堿提酸沉法對落葉松松針中蛋白的分離純化的制作方法
【專利摘要】本發明公開一種對落葉松松針中蛋白的分離純化，該方法為：將落葉松松針粉碎成粗粉，加15倍量0.05％的氫氧化鈉溶液45～50℃浸泡120分鐘，濾過；濾液，用體積比1∶1的鹽酸∶水將濾液pH值調至4.5，放置40分鐘，濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05％的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品；將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1∶10的鹽酸∶水溶液洗雜質，濾過，濾液棄去，收集沉淀，繼用0.01％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品，其含量在90％以上。本發明方法的最大特點是利用堿-酸反復精制，方便快捷、原料來源豐富、生產成本低廉、分離效果明顯、提取純度高。
【專利說明】堿提酸沉法對落葉松松針中蛋白的分離純化
【技術領域】
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[0001]本發明屬于天然有機化學領域，涉及一種松針蛋白的生產工藝，特別是涉及一種利用堿提酸沉法對落葉松松針中蛋白的分離純化工藝。
【背景技術】
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[0002]落葉松,學名:Larix gmelinii (Rupr.)Kuzen.,為松科落葉松屬的落葉喬木,是中國東北、內蒙古林區的主要森林組成樹種，是東北地區主要三大針葉用材林樹種之一。
[0003]松針中含有大量的葉綠素、粗蛋白質、粗脂肪、脂溶性維生素A和維生素C，以及氮、磷、鉀、鈣、鎂等礦物質。松針的化學組成如下:針葉中含干物質94.04%，蛋白質
11.39%，脂肪10.31%，醚浸出物(包括樹脂、揮發油、葉綠素、胡蘿卜素等)11.87%，單寧4.58%，還原物3.36%，多縮戊糖6.78%，木素22.96%，纖維素29.73%，水浸提物18.66%,灰分3.08%，含鈣0.54%，含磷0.08%。除上述成分外，還含有大量維生素，三年生針葉中維生素C的含量為0.522毫克/克，胡蘿卜素含量為0.13-0.2毫克/克，葉綠素為5-7毫克/克。松針中不含有許多微量元素，如銅、錳、鈷、鐵等。
[0004]蛋白質是自然界中最重要的組成物質，是構成有機生物的基本元素。所有動、植物的一切生命活動都與蛋白質息息相關。
[0005]同時，蛋白質是人體所需第一營養素，占人體干物質總量的45%，占肌肉總量的70%。人體的細胞、組織、器官主要組成成分皆為蛋白質。人體的新陳代謝,抗病免疫,體液平衡，遺傳信息傳遞等無不與蛋白質密切相關。沒有蛋白質就沒有生命，所以蛋白質又被稱為人類的“第一營養素”或“生命素”。
[0006]近年來，人們對松針的研究利用越來越廣，松針茶，松針油，松針栲膠等等，但對松針中蛋白的利用并不多見。本人從事北藥研究多年，參與過大豆蛋白項目，豌豆蛋白項目，《中國居民膳食營養素參考攝入量》葉推薦成人每人每天蛋白質的攝入量是65?90克，隨著經濟水平提升蛋白粉需求量逐年遞增，松針資源廣泛成本低廉，較之白豆片、米糠，成本更低，并且本工藝成品蛋白含量在90%以上，品種高，市場競爭力大。本發明方法的最大特點是利用堿-酸反復精制，方便快捷、原料來源豐富、生產成本低廉、分離效果明顯、提取純度高。
【發明內容】
[0007]本發明目的在于提供一種松針蛋白的分離純化方法；本發明目的還在于提供一種方便快捷、原料來源豐富、生產成本低廉、分離效果明顯、提取純度高的利用堿提酸沉法對落葉松松針中蛋白的分離純化工藝。
[0008]本發明目的是通過如下技術方案實現的。
[0009]本發明松針蛋白的分離純化方法包括如下步驟:
[0010]將落葉松松針粉碎成粗粉，加15?20倍量0.05%的氫氧化鈉溶液45?50°C浸泡120?180分鐘，濾過；濾液，用體積比1:1的鹽酸；水將濾液pH值調至4.5?5.0，放置20?40分鐘，濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品；將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過，濾液棄去，收集沉淀，繼用0.01%的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品。
[0011]本發明松針蛋白的分離純化方法包括如下步驟:
[0012]稱取粉碎成粗粉的落葉松松針，加入粗粉質量20倍量的0.05%的氫氧化鈉溶液50°C浸泡180分鐘,濾過；濾液濾液,用體積比1:1的鹽酸:水將濾液pH值調至4.5,放置40分鐘后濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品；將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過，濾液棄去，收集沉淀，繼用0.01 %的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品。
[0013]所述清洗凝乳步驟采用精確定量稀酸液，酸濃度為體積比1: 10的鹽酸:水溶液，量為半成品的20?30倍，洗滌3次。
[0014]所述沉淀用稀堿液溶解,堿濃度為質量百分百0.01%的氫氧化鈉水溶液。
[0015]本發明中采用噴霧干燥得松針蛋白成品。噴霧干燥進口溫度為160?165°C，出口溫度為80?90°C。
[0016]本發明公開一種對落葉松松針中蛋白的分離純化，該方法為:將落葉松松針粉碎成粗粉，加15倍量0.05%的氫氧化鈉溶液45?50°C浸泡120分鐘，濾過；濾液，用體積比I: I的鹽酸:水將濾液PH值調至4.5，放置40分鐘，濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳PH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品；將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過，濾液棄去，收集沉淀，繼用
