一種從發酵液中提取谷氨酰胺的方法

            文檔序號:3545009閱讀:928來源:國知局
            專利名稱:一種從發酵液中提取谷氨酰胺的方法
            技術領域
            本發明屬于發酵技術領域,尤其涉及一種從發酵液中提取谷氨酰胺的方法。
            背景技術
            L-谷氨酰胺(Gln)是L-谷氨酸的Y —羧基酰胺化的一種條件必需性氨基酸,是20種構成蛋白質的基本氨基酸之一,在體內可以由葡萄糖轉變而來,是哺乳動物非必需氨基酸。L-谷氨酰胺屬中性氨基酸,在偏酸、偏堿及較高溫度下易分解成谷氨酸或環化為吡咯烷酮二羧酸,它的化學分子式為C5HltlO3N2,分子量為146. 15,分解溫度為184 185°C,等電點為5. 65,結構式如下 OO
            H2N
            NH2近年來研究表明谷氨酰胺是機體含量最豐富的氨基酸,占全部游離氨基酸60%以上,主要儲存在腦、骨骼肌和血液中,具有很廣泛的生理作用(I)維持機體免疫功能。現有資料表明谷氨酰胺不僅是淋巴細胞和巨噬細胞的重要能量物質,甚至可能是各種免疫細胞的主要能源物質。小腸作為人體重要的最大免疫器官,是利用L-谷氨酰胺的主要器官,它的吸收細胞以很高的速率利用谷氨酰胺,說明谷氨酰胺在機體免疫中發揮著十分重要的作用。(2)調節蛋白質的合成和分解。谷氨酰胺是蛋白質合成的重要調節劑,在運動中可以調節蛋白質合成和降低肌肉蛋白質的分解,從而維持機體的生理功能。(3)谷氨酰胺是機體內氮和碳的重要運載工具。(4)維持體內酸堿平衡。谷氨酰胺可以作為腎臟生成的氨的載體,直接參與氨的代謝,從而起到維持酸堿平衡的重要作用。(5)調節糖代謝。谷氨酰胺可以通過糖異生作用生成葡萄糖,維持血糖濃度平衡。(6)細胞燃料。谷氨酰胺為快速生長和分化的細胞(如血管內皮細胞、淋巴細胞、腸粘膜上皮細胞等)提供能量來源。每Imol -Γ1的谷氨酰胺直接經三羧酸循環可以產生30mol .I/1的ATP。故谷氨酰胺產能對谷氨酰胺依賴性細胞(特別是小腸粘膜細胞,對谷氨酰胺具有很高的攝取率和利用率)具有更加重要的意義。此外,谷氨酰胺還有作為氨流動的重要載體、大分子的合成前體、胃腸管腔細胞的基本營養來源、在血液中暫時解除氨毒的作用等。由于谷氨酰胺在生物代謝中起著舉足輕重的作用,谷氨酰胺缺乏時將引發多種疾病。因此,開發谷氨酰胺具有重要意義。目前谷氨酰胺的生產方法主要有化學合成法、酶法和發酵法。現有化學合成法均采用濃硫酸作為必需的催化劑,反應條件苛刻、反應步驟多、收率低。化學合成法使用的化學試劑在產品中均有不同程度的殘留,而谷氨酰胺往往作為一種藥或功能食品,對純度有較高的要求,而且大量化學試劑的使用會造成環境污染,從而限制了產品質量及使用范圍。酶法合成谷氨酰胺主要是以NH3、三磷酸腺苷(ATP)及谷氨酸作為原料經合成酶催化生成谷氨酰胺。與化學合成法相比,酶法合成反應步驟相對簡單。然而其中ATP是必需的,而ATP價格昂貴,難以在工業上應用。同時,酶反應底物NH4+、副產物二磷酸腺苷(ADP)都明顯抑制谷氨酰胺的生成,反應收率低。因此酶法合成谷氨酰胺不能滿足大規模工業化生產的需要。發酵法是目前最常用的谷氨酰胺生產方法,具有原料來源廣泛、生產成本低,產品質量可控,產物單一等優點,適宜于大規模工業化生產。其中,從發酵液中分離提取谷氨酰胺是發酵法生產谷氨酰胺的重要步驟,直接影響谷氨酰胺產品生產效率。目前大多數采用發酵法生產谷氨酰胺的企業基本上都采用陰陽雙柱離子交換法分離提取谷氨酰胺。然而陰陽雙柱分離工藝存在交換樹脂用量大、洗脫和再生過程中酸堿消耗多的問題,造成嚴重的環境污染。另外谷氨酰胺在強酸或強堿環境容易轉化為谷氨酸,導致收率很低。

            發明內容
            有鑒于此,本發明的目的在于提供一種能耗低、污染小、谷氨酰胺收率高從發酵液 中提取谷氨酰胺的方法。為實現本發明的目的,本發明采用如下技術方案一種從發酵液中提取谷氨酰胺的方法,包括以下步驟步驟I、取谷氨酰胺發酵液降溫、過濾,得到的濾液濃縮、冷卻結晶、分離得到結晶粗品,然后加入結晶粗品重量30 60%的水洗晶,分離得洗晶粗品;步驟2、取洗晶粗品加水溶解后依次加入陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂脫鹽,過濾得到脫鹽液;步驟3、取脫鹽液納濾得到納濾液,納濾液脫色、過濾得脫色液,濃縮、冷卻結晶、分離干燥即得。作為優選,本發明步驟I所述過濾的過濾介質為陶瓷膜。更優選為過截留分子量為30kDa的陶瓷膜。作為優選,步驟I所述濃縮為濃縮至谷氨酰胺含量為20 35%。作為優選,步驟I所述冷卻結晶為緩慢降溫至5 15°C,維持10小時左右。作為優選,所述水洗晶的用水量為結晶粗品質量的50wt%。作為優選,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟2所述加水溶解為加水溶解成谷氨酰胺含量為3-4wt%的溶液。作為優選,步驟2所述脫鹽的具體操作為先加入陽離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾除去陽離子交換樹脂,然后再加入陰離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾除去陰離子交換樹月旨,得到脫鹽液。作為優選,所述陽離子交換樹脂的用量為谷氨酰胺發酵液體積的3. 17^3. 65v/v%。作為優選,所述陰離子交換樹脂的用量為谷氨酰胺發酵液體積的4. 25^4. 89v/v%。作為優選,本發明所述陽離子交換樹脂為強酸型陽離子交換樹脂。更優選為JK008、732#、WA-2或W-2型離子交換樹脂。作為優選,本發明所述陰離子交換樹脂為是弱堿型陰離子交換樹脂。更優選為A830或D354型離子交換樹脂。作為優選,步驟3所述納濾為用截留分子量為IOOODa的納濾膜過濾。
