用于合成鵝膏毒素結構單元及鵝膏毒素的方法
【專利摘要】本發明涉及用于合成作為鵝膏毒素合成的結構單元的γ,δ-二羥異亮氨酸1(CAS號55399-94-5]的合成子的新方法，以及使用這樣的結構單元合成鵝膏毒素的新方法。
【專利說明】用于合成鵝膏毒素結構單元及鵝膏毒素的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種用于合成作為用于鵝膏毒素合成的結構單元（building block) y，S -二羥異亮氨酸I (CAS號55399-94-5]的合成子的新方法，以及使用這樣的結構單元 合成鵝膏毒素的新方法。
[0002]
【權利要求】
1. 一種用于γ，δ-二羥異亮氨酸1或化合物1的合成子的合成方法，其包含在二（三 甲基甲硅烷基）氨基化鋰（LHMDS)的存在下使用甲基碘甲基化化合物3或3*的步驟。
2. 權利要求1所述的方法，其中反應在醚中在約-KTC至約_80°C下進行約12至約20 小時。
3. 權利要求1或2所述的方法，其還包含以下一個或多個步驟： (a) L-天冬氨酸，一甲基酯A與2-甲基丙烯反應生成化合物B;
(b) B與苯甲醛反應生成化合物C;
(c) C與苯荷溴反應生成化合物3,或與節基溴反應生成化合物3*。
4. 權利要求1-3任一項所述的方法，其還包含以下步驟的一個或多個： (a)還原化合物2或化合物2*，特別是使用二異丁基氫化鋁以分別生成化合物D或D* ;
(b) 氧化羥基化合物D或D*,特別是使用Swern氧化，以分別牛成化合物E或E* :
(c) 轉換E或E*，特別是在Wittig反應條件下，以分別生成化合物4或4* ;
(d) 轉換4或4*，特別是在Sharpless氧化條件下，以分別生成化合物F或F* ;
(e) 轉換F或F*，特別是在催化酯化條件下，以分別生成化合物5或5* ;
和 (f) 5或5*的N-去保護，特別是使用鈀催化加氫，以生成化合物6。
5. 權利要求1-4任一項所述的方法，其還包含分離和純化化合物6的步驟，特別地其中 化合物6使用沉淀法像鹽酸鹽和/或層析法純化進行純化。
6. 結構為6的化合物：
7. 權利要求6所述的化合物，其中化合物6具有大于90%，特別是大于95%的純度。
8. 權利要求6所述的化合物，其中化合物6具有大于70:30的非對映體的純度。
9. 一種用于鵝膏毒素或其前體的合成的試劑盒，其包含化合物6,特別是包含至少 IOOmg的化合物6,以及一種或多種附加的試劑。
10. 權利要求9所述的試劑盒，其中所述一種或多種附加的試劑從下面列表中選擇： (i) 樹脂，特別是從下組中選擇的樹脂：Merrifield樹脂；Rink-Amid樹脂；和THP樹 脂； (ii) 受保護的羥脯氨酸，特別是芴甲氧羰基（Fmoc-)-保護的O-烯丙基羥脯氨酸 (FmocHypOAll)； (iii) 受保護的天冬酰胺，特別是Fmoc保護的N-三苯甲基天冬酰胺（Fmoc(N-Tri) AsnOH)； (iv) 受保護的Cys-Trp二肽，特別是具有-SH和-OH保護基團的Fmoc保護的Cys-Trp 二肽（FmocCys(S-2- ((O-NO2Ph)SO2Trp-O-AlIyI))] 0H); (V)受保護的甘氨酸，特別是Fmoc保護的甘氨酸（FmocGly); (vi) 受保護的異亮氨酸，特別是Fmoc保護的異亮氨酸（Fmoclle); (vii) 縮氨酸偶聯試劑，特別是從下組中選出的縮氨酸偶聯試劑：〇_(苯并三 唑-1-基）-N，Ν，Ν'，Ν'-四甲基脲四氟硼酸（TBTU);六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯 烷基（PyBOP);和〇-(7-偶氮苯并三唑-1-基）-Ν，Ν，Ν'，Ν' -四甲基脲六氟磷酸酯（HATU); 和 (viii) 叔胺，特別是N，N二異丙基乙胺（DIPEA)。
11. 一種用于合成鵝膏毒素或其前體分子的方法，其包含步驟（a)將化合物6耦合至羥 基脯氨酸，特別是通過化合物6與羥脯氨酸-預裝樹脂反應，特別是通過將化合物6耦合至 固定在樹脂L，特別是四氫吡喃（THP)樹脂上的FmocHypOH的自由C-末端。
12. 權利要求11所述的方法，其中剩余的氨基酸隨后由N末端合成策略耦合。
13. 權利要求12所述的方法，其還包含以下一個或多個步驟： (b)反復的FmocN-去保護和G與Fmoc-(N-Tri)Asn OH ;FmocCys(S_2-( (O-NO2Ph) S02Trp-〇-Allyl))]OH、Fmoc_Gly 0H、Fmoc_Ile 0H、Fmoc_Gly OH的親合以生成化合物Η:
(c)H的0-烯丙基和Fmoc-N去保護，然后環化，以生成化合物I(Β-環閉合）：
(d) 2-硝基芳磺胺N-去保護和從樹脂分離I生成J:
(e) J的液相環化生成鵝膏蕈堿衍生物K:
14.權利要求11所述的方法，其中鵝膏毒素是具有二羥異亮氨酸部分作為氨基酸3的 鵝膏毒素。
【文檔編號】C07C229/22GK104470891SQ201380037459
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2013年7月12日 優先權日:2012年7月13日
【發明者】克里斯蒂安·盧茨, 克里斯托夫·米勒, 維爾納·西蒙 申請人:海德堡醫藥有限責任公司