專利名稱：提高甜菊糖總甙的新方法
技術領域：
本發明屬于生物工程和新型甜味劑領域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。
背景技術：
甜菊糖是從菊科草本植物甜葉菊中精提的新型天然甜味劑。它具有高甜度、低熱能的特點，其甜度是蔗糖的200— 350倍，熱值僅為蔗糖的I / 300。是繼甘蔗、甜菜之外第三種最具有開價值和健康推崇的天然蔗糖替代品，被譽為“世界第三糖源”。甜菊糖在一般著色性，安全無毒，被廣泛應用于食品、釀酒、醫藥、日用化工等行業。甜菊糖的九種甜味成分中，甜菊甙、萊鮑迪甙A(RA)和萊鮑迪甙C(RC)的相對含量較高，共占90%以上，是決定甜菊糖味質的主要成分。RA甜度最高，相當于蔗糖的450倍，甜 味特性也與蔗糖相接近；甜菊甙甜味相當于蔗糖的300倍，具有一定的苦味和不愉快的后味，影響了甜菊糖的味質，限制了其更為廣泛的應用。現在中國市場上的甜菊糖產品有相當一部分產品的總甙含量較低，不能滿足客戶的需求，需要再次精制以提高產品總甙。本發明提供一種簡單易行的方法能將總甙含量較低的產品總甙提高到95%以上。
發明內容
本發明解決的技術問題是提供一種提高甜菊糖總甙的方法。本發明提供ー種利用下述エ藝提高甜菊糖總甙含量的方法。エ藝流程為將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持4-10小時進行結晶；結晶過程中進行攪拌，攪拌轉速為50_100rpm ;上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；結晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；所述甜菊糖原料的質量與溶劑的質量體積比為1:2-15 ；上述甜菊糖原料總甙含量不得低于80%。所述有機溶劑為甲醇、異丙醇中的一種或其混合；有機溶劑優選甲醇和異丙醇的混合溶劑；所述甲醇純度為95-100%，異丙醇純度為100% ；甲醇與異丙醇的比例為1:3-8 ;甲醇與異丙醇的比例優選1:4-7 ；所述結晶溫度優選30_35°C，結晶時間優選6-8小時；所述結晶過程中攪拌轉速優選60_80rpm ；所述離心機轉速為1500-3000rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_70°C。有益效果
本發明可將甜菊糖原料的總甙由80%提高至95%以上；本發明產品的收率較高，一般在40%_70%之間。
具體實施例方式下面通過具體的實施方案敘述本發明方法。另外，實施方案應理解為說明性的，而非限制本發明的范圍，本發明的實質和范圍僅由權利要求書所限定。對于本領域技術人員而言，在不背離本發明實質和范圍的前提下，對這些實施方案中的結晶條件進行的各種改變或改動也屬于本發明的保護范圍。本發明提高甜菊糖總甙含量的エ藝如下 將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持4-10小時進行結晶；結晶過程中進行攪拌，攪拌轉速為50_100rpm ;上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；結晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；所述甜菊糖原料的質量與溶劑的質量體積比為1:2-15 ；上述甜菊糖原料總式含量不得低于80%。所述有機溶劑為甲醇、異丙醇中的一種或其混合；有機溶劑優選甲醇和異丙醇的混合溶劑；所述甲醇純度為95-100%，異丙醇純度為100% ；甲醇與異丙醇的比例為1:3-8 ;甲醇與異丙醇的比例優選1:4-7;所述結晶溫度優選30_35°C，結晶時間優選6-8小時；所述結晶過程中攪拌轉速為50_100rpm ；所述離心機轉速為1500_3000rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_70°C。甜菊糖總甙的測定法法如下HPLC定量測定方法(JECFA 2010會議標準)檢測步驟按照以下液相色譜條件檢測每種糖甙的含量。試劑こ腈，在210nm下檢測透光度>95%.標準品規格甜菊甙標準品干重純度>99% 萊鮑迪式A標準品干重純度>99%含有9種甜菊糖甙的基準溶液鮑含甜菊甙、萊鮑迪甙A、萊鮑迪甙B、萊鮑迪甙C、萊鮑迪甙D、萊鮑迪甙F、杜爾克甙A、懸鉤子甙和甜菊雙糖甙。用7:3的水こ腈溶液將含有9種甜菊糖甙的標準溶液進行稀釋，以便用來確定各個糖甙的出峰時間。標準品可在日本Wako公司和美國ChromaDex公司買到。標準品溶液的配制精確稱取50毫克甜菊甙標準品和50毫克萊鮑迪甙A標準品，分別放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水こ腈溶液進行溶解至50毫升刻度。樣品溶液的配制精確稱取50 — 100毫克甜菊甙樣品，放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水こ腈溶液進行溶解至50毫升刻度。檢測步驟
