專利名稱：一種Nα-芴甲氧羰基-Nε-乙酰基-賴氨酸的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種賴氨酸制備方法，尤其是一種N α -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法。
背景技術：
N α -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸是一種常用的氨基酸保護試劑，在多肽合成領域經常用到。在以往的生產過程中，先用銅鹽等金屬將賴氨酸α氨基和羧基螯合，再在堿性條件下令側鏈氨基與乙酰基氯反應，再用乙二胺四乙酸或其鈉鹽脫銅，純化產物，將純化產物與芴甲氧羰基琥珀酰亞胺反應得到產物；實際上這條路線生產起來有相當的操作難度，第一，N ε -乙酰基-賴氨酸親水性極強，不易萃取和純化；第二，乙酰基氯與賴氨酸銅鹽反應的后不易處理，雜質不易清除，第三，乙酰基氯本身具有強烈的刺激性，對環境和人的身體健康不利。
發明內容
本發明的目的是提供一種Na-芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法，主要解決現有制備方法存在的不易萃取和純化、后處理困難和反應物對環境和人體不利的技術問題。本發明的技術方案:一種Na-芴甲氧羰基-Ne -乙酰基-賴氨酸的制備方法，包括以下步驟:以N a -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-賴氨酸為起始原料，經過脫叔丁氧羰基，純化N a -芴甲氧羰基-賴氨酸，純化好的N a -芴甲氧羰基-賴氨酸與乙酰氯或乙酸酐反應，得N a -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸，純化處理得到產品。其所述脫叔丁氧羰基的試劑為質量百分含量為15% 60%的三氟醋酸與二氯甲烷混合溶液，或氯化氫溶于乙醚·或乙醇溶液。其具體操作步驟為，將I當量的Na -芴甲氧羰基-N ε _叔丁氧羰基-賴氨酸溶解于二氯甲烷中，加入，I 3份質量百分含量為15% 60%三氟醋酸的二氯甲烷溶液，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，減壓蒸餾掉溶劑和三氟醋酸，石油醚洗滌，石油醚傾掉溶于四氫呋喃，加有機堿至PH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯或乙酸酐，薄層色譜檢測反應進度，pH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在7 10，反應結束后，濃縮反應液，力口乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到I 6，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品。其具體操作步驟為，將I當量的N a -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-賴氨酸溶解于乙醇或乙醚中，通入氯化氫氣體，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，過濾掉溶劑，用乙醚洗滌，溶于四氫呋喃，加有機堿至PH弱堿性攪拌滴加乙酰氯或乙酸酐，薄層色譜檢測反應進度，PH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在7 10，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到I 6，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品。其所述有機堿為N-甲基嗎啉，N, N- 二異丙基乙胺或其他溶于有機溶劑的弱堿； 其所述的賴氨酸包括L-賴氨酸，DL-賴氨酸，D-賴氨酸；
該方法適用于制備Na -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-鳥氨酸。Na -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸相關產品定性指標:
Fmoc-Lys (Ac) -OH ； CAS: 159766-56-0 ;分子式=C23H23F3N2O5 分子量:410.5質譜實測409.6 [M-H]-。本發明的有益效果:第一，在反應最后加入乙酸酐或乙酰氯，不直接產生N ε -乙酰基-賴氨酸，更加容易處理；第二，避免了銅鹽和乙酰氯反應后的難以洗滌；第三，利用本公司噸級產量的Na -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-賴氨酸降低了初始原料的成本;第四，產品質量穩定可靠。
圖1為本發明產品紅外圖譜。圖2為本發明產品核磁圖譜。
具體實施例方式實施例1:將I當量的N α-芴 甲氧羰基-N ε-叔丁氧羰基-L-賴氨酸溶解于二氯甲烷中，加入，I份質量百分含量為15%的三氟醋酸的二氯甲烷溶液，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，減壓蒸餾掉溶劑和三氟醋酸，石油醚洗滌，石油醚傾掉溶于四氫呋喃，加N-甲基嗎啉至pH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯，薄層色譜檢測反應進度，pH試紙檢測反應體系酸性，維持PH值在7，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到1，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98%，收率，85% ；紅外及核磁譜圖見圖1、2。實施例2:將I當量的N a -芴甲氧羰基_Ν ε -叔丁氧羰基_L_賴氨酸溶解于乙醇或乙醚中，通入氯化氫氣體，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，過濾掉溶劑，用乙醚洗滌，溶于四氫呋喃，加N，N- 二異丙基乙胺至pH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯，薄層色譜檢測反應進度，PH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在10，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調pH到6，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98%，收率，90% ;紅外及核磁譜圖見圖1、2。實施例3:將I當量的Na -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-D-賴氨酸溶解于二氯甲烷中，加入，3份的質量百分含量為30%的三氟醋酸的二氯甲烷溶液，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，減壓蒸餾掉溶劑和三氟醋酸，石油醚洗滌，石油醚傾掉溶于四氫呋喃，加N-甲基嗎啉至pH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯，薄層色譜檢測反應進度，pH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在10，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調pH到6，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98.1%，收率，89% ;紅外及核磁譜圖見圖1、2。實施例4:將I當量的Na -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-DL-賴氨酸溶解于乙醇或乙醚中，通入氯化氫氣體，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，過濾掉溶劑，用乙醚洗滌，溶于四氫呋喃，加N，N- 二異丙基乙胺至pH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯，薄層色譜檢測反應進度，PH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在7，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到1，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98.3%，收率，84% ;紅外及核磁譜圖見圖1、2。