專利名稱：用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的肽、及其在化妝用組合物或藥物組合物中的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及能夠誘導皮膚、粘膜和/或毛發中熱激蛋白的表達的肽，且涉及含有這些肽、用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的化妝用組合物或藥物組合物，優選地用于治療和/或護理通過刺激熱激蛋白合成而改善或預防的皮膚、粘膜和/或毛發的那些病況、病癥和/或疾病。
背景技術：
皮膚、粘膜和毛發經常暴露于化學性質和物理性質二者的應激因素下。太陽照射、暴露于某些化學劑或高溫，會對構成皮膚的細胞具有傷害效應，加速皮膚老化且讓皮膚看 起來不健康。紫外線輻射(UV)實行這些效應的機制尤其包括形成活性氧物質、造成DNA受損和蛋白質變性。蛋白質的變性或構象改變可暗不疏水性殘基暴露于蛋白質表面，此情況下蛋白質易形成聚集物，因而喪失其功能性。此情況危及細胞完整性，因此其具有對抗前述情況的特化機制所有活的有機體都具有阻止因錯誤折疊蛋白質的累積所造成的傷害的機制[Ananthan J.，Goldberg A. L.和 Voellmy R. (1986) “Abnormal proteins serve aseukaryotic stress signals and trigger the activation of heat shock genes (異常蛋白用作真核細胞應激信號并觸發熱激基因的激活)” Science 232 :522-524]。已經觀察到，細胞通過增加所謂應激蛋白的合成而對應激的環境響應。這種響應在細胞檢測到異常折疊蛋白的累積時開始，造成熱激基因的轉錄增加[Lis J.和WuC. (1993) “Protein traffic on the heat shock promoter parking, stalling, andtrucking along (熱激啟動子上的蛋白交通停靠、拋錨和運輸)” Cell 74:1-4]。這些基因的產物分成兩大類熱激蛋白和葡萄糖調節蛋白質(glucose regulated protein)。術語“熱激蛋白”起源于在異常高溫下培育的細胞中觀察到這些蛋白質的合成增加。這些蛋白質的合成并非僅在細胞經受溫度升高時增加，在其他應激的環境諸如暴露于UV照射、氧化應激、滲透壓沖擊(osmotic shock)、炎癥、缺氧、暴露于污染物諸如重金屬、缺少營養和缺乏水合作用(lack of hydration)也增加[Lindquist S. (1986) “The heat-shockresponse (熱激響應)” Annu. Rev. Biochem. 55 :1151-1191]。熱激蛋白為一個蛋白質家族，根據其分子量分類，已進行較多研究的是60kDa和70kDa蛋白質，因為它們在所有細胞中組成型表達且直接參與蛋白質成熟的多個方面。Hsp70主要包含兩種蛋白質Hsp73，組成型表達的形式；和Hsp72，可誘導的形式，其被熱激因子蛋白I(HSFl)以轉錄方式調節。這些蛋白質也稱為分子伴侶蛋白(chaperone)，因為其引導新合成的蛋白質從合并的小球狀構象折疊成最終緊致結構的功能，避免出現易形成聚集物的構象，因此，確保其正確功能性。在正常條件下，Hsp70位于細胞核和細胞質中，短暫地與新生蛋白質相互作用，與Hsp60聯合作用有助于它們的折疊且促進它們易位通過聞爾基體和內質網。然而，在應激的環境中，Hsp70與未折置蛋白質或錯誤折置的蛋白質形成復合體，以拯救蛋白質避免降解和不可逆損壞，或在不可能保護蛋白質的情況下，相反地增加蛋白水解式攻擊的可能性[Hayes S. A.和Dice J. F. (1996) “Roles of molecularchaperones in protein degradation (分子伴侶蛋白在蛋白降解中的作用)” J. Cell.Biol. 132 :255-258 ；Gething M. J.和 Sambrook J. (1992) “Protein folding in thecell (細胞中的蛋白折疊)”Nature 355:33-45]。Hsp70或Hsp60最后既不形成最終正確折疊蛋白質的一部分，它們也不具備有關折疊的任何特定信息；它們僅阻止建立可能造成錯誤折疊或導致聚集且因此喪失功能性的不恰當相互作用。然而，蛋白質經由何種機制采用其最終構象是未知的。除了重建不正確地折疊的蛋白質構象的伴侶蛋白功能外，Hsp70的參與還描述在因UV輻射或電離輻射造成損害的情況下，保護和修復DNA的過程中[Bases R. (2006)“Heatshock protein 70 enhanced deoxyribonucleic acid base excision repair in humanleukemic cells after ionizing radiation(在電離福射后熱激蛋白70增強人類白血病細胞中的脫氧核糖核酸堿基切除修復)”Cell Stress Chaperones 11 :240-249 ；NiuP.，Liu L，Gong Z.，Tan H.，Wang F.，Yuan J.，Feng Y.，Wei Q.，Tanguay R. M.和 WuT. (2006)uOverexpressed heat shock protein 70 protects cells against DNA damage、caused by ultraviolet C in a dose-dependent manner(過表達的熱激蛋白 70 以劑量依賴性方式保護細胞免受紫外線C導致的DNA損傷)”Cell Stress&Chaperones 11:162-169]o對應激的響應構成普遍地保守的細胞防衛機制，反映于所謂獲得性耐熱性，這一現象是遭遇非致死性熱激的細胞在正常生長溫度的恢復階段后，能夠在若第一次遭遇將致死的第二次熱激下存活[Subjeck J. R.，Sciandra J. J.和 Johnson R. J. (1982) “Heatshock proteins and thermotolerance ；a comparison of induction kinetics (熱激蛋白和耐熱性；誘導動力學的比較)”Br. J Radiol. 55 :579-584 ；Angelidis C. E. ,LazaridisI.和 Pagoulatos G.N. (1991) “Constitutive expression of heat-shock protein 70in mammalian cells confers thermoresistance (熱激蛋白70在哺乳動物細胞中的組成型表達賦予耐熱性)”Eur.J. Biochem. 199 :35-39 ;Li G. C.，Li L G.，Liu Y. K.，MakJ. Y.，Chen LL 和 Lee W. M. (1991) “Thermal response of rat fibroblasts stablytransfected with the human 70-kDa heat shock protein-encoding gene (穩定地轉染人類70-kDa熱激蛋白編碼基因的大鼠成纖維細胞的熱響應)”Pix)C. Natl. Acad. Sci.USA 88 :1681-1685] o已觀察到這種獲得性耐熱性是暫時的，在生長中的細胞中通常持續12和24小時之間，且取決于由起始溫度沖擊所誘導的變化，諸如沖擊蛋白的表達增加程度和累積。在Hsp家族中，已證實Hsp70負責誘導耐熱性Hsp72的轉錄和合成兩者的特異性抑制阻止由熱處理誘導的保護效應[Trautinger F.，Kindas-Mugge I.，Barlan
B.，Neuner P.和 Knobler R. M. (1995) “72_kD heat shock protein is a mediator ofresistance to ultraviolet B light (72_kD熱激蛋白是對紫外光B的抵抗力的介質)”J.Invest.Dermatol. 105 :160-162 ；Simon M. M.，Reikerstorfer A.，Schwarz A.，Krone C.，Luger T. A. , Jddtteld M.和 Schwarz T. (1995) “heat shock protein 70 overexpressionaffects the response to ultraviolet light in murine fibroblasts. Evidence forincreased cell viability and suppression of cytokine release (鼠成纖維細胞中熱激蛋白70過表達影響對紫外光的響應。增加細胞存活率和阻遏細胞因子釋放的證據)”J.Clin.Invest. 95 :926-33]。之后證實，能夠誘導對應激的響應的任何劑或處理為面對后續暴露于造成應激的因素的細胞提供保護，而不論應激的來源[Kampinga H. H. , Brunsting J. F. , Stege
G.J. J. ,Burgman P. ff. J. J.和Konings A. ff. T(1995)^Thermal protein denaturation and protein aggregation in cells made thermotolerant by various chemicals rol e of heat shock protein(被不同化學品變得耐熱的細胞中的熱蛋白變性和蛋白聚集熱激蛋白的作用)"Exp. Cell Res. 219 :536-546]。沖擊蛋白表達的外源性誘導因此為阻止細胞蛋白質受損且因此保持細胞完整性的可信策略。文獻中描述了由蛋白質異常折疊所造成的不同疾病，諸如大皰性表皮松解癥[Gu L. H.和 Coulombe P. A. (2005) “Defining the properties of the nonhelical tail domain in type H keratin 5 insight from a bullous disease-causing mutation(定義II型角蛋白5中非螺旋尾結構域的特性從導致大皰性疾病的突變的洞察)”Mol Biol Cell. 16 :1427-1438],其是由序列中某些氨基酸突變所造成的角蛋白不正確折疊導致。這些疾病以誘導熱激蛋白水平增加的化合物治療。相同地，使用誘導熱激蛋白表達增加的化合物治療和/或護理創傷或作為愈合和 /或表皮再生過程中的輔助劑。已知創傷愈合和修復過程帶來熱激蛋白表達的增加。具體地，在皮膚外傷情形中Hsp表達的誘導是皮膚中角質細胞的位置特異性的；因此觀察到在表皮角質細胞中誘導 Hsp70 合成[Laplante A. F.，Moulin V.，Auger F. A.，Landry J.，Li
H.,Morrow G. ,Tanguay R. Μ.和Germain L. (1998)“Expression of heat shock proteins in mouse skin during wound healing(熱激蛋白在小鼠皮膚中在創傷愈合期間的表達)” J. Histochem. Cytochem. 46 :1291-301]。還已觀察到,外部遞送Hsp70蛋白質加速倉1J 傷愈合[Kovalchin J. T. , Wang R. , Wagh M. S. , Azoulay J. , Sanders Μ.和 Chandawarkar R. Y. (2006)“In vivo delivery of heat shock protein 70 accelerates wound healing by up-regulating macrophage-mediated phagocytosis (熱激蛋白 70 的體內遞送通過上調巨噬細胞介導的吞噬作用而加速創傷愈合)”Wound Repair Regen. 14 =129-137] 還已描述具有受損的創傷愈合和修復的糖尿病患者的皮膚中Hsp70的量降低[Bitar M. S.， Farook T. , John B.和 Francis I. Μ. (1999) “Heat-shock protein 72/73 and impaired wound healing in diabetic and hypercortisolemic states (糖尿病和腎上腺皮質醇增多癥狀態中的熱激蛋白72/73和受損的創傷愈合)” Surgery 125 :594-601 ；Atalay Μ.， Oksala N. , Lappalainen J. , Laaksonen D. Ε. , Sen C. K.和 Roy S. (2009) “Heat shock proteins in diabetes and wound healing(糖尿病和創傷愈合中的熱激蛋白)”Curr. Protein Pept. Sci. 10 :85-95 ；McMurtry A. L. , Cho Κ. , Young L. J. -T. , Nelson C. F.和 Greenhalgh D. G. (1999) “Expression of HSP70 in healing wounds of diabetic and nondiabetic mice (糖尿病和非糖尿病小鼠的愈合創傷中HSP70的表達)”J. Surg. Res. 86 36-41]。因此，誘導熱激蛋白合成是用于治療和/或護理皮膚和/或粘膜創傷的有效策略， 特別是在糖尿病造成的皮膚和/或粘膜創傷的愈合和表皮再生的情況。現有技術中還已知Hsp70參與毛發生長的調節；具體地，專利申請MX 2007-007622描述抑制Hsp70合成的化合物減少毛發生長的應用。Hsp70在調節毛發生長中的牽涉指出使用能夠刺激Hsp合成的化合物用于治療和/或預防脫發癥以延遲脫發或誘導毛發生長的用途，尤其是用于治療因治療癌癥的化療造成的脫發癥，如專利us 2002/0001629 所述。在美觀的角度而言，異常蛋白質折疊對皮膚也有影響。