專利名稱：一種從牡丹籽粕中提取芍藥苷的方法
技術領域：
本發明涉及植物提取的領域，具體涉及一種提取芍藥苷的新的植物來源和方法。
背景技術：
芍藥苷為吸濕性無定形白色粉末，在酸性條件下芍藥苷穩定，受熱易分解。芍藥苷具有顯著的鎮痛、鎮靜、抗驚厥作用。對心腦血管系統具有擴張冠狀動脈，增加冠脈流量，對抗急性心肌缺血，降低血壓作用。芍藥苷還具有通過抗血小板聚集而實現抗血栓形成的作用。國內外研究證明芍藥苷具有降低高血脂、高膽固醇、高血糖作用；逆轉低血壓作用；具有舒張平滑肌細胞的解痙作用；抗炎、抗潰瘍和抗過敏作用；對于應激潰瘍有預防作用；對某些致病性細菌和真菌有抑制作用。此外還具有抗腫瘤作用、對肝臟的保護作用、防治老年性癡呆及利尿的作用。芍藥苷的提取方法很多，例如一種是取赤芍藥材粉碎，乙醇一水溶液熱回流提取，再上大孔吸附樹脂柱，乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮后上聚酰胺柱，水洗脫，濃縮洗脫液，干燥后得白色粉末。一種是從白芍中提取芍藥苷，將白勺粉碎，用醇或酮提取，大孔樹脂吸附，甲醇洗脫，氧化鋁柱除雜，萃取后，減壓干燥即可得到產品。但是以牡丹籽為原料，從牡丹籽柏中提取芍藥苷的報道，卻鮮見。成熟牡丹的籽產量為300kg- 500kg/年，2011年衛生部批 準牡丹籽油作為新資源食品后，牡丹籽油及其深加工產業化，使牡丹籽變廢為寶，從單純的留夠種子育苗，其他的都丟棄不管到各種經營商高價搶購，提高了當地農民的經濟收入。
發明內容
本發明提供了一種從牡丹籽柏中提取芍藥苷的方法，通過該方法提取的芍藥苷，不僅純度高，而且易于工業化生產。為牡丹產業的深加工提供更廣的應用。為實現上述目的，本發明提供一種從牡丹籽柏中提取芍藥苷的方法，它包括以下步驟:
一種從牡丹籽柏中提取芍藥苷的方法，該方法包含下述步驟:
(1)粉碎:將原料牡丹籽柏粉碎至200目，得牡丹籽柏粉，原料牡丹籽柏為牡丹種仁榨油之后的固體餅柏；
(2)酶解:將步驟(I)中的牡丹籽柏粉以料液比1:10 20的比例加入水，在35 55°C的條件下，調PH4 6，加入纖維素酶和果膠酶，所加的纖維素酶占物料重的0.1 0.2%，其酶活彡8萬U/g，果膠酶0.1 0.2%，其酶活彡10萬U/g，酶解I 3 h，在95°C下滅酶，得酶解液；
(3)乙醇提取:取步驟(2)中的酶解漿液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇體積分數為25 80%，進行超聲波提取，提取溫度為10 60°C，提取時間為10 60min ;超聲頻率為20 30 kHz，抽濾，在殘渣中加入乙醇溶液，繼續提取，其提取條件同前一次超聲波提取；待兩次超聲波提取之后，再微波提取10 30min，微波提取的條件是:溫度20 50°C，微波功率2MHz 5MHz，得提取液，合并兩次的提取液；并減壓濃縮至無醇，得濃縮液；
(4)將步驟(3)中的濃縮液上大孔樹脂吸附柱，先用水沖洗，再用體積分數為40% 95%的乙醇解析液洗脫，收集洗脫液，再過氧化鋁柱，鈦棒過濾，膜超濾、納濾，減壓濃縮至無醇，干燥得芍藥苷提取物，上述的干燥方式為真空冷凍干燥、噴霧干燥或真空烘干中的任一種；膜超濾、納濾的條件如下:進液壓力為0.1 0.5Mpa ;料液流速為20 30ml/s ;料液溫度為20 35°C ;當料液原液被超濾至少量時，再加純化水稀釋，重復超濾多次；料液的pH值控制在6 7 ;反沖洗周期為每批，反沖洗時間為I小時，超濾膜的截留分子量采用10000 lOOOOODa，納濾膜的截留分子量采用200 5000Da。優選的，超聲提取條件是，提取溫度為30°C，提取時間為30min，頻率為25kHz。優選的，微波提取的條件是:溫度25°C，微波頻率2.5MHz ;步驟(4)中的大孔樹脂為 HPD200A，HPD100, D-101，D-101A，AB-8。上述的解析液乙醇的體積分數為50% 70%，更優選的，解析液乙醇的體積分數為50%。