            作為優選,步驟3所述納濾液脫色優選為納濾液加熱至40°C加入活性炭脫色。作為優選,步驟3所述濃縮為濃縮至谷氨酰胺含量為25 45wt%。作為優選,步驟3所述冷卻結晶為緩慢降溫至5 15°C,維持10小時左右。從上述的技術方案可以看出,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法為取谷氨酰胺發酵液降溫、過濾,得到的 濾液濃縮、冷卻結晶、分離得到結晶粗品,然后加入結晶粗品重量30 60%的水洗晶,分離得洗晶粗品;洗晶粗品加水溶解后依次加入陽離子交換樹月旨、陰離子交換樹脂脫鹽,過濾得到脫鹽液;脫鹽液納濾得到納濾液,納濾液脫色、過濾得脫色液,濃縮、冷卻結晶、分離干燥即得谷氨酰胺。本發明所述提取方法采用水洗谷氨酰胺發酵液過濾后的結晶粗品,除去了結晶粗品表面的大部分雜質,減少脫鹽樹脂的用量,從而減少了因樹脂再生而產生污水量,降低了能耗,減少了污染。同時采用將陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂依次加入到料液中的方法進行脫鹽,料液脫鹽時間僅為4小時,大大降低了脫鹽周期較長導致的谷氨酰胺的損失,提高了谷氨酰胺收率。同時本發明所述提取方法在脫鹽時在使用陽離子交換樹脂脫鹽后,又用陰離子交換樹脂脫鹽,陰離子交換樹脂可以吸附料液中的谷氨酸,使成品中谷氨酸的含量降低到O. 3%以下,大大提高了提取谷氨酰胺的純度。并且本發明所述提取方法操作簡單,安全性高,工藝成本低,適合工業化生產。


            圖I示現有技術中提取谷氨酰胺的工藝流程圖;圖2示本發明所述提取谷氨酰胺的方法的流程圖。
            具體實施例方式本發明實施例公開了從發酵液中提取谷氨酰胺的方法。本領域技術人員可以借鑒本文內容,適當改進工藝參數實現。特別需要指出的是,所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的,它們都被視為包括在本發明。本發明的方法已經通過較佳實施例進行了描述,相關人員明顯能在不脫離本發明內容、精神和范圍內對本文所述的方法進行改動或適當變更與組合,來實現和應用本發明技術。為實現本發明的目的,本發明采用如下技術方案一種從發酵液中提取谷氨酰胺的方法,包括以下步驟步驟I、取谷氨酰胺發酵液降溫、過濾,得到的濾液濃縮、冷卻結晶、分離得到結晶粗品,然后加入結晶粗品重量30 60%的水洗晶,分離得洗晶粗品;步驟2、取洗晶粗品加水溶解后依次加入陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂脫鹽,過濾得到脫鹽液;步驟3、取脫鹽液納濾得到納濾液,納濾液脫色、過濾得脫色液,濃縮、冷卻結晶、分離干燥即得。本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法首先將谷氨酰胺發酵液降溫,然后過濾以除去谷氨酰胺發酵液中的菌體及其它不溶性大分子物質。過濾是在推動力的作用下,位于一側的懸浮液(或含塵氣)中的流體通過多孔介質的孔道向另一側流動,顆粒則被截留,從而實現流體與顆粒的分離操作過程。被過濾的懸浮液又稱為濾漿,過濾時截留下的顆粒層稱為濾餅,過濾的清液稱為濾液。無論采用何種過濾方式,過濾介質總是必須的,過濾介質即為使流體通過而顆粒被截留的多孔介質。過濾介質的共性要求是多孔、理化性質穩定、耐用和可反復利用等。目前可以用作過濾介質的材料很多,如由天然或合成纖維、金屬絲等編織而成的濾布和濾網、聚酰胺、聚酯或聚丙烯等纖維制成的單縷濾網、陶瓷膜、高分子聚合物多孔膜等。其中作為優選,本發明步驟I所述過濾的過濾介質為陶瓷膜。陶瓷膜也稱CT膜,是固態膜的一種,最早由日本的大日本印刷公司和東洋油墨公司在1996年開發引入市場。陶瓷膜具有分離效率高、效果穩定、化學穩定性好、耐酸堿、耐有機溶劑、耐菌、耐高溫、抗污染、機械強度高、膜再生性能好、分離過程簡單、能耗低、操作維護簡便、膜使用壽命長等眾多優勢廣泛應用于食品、飲料、植(藥)物深加工、生物醫藥、發酵、精細化工等眾多領域,可用于工藝過程中的分離、澄清、純化、濃縮、除菌、除鹽等。更優選為過截留分子量為30kDa的陶瓷膜。作為優選,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟I所述濃縮為濃縮至谷氨酰胺含量為20 35%。 作為優選,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟I所述冷卻結晶為緩慢降溫至5 15°C,維持10小時左右。本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟I采用水洗谷氨酰胺發酵液過濾后的結晶粗品,以除去結晶粗品表面的大部分雜質,減少脫鹽樹脂的用量,從而減少了因樹脂再生而產生污水量,降低了能耗,減少了污染。優選的,所述水洗晶的用水量為結晶粗品質量的50wt%。本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟I冷卻結晶后將結晶粗品與一次結晶母液分離得到結晶粗品,然后進行用水洗結晶粗品,水洗結晶粗品后將洗晶粗品與洗晶母液分離得到洗晶粗品。其中所述兩步分離均可以采用板框分離或離心分離。作為優選,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟2所述加水溶解為加水溶解成谷氨酰胺含量為3-4wt%的溶液。因脫鹽樹脂用量較少,若用離子交換樹脂柱脫鹽,如果陽柱以lBv/h的上柱流速上柱,過柱時間需要33. 48小時,以I. 2Bv/h的上柱流速上柱,過柱時間需要27. 9小時,陰柱以lBv/h的上柱流速上柱,過柱時間需要25小時,陽柱和陰柱串聯上柱,整個過柱時間為28. 9小時,過柱時間長,并且料液長期處于酸性或堿性條件下,谷氨酰胺易分解為谷氨酸,導致收率很低。本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法采用將陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂依次加入到料液中的方法進行脫鹽,料液脫鹽時間僅為4小時,大大降低了脫鹽較長導致的谷氨酰胺的損失。同時本發明所述提取方法在脫鹽時在使用陽離子交換樹脂脫鹽后,又用陰離子交換樹脂脫鹽,陰離子交換樹脂可以吸附料液中的谷氨酸,使成品中谷氨酸的含量降低到O. 3%以下,大大提高了提取谷氨酰胺的純度。作為優選,本發明所述提取方法步驟2所述脫鹽的具體操作為先加入陽離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾除去陽離子交換樹脂,然后再加入陰離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾除去陰離子交換樹脂,得到脫鹽液。