彈性蛋白和膠原蛋白的正確折疊是保持皮膚彈性和光滑與年輕外觀皮膚的基礎。年輕成人的皮膚因為能夠合成大量Hsp以在合成期間保護蛋白質折疊，特別適合對應激的環境作出快速且有效的響應。然而，因為Hsp70合成隨著年齡減少,熟齡人士中保持蛋白質正確折疊的能力降低,造成受損蛋白質累積或不充分地折疊和對細胞死亡的調節較差，造成皮膚老態[Verbeke P,Fonager J, Clark BF, Rattan SI. (2001) “Heat shock response and ageing mechanisms and applications (熱激蛋白與老化機制和應用)” Cell Biol. Int. 25 :845-857]。從美觀的角度看來，當皮膚暴露于UV輻射時，蛋白質異常折疊對皮膚的影響惡化，且造成光老化皮膚的外觀。UV輻射能夠不可逆地傷害皮膚，造成細胞死亡。然而，已證實暴露于高溫對細胞具有某種保護效果，減少被UVB誘導的細胞死亡的數量[Trautinger F. , Knobler R., Honigsmann H. ,M. Mayr W.和Kindds-Mtigge I. (1996) “Increased expression of the 72-kD heat shock protein and reduced sunburn cell formation in human skin after local hyperthermia(局部高溫后人類皮膚中72_kD熱激蛋白的表達增加和曬傷細胞形成減少)” J. Invest. Dermatol. 107 :442-443]。這種對高溫的暴露誘導Hsp合成。這些結果造成對所觀察到的UV輻射的有害效應的光保護性效果。因此，熱激蛋白合成誘導是用于治療和/或護理皮膚和/或毛發以減少、延遲和/或阻止老化和/或光老化的跡象的有效策略。 化妝品和藥學兩領域都已對開發能夠刺激熱激蛋白合成的化合物進行不同試驗。 熱激蛋白在不同病況、病癥和疾病中起的作用是現有技術中廣為人知的，如可見于例如期 fIjHeat Shock Proteins in Biology and Medicine (Research Signpost, India)或Cell Stress and Chaperones(Springer, Netherlands)。已知某些絲氨酸蛋白酶抑制劑能夠刺激熱激蛋白的產生，但其高毒性妨礙其用于治療目的的用途。因此，業界需找出具有這些性質且還可對于患者或消費者健康不具風險地使用的藥劑。現有技術中描述了刺激Hsp合成的不同天然提取物，諸如尤其是黑麥籽提取物、 梨果仙人掌(Opuntia ficus-indica)提取物、含有芒果苷(mangiferin)的提取物(US 2006/0088560)、或文獻 US 2004/0228816,US 7128914 或 FR 2834887 中所述的那些。獲得具有均一品質和已知組成和純度的提取物的困難度使得其于工業上的開發困難，尤其是在醫藥領域中。還描述了具有醛或α-酮酯官能性的不同的經修飾的合成肽，其誘導Hsp合成，諸如專利US 5942494所述。然而，醛官能性與許多常用于局部(topical)施用制劑中的成分在化學上不相容，還顯示在制劑中低穩定性的問題，這限制了其在化妝品或皮膚醫學領域的用途。熱激蛋白對皮膚、粘膜和/或毛發的作用的益處還可通過將這些蛋白質直接施加至皮膚、粘膜和/或毛發來獲得。在此情況下，專利US 5348945描述外源性施加蛋白質 Hsp70作為降低被置于應激環境的組織的死亡率的方法，尤其是保存將使用于器官移植的組織。局部施加高分子量蛋白質展現其穿過皮膚和毛發的低滲透性的困難，因此，使其在化妝品或皮膚醫學領域中的開發困難。
這是盡管有許多現存的化合物和/或提取物，但對于鑒定比現有技術已知的更有效且更有選擇性的刺激熱激蛋白合成的新穎化合物仍有需求的原因。發明詳述本發明為前述問題提供解決方案。本發明的申請人已出乎意料的發現，其序列不包括醛官能性的合成肽能夠刺激Hsp70蛋白質合成，因此，能夠保護皮膚、粘膜和/或毛發免受因為暴露于應激的環境所致的侵襲。這些肽用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發，優選地用于治療和/或護理通過刺激熱激蛋白而改善或預防的皮膚、粘膜和/或毛發的那些病況、病癥和/或疾病。定義為了幫助理解本發明，本文包括一些術語和措詞在本發明的上下文中使用時的意義。在本發明的上下文內，應理解“皮膚”為包含從最外層或角質層至最底層或皮下組織(包括所述二者)的多層。這些層包含不同類型的細胞，尤其是諸如角質細胞、成纖維細胞、黑色素細胞和/或脂肪細胞。在本發明的上下文中，術語“皮膚”包括頭皮。 在本發明的上下文中，“護理皮膚、粘膜和/或毛發”包括預防皮膚、粘膜和/或毛發的病癥和/或疾病。在本發明的上下文中，術語“老化”是指皮膚隨著年齡(時間老化)或因暴露于陽光(光老化)或環境因素諸如煙草煙霧、極冷或多風天氣、化學污染物或污染而經歷的改變，且包括所有外在可見和/或可經由觸摸感知的，諸如且不限于，皮膚上不連續性的發展，諸如皺紋、細紋、裂紋、不規則或粗糙、毛孔尺寸增大、失去彈性(elasticity)、失去緊致、失去彈性(resilience)、失去從變形復原的能力、皮膚松垂諸如臉頰松垂、出現眼袋或出現雙下巴、皮膚顏色改變，諸如尤其是斑塊、發紅、眼袋或出現色素沉著過度區域諸如老年斑或雀斑、異常分化、角化過度、彈性組織變性、角化病、脫發、橘皮、失去膠原結構化、和角質層、真皮、表皮、血管系統(例如出現蜘蛛網狀靜脈或毛細管擴張)、或尤其是接近皮膚的組織的其他組織學變化。術語“光老化”集合一組因為皮膚長期暴露于紫外線輻射而造成皮膚過早老化的過程，呈現與老化相同的生理特征，諸如且不排除松弛、下垂、顏色改變或色素沉著不規則、異常和/或過度角質化。在本發明的上下文中，“光防護”理解為當在暴露于UV輻射之前施加化合物或制劑時，此化合物或制劑阻止或延遲光老化癥狀出現的能力。在本說明書中，用于氨基酸的縮寫依照在Eur. J. Biochem. (1984) 138 :9_37和 J. Biol. Chem. (1989)264 =633-673中所規定的IUPAC-IUB聯合委員會的生化命名規則。因此，例如，Asn代表 NH2-CH (CH2CONH2)-C00H，Asn-代表 NH2-CH (CH2CONH2)-CO-，-Asn 代表-NH-CH (CH2CONH2)-COOH，且-Asn-代表-NH-CH(CH2C0NH2) -CO-。因此，當代表肽鍵的連字符位于符號右邊時，則消除氨基酸(此處表示為非離子化的慣用形式)的I-羧基的0H，當位于符號左邊時，則消除氨基酸的2-氨基的H ;此兩種修飾可應用于相同符號(見表I)。_表I.氨基酸結構及其三字母命名代碼_
符號剩余部分符號剩余部分符號剩余部分
H O
H/ -HlS- VNH _ASn' ' V
入NH2
HN NH2‘
r f
-Leu-^-Pro-
I本說明書中所使用的縮寫“Ac- “用來指明乙酰基(CH3-CO-)，縮寫“Palm-”用以指明棕櫚酰基(CH3-(CH2) 14-C0-)。術語“非環狀脂族基”在本發明中用以涵蓋例如且不限于直鏈或支鏈的烷基、烯基和塊基。
術語“烷基”是關于飽和、直鏈或支鏈的基團，具有介于I至24個之間、優選介于 I至16個之間、更優選介于I至14個之間、甚至更優選介于I至12個之間、又再更優選I、 2、3、4、5或6個的碳原子，且以單鍵與分子的其余部分結合，烷基包括例如且不限于甲基、 乙基、異丙基、異丁基、叔丁基、庚基、羊基、癸基、十~■燒基、月桂基、十TK燒基、十八燒基、戍基、2-乙基己基、2-甲基丁基、5-甲基己基和類似基團。術語“烯基”是指直鏈或支鏈的基團，其具有介于2至24個之間、優選介于2至 16個之間、更優選介于2至14個之間、又更優選介于2至12個之間、又再更優選2、3、4、5 或6個的碳原子，具有一或多個碳-碳雙鍵，優選具有I、2或3個共軛或非共軛的碳-碳雙鍵，其經由單鍵與分子的其余部分結合，烯基包括例如且不限于乙烯基、油烯基、亞油烯基 (Iinoleyl)和類似基團。術語“炔基”是指直鏈或支鏈基團，其具有介于2至24個之間、優選介于2至16 個之間、更優選介于2至14個之間、又更優選介于2至12個之間、又再更優選2、3、4、5或6 個的碳原子，具有一或多個碳-碳三鍵，優選具有1、2或3個共軛或非共軛的碳-碳三鍵， 其經由單鍵與分子的其余部分結合，炔基包括例如且不限于乙炔基、I-丙炔基、2-丙炔基、 I- 丁炔基、2- 丁炔基、3- 丁炔基、戊炔基諸如I-戊炔基和類似基團。術語“脂環族基團”在本發明中用以涵蓋例如且不限于環烷基或環烯基或環炔基。術語“環烷基”是關于飽和的單環或多環的脂族基團，其具有介于3至24之間、優選介于3至16個之間、更優選介于3至14個之間、又更優選介于3至12個之間、又再更優選3、4、5或6個的碳原子，其經由單鍵與分子的其余部分結合，環烷基包括例如且不限于環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、甲基環己基、二甲基環己基、八氫茚、十氫萘、十二氫軀(dodecahydro-phenalene)和類似基團。術語“環烯基”是關于非芳族的單環或多環脂族基團，其具有介于5至24個之間、 優選介于5至16個之間、更優選介于5至14個之間、又更優選介于5至12個之間、又再更優選5或6個的碳原子，具有一或多個碳-碳雙鍵，優選具有1、2或3個共軛或非共軛的碳-碳雙鍵，其經由單鍵與分子的其余部分結合，環烯基包括例如且不限于環戊-I-烯-I-基和類似基團。術語“環炔基”是關于非芳族的單環或多環脂族基團，其具有介于8至24個之間、 優選介于8至16個之間、更優選介于8至14個之間、又更優選介于8至12個之間、又再更優選8或9個碳原子，具有一或多個碳-碳三鍵，優選具有I、2或3個共軛或非共軛的碳-碳三鍵，其經由單鍵與分子的其余部分結合，環炔基包括例如且不限于環辛-2-炔-I-基和類似基團。術語“芳基”是關于芳族基團，具有介于6至30個之間、優選介于6至18個之間、 更優選介于6至10之間、再更優選6或10個的碳原子，其包含以碳-碳鍵結合或稠合的I、 2、3或4個芳族環，且經由單鍵與分子的其余部分結合，芳基尤其包括例如且不限于苯基、 萘基、聯苯基、茚基、菲基或蒽基。術語“芳烷基”是關于以芳族基團取代的烷基，其具有介于7至24個之間的碳原子，且包括例如且不限于-(CH2) !_6-苯基、-(CH2) !_6-(1-萘基)、-(CH2) !_6- (2-萘基)、-(CH2) ^6-CH (苯基)2和類似基團。、術語“雜環基”是關于3-10元雜環或烴環，其中一個或多個環原子，優選I、2或3 個環原子是非碳的元素，諸如氮、氧或硫，且可為飽和或未飽和。為了本發明的目的，雜環基可為環狀、單環、雙環或三環系統，可包括稠合環系統；且雜環基中的氮、碳或硫原子可任選地被氧化；氮原子可任選地被季銨化；且雜環基可為部分或完全飽和的，或可為芳族的。更優選的是，術語雜環是關于5或6元環。術語“雜芳基烷基”是關于以經取代或未經取代的芳族雜環基取代的烷基，該烷基具有I至6個碳原子，該芳族雜環基具有介于2至24個之間的碳原子和I至3個非碳原子，且雜芳基烷基包括例如且不限于-(CH2) !_6-咪唑基、-(CH2) !_6-三唑基、-(CH2) !_6-噻吩基、-(CH2) H-呋喃基、-(CH2) H-吡咯烷基和類似基團。當在本技術領域中使用時，在上述定義基團上可存在某一程度的取代。因此，在本發明的任何基團上可存在取代。在本文中提及本發明的基團中的經取代的基團表示，所述基團可在一或多個可利用位置上被一或多個取代基取代，優選在1、2或3個位置，更優選在 I或2個位置，再更優選在I個位置。這些取代基包括例如且不限于C1-C4烷基；羥基K1-C4 燒氧基；氣基；C「C4氣基燒基！C1-C4擬氧基；C「C4氧擬基；1 素，諸如氣、氣、漠和鵬；氛基； 硝基；疊氮基A-C4烷基磺酰基；硫醇基K1-C4烷硫基，芳氧基，諸如苯氧基；-NRb(C = NRb) NRbRc ;其中Rb和R。獨立地選自由下列所組成的組H、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、 C3-C10環烷基、C6-C18芳基、C7-C17芳烷基、3-10元雜環基、或氨基的保護基。本發明化合物本發明的化合物以通式⑴定義R1-Wn-X111-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-Zq-R2(I)
其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，特征在于AA1 為-His-；AA2 選自-His-、-Leu-和-Pro-組成的組；AA3 為-Leu-；AA4選自-Arg-和-Asn-組成的組；W、X、Y和Z彼此獨立地選自編碼的氨基酸和非編碼的氨基酸組成的組；n、m、P和q彼此獨立地選擇，且具有介于O至I之間的值；
