專利名稱：牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥領域，特別是指一種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法。
背景技術：
牛磺熊去氧膽酸(tauroursodeoxycholicacid)是熊膽汁的主要有效成分，也是人工合成熊膽的主要成分，廣泛存在于人和多種動物膽汁中的一種結合型膽汁酸，有著多種生理藥理作用，該藥及其制劑在國外已有二十年的上市臨床經驗，主要用于固醇性膽囊結石、膽汁郁積性肝病(如原發性膽汁性肝硬化)、膽汁反流性胃炎、自身免疫性肝炎(AIH)、原發性膽汁性肝硬化(PBC)、原發性硬化性膽管炎(PSC)、慢性肝 炎(こ肝、丙肝等)、酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝、藥物性肝損害、肝移植術前后預防及治療并發癥等。該藥于1992年由Bruschettini S. R. L意大利貝斯迪大藥廠首次注冊上市，2007年獲準在中國銷售，目前在我國還沒有人進行仿制藥新藥注冊。近年來人們對動物保護的關注，使天然熊膽備受熱議，人工熊膽的開發是大勢所趨，其主要成分牛磺熊去氧膽酸的合成エ藝研究也成熱門課題。國內外報道的文獻主要有四種化學半合成方法I、以熊去氧膽酸為原料，先與氯甲酸こ酯形成混酐，再與牛磺酸鈉反應合成牛磺熊去氧膽酸，最后用離子交換的方法合成牛磺熊去氧膽酸ニ水化合物；缺點是離子交換柱裝柱及再生較麻煩。2、熊去氧膽酸和牛磺酸在堿性條件下分別在EEDQ (N-ethoxy-carbonyl-ethoxy-l , 2_dihydro_quinolineノ 或DEPC (diethylphosphorocyanidate)作為縮合劑制備牛磺熊去氧膽酸；所需EEDQ和DEPC,優點是反應條件溫和。但價格昂貴，制備較繁瑣。3、熊去氧膽酸和2,2，- ニ硫ニ苯并噻唑在三こ胺和三苯膦作用下縮合，得熊去氧膽酸-2-苯并噻唑硫酷，再與堿性牛磺酸溶液反應即可得牛磺熊去氧膽酸。價格昂貴、制備復雜。4、直接以禽膽汁為原料，經重鉻酸鈉氧化、金屬鈉還原ニ個過程制得牛磺熊去氧膽酸粗品，進ー步純化后得牛磺熊去氧膽酸。禽膽汁含有多種膽汁酸，成分復雜，經二次強烈氧化還原反應，甘氨型膽汁酸與牛磺酸型膽汁酸很難分離純化，不宣制成高純度牛磺酸結合型単體化學原料藥。
發明內容
本發明提出一種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，解決了現有技術中分離純化困難的技術問題，且該方法簡單，成本低。本發明的技術方案是這樣實現的一種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，包括(I)以熊去氧膽酸為原料，經過こ酰化、酰氯化反應得到混合酸酐溶液；
(2)將牛磺酸溶于碳酸鈉溶液中，得到牛磺酸的碳酸鈉溶液；將所述牛磺酸的碳酸鈉溶液滴加到步驟(I)中的混合酸酐溶液中，攪拌，濾除沉淀得濾液；(3)將步驟(2)中的濾液的pH調整為6 7，濃縮干燥得牛磺熊去氧膽酸粗品干燥物；(4)將步驟(3)中的濃縮干燥物脫鹽純化和重結晶，即得牛磺熊去氧膽酸。作為優選的技術方案，所述步驟(I)中的こ酰化、酰氯化的具體過程如下在反應釜中加入質量比為8 10 I的丙酮和熊去氧膽酸，分散均勻，冷卻 至-5 -10°C，得到冷卻后的混合液；向冷卻后的混合液中滴加用丙酮稀釋后的三こ胺溶液，滴加完畢后再滴加氯甲酸こ酷，繼續在_5 -10°C攪拌，過濾除去三こ胺鹽，過濾后的濾液即為混合酸酐溶液；其中三こ胺與熊去氧膽酸的質量比為2 3 10;三こ胺與用于稀釋的丙酮的體積比為3 2。作為優選的技術方案，所述步驟(3)使用鹽酸調節pH。作為優選的技術方案，所述步驟(3)中的濃縮干燥為，將調節pH后的濾液蒸干，然后在70°C 90°C下減壓抽干。作為優選的技術方案，所述脫鹽純化的具體過程如下，向步驟(3)中的牛磺熊去氧膽酸粗品干燥物中加入無水こ醇，70 90°C回流處理，待鹽松散后過濾，除鹽和未反應的牛磺酸，在濾液攪拌下加入こ酸こ酷-丙酮混合溶液中，劇烈攪拌，產生白色沉淀，室溫下靜置12h 24h，吸取上層液，過濾收集濾餅；其中牛磺熊去氧膽酸粗品干燥物與無水こ醇的質量體積比I : 4 5g/L。作為優選的技術方案，所述重結晶的具體過程如下，將所述濾餅用水溶解，再加入丙酮溶液中攪拌，2°C 5°C冷藏8h 12h，過濾得白色漿狀物，70 90°C真空干燥，粉碎；其中水與丙酮溶液的體積比為I : 5 10。作為優選的技術方案，所述的こ酸こ酷-丙酮為體積比為50 50的こ酸こ酯和