膜結構采用中空纖維超濾膜、卷式或管式超濾膜，采用錯流過濾或采用死端過濾；超濾膜材料為纖維素及其衍生物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、交鏈的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物中的任一種。乙醇提取步驟中:取步驟(2)中的酶解漿液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇體積分數為60%，進行超聲波提取，提取溫度為40°C，提取時間為20 min ;超聲頻率為20 kHz，抽濾，在殘渣中加入乙醇溶液，繼續提取，其提取條件同前一次超聲波提取；待兩次超聲波提取之后，再微波提取20min，微波提取的條件是:溫度35°C，微波功率5MHz，得提取液，合并兩次的提取液；并減壓濃縮至無醇，得濃縮液。納濾膜的截留分子量采用3000Da。本發明的有益效果在于，以廢棄的牡丹柏為原料，采用酶解法先對牡丹籽柏進行酶解，然后再加入有機溶劑乙醇對芍藥苷進行提取，再采用大孔吸附樹脂、氧化鋁柱，鈦棒、膜過濾對提取液進行提取，使芍藥苷的提取率達到61.6%。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作更進一步的說明，以便本領域的技術人員更了解本發明，但并不因此限制本發明。實施例1
一種從牡丹籽柏中提取芍藥苷的方法，該方法包含下述步驟:
(1)粉碎:將原料牡丹籽柏粉碎至200目，得牡丹籽柏粉，原料牡丹籽柏為牡丹種仁榨油之后的固體餅柏；
(2)酶解:將步驟(I)中的牡丹籽柏粉以料液比1:15的比例加入水，在45°C的條件下，調pH5，加入纖維素酶和果膠酶，所加的纖維素酶占物料重的0.15%，其酶活彡8萬U/g，果膠酶0.15%，其酶活> 10萬U/g，酶解2h，在95°C下滅酶，得酶解液；
(3)乙醇提取:取步驟(2) 中的酶解漿液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇體積分數為60%，進行超聲波提取，提取溫度為30°C，提取時間為30 min ;超聲頻率為20kHz，抽濾，在殘渣中加入乙醇溶液，繼續提取，其提取條件同前一次超聲波提取；待兩次超聲波提取之后，再微波提取20min，微波提取的條件是:溫度40°C，微波功率5MHz，得提取液，合并兩次的提取液；并減壓濃縮至無醇，得濃縮液；
(4)將步驟(3)中的濃縮液上大孔樹脂吸附柱，先用水沖洗，再用體積分數為50%的乙醇解析液洗脫，收集洗脫液，再過氧化鋁柱，鈦棒過濾，膜超濾、納濾，減壓濃縮至無醇，干燥得芍藥苷提取物，上述的干燥方式為真空冷凍干燥、噴霧干燥或真空烘干中的任一種；膜超濾、納濾的條件如下:進液壓力為0.2Mpa ;料液流速為20ml/s ;料液溫度為30°C ;當料液原液被超濾至少量時，再加純化水稀釋，重復超濾多次；料液的PH值控制在6 ;反沖洗周期為每批，反沖洗時間為I小時，超濾膜的截留分子量采用lOOOODa，納濾膜的截留分子量采用IOOODa0以上的大孔樹脂為AB-8，膜結構采用中空纖維超濾膜，采用死端過濾；超濾膜材料為纖維素聚砜酰胺。檢測得到的芍藥苷的純度是50.26%，提取率為61.6%。實施例2
一種從牡丹籽柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，該方法包含下述步驟:
(1)粉碎:將原料牡丹籽柏粉碎至200目，得牡丹籽柏粉，原料牡丹籽柏為牡丹種仁榨油之后的固體餅柏；
(2)酶解:將步驟(I)中的牡丹籽柏粉以料液比1:10的比例加入水，在35°C的條件下，調pH4，加入纖維素酶和果膠酶，所加的纖維素酶 占物料重的0.1%，其酶活>8萬U/g，果膠酶0.1%，其酶活彡10萬U/g，酶解I h，在95°C下滅酶，得酶解液；
(3)乙醇提取:取步驟(2)中的酶解漿液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇體積分數為25%，進行超聲波提取，提取溫度為20°C，提取時間為10 min ;超聲頻率為20kHz，抽濾，在殘渣中加入乙醇溶液，繼續提取，其提取條件同前一次超聲波提取；待兩次超聲波提取之后，再微波提取20min，微波提取的條件是:溫度30°C，微波功率5MHz，得提取液，合并兩次的提取液；并減壓濃縮至無醇，得濃縮液；
