專利名稱：一種制備葉下珠斯泰丁a的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥化學(xué) 技術(shù)領(lǐng)域，涉及ー種制備葉下珠斯泰丁 A的方法。
背景技術(shù)：
葉下珠斯泰丁 A (Phyllanthostatin A)是ー種木脂素類化合物，分子式為C29H3tlO13，分子量為586. 55，為無定性固體，mp. 127_130°C。主要存在于大戟科漸尖葉下珠Phyllanthus acuminatus Vahl.的根中、不齊淺裂葉下珠anisolvbus 的葉和枝中。藥理學(xué)研究表明葉下珠斯泰丁具有細胞抑制活性，體外抑制PS白血病細胞生長，ED50 為 4 μ g/mL0目前對葉下珠斯泰丁A的研究較少，因此提供一種葉下珠斯泰丁 A的制備方法對含有葉下珠斯泰丁 A的藥材資源開發(fā)及藥理研究具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種操作簡單、制備量大、純度高，適合エ業(yè)化生產(chǎn)的制備葉下珠斯泰丁 A的方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種制備葉下珠斯泰丁 A的方法，其特征在于包括以下步驟
A.提取取富含葉下珠斯泰丁A的藥材粉碎，依次用70-90%丙酮和75-95%こ醇滲漉提取，合并提取液，濃縮成浸膏，得提取液浸膏；
B.萃取將上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液進行濃縮得浸膏；
C.柱層析將上述浸膏用中性氧化鎂拌樣上柱，石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液；
D.制備液相純化將石油醚-丙酮(3:1)洗脫液濃縮干燥，用制備液相色譜分離純化，流速為20-501111/1^11，流動相為甲醇-こ腈-水(18:35:47)。所述步驟C中，氧化鎂目數(shù)為100-200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5-8bar，柱徑高比為1:7-10。本發(fā)明的有益效果是采用本發(fā)明方法，操作簡單、制備量大、得率高、產(chǎn)品純度高，適合エ業(yè)化生產(chǎn)。下面將結(jié)合具體實施方式
進ー步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例I :
取漸尖葉下珠根粉碎，先用70%的丙酮滲漉提取，再用85%こ醇滲漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，減壓濃縮得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:7)，用石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮(3:1)洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為20ml/min，流動相為甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外檢測器在線監(jiān)測，針對性收集葉下珠斯泰丁 A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁 A，含量為96. 7%ο實施例2
取漸尖葉下珠根粉碎，先用80%的丙酮滲漉提取，再用90%こ醇滲漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，減壓濃縮得提 取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混 合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為5bar，柱徑高比為1:10)，用石油醚-丙酮按體積比20:1_3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮(3:1)洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為40ml/min，流動相為甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外檢測器在線監(jiān)測，針對性收集葉下珠斯泰丁 A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁 A，含量為95. 5%。實施例3:
取漸尖葉下珠根粉碎，先用90%的丙酮滲漉提取，再用95%こ醇滲漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，減壓濃縮得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為8bar，柱徑高比為1:9)，用石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮(3:1)洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為50ml/min，流動相為甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外檢測器在線監(jiān)測，針對性收集葉下珠斯泰丁 A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁 A，含量為96. 2%ο實施例4:
取漸尖葉下珠根粉碎，先用75%的丙酮滲漉提取，再用75%こ醇滲漉提取，合并丙酮提取液和こ醇提取液，減壓濃縮得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為7bar，柱徑高比為1:8)，用石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮(3:1)洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為30ml/min，流動相為甲醇-こ臆-水(18:35:47)，紫外檢測器在線監(jiān)測，針對性收集葉下珠斯泰丁 A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁 A，含量為95. 8%ο
權(quán)利要求
1.一種制備葉下珠斯泰丁 A的方法，其特征在于包括以下步驟 A.提取取富含葉下珠斯泰丁A的藥材粉碎，依次用70-90%丙酮和75-95%乙醇滲漉提取，合并提取液，濃縮成浸膏，得提取液浸膏； B.萃取將上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液進行濃縮得浸膏； C.柱層析將上述浸膏用中性氧化鎂拌樣上柱，石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液； D.制備液相純化將石油醚-丙酮(3:1)洗脫液濃縮干燥，用制備液相色譜分離純化，流速為20-501111/1^11，流動相為甲醇-乙腈-水(18:35:47)。
2.如權(quán)利要求I所述的一種制備葉下珠斯泰丁A的方法，其特征在于所述步驟C中，氧化鎂目數(shù)為100-200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5-8bar，柱徑高比為1:7-10。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制備葉下珠斯泰丁A的方法，該方法的步驟是將藥材粉碎，依次用丙酮和乙醇溶液滲漉提取，合并提取液，濃縮后用正丁醇萃取，萃取液上氧化鎂柱，石油醚-丙酮混合溶液梯度洗脫，洗脫液濃縮后采用制備高效液相色譜進一步純化，獲得葉下珠斯泰丁A。該方法操作簡單、制備量大、得率高、產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07H13/08GK102659857SQ20121011893
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月23日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司