n+m+p+q小于或等于2 ；R1選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的非環狀脂族基、經取代或未經取代的脂環基、經取代或未經取代的雜環基、經取代或未經取代的雜芳基烷基、經取代或未經取代的芳基、經取代或未經取代的芳烷基和R5-CO-,其中R5選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的非環狀脂族基、經取代或未經取代的脂環基、經取代或未經取代的芳基、 經取代或未經取代的芳烷基、經取代或未經取代的雜環基和經取代或未經取代的雜芳基烷基;R2選自由下列所組成的組-NR3R4、-OR3和-SR3,其中R3和R4獨立的選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的非環狀脂族基、經取代或未經取代的脂環基、經取代或未經取代的雜環基、經取代或未經取代的雜芳基烷基、經取代或未經取代的芳基、和經取代或未經取代的芳烷基；條件為當AA2 為-Leu-，AA4 為-Asn-，Y 為-Gln-時，則 Z 不為-Leu-；且條件為當AA2為-His-，AA4為-Arg-，Y或Z為-Tyr-時，則p+q不為I。 R1和R2基團分別結合于肽序列的氨基末端(N-末端)和羧基末端(C-末端)。根據本發明的優選實施方案，R1選自H或R5-CO-組成的組，其中R5選自由下列所組成的組經取代或未經取代的C1-C24烷基、經取代或未經取代的C2-C24烯基、經取代或未經取代的C2-C24炔基、經取代或未經取代的C3-C24環烷基、經取代或未經取代的C5-C24環烯基、經取代或未經取代的C8-C24環炔基、經取代或未經取代的C6-C3tl芳基、經取代或未經取代的C7-C24芳烷基、具有3至10個環元的經取代或未經取代的雜環基、及具有2至24 個碳原子與I至3個非碳原子和具有I至6個碳原子的烷基鏈的經取代或未經取代的雜芳基烷基。更優選地，R1選自H、乙酰基、叔丁酰基、己酰基、2-甲基己酰基、環己烷羧基 (cyclohexancarboxyl)、辛酰基、癸酰基、月桂酰基、肉豆蘧酰基、棕櫚酰基、硬脂酰基、油酰基和亞油酰基(linoleoyl)。再更優選地，R1為H、乙酰基、月桂酰基、肉豆蘧酰基或棕櫚酰基。在更優選的實施方案中，R1為乙酰基或棕櫚酰基。根據另一優選的實施方案，R2為-NR3R4、-OR3或-SR3，其中R3和R4獨立地選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的C1-C24烷基、經取代或未經取代的C2-C24烯基、經取代或未經取代的C2-C24炔基、經取代或未經取代的C3-C24環烷基、經取代或未經取代的 C5-C24環烯基、經取代或未經取代的C8-C24環炔基、經取代或未經取代的C6-C3tl芳基、經取代或未經取代的C7-C24芳烷基、具有3至10個環元的經取代或未經取代的雜環基、及具有2至 24個碳原子與I至3個非碳原子的經取代或未經取代的雜芳基烷基，其中烷基鏈具有I至 6個碳原子。任選地，R3和R4可經由飽和或不飽和碳-碳鍵結合，與氮原子一起形成環。更優選地，R2是-NR3R4或-OR3。更優選地，R3和R4選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基或十六烷基組成的組。再更優選地，R3為H且R4選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基或十六烷基組成的組。根據更優選的實施方案，R2選自-OH和-NH20根據本發明的另一實施方案，R1選自由下列所組成的組H、乙酰基、月桂酰基、肉豆蔻酰基或棕櫚酰基，AA2為-L-Leu-，AA4為-L-Arg-，且R2為-NR3R4或-OR3,其中R3和R4 獨立地選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基和十六烷基，優選地R2為-OH或-NH2。更優選地， R1為乙酰基或棕櫚酰基且R2為-0H。再更優選地，n、m、P和q為O。根據本發明的另一實施方案，R1選自由下列所組成的組H、乙酰基、月桂酰基、肉豆蔻酰基或棕櫚酰基，AA2為-L-Ρι -，AA4為-L-Arg-，且R2為-NR3R4或-OR3，其中R3和R4 獨立地選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基和十六烷基，優選地R2為-OH或-NH2。更優選地， R1為乙酰基或棕櫚酰基且R2為-0H。再更優選地，n、m、P和q為O。優選地，式(I)化合物選自以下組成的組Palm-Hi S-Leu-Leu-Arg-NH2，Palm-His-Leu-Leu-Arg-ΟΗ, Ac-Hi S-Leu-Leu-Arg-NH2，Ac-His-Leu-Leu-Arg-OH, Ac-His-Leu-Leu-Arg-NH- (CH2) 15_CH3，Palm-Hi s-Leu-Leu-Asn_NH2，Palm-His-Leu-Leu-Asn-OH，Ac-Hi s-Leu-Leu-Asn-NH2，AcI-Hi s-Leu-Leu-Asn-OH,Ac-Hi s_Leu_Leu_Asn_NH_ (CH2) 15_CH3， Palm-Hi S-Pro-Leu-Arg-NH2,Palm-His-Pro-Leu-Arg-OH,Ac-Hi S-Pro-Leu-Arg-NH2，Ac-His-Pro-Leu-Arg-OH, Ac-His-Pro-Leu-Arg-NH- (CH2) 15_CH3，Palm-Hi s-Pro-Leu-Asn-NH2，Palm-His-Pro-Leu-Asn-OH，Ac-Hi S-Pro-Leu-Asn-NH2，Ac-His-Pro-Leu-Asn-0H,Ac-Hi s_Pro_Leu_Asn_NH_ (CH2) 15_CH3jPalm-Hi s_Hi S-Leu-Arg-NH2，Palm-His_Hi s-Leu-Arg-OH，Ac-Hi s-Hi S-Leu-Arg-NH2，Ac-His-His-Leu-Arg-OH, Ac-Hi s_Hi S-Leu-Arg-NH- (CH2) 15_CH3，Palm-Hi s-Hi s-Leu-Asn_NH2，Palm-His-His-Leu-Asn-OH，Ac-Hi s-Hi s-Leu-Asn_NH2，
Ac-His-His-Leu-Asn-OH，Ac-His-His-Leu-Asn-NH-(CH2) 15_CH3，Ac-Gly-Gly-His-Pro-Leu-Asn-OH,Ac-His-His-Leu-Asn-Ala-Leu-OH,Ac-Gly-His-His-Leu-Asn-Ala-OH,其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽。本發明的肽可以立體異構體或立體異構體的混合物存在；例如，形成肽的氨基酸可彼此獨立地具有L-、D-構型，或為外消旋的。因此，根據不對稱碳的數目和存在何種異構體或異構體的混合物，有可能獲得異構體的混合物以及外消旋混合物或非對映異構體的混合物，或純的非對映異構體或對映異構體。本發明肽的優選結構為純的異構體，即對映異構體或非對映異構體。
例如，當指出AA1可為-His-時，則應理解AA1選自_L_His_、-D-His-或二者的外消旋或非外消旋的混合物。同樣的，當指出AA2可為-Leu-時，則應理解其可為-L-Leu-、-D-Leu-或二者的外消旋或非外消旋的混合物。在本文中所描述的制備方法允許本領域技術人員藉由選擇具有適當的構型的氨基酸而獲得本發明肽的各立體異構體。在本發明的上下文中，術語“非編碼的氨基酸”是關于不由遺傳密碼編碼的那些天然或非天然氨基酸，諸如且不限于尤其是瓜氨酸、鳥氨酸、肌氨酸、鎖鏈素、正纈氨酸、4-氨基丁酸、2-氨基丁酸、2-氨基異丁酸、6-氨基己酸、I-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、2-氨基苯甲酸、4-氨基苯甲酸、4-氯苯基丙氨酸、2，3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、環絲氨酸、肉堿、胱氨酸、青霉胺、焦谷氨酸、噻吩基丙氨酸、羥基脯氨酸、別-異亮氨酸、別-蘇氨酸、4-哌唳甲酸(isonipecotic acid)、異絲氨酸、苯基甘氨酸、抑胃酶氨酸(statine)、β -丙氨酸、 正亮氨酸、N-甲基氨基酸、β-氨基酸或Y-氨基酸以及其衍生物。非天然氨基酸的名單可見于論文“Unusual amino acids in peptide synthesis (妝合成中的不常見氨基酸)” 由 D. C. Roberts 和 F. Vellaccio 于 The Peptides (肽類)，第 5 卷(1983),第 VI 章，Gross E.和Meienhofer J.,編著,Academic Press,New York,USA中或此領域中的專門公司的商業目錄中，諸如尤其是 PolyPeptide Laboratories、Bachem、Novabiochem、Sigma_Aldrich、 Peptides International、Advanced ChemTech、Chem-Impex、Maybridge Chemical、 Chirotech Technology、Peninsula Laboratories 或 RSP Amino Acid Analogues。在本發明的上下文中，當n、m、p或q不同于0時，應確知W、X、Y和/或Z的性質不會使本發明肽的活性難以實現，而是促進刺激熱激蛋白合成，或是對其不具影響。在本發明的上下文中，本發明還提供肽的化妝品上或藥學上可接受的鹽。術語“化妝品上或藥學上可接受的鹽”意指公認可用于動物且尤其是人的鹽，包括用以形成堿加成鹽的鹽，不論是無機鹽，例如且不限于尤其是鋰、鈉、鉀、鈣、鎂、錳、銅、鋅或鋁；或是有機鹽，諸如且不限于尤其是乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、精氨酸、賴氨酸、組氨酸或哌嗪；或用于形成酸加成鹽的鹽，不論是有機鹽，例如且不限于尤其是乙酸鹽、檸檬酸鹽、 乳酸鹽、丙二酸鹽、順丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、反丁烯二酸鹽、苯甲酸鹽、天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽、琥珀酸鹽、油酸鹽、三氟乙酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽或葡糖酸鹽；或無機鹽，例如且不限于尤其是鹽酸鹽、硫酸鹽、硼酸鹽或碳酸鹽。鹽的性質不重要，條件為該鹽為化妝品上和藥學上可接受的。本發明肽的化妝品上和藥學上可接受的鹽可由現有技術熟知的慣用方法獲得[Berge S. Μ. , Bighley L. D.和 Monkhouse D. C. (1977) " Pharmaceutical Salts (藥用鹽類)"J. Pharm. Sci. 66 :1-19]。本發明的一方面涉及用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的如本發明所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽。在另一具體方面，本發明涉及如本發明所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，用于治療和/或護理通過刺激Hsp蛋白質合成而改善或預防的那些病況、病癥和/或疾病，具體地分子量介于20kDa至IlOkDa間的Hsp 家族蛋白質，更具體地介于40kDa至IOOkDa間的分子量,更具體地包括介于60kDa至80kDa 之間的分子量的Hsp蛋白質，尤其是分子量為70kDa的Hsp或Hsp70。在優選的實施方案中，通過刺激熱激蛋白合成而改善或預防的病況、病癥和/或疾病選自大皰性表皮松解癥和脫發癥組成的組，包括因癌癥化療所引起的脫發癥。在另一具體方面，本發明涉及用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的如本發明所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽， 其減輕、延遲和/或阻止由UV輻射、熱應激、氧化應激、滲透壓沖擊、炎癥、缺氧、暴露于污染物、缺少營養和缺乏水合作用引起的細胞受損。在另一方面，本發明涉及一種用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的如本發明所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽， 其減少和/或阻止老化和/或光老化的跡象。在另一方面，本發明涉及用于治療和/或護理皮膚和/或粘膜的如本發明所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，其刺激創傷的愈合和/或表皮再生，優選地因糖尿病導致的那些創傷。在另一具體方面，本發明涉及用于治療和/或護理皮膚和/或毛發的如本發明所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，其延遲和/或阻止脫發或誘導毛發生長。制備方法本發明的肽、其立體異構體或其化妝品上或藥學上可接受的鹽的合成可根據現有技術已知的慣用方法進行，諸如固相肽合成法[Stewart J. Μ.和Young J. D. (1984)“Solid Phase Peptide Synthesis (固相妝合成)，第 2 版，，Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois ；Bodanzsky M.和 Bodanzsky A. (1984) “The practice of Peptide Synthesis (月太合成實踐)，，Springer Verlag, New Cork ；Lloyd-ffilliams P. , Albericio F.和 Giralt E. (1997) “Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins (合成肽和蛋白的化學方法)” CRC，Boca Raton, FL, USA ]、溶液合成法、固相合成法與溶液合成法的組合或酶催化合成法[Kullmann W. (1980) “Proteases as catalysts for enzymic syntheses of opioid peptides (蛋白酶作為酶催化性合成阿片肽的催化劑)”J. Biol. Chem. 255 =8234-8238]。肽還可如下獲得發酵經或未經遺傳改造的菌株以產生所需序列，或控制動物或植物來源(優選植物來源)的蛋白質水解，以釋出含有至少所需序列的肽片段。