在以下條件下注入5 μ I的樣品溶液。色譜柱Shiseido公司的 Capcell pak C18 MG II 型色譜柱或者 Phenomenex 公司的Luna 5 μ C18⑵IOOA型色譜柱或者相當規格的色譜柱(長度250毫米；內徑4. 6毫米，填料粒度5μπι)。；流動相比例為32:68的こ腈和磷酸鈉緩沖液(規格10mmol/L，pH值2. 6)的混合液。磷酸鈉緩沖液的配置方法將2. 76克磷酸ニ氫鈉溶解到2升水中，加入磷酸將pH值調整到2. 6流速I毫升/毎分鐘。
檢測器210nm紫外檢測。色譜柱溫度40°C記錄大約30分鐘的檢測圖譜。峰值識別和計算將樣品溶液的出峰與含有9種甜菊糖甙的基準溶液的出峰時間(見附后圖譜)相對比，確定樣品溶液中各個出峰對應的糖甙。算出樣品溶液中9種糖甙對應的峰面積，算出甜菊甙標準品溶液和萊鮑迪甙A標準品溶液的峰面積。按照以下公式，計算樣品中萊鮑迪甙A之外的8種糖甙中每ー種糖甙的百分比%X= [ffs/ff] X [fxAx/As] x 100按照以下公式，計算樣品中萊鮑迪甙A的百分比% 萊鮑迪式 A= [WR/ff] X [Ax/AR] X 100公式中X代表每種糖甙Ws是甜菊甙標準品溶液中甜菊甙的干重(mg)WR是萊鮑迪甙A標準品溶液中萊鮑迪甙A的干重(mg)W是樣品溶液中樣品的干重(mg)As是甜菊甙標準品溶液的峰面積AR是萊鮑迪甙A標準品溶液的峰面積Ax是樣品溶液每種糖甙的峰面積fx是每種糖甙的分子量與甜菊甙分子量的比值1. 00(甜菊甙)，I. 20 (萊鮑迪甙A), 1.00(萊鮑迪甙B)，I. 18 (萊鮑迪甙C)，1.40(萊鮑迪甙D)，I. 16(萊鮑迪甙F)，0. 98 (杜爾克甙A) ,0.80(懸鉤子甙),0.80(甜菊雙糖甙)。計算甜菊糖甙總量的百分比(將9種糖甙的百分比相加)實施例I取甜菊糖原料100g，加入200ml溶剤，甲醇純度為98%，異丙醇純度為100%，甲醇異丙醇=1: 3，充分溶解后置于三ロ燒瓶中，水浴控制溫度30攝氏度，攪拌速度為90rpm，養晶時間為10小吋，將結晶混合液用布氏漏斗進行抽濾，所得晶體50°C過夜烘干，得干樣42. 3g。液相測定結果為
權利要求
1.一種提高甜菊糖總甙的方法，步驟如下 將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持4-10小時進行結晶，結晶過程中進行攪拌，攪拌轉速為50-100rpm ;上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖，所述有機溶劑為甲醇、異丙醇中的一種或其混合。
2.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述結晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離。
3.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甜菊糖原料的質量與溶劑的質量體積比為1:2-15。
4.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甜菊糖原料總甙含量不得低于80%。
5.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述有機溶劑為甲醇和異丙醇的混合溶剤。
6.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甲醇純度為95-100%，異丙醇純度為100%。
7.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甲醇與異丙醇的比例為 1:3-8。
8.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甲醇與異丙醇的比例為 1:4-7。
9.根據權利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述精制樣品的烘干溫度為 50-70 °C。
全文摘要
本發明公開了一種提高甜菊糖總甙的新方法，本發明屬于生物工程和新型甜味劑領域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。工藝流程為將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，保持溫度為25-45℃，保持4-10小時進行結晶；結晶過程中進行攪拌，攪拌轉速為50-100rpm；上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；本發明可將甜菊糖原料的總甙由80%提高至95%以上；本發明產品的收率較高，一般在40%-70%之間。
文檔編號C07H15/256GK102690306SQ20121018583
公開日2012年9月26日 申請日期2012年6月6日 優先權日2012年6月6日
發明者喬長晟, 李利寧, 樓鵬, 王彥飛, 鐘海蛟 申請人:天津北洋百川生物技術有限公司