一種從小葉榕葉中提取異牡荊苷的方法
【專利摘要】本發明涉及一種從小葉榕葉中提取異牡荊苷的方法，具體涉及一種應用閃提技術與酶解-超聲波輔助提取相結合提取異牡荊苷的方法。其處理步驟包括：將新鮮或干燥的小葉榕葉放入容器中，加入70~80%的乙醇，置于中藥提取器上將小葉榕葉破碎提取5~10min；取出，調PH值至4.0~5.5，酶解，超聲波輔助提取；過濾，濾液加堿中和，大孔吸附樹脂純化，重結晶得到高純度的異牡荊苷。本發明工藝簡單，采用兩種技術聯用，可以優勢互補，大大縮短了提取時間，成本低、更利于環保，適合工業化生產。
【專利說明】一種從小葉榕葉中提取異牡荊苷的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種從小葉榕葉中提取異牡荊苷的方法，具體涉及一種應用閃提技術 與酶解-超聲波輔助提取相結合提取異牡荊苷的方法，屬于天然產物分離領域。
【背景技術】
[0002] 小葉榕葉，又名小榕葉、落地金錢，來源于桑科榕屬植物榕樹的葉。小葉榕葉為民 間常用中草藥，其味淡、性涼，具有清熱發表、解毒消腫、去濕止痛的功效。用于治療哮喘和 慢性支氣管炎，在治療心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有顯著的效果。其中主要含黃酮、 三萜類和留體化合物等化學成分，黃酮類成分以異牡荊苷為主。異牡荊苷，黃色狀干粉，熔 點228°C，不溶于水，溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿等有機溶劑，屬于碳苷黃酮，結構穩定， 不易降解，并具有抗氧化、抗菌等活性。
[0003] 目前關于提取異牡荊苷的方法主要是傳統的浸漬法、滲漉法、回流提取法等，這些 提取法均存在諸多不足，如雜質多，提取時間長，提取率低，溶劑消耗和殘留大，成本高等。 專利CN1289470C "白花敗醬草中幾種高純度藥用物質的快速制備方法"，采用乙醇提取，有 機溶劑萃取、高效逆流色譜分離純化等步驟，該方法提取時間長、有機溶劑用量大，并受到 儀器設備的制約，成本高，不適合大規模生產。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于提供一種快速、高效的提取高純度異牡荊苷的方法，該方法具 有操作簡單、反應條件溫和、無毒性、對環境友好的優點，易于實現工業化生產。
[0005] 本發明包括以下步驟： a. 將新鮮或干燥的小葉榕葉放入容器中，加入5~10倍的7(Γ80%的乙醇，置于中藥提取 器上將小葉榕葉破碎提取5~10min ; b. 取出，醋酸/醋酸鈉調PH值至4. (Γ5. 5,加入廣2%的纖維素酶，置于超聲波裝置中， 于 25(T400W、4(T60°C下酶解 4(T60min ; c. 過濾，濾液加堿中和至PH7. 0,大孔吸附樹脂純化，8?10BV的4(Γ50%的乙醇洗脫，洗 脫液減壓濃縮，得粗品； d. 乙醇重結晶2次，得到高純度的異牡荊苷。
[0006] 步驟c中所述的堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀或碳酸鈉。
[0007] 步驟c中所述的大孔吸附樹脂型號為AB-8、D-140、ADS-5等。
[0008] 本發明的優點在于：應用閃提技術對植物進行破碎，使物料高速粉碎至適當粒度， 同時伴有高速攪拌、振動等外力，充分提高了提取效率；再結合纖維素酶酶解植物的細胞 壁，使細胞破碎，在超聲作用下，加速有效成分的溶出，從而提高了提取的速度和產率。本發 明具有操作簡單、周期短、產品得率高、純度高的優點，可實現大規模的產業化生產。
[0009] 下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不 局限于下列實施方式。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1 : 將1000g新鮮或干燥的小葉榕葉放入容器中，加入5倍的80%的乙醇，置于中藥提取器 上將小葉榕葉破碎提取5min，取出，醋酸/醋酸鈉調PH值至4. 0,加入1%的纖維素酶，置于 超聲波裝置中，于250W、40°C下酶解40min，過濾，濾液加氫氧化鈉中和至PH7. 0, AB-8大孔 吸附樹脂純化，8BV的50%的乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，甲醇重結晶2次，得到5. 3g異牡荊 苷，經HPLC檢測，純度為92. 3%。
[0011] 實施例2: 將1000g新鮮或干燥的小葉榕葉放入容器中，加入8倍的75%的乙醇，置于中藥提取器 上將小葉榕葉破碎提取8min，取出，醋酸/醋酸鈉調PH值至5. 0,加入1. 5%的纖維素酶，置 于超聲波裝置中，于300W、50°C下酶解50min，過濾，濾液加氫氧化鈉中和至PH7. 0, ADS-5 大孔吸附樹脂純化，10BV的40%的乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，甲醇重結晶2次，得到6. 2g 異牡荊苷，經HPLC檢測，純度為95. 6%。
[0012] 實施例3: 將1000g新鮮或干燥的小葉榕葉放入容器中，加入10倍的70%的乙醇，置于中藥提取 器上將小葉榕葉破碎提取10min，取出，醋酸/醋酸鈉調PH值至5. 5,加入2%的纖維素酶， 置于超聲波裝置中，于400W、60°C下酶解60min，過濾，濾液加氫氧化鈉中和至PH7. 0, AB-8 大孔吸附樹脂純化，9BV的45%的乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，甲醇重結晶2次，得到5. 8g異 牡荊苷，經HPLC檢測，純度為93. 8%。
【權利要求】
1. 一種從小葉榕葉中提取異牡荊苷的方法，其特征在于，包括以下步驟：將新鮮或干 燥的小葉榕葉放入容器中，加入5~10倍的7(Γ80%的乙醇，置于中藥提取器上將小葉榕葉破 碎提取5?lOmin，取出，醋酸/醋酸鈉調ΡΗ值至4. (Γ5. 5,加入廣2%的纖維素酶，置于超聲 波裝置中，于25(T400W、4(T60°C下酶解4(T60min，過濾，濾液加堿中和至PH7. 0,大孔吸附 樹脂純化，8~10BV的4(Γ50%的乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，甲醇重結晶2次，得到高純度的 異牡荊苷。
2. 根據權利要求1所述的一種從小葉榕葉中提取異牡荊苷的方法，其特征在于，所述 的堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀或碳酸鈉。
3. 根據權利要求1所述的一種從小葉榕葉中提取異牡荊苷的方法，其特征在于，所述 的大孔吸附樹脂型號為AB-8、D-140、ADS-5等。
【文檔編號】C07D407/04GK104193734SQ201410445690
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月4日 優先權日:2014年9月4日
【發明者】張金芳, 楊存 申請人:南京標科生物科技有限公司