專利名稱：一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法
技術領域：
本發明涉及一種利用禽蛋蛋黃提取制備磷脂的方法，具體涉及一種利用低溫溶劑沉淀技術從蛋黃液中提取蛋黃磷脂的方法。
背景技術：
磷脂普遍存在于人體各組織和器官中，特別是存在于腦、神經系統、心臟、肺、腎、脾、血液、乳液、精液和精子中，是生物膜的組成部分。蛋黃磷脂具有很高的營養價值和生理活性，在保護細胞膜、抗衰老、降血脂、防治脂肪肝等方面有顯著療效。除生物學功能和藥物應用外，磷脂在食品工業、輕工、化工等領域具有廣泛的應用，這是由于磷脂還具有多種功能性特征，如乳化、潤濕、改善物料粘度、抗氧化作用、防止淀粉老化等。 磷脂在動植物體內廣泛存在，以禽蛋卵黃中含量最為豐富，占干物質總量的8-10%，而鴨蛋黃比雞蛋黃還高出O. 5個百分點以上，所以開發鴨蛋黃卵磷脂更具經濟性。國內外對磷脂的提純進行了很多研究，主要有溶劑萃取法、超臨界流體萃取法、吸附法、酶催化精制法及膜分離等方法，其中前兩種方法主要用于粗提，得到PC含量低于70%的粗磷脂，精制純化得到PC含量高于70%的產品主要依靠后三種方法。溶劑萃取法是傳統的PC制備方法。單一溶劑以乙醇提取效果最好，PC提取率與含量分別為71. 6%和51. 4%。混合溶劑提取以乙腈-甲醇效果最好，PC的提取率和含量分別為67. 8%和72. 8%。張維農等用適量95%乙醇浸提脫水脫油后的大豆油腳，經真空濃縮后用乙醚溶解，離心分離去除固體雜質，然后加入丙酮沉淀，得到PC含量為65. 8%的大豆粗磷脂產品。Hatta等用ZnCl2乙醇液純化粗磷脂，可得高達99. 6%的磷脂。無機鹽復合沉淀法利用無機鹽對磷脂分子的選擇性，雖然可以大大提高PC含量，但會在操作中引入金屬離子(如Zn2+、Cd2+)，影響產品質量，加重污染。目前利用有機溶劑浸取磷脂的大多數研究集中在大豆油腳或濃縮磷脂上，對蛋黃磷脂涉及較少。賴炳森等用超臨界C02萃取法去除蛋黃粉中甘油三酯和膽固醇，再用乙醇萃取磷月旨，得到磷脂總含量為95%的產品。Heidlas等以體積分數為70%的丙烷為夾帶劑，得到蛋黃磷脂總量為85%的萃余物。Lucas Mayer公司公布了超臨界CO2生產去油級卵磷脂的專利技術，該專利技術不僅可以采用連續式或半連續式工藝操作，而且混合器操作條件溫和，可以大大縮短萃取時間，萃取劑消耗低，能耗大大降低，生產成本也大為降低。超臨界流體萃取提純磷脂是一種與環境友好的方法，但是設備費用比較昂貴，且只能去除大豆或蛋黃原料中大部分的中性油脂及膽固醇，溶油能力較強而溶解磷脂能力較弱，只適合制備粗磷脂產品。吸附法一般選擇的吸附劑主要有硅膠，氧化鋁和離子交換樹脂，洗脫液常選用低級醇或氯仿等溶劑。Zhang等以大豆油腳為原料，采用溶劑萃取法和柱色譜法相結合的工藝，同時制備高純PC和PE，獲得含量為91. 9%的PC和少量含量為74. 2%的PE產品。Gunther等用低沸點石油醚Cl-4醇水(1:1:0. 175,v/v/v)的混合溶劑浸取蛋黃粉得到蛋黃磷脂，進樣到硅膠柱，用混合溶劑洗脫，洗脫液分為三部分收集，中間部分PC含量達94%。柱色譜設備簡單，生產成本低，是目前唯一能夠用于大規模生產高純磷脂的方法，但大部分研究停留在分析級制備上，制備過程洗脫液回收困難，易造成環境污染。Lekh等人采用酶法提高磷脂中PC的含量，所用酶來源于卷心菜中的磷脂酶，其研究結果將PC80%的大豆磷脂和75%的蛋黃磷脂分別提高至95%和100%。但酶法提純會導致成本增加，酶來源有限，不適合放大生產。Gupta等用正己烷-異丙醇混合溶劑溶解的大豆粗磷脂溶液通過聚丙烯半透膜，收集流過膜的溶液，蒸發濃縮，可使PC濃度由原始25%提高到51%，雜質大大減少。膜分離發具有能耗低、裝置簡單、操作容易、不產生新的污染等優點，分離過程一般在常溫下進行，特別適合分離天然物質，但膜不易再生，重復性差，成本昂貴，工業上難以應用。在此基礎上，開發出一種 工藝簡單，成本低，設備要求低，易于工業化生產的高純度磷脂提取工藝十分必要。
