專利名稱：一種高純度毛蘭素的制備方法
技術領域：
本發明屬于天然藥物化學領域，特別涉及一種高純度毛蘭素的制備方法。
毛蘭素(Erianin)，中文系統名:3_羥基_4，3’，4’，5’ -四甲氧基聯芐；分子式:
毛蘭素為聯芐類化合物，易溶于乙醇、氯仿、丙酮、甲醇等有機溶劑，極微溶于水。 通過實驗發現毛蘭素能明顯抑制胃癌細胞SGC-7901增殖，表現為濃度依賴性，48小時IC5tl 為0.056 yg / ml，研究發現，毛蘭素可以快速抑制胃癌細胞SGC-7901的端粒酶活性，8小時就可見端粒酶活性抑制，48小時就可以抑制端粒酶活性的80%。
二十世紀九十年代我國學者從石斛中分離提取出毛蘭素，其提取方法是用氯仿或苯為提取溶媒并用超聲處理30分鐘進行提取，提取物再經硅膠柱柱層析分離得白色不定形的毛蘭素結晶粉末。中國專利申請(03115752.1)公開了從石斛中提取毛蘭素的方法，包括應用超臨界CO2萃取和柱層析法以無水乙醇、甲醇、丙酮等為夾帶劑，以CO2等位提取介質從蘭科植物石斛中提取抗腫瘤成分毛蘭素，對所得的粗提物再以石油醚:醋酸乙酯溶液為洗脫劑進行硅膠柱柱層析分離及重結晶等步驟獲得精提物。傳統硅膠柱制備高純度毛蘭素，分離步驟復雜，溶劑用量大，分離過程樣品得率低，污染嚴重，不適合工業化生產。發明內容
本發明的目的是解決現有技術的不足和缺陷，提供一種高效，簡便的高純度毛蘭素的制備方法。
為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案:一種高純度毛蘭素的制備方法，其特征在于:取鼓槌石斛原料粉碎，加入5 10倍量 7(Γ100%甲醇溶液超聲提取2-3次，提取液濃縮后用氯仿溶液萃取，收集萃取液回收試劑， 濃縮液再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監測，收集流分減壓干燥即得。
所述的高速逆流色譜儀分離條件為:取氯仿、甲醇、水，按5 10:2 4:3、混合，取上相做固定相、下相為流動相，主機轉速70(Tl000rpm,流速為l 4ml/min。
本發明的積極效果是:采用高速逆流色譜法分離，制備周期短，操作簡單，制備量大，而且樣品不損失，對環境友好，適合工業化生產。
背景技術：
C18H22O5 ;分子結構 式如下
下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施方式
:實施例1:鼓槌石斛原料粉碎，稱3kg，每次用15L80%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮至500ml，加等體積氯仿萃取3次，合并萃取液回收氯仿得萃取物。取氯仿、甲醇、水，按5:2:3混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉主機，轉速 800rpm,同時泵入下相做流定相，建立動態平衡后，流速調節為2ml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，連續制備，流分回收試劑，得白色粉末毛蘭素4.2g，經HPLC檢測，含量98.8%，經UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數據與現有技術相一致。
實施例2:鼓槌石斛原料粉碎，稱3kg，每次用30L90%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取2次，提取液減壓濃縮至800ml，加等體積氯仿萃取2次，合并萃取液回收氯仿得萃取物。取氯仿、甲醇、水，按10:4:7混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉主機，轉速 900rpm,同時泵入下相做流定相，建立動態平衡后，流速調節為3ml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集目標成分，連續制備，流分回收試劑，得白色粉末毛蘭素4.8g，經HPLC檢測，含量98.1%，經UV、IR、MS、2H NMR、13CNMR等表征其物理性狀的數據與現有技術相一致。
權利要求
1.一種高純度毛蘭素的制備方法，其特征在于取鼓槌石斛原料粉碎，加入5^10倍量 7^100%甲醇溶液超聲提取2 3次，提取液濃縮后用氯仿溶液萃取，收集萃取液回收試劑，濃縮液再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監測，收集流分減壓干燥即得。
2.根據權利要求I所述的高純度毛蘭素的制備方法，其特征在于所述的高速逆流色譜儀分離條件為取氯仿、甲醇、水，按5 10:2 4:3、混合，取上相做固定相、下相為流動相， 主機轉速700 IOOOrpm,流速為I 4ml/min。
全文摘要
本發明公開了一種操作簡便、污染小的高純度毛蘭素的制備方法，工藝步驟為取鼓槌石斛原料粉碎，加入5~10倍量70~100%甲醇溶液超聲提取2~3次，提取液濃縮后用氯仿溶液萃取，收集萃取液回收試劑，濃縮液再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監測，收集流分減壓干燥即得。采用本發明制備毛蘭素，產品純度高，易于實現產業化放大。
文檔編號C07C41/34GK103254045SQ20131019436
公開日2013年8月21日 申請日期2013年5月23日 優先權日2013年5月23日
發明者劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司