專利名稱：一種綿棗兒皂苷b的制備方法
技術領域：
本發明屬于天然藥物化學領域，尤其是涉及一種綿棗兒皂苷B的制備方法。
背景技術：
綿棗兒為風信子科綿棗兒屬多年生草本植物，鱗莖含綿棗兒皂苷、綿棗兒素等皂苷成分，具有強心利尿、消腫止痛作用。綿棗兒皂苷B為留體皂苷，是綿棗兒皂苷的主要成分之一，具有抗腫瘤活性，CAS號 144863-06-9，分子式 C59H94O29，分子量 1267.37。通過文獻檢索，尚未發現有綿棗兒皂甙B的制備方法公開。
發明內容
本發明的目的是解決現有技術不足和缺陷，提供一種高效、簡單的綿棗兒皂苷B的制備方法。本發明的目的是采用以下技術方案實現的:一種綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于包含以下步驟:
A.取綿棗兒打漿，加生物酶酶解3-20小時，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上大孔樹脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取，萃取液濃縮至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再產生，過濾，得粗提物；
B.上述粗提物利用高速逆流 色譜制備，依據蒸發光散射檢測器譜圖分別收集流分，干燥流分即得。所述步驟A中的生物酶可選纖維素酶、果膠酶和淀粉酶中的一種。所述步驟A中的大孔樹脂型號可選ADS-21、AB-8、NK-9和HPD500中的一種。所述步驟A中的乙醇溶液梯度洗脫為:以5-10倍柱體積30-50%乙醇溶液洗脫雜質，再以5-10倍柱體積60-80%乙醇溶液洗脫成分。步驟B中的高速逆流色譜溶劑系統為正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例
3-5:1-2:4-7,上相作為固定相，下相作為流動相。采用本方法制備綿棗兒皂苷B，提取效率高，產品收率高，操作簡單，易于工業化生產。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施方式
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實施例1:
取新鮮綿棗兒鱗莖IOkg打漿加入多功能提取罐，加5%。纖維素酶酶解5小時，再加5倍量70%乙醇溶液回流提取3次，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上ADS-21大孔樹脂柱吸附，以6倍柱體積50%乙醇溶液洗脫雜質，再以8倍柱體積70%乙醇溶液洗脫成分，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取3次，萃取液濃縮至干，以無水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再產生，過濾，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例3:1:4，上相作為固定相，下相作為流動相，流動相溶解粗提物，以800rpm轉速,流速2ml/min,用高速逆流色譜儀分離，依據蒸發光散射檢測器譜圖分別收集流分，干燥流分，得白色粉末3g，含量 98.2%ο實施例2:
取新鮮綿棗兒鱗莖IOkg打漿加入多功能提取罐，加3%。淀粉酶酶解20小時，再加7倍量80%乙醇溶液回流提取2次，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上AB-8大孔樹脂柱吸附，以5倍柱體積40%乙醇溶液洗脫雜質，再以7倍柱體積80%乙醇溶液洗脫成分，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取3次，萃取液濃縮至干，以無水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再產生，過濾，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例5:2:7，上相作為固定相，下相作為流動相，流動相溶解粗提物，以900rpm轉速,流速3ml/min,用高速逆流色譜儀分離，依據蒸發光散射檢測器譜圖分別收集流分，干燥流分，得白色粉末3.2g，含量95.4%。實施例3:
取新鮮綿棗兒鱗莖IOkg打漿加入多功能提取罐，加2%。果膠酶酶解10小時，再加8倍量90%乙醇溶液回流提取2次，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上HPD500大孔樹脂柱吸附，以8倍柱體積40%乙醇溶液洗脫雜質，再以6倍柱體積75%乙醇溶液洗脫成分，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取3次，萃取液濃縮至干，以無水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再產生，過濾，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例4:1:5，上相作為固定相，下相作為流動相，流動相溶解粗提物，以850rpm轉速,流速2ml/min,用高速逆流色譜儀分離，依據蒸發光散射檢測器譜圖分別收集流分，干燥流分，得白色粉末3.1g,含量97.2%ο·
權利要求
1.一種綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于包含以下步驟: A.取綿棗兒打漿，加生物酶酶解3-20小時，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上大孔樹脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取，萃取液濃縮至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再產生，過濾，得粗提物； B.上述粗提物利用高速逆流色譜制備，依據蒸發光散射檢測器譜圖分別收集流分，干燥流分即得。
2.如權利要求1所述的綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于所述步驟A中的生物酶可選纖維素酶、果膠酶和淀粉酶中的一種。
3.如權利要求1所述的綿棗兒皂甙B的制備方法，其特征在于所述步驟A中的大孔樹脂型號可選ADS-21、AB-8、NK-9和HPD500中的一種。
4.如權利要求1所述的綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于所述步驟A中的乙醇溶液梯度洗脫為:以5-10倍柱體積30-50%乙醇溶液洗脫雜質，再以5-10倍柱體積60-80%乙醇溶液洗脫成分。
5.如權利要求1所述的綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于所述步驟B中的高速逆流色譜溶劑系統為正 丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例3-5:1-2:4-7，上相作為固定相，下相作為流動相。
全文摘要
本發明公開了一種操作簡便、污染小的綿棗兒皂苷B的制備方法。方法如下A.取綿棗兒打漿，加生物酶酶解3-20小時，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上大孔樹脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取，萃取液濃縮至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再產生,過濾,得粗提物；B.上述粗提物利用高速逆流色譜制備,依據蒸發光散射檢測器譜圖分別收集流分，干燥流分即得。采用本發明生產綿棗兒皂苷B，所得產品純度高，生產成本低。
文檔編號C07J21/00GK103232517SQ20131018338
公開日2013年8月7日 申請日期2013年5月17日 優先權日2013年5月17日
發明者劉東鋒, 萬冬梅 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司