丙酮的混合液。作為優選的技術方案，所述步驟(2)中的碳酸鈉溶液為lmol/L ;所述牛磺酸與碳酸鈉溶液的質量體積比為18 23 100g/mL。本發明與現有技術相比，具有如下有益效果(I)本發明制備方法中的純化工藝采用二次結晶法，而不是柱層析法，不僅避免了裝柱及活化處理的麻煩，而且采用的結晶廢液(如丙酮、こ酸こ酯等)，在生產完畢后，可以用精餾塔回收套用，進行再利用，大大降低生產成本；(2)本發明制備方法將牛磺熊去氧膽酸縮合反應真空抽干，改進為放出靜態隔膜真空干燥，節省了干燥時間，降低能源消耗；(3)本發明制備方法エ藝簡單，得率高達78%，普通エ藝為64%左右；溶劑廉價、常用、易得，可以精餾回收套用，利用率達60%，大大降低生產成本凸顯經濟效益，適于エ業化規模生產。
為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動性的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。圖I為本發明的反應式。
具體實施例方式下面將結合本發明實施例中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。實施例I一種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，包括
(I) IOg熊去氧膽酸原料(25. 5mmol), 2. 7g三こ胺(26. 5mmol)溶于丙酮IOOml溶液中，冷卻至-5 -10°C，向溶液中滴加2. 9g氯甲酸こ酯(25.97mmol)，滴加完畢后繼續在-5 -10°C攪拌20min，過濾除去三こ胺鹽，濾液備用；(2)牛磺酸縮合反應將牛磺酸4g(31. 875mmol)溶于22ml lmol/L碳酸鈉溶液中，滴加到前項所得混合酸酐溶液中，在20 30°C下30min內均速添加完畢，快速攪拌3h_4h，濾除沉淀，濾液備用；(3)調酸與濃縮干燥上述濾液用2mol/LHCL溶液調pH6_7，回收蒸干溶液，80°C下繼續減壓抽干，得牛磺熊去氧膽酸干燥物；所述的減壓抽干可以選取的溫度范圍為70°C 90°C，本實施例中選取 80。。；⑷脫鹽純化向上述干燥物中添加40ml無水こ醇80°C左右進行回流處理lh，待鹽松散后過濾除鹽和未反應的牛磺酸，將濾液攪拌下加入IOOOmlこ酸こ酷-丙酮(50 50v/v)混合溶液中，劇烈攪拌，產生大量白色沉淀，室溫下靜置一夜，吸取上層液，過濾收集濾餅，待進ー步純化；所述的回流處理的溫度可以選取70°C 90°C，本實施例中選取80°C，回流處理的時間根據具體情況可以為lh_2h ；(5)精制重結晶上述濾餅用IOOml水溶解,加入900ml丙酮溶液中攪拌，2°C 5°C冷藏12h，過濾得白色漿狀物，80°C真空干燥，粉碎得牛磺熊去氧膽酸。所述的真空干燥的溫度可以選取70 90°C，本實施例中選取80°C。產品得率為76%。實施例2下面以中試放大生產為實例，對本發明的牛磺熊去氧膽酸鈉大生產エ藝做進ー步說明。(I)對150L反應釜進行干燥處理，投入90L無水丙酮，在攪拌下投入10公斤熊去氧膽酸待分散均勻后，制冷泵預設-20°C進行冷循環，至釜內溫度降至-5 °C吋，將
2.7公斤三こ胺用2L丙酮稀釋后，用恒壓漏斗進行滴加，20min內均速滴完，保持釜內溫度-5で -10で，用2し丙酮沖洗恒壓漏斗，取2.9公斤氯甲酸こ酯用2-3L丙酮稀釋后加入恒壓漏斗中，Ih內滴加到反應爸中，保持溫度_3°C _5°C反應20min后,放出反應液過濾除去胺鹽等沉淀物，濾液備用，直接用于下ー步反應；(2)將上述濾液轉移至250L反應釜中，保持釜內溫度20°C 30°C ;稱取4公斤牛磺酸和2. 65公斤碳酸鈉，用20L 80°C去離子水溶解，利用反應釜高位槽進行滴加，高速攪拌下，3h內添加完畢；放緩攪拌速度再反應2. 5h，停止攪拌，放出反應液過濾，濾除未反應的牛磺酸，濾液備用；(3)前步濾液用2mol/LHCL溶液調pH6_7，返回150L反應釜中減壓回收溶劑，待沒有氣泡產生時，迅速放出濃縮液，將高溫薄膜放于不銹鋼方盤上，將濃縮液涂布在隔離膜上，進行真空干燥，80°C干燥4h后，取出干燥物粗粉，得粗品牛磺熊去氧膽酸鈉；(4)以上粗品置150L擁有回收裝置的反應釜中，添加40L無水こ醇80°C左右進 行回流處理lh，待溶液分層，下層鹽松散后過濾除鹽和未反應的牛磺酸，將濾液攪拌下加入500Lこ酸こ酯-500L丙酮混合結晶溶液中，劇烈攪拌，產生大量白色絮狀沉淀，室溫下靜置一夜，吸取上層液，剩余沉淀層經過濾收集濾餅；(5)上述濾餅用100L去離子水徹底溶解后，攪拌下加入900L丙酮溶液中不斷攪拌，進行二次結晶純化；2°C _5°C冷藏一夜，結晶液底部形成白色漿狀物，刮去漿狀物，80°C真空干燥2h，取出蜂窩狀干燥物，粉碎得牛磺熊去氧膽酸鈉。產品得率為78%。以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，并不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