(4)將步驟(3)中的濃縮液上大孔樹脂吸附柱，先用水沖洗，再用體積分數為60%的乙醇解析液洗脫，收集洗脫液，再過氧化鋁柱，鈦棒過濾，膜超濾、納濾，減壓濃縮至無醇，干燥得芍藥苷提取物，上述的干燥方式為真空冷凍干燥、噴霧干燥或真空烘干中的任一種；膜超濾、納濾的條件如下:進液壓力為0.1Mpa ;料液流速為20ml/s ;料液溫度為20°C ;當料液原液被超濾至少量時，再加純化水稀釋，重復超濾多次；料液的PH值控制在6 ;反沖洗周期為每批，反沖洗時間為I小時，超濾膜的截留分子量采用lOOOODa，納濾膜的截留分子量采用200Da。以上的大孔樹脂為HPD200A。膜結構采用管式超濾膜，采用錯流過濾；超濾膜材料為聚碳酸酯。檢測得到的芍藥苷的純度是49.34%，提取率為58.2%。實施例3
一種從牡丹籽柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，該方法包含下述步驟:
(1)粉碎:將原料牡丹籽柏粉碎至200目，得牡丹籽柏粉，原料牡丹籽柏為牡丹種仁榨油之后的固體餅柏；
(2)酶解:將步驟(I)中的牡丹籽柏粉以料液比1:20的比例加入水，在45°C的條件下，調pH6，加入纖維素酶和果膠酶，所加的纖維素酶占物料重的0.2%，其酶活>8萬U/g，果膠酶0.2%，其酶活> 10萬U/g，酶解3 h，在95°C下滅酶，得酶解液；
(3)乙醇提取:取步驟(2)中的酶解漿液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇體積分數為60%，進行超聲波提取，提取溫度為40°C，提取時間為20 min ;超聲頻率為30kHz，抽濾，在殘渣中加入乙醇溶液，繼續提取，其提取條件同前一次超聲波提取；待兩次超聲波提取之后，再微波提取20min，微波提取的條件是:溫度40°C，微波功率5MHz，得提取液，合并兩次的提取液；并減壓濃縮至無醇，得濃縮液；
(4)將步驟(3)中的濃縮液上大孔樹脂吸附柱，先用水沖洗，再用體積分數為75%的乙醇解析液洗脫，收集洗脫液，再過氧化鋁柱，鈦棒過濾，膜超濾、納濾，減壓濃縮至無醇，干燥得芍藥苷提取物，上述的干燥方式為真空冷凍干燥、噴霧干燥或真空烘干中的任一種；膜超濾、納濾的條件如下:進液壓力為0.4Mpa ;料液流速為30ml/s ;料液溫度為35°C ;當料液原液被超濾至少量時，再加純化水稀釋，重復超濾多次；料液的PH值控制在7 ;反沖洗周期為每批，反沖洗時間為1小時，超濾膜的截留分子量采用600000Da，納濾膜的截留分子量采用3000Dao步驟(4)中的大孔樹脂為HPD100。膜結構采用卷式超濾膜，采用錯流過濾；超濾膜材料為聚丙烯腈。檢測得到的芍藥苷的純度是50.26%，提取率為61.6%。
權利要求
1.一種從牡丹籽柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，該方法包含下述步驟: (1)粉碎:將原料牡丹籽柏粉碎至200目，得牡丹籽柏粉，所述的原料牡丹籽柏為牡丹種仁榨油之后的固體餅柏； (2)酶解:將步驟(I)中的牡丹籽柏粉以料液比1:10 20的比例加入水，在35 55°C的條件下，調PH4 6，加入纖維素酶和果膠酶，所加的纖維素酶占物料重的0.1 0.2%，其酶活彡8萬U/g，果膠酶0.1 0.2%，其酶活彡10萬U/g，酶解I 3 h，在95°C下滅酶，得酶解液； (3)乙醇提取:取步驟(2)中的酶解漿液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇體積分數為25 80%，進行超聲波提取，提取溫度為10 60°C，提取時間為10 60min ;超聲頻率為20 30 kHz，抽濾，在殘渣中加入乙醇溶液，繼續提取，其提取條件同前一次超聲波提取；待兩次超聲波提取之后，再微波提取10 30min，微波提取的條件是:溫度20 50°C，微波功率2MHz 5MHz，得提取液，合并兩次的提取液；并減壓濃縮至無醇，得濃縮液； (4)將步驟(3)中的濃縮液上大孔樹脂吸附柱，先用水沖洗，再用體積分數為40% 