專利名稱：一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法
技術領域：
本發明涉及一種從植物中制備植物激素的方法，屬于天然產物領域，具體地說是一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法。
背景技術：
大豆異黃酮是從非轉基因大豆精制而成的生物活性物質，是一種具有多種重要生理活性的天然營養因子，是純天然的植物雌激素，容易被人體吸收，能迅速補充營養。在每100克大豆樣品中，含異黃酮128毫克，傳統方法生產的分離蛋白含異黃酮102毫克，而豆乳中含9.65毫克，因為豆乳含水93.27%，相當于干物質中每100克也含異黃酮100毫克以上。豆腐中含異黃酮27.74毫克，其干物質含異黃酮200毫克以上。異黃酮是一種弱的植物雌規劃計劃經濟激素，大豆是人類獲得異黃酮的惟一有效來源。在雌激素生理活性強的情況下，異黃酮能起抗雌激素作用，降低受雌激素激活的癌癥如乳腺癌的風險，而當婦女絕經時期雌激素水平降低，異黃酮能起到替代作用，避免潮熱等停經期癥狀發生。異黃酮的抗癌特性十分突出，能阻礙癌細胞的生長和擴散，而且只對癌細胞有作用，對正常細胞并無影響。異黃酮還是一種有效的抗氧化劑，能阻止氧自由基的生成，而氧自由基是一種強致癌因素。可見異黃酮的抗癌作用有多種方式和途徑。異黃酮是黃酮類化合物中的一種，主要存在于豆科植物中，大豆異黃酮是大豆生長中形成的一類次級代謝產物。由于是從植物中提取，與雌激素有相似結構，因此大豆異黃酮又稱植物雌激素，能夠彌補30歲以后女性雌性激素分泌不足的缺陷，改善皮膚水分及彈性狀況，緩解更年期綜合癥和改善骨質疏松，使女性再現青春魅力。大豆異黃酮的雌激素作用影響到激素分泌、代謝生物學活性、蛋白質合成、生長因子活性，是天然的癌癥化學預防劑。
發明內容
本發明的目的在于提供一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法，解決了傳統方法。為了實現上述目的，本發明所述的一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法，其特征在于:
一、對干燥粉碎處理大豆利用溶劑提取，所述的溶劑為乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例組成，材料與提取溶劑的重量比為1:5 20，提取溫度為10°C 100°C，每次提取時間為
0.5 5h，提取2 5次，提取液濃縮后得濃縮液或浸膏；
二、將濃縮液或浸膏溶于水，用弱極性或中等極性的有機溶劑作為萃取劑萃取，所述的弱極性和中等極性的有機溶劑萃取劑為石油醚、環己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯，分別濃縮回收溶劑，得到大豆異黃酮萃取浸膏。
本發明所述的一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法，其特征在于:具體包括下列步驟:
I.原料選擇:以大 為提取材料；2.原料處理:去除原料中雜物，通風處陰干，或100°C以下低溫烘干，粉碎成粗粉，干燥保存待用；
3.大豆異黃酮的提取:取粉碎干燥的大豆原料，加入乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例組成的溶劑浸提或回流提取，材料與提取溶劑的重量比為1:5 20，提取溫度為10°C 100°C，每次提取時間為0.5 5h，提取2 5次，合并提取液；
4.萃取浸膏:提取液濃縮后得濃縮液或浸膏，將濃縮液或浸膏溶于水，用弱極性或中等極性的有機萃取劑如石油醚、環己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯等萃取，得到大豆異黃酮萃取浸膏；
5.大豆異黃酮的分離和純化:純品大豆異黃酮可通過以下兩個途徑獲取:
Φ純化弱極性或中等極性的有機溶劑萃取物，分離得大豆異黃酮:取上述弱極性或
中等極性的有機溶劑如氯仿或乙酸乙酯萃取物，選擇非極性或弱極性大孔樹脂如HP-20、D-10U XDA-U AB-8型等樹脂純化，先用水洗柱，再用醇水體系洗脫劑洗脫，洗脫液濃縮后，經葡聚糖凝膠柱S^hadex LH-20柱純化，氯仿一甲醇溶劑系統洗脫劑洗脫得大豆異黃酮；
f純化醇萃取物得含大豆異黃酮的總皂苷，水解總皂苷制備大豆異黃酮洗脫液濃縮后
制備得大豆異黃酮。本發明所述的一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法，其有益效果在于:本發明方法制備工藝簡單，制作方便，技術易掌握，能耗小，主要以醇一水體系為溶劑，無環境污染，萃取劑和洗脫劑都可回收，循環使用，提取率高，生產成本低，生產的大豆異黃酮能夠用于開發多種治療藥物及植物激素產品，也可作為化學合成的原料。
具體實施例方式以下實施例為本發明作進一步出闡述。實施例1
一、取大豆lkg，干燥，研磨成粗粉，加入4L70%乙醇(V/V)溶液室溫浸提4次，每次4h，合并提取液，將濾液濃縮成浸膏，將其懸浮于水，依次用等體積的石油醚、正丁醇分別萃取5次，分別減壓回收溶劑得萃取物；
