專利名稱：生產雞白細胞干擾素用預處理劑及生產方法
技術領域：
本發明屬于獸藥生產領域。尤其涉及一種可顯著提高雞白細胞干擾素產量的生產雞白細胞干擾素用預處理劑及生產方法。
背景技術：
干擾素為一類細胞因子,具有抗病毒和免疫調節作用，已廣泛應用于抗病毒治療和提高機體免疫力。人或動物的白細胞在病毒或誘導劑的作用下，可產生干擾素，但所產生干擾素的種類或產量隨不同病毒或誘導劑而發生變化。例如用PHA誘導T淋巴細胞，則主要產生Y干擾素(IFN — Y)，而以短小棒狀桿菌誘導T淋巴細胞，則主要產生α-干擾素。
F系新城疫病毒誘導干擾素的能力較強，所產生的干擾素99%為α-干擾素(IFN — α)，但是其產量并不理想。
發明內容
本發明是為了解決現有技術所存在的上述技術問題，提供一種可顯著提高雞白細胞干擾素產量的生產雞白細胞干擾素用預處理劑及生產方法。本發明的技術解決方案是一種生產雞白細胞干擾素用預處理劑，其特征在于由豬白細胞干擾素、左旋咪唑、有機鍺及去離子水構成，各組分的含量為豬白細胞干擾素10 100IU/ml、左旋咪唑I 2mg/ml及有機鍺I 2mg/ml。一種上述生產雞白細胞干擾素用預處理劑的生產方法，其特征在于按如下步驟進行
a.用5 IOml去離子水溶解100^200mg左旋咪唑，作為A液；
b.用5 IOml去離子水溶解100^200 mg有機鍺，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細胞干擾素300(T30000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過濾，即為生產白細胞干擾素用預處理劑。本發明對白細胞進行預處理，可顯著增加干擾素產量，較單獨使用新城疫病毒誘導干擾素的產量增加10 100倍，-20°c冷凍保存，可保存12個月。
具體實施例方式實施例I :
按如下步驟進行
a.用5ml去離子水溶解IOOmg左旋咪唑，作為A液；
b.用5ml去離子水溶解IOOmg有機鍺(Ge-123)(羧乙基鍺倍半氧化物)，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細胞干擾素3000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過濾，即為生產白細胞干擾素用預處理劑，各組分的含量為豬白細胞干擾素10IU/ml、左旋咪唑lmg/ml及有機鍺lmg/ml，_20°C冷凍保存。所用原料來源如下
左旋咪唑購自山東濟南百納獸藥有限公司；
有機鍺(Ge-123)(羧乙基鍺倍半氧化物)購自阿拉丁試劑(上海)有限公司；
凍干豬白細胞干擾素購自四川世紅生物技術有限公司。實驗
先取Iml本發明實施例1，加入100mlRPMI-1640完全培養基中(含IO6 IO7雞白細胞中/ml)，37°C搖動培養12小時；再按100 200血凝單位/ml加入F系新城疫病毒，繼續培養24小時；收獲培養液，4000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清，即為雞白細胞干擾素粗 制液。用細胞病變抑制方法檢測，其中含有IO4a-干擾素(IFN — α)，比單獨使用新城疫病毒誘導干擾素的產量增加10倍。實施例2
按如下步驟進行
a.用8ml去離子水溶解150mg左旋咪唑，作為A液；
b.用8ml去離子水溶解150mg有機鍺，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細胞干擾素12000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過濾，即為生產白細胞干擾素用預處理劑，各組分的含量為豬白細胞干擾素40U/ml、左旋咪唑I. 5mg/ml及有機鍺I. 5mg/ml，_20°C冷凍保存。
原料來源同實施例I。實驗
先取Iml本發明實施例2，加入100mlRPMI-1640完全培養基中(含IO6 IO7雞白細胞中/ml)，37°C搖動培養12小時；再按100 200血凝單位/ml加入F系新城疫病毒，繼續培養24小時；收獲培養液，4000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清，即為雞白細胞干擾素粗制液。用細胞病變抑制方法檢測，其中含有8*104α-干擾素(IFN — α )，比單獨使用新城疫病毒誘導干擾素的產量增加80倍。實施例3:
按如下步驟進行
a.用IOml去離子水溶解200mg左旋咪唑，作為A液；
b.用IOml去離子水溶解200mg有機鍺，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細胞干擾素30000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過濾，即為生產白細胞干擾素用預處理劑，各組分的含量為豬白細胞干擾素100U/ml、左旋咪唑2mg/ml及有機鍺2mg/ml，_20°C冷凍保存。原料來源同實施例I。實驗
先取Iml本發明實施例3，加入100mlRPMI-1640完全培養基中(含IO6 IO7雞白細胞中/ml)，37°C搖動培養12小時；再按100 200血凝單位/ml加入F系新城疫病毒，繼續培養24小時；收獲培養液，4000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清，即為雞白細胞干擾素粗制液。用細胞病變抑制方法檢測，其中含有IO5a-干擾素(IFN — α)，比單獨使用新城疫 病毒誘導干擾素的產量增加100倍。
權利要求
1.一種生產雞白細胞干擾素用預處理劑，其特征在于由豬白細胞干擾素、左旋咪唑、有機鍺及去離子水構成，各組分的含量為豬白細胞干擾素10 100IU/ml、左旋咪唑I 2mg/ml及有機鍺I 2mg/ml。
2.一種如權利要求I所述生產雞白細胞干擾素用預處理劑的生產方法，其特征在于按如下步驟進行 a.用5 IOml去離子水溶解100^200mg左旋咪唑，作為A液； b.用5 IOml去離子水溶解100^200 mg有機鍺，作為B液； c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細胞干擾素300(T30000IU，作為C液； d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液； e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過濾，即為生產白細胞干擾素用預處理劑。
全文摘要
本發明公開一種生產雞白細胞干擾素用預處理劑，各組分的含量為豬白細胞干擾素10～100IU/ml、左旋咪唑1～2mg/ml及有機鍺1～2mg/ml，生產方法是按如下步驟進行用5～10ml去離子水溶解100~200mg左旋咪唑，作為A液；用5～10ml去離子水溶解100~200mg有機鍺，作為B液；用3ml去離子水溶解凍干豬白細胞干擾素3000~30000IU，作為C液；將A液與B液混合，加入1mlC液，作為D液；將D液定容至100ml，用除菌濾器過濾。本發明對白細胞進行預處理，可顯著增加干擾素產量，較單獨使用新城疫病毒誘導干擾素的產量增加10～100倍，-20℃冷凍保存，可保存12個月。
文檔編號C07K14/555GK102838670SQ201210360228
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月25日 優先權日2012年9月25日
發明者江國托, 常維山 申請人:大連三儀動物藥品有限公司