權利要求
1.一種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，包括 (1)以熊去氧膽酸為原料，經過こ酰化、酰氯化反應得到混合酸酐溶液； (2)將牛磺酸溶于碳酸鈉溶液中，得到牛磺酸的碳酸鈉溶液；將所述牛磺酸的碳酸鈉溶液滴加到步驟(I)中的混合酸酐溶液中，攪拌，濾除沉淀得濾液； (3)將步驟(2)中的濾液的pH調整為6 7，濃縮干燥得牛磺熊去氧膽酸粗品干燥物； (4)將步驟(3)中的濃縮干燥物脫鹽純化和重結晶，即得牛磺熊去氧膽酸。
2.根據權利要求I所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，所述步驟 (1)中的こ酰化、酰氯化的具體過程如下 在反應釜中加入質量比為8 10 I的丙酮和熊去氧膽酸，分散均勻，冷卻至-5 -10°C，得到冷卻后的混合液；向冷卻后的混合液中滴加用丙酮稀釋后的三こ胺溶液，滴加完畢后再滴加氯甲酸こ酷，繼續在_5 -10°C攪拌，過濾，過濾后的濾液即為混合酸酐溶液；其中三こ胺與熊去氧膽酸的質量比為2 3 10;三こ胺與用于稀釋的丙酮的體積比為3 2。
3.根據權利要求I所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)使用鹽酸調節pH。
4.根據權利要求I所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中的濃縮干燥為，將調節pH后的濾液蒸干，然后在70°C 90°C下減壓抽干。
5.根據權利要求I所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，所述脫鹽純化的具體過程如下，向步驟(3)中的牛磺熊去氧膽酸粗品干燥物中加入無水こ醇，70 90°C回流處理，待鹽松散后過濾，除鹽和未反應的牛磺酸，在濾液攪拌下加入こ酸こ酯-丙酮混合溶液中，劇烈攪拌，產生白色沉淀，室溫下靜置12 24h，吸取上層液，過濾收集濾餅；其中牛磺熊去氧膽酸粗品干燥物與無水こ醇的質量體積比I : 4 5g/L。
6.根據權利要求5所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，所述重結晶的具體過程如下，將所述濾餅用水溶解，再加入丙酮溶液中攪拌，2°C 5°C冷藏8 12h，過濾得白色漿狀物，70 90°C真空干燥，粉碎；其中水與丙酮溶液的體積比為I : 5 10。
7.根據權利要求5所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，所述的こ酸こ酷-丙酮為體積比為50 50的こ酸こ酯和丙酮的混合液。
8.根據權利要求I所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中的碳酸鈉溶液為lmol/L;所述牛磺酸與碳酸鈉溶液的質量體積比為18 23 IOOg/mLo
9.根據權利要求I 8任ー權利要求所述的ー種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，其特征在于，制備得到的牛磺熊去氧膽酸鈉應用于人工熊膽的配方中或原料藥及其制劑中。
全文摘要
本發明提出了一種牛磺熊去氧膽酸鈉的制備方法，包括(1)以熊去氧膽酸為原料，經過乙酰化、酰氯化反應得到混合酸酐溶液；(2)將牛磺酸溶于碳酸鈉溶液中，得到牛磺酸的碳酸鈉溶液；將所述牛磺酸的碳酸鈉溶液滴加到步驟(1)中的混合酸酐溶液中，攪拌，濾除沉淀得濾液；(3)將步驟(2)中的濾液的pH調整為6～7，濃縮干燥得牛磺熊去氧膽酸粗品干燥物；(4)將步驟(3)中的濃縮干燥物脫鹽純化和重結晶，即得牛磺熊去氧膽酸。本發明成本低，工藝路線短，得率高達78％，適于工業化規模生產。
文檔編號C07J41/00GK102718829SQ20121016269
公開日2012年10月10日 申請日期2012年5月23日 優先權日2012年5月23日
發明者江崇波 申請人:杭州寶積生物科技有限公司