例如，獲得本發明式⑴的肽的方法包含以下步驟-將具有經保護的N-末端和自由C-末端的氨基酸偶合于具有自由N-末端和經保護的或結合至固態支撐物上的C-末端的氨基酸；-移除N-末端的保護基；-重復偶合和移除N-末端保護基的順序，直至得到所需的肽序列；-移除C-末端的保護基或從固態支撐物裂解出。優選地，將C-末端結合至固態支撐物，且在固 相上進行該方法，因此，包括將具有經保護的N-末端和自由C-末端的氨基酸偶合至具有自由N-末端和與聚合物支撐物結合的C-末端的氨基酸；移除N-末端的保護基；依需要重復此順序多次直至獲到所需長度的肽，最后接著從原始聚合物支撐物裂解出所合成的肽。在整個合成期間，氨基酸側鏈的官能團以暫時或永久性保護基適當地保護，且可在與從聚合物支撐物裂解肽的過程同時或互不相關地(orthogonally)脫保護。可選地，可藉由將肽偶合于聚合物支撐物上或肽上或預先結合至聚合物支撐物的氨基酸上的收斂性策略，來進行固相合成。收斂性合成策略是本領域技術人員廣泛所知的， 且描述于 Lloyd-Williams P. , Albericio F.和 Giralt E.于 “Convergent solid-phase Peptide synthesis (收斂性固相妝合成)” (1993) Tetrahedron 49 :11065-11133 中。該方法可包括使用現有技術已知的標準方法和條件，以不同的次序脫保護N-末端和C-末端和/或從聚合物支撐物裂解肽的另外階段，隨后可修飾這些末端的官能團。 N-末端和/或C-末端的任選修飾可對結合于聚合物支撐物的式(I)的肽進行，或在肽已從聚合物支撐物裂解出時進行。任選地，R1可藉由本發明肽的N-末端與化合物R1-J的反應而引入，其中R1如前文所述且J為離去基，例如且不限于尤其是甲苯磺酰基、甲磺酰基和鹵素；經由在適當的堿和溶劑存在下的親核取代反應而引入，其中具有不牽涉入N-C鍵形成作用的官能團的片段經暫時性或永久性保護基適當地保護。任選地和/或另外地，R2基團可藉由其中R2為_0R3、-NR3R4或-SR3的化合物HR2 與對應于其中R2為-OH的式(I)肽的互補片段的反應而引入，該反應在適當的溶劑和尤其是堿諸如N，N-二異丙基乙胺(DIEA)或三乙胺，或添加劑諸如I-羥基苯并三唑(HOBt) 或I-羥基氮雜苯并三唑(HOAt)和脫水劑諸如碳二亞胺、脲鹽、鱗鹽或脒基鹽(amidinium salt)的存在下進行；或藉由以例如亞硫酰氯預先形成酰基鹵化物而引入，藉以獲得根據本發明通式(I)的肽，其中具有不牽涉入N-C鍵形成作用的官能團的片段以暫時或永久性保護基適當地保護，或可選地，其他R2基團可藉由在從聚合物支撐物裂解肽的過程中同時并入而引入。本領域技術人員可容易理解，C-末端和N-末端的脫保護/裂解步驟及其后續的衍生作用可根據現有技術中已知的方法以不同順序進行[Smith Μ. B.和March J. (1999) “March ' s Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms and Structure (March高級有機化學反應、機理和結構)”,第5版，John ffiley&Sons, 2001]。術語“保護基”是關于封閉官能性有機基團且可在受控制條件下移除的基團。保護基、其相關反應性和保持其為惰性的條件是本領域技術人員已知的。氨基的代表性保護基的實例尤其為酰胺，諸如酰胺乙酸酯、酰胺苯甲酸酯、酰胺特戊酸酯；氨基甲酸酯，諸如芐氧基羰基(Cbz或Z)、2-氯芐基(ClZ)、對-硝基芐氧基羰基 (pNZ)、叔丁氧基羰基(Boc)、2，2，2-三氯乙基氧基羰基(Troc)、2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基(Teoc)、9_荷甲氧基羰基(Fmoc)或烯丙氧基羰基(Alloc)、三苯甲基(Trt)、甲氧基三苯甲基(Mtt)、2，4-二硝基苯基(0即)、^[1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代亞環己-1-基)乙基(Dde)、1-(4,4_ 二甲基-2,6- 二氧代_亞環己基)_3_甲基丁基(ivDde)、1_(1_金剛燒基)-I-甲基乙氧基羰基(Adpoc),優選為Boc或Fmoc。羧基的代表性保護基的實例尤其為酯，諸如叔丁酯(tBu)、烯丙酯(All)、三苯基甲酯(三苯甲酯，Trt)、環己酯(cHx)、芐酯(Bzl)、鄰-硝基芐酯、對-硝基芐酯、對-甲氧基節酯、二甲娃燒基乙酯、2-苯基異丙酯、荷甲酯(Fm)、4_(N-[I-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亞環己基)-3-甲基丁基]氨基)芐酯(Dmab);本發明優選的保護基為All、tBu、cHx、Bzl 和Trt酯。三官能性氨基酸的側鏈可在合成過程期間以與N-末端和C-末端的保護基互不相關的暫時性或永久性保護基保護。精氨酸側鏈的胍基可使用以下基團保護尤其是硝基、烯丙氧基羰基(Alloc)、 對-甲苯磺酰基(tosyl,Tos)、2, 2, 5, 7,8-五甲基色滿-6-磺酰基(Pmc)、2，2,4,6, 7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰基(Pbf)或4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基(Mtr);組氨酸側鏈的咪唑基可使用以下基團保護尤其是甲苯磺酰基(Tos)、叔丁氧基羰基(Boc)、三苯甲基(Trt)、甲氧基三苯甲基(Mtt)或2，4-二硝基苯基(Dnp);且天冬酰胺側鏈的酰胺基可使用三苯甲基(Trt)或占噸基(Xan)保護，或不經保護地使用。、
在優選的實施方案中，所使用的保護基策略為其中氨基以Boc保護，羧基以Bzl、 cHx或Al I酯保護，精氨酸側鏈以Mtr或Tos保護，天冬酰胺側鏈不經保護地使用，組氨酸側鏈以Tos或Dnp保護的策略。在另一優選的實施方案中，所使用的保護基策略是其中氨基以Fmoc保護，羧基以 tBu.All或Trt酯保護，精氨酸側鏈以Pmc或Pbf保護，天冬酰胺側鏈以Trt保護且組氨酸側鏈以Trt或Mtt保護的策略。這些與其他另外的保護基的實例、其引入和移除可見于文獻[Greene T. ff.和Wuts P. G. M. , (1999)“Protective groups in organic synthesis (有機合成中的保護基)”John ffiley&Sons, New York ；Atherton B.和 Sheppard R. C. (1989) “Solid Phase Peptide Synthesis A practical approach(固相妝合成實用方法)” IRL Oxford University Press]。術語“保護基”也包括在固相合成法中使用的聚合物支撐物。當合成完全或部分在固相上進行時，本發明方法中所使用的可能的固態支撐物可包括聚苯乙烯支撐物、接枝于聚苯乙烯的聚乙二醇和類似物，例如且不限于對甲基二苯甲胺(MBHA)樹脂[Matsueda G. R.和 Stewart J. M. (1981) “A p-methylbenzhydryIamine resin for improved solid-phase synthesis of peptide amides (用于妝酉先胺類改進的固相合成的對-甲基二苯甲胺樹脂)” P印tides 2 :45-50]、2-氯三苯甲基樹脂[[Barlos K. , Gatos D. , Kallitsis J. , Papaphotiu G. , Sotiriu P. , Wenqing Y.和 Schdfer ff. (1989)“Darstellung geschiitzter Peptid-Fragmente unter Einsatz substituierter Tripheny Ime thy I-Harze^ Tetrahedron Lett. 30 :3943-3946 ；Barlos K. , Gatos D., Kapolos S. ,Papaphotiu G. , Schafer ff.和Wenqing Y. (1989)“Veresterung von partiell geschiitzten Peptid-Fragmenten mit Harzen.Einsatz von 2-ChlorotrityIchiorid zur Synthese von Leul -Gastrin I，，Tetrahedron Lett. 30 :3947-3951]、TentaGel .樹脂((Rapp Polymere GmbH)、ChemMatrix ⑧樹脂(Matrix Innovation, Inc)和類似物，其可包括或不包括不穩定的接頭，諸如5-(4-氨甲基-3，5-二甲氧基苯氧基)戊酸 (PAL) [Albericio F.，Kneib-Cordonier N.，Biancalana S.，Gera L.，Masada R. I.， Hudson D.和 Barany G. (1990) “Preparation and application of the 5-(4-(9-flu orenylmethyloxycarbonyI)aminomethyl-3,5-dimethoxy phenoxy)valeric acid (PAL) handle for the solid-phase synthesis of C—terminal peptide amides under mild conditions (用于在溫和條件下操縱C端肽酰胺類固相合成的5-(4-(9-芴基甲基氧羰基)氨甲基-3，5-二甲氧基苯氧基)戊酸(PAL)的制備和應用)”J. Org. Chem. 55 3730-3743]、2_(AM)[Rink H. (1987) “Solid-phase synthesis of protected peptide fragments using a trialkoxy-dipheny 1-methyl ester resin (利用三焼氧基-二苯基-甲基酯樹脂固相合成受保護的肽片段)” Tetrahedron Lett. 28 :3787-3790]、Wang [Wang S.S. (1973) ^p-Alkoxybenzyl Alcohol Resin and p-Alkoxybenzyloxycarbonylhydrazi de Resin for Solid Phase Synthesis of Protected Peptide Fragments (用于固相合成受保護的肽片段的對烷氧基芐醇樹脂和對烷氧基芐氧羰基肼樹脂)”J. Am. Chem. Soc. 95 1328-1333]和類似物，允許同時將肽脫保護和從聚合物支撐物裂解肽。化妝用組合物或藥物組合物在這方面，本發明的另一方面為化妝用組合物或藥物組合物，其包含至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽、連同至少一種化妝品上或藥學上可接受的佐劑。這些組合物可以本領域技術人員已知的慣用方法制備[“Harry，s Cosmeticology (Harry 化妝品學)”,第 8 版(2000) Rieger Μ. M.，編著，New York Chemical Pub.，NY,US ;“Remington :The Scien ce and Practice of Pharmacy (雷明頓藥學理論和實踐)”，第 20 版(2003) Genaro A. R.,編著,Lippincott ffilliams&ffilkins, Philadelphia,US]。根據其序列的性質或在N-末端和/或C-末端上任何可能的修飾，本發明的肽在水中具有不同的溶解度。因此，本發明的肽可以水溶液摻入組合物中，不溶于水的那些肽可溶解于化妝品上或藥學上可接受的慣用溶劑中，例如且不限于乙醇、丙醇、異丙醇、丙二醇、 甘油、丁二醇或聚乙二醇或其任何組合。應施用本發明的肽的化妝品上或藥學上有效量以及其劑量將取決于許多因素，包括患者的年齡、狀態、待治療、護理和/或預防的病況、病癥或疾病的性質或嚴重性、施用途徑和頻率及尤其是待使用的肽的性質。應理解，“化妝品上和藥學上有效量”是指無毒性但足以提供所需效果的本發明的肽或肽類的量。本發明的肽以實現所需效果的化妝品上或藥學上有效濃度用于本發明的化妝用組合物或藥物組合物中；在優選形式中，以組合物總重量計介于O. 00000001% (以重量計)至20% (以重量計)之間；優選介于O. 000001 % (以重量計)至20% (以重量計)之間，更優選介于O. 0001% (以重量計)至10% (以重量計)之間，且再更優選介于 O. 0001% (以重量計)至5% (以重量計)之間。本發明的肽還可被摻入化妝品或藥物遞送系統和/或持續釋放系統中。術語“遞送系統”是關于與本發明的肽一起施用的稀釋劑、佐劑、賦形劑或載體。這些化妝用或藥學載體可為液體,諸如水、油或表面活性劑,包括石油、動物、植物或合成來源的，諸如且不限于花生油、大豆油、礦油、芝麻油、蓖麻油、聚山梨醇酯、山梨醇酐酯、醚硫酸酯、硫酸酯、甜菜堿、糖苷、麥芽糖苷、脂肪醇、壬苯聚醇(nonoxynol)、泊洛沙姆 (poloxamer)、聚氧乙烯、聚乙二醇、右旋糖、甘油、毛地黃阜苷和類似物。在E. ff. Martin 白勺"Remington' s Pharmaceutical Sciences (雷明頓藥學理論和實踐)"中，描述了作為適當的載體的稀釋劑、佐劑或賦形劑。術語“持續釋放"以慣用意義使用，是關于在一段時間提供逐漸釋放化合物的此化合物遞送系統，優選在整個一段時間具有相對恒定的化合物釋放水平，盡管非必需。 遞送系統或持續釋放系統的實例有脂質體、混合脂質體、油質體、類脂囊泡 (niosome)、醇質體(ethosome)、毫米微粒(milliparticle)、微粒、納米微粒和固態脂質納米微粒、納米構造的脂質載體、海棉、環糊精、囊泡、膠束、表面活性劑混合膠束、表面活性劑-磷脂混合膠束、毫米微球、微球和納米微球、脂質微球、毫米微膠囊、微膠囊和納米微膠囊，以及微乳劑和納米乳劑，可添加這些以實現更大的活性成分滲透和/或改善其藥代動力學與藥效學性質。優選的遞送或持續釋放系統為脂質體、表面活性劑-磷脂混合膠束和微乳劑，更優選為具有反膠束的內部結構的油包水型微乳劑。持續釋放系統可以現有技術中已知的方法制備，且含有該系統的組合物可以例如局部或經皮施用，包括粘性貼片、非粘性貼片、閉合型貼片和微電貼片，或以全身性施用，例如且不限于口服或腸胃外，包括鼻、直腸或皮下植入或注射，或直接植入或注射至特定身體部位，優選地應釋放相對恒定量的本發明的肽。持續釋放系統中所含的肽量將取決于例如待施用組合物的位置、本發明肽的釋放動力學和持續時間，以及待治療和/或護理的病況、 病癥和/或疾病的性質。