專利名稱：一種vegfr2酪氨酸激酶抑制劑多肽及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及藥物領域，具體涉及用于治療濕性型老年性黃斑變性的VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽。
背景技術：
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濕性型老年性黃斑變性(exudative senile macular degenetion)是老年性黃斑變性的一種，隨著年齡越大，患病率越高，是老年人失明的主要原因之一。濕性型老年性黃斑變性的特點是色素上皮層下有活躍的新生血管，從而引起一系列滲出、出血、瘢痕改變。濕性型老年性黃斑變性與新生血管密切相關。新生血管生成，在正常生理條件下，受到高度調節，在生殖、胚胎發育、組織修復和創傷愈合中是必不可少的過程。血管生成在多種病理條件下也發生。濕性型老年性黃斑變性早期，熒光造影顯示在背景熒光消失后仍留有強熒光斑，說明有兩種情況:一是玻璃膜疣著色，二是色素上皮層下存在新生血管；中期 ，主要特征為黃斑部由于新生血管滲漏，形成色素上皮層和/或神經上皮層漿液或/和出血性脫離，造影后期，大片熒光遮蔽區內可出現I 2個逐漸增強擴大的熒光斑點(稱為熱點-hot spot)證明視網膜下新生血管的存在；晚期，滲出和出血逐漸吸收并為瘢痕組織所替代，之后，病變并不就此結束，而在瘢痕邊緣處出現新的新生血管，再度經歷滲出、出血、吸收、瘢痕的過程。如此反復。由此可見新生血管貫穿于濕性型老年性黃斑變性病變的全過程中，與病情的發展。嚴重程度密切相關。血管內皮生長因子受體2 (VEGFR2)亦稱含激酶插入域的受體(KDR)，屬于受體酪氨酸激酶超家族。血管內皮生長因子受體2在新生血管生成過程中起著主要的作用。其配體VEGF通過刺激細胞表面VEGFR2活化內皮細胞，發生生化信號的復雜級聯與細胞外基質組分和可溶性因子相互作用，導致腔管形成并且分化成成熟的血管。另外，這些被活化的細胞經過細胞增殖過程，來提高細胞粘附分子的表達，增加蛋白水解酶的分泌，增加細胞遷移和侵襲。目前，靶向KDR的抑制劑已成為開發新興抗血管新生藥物的研究熱點。盡管如此，并沒有成熟開發的血管內皮生長因子受體2酪氨酸激酶多肽抑制劑問世，用于治療濕性型老年性黃斑變性。發明內容:
本發明目的是針對設計一種VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽，可以用于治療濕性型老年性黃斑變性。本發明技術方案是提供一種VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽1，其序列為SELKILIHIG，及在制備治療濕性型老年性黃斑變性藥物中的應用。本發明的原理在于VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽與VEGFR2結合，抑制VEGFR2產生生理或病理的效應，起到抑制血管內皮細胞增殖，遷移，血管腔管形成，以及相關細胞因子分泌，從而起到治療濕性型老年性黃斑變性的作用。有益結果:
本發明中的VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I序列SELKILIHIG，可以靶向抑制VEGFR2酪氨酸激酶，抑制VEGFR2產生的生理或病理的效應，達到治療濕性型老年性黃斑變性的效果。發明人經過大量實驗獲知VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I能夠抑制兔眼視網膜血管新生和小鼠眼角膜血管新生的發展，體內實驗證明具有顯著的治療濕性型老年性黃斑變性的效果，并且副作用少。說明本發明設計的VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I科學、合理、可行有效，能作為治療濕性型老年性黃斑變性藥物。
具體實施例方式本發明涉及的多肽I委托上海生工合成。實施例1
VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I對兔眼視網膜新生血管動物模型的影響VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I對兔眼視網膜新生血管動物模型的影響，觀察VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽治療兔眼視網膜新生血管的療效。
方法:選取健康有色家兔為試驗對象，應用電凝器分別對雙眼視盤兩側集束狀視網膜血管進行電凝，建立兔RNV模型。電凝2周后，經FFA檢查和病理組織切片光鏡檢查證實有視網膜新生血管形成，選取36只(72眼)兔視網膜新生血管眼，隨機分為治療組和對照組。治療組玻璃體腔內注射VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽1，劑量1.25mg/0.05ml，對照組玻璃體腔內注射PBS 0.05ml。注射后1W、2 W及4 W及各處死動物12摘除眼球，10只制作石蠟切片，兩只行電鏡檢查。免疫組織化學檢查對VEGF因子和F VD1-Rag蛋白表達進行灰度值檢測。鄭州大學一附院眼科王文戰
結果:免疫組織化學檢測結果顯示注射后1W、2 W及4 W時治療組VEGF因子表達的灰度值與對照組相比明顯減少，F VD1-Rag蛋白表達的灰度值與對照組相比明顯減少；光鏡和電鏡顯示:注射后1W、2 W及4 W治療組光鏡切片中突破視網膜內界膜的毛細血管內皮細胞數目較對照組降低。觀察注射后組織學和超微結構無明顯異常。
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結論:VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I玻璃體腔內注射治療實驗性RNV，療效明顯，可作為臨床視網膜新生血管有效的治療方法。實施例2
VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I對小鼠角膜新生血管模型的影響。VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I對小鼠角膜新生血管模型的影響，觀察VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽治療小鼠角膜新生血管的療效。方法:以堿燒傷法(lmol/LNaOH溶液)誘導角膜新生血管的生成。模型建立后選取36只(72眼)小鼠角膜新生血管眼，隨機分為治療組和對照組。各組均于堿燒傷后第7d給予相應藥物滴眼，4次/d，共14d;治療組滴眼VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽1，劑量1.25mg/0.05ml,對照組PBS 0.05ml滴眼。通過裂隙燈觀察并記錄堿燒傷后第7d、14d、28d、56d角膜情況，拍照計算角膜新生血管面積；免疫組織化學法檢測角膜組織中VEGF蛋白的表達。結果:結果顯示堿燒傷后第7d、14d、28d、56d角膜，治療組角膜新生血管面積與對照組相比明顯減少，治療組VEGF因子表達的灰度值與對照組相比也明顯減少。結論:VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I滴眼治療角膜血管新生，療效明顯，可作為臨床角膜新生血管有效的治療方法。
權利要求
1.VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I，其特征在于其序列SELKILIHIG。
2.根據權利要求I所述的VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽I在制備治療濕性型老年性黃斑變性藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及藥物領域，具體涉及用于治療濕性型老年性黃斑變性的VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽。本發明技術方案是提供一種VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽1，其序列為SELKILIHIG，及在制備治療濕性型老年性黃斑變性藥物中的應用。本發明中的VEGFR2酪氨酸激酶抑制劑多肽1序列SELKILIHIG，可以靶向抑制VEGFR2酪氨酸激酶，抑制VEGFR2產生的生理或病理的效應，達到治療濕性型老年性黃斑變性的效果。
文檔編號C07K7/06GK103254285SQ20131020893
公開日2013年8月21日 申請日期2013年5月30日 優先權日2013年5月30日
發明者羅瑞雪 申請人:蘇州普羅達生物科技有限公司