二、正丁醇萃取物用去離子水溶解，按照樣品與填料1:7比例在D-101型大孔樹脂上純化，先用去離子水洗脫除雜，直至a-萘酚反應檢測洗脫液成陰性為止，然后用30%乙醇洗脫，收集該乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，干燥得含大豆異黃酮總皂苷2.4g ；
三、將總皂苷溶解在12mL，濃度為2mol/LHCl (MeOH =H2O=1:1)溶液中，90°C熱水浴回流水解2h，反應液冷卻后，減壓濃縮除去甲醇，再用氯仿萃取，回收溶劑，N2干燥得大豆異黃酮1.2g，純度97%。實施例2
一、取粉碎干燥的大豆1kg，加入5L甲醇溶劑，60°C水浴回流提取3次，每次3h，提取3次，合并提取液，將浸膏用去離子水溶解，在DIA10NHP-20大孔樹脂上進行純化，按照樣品與填料1:6比例上樣，裝柱，70%甲醇(V/V)溶液洗脫除雜后，收集80%甲醇洗脫液，干燥得
2.8g大豆異黃酮總阜苷；二、將總皂苷溶解在15mL，濃度為Imol / L H2SO4(MeOH:H2O=I:1)溶液中，80°C熱水浴回流水解lh，反應液冷卻后，減壓濃縮除去甲醇，再用環己烷萃取，回收溶劑，N2干燥得大豆異黃酮1.4g，純度96.6%。實施例3
一、取粉碎干燥的大豆1kg，加入4L丙酮，65°C水浴加熱回流提取3次，每次2h，共提取3次，合并提取液，減壓回收丙酮，濃縮成浸膏，將浸膏用純凈水溶解，依次用等體積的石油醚、氯仿、正丁醇萃取4次，分別減壓回收溶劑得萃取物；
二、氯仿萃取物經DIA10NHP-20大孔樹脂純化，先用水洗柱，收集90%甲醇溶液洗脫液，洗脫液濃縮干燥后，經葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱純化，按氯仿:甲醇=1:1配置的洗脫劑洗脫，收集洗脫液 ，干燥得拉肖皂苷元0.5g，純度96%。
權利要求
1.一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法，其特征在于: I對干燥粉碎處理大豆利用溶劑提取，所述的溶劑為乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例組成，材料與提取溶劑的重量比為1:5 20，提取溫度為10°C 100°C，每次提取時間為0.5 ，提取2 5次，提取液濃縮后得濃縮液或浸膏； 2將濃縮液或浸膏溶于水，用弱極性或中等極性的有機溶劑作為萃取劑萃取，所述的弱極性和中等極性的有機溶劑萃取劑為石油醚、環己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯，分別濃縮回收溶劑，得到大豆異黃酮萃取浸膏。
2.一種從大豆中制備大豆異黃酮的步驟,其特征在于: Φ原料選擇:以大 為提取材料； 原料處理:去除原料中雜物，通風處陰干，或100°C以下低溫烘干，粉碎成粗粉，干燥保存待用； O大豆異黃酮的提取:取粉碎干燥的大豆原料，加入乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例組成的溶劑浸提或回流提取，材料與提取溶劑的重量比為1:5 20，提取溫度為10°C 100°C，每次提取時間為0.5 5h，提取2 5次，合并提取液； @萃取浸膏:提取液濃縮后得濃縮液或浸膏，將濃縮液或浸膏溶于水，用弱極性或中等極性的有機萃取劑如石油醚、環己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯等萃取，得到大豆異黃酮萃取浸膏； O大豆異黃酮的分離和純化。
3.如權利要求2所述一種從大豆中制備大豆異黃酮的步驟，其特征在于:所述大豆異黃酮的分離和純化: Φ純化弱極性或中等極性的有機溶劑萃取物，分離得大豆異黃酮:取上述弱極性或中等極性的有機溶劑如氯仿或乙酸乙酯萃取物，選擇非極性或弱極性大孔樹脂如HP-20、D-10U XDA-U AB-8型等樹脂純化，先用水洗柱，再用醇水體系洗脫劑洗脫，洗脫液濃縮后，經葡聚糖凝膠柱S^ha dex LH-20柱純化，氯仿一甲醇溶劑系統洗脫劑洗脫得大豆異黃酮；a純化醇萃取物得含大豆異黃酮的總皂苷，水解總皂苷制備大豆異黃酮洗脫液濃縮后制備得大豆異黃酮。
全文摘要
本發明公開一種從大豆中制備大豆異黃酮的方法，涉及一種從植物中制備植物激素的方法，屬于天然產物領域。其特征在于對干燥粉碎處理大豆利用溶劑提取，材料與提取溶劑的重量比為15～20，提取溫度為10℃～100℃，每次提取時間為0.5～5h，提取2～5次，提取液濃縮后得濃縮液或浸膏。其有益效果在于本發明方法制備工藝簡單，制作方便，技術易掌握，能耗小，主要以醇一水體系為溶劑，無環境污染，萃取劑和洗脫劑都可回收，循環使用，提取率高，生產成本低，生產的大豆異黃酮能夠用于開發多種治療藥物及植物激素產品，也可作為化學合成的原料。
文檔編號C07D311/36GK103145675SQ20131006074
公開日2013年6月12日 申請日期2013年2月27日 優先權日2013年2月27日
發明者何誠慧 申請人:何誠慧