95%的乙醇解析液洗脫，收集洗脫液，再過氧化鋁柱，鈦棒過濾，膜超濾、納濾，減壓濃縮至無醇，干燥得芍藥苷提取物，所述的干燥方式為真空冷凍干燥、噴霧干燥或真空烘干中的任一種；所述的膜超濾、納濾的條件如下:進液壓力為0.1 0.5Mpa ;料液流速為20 30ml/s ;料液溫度為20 35°C;當料液原液被超濾至少量時，再加純化水稀釋，重復超濾多次；料液的PH值控制在6 7 ;反沖洗周期為每批，反沖洗時間為I小時，所述的超濾膜的截留分子量采用10000 lOOOOODa，納濾膜的截留分子量采用200 5000Da。
2.按權利要求1所述從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的超聲提取條件是，提取溫度為30°C，提取時間為30min，頻率為25kHz。
3.按權利要求1所述 從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的微波提取的條件是:溫度25 °C，微波頻率2.5MHz。
4.按權利要求1所述從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的步驟(4)中的大孔樹脂為 HPD200A, HPD100, D-101，D-101A, AB-8。
5.按權利要求1所述從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的乙醇解析液的體積分數為50% 70%。
6.按權利要求1或5所述從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的解析液乙醇的體積分數為50%。
7.按權利要求1所述從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的膜結構采用中空纖維超濾膜、卷式或管式超濾膜，采用錯流過濾或采用死端過濾。
8.按權利要求1所述從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的超濾膜材料為纖維素及其衍生物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、交鏈的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物中的任一種。
9.按權利要求1所述從牡丹柏中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的乙醇提取步驟中:取步驟(2)中的酶解漿液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇體積分數為60%，進行超聲波提取，提取溫度為40°C，提取時間為20 min，超聲頻率為20 kHz，抽濾，在殘渣中加入乙醇溶液，繼續提取，其提取條件同前一次超聲波提取；待兩次超聲波提取之后，再微波提取20min，微波提取的條件是:溫度35°C，微波功率5MHz，得提取液，合并兩次的提取液；并減壓濃縮至無醇，得濃縮液。
10.按權利要求1所述從牡丹柏 中提取芍藥苷的方法，其特征在于，所述的納濾膜的截留分子量采用3000Da。
全文摘要
本發明涉及植物提取的領域，具體涉及一種提取芍藥苷的新的植物來源和方法。一種從牡丹籽粕中提取芍藥苷的方法，其特征在于，包括下述的步驟粉碎、酶解、乙醇超聲提取，乙醇微波提取，大孔樹脂吸附，氧化鋁柱吸附，鈦棒過濾，膜超濾、納濾，濃縮，干燥得芍藥苷提取物。本發明的有益效果在于，以廢棄的牡丹籽粕為原料，采用酶解法先對牡丹籽粕進行酶解，然后再加入有機溶劑乙醇對芍藥苷進行提取，再采用大孔吸附樹脂、氧化鋁柱，鈦棒、膜過濾對提取液進行提取，使芍藥苷的提取率達到61.6%。
文檔編號C07H17/04GK103087128SQ20131004490
公開日2013年5月8日 申請日期2013年2月5日 優先權日2013年2月5日
發明者崔同, 余洪智, 秦愛霞, 毛文岳, 吳震生, 朱宗磊 申請人:菏澤堯舜牡丹生物科技有限公司