進一步的,所述陽離子交換樹脂的用量為谷氨酰胺發酵液體積的3. 17^3. 65v/v%。進一步的,所述陰離子交換樹脂的用量為谷氨酰胺發酵液體積的4. 25^4. 89v/v%。目前陽離子交換樹脂又分為強酸性和弱酸性兩類。強酸型陽離子交換樹脂主要含有強酸性的反應基,如磺酸基(一 SO3H),此離子交換樹脂可以交換所有的陽離子。弱酸型陽離子交換樹脂具有較弱的反應基如羧基(-COOH基),此離子交換樹脂僅可交換弱堿中的陽離子如Ca2+、Mg2+,對于強堿中的離子如Na+、K+等無法進行交換。作為優選,本發明所述陽離子交換樹脂為強酸型陽離子交換樹脂。更優選為JK008、732#、WA-2或W-2型離子交換樹脂。其中,732#型離子交換樹脂,又名001X7型陽離子交換樹脂,是指凝膠型強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂,交聯度為7%,骨架帶有很高密度的電荷。732型陽離子交換樹脂經鈣離子轉型后,制得732型鈣離子交換樹脂。JK008型離子交換樹脂為均孔強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂,性能與001X7系列陽離子交換樹脂相似,但具有更高的交換容量。陰離子交換樹脂又分為強堿性和弱堿性兩類。(I)強堿型陰離子交換樹脂主要是含有較強的反應基,如具有四面體銨鹽官能基之一 n+(ch3)3,在氫氧形式下,一N+(CH3)3CMT中的氫氧離子可以迅速釋出,以進行交換,強堿型陰離子交換樹脂可以和所有的陰離子進行交換去除,這類樹脂含有強堿性基團,如季胺基(亦稱四級胺基)一 NR3OH(R為 碳氫基團),能在水中離解出0H—而呈強堿性。這種樹脂的正電基團能與溶液中的陰離子吸附結合,從而產生陰離子交換作用。這種樹脂的離解性很強,在不同PH下都能正常工作。它用強堿(如NaOH)進行再生。(2)弱堿型陰離子交換樹脂含有弱堿性基團,如伯胺基(亦稱一級胺基)-NH2、仲胺基(二級胺基)-NHR、或叔胺基(三級胺基)-NR2,它們在水中能離解出OH 一而呈弱堿性。這種樹脂的正電基團能與溶液中的陰離子吸附結合,從而產生陰離子交換作用。這種樹脂在多數情況下是將溶液中的整個其他酸分子吸附。它只能在中性或酸性條件(如pHl 9)下工作。它可用Na2C03、NH4OH進行再生。作為優選,本發明所述陰離子交換樹脂為是弱堿型陰離子交換樹脂。更優選為A830或D354型離子交換樹脂。本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法在利用離子交換樹脂脫鹽后對脫鹽液進行納濾,以除去脫鹽液中可溶性大分子物質及少量二價鹽。納濾(NF)是介于超濾與反滲透之間的一種膜分離技術,其截留分子量在80-1000的范圍內,孔徑為幾納米,因此稱納濾。納濾分離作為一項新型的膜分離技術,技術原理近似機械篩分。但是納濾膜本體帶有電荷性,這是它在很低壓力下仍具有較高脫鹽性能和截留分子量為數百的膜也可脫除無機鹽的重要原因。納濾能截留分子量大于100的有機物以及多價離子,允許小分子有機物和單價離子透過,可在高溫、酸、堿等苛刻條件下運行,耐污染,運行壓力低,膜通量高,裝置運行費用低。與超濾或反滲透相比,納濾過程對單價離子和分子量低于200的有機物截留較差,而對二價或多價離子及分子量介于200 500之間的有機物有較高脫除率。基于這一特性,納濾主要應用于水的軟化、凈化以及相對分子質量在百級的物質的分離、分級和濃縮(如染料、抗生素、多肽、多醣等化工和生物工程產物的分級和濃縮)、脫色和去異味等。作為優選,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟3所述納濾為用截留分子量為IOOODa的納濾膜過濾。脫色就是用吸附的方法除去化合物樣品中的雜質。當樣品(產品)為固體時,一般是先用適當溶劑將其溶解,加入吸附劑,停留或攪拌片刻,雜質即被吸附劑吸附。然后過濾,被吸附的雜質即與吸附劑一起留在濾紙上,而與樣品分離。活性炭是一種黑色粉狀,粒狀或丸狀的無定形具有多孔的碳,具有較大的表面積,有很強的吸附性能,常用于氣體的吸附、分離和提純,溶劑的回收,糖液、油脂、甘油、藥物的脫色劑等。因此本發明步驟3所述納濾液脫色優選為納濾液加熱至40°C加入活性炭脫色。作為優選,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟3所述濃縮為濃縮至谷氨酰胺含量為25 45wt%。作為優選,本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法步驟3所述冷卻結晶為緩慢降溫至5 15°C,維持10小時左右。為了進一步理解本發明,下面結合實施例對本發明進行詳細說明。實施例I :本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法提取谷氨酰胺取27L谷氨酰胺發酵液(谷氨酰胺含量為78mg/mL),截留分子量為30kDa陶瓷膜過濾得到濾液,濾液經真空濃縮至谷氨酰胺含量為30%,然后緩慢降溫至7°C,冷卻結晶 10小時,離心分離得到一次結晶粗品2302. 6克,加入1064mL水洗晶,經分離得到洗晶粗品2201. 8克,加水溶解至谷氨酰胺含量為3. 9%,向溶解液中先加入856mL陽離子交換樹脂攪拌2小時,過濾,再加入1150mL陰離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾,得濾液29. 08L,濾液過截留分子量為IOOODa的納濾膜,得納濾液,加入84. 8克針劑炭脫色,經過濾后將脫色液濃縮至谷氨酰胺含量為30%,濃縮液冷卻至10°C以下,維持10小時,經分離得二次結晶濕品,濕品干燥后得谷氨酰胺成品。所得谷氨酰胺純度99. 1%,成品中谷氨酸含量為O. 15%,谷氨酰胺的收率為64. 58%。陽樹脂再生過程中產生的廢水量為5735mL,陰樹脂再生過程中產生的廢水量為7660mL。實施例2 :本發明所述從發酵液中提取谷氨酰胺的方法提取谷氨酰胺取28L谷氨酰胺發酵液(谷氨酰胺含量為76mg/mL),截留分子量為30kDa陶瓷膜過濾得到濾液,濾液經真空濃縮至谷氨酰胺含量為28%,緩慢降溫至7 V,冷卻結晶10小時,離心分離得到一次結晶粗品2250. I克,加入1070mL水洗晶,經分離得到洗晶粗品2133. 3克,加水溶解至谷氨酰胺含量為3. 