發明內容
本發明的目的是針對現有技術的不足提供一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法。具體工藝步驟如下
1、鴨蛋經過清洗、消毒、打蛋、分離出蛋黃，蛋黃經過攪拌成蛋黃液，添加體積為蛋黃液體積3-5倍的無水食用酒精，在20-40°C下攪拌提取IOmin-1小時，通過過濾分離出提取液，留下的蛋黃固體再重復提取兩次，去除蛋黃固體合并3次提取液，40°C減壓蒸餾去除乙醇，濃縮成膠狀物；
2、用體積為上述膠狀物1-10倍的短鏈烷烴或短鏈醇或鹵代烷烴溶劑溶解步驟I中的膠狀物，過濾去除不溶物，上清液置于-20 - (TC冰浴中保溫；
所述短鏈烷烴可以是正己烷、石油醚、正戊烷；
所述鹵代烷可以是烴氯仿、二氯甲烷；
所述短鏈醇可以是正丁醇、乙醇、甲醇；
3、接著緩慢倒入體積為上清液1-5倍的-30- O:c冷丙酮溶液，攪拌混勻，然后磷脂沉淀析出，攪拌停止，倒出上清液；
4、對步驟3中的磷脂沉淀用1-5倍體積的-30-0f冷丙酮洗滌5次，每次溶劑經過傾
倒去除，通過低溫真空烘干或氮吹法去除殘留溶劑，得到純度> 90%的高純度磷脂。本發明具有以下優點
1、工藝簡單，操作方便，適合大規模工業化制備；
2、使用溶劑回收方便，成本較低且環保；
3、提取流程短，收率高，產品純度高(純度>90%以上);
4、溶劑萃取低溫沉淀法處理量大，設備簡單，產率高；
表I不同提取方法比較
權利要求
1.一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法，其特征是 (1)鴨蛋經過清洗、消毒、打蛋、分離出蛋黃，蛋黃經過攪拌成蛋黃液，添加體積為蛋黃液體積3-5倍的無水食用酒精，在20-40°C下攪拌提取IOmin-1小時，通過過濾分離出提取液，留下的蛋黃固體再重復提取兩次，去除蛋黃固體合并3次提取液，40°C減壓蒸餾去除乙醇，濃縮成膠狀物； (2)用體積為上述膠狀物1-10倍的短鏈烷烴或短鏈醇或鹵代烷烴溶劑溶解步驟I中的膠狀物，過濾去除不溶物，上清液置于-20 - (TC冰浴中保溫； (3)接著緩慢倒入體積為上清液1-5倍的-30- (TC冷丙酮溶液，攪拌混勻，然后磷脂沉淀析出，攪拌停止，倒出上清液； (4)對步驟(3)中的磷脂沉淀用1-5倍體積的-30-0°C冷丙酮洗滌5次，每次溶劑經過傾倒去除，通過低溫真空烘干或氮吹法去除殘留溶劑，得到純度> 90%的高純度磷脂。
2.根據權利要求1所述的一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法，其特征是 所述短鏈烷烴是正己烷、石油醚或正戊烷；鹵代烷是烴氯仿或二氯甲烷；短鏈醇是正丁醇、乙醇或甲醇。
全文摘要
一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法，是將蛋黃液用無水食用酒精提取，再用短鏈烷烴或短鏈醇或鹵代烷烴溶劑溶解得到膠狀物，再用冷丙酮溶液溶解，使磷脂沉淀析出，最后用冷丙酮洗滌，烘干，得到產品。該方法提取流程短，收率高，產品純度高(純度≥90%以上)；溶劑萃取低溫沉淀法處理量大，設備簡單，產率高。
文檔編號C07F9/10GK103012468SQ20131000540
公開日2013年4月3日 申請日期2013年1月8日 優先權日2013年1月8日
發明者朱建航, 張帆, 范杰平, 肖文婷 申請人:江西昌豐由由生物科技有限公司