專利名稱：一種同時制備款冬花酮和新款冬花內酯的方法
技術領域：
本發明涉及一種同時制備款冬花酮和新款冬花內酯的方法，尤其是涉及ー種柱層析與逆流色譜結合分離純化款冬花酮和新款冬花內酯的方法。
背景技術：
款冬花酮和新款冬花內酷，均為倍半萜類化合物，來源于來源于菊科植物款冬花ijussilago farfara L.)的花蕾。款冬花具有潤肺下氣，化痰止嗽等功效。現代藥理研究表明，款冬花對呼吸系統具有止咳，祛痰和平喘作用；對交感神經、擬交感神經、血管平滑肌等具有直接興奮作用；對在體或離體胃腸道平滑肌均呈抑制作用。款冬花分布河北、河南、湖北、四川、山西、陜西、甘肅、內蒙古、新疆、青海，西藏等地，資源豐富。款冬花酮，分子式=C21H3tlO3,分子量330. 47，無色膠狀物。新款冬花內酷，分子式C21H28O4，分子量344.45.。款冬花酮和新款冬花內酯均具有較強的抑制血小板活化因子的作用，能抑制PAF誘導的血小板聚集。目前尚未見提純款冬花酮和新款冬花內酷的相關報道。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供ー種利用高速逆流色譜法純化款冬花酮和新款冬花內酯的方法。本發明所述的ー種同時制備款冬花酮和新款冬花內酯的方法，其特征在于按下列步驟進行
(1)取款冬花的花蕾粉碎后用80-100%こ醇超聲提取1-2次，合并提取液加入針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮；
(2)將濃縮液以熱水分散，加入20-100目硅膠層析柱，ニ氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥；
(3)采用高速逆流色譜儀，溶劑系統由正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水組成，體積比為6-11 :7-15 :4-8 :3，置于分液漏斗中，上相為固定相，下相為流動相，取步驟(2)干燥物溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機轉動，泵入流動相，當流動相流出吋，連續進樣，根據檢測器譜圖收集目標成分，濃縮，低溫干燥即得產品。所述步驟(I)中活性炭用量為提取液總質量的3-5%。。所述步驟(2)中柱層析所用的混合溶劑的比例為1:3-10。所述步驟(3)中高速逆流色譜儀流動相流速控制在2-3ml/min,主機轉速為750-950rpm.。本發明與現有技術相比具有如下的優點及有益效果
1)本發明先用柱層析富集純化，降低了后續エ序的處理量；
2)采用高速逆流色譜法分離純化，制備量大，產品純度高，處理過程中樣品無損失。
具體實施例方式實施例I :
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用80%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入3%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入100目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:3)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(6 7 8 3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機轉動達到950rpm,以2. Oml/min流速泵入流動相，當流動相流出時，開始連續進樣，根據檢測器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內酷，檢測含量都在98%以上。
實施例2:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用こ醇超聲提取I次，合并提取液加入5%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入20目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:10)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(11 15 :4:3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機轉動達到750rpm,以2. Oml/min流速泵入流動相，當流動相流出時，開始連續進樣，根據檢測器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內酷，檢測含量都在98%以上。實施例3:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用90%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入4%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入80目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:5)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(7 8 5 3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機轉動達到850rpm,以2. 5ml/min流速泵入流動相，當流動相流出時，開始連續進樣，根據檢測器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內酷，檢測含量都在98%以上。實施例4:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用85%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入5%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入60目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:5)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(9 11 5 3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機轉動達到800rpm,以2. 8ml/min流速泵入流動相，當流動相流出時，開始連續進樣，根據檢測器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內酷，檢測含量都在98%以上。實施例5:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用90%こ醇超聲提取2次，合并提取液加入4%。針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮，濃縮液以熱水分散，加入80目硅膠層析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:8)洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(10 9 6 :3)置于分液漏斗中，靜置分層，上相為固定相，下相為流動相，取樣品溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機轉動達到 850rpm,以2. Oml/min流速泵入流動相，當流動相流出時，開始連續進樣，根據檢測器譜圖分別收集款冬花酮流分和新款冬花內酯流分，濃縮，低溫干燥即得到款冬花酮和新款冬花內酷，檢測含量都在98%以上。
權利要求
1.一種同時制備款冬花酮和新款冬花內酯的方法，其特征在于按下列步驟進行 (1)取款冬花的花蕾粉碎后用80-100%乙醇超聲提取1-2次，合并提取液加入針劑類藥用活性炭脫色，濾出活性炭，提取液減壓濃縮； (2)將濃縮液以熱水分散，加入20-100目硅膠層析柱，二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，薄層跟蹤，收集洗脫液，濃縮干燥； (3)采用高速逆流色譜儀，溶劑系統由正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水組成，體積比為6-11 :7-15 :4-8 :3，置于分液漏斗中，上相為固定相，下相為流動相，取步驟(2)干燥物溶于下相中，用泵將固定相灌滿分離柱，然后使主機轉動，泵入流動相，當流動相流出時，連續進樣，根據檢測器譜圖收集目標成分，濃縮，低溫干燥即得產品。
2.根據權利要求I所述的同時制備款冬花酮和新款冬花內酯的方法，其特征在于所述步驟(I)中活性炭用量為提取液總質量的3-5%。。
3.根據權利要求I所述的同時制備款冬花酮和新款冬花內酯的方法，其特征在于所述步驟(2)中柱層析所用的混合溶劑的比例為1:3-10。
全文摘要
本發明公開了一種同時制備款冬花酮和新款冬花內酯的方法，包括取款冬花的花蕾粉碎醇提，提取液過柱層析初步分離，再采用高速逆流色譜法純化，將洗脫溶劑系統置于分液漏斗中分層，取上相為固定相，下相為流動相，取款冬花提取物溶解于下相中，將固定相用泵灌滿分離柱，連接柱首端與進樣閥，調節流動相流速和主機轉速，分段收集分離物，濃縮干燥即得款冬花酮及新款冬花內酯。該分離方法分離效率高，能得到高含量的款冬花酮和新款冬花內酯。
文檔編號C07C67/56GK102659585SQ201210117158
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月20日 優先權日2012年4月20日
發明者劉東鋒, 吳艷波 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司