本發明的肽還可吸附于固態有機聚合物或固態無機支撐物上，諸如且不限于尤其是滑石、膨潤土、硅石、淀粉或麥芽糊精。含有本發明肽的組合物還可被摻入與皮膚直接接觸的織物、非織造織物和醫療裝置中，從而釋放本發明的肽，不論經由與織物、非織造織物或醫療裝置的結合系統的生物降解，或經由織物、非織造織物或醫療裝置與身體之間的摩擦、因身體濕度、皮膚pH或體溫而釋放。此外，可使用織物和非織造織物制造與身體直接接觸的衣物。優選地，使用含有本發明肽的織物、非織造織物和醫療裝置以治療和/或護理通過刺激Hsp合成而改善或預防的病況、病癥和/或疾病。為上述的遞送系統和/或持續釋放系統的織物、非織造織物、衣物、醫療裝置和用于固定肽于其上的設備(means)的實例可見于文獻且為現有技術已知的[Schaab C. K. (1986) " Impregnating Fabrics With Microcapsules (用微膠囊浸潰織物)",HAPPI May 1986 ；Nelson G. (2002) “Application of microencapsulation in textiles (微膠囊化在紡織品中的應用)” Int. J. Pharm. 242 :55-62 ;“Biofunctional Textiles and the Skin (生物功能的紡織品與皮膚)”(2006) Curr. Probl. Dermatol.第 33 卷,Hipler U. C.和 Elsner P.，編著.S.Karger AG, Basel, Switzerland ；Malcom R. K. ；McCullagh S.D., Woolfson A. D. , Gorman S. P. , Jones D. S. y Cuddy J. (2004) “Controlled release of a model antibacterial drug from a novel self-lubricating silicone biomaterial(模式抗細菌藥從新型自潤滑硅酮生物材料的控制釋放)” J. Cont. Release 97 =313-320]。優選的織物、非織造織物、衣物和醫療裝置為繃帶、紗布、T恤、襪子、褲襪、內衣、腰帶、手套、尿布、衛生巾、敷料、床罩、擦拭物、粘性貼片、非粘性貼片、閉合型貼片、微電貼片和/或面罩 (face mask)。含有本發明的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽的化妝用組合物或藥物組合物可以不同類型的局部或經皮施加的組合物使用，任選地包括用于配制所需施用形式必需的化妝品上或藥學上可接受的賦形劑[Faulii Trillo C. (1993)的“Tratado de Farmacia Galenica，，，Luzcin 5, S. A. Ediciones, Madrid]。局部或經皮施用的組合物可制成任何固態、液態或半固態制劑，諸如且不限于乳霜(cream)、復合乳劑(multiple emulsion),諸如且不限于水包油型和/或水包娃酮型乳齊U、油包水型和/或硅酮包水型乳劑、水/油/水或水/硅酮/水型乳劑和油/水/油型或硅酮/水/硅酮型乳劑、無水組合物、水性分散液、油、奶狀物(milk)、香脂(balsam)、泡沫(foam)、洗劑(lotion)、凝膠、乳膠(cream gel)、水醇溶液、水二醇溶液(hydroglycolic solution)、水凝膠、搽劑(liniment)、衆液(sera)、阜(soap)、洗發劑(shampoo)、潤發乳 (conditioner)、衆液(serum)、多糖膜(polysaccharide film)、軟膏(ointment)、摩絲 (mousse)、潤發油(pomade)、粉劑(powder)、棒劑(bar)、筆劑(pencil)和噴霧劑(spray) 或氣霧劑(aerosol)(噴霧劑)，包括免沖洗型(leave-on)和沖洗型(rinse-ofT)制劑。這些局部或經皮施用的制劑可使用本領域技術人員已知的技術摻入不同類型的固態附件中， 諸如且不限于繃帶、紗布、T恤、襪子、褲襪、內衣、腰帶、手套、尿布、衛生巾、敷料、床罩、擦拭物、粘性貼片、非粘性貼片、閉合型貼片、微電貼片或面罩，或可將這些制劑摻入不同化妝產品中，尤其諸如粉底，諸如液態粉底和粉餅、卸妝液、卸妝乳、眼部遮瑕霜、眼影、唇膏、護唇膏、唇彩和唇粉。
本發明的化妝用組合物和藥物組合物可包括增加本發明的肽經皮吸收的劑，諸如且不限于尤其是二甲亞砜、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、表面活性劑、氮酮(I-十二烷基氮雜環庚烷-2-酮)、醇、尿素、乙氧基二甘醇、丙酮、丙二醇或聚乙二醇。此外，本發明的化妝用組合物或藥物組合物可以離子電滲(iontophoresis)、超聲波導入(sonophoresis)、 電穿孔、微電貼片、機械壓力、滲透壓梯度、閉塞治療(occlusive cure)、微注射、或借助壓力的無針注射諸如借助氧壓注射或其任何組合的方式施用于待治療的局部區域，以實現本發明肽的更大滲透。施用區域由待治療和/或護理的病況、病癥和/或疾病的性質而決定。另外，含有本發明的肽、其立體異構體或其化妝品上或藥學上可接受的鹽的化妝用組合物可以不同類型的口服施用制劑使用，優選以口服化妝品和藥學藥物形式，諸如且不限于膠囊，包括明膠膠囊、軟膠囊、硬膠囊、片劑包括糖衣片劑、粉末劑、顆粒劑、咀嚼膠、 溶液、懸浮液、乳劑、糖漿、多糖膜、凍膠或明膠，和本領域技術人員已知的任何其他形式。尤其是，本發明的肽可被摻入任何形式的功能性食品或強化食品中，諸如且不限于膳食棒或壓制粉末或未壓制粉末。這些粉末可溶于水、果汁、蘇打水、乳制品、大豆衍生物中，或可被摻入膳食棒中。本發明的肽可與常用于口服組合物或食品補充物的賦形劑和佐劑配制，諸如且不限于食品工業中常用的脂肪成分、水性成分、保濕劑、防腐劑、調質劑、調味劑、香料、 抗氧化劑和著色劑。含有本發明的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽的化妝用組合物或藥物組合物還可以局部或經皮途徑，以及任何其他適當的途徑例如口服或腸胃外途徑施用，為這些途徑的組合物包括配制所需施用形式必需的藥學上可接受的賦形劑。在本發明的上下文中，術語“腸胃外”包括鼻、耳、眼、直腸、尿道、陰道、皮下、皮內、血管內注射諸如靜脈內、肌內、眼內、玻璃體內、角膜內、脊椎內、脊髓內、顱內、宮頸內、 腦內、腦脊膜內、關節內、肝內、胸腔內、氣管內、鞘內和腹膜內，及任何其他類似的注射或輸注技術。施用活性成分的不同的藥物形式和獲得這些形式必需的賦形劑的綜述可見于例如“Tratado de Farmacia Galenica，，，C. Fauli i Trillo, 1993, Luzan 5, S. A. Ediciones, Madrid 中。
在本發明所述的化妝用組合物或藥物組合物中所含有的化妝品上或藥學上可接受的佐劑包括用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的組合物中常使用的另外成分，諸如且不限于熱激蛋白、其他熱激蛋白合成刺激劑、乙酰膽堿受體聚集抑制劑 (acetylcholine-receptor aggregation inhibitor)、肌肉收縮抑制劑、抗膽堿能劑、彈性蛋白酶抑制劑、基質金屬蛋白酶抑制劑、黑色素合成刺激或抑制劑、增白劑或脫色劑、色素原形成劑(pro-pigmenting agent)、仿曬劑、抗老化劑、NO-合酶抑制劑、5 α -還原酶抑制劑、賴氨酰基-和/或脯氨酰基羥化酶抑制劑、抗氧化劑、自由基清除劑和/或抗空氣污染劑、反應性羰基物類清除劑、抗糖化劑、抗組織胺劑、抗病毒劑、抗寄生劑、乳化劑、潤膚劑(emollient)、有機溶劑、液體推進劑、皮膚調理劑,諸如保濕劑(humectant)、保濕物質、 α羥酸、β羥酸、濕潤劑、表皮水解酶、維生素、氨基酸、蛋白質、顏料或著色劑、染料、膠化聚合物、增厚劑、表面活性劑、軟化劑、防皺劑(anti-wrinkle agent)、能夠減輕或治療眼袋的劑、去角質劑、抗微生物劑、抗真菌劑、抑真菌劑、殺細菌劑、抑細菌劑、刺激真皮或表皮大分子合成和/或能夠抑制或阻止其降解的劑，諸如例如膠原合成刺激劑、彈性蛋白合成刺激劑、核心蛋白聚糖合成刺激劑、層粘連蛋白合成刺激劑、防御素合成刺激劑、水通道蛋白合成刺激劑、透明質酸合成刺激劑、纖連蛋白合成刺激劑、乙酰化酶合成刺激劑、刺激脂質與角質層的成分(神經酰胺、脂肪酸等)合成的劑、膠原降解抑制劑、其他抑制彈性蛋白降解的劑、絲氨酸蛋白酶諸如組織蛋白酶G的抑制劑、成纖維細胞增殖刺激劑、角質細胞增殖刺激劑、脂肪細胞增殖刺激劑、黑色素細胞增殖刺激劑、角質細胞分化刺激劑、脂肪細胞分化刺激劑、乙酰膽堿酯酶抑制劑、皮膚松弛劑、糖胺聚糖合成刺激劑、抗角化過度劑、粉刺溶解劑、抗牛皮癬劑、DNA修復劑、DNA防護劑、穩定劑、止癢劑、敏感性皮膚治療和/或護理劑、皮膚緊實劑、除妊娠紋劑、粘合劑、皮脂產生調節劑、解脂劑或脂肪分解刺激劑、抗脂肪小丘劑、止汗劑、愈合刺激劑、愈合輔助劑、表皮再生刺激劑、表皮再生輔助劑、細胞因子生長因子、鎮定劑、消炎劑和/或止痛劑、麻醉劑、作用于毛細血管循環和/或微循環的齊Li、血管生成刺激劑、血管通透性抑制劑、靜脈張力劑(venotonic agent)、作用于細胞代謝的劑、改善真皮-表皮接合的劑、毛發生長誘導劑、毛發生長抑制劑或延緩劑、脫發延緩齊U、防腐劑、香料、螯合劑、植物提取物、精油、海洋提取物、從生物發酵過程獲得的劑、無機鹽、細胞提取物與防曬劑(抗紫外線A和/或B的活性有機或無機光防護劑)，條件是這些另外成分與組合物的其他成分且尤其是與本發明組合物中所含有的通式(I)的肽在物理上與化學上相容。另外，這些另外成分的性質不應不可接受地改變本發明肽的益處。這些另外成分的性質可為合成或天然的，諸如植物提取物，或由生物技術過程或合成過程與生物技術過程的組合獲得。其他的實例可見于CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary&Handbook(國際化妝品原料字典&手冊)，第12版(2008)。在本發明的上下文中，應理解生物技術過程為在生物體或其部分中產生活性成分或其部分的任何過程。
本發明的另一方面涉及一種化妝用組合物或藥物組合物，含有化妝品上或藥學上有效量的至少一種根據通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，以及化妝品上或藥學上有效量的至少一種刺激Hsp合成的提取物、合成化合物或生物發酵產物，諸如且不限于尤其是梨果仙人掌(Opuntia ficus indica)、白柳(Salix alba)、羽扇豆屬(Lupinus spp)、黑麥(Secale cereale)的提取物、紫菜屬 (Porphyra)紅藻的提取物、鹵蟲屬(Artemia)的甲殼類的提取物、荷荷色籽油、葡萄籽提取物、綠茶提取物、香葉基香葉基丙酮、南蛇藤素(celastrol)、鋅及其鹽、2-環戊烯-I-酮、蛋白酶體抑制劑，諸如且不限于尤其是硼替佐米(bortezomib);前列腺素及其衍生物、羥胺及其衍生物，諸如且不限于氯批哌醇(bimoclomol);查耳酮(chalcone)及其衍生物,高滲齊U，諸如且不限于山梨糖醇及其衍生物、甘露醇及其衍生物或甘油及其衍生物、異山梨醇、 脲或水楊酸及其衍生物、或其混合物。本發明的另一方面涉及含有化妝品上或藥學上有效量的至少一種 根據通式(I) 的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽的化妝用組合物或藥物組合物，且該組合物還含有化妝品上或藥學上有效量的至少一種為防皺劑和/或抗老化劑的提取物，諸如且不限于尤其是葡萄(Vitis vinifera)、狗薔薇(Rosa canina)、姜黃(Curcuma longa)、香根鳶尾(Iris pallida)、可可(Theobroma cacao)、銀杏(Ginkgo biloba)、火絨草(Leontopodium Alpinum)或鹽藻(Dunaliella salina)的提取物，或另外至少一種為防皺劑和/或抗老化劑的合成化合物或生物發酵產物，諸如且不限于由 Sederma 銷售的 Matrixyl [INCI :棕櫚酰基五肽 _4]、Matrixyl 3000 [INCI :棕櫚酰基四肽-7、棕櫚酰基寡肽]、Essenskin [INCI :輕基甲硫氨酸I丐]、Renovage[INCI :替普瑞酮(teprenone)]或 Dermaxyl [INCI :棕櫚酰基寡肽]，由 Pentapharm/D SM 銷售的 Vialox [INCI :五肽-3]、Syn _Ake [INCI :二肽二氨基丁酰基芐基酰胺二乙酸酯]、Syn -Coll [INCI :掠櫚酸基三妝-5]、Phytaluronate [INCI :角豆(Ceratonia Siliqua)膠]或 Preregen [INCI :野生大豆(Glycine Soya)(大豆)蛋白、氧化還原酶],由 Laboratoires S6robiologiques/Cognis 銷售的 Myoxinol [INCI :水解的黃秋葵(Hibiscus Esculentus) 提取物]、Syniorage [INCI :乙酰基四肽-11]、Dermican [INCI :乙酰基四肽_9]或 DN-AGE LS[INCI :翅莢決明(Cassia Alata)葉提取物]，由 Exsymol 銷售的 Algisum C [INCI :甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯]或Hydroxyprolisilane CN. [INCI :甲基硅烷醇羥基脯氨酸天冬氨酸酯]，Argireline [INCI :乙酰基六肽_8]、SNAP-7 [INCI :乙酰基七肽-4]、SNAP-8[INCI :乙酰基八肽 _3]、Leuphasyl [INCI 五肽-18]、Inyline [INCI 建議乙酰基六肽-25]、Aldenine [INCI :水解小麥蛋白、水解大豆蛋白、三肽_1]、 Preventhelia [INCI : 二氨基丙酰基三肽-33]、Decorinyl [INCI :三肽-10 瓜氨酸]、 Trylagen [INCI :假交替單胞菌(Pseudoalteromonas)發酵提取物、水解小麥蛋白、水解大豆蛋白、三肽-10瓜氨酸、三肽-I]、Eyeseryl [INCI 乙酰基四肽-5]、肽AC29 [INCI 乙酰基三肽-30 瓜氨酸]、Relistase [INCI 建議乙酰基四肽-30]、Lipochroman-6 [INCI :二甲基甲氧基色原燒醇]>Chromabright [INCI :二甲基甲氧基色滿基棕櫚酸酯]、由Lipotec 銷售的Antarcticine [INCI :假交替單胞菌發酵提取物]或Vilastene [INCI :鹽酸賴氨酸、卵磷脂、三肽-10 瓜氨酸],由 InstitutEuropeen de Biologie Cellulaire 銷售的 Kollaren [INCI :三肽 _1、右旋糖酐]，由 Vincience/ISP 銷售的 Collaxyl IS[INCI 六肽 _9]、Laminixyl IS [INCI :七妝]、Orsirtine GL [INCI :水稻(Oryza Sativa)(稻) 提取物]、D，Orientine IS [INCI :海棗(Phoenix Dactyl if era)(椰棗)種子提取物]、 Phytoquintescine [INCI :單谷小麥(Einkorn)( 一粒小麥(Triticum Monococcum))提取物]或 Quintescine IS [INCI : 二妝-4],由 Infinitec Activos 銷售的 BONT-L-妝 [INCI :棕櫚酰基六肽-19]，由S印pic銷售的De印aline PVB[INCI :棕櫚酰基水解小麥蛋白]或:二棕櫚酰基羥基脯氨酸]，由Gattefoss6銷售的Gatuline Expression [INCI :印度金鈕扣(Acmella oleracea)提取物]、Gatuline In-Tense [INCI 金鈕扣(Spilanthes Acmella)花提取物]或 Gatuline Age Defense 2[INCI:胡桃 (Juglans Regia)(胡桃)種子提取物]，由 Biotechmarine 銷售的 Thalassine [INCI 藻類提取物]，由 Atrium Innovations/Unipex Group 銷售的 ChroNOline [INCI 己酸基四肽-3]或 Thymulen-4[INCI :乙酰基四肽 _2]，由 Coletica/Engelhard/BASF 銷售的 EquiStat [INCI :蘋果(Pyrus Malus)果提取物、野生大豆種子提取物]或Juvenesce[INCI 乙氧基二甘醇和辛酸甘油三酯、視黃醇、熊果酸、維生素K1、伊洛馬司他(Ilomastat)]，由 Mibelle Biochemistry 銷售的 Ameliox[INCI :肌妝、生育酌·、水飛薊(Silybum Marianum) 果提取物]或 PhytoCellTec Malus Domestica[INCI :蘋果(Malus Domestica)果細胞培養物]，由 Silab 銷售的 Bioxilift[INCI :茴芹(Pimpinella Anisum)提取物]或 SMS Anti-Wrinkle [INCI :番蒸枝(Annona Squamosa)種子提取物],Ca2+通道拮抗劑,諸如且不限于阿爾維林(alverine)、錳鹽或鎂鹽、某些仲胺或叔胺、視黃醇及其衍生物、艾地苯醌 (idebenone)及其衍生物、輔酶QlO及其衍生物、乳香酸及其衍生物、GHK及其衍生物和/或鹽類、肌肽及其衍生物、DNA修復酶，諸如且不限于光解酶、T4核酸內切酶V或氯化物通道激動劑。 另外，本發明是關于化妝用組合物或藥物組合物，其包含化妝品上或藥學上有效量的至少一種根據通式(I )的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，且另外含有化妝品上或藥學上有效量的至少一種刺激愈合和/或表皮再生的提取物或提取物組合、或愈合和/或表皮再生的輔助劑，諸如且不限于以下的提取物積雪草(Centella asiatica)、磨香玫瑰(Rosa moschata)、狹葉松果菊(Echinacea angustifolia)、聚合草(Symphytum officinal)、問荊(Equisetum arvense)、貫葉金絲桃(Hypericum perforatum)、細花含羞草(Mimosa tenuiflora)、蘆薈;(Aloe vera)、由 Provital 銷售的Polyplant Epithelizing[INCI :金蓋菊(Calendula officinalis)、金絲桃、母菊(Chamomilla recutita)、迷迭香(Rosmarinus officinalis)]、由 Laboratories Serobiologiques/Cognis 銷售的 Cytokinol LS 9028[INCI :水解酪蛋白、水解酵母蛋白、 鹽酸賴氨酸]、或由 Coletica/Engelhard/BASF 銷售的 Deliner [INCI :玉蜀黍(Zea mays) (玉米)谷粒提取物]、和/或化妝品上或藥學上有效量的刺激愈合和/或表皮再生的至少一種合成化合物、提取物或生物發酵產物，諸如且不限于尤其是鈣粘蛋白、整聯蛋白、選擇蛋白、透明質酸受體、免疫球蛋白、成纖維細胞生長因子、結締組織生長因子、血小板衍生的生長因子、血管內皮生長因子、表皮生長因子、胰島素樣生長因子、角質細胞生長因子、集落刺激因子、轉化生長因子_β、腫瘤壞死因子-α、干擾素、白介素、基質金屬蛋白酶、蛋白質酪氨酸磷酸酶受體、由Lipotec銷售 的Antarcticine [INCI :假交替單胞菌發酵提取物] 或Decorinyl [INCI :三肽-10瓜氨酸]、或其混合物。
本發明另一方面是關于一種化妝用組合物或藥物組合物，其包含化妝品上或藥學上有效量的至少一種根據通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽、且另外含有化妝品上或藥學上有效量的至少一種延遲脫發或誘導毛發生長的提取物或提取物組合，諸如且不限于尤其是款冬(Tussilago farfara)或千葉蓍(Achillea millefolium)的提取物、和/或化妝品上或藥學上有效量的至少一種延遲脫發或誘導毛發生長的化合物，諸如且不限于煙酸酯，諸如煙酸C3-C6烷基酯，諸如煙酸甲基酯或煙酸己基酯、煙酸芐酯或生育酚煙酸酯；類固醇和非類固醇抗炎劑，諸如且不限于氫化可的松、其鹽和衍生物或尼氟滅酸；類視黃醇，諸如且不限于全反式視黃酸或維甲酸、異維甲酸、視黃醇或維生素A及其衍生物，諸如乙酸酯、棕櫚酸酯、丙酸酯、莫維A胺 (motretinide)、依曲替酉旨(etretinate)和反式視黃酸鋒(zinc trans retinoate);抗菌素，諸如且不限于大環內酯、吡喃糖苷和四環素、紅霉素；鈣通道拮抗劑，諸如且不限于肉桂苯哌嗪(cinnarizine)和地爾硫卓(diltiazem);激素,諸如且不限于雌三醇、其類似物或酪氨酸、其類似物和/或其鹽；抗雄激素劑，諸如且不限于氧雄龍(oxendolone)、螺旋內酯或己烯雌酚；抗自由基劑，諸如且不限于二甲亞砜；酯化寡糖，諸如且不限于文獻EP 0211610和EP 0064012中所述的那些；聚己糖酸(hexasaccharide acids)的衍生物，諸如且不限于葡萄糖糖酸(glucose saccharide acid)或文獻EP 0375388中所述的那些; 葡糖苷酶抑制劑，諸如且不限于D-葡糖二酸-1，5-內酰胺或文獻EP 0334586中所述的那些；糖胺聚糖和蛋白聚糖抑制劑，諸如且不限于L-半乳糖-1，4-內酯或文獻EP 0277428中所述的那些；酪氨酸激酶抑制劑，諸如且不限于I-酰胺-I-氰基(3，4-二羥苯基)乙烯或文獻EP 0403238中所述的那些，二氮嗪類，諸如且不限于7-(乙酰基硫基)_4’，5’ - 二氫螺[雄-4-烯_17，2’ -(3H)呋喃]-3-酮、3-甲基_7_氯[2H]-1，2，4-苯并噻二嗪或螺噁嗪1，I- 二氧化物；磷脂，諸如且不限于卵磷脂；水楊酸及其衍生物、羥基羧酸或酮羧酸及其酯、內酯及其鹽；蒽林、二十碳-5,8,11-三烯酸及其酯或酰胺、或米諾地爾(minoxidil)及其衍生物、或其混合物。本發明另一方面涉及一種化妝用組合物或藥物組合物，其包含化妝品上或藥學上有效量的至少一種根據通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，且另外含有化妝品上或藥學上有效量的至少一種防曬劑，諸如且不限于尤其是氨基苯甲酸酯、肉桂酸酯、水楊酸酯、二苯酰甲烷的衍生物、樟腦的衍生物、三嗪的衍生物、二苯甲酮的衍生物、β，β 二苯基丙烯酸酯的衍生物、苯并三唑的衍生物、芐基丙二酸酯的衍生物、苯并咪唑的衍生物、咪唑啉、苯并烯丙基的衍生物、對氨基苯甲酸的衍生物、聚合物和硅酮、烷基苯乙烯的衍生物、金屬氧化物的納米顏料，諸如且不限于二氧化鈦或氧化鋅或基于碳納米管的濾光劑(filter)、或其混合物。本發明另一另外方面涉及一種化妝用組合物或藥物組合物，其包含化妝品上或藥學上有效量的至少一種根據通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，且另外含有化妝品上或藥學上有效量的至少一種來自Hsp家族的蛋白質，諸如且不限于尤其是Hsp70，包括Hsp72和Hsp73、Hsp60、Hsp27或Hsp90。
本發明的一方面涉及至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽在制備用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的化妝用組合物或藥物組合物中的用途。本發明另一方面涉及至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽在制備用于治療和/或護理通過刺激Hsp蛋白質合成而改善或預防的那些病況、病癥和/或疾病的化妝用組合物或藥物組合物中的用途，所述Hsp蛋白質尤其是分子量介于20kDa至IIOkDa間的Hsp家族蛋白質，尤其是介于40kDa至IOOkDa間的分子量，更優選地分子量包含介于60kDa至80kDa間的Hsp蛋白質，特別是分子量為70kDa 的 Hsp 或 Hsp70。在優選實施方案中，通過刺激熱激蛋白刺激而改善或預防的病況、病癥和/或疾病選自大皰性表皮松解癥和脫發癥組成的組，包括癌癥化療所導致的脫發癥。根據優選的實施方案，本發明涉及式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽在制備用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的化妝用組合物或藥物組合物中的用途，所述組合物減輕、延遲和/或阻止因UV輻射、熱應激、氧化應激、滲透壓沖擊、炎癥、缺氧、暴露于污染物、缺少營養和缺乏水合作用所誘導的細胞損壞。根據優選的實施方案，本發明涉及式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽在制備用于治療和/或護理皮膚和/或毛發的化妝用組合物或藥物組合物中的用途，所述組合物減經、延遲或阻止老化和/或光老化的跡象。、
類似地，本發明涉及式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽在制備用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的化妝用組合物或藥物組合物中的用途，所述組合物刺激創傷的愈合和/或表皮再生，優選因糖尿病所致的那些創傷。根據優選的實施方案，本發明涉及式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽在制備用于治療和/或護理皮膚和/或毛發的化妝用組合物或藥物組合物中的用途，所述組合物延遲和/或阻止脫發或誘導毛發生長。用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的化妝用組合物或藥物組合物的實例尤其包括乳霜、復合乳劑，諸如且不限于水包油型和/或水包硅酮型乳劑、油包水型和/或硅酮包水型乳劑、水/油/水型或水/硅酮/水型乳劑和油/水/油型或硅酮/水/硅酮型乳劑、無水組合物、水性分散液、油、奶狀物、香脂、泡沫、洗劑、凝膠、乳凝膠、水醇溶液、水二醇溶液、水凝膠、搽劑、漿液、皂、洗發劑、潤發乳、漿液、多糖膜、軟膏、摩絲、潤發油、粉劑、 棒劑、筆劑和噴霧劑或氣霧劑(噴霧劑)，包括免沖洗型和沖洗型制劑、繃帶、紗布、T恤、 襪子、褲襪、內衣、腰帶、手套、尿布、衛生巾、敷料、床罩、擦拭物、粘性貼片、非粘性貼片、閉合型貼片、微電貼片或面罩、化妝產品，諸如粉底，諸如液態粉底(fluid foundation)和粉餅(compact foundation)、隹P妝液(make-up removal lotion)、隹 P妝乳(make-up removal milk)、眼部遮瑕膏(under-eye concealer)、眼影(eye shadow)、唇膏(lipstick)、護唇膏 (lip protector)、唇彩(lip gloss)和唇粉(lip powder)。含有本發明肽的組合物可如所需地施用于皮膚或可經口服或腸胃外施用以治療和/或護理病況、病癥和/或疾病。本發明涉及的化妝用組合物或藥物組合物可經由離子電滲、超聲波導入、電穿孔、 微電貼片、機械壓力、滲、透壓梯度、閉塞治療、微注射或借助壓力的無針注射諸如借助氧壓注射或其任何組合的方式施用至皮膚，以實現本發明肽的更大滲透。本發明另一方面涉及一種治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的方法，其包括施用化妝品上或藥學上有效量的至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，優選以含有它們的化妝用組合物或藥物組合物的形式。