7%,向溶解液中先加入890mL陽離子交換樹脂、攪拌2小時,過濾,再加入1190mL陰離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾,得濾液32L,濾液過截留分子量為IOOODa的納濾膜,得納濾液,加入88. 8克針劑炭脫色,過濾,脫色液濃縮至谷氨酰胺含量為30%,濃縮液冷卻至10°C以下,維持10小時,經分離得二次結晶濕品,濕品干燥后得谷氨酰胺成品。所得谷氨酰胺純度為98. 8%,成品中谷氨酸含量為O. 05%,該過程中谷氨酰胺的收率為62. 55%。陽樹脂再生過程中產生的廢水量為5960mL,陰樹脂再生過程中產生的廢水量為 7930mL。實施例3 :現有提取谷氨酰胺的方法提取谷氨酰胺取32L谷氨酰胺發酵液(谷氨酰胺含量為75. 2mg/mL),截留分子量為30kDa陶瓷膜過濾得到濾液,過陰陽離子交換柱,陽樹脂體積為9L,陰樹脂體積為9L,過柱所得的脫鹽液經真空濃縮至谷氨酰胺含量為25%,緩慢降溫至7°C,冷卻結晶10小時,離心分離得到一次結晶粗品克,加水溶解至谷氨酰胺含量為4. 5%,加入120克針劑炭脫色,過濾,過濾得到的脫色液過截留分子量為SOODa的納濾膜,得納濾液,濃縮至谷氨酰胺含量為40%,濃縮液冷卻至10°C以下,維持10小時,經分離得二次結晶濕品,濕品干燥后得谷氨酰胺成品。所得谷氨酰胺純度為98. 8%,成品中谷氨酸含量為I. 1%,該過程中谷氨酰胺的收率為51%。陽樹脂再生過程中產生的廢水量為30L,陰樹脂在生過程中產生的廢水量為30L。
            以上實施例的說明只是用于幫助理解本發明的方法及其核心思想。應當指出,對于本技術領域的普通技術人員來說,在不脫離本發明原理的前提下,還可以對本發明進行若干改進和修飾,這些改進和修飾也落入本發明權利要求的保護范圍內。
            權利要求
            1.一種從發酵液中提取谷氨酰胺的方法,其特征在于,包括以下步驟 步驟I、取谷氨酰胺發酵液降溫、過濾,得到的濾液濃縮、冷卻結晶、分離得到結晶粗品,然后加入結晶粗品重量30 60%的水洗晶,分離得洗晶粗品; 步驟2、取洗晶粗品加水溶解后依次加入陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂脫鹽,過濾得到脫鹽液; 步驟3、取脫鹽液納濾得到納濾液,納濾液脫色、過濾得脫色液,濃縮、冷卻結晶、分離干燥即得。
            2.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟I所述過濾為過截留分子量為30kDa的陶瓷膜。
            3.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟I所述濃縮為濃縮至谷氨酰胺含量為20 35%。
            4.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟I所述冷卻結晶為緩慢降溫至5 15。。,維持10小時左右。
            5.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟I所述水洗晶的用水量為結晶粗品質量的50%。
            6.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟2所述加水溶解為加水溶解成谷氨酰胺含量為3-4wt%的溶液。
            7.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟2所述脫鹽的具體操作為為先加入陽離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾除去陽離子交換樹脂,然后再加入陰離子交換樹脂,攪拌2小時,過濾除去陰離子交換樹脂,得到脫鹽液。
            8.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,所述陽離子交換樹脂的用量為谷氨酰胺發酵液體積的3. 17 3. 65v/v%。
            9.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,所述陰離子交換樹脂的用量為谷氨酰胺發酵液體積的4. 25 4. 89v/v%。
            10.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,所述陽離子交換樹脂為強酸型陽離子交換樹脂。
            11.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,所述陰離子交換樹脂為是弱堿型離子交換樹脂。
            12.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟3所述納濾為用截留分子量為IOOODa的納濾膜過濾。
            13.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟3所述納濾液脫色為納濾液加入活性炭脫色。
            14.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟3所述濃縮為濃縮至谷氨酰胺含量為25 45wt%。
            15.根據權利要求I所述提取方法,其特征在于,步驟3所述冷卻結晶為緩慢降溫至5 15°C,維持10小時左右。
            全文摘要
            本發明屬于發酵技術領域,公開了一種從發酵液中提取谷氨酰胺的方法,為取谷氨酰胺發酵液降溫、過濾,得到的濾液濃縮、冷卻結晶、分離得到結晶粗品,然后加入其重量30~60%的水洗晶,分離得洗晶粗品;加水溶解后依次加入陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂脫鹽,過濾得到脫鹽液;納濾后得到納濾液,脫色、過濾得脫色液,濃縮、冷卻結晶、分離干燥即得谷氨酰胺。本發明所述提取方法采用水洗結晶粗品,除去結晶粗品表面的大部分雜質,減少脫鹽樹脂的用量,從而減少了產生污水量,降低了能耗,減少了污染。同時采用將陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂依次加入到料液中的方法進行脫鹽,大大降低了脫鹽周期較長導致的谷氨酰胺的損失,提高了谷氨酰胺收率。