實施例5:將I當量的N a -芴甲氧羰基_Ν ε -叔丁氧羰基-L-賴氨酸溶解于二氯甲烷中，加入，2份質量百分含量為45%的的三氟醋酸的二氯甲烷溶液，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，減壓蒸餾掉溶劑和三氟醋酸，石油醚洗滌，石油醚傾掉溶于四氫呋喃，加N-甲基嗎啉至pH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯，薄層色譜檢測反應進度，pH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在8，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調pH到4，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98.4%，收率，91% ;紅外及核磁譜圖見圖1、2。實施例6:將I當量的Na -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-L-賴氨酸溶解于乙醇或乙醚中，通入氯化氫氣體，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，過濾掉溶劑，用乙醚洗滌，溶于四氫呋喃，加N，N- 二異丙基乙胺至pH弱堿性攪拌；滴加乙酸酐，薄層色譜檢測反應進度，PH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在8，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取 層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到4，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98.0%，收率，88% ;紅外及核磁譜圖見圖1、2。實施例7:將I當量的Na -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基_L_鳥氨酸溶解于二氯甲烷中，加入，2份質量百分含量為60%的的三氟醋酸的二氯甲烷溶液，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，減壓蒸餾掉溶劑和三氟醋酸，石油醚洗滌，石油醚傾掉溶于四氫呋喃，加N-甲基嗎啉至pH弱堿性攪拌；滴加乙酸酐，薄層色譜檢測反應進度，pH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在9，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到3，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98.1%，收率，94% ;紅外及核磁譜圖見圖1、2。實施例8:將I當量的Na -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基_D_鳥氨酸溶解于乙醇或乙醚中，通入氯化氫氣體，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，過濾掉溶劑，用乙醚洗滌，溶于四氫呋喃，加N，N- 二異丙基乙胺至pH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯，薄層色譜檢測反應進度，PH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在8，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到2，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥齊U，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品，純度98.1%，收率，90% ;紅外及核磁譜圖見圖1、 2。
權利要求
1.一種Nd -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法，其特征是包括以下步驟:以N a -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-賴氨酸為起始原料，經過脫叔丁氧羰基，純化Na-芴甲氧羰基-賴氨酸，純化好的N a -芴甲氧羰基-賴氨酸與乙酰氯或乙酸酐反應，得Na -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸，純化處理得到產品。
2.根據權利要求1所述的一種Na -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法，其特征在于脫叔丁氧羰基需要試劑為質量百分含量為15% 60%的三氟醋酸與二氯甲烷混合溶液，或氯化氫溶于乙醚或乙醇溶液。
3.根據權利要求1所述的Na-芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法，其特征在于其具體操作步驟為，將I當量的N a -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-賴氨酸溶解于二氯甲烷中，加入，I 3份質量百分含量為15% 60%三氟醋酸的二氯甲烷溶液，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，減壓蒸餾掉溶劑和三氟醋酸，石油醚洗滌，石油醚傾掉溶于四氫呋喃，加有機堿至PH弱堿性攪拌；滴加乙酰氯或乙酸酐，薄層色譜檢測反應進度，PH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在7 10，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到I 6，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品。
4.根據權利要求1所述的Na -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法，其特征在于其具體操作步驟為，將I當量的N a -芴甲氧羰基-N ε -叔丁氧羰基-賴氨酸溶解于乙醇或乙醚中，通入氯化氫氣體，劇烈攪拌，外部用自來水冷卻，薄層色譜檢測反應完全，過濾掉溶劑，用乙醚洗滌，溶于四氫呋喃，加有機堿至PH弱堿性攪拌滴加乙酰氯或乙酸酐，薄層色譜檢測反應進度，pH試紙檢測反應體系酸性，維持pH值在7 10，反應結束后，濃縮反應液，加乙醚溶解，水洗，乙醚提取層雜質，乙醚層合并，水洗乙醚層，水層中加入乙酸乙酯，鹽酸調PH到I 6，分液，酸水洗乙酸乙酯層，鹽水系乙酸乙酯層，乙酸乙酯層干燥劑干燥，過濾干燥劑，乙酸乙酯溶液濃縮，靜置，固體析出，過濾烘干，得產品。
5.根據權利要求3或4所述的Na -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法，其特征在于所述有機堿為N-甲基嗎啉或N，N- 二異丙基乙胺。
6.根據權利要求1所述的Na -芴甲氧羰基-N ε -乙酰基-賴氨酸的制備方法，其特征在于其所述的賴氨酸為L-賴氨酸、DL-賴氨酸或D-賴氨酸。
全文摘要
本發明涉及一種賴氨酸制備方法，尤其是一種Nα-芴甲氧羰基-Nε-乙酰基-賴氨酸的制備方法。主要解決現有制備方法存在的不易萃取和純化、后處理困難和反應物對環境和人體不利的技術問題。本發明的技術方案一種Nα-芴甲氧羰基-Nε-乙酰基-賴氨酸的制備方法，包括以下步驟以Nα-芴甲氧羰基-Nε-叔丁氧羰基-賴氨酸為起始原料，經過脫叔丁氧羰基，純化Nα-芴甲氧羰基-賴氨酸，純化好的Nα-芴甲氧羰基-賴氨酸與乙酰氯或乙酸酐反應，得Nα-芴甲氧羰基-Nε-乙酰基-賴氨酸，純化處理得到產品。Nα-芴甲氧羰基-Nε-乙酰基-賴氨酸是一種常用的氨基酸保護試劑，在多肽合成領域經常用到。
文檔編號C07C269/06GK103242200SQ201310122100
公開日2013年8月14日 申請日期2013年4月10日 優先權日2013年4月10日
發明者徐紅巖, 李忠亮 申請人:吉爾生化(上海)有限公司, 上海吉爾多肽有限公司, 無錫亞肽生物科技有限公司