本發明另一方面涉及一種用于治療和/或護理哺乳類，優選人類的通過刺激熱激蛋白優選Hsp70合成而改善或預防的那些病況、病癥和/或疾病的方法；其包括施用有效量的至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，優選地以含它們的化妝用組合物或藥物組合物的形式。 在優選的實施方案中，通過刺激熱激蛋白合成而改善或預防的病況、病癥和/或疾病選自大皰性表皮松解癥和脫發癥組成的組，包括因癌癥化療所導致的脫發癥。本發明另一另外的方面涉及一種治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發的方法，其減輕、延遲和/或阻止因UV輻射、熱應激、氧化應激、滲透壓沖擊、炎癥、缺氧、暴露于污染物、缺少營養和缺乏水合作用所致的細胞損壞；其包括施用有效量的至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，優選地以含它們的化妝用組合物或藥物組合物的形式。根據另外的方面，本發明涉及減少、延遲和/或阻止老化和/或光老化的跡象的治療和/或護理，其包括施用有效量的至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和 /或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，優選地以含它們的化妝用組合物或藥物組合物的形式。本發明另一另外的方面涉及一種用于治療和/或護理皮膚和/或粘膜的方法，其刺激創傷的愈合和/或表皮再生，優選地因糖尿病所致的創傷，其包括施用有效量的至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，優選地以含它們的化妝用組合物或藥物組合物的形式。本發明另一另外的方面涉及一種用于治療和/或護理皮膚和/或毛發的方法，其延遲和/或阻止脫發或誘導毛發生長，其包括施用有效量的至少一種通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，優選地以含它們的化妝用組合物或藥物組合物的形式。在更具體的方面，本發明的治療和/或護理通過局部或經皮施加來進行；優選地， 局部或經皮施加經由離子電滲、超聲波導入、電穿孔、機械壓力、滲透壓梯度、閉塞治療、微注射、借助壓力的無針注射、借助微電貼片或其任何組合來進行。在另一具體的方面，該治療和/或護理經由口服施用來進行。另一特別方面中，該治療和/或護理經由腸胃外施用來進行。施加或施用頻率可取決于各個受治療者的需求和待治療或護理的病況、病癥或疾病的嚴重性而極大地改變，建議的施加或施用范圍從每月一次至每日十次，優選每周一次至每日四次，更優選每周三次至每日三次，再更優選每日一次或兩次。本文提供的以下特定實施例說明本發明的性質。所包括的這些實施例僅以說明為目的，不應解釋為對本文所要求保護的本發明構成限制。
實施例
一般方法所有試劑和溶劑均為合成質量，且未經另外處理地使用。縮寫氨基酸所用的縮寫依照在Eur. J. Biochem. (1984) 138 :9_37 和 J. Biol. Chem. (1989)264 =633-673中所規定的IUPAC-IUB聯合委員會的生化命名規則。 ,樹脂'Ac,乙酸基；DNA,脫氧核糖核酸；Adpoc, 1-(1-金剛燒基)-1-甲基乙氧基-羰基；A11，烯丙基；Alloc，烯丙氧基羰基；AM，2-[4-氨基甲基_(2，4-二甲氧基苯基)] 苯氧基乙酸；Arg，精氨酸；Asn，天冬酰胺；Boc，叔丁氧基羰基；2_BrZ，2-溴芐基氧基羰基； Bzl，芐基；Cbz，羧基芐基；cHx，環己基；ClTrt- ,2-氯三苯甲基樹脂；C1Z，2_氯芐基； cps，厘泊；C-末端，羧基末端；DCM，二氯甲烷；Dde, N_[l_(4，4-二甲基-2，6-二氧代亞環己-I-基)乙基；2，6-diClZ，2，6-二氯芐基；DIEA，N，N-二異丙基乙胺;DIPCDI，N，N，-二異丙基碳二亞胺；Dmab，4-(N-[I-(4，4-二甲基-2，6-二氧代亞環己基)-3-甲基丁基]氨基)芐基；DMEM，Dulbecco修改的Eagle培養基；DMF，N, N- 二甲基甲酰胺；DMS0，二甲亞砜；Dnp，2，4- 二硝基苯酚；DPPC，二棕櫚酰基磷脂酰膽堿；EDTA，乙二胺四乙酸；ELISA，酶聯免疫吸附測定；equiv,當量；ESI_MS,電噴射電離質譜；Fm,荷甲基；Fmoc, 9_荷甲氧基羰基；Gln,谷氨酰胺；grp,葡萄糖調節蛋白質；His,組氨酸；H0At,l_輕基_7_氮雜苯并三唑； H0Bt，l-羥基苯并三唑；HPLC，高效液相色譜；Hsp，熱激蛋白；INCI，國際化妝品成分命名法；丨￥0(^，1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代亞環己基)-3-甲基-丁基；kDa，千道爾頓；Leu，亮氨酸；MBHA，對甲基二苯甲胺；MeCN，乙腈；MeOH，甲醇；MLV，多層囊泡；MPD，最低著色劑量； Mtt，甲氧基三苯甲基或甲基三苯甲基；MTT，3- (4，5- 二甲基噻唑-2-基)_2，5- 二苯基溴化四唑鎗；N-末端，氨基末端；PAL，5-(4-氨基甲基-3，5-二甲氧基苯氧基)戊酸；Palm，棕櫚酰基；PBS,磷酸鹽緩沖鹽水；pNZ,對硝基節氧基羰基；Pro,脯氨酸；rpm,每分鐘轉數；qs, 適量；q. s.p.，適量至；tBu，叔丁基；Teoc，2-(三甲基硅烷基)乙氧基羰基；TFA，三氟乙酸； THF，四氫呋喃；TIS，三異丙基硅烷；Troc，2，2，2-三氯乙氧基羰基；Trt，三苯基甲基或三苯甲基；Trt，三苯甲基；Tyr，酪氨酸；ULV，單層囊泡；UV，紫外線；Z，芐氧基羰基。化學合成所有合成方法在裝配有多孔聚乙烯盤的聚丙烯注射筒或裝配有多孔板的Pyrex 反應器中進行。通過抽氣移除溶劑和可溶試劑。以哌啶_DMF(2 8, v/v) (lXlmin, I X 5min, 5mL/g 樹脂)移除 Fmoc 基團[Lloyd-ffilliams P.，Albericio F.和 Giralt E. (1997) “Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins (合成肽和蛋白的化學方法)”CRC，Boca Raton, FL, USA]。在脫保護、偶合和再次脫保護的各階段之間以DMF (3 X Imin)進行洗滌，每次各使用IOmL溶劑/g樹脂。以3mL溶劑/g樹脂進行偶合反應。偶合的控制藉由進行卻三酮試驗[Kaiser E. , Colescott R. L. , Bossinger C. D.和Cook P. I. (1970)“Color test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides (固相肽合成中用于檢測自由端氨基的顯色試驗)”Anal. Biochem. 34 :595-598]或四氯苯醌(chloranil)試驗[Christensen T. (1979)“A qualitative test for monitoring coupling completen ess in solid-phase peptide synthesis using chloranil (用于在固相肽合成中利用四氯苯醌監測偶合完成程度的定性檢驗)” Acta Chem. Scand. 33B =763-766]而進行。所有合成反應和洗滌在室溫下進行。
HPLC色譜分析以Shimadzu設備(Kyoto, Japan)使用使用恒溫于30°C反相柱進行 (250X4. 0mm, Kromasil C8, 5 μ m, Akzo Nobel, Sweden)。使用乙臆(+0.07% TFA)在水中 (+0. 1% TFA)的梯度以流速lmL/min進行洗脫，且在220nm處進行檢測。實施例I獲得Fmoc-Wn-X111-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-ZtlU-ClTrt- ，其中 AA1 為-L-His_ ；AA2 為-L-His-> -L-Leu-或-L-Pro- ；AA3 為-L-Leu- ；AA4 為-L-Arg-或-L-Asn-;且 n、m、p 和 q為O。將5.71g Fmoc-L-Arg (Pbf)-OH 或 5. 25g Fmoc-L-Asn (Trt) -OH (8. 8mmo1 ； I 當量) 溶于添加有I. 3mL DIEA (7. 6mmol ；0. 86當量)的55mL DCM中，偶合于干燥2-氯三苯甲基樹脂(5. 5g ；8. 8mmol)上。攪拌 5min，之后添加 2. 5mL DIEA (14. 6_1 ；1. 66 當量)。允許混合物反應40min。殘留氯基通過以4. 4mL MeOH處理而封閉。N-末端Fmoc基團如一般方法中所述的脫保護，將7. 77gFmoc-L-Leu-0H(22mmol ； 2,5 當量)在 DIPCDI (3. 39mL, 22mmol, 2. 5 當量)和 HOBt (3. 37g, 22mmol, 2. 5 當量)存在下使用DMF作溶劑偶合至肽基樹脂持續I小時。隨后如一般方法中所述的洗滌樹脂，重復Fmoc基團的脫保護處理，以偶合下一個氨基酸。依照所述實驗方案，順序地偶合13. 63g Fmoc-L-His (Trt)-0H、7. 77g Fmoc-L-Leu-OH 或 7. 42g Fmoc-L-Pro-0H(22mmol ;2· 5 當量)； 且之后 13. 63g Fmoc-L-His (Trt)-OH(22mmoI ；2. 5 當量)，每次均在 3. 37g H0Bt(22mmol ； 2. 5當量)和3. 39mL DIPCDI (22mmol ；2. 5當量)存在下偶合。合成后，肽基樹脂以DCM(5X 3min)洗滌和以氮流干燥。實施例2獲得Fmoc-Wn-Xni-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-Ztl-AM-MBHA- ，其中 AA1 為-L-His- -,AA2 為-L-His-> -L-Leu-或-L-Pro- ；AA3 為-L-Leu- ；AA4 為-L-Arg-或-L-Asn-;且 n、m、p 和 q為O。
官能度為O. 73mmol/g (5mmol)的 6. 85g Fmoc-AM-MBHA 樹脂根據所述一般方法以哌啶-DMF 處理，以移除 Fmoc 基團。16. 22gFmoc-L-Arg(Pbf)-OH 或 14. 92g Fmoc-L-Asn (Trt) -OH(25mmol ;5 當量)在 DIPCDI (3. 85mL ；25mmol ;5 當量)和 HOBt (3. 85g ； 25mmol ；5當量)存在下使用DMF為溶劑摻入到脫保護的樹脂上持續I小時。隨后如一般方法中所述的洗滌樹脂，重復Fmoc基團的脫保護處理，以偶合下一個氨基酸。依先前所述方法，順序地偶合8. 84g FmOC-L-Leu-0H(25mmOl ;5當量)；15.49g Fmoc-L-His (Trt)-OH、8. 84g Fmoc-L-Leu-OH或8. 44g Fmoc-L-Pro-OH (25mmol ;5 當量)；且之后 15. 49gFmoc-L-His(Trt)-0H(25mmol ;5 當量)，每次均在 3. 85g H0Bt(25mmol ;5 當量) 和3. 85mL DIPCDI (25mmol ；5當量)存在下偶合。合成后，肽基樹脂以DCM(5X 3min)洗滌和以氮流干燥。實施例3移除Fmoc N-末端保護基的一般方法。將實施例I和2所得的肽基樹脂的N-末端Fmoc基團如一般方法中所述的脫保護 (20%哌啶于 DMF 中，lX5min+lX20min)。肽基樹脂以 DMF(5X lmin) ,DCM(4X Imin)、二乙醚(4 X lmin)洗滌且在真空下干燥。實施例4
將R1棕櫚酰基引入實施例3所得肽基樹脂上的方法。在I. 53g HOBtdOmmol ；10 當量)和 I. 54mL DIPCDI (IOmmoI ；10 當量)存在下將預溶于DMF(ImL)中的2. 56g棕櫚酸(IOmmol ；10當量)添加至Immol實施例3所得的肽基樹脂。允許其反應15小時，之后樹脂以THF (5 X lmin)、DCM (5 X lmin)、DMF (5 X lmin)、 MeOH (5 X lmin)、DMF (5 X lmin)、THF (5 X lmin)、DMF (5 X lmin)、DCM (4 X lmin)、乙醚 (3 X lmin)洗滌，在真空下干燥。實施例5將R1乙酰基引入實施例3所得肽基樹脂上的方法。將Immol實施例3所得的肽基樹脂在25當量DIEA存在下，使用5mL DMF作為溶劑以25當量乙酸酐處理。允許其反應3011^11，之后以01^(5\11^11)、001(4\11^11)、二乙醚 (4X lmin)洗滌肽基樹脂，在真空下干燥。實施例6從實施例3、4和5所得的肽基樹脂的聚合物支撐物裂解的方法將200mg實施例3、4和5獲得的干燥肽基樹脂于室溫在攪拌下以5mL TFA TIS H2O(90 5 5)處理2小時。將濾液收集于50mL冷二乙醚上，經裝配有多孔聚乙烯盤的聚丙烯注射器過濾，以50mL 二乙醚洗滌5次。在真空下干燥最終沉淀物。將所得肽在MeCN(+0.07% TFA)在!120(+0. 1% TFA)中的梯度進行HPLC分析，顯示所有情況下的純度超過80%。所得肽的身份以ESI-MS確認。實施例7聚合物支撐物的裂解方法和以經取代的R2胺的官能化獲得Ac-Wn-Xm-AA1-AA2-A A3-AA4-Yp-ZtJ-NH-(CH2) 15_CH3，其中 AA1 為 _L_His_ ；AA2 為 _L_His_、_L_Leu_ 或 _L_Pro_ ；AA3 為 _L_Leu_ ；AA4 為 _L_Arg_ 或-L-Asn- ; η、πι、ρ 和 q 為 O。具有完全經保護的側鏈的肽Ac-Wn-Xm-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-Zq-OH是通過以3mL 3% TFA的DCM溶液處理在真空下在KOH存在下預先干燥的150mg實施例5的肽基樹脂Ac-Wn-Xm-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-Zq-OKlTrt- 持續5min來獲得。將濾液收集于50mL冷二乙醚上且該處理重復三次。乙醚溶液于減壓下在室溫下蒸干，將沉淀物再溶于50% MeCN/H20中且凍干。將IOmg所得粗制肽在燒瓶中稱重，添加3當量十六烷基胺和25mL無水DMF。添加2 當量DIP⑶I，于47°C在磁力攪拌下留置反應。由HPLC監測反應，直至初始產物消失，反應于24至48小時后完成。將溶劑蒸干，且以DCM共蒸發兩次。將所得殘留物[具有完全經保護的側鏈的 Ac-Wn-Xm-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-Zq-NH-(CH2)15-CH3]再溶于 25mLTFA_DCM-苯甲醚的混合物(49 49 2)并留置于室溫反應30min。添加250mL冷二乙醚，于減壓下蒸發溶劑，再以乙醚進行兩次另外的共蒸發。將殘留物溶于50% MeCN/H20的混合物中且冷凍干燥。所得肽于MeCN (+0.07% TFA)在!120(+0. 1% TFA)中的梯度中進行HPLC分析，所有情況下顯示超過65%純度。所得肽的身份以ESI-MS確認。實施例8Hsp70合成刺激測定。Hsp70合成刺激是在人類角質細胞系中在本發明肽存在下評價。接種細胞(IO6個細胞/6孔板)并于DM EM中培育24小時，之后于培養基中添加肽至200 μ M，培育另外16至24小時。使用10 μ M蛋白酶體抑制劑MG-132作為陽性對照且使用載體(培養基)作為陰性對照。在培育階段后，以PBS洗滌細胞，溶解且于12，OOOrpm在4°C離心lOmin。收集上清液，通過按照市售試劑盒(DuoSet IC人類/小鼠總HSP70ELISA試劑盒，R&D Systems Inc.)的實驗方案進行競爭型ELISA測定而確定Hsp70水平。表2提供肽的細節，顯示Hsp70刺激水平值大于15%。Hsp70水平按照平均基礎值標準化。