            文檔編號C07C237/06GK102924321SQ201210504319
            公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月30日 優先權日2012年11月30日
            發明者閆美鳳, 尹春蕾, 王海雷, 劉康樂, 龔華 申請人:通遼梅花生物科技有限公司
            網友詢問留言 已有0條留言
            • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
            1
            婷婷六月激情在线综合激情,亚洲国产大片,久久中文字幕综合婷婷,精品久久久久久中文字幕,亚洲一区二区三区高清不卡,99国产精品热久久久久久夜夜嗨 ,欧美日韩亚洲综合在线一区二区,99国产精品电影,伊人精品线视天天综合,精品伊人久久久大香线蕉欧美
            亚洲精品1区 国产成人一级 91精品国产欧美一区二区 亚洲精品乱码久久久久久下载 国产精品久久久久久久伊一 九色国产 国产精品九九视频 伊人久久成人爱综合网 欧美日韩亚洲区久久综合 欧美日本一道免费一区三区 夜夜爽一区二区三区精品 欧美日韩高清一区二区三区 国产成人av在线 国产精品对白交换绿帽视频 国产视频亚洲 国产在线欧美精品 国产精品综合网 国产日韩精品欧美一区色 国产日韩精品欧美一区喷 欧美日韩在线观看区一二 国产区精品 欧美视频日韩视频 中文字幕天天躁日日躁狠狠躁97 视频一二三区 欧美高清在线精品一区二区不卡 国产精品揄拍一区二区久久 99久久综合狠狠综合久久aⅴ 亚洲乱码视频在线观看 日韩在线第二页 亚洲精品无码专区在线播放 成人亚洲网站www在线观看 欧美三级一区二区 99久久精品免费看国产高清 91麻豆国产在线观看 最新日韩欧美不卡一二三区 成人在线观看不卡 日韩国产在线 在线亚洲精品 亚洲午夜久久久久中文字幕 国产精品成人久久久久久久 精品国产一区二区在线观看 欧美精品国产一区二区三区 中文在线播放 亚洲第一页在线视频 国产午夜精品福利久久 九色国产 精品国产九九 国产永久视频 久久精品人人做人人综合试看 国产一区二区三区免费观看 亚洲精品国产电影 9999热视频 国产精品资源在线 麻豆久久婷婷国产综合五月 国产精品免费一级在线观看 亚洲国产一区二区三区青草影视 中文在线播放 国产成人综合在线 国产在线观看色 国产亚洲三级 国产片一区二区三区 久久99精品久久久久久牛牛影视 亚洲欧美日韩国产 四虎永久免费网站 国产一毛片 国产精品视频在 九九热在线精品 99精品福利视频 色婷婷色99国产综合精品 97成人精品视频在线播放 精品久久久久久中文字幕 亚洲欧美一区二区三区孕妇 亚洲欧美成人网 日韩高清在线二区 国产尤物在线观看 在线不卡一区二区 91网站在线看 韩国精品福利一区二区 欧美日韩国产成人精品 99热精品久久 国产精品免费视频一区 高清视频一区 精品九九久久 欧美日韩在线观看免费 91欧美激情一区二区三区成人 99福利视频 亚洲国产精品91 久热国产在线 精品久久久久久中文字幕女 国产精品久久久久久久久99热 成人自拍视频网 国产精品视频久久久久久 久久影院国产 国产玖玖在线观看 99精品在线免费 亚洲欧美一区二区三区导航 久久久久久久综合 国产欧美日韩精品高清二区综合区 国产精品视频自拍 亚洲一级片免费 久久久久久九九 国产欧美自拍视频 视频一区二区在线观看 欧美日韩一区二区三区久久 中文在线亚洲 伊人热人久久中文字幕 日韩欧美亚洲国产一区二区三区 欧美亚洲国产成人高清在线 欧美日韩国产码高清综合人成 国产性大片免费播放网站 亚洲午夜综合网 91精品久久一区二区三区 国产无套在线播放 国产精品视频网站 国产成人亚洲精品老王 91在线网站 国产视频97 欧美黑人欧美精品刺激 国产一区二区三区免费在线视频 久久久国产精品免费看 99re6久精品国产首页 久久精品91 国产成人一级 国产成人精品曰本亚洲 日本福利在线观看 伊人成综合网 久久综合一本 国产综合久久久久久 久久精品成人免费看 久久福利 91精品国产91久久久久久麻豆 亚洲精品成人在线 亚洲伊人久久精品 欧美日本二区 国产永久视频 国产一区二 一区二区福利 国产一毛片 亚洲精品1区 毛片一区二区三区 伊人久久大香线蕉综合影 国产欧美在线观看一区 亚洲国产欧洲综合997久久 国产一区二区免费视频 国产91精品对白露脸全集观看 久久亚洲国产伦理 欧美成人伊人久久综合网 亚洲性久久久影院 久久99国产精一区二区三区! 91精品国产欧美一区二区 欧美日韩亚洲区久久综合 日韩精品一二三区 久久久夜色精品国产噜噜 国产在线精品福利91香蕉 久久久久久久亚洲精品 97se色综合一区二区二区 91国语精品自产拍在线观看性色 91久久国产综合精品女同我 日韩中文字幕a 国产成人亚洲日本精品 久久国产精品-国产精品 久久国产经典视频 久久国产精品伦理 亚洲第一页在线视频 国产精品久久久久三级 日韩毛片网 久久免费高清视频 麻豆国产在线观看一区二区 91麻豆国产福利在线观看 国产成人精品男人的天堂538 一区二区三区中文字幕 免费在线视频一区 欧美日韩国产成人精品 国产综合网站 国产资源免费观看 亚洲精品亚洲人成在线播放 精品久久久久久中文字幕专区 亚洲人成人毛片无遮挡 国产一起色一起爱 国产香蕉精品视频在 九九热免费观看 日韩亚洲欧美一区 九九热精品在线观看 精品久久久久久中文字幕专区 亚洲欧美自拍偷拍 国产精品每日更新 久久久久国产一级毛片高清板 久久天天躁狠狠躁夜夜中文字幕 久久精品片 日韩在线毛片 国产成人精品本亚洲 国产成人精品一区二区三区 九九热在线观看 国产r级在线观看 国产欧美日韩精品高清二区综合区 韩国电影一区二区 国产精品毛片va一区二区三区 五月婷婷伊人网 久久一区二区三区免费 一本色道久久综合狠狠躁篇 亚洲综合色站 国产尤物在线观看 亚洲一区亚洲二区 免费在线视频一区 欧洲精品视频在线观看 日韩中文字幕a 中文字幕日本在线mv视频精品 91精品在线免费视频 精品国产免费人成在线观看 精品a级片 中文字幕日本在线mv视频精品 日韩在线精品视频 婷婷丁香色 91精品国产高清久久久久 国产成人精品日本亚洲直接 