專利名稱：一種23-乙酰澤瀉醇b單體的分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物化合物單體的制備方法，具體涉及從澤瀉中提取分離23-乙酰澤瀉醇B單體的方法，屬于中藥活性成分的分離純化技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
23-乙酰澤瀉醇B又叫澤瀉醇B單乙酸酯，23-0-Acetylalisol B, Alisol B 23-acetate, Alisol B 23-monoacetate, Alisol B monoacetate,分子式為 C32H50O5,分子量為514. 74，結(jié)構(gòu)式如下
23-乙酰澤瀉醇B來源于澤瀉科澤瀉屬植物澤瀉JB1Srna oriental is (Sam.) Juzep 的干燥塊莖，是澤瀉藥材中的主要活性成分，具有抗高血脂、抗肝毒、抑制血管收縮功能。通過研究23-乙酰澤瀉醇B逆轉(zhuǎn)因P-糖蛋白在腫瘤細(xì)胞上過度表達產(chǎn)生的多藥耐藥性的活性，發(fā)現(xiàn)對23-乙酰澤瀉醇B能夠恢復(fù)多藥耐藥細(xì)胞株對抗癌素的敏感性，是一種潛在的 MDR逆轉(zhuǎn)劑，可用于研制新型抗腫瘤藥物。目前文獻報道主要集中在提取方法、檢測方法及藥理研究上。本發(fā)明的目的就在于提供一種簡便的快速分離制備高含量23-乙酰澤瀉醇B的方法，為新藥研發(fā)提供支持。該方法操作簡便，分離效率高，工藝穩(wěn)定，成本低廉，可實現(xiàn)大量 23-乙酰澤瀉醇B單體的高純度分離制備，得到的23-乙酰澤瀉醇B單體純度高，可達到99% 以上。為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下
一種23-乙酰澤瀉醇B單體的分離純化方法，其特征在于以澤瀉科植物澤瀉的塊莖為原料，通過提取、萃取、富集和結(jié)晶得到23-乙酰澤瀉醇B單體，具體包括下述主要步驟
將干燥的澤瀉塊莖粉碎成粗粉，加入質(zhì)量百分比濃度均為75% 95%的甲醇或乙醇溶液，其加入量按照藥材重量乙醇溶液體積=IKg: (5 10) L計算，60 80°C提取3 4次， 每次1 2小時，提取液過濾，合并過濾液，濃縮回收乙醇，得濃浸膏待進行下一步水解處理；
發(fā)明內(nèi)容
A、提取
權(quán)利要求
1.一種23-乙酰澤瀉醇B單體的分離純化方法，其特征在于以澤瀉科植物澤瀉的塊莖為原料，通過提取、萃取、富集和結(jié)晶得到23-乙酰澤瀉醇B單體，具體包括下述主要步驟A、提取將干燥的澤瀉塊莖粉碎成粗粉，加入質(zhì)量百分比濃度均為75% 95%的甲醇或乙醇溶液，其加入量按照藥材重量乙醇溶液體積=IKg: (5 10) L計算，60 80°C提取3 4次， 每次1 2小時，提取液過濾，合并過濾液，濃縮回收乙醇，得濃浸膏待進行下一步水解處理；B、萃取將步驟A所得的濃浸膏加水稀釋至60°C時相對密度為0. 8 0. 9g/mL，然后加入等體積的乙酸乙酯萃取3 5次，分取上層溶液，45 60°C減壓濃縮至干，所得固體物進行下一步富集處理；C、_集將步驟B所得固體物用甲醇或乙醇溶解完全，加入固體物3 5倍質(zhì)量的硅膠拌樣， 經(jīng)40 60°C干燥后，進行以二氯甲烷-甲醇混合液為洗脫劑的硅膠柱層析，其中硅膠為 200 300目，其用量為固體物質(zhì)量的20 50倍，流出液按200ml/瓶收集，進行以環(huán)己烷-乙酸乙酯1 1體積比為展開劑，5%質(zhì)量體積比硅鎢酸乙醇溶液為顯色劑的TLC操作，完全收集經(jīng)105°C加熱后顯示為紫紅色斑點的流份，并于40 60°C的水浴減壓干燥，得粉末狀固體，進行進一步純化；D、結(jié)晶按照粉末狀固體物乙酸乙酯溶液=Ig: ( 6 8)ml計算，于步驟C得到的粉末狀固體物中加入乙酸乙酯溶液，加熱使溶解完全，過濾除去不溶性雜質(zhì)，將濾液冷卻結(jié)晶；根據(jù)晶體純度情況，重結(jié)晶2 3次，直到純度彡99%，即可得到23-乙酰澤瀉醇B單體產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述23-乙酰澤瀉醇B單體的分離純化方法，其特征在于步驟C所述拌樣硅膠的類型選自60 80目或80 100目。
3.如權(quán)利要求1所述23-乙酰澤瀉醇B單體的分離純化方法，其特征在于步驟C所述洗脫劑中甲醇的體積分?jǐn)?shù)為5% 15%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物化合物單體的制備方法，屬于中藥活性成分的分離純化技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明是以澤瀉(澤瀉科澤瀉屬植物澤瀉Alismaorientalis(Sam.)Juzep)的塊莖為原料，通過醇提取、采用乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析進行富集及加入乙酸乙酯后的冷卻結(jié)晶得到23-乙酰澤瀉醇B單體。本發(fā)明通過最適宜的工藝及參數(shù)條件，使產(chǎn)品中23-乙酰澤瀉醇B的含量達到98%以上；整個工藝過程操作簡便、工藝穩(wěn)定、成本低，適合大量生產(chǎn)，且分離效率高、產(chǎn)品純度高，即可實現(xiàn)大量23-乙酰澤瀉醇B單體的高純度分離制備。
文檔編號C07J17/00GK102432659SQ20111042020
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月15日
發(fā)明者劉丁, 夏柯, 文煥松, 郭建華, 陳軍 申請人:成都普思生物科技有限公司