專利名稱：從甘草中提取純化異甘草素的方法
技術領域：
本發明屬于異甘草素的提取純化方法，特別涉及一種從甘草中提取純化異甘草素的方法。甘草為豆科植物甘草屬烏拉爾甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、脹果甘草 (G. inflate Batal.)、光果甘草(G. glabra L.)的干燥根及根莖H J，具有補脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調和諸藥之功效。甘草中黃酮類成分具有多種生物活性，除了消炎、抗菌、抗變態等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、防腫瘤等也有明顯的作用。現代藥理研究表明甘草苷、異甘草苷、甘草素、異甘草素為甘草黃酮類的主要有效成分。異甘草素(Isoliquiritigenin)，是甘草素的同分異構體，黃色結晶，分子式 C15H1204，分子量256. 25，可溶于甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇等有機溶劑，熔點206°C 210°C。現代研究表明，異甘草素有抗氧化、抗潰瘍、治療抑郁性精神病、艾滋病、輔助治療糖尿病等功效。
連續逆流提取是指在提取的過程中，物料和溶劑同時連續運動，但運動方向相反，通過機械傳輸，連續定量加料，使物料和溶媒充分接觸，設備內溶劑不斷更新，最終連續出渣。同時在設備內部不斷更新溶劑，溶劑在流動過程中不斷獲得物料的有效成份，濃度不斷提高。在連續進液和連續出液的過程中，溶劑中存在連續的濃度梯度，從而使提取液可以獲得比較快的浸出速度，也可以獲得比較高的提取液濃度，同時節省了提取溶劑。使用聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合，使得異甘草素分離純化效果更好。目前，異甘草素提取已經有了 1個專利，中國專利CN1013^115從甘草中提取異甘草素的方法，是先用酸水解，然后堿解，醇提，而其最后純化分離也是使用單一樹脂，而且沒有重結晶過程，提取過程中消耗有機溶劑多，效率差，含量低。
發明內容
本發明的目的是充分利用自然資源，提供一種從甘草中提取純化異甘草素的方法。本發明的技術方案概述如下
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 10 30的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提
背景技術：
異甘草素結構式取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，用5-8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20% 40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味，在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合。所述料液比為1 10 30。所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、硅膠兩種樹脂的混合，混合質量比為5:5。所述聚酰胺樹脂型號為30-60目；60-100目。所述大孔樹脂，型號為HPD-100；DlOlB ；HP-30。
具體實施例方式下面通過具體的實施例說明本發明從甘草中提取純化異甘草素的方法，下面的描述僅是為了使本領域的技術人員更好地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。實施例1
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :10的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂HPD-100組成，用5倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20% 乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為96. 3%。實施例2
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :20的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為5 5的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂DlOlB組成，用6倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為 30%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味， 在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為97. 5%。實施例3
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :30的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為55的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂HP-30組成，用7倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為 40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味， 在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為98. 1。實施例4
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :25的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂D101B組成，用8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為98. 6%。實施例5
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :10的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為55的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂HPD-100組成，用8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為35%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C 條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%， 加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味，在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為99. 1%。實施例6
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :30的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂HP-30組成，用7倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為25%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為96. 8%。實施例7
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :15的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為55的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂HP-30組成，用5倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為 30%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味， 在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為97. 7%。
實施例8
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 :20的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂DlOlB組成，用7倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為97. 6%。
權利要求
1.從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征是包括如下步驟(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續逆流提取技術，在50°C，料液質量比為1 10 30的條件下，提取60分鐘，過濾，得甘草提取液；(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個小時后，然后用氫氧化鈉調節溶液PH值至12，在90°C，堿解2個小時，然后用lmol/L鹽酸溶液調PH值為7，得異甘草素粗提液；(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，用5-8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20% 40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結晶加入4倍體積的無水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結晶以去離子水洗至無醇味，在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。
2.所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合。
3.根據權利要求1所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述料液比為 1 10 30。
4.根據權利要求1所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合，混合質量比為5: 5。
5.根據權利要求1或3所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述聚酰胺樹脂型號為=30-60目；60-100目。
6.根據權利要求1或3所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述大孔樹脂，型號為HPD-100 ；DlOlB ；HP—30。
全文摘要
本發明公開了一種從甘草中提取純化異甘草素的方法，該方法包括如下步驟(1)將甘草粉碎，用乙醇水溶液采用連續逆流提取，過濾，得甘草提取液；(2)揮盡乙醇，加入1mol/L鹽酸溶液酸解2個小時，然后用氫氧化鈉調節溶液pH值至12，堿解2個小時后，用1mol/L鹽酸溶液調pH值為7，得異甘草素粗提液；(3)將異甘草素粗提液上混合樹脂柱，并進行洗脫分離純化重結晶。本發明的方法提取的異甘草素為天然提取物，純度高，成本低，生產效率高，質量穩定可控。
文檔編號C07C45/79GK102285875SQ20111028783
公開日2011年12月21日 申請日期2011年9月26日 優先權日2011年9月26日
發明者吳巍 申請人:天津市尖峰天然產物研究開發有限公司