五月综合视频 欧美日韩在线亚洲国产人 精液呈暗黄色 亚洲乱码一区 久久精品中文字幕不卡一二区 亚洲天堂精品在线 激情婷婷综合 国产免费久久精品久久久 国产精品亚洲二区在线 久久免费播放视频 五月婷婷丁香综合 在线亚洲欧美日韩 久久免费精品高清麻豆 精品久久久久久中文字幕 亚洲一区网站 国产精品福利社 日韩中文字幕免费 亚洲综合丝袜 91精品在线播放 国产精品18 亚洲日日夜夜 伊人久久大香线蕉综合影 亚洲精品中文字幕乱码影院 亚洲一区二区黄色 亚洲第一页在线视频 一区二区在线观看视频 国产成人福利精品视频 亚洲高清二区 国内成人免费视频 精品亚洲性xxx久久久 国产精品合集一区二区三区 97av免费视频 国产一起色一起爱 国产区久久 国产资源免费观看 99精品视频免费 国产成人一级 国产精品九九免费视频 欧美91精品久久久久网免费 99热国产免费 久久精品色 98精品国产综合久久 久久精品播放 中文字幕视频免费 国产欧美日韩一区二区三区在线 精品久久蜜桃 国产小视频精品 一本色道久久综合狠狠躁篇 91在线免费观看 亚洲精品区 伊人成综合网 伊人热人久久中文字幕 伊人黄色片 99国产精品热久久久久久夜夜嗨 久久免费精品视频 亚洲一区二区三区高清不卡 久久久久国产一级毛片高清板 国产片一区二区三区 久久狠狠干 99久久婷婷国产综合精品电影 国产99区 国产精品成人久久久久 久久狠狠干 青青国产在线观看 亚洲高清国产拍精品影院 国产精品一区二区av 九九热在线免费视频 伊人久久国产 国产精品久久久久久久久久一区 在线观看免费视频一区 国产精品自在在线午夜区app 国产精品综合色区在线观看 国产毛片久久久久久国产毛片 97国产免费全部免费观看 国产精品每日更新 国产尤物视频在线 九九视频这里只有精品99 一本一道久久a久久精品综合 久久综合给会久久狠狠狠 国产成人精品男人的天堂538 欧美一区二区高清 毛片一区二区三区 国产欧美日韩在线观看一区二区三区 在线国产二区 欧美不卡网 91在线精品中文字幕 在线国产福利 国内精品91久久久久 91亚洲福利 日韩欧美国产中文字幕 91久久精品国产性色也91久久 亚洲性久久久影院 欧美精品1区 国产热re99久久6国产精品 九九热免费观看 国产精品欧美日韩 久久久久国产一级毛片高清板 久久国产经典视频 日韩欧美亚洲国产一区二区三区 欧美亚洲综合另类在线观看 国产精品自在在线午夜区app 97中文字幕在线观看 视频一二三区 精品国产一区在线观看 国产欧美日韩在线一区二区不卡 欧美一区二三区 伊人成人在线观看 国内精品91久久久久 97在线亚洲 国产在线不卡一区 久久久全免费全集一级全黄片 国产精品v欧美精品∨日韩 亚洲毛片网站 在线不卡一区二区 99re热在线视频 久久激情网 国产毛片一区二区三区精品 久久亚洲综合色 中文字幕视频免费 国产视频亚洲 婷婷伊人久久 国产一区二区免费播放 久久99国产精品成人欧美 99国产在线视频 国产成人免费视频精品一区二区 国产不卡一区二区三区免费视 国产码欧美日韩高清综合一区 久久精品国产主播一区二区 国产一区电影 久久精品国产夜色 国产精品国产三级国产 日韩一区二区三区在线 久久97久久97精品免视看 久久国产免费一区二区三区 伊人久久大香线蕉综合电影网 99re6久精品国产首页 久久激情网 亚洲成人高清在线 国产精品网址 国产成人精品男人的天堂538 香蕉国产综合久久猫咪 国产专区中文字幕 91麻豆精品国产高清在线 久久国产经典视频 国产精品成人va在线观看 国产精品爱啪在线线免费观看 日本精品久久久久久久久免费 亚洲综合一区二区三区 久久五月网 精品国产网红福利在线观看 久久综合亚洲伊人色 亚洲国产精品久久久久久网站 在线日韩国产 99国产精品热久久久久久夜夜嗨 国产综合精品在线 国产区福利 精品亚洲综合久久中文字幕 国产制服丝袜在线 毛片在线播放网站 在线观看免费视频一区 国产精品久久久精品三级 亚洲国产电影在线观看 最新日韩欧美不卡一二三区 狠狠综合久久综合鬼色 日本精品1在线区 国产日韩一区二区三区在线播放 欧美日韩精品在线播放 亚洲欧美日韩国产一区二区三区精品 久久综合久久网 婷婷六月激情在线综合激情 亚洲乱码一区 国产专区91 97av视频在线观看 精品久久久久久中文字幕 久久五月视频 国产成人福利精品视频 国产精品网址 中文字幕视频在线 精品一区二区三区免费视频 伊人手机在线视频 亚洲精品中文字幕乱码 国产在线视频www色 色噜噜国产精品视频一区二区 精品亚洲成a人在线观看 国产香蕉尹人综合在线 成人免费一区二区三区在线观看 国产不卡一区二区三区免费视 欧美精品久久天天躁 国产专区中文字幕 久久精品国产免费中文 久久精品国产免费一区 久久无码精品一区二区三区 国产欧美另类久久久精品免费 欧美精品久久天天躁 亚洲精品在线视频 国产视频91在线 91精品福利一区二区三区野战 日韩中文字幕免费 国产精品99一区二区三区 欧美成人高清性色生活 国产精品系列在线观看 亚洲国产福利精品一区二区 国产成人在线小视频 国产精品久久久久免费 99re热在线视频 久久久久久久综合 一区二区国产在线播放 成人国产在线视频 亚洲精品乱码久久久久 欧美日韩一区二区综合 精品久久久久免费极品大片 中文字幕视频二区 激情粉嫩精品国产尤物 国产成人精品一区二区视频 久久精品中文字幕首页 亚洲高清在线 国产精品亚洲一区二区三区 伊人久久艹 中文在线亚洲 国产精品一区二区在线播放 国产精品九九免费视频 亚洲二区在线播放 亚洲狠狠婷婷综合久久久久网站 亚洲欧美日韩网站 日韩成人精品 亚洲国产一区二区三区青草影视 91精品国产福利在线观看 国产精品久久久久久久久99热 国产一区二区精品尤物 久碰香蕉精品视频在线观看 亚洲日日夜夜 在线不卡一区二区 国产午夜亚洲精品 九九热在线视频观看这里只有精品 伊人手机在线视频 91免费国产精品 日韩欧美中字 91精品国产91久久久久 国产全黄三级播放 视频一区二区三区免费观看 国产开裆丝袜高跟在线观看 国产成人欧美 激情综合丝袜美女一区二区 国产成人亚洲综合无 欧美精品一区二区三区免费观看 欧美亚洲国产日韩 日韩亚州 国产欧美日韩精品高清二区综合区 亚洲午夜国产片在线观看 精品久久久久久中文字幕 欧美精品1区 久久伊人久久亚洲综合 亚洲欧美日韩精品 国产成人精品久久亚洲高清不卡 久久福利影视 国产精品99精品久久免费 久久久久免费精品视频 国产日产亚洲精品 亚洲国产午夜电影在线入口 精品无码一区在线观看 午夜国产精品视频 亚洲一级片免费 伊人久久大香线蕉综合影 国产精品久久影院 久碰香蕉精品视频在线观看 www.