專利名稱：一種來自綠木霉的殺線蟲化合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于微生物農藥技術領域，具體涉及ー種分離自綠木霉(Hypocrea virens H22)的化合物及其制備方法和應用。
背景技術：
植物寄生線蟲是ー類重要的病原微生物，分布廣、種類多，全世界已報道的植物線蟲有200多屬5000余種，給農林業生產造成嚴重為害(馮志新，2001)。據估計全球毎年由植物寄生線蟲所造成的作物損失達780億美元(Barker et al，1998)。就現今危害最為嚴重的根結線蟲而言，其有著廣泛的寄主，且為世界性分布，毎年可給全球作物總產量造成 10% 以上的損失(Whitehead，1998)。植物線蟲具有隱蔽性、多寄主性、頑固性、易傳播的特點，其種群增長迅速，給防治上帯來了諸多的困難。自從20世紀40年代化學技術的革命后，化學殺蟲劑被廣泛用于農林業生產，并在害蟲防治中占居重要地位。與此同吋，由于人們長期過分依賴化學農藥，且缺乏生態意識，造成了嚴重的環境污染。殺線蟲劑多為高毒力高殘留化學農藥，這些藥物對人畜不安全，對環境污染嚴重，并易使線蟲產生抗藥性，對有益生物殺傷力強。同時，隨著人們環保意識的增強，對健康食品要求的日益增高，以往用于植物線蟲防治的高毒農藥多以法律的形式給予了禁用。生物防治具有對人畜安全、對環境友好等優點，因此，生物防治方法在植物線蟲病害的防治地位尤顯重要。鑒于此，人們將研究重點轉向了生物防治。生物防治的一個很重要的方面是使用微生物代謝物對有害生物進行防治，目前已經從微生物菌株中分離到上百種對線蟲有活性的化合物，包括醌類、萜類、肽類等，這些化合物對進一歩研究新型線蟲生防制劑具有很好的開發潛力，因此，研究利用菌物微生物代謝物防治植物寄生線蟲具有重要意義。
發明內容
本發明的目的是克服植物寄生線蟲現有生防技術的不足，提供ー種來自于真菌的微生物源殺線蟲化合物。本發明的另ー個目的是提供所述化合物的制備方法。本發明還有ー個目的是提供所述化合物的應用，為研究開發生物殺線蟲制劑和研究開發仿生生物農藥奠定基礎。本發明的目的通過以下技術方案予以實現本發明人在前期研究中，篩選獲得了具有較好殺植物線蟲功能的真菌綠木霉菌株 (Hypocrea virens H22)，該菌株于2011年9月2日保存于中國典型培養物保藏中心，保藏號為 CCTCC NO :M 2011303。申請人:采用萃取、硅膠柱層析及葡聚糖凝膠柱層析的方法，從綠木霉(Hypocrea virens H22)的CMA粉培養液QOg玉米粉，15g瓊脂粉，IOOOml水)中分離純化到一種對植物線蟲有殺線蟲活性的化合物，根據其核磁碳譜、氫譜及高分辨率質譜的特征，確定了其分 子量為354. 1099，分子式為C2tlH18O6,鑒定為viridiol，化學結構為式(I)所示
權利要求
1. 一種來自綠木霉(Hypocrea viride H22)具有毒殺線蟲活性的化合物，其特征在于具有式(I)所示結構
2.—種權利要求1所述化合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)取綠木霉(Hypocreaviride H22)真菌的培養液，過濾去除菌體后，用等體積的乙酸乙酯萃取，旋轉蒸發得到粗提物；(2)用硅膠柱層析對步驟(1)所得粗提物進行餾分分段，先用氯仿洗脫，然后按照甲醇氯仿的體積比為 1 9、2 8、3 7、4 6、5 5、6 4、7 3、8 2、9 1 和甲醇的順序依次洗脫；每IOOml收集1次餾分，通過TLC檢測，合井比移值相同的餾分，旋轉蒸發濃縮；(3)收集采用氯仿甲醇體積比為7 3的溶液為展開劑、進行TLC檢測時出現Rf值約為0. 3的點情況下的餾分，將所述餾分用葡聚糖凝膠柱層析純化，甲醇洗脫，每5ml收集一次樣；采用氯仿甲醇體積比為7 3的溶液為展開劑進行TLC檢測，收集只出現ー個點且Rf值約為0. 3的餾分，揮發掉有機溶剤，即得所述化合物。
3.—種權利要求1所述化合物的應用，其特征在于應用于制備防治植物線蟲的制劑。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于應用于制備防治大豆孢囊線蟲 (Heterodera glycines)、松材線蟲(Bursapnelenchus xylophilus)、爪唾根結線蟲 (Meloidogyne javanica) >(Μ. incognita) >^M^hff ^(Caenorhabditis elegans)、全齒復活線蟲(Panagrellus redivivus)、相イ以穿孑し線蟲(Radopholus similis) 和/或玉米短體線蟲(Pratylenchus zeae)的制劑。
5.根據權利要求3或4所述的應用，其特征在于應用于防治大豆孢囊線蟲、松材線蟲、 爪哇根結線蟲或南方根結線蟲方面。
全文摘要
本發明公開了一種來自綠木霉具有毒殺線蟲活性的化合物及其制備方法和應用。所述化合物viridiol具有式(I)所示結構本發明所述化合物對大豆孢囊線蟲、松材線蟲、爪哇根結線蟲和南方根結線蟲等多種線蟲具有較強的殺死作用，可應用于制備防治線蟲的制劑，具有高效、低毒、較廣譜等優點，工業應用前景良好。
文檔編號C07J71/00GK102532247SQ20111035097
公開日2012年7月4日 申請日期2011年11月8日 優先權日2011年11月8日
發明者卓侃, 唐照磊, 廖金鈴 申請人:華南農業大學