專利名稱：梔子中高純度亞油酸三甘油酯的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種從桅子果實中提取天然高純度亞油酸三甘油酯的方法。
背景技術：
桅子為菌草科植物桅子(Gardenia jasminoides Ellis)的果實,盛產于江、浙、閩、贛、徽、湘等省山區，為我國大宗傳統中藥材，屬衛生部頒布的首批藥食兩用藥用植物資源。常見的栽培品種及變種為山桅子、黃桅子及水桅子。明朝李時珍的《本草綱目》中已有詳細記載桅子具有護肝、利膽、降壓、鎮靜、止血、消腫等作用；中醫臨床上用于治療黃疽型肝炎、扭挫傷、高血壓、糖尿病等癥。桅子中主要含有藏花素、藏花酸及其衍生物，和以桅子苷為主的11種環烯醚萜苷類成分，同時還含有綠原酸、鞣質、果膠、揮發油、甘露醇等。亞油酸是功能性多不飽和脂肪酸中被最早認識的一種，具有降低血清膽固醇水平作用，攝入大量亞油酸對高甘油三酯疾病人有明顯的療效。我國藥典仍采用亞油酸乙酯丸齊U、滴劑作為預防和治療高血壓及動脈粥樣硬化癥、冠心病的藥物。亞油酸有助于降低血清膽固醇和抑制動脈血栓的形成，因此在預防動脈粥樣硬化和心肌梗塞等心血管疾病方面有良好作用。亞油酸為人體必需脂肪酸，人體每天攝取6g亞油酸，才能維持正常的生理代謝，它在代謝產物為一系列有特殊生物活性化合物類二十烷酸的前體，是影響血壓、血管反應性、凝血和免疫系統的脂肪激素。由于亞油酸很容易氧化變性，酸價高，容易酸敗，且氣味不友好，而與亞油酸相比，亞油酸甘油酯在保持其生理和營養功能的同時，穩定性好、氣味和味道更平和、更易于被人體吸收，因此日益受到關注。到目前為止未見有關從桅子果實中制備亞油酸三甘油酯的相關研究報道。
發明內容
本發明涉及一種從桅子果實中提取天然高純度亞油酸三甘油酯的方法。本發明以桅子果實為原料，通過原料采集加工，溶劑提取，硅膠柱層析分離步驟制備出了高純度的亞油酸三甘油酯，該化合物具有C57H98O6分子式，化學結構式1:
H2C-
O
H。一
O
H2C—
化學結構式I本發明提供的化合物亞油酸三甘油酯的化學結構經過1HNMI^ 13CNMR, DEPT、ES1-MS、GC/MS等波譜技術的鑒定以及參考文獻(伊桐的化學成分研究，中國中藥雜志，32 13，2007，1361-1363.)得到確認并具有以下理化常數和譜學特征亞油酸三甘油酯(linoleicacid triglycerides), C57H98O6,無色油狀物，
5% 硫酸-乙醇溶液顯色為淡紫紅色。ES1-MS m/z :879[M+H] +。1HNMR(O)Cl3,400MHz)δ 0. 78 (6Η, t, J = 6. 9Hz, 3 X-CH2CH3),1. 21 1·32(48Η，s，24Χ-CH2-)，1. 51 (6Η，m，3 X-COCH2CH2-)，2· 02(12Η，m，6 X-CH2CH = )，2· 20 (6Η，t，J = 7. 5Ηζ, 3 X-COCH2-),2.67(6H，m，3X = CH-CH2-CH = ) ,4. 18,4. 23 (2Η, dd, J = 12Hz，-O-CH2-)，5· 28 (12Η，m，6X-CH，-0-CH-).13CMMR(CDCl3，75MHz)S : 172. 5 (2 X-CH2-O-C = O)，172. 2 (-CH-0-C=O)，129. 7，129. 6，127. 8，127. 6(12Χ = CH) ,68. 7, 61. 8 (2 X-CH2-O, CH-0), 33. 8 22. 4 (33 X -CH2-), 13. 8 (3 X CH3).一種桅子中高純度亞油酸三甘油酯的制備方法，其特征在于該方法包括原料采集加工，脂溶性浸膏提取，分離純化三個步驟Α、原料采集加工采集桅子果實，干燥，粉碎；B、脂溶性浸膏提取①采用90-95%的乙醇對原料冷浸或熱回流提得總浸膏，總浸膏用水混懸，用石油醚進行液液分配萃取得到脂溶性浸膏；②或直接用石油醚對原料冷浸或熱回流提得脂溶性浸膏；C、分離純化B步驟中得到的脂溶性浸膏與柱層析用硅膠按照1: 3-1 5的重量比混合拌樣，再置于1: 8-1 20的重量比的硅膠柱中，用石油醚/乙酸乙酯，或石油醚/丙酮以不同體積比例混合組成的溶劑，按極性從小到大，梯度洗脫，進行硅膠柱層析分離，收集極性范圍在30 :1至10 :1的組分，合并后利用石油醚/乙酸乙酯15 I重新進行柱色譜分離，收集在10%硫酸乙醇顯色反應中呈淡紫紅色斑點的部分，得到式I亞油酸三甘油酯。本發明的優點在于1、首次從桅子果實中提取分離到具有較強生物活性的亞油酸三甘油酯類化合物；2、按照本發明提供的制備方法，提取分離制備亞油酸三甘油酯工藝簡單，成本低，產率高，純度高，適合于工業化生產。