欧美精品 在线小视频国产 亚洲国产天堂久久综合图区 欧美一区二区三区不卡 日韩美女福利视频 九九精品免视频国产成人 不卡国产00高中生在线视频 亚洲第一页在线视频 欧美日韩在线播放成人 99re视频这里只有精品 国产精品91在线 精品乱码一区二区三区在线 国产区久久 91麻豆精品国产自产在线观看一区 日韩精品成人在线 九九热在线观看 国产精品久久不卡日韩美女 欧美一区二区三区综合色视频 欧美精品免费一区欧美久久优播 国产精品网址 国产专区中文字幕 国产精品欧美亚洲韩国日本久久 日韩美香港a一级毛片 久久精品123 欧美一区二区三区免费看 99r在线视频 亚洲精品国产字幕久久vr 国产综合激情在线亚洲第一页 91免费国产精品 日韩免费小视频 亚洲国产精品综合一区在线 国产亚洲第一伦理第一区 在线亚洲精品 国产精品一区二区制服丝袜 国产在线成人精品 九九精品免视频国产成人 亚洲国产网 欧美日韩亚洲一区二区三区在线观看 在线亚洲精品 欧美一区二区三区高清视频 国产成人精品男人的天堂538 欧美日韩在线观看区一二 亚洲欧美一区二区久久 久久精品中文字幕首页 日本高清www午夜视频 久久精品国产免费 久久999精品 亚洲国产精品欧美综合 88国产精品视频一区二区三区 91久久偷偷做嫩草影院免费看 国产精品夜色视频一区二区 欧美日韩导航 国产成人啪精品午夜在线播放 一区二区视频在线免费观看 99久久精品国产自免费 精液呈暗黄色 久久99国产精品 日本精品久久久久久久久免费 精品国产97在线观看 99re视频这里只有精品 国产视频91在线 999av视频 亚洲美女视频一区二区三区 久久97久久97精品免视看 亚洲国产成人久久三区 99久久亚洲国产高清观看 日韩毛片在线视频 综合激情在线 91福利一区二区在线观看 一区二区视频在线免费观看 激情粉嫩精品国产尤物 国产成人精品曰本亚洲78 国产成人精品本亚洲 国产精品成人免费视频 国产成人啪精品视频免费软件 久久精品国产亚洲妲己影院 国产精品成人久久久久久久 久久大香线蕉综合爱 欧美一区二区三区高清视频 99热国产免费 在线观看欧美国产 91精品视频在线播放 国产精品福利社 欧美精品一区二区三区免费观看 国产一区二区免费视频 国产午夜精品一区二区 精品视频在线观看97 91精品福利久久久 国产一区福利 国产综合激情在线亚洲第一页 国产精品久久久久久久久久久不卡 九色国产 在线日韩国产 黄网在线观看 亚洲一区小说区中文字幕 中文字幕丝袜 日本二区在线观看 日本国产一区在线观看 欧美日韩一区二区三区久久 欧美精品亚洲精品日韩专 国产日产亚洲精品 久久综合九色综合欧美播 亚洲国产欧美无圣光一区 欧美视频区 亚洲乱码视频在线观看 久久无码精品一区二区三区 九九热精品免费视频 久久99精品久久久久久牛牛影视 国产精品成久久久久三级 国产一区福利 午夜国产精品视频 日本二区在线观看 99久久网站 国产亚洲天堂 精品国产一区二区三区不卡 亚洲国产日韩在线一区 国产成人综合在线观看网站 久久免费高清视频 欧美在线导航 午夜精品久久久久久99热7777 欧美久久综合网 国产小视频精品 国产尤物在线观看 亚洲国产精品综合一区在线 欧美一区二区三区不卡视频 欧美黑人欧美精品刺激 日本福利在线观看 久久国产偷 国产手机精品一区二区 国产热re99久久6国产精品 国产高清啪啪 欧美亚洲国产成人高清在线 国产在线第三页 亚洲综合一区二区三区 99r在线视频 99精品久久久久久久婷婷 国产精品乱码免费一区二区 国产在线精品福利91香蕉 国产尤物视频在线 五月婷婷亚洲 中文字幕久久综合伊人 亚洲精品一级毛片 99国产精品电影 在线视频第一页 久久99国产精品成人欧美 国产白白视频在线观看2 成人精品一区二区www 亚洲成人网在线观看 麻豆91在线视频 色综合合久久天天综合绕视看 久久精品国产免费高清 国产不卡一区二区三区免费视 欧美国产中文 99精品欧美 九九在线精品 国产中文字幕在线免费观看 国产一区中文字幕在线观看 国产成人一级 国产精品一区二区制服丝袜 国产一起色一起爱 亚洲精品成人在线 亚洲欧美精品在线 国产欧美自拍视频 99精品久久久久久久婷婷 久99视频 国产热re99久久6国产精品 视频一区亚洲 国产精品视频分类 国产精品成在线观看 99re6久精品国产首页 亚洲在成人网在线看 亚洲国产日韩在线一区 久久国产三级 日韩国产欧美 欧美在线一区二区三区 国产精品美女一级在线观看 成人午夜免费福利视频 亚洲天堂精品在线 91精品国产手机 欧美日韩视频在线播放 狠狠综合久久综合鬼色 九一色视频 青青视频国产 亚洲欧美自拍一区 中文字幕天天躁日日躁狠狠躁97 日韩免费大片 996热视频 伊人成综合网 亚洲天堂欧美 日韩精品亚洲人成在线观看 久久综合给会久久狠狠狠 日韩精品亚洲人成在线观看 日韩国产欧美 亚洲成aⅴ人片在线影院八 亚洲精品1区 99久久精品免费 国产精品高清在线观看 国产精品久久久免费视频 在线亚洲欧美日韩 91在线看视频 国产精品96久久久久久久 欧美日韩国产成人精品 91在线亚洲 热久久亚洲 国产精品美女免费视频观看 日韩在线毛片 亚洲永久免费视频 九九免费在线视频 亚洲一区网站 日本高清二区视频久二区 精品国产美女福利在线 伊人久久艹 国产精品久久久久三级 欧美成人精品第一区二区三区 99久久精品国产自免费 在线观看日韩一区 国产中文字幕一区 成人免费午夜视频 欧美日韩另类在线 久久99国产精品成人欧美 色婷婷中文网 久久天天躁夜夜躁狠狠躁2020 欧美成人伊人久久综合网 国产精品福利资源在线 国产伦精品一区二区三区高清 国产精品亚洲综合色区韩国 亚洲一区欧美日韩 色综合视频 国语自产精品视频在线区 国产高清a 成人国内精品久久久久影 国产在线精品香蕉综合网一区 国产不卡在线看 国产成人精品精品欧美 国产欧美日韩综合精品一区二区三区 韩国电影一区二区 国产在线视频www色 91中文字幕在线一区 国产人成午夜免视频网站 亚洲综合一区二区三区 色综合视频一区二区观看 久久五月网 九九热精品在线观看 国产一区二区三区国产精品 99久热re在线精品996热视频 亚洲国产网 在线视频亚洲一区 日韩字幕一中文在线综合 国产高清一级毛片在线不卡 精品国产色在线 国产高清视频一区二区 精品日本久久久久久久久久 亚洲国产午夜精品乱码 成人免费国产gav视频在线 日韩欧美一区二区在线观看 欧美曰批人成在线观看 韩国电影一区二区 99re这里只有精品6 