0.01%的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品，其含量在90%以上。本發明方法的最大特點是利用堿-酸反復精制，方便快捷、原料來源豐富、生產成本低廉、分離效果明顯、提取純度高。
【具體實施方式】
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[0017]實施例1:
[0018]稱取落葉松針10kg，粉碎成粗粉，加18倍量0.05%的氫氧化鈉溶液50°C浸泡140分鐘，濾過；濾液，用體積比1:1的鹽酸:水將濾液PH值調至4.5，放置40分鐘，濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品140g;將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過,濾液棄去，收集沉淀,繼用0.01 %的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品80g，含量92.5%。
[0019]實施例2:
[0020]稱取落葉松針15kg，粉碎成粗粉，加20倍量0.05%的氫氧化鈉溶液45°C浸泡160分鐘，濾過；濾液，用體積比1:1的鹽酸:水將濾液PH值調至5.0，放置30分鐘，濾過:濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品180g ;將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質,濾過，濾液棄去，收集沉淀，繼用0.01%的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品120g，含量91.2%。
[0021]實施例3:
[0022]稱取落葉松針20kg，粉碎成粗粉，加15倍量0.05%的氫氧化鈉溶液50°C浸泡120分鐘，濾過；濾液，用體積比1:1的鹽酸:水將濾液PH值調至4.8，放置30分鐘，濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品300g;將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過,濾液棄去，收集沉淀,繼用0.01 %的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品140g，含量90.5%。
[0023]實施例4:
[0024]稱取落葉松針5kg，粉碎成粗粉，加20倍量0.05%的氫氧化鈉溶液45°C浸泡180分鐘，濾過；濾液，用體積比1:1的鹽酸:水將濾液PH值調至4.5，放置30分鐘，濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品80g ;將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過,濾液棄去,收集沉淀,繼用0.01 %的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品50g，含量85.7%。
【權利要求】
1.堿提酸沉法對落葉松松針中蛋白的分離純化，其特征在于該方法包括如下步驟: 將落葉松松針粉碎成粗粉，加15?20倍量0.05 %的氫氧化鈉溶液45?50°C浸泡120?180分鐘，濾過；濾液，用體積比1:1的鹽酸:水將濾液pH值調至4.5?5.0，放置20?40分鐘，濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品；將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過，濾液棄去，收集沉淀，繼用0.01%的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品。
2.如權利要求1所述的蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法包括如下步驟: 稱取粉碎成粗粉的落葉松松針，加入粗粉質量20倍量的0.05%的氫氧化鈉溶液50°C浸泡180分鐘,濾過；濾液濾液,用體積比1:1的鹽酸:水將濾液pH值調至4.5,放置40分鐘后濾過；濾液棄去，收集凝乳，用0.05%的氫氧化鈉溶液將凝乳pH值調至6.8，濃縮干燥得松針蛋白半成品；將所得松針蛋白半成品加入洗滌罐，并以體積比1: 10的鹽酸:水溶液洗雜質，濾過，濾液棄去，收集沉淀，繼用0.01 %的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，收集濾液；將所收集到的松針蛋白溶液進行噴霧干燥得松針蛋白成品。
3.如權利要求1或2所述的松針蛋白的分離純化方法，其特征在于該方法中所述清洗凝乳步驟采用精確定量稀酸液，酸濃度為體積比1: 10的鹽酸:水溶液，量為半成品的20?30倍，洗滌3次。
4.如權利要求1或2所述的松針蛋白的分離純化方法，其特征在于該方法中所述沉淀用稀堿液溶解，堿濃度為質量百分百0.01%的氫氧化鈉水溶液。
5.如權利要求1或2所述的松針蛋白的分離純化方法，其特征在于該方法中所述采用噴霧干燥得松針蛋白成品。噴霧干燥進口溫度為160?165°C，出口溫度為80?90°C。
【文檔編號】C07K1/30GK104447969SQ201410617091
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年10月31日 優先權日:2014年10月31日
【發明者】姚德坤, 姚德利, 劉巍, 姚航, 黃運生, 吳海龍 申請人:大興安嶺林格貝有機食品有限責任公司