專利名稱：一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法
技術領域：
本發明涉及一種高熊果酚苷的制備方法，尤其是一種從植物中提取高熊果酚苷的制備方法。
背景技術：
高熊果酚苷(Homoarbutin)，分子式=C13H18O7'分子量:286.281，CAS 登錄號25712-94-1，主要存在于鹿蹄草科多種植物中，其中鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola calIiantha H. Andres中含量豐富。其分子式如下。現代研究表明，高熊果酚苷具有抗腫瘤作用，同時其也作為合成其它活性衍生物的原料。鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola calIiantha H. Andres的全草被作為中藥鹿銜草使用，能補腎強骨，祛風除濕，止咳，止血。現有技術中，尚沒有適用于高純度高熊果酚苷工業化大生產的制備工藝報道。本發明所要解決的技術問題是提供一種利于大生產操作、產品純度高的高熊果酚苷的制備方法。為解決上述技術問題，本發明采用下列技術方案。取鹿蹄草全草，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%，萃取壓力20-40MPa，溫度50_60°C，CO2流量l_3ml/g生藥·π η，萃取時間80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脫， 收集3-8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附，以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮，加入甲醇結晶，分離結晶，洗滌、干燥即得。CO2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%。CO2超臨界萃取壓力30MPa，溫度55°C，CO2流量2ml/g生藥· min
發明內容
CO2超臨界萃取時間lOOmin。大孔吸附樹脂選自DlOl型、D102型、AB_8型大孔吸附樹脂中的一種。大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為70%。大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5柱體積。強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂選自201 X 7型、201 X 4型、D201型強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂中的一種。強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂選自001X7型、001X4型、DOOl型強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂中的一種。制備所得高熊果酚苷可采用下列方法檢測。試驗例1 HPLC法測定高熊果酚苷純度色譜條件
色譜柱十八烷基硅烷鍵合膠硅膠為填充劑；流動相甲醇-水(90 10)；流速lmL/ min ；檢測波長:224nm ；柱溫:30°C。測定方法
精密稱取高熊果酚苷ang，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超聲振蕩使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10 μ L，注入高效液相色譜儀，采用歸一化法測定樣品純度。采用本發明制備高熊果酚苷，利于大生產操作，能耗小，污染小。下面將結合具體實施方式
對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力20MPa，溫度50°C，CO2流量lml/g生藥·π η，萃取時間80min，得萃取物，加入到DlOl型大孔吸附樹脂柱上吸附，60%乙醇洗脫，收集3倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過201X7型強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附，以 0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過001 X 7型強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮，加入甲醇結晶，分離結晶，洗滌、干燥即得高熊果酚苷2. 5g，經 HPLC檢測，純度為95. 5%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數據與現有技術相一致。實施例2
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為6%，萃取壓力40MPa，溫度60°C，CO2流量3ml/g生藥·π η，萃取時間120min，得萃取物，加入到D102型大孔吸附樹脂柱上吸附，80%乙醇洗脫，收集8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過201X4型強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過001 X 4型強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮，加入甲醇結晶，分離結晶，洗滌、干燥即得高熊果酚苷3. 2g， 經HPLC檢測，純度為94. 4%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數據與現有技術相一致。
實施例3
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力30MPa，溫度55°C，CO2流量2ml/g生藥·π η，萃取時間lOOmin，得萃取物，加入到AB-8型大孔吸附樹脂柱上吸附，70%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過D201型型強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過DOOl型強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮，加入甲醇結晶，分離結晶，洗滌、干燥即得高熊果酚苷2. 9g，經 HPLC檢測，純度為97. 6%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數據與現有技術相一致。
權利要求
1.一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成 取鹿蹄草全草，粉碎，加入到(X)2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%，萃取壓力20-40MPa，溫度50-60°C，CO2流量l_3ml/g生藥· min， 萃取時間80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脫，收集3_8 倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附，以 0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮，加入甲醇結晶，分離結晶，洗滌、干燥即得。
2.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO2 超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%。
3.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述(X)2 超臨界萃取壓力30MPa，溫度55°C，CO2流量2ml/g生藥· min。
4.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO2 超臨界萃取時間lOOmin。
5.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂選自DlOl型、D102型、AB-8型大孔吸附樹脂中的一種。
6.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為70%。
7.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5柱體積。
8.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂選自201 X 7型、201 X 4型、D201型強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂中的一種。
9.根據權利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂選自001 X 7型、001 X 4型、DOOl型強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂中的一種。
全文摘要
本發明涉及一種操作簡便、污染小、能耗少的從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，工藝步驟為取鹿蹄草全草，加入到CO2超臨界萃取器中，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脫，通過強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮，加入甲醇結晶，分離結晶，洗滌、干燥即得。采用本發明制備高熊果酚苷，產品純度高，易于實現產業化放大。
文檔編號C07H15/203GK102250163SQ20111015060
公開日2011年11月23日 申請日期2011年6月7日 優先權日2011年6月7日
發明者張發成, 王峰, 王琳 申請人:蘇州派騰生物醫藥科技有限公司