日韩精品一区二区三区视频 99re6久精品国产首页 亚洲欧美一区二区三区导航 欧美色图一区二区三区 午夜精品视频在线观看 欧美激情在线观看一区二区三区 亚洲热在线 成人国产精品一区二区网站 亚洲一级毛片在线播放 亚洲一区小说区中文字幕 亚洲午夜久久久久影院 国产自产v一区二区三区c 国产精品视频免费 久久调教视频 国产成人91激情在线播放 国产精品欧美亚洲韩国日本久久 久久亚洲日本不卡一区二区 91中文字幕网 成人国产在线视频 国产视频91在线 欧美成人精品第一区二区三区 国产精品福利在线 久久综合九色综合精品 欧美一区二区三区精品 久久国产综合尤物免费观看 久久99青青久久99久久 日韩精品免费 久久国产精品999 91亚洲视频在线观看 国产精品igao视频 色综合区 在线亚洲欧国产精品专区 国产一区二区三区在线观看视频 亚洲精品成人在线 一区二区国产在线播放 中文在线亚洲 亚洲精品第一国产综合野 国产一区二区精品久久 一区二区三区四区精品视频 99热精品久久 中文字幕视频二区 国产成人精品男人的天堂538 99精品影视 美女福利视频一区二区 久久午夜夜伦伦鲁鲁片 综合久久久久久久综合网 国产精品国产欧美综合一区 国产99视频在线观看 国产亚洲女在线精品 婷婷影院在线综合免费视频 国产亚洲3p一区二区三区 91成人爽a毛片一区二区 亚洲一区二区高清 国产欧美亚洲精品第二区首页 欧美日韩导航 亚洲高清二区 欧美激情观看一区二区久久 日韩毛片在线播放 亚洲欧美日韩高清中文在线 亚洲日本在线播放 国产精品一区二区制服丝袜 精品国产一区二区三区不卡 国产不卡在线看 国产欧美网站 四虎永久在线观看视频精品 国产黄色片在线观看 夜夜综合 一本色道久久综合狠狠躁篇 欧美亚洲综合另类在线观看 国产91在线看 伊人久久国产 欧美一区二区在线观看免费网站 国产精品久久久久三级 久久福利 日韩中文字幕a 亚洲午夜久久久久影院 91在线高清视频 国产亚洲一区二区三区啪 久久人精品 国产精品亚洲午夜一区二区三区 综合久久久久久 久久伊人一区二区三区四区 国产综合久久久久久 日韩一区精品视频在线看 国产精品日韩欧美制服 日本精品1在线区 99re视频 无码av免费一区二区三区试看 国产视频1区 日韩欧美中文字幕一区 日本高清中文字幕一区二区三区a 亚洲国产欧美无圣光一区 国产在线视频一区二区三区 欧美国产第一页 在线亚洲欧美日韩 日韩中文字幕第一页 在线不卡一区二区 伊人久久青青 国产精品一区二区在线播放 www.五月婷婷 麻豆久久婷婷国产综合五月 亚洲精品区 久久国产欧美另类久久久 99在线视频免费 伊人久久中文字幕久久cm 久久精品成人免费看 久久这里只有精品首页 88国产精品视频一区二区三区 中文字幕日本在线mv视频精品 国产在线精品成人一区二区三区 伊人精品线视天天综合 亚洲一区二区黄色 国产尤物视频在线 亚洲精品99久久久久中文字幕 国产一区二区三区免费观看 伊人久久大香线蕉综合电影网 国产成人精品区在线观看 日本精品一区二区三区视频 日韩高清在线二区 久久免费播放视频 一区二区成人国产精品 国产精品免费精品自在线观看 亚洲精品视频二区 麻豆国产精品有码在线观看 精品日本一区二区 亚洲欧洲久久 久久中文字幕综合婷婷 中文字幕视频在线 国产成人精品综合在线观看 91精品国产91久久久久福利 精液呈暗黄色 香蕉国产综合久久猫咪 国产专区精品 亚洲精品无码不卡 国产永久视频 亚洲成a人片在线播放观看国产 一区二区国产在线播放 亚洲一区二区黄色 欧美日韩在线观看视频 亚洲精品另类 久久国产综合尤物免费观看 国产一区二区三区国产精品 高清视频一区 国产精品igao视频 国产精品资源在线 久久综合精品国产一区二区三区 www.五月婷婷 精品色综合 99热国产免费 麻豆福利影院 亚洲伊人久久大香线蕉苏妲己 久久电影院久久国产 久久精品伊人 在线日韩理论午夜中文电影 亚洲国产欧洲综合997久久 伊人国产精品 久草国产精品 欧美一区精品二区三区 亚洲成人高清在线 91免费国产精品 日韩精品福利在线 国产一线在线观看 国产不卡在线看 久久99青青久久99久久 亚洲精品亚洲人成在线播放 99久久免费看国产精品 国产日本在线观看 青草国产在线视频 麻豆久久婷婷国产综合五月 国产中文字幕一区 91久久精品国产性色也91久久 国产一区a 国产欧美日韩成人 国产亚洲女在线精品 一区二区美女 中文字幕在线2021一区 在线小视频国产 久久这里只有精品首页 国产在线第三页 欧美日韩中文字幕 在线亚洲+欧美+日本专区 精品国产一区二区三区不卡 久久这里精品 欧美在线va在线播放 精液呈暗黄色 91精品国产手机 91在线免费播放 欧美视频亚洲色图 欧美国产日韩精品 日韩高清不卡在线 精品视频免费观看 欧美日韩一区二区三区四区 国产欧美亚洲精品第二区首页 亚洲韩精品欧美一区二区三区 国产精品视频免费 在线精品小视频 久久午夜夜伦伦鲁鲁片 国产无套在线播放 久热这里只精品99re8久 欧美久久久久 久久香蕉国产线看观看精品蕉 国产成人精品男人的天堂538 亚洲人成网站色7799在线观看 日韩在线第二页 一本色道久久综合狠狠躁篇 国产一区二区三区不卡在线观看 亚洲乱码在线 在线观看欧美国产 久久福利青草精品资源站免费 国产玖玖在线观看 在线亚洲精品 亚洲成aⅴ人在线观看 精品91在线 欧美一区二三区 日韩中文字幕视频在线 日本成人一区二区 日韩免费专区 国内精品在线观看视频 久久国产综合尤物免费观看 国产精品系列在线观看 一本一道久久a久久精品综合 亚洲免费播放 久久精品国产免费 久久人精品 亚洲毛片网站 亚洲成a人一区二区三区 韩国福利一区二区三区高清视频 亚洲精品天堂在线 一区二区三区中文字幕 亚洲国产色婷婷精品综合在线观看 亚洲国产成人久久笫一页 999国产视频 国产精品香港三级在线电影 欧美日韩一区二区三区四区 日韩国产欧美 国产精品99一区二区三区 午夜国产精品理论片久久影院 亚洲精品中文字幕麻豆 亚洲国产高清视频 久久免费手机视频 日韩a在线观看 五月婷婷亚洲 亚洲精品中文字幕麻豆 中文字幕丝袜 www国产精品 亚洲天堂精品在线 亚洲乱码一区 国产日韩欧美三级 久久999精品 伊人热人久久中文字幕 久热国产在线视频 国产欧美日韩在线观看一区二区三区 国产一二三区在线 日韩国产欧美 91精品国产91久久久久 亚洲一区小说区中文字幕 精品一区二区免费视频 国产精品视频免费 国产精品亚洲综合色区韩国 亚洲国产精品成人午夜在线观看 欧美国产日韩精品 中文字幕精品一区二区精品