具體實施例方式為了更清晰的理解本發明，以下結合實施例對本發明作進一步的說明，但本發明不限于以下實施例。實施例1 :山桅子中亞油酸三甘油酯的分離制備Α、原料采集加工采集山桅子果實，微波干燥，適當粉碎；B、脂溶性浸膏提取取山桅子100g，加入93%的乙醇1500mL，60°C提取(2hX2)，過濾，減壓回收溶劑，得25. Sg總浸膏，總浸膏用150mL水混懸，用等體積石油醚進行液液分配萃取，萃取4次，合并萃取液，減壓濃縮干燥后得到脂溶性浸膏13. 2g ；C、分離純化B步驟中得到的脂溶性浸膏O. 53g與柱層析用硅膠1. 5g混合拌樣，再置于裝有20g硅膠的玻璃柱中，用石油醚/乙酸乙酯以不同體積比例混合組成的溶劑，按極性從小到大，梯度洗脫，130mL為一流份，回收溶劑，用薄層色譜及10%硫酸乙醇溶液顯色并鑒識，收集極性范圍在30 :1至10 :1的組分，合并相同組分，合并后利用石油醚/乙酸乙酯15 I重新進行柱色譜分離，即制備得到式I亞油酸三甘油酯O. 39g。實施例2 :水桅子中亞油酸三甘油酯的分離制備A、原料采集加工采集水桅子果實，鼓風干燥，適當粉碎；B、脂溶性浸膏提取取水桅子100g，加入石油醚IOOOmL,熱回流提取(2hX2)，過濾，減壓回收溶劑，得到脂溶性浸膏13. Sg ；C、分離純化B步驟中得到的脂溶性浸膏0. 51g與柱層析用硅膠1. 5g混合拌樣，再置于裝有20g硅膠的玻璃柱中，用石油醚/丙酮以不同體積比例混合組成的溶劑，按極性從小到大，梯度洗脫，135mL為一流份，回收溶劑，用薄層色譜及10%硫酸乙醇溶液顯色并鑒識，收集極性范圍在30 I至10 I的組分，合并相同組分，合并后利用石油醚/乙酸乙酯15 I重新進行柱色譜分離，即制備得到式I亞油酸三甘油酯0.29g。實施例3 :桅子中亞油酸三甘油酯的酸值測定酸值系指中和脂肪、脂肪油或其他類似物質Ig中含有的游離脂肪酸所需氫氧化鉀的重量(mg),但在測定時可采用氫氧化鈉滴定液(0. lmol/L)進行滴定。精密稱取純化后的亞油酸三甘油酯，置250ml錐形瓶中，加乙醇/乙醚1:1混合液50ml，臨用前加酚酞指示液1. OmL，用氫氧化鈉滴定液(0. lmol/L)滴定,至粉紅色持續30s不褪色。以消耗氫氧化 鈉滴定液(0. lmol/L)的容積(mL)為A，供試品的重量(g)為W，按照下式計算酸值供試品的酸值=AX5. 16/W。純化后的亞油酸三甘油酯的平均酸值為
0.20 (η = 2) ο
權利要求
1.一種桅子中高純度亞油酸三甘油酯的制備方法，其特征在于該方法包括原料采集加工，脂溶性浸膏提取，分離純化三個步驟 A、原料采集加工采集桅子果實，干燥，粉碎； B、脂溶性浸膏提取①采用90-95%的乙醇對原料冷浸或熱回流提得總浸膏，總浸膏用水混懸，用石油醚進行液液分配萃取得到脂溶性浸膏；②或直接用石油醚對原料冷浸或熱回流提得脂溶性浸膏； C、分離純化B步驟中得到的脂溶性浸膏與柱層析用硅膠按照1: 3-1 5的重量比混合拌樣，再置于1: 8-1 20的重量比的硅膠柱中，用石油醚/乙酸乙酯，或石油醚/丙酮以不同體積比例混合組成的溶劑，按極性從小到大，梯度洗脫，進行硅膠柱層析分離，收集極性范圍在30 :1至10 :1的組分，合并后利用石油醚/乙酸乙酯15 I重新進行柱色譜分離，收集在10%硫酸乙醇顯色反應中呈淡紫紅色斑點的部分，得到式I亞油酸三甘油酯；
全文摘要
本發明公開了一種從梔子中制備高純度亞油酸三甘油酯的方法。本發明從梔子果實中提取分離出的亞油酸三甘油酯為同酸甘油三酯類化合物，具有C57H98O6分子式，該化合物屬于具有較高生理活性的共軛不飽和脂肪酸。本發明提取分離制備亞油酸三甘油酯工藝簡單，成本低，產率高，純度高，適合于工業化生產。
文檔編號C07C69/587GK103058866SQ20111032160
公開日2013年4月24日 申請日期2011年10月20日 優先權日2011年10月20日
發明者師彥平, 戚歡陽 申請人:中國科學院蘭州化學物理研究所, 南京博士牛生態農業有限公司