權利要求
1.一種通式⑴的肽， R1-Wn-X111-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-Zq-R2 (I) 其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，特征在于 AA1 為-His-； AA2選自-His-、-Leu-和-Pro-組成的組；AA3 為 _Leu_ ； AA4選自-Arg-和-Asn-組成的組； W、X、Y和Z彼此獨立地選自編碼的氨基酸和非編碼的氨基酸組成的組； n、m、p和q彼此獨立地選擇,且具有介于O至I之間的值； n+m+p+q小于或等于2 ； R1選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的非環狀脂族基、經取代或未經取代的脂環基、經取代或未經取代的雜環基、經取代或未經取代的雜芳基烷基、經取代或未經取代的芳基、經取代或未經取代的芳烷基和R5-CO-,其中R5選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的非環狀脂族基、經取代或未經取代的脂環基、經取代或未經取代的芳基、經取代或未經取代的芳烷基、經取代或未經取代的雜環基和經取代或未經取代的雜芳基烷基；R2選自由下列所組成的組-NR3R4、-OR3和-SR3,其中R3和R4獨立地選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的非環狀脂族基、經取代或未經取代的脂環基、經取代或未經取代的雜環基、經取代或未經取代的雜芳基烷基、經取代或未經取代的芳基、經取代或未經取代的芳烷基； 條件為當AA2為-Leu-, AA4為-Asn-且Y為-Gln-時，則Z不為-Leu-； 且條件為當AA2為-His-, AA4為-Arg-且Y或Z為-Tyr-時，則p+q不為I。
2.如權利要求I所述的肽，特征在于=R1選自H和R5-CO-組成的組，其中R5選自由下列所組成的組經取代或未經取代的C1-C24烷基、經取代或未經取代的C2-C24烯基、經取代或未經取代的C2-C24炔基、經取代或未經取代的C3-C24環烷基、經取代或未經取代的C5-C24環烯基、經取代或未經取代的C8-C24環炔基、經取代或未經取代的C6-C3tl芳基、經取代或未經取代的C7-C24芳烷基、具有3至10個環元的經取代或未經取代的雜環基、及具有2至24個碳原子與I至3個非碳原子和具有I至6個碳原子的烷基鏈的經取代或未經取代的雜芳基燒基。
3.如權利要求2所述的肽，特征在于=R1選自由下列所組成的組H、乙酰基、叔丁酰基、己酰基、2-甲基己酰基、環己烷羧基、辛酰基、癸酰基、月桂酰基、肉豆蘧酰基、棕櫚酰基、硬脂酰基、油酰基和亞油酰基。
4.如權利要求I所述的肽，特征在于=R2為-NR3R4或-OR3，其中R3和R4獨立地選自由下列所組成的組H、經取代或未經取代的C1-C24烷基、經取代或未經取代的C2-C24烯基、經取代或未經取代的C2-C24炔基、經取代或未經取代的C3-C24環烷基、經取代或未經取代的C5-C24環烯基、經取代或未經取代的C8-C24環炔基、經取代或未經取代的C6-C3tl芳基、經取代或未經取代的C7-C24芳烷基、具有3至10個環元的經取代或未經取代的雜環基、及具有2至24個碳原子與I至3個非碳原子和具有I至6個碳原子的烷基鏈的經取代或未經取代的雜芳基烷基。
5.如權利要求4所述的肽，特征在于=R3和R4獨立地選自由下列所組成的組H、甲基、乙基、己基、十_■燒基和十TK燒基。
6.如權利要求I所述的肽，特征在于乂選自由下列所組成的組H、乙酰基、月桂酰基、肉豆蘧酰基和棕櫚酰基，AA2為-L-Leu-，AA4為-L_Arg-，且R2為-NR3R4或-OR3，其中R3和R4獨立地選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基和十六烷基。
7.如權利要求I所述的肽，特征在于乂選自由下列所組成的組H、乙酰基、月桂酰基、肉豆蘧酰基和棕櫚酰基，AA2為-L-Pro-，AA4為-L_Arg-，且R2為-NR3R4或-OR3，其中R3和R4獨立地選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基和十六烷基。
8.如權利要求I所述的肽，特征在于n、m、p和s為O。
9.如權利要求I至8任一項所述的肽，所述肽用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發。
10.如權利要求9所述的肽，所述肽用于治療和/或護理通過刺激至少一種熱激蛋白合成而改善或預防的皮膚、粘膜和/或毛發的那些病況、病癥和/或疾病。
11.如權利要求10所述的肽，特征在于所述熱激蛋白具有介于20kDa至IlOkDa之間的分子量。
12.如權利要求11所述的肽，特征在于所述熱激蛋白為Hsp70。
13.如權利要求9至12任一項所述的肽，特征在于所述治療和/或護理減少、延遲和/或阻止因為UV輻射、熱應激、氧化應激、滲透壓沖擊、炎癥、缺氧、暴露于污染物、缺少營養和缺乏水合作用所造成的細胞受損。
14.如權利要求9至13任一項所述的肽，其中所述治療和/或護理減少、延遲和/或阻止老化和/或光老化的跡象。
15.如權利要求9至14任一項所述的肽，其中所述治療和/或護理延遲和/或阻止脫發或誘導毛發生長。
16.如權利要求9至13任一項所述的肽，其中所述治療和/或護理刺激創傷的愈合和/或表皮再生。
17.如權利要求16所述的肽，其中所述創傷是糖尿病導致的。
18.如權利要求10至16任一項所述的肽，其中所述病癥和/或疾病選自大皰性表皮松解癥和脫發癥組成的組。
19.如權利要求18所述的肽，其中所述脫發癥由癌癥化療所導致。
20.如權利要求9至19任一項所述的肽，其中所述治療和/或護理經由所述肽的局部、經皮、口服或腸胃外施用而進行。
21.如權利要求20所述的肽，其中所述局部或經皮施用經由離子電滲、超聲波導入、電穿孔、機械壓力、滲透壓梯度、閉塞治療、微注射、借助壓力的無針注射、微電貼片或其任何組合而進行。
22.—種制備如權利要求I至8任一項所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽的方法，特征在于所述方法以固相或溶液進行。
23.一種制備如權利要求I至8任一項所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽的方法，特征在于自由氨基的保護基選自由下列所組成的組Boc、Fmoc、Trt、Troc、Teoc、Alloc、Mtt、Z、ClZ、Dnp、Dde、ivDde 和 Adpoc,自由羧基的保護基選自由下列所組成的組tBu、Bzl、cHx、All、Dmab、2-苯基異丙基、Fm和Trt,精氨酸側鏈以選自Tos、Mtr> Pbf和Pmc組成的組的保護基保護，組氨酸側鏈以選自Tos、Dnp、Trt和Mtt組成的組的保護基保護，而天冬酰胺側鏈以Trt基團保護或不經保護地使用。
24.一種化妝用組合物或藥物組合物，包含化妝品上或藥學上有效量的至少一種如權利要求I至9任一項所述的通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽，及至少一種化妝品上或藥學上可接受的賦形劑或佐劑。
25.如權利要求24所述的組合物，特征在于所述通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽以相對于所述組合物總重量計介于O. 000001重量％至20重量％之間的濃度存在。
26.如權利要求25所述的組合物，特征在于所述通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽以相對于所述組合物總重量計介于O. 0001重量％至5重量％之間的濃度存在。
27.如權利要求24至26任一項所述的組合物，特征在于所述通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽被摻入選自由下列所組成的組的化妝品或藥物遞送系統和/或持續釋放系統中脂質體、混合脂質體、油質體、類脂囊泡、醇質體、毫米微膠囊、微膠囊、納米微膠囊、海綿、環糊精、囊泡、膠束、表面活性劑混合膠束、表面活性劑-磷脂混合膠束、毫米微球、微球、納米微球、脂質微球、微乳劑、納米乳劑、迷你微粒、毫米微粒、微粒、納米微粒、固態脂質納米微粒和納米構造的脂質載體。
28.如權利要求27所述的組合物，特征在于所述微乳劑為具有反膠束的內部結構的油包水型微乳劑。
29.如權利要求24至28任一項所述的組合物，特征在于所述通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽被吸附于選自由下列所組成的組的固態有機聚合物或固態無機支撐物上滑石、膨潤土、硅石、淀粉和麥芽糊精。
30.如權利要求24至29任一項所述的組合物，特征在于所述組合物以選自由下列所組成的組的制劑呈現乳霜、復合乳劑、無水組合物、水性分散液、油、奶狀物、香脂、泡沫、洗齊U、凝膠、乳凝膠、水醇溶液、水二醇溶液、水凝膠、搽劑、漿液、皂、洗發劑、潤發乳、漿液、軟膏、摩絲、潤發油、粉劑、棒劑、筆劑、噴霧劑、氣霧劑、膠囊、明膠膠囊、軟膠囊、硬膠囊、片劑、糖衣片劑、顆粒劑、咀嚼膠、溶液、懸浮液、乳劑、糖漿、多糖膜、凍膠和明膠。
31.如權利要求24至30任一項所述的組合物，特征在于所述組合物被摻入選自由下列所組成的組的產品中眼部遮瑕膏、粉底、卸妝液、卸妝乳、眼影、唇膏、唇彩、護唇膏和唇粉。
32.如權利要求24至30任一項所述的組合物，特征在于所述通式(I)的肽、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽被摻入織物、非織造織物或醫療裝置中。
33.如權利要求32所述的組合物，特征在于所述織物、非織造織物或醫療裝置選自由下列所組成的組繃帶、紗布、T恤、褲襪、襪子、內衣、腰帶、手套、尿布、衛生巾、敷料、床罩、擦拭物、粘性貼片、非粘性貼片、閉合型貼片、微電貼片和/或面罩。
34.如權利要求24至33任一項所述的組合物，特征在于所述組合物還包含化妝品上或藥學上有效量的至少一種選自由下列所組成的組的佐劑熱激蛋白、其他熱激蛋白合成刺激劑、乙酰膽堿受體聚集抑制劑、肌肉收縮抑制劑、抗膽堿能劑、彈性蛋白酶抑制劑、基質金屬蛋白酶抑制劑、黑色素合成刺激或抑制劑、增白劑或脫色劑、色素原形成劑、仿曬劑、抗老化劑、NO-合酶抑制劑、5 α -還原酶抑制劑、賴氨酰基-和/或脯氨酰基羥化酶抑制劑、抗氧化劑、自由基清除劑和/或抗空氣污染劑、反應性羰基物類清除劑、抗糖化劑、抗組織胺劑、抗病毒劑、抗寄生蟲劑、乳化劑、潤膚劑、有機溶劑、液體推進劑、皮膚調理劑、保濕劑、保濕物質、α羥酸、β羥酸、濕潤劑、表皮水解酶、維生素、氨基酸、蛋白質、顏料或著色劑、染料、膠化聚合物、增厚劑、表面活性劑、軟化劑、防皺劑、能夠減少或治療眼袋的劑、去角質齊IJ、抗微生物劑、抗真菌劑、抑真菌劑、殺細菌劑、抑細菌劑、刺激真皮或表皮大分子合成和/或能夠抑制或阻止其降解的劑、膠原合成刺激劑、彈性蛋白合成刺激劑、核心蛋白聚糖合成刺激劑、層粘連蛋白合成刺激劑、防御素合成刺激劑、水通道蛋白合成刺激劑、透明質酸合成刺激劑、纖連蛋白合成刺激劑、乙酰化酶合成刺激劑、刺激脂質和角質層的成分神經酰胺、脂肪酸的合成的劑、膠原降解抑制劑、彈性蛋白降解抑制劑、絲氨酸蛋白酶諸如組織蛋白酶G抑制劑、成纖維細胞增殖刺激劑、角質細胞增殖刺激劑、脂肪細胞增殖刺激劑、黑色素細胞增殖刺激劑、角質細胞分化刺激劑、脂肪細胞分化刺激劑、乙酰膽堿酯酶抑制劑、皮膚松弛劑、糖胺聚糖合成刺激劑、抗角化過度劑、粉刺溶解劑、抗牛皮癬劑、DNA修復劑、DNA防護劑、穩定劑、止癢劑、敏感性肌膚治療和/或護理劑、皮膚緊實劑、除妊娠紋劑、粘合劑、皮脂產生調節劑、解脂劑或脂肪分解刺激劑、抗脂肪小丘劑、止汗劑、愈合刺激劑、愈合輔助齊U、表皮再生刺激劑、表皮再生輔助劑、細胞因子生長因子、鎮定劑、消炎劑和/或止痛劑、麻醉劑、作用于毛細血管循環和/或微循環的劑、血管生成刺激劑、血管通透性抑制劑、靜脈張力劑、作用于細胞代謝的劑、改善真皮-表皮接合的劑、毛發生長誘導劑、毛發生長抑制劑或延緩劑、脫發延緩劑、防腐劑、香料、螯合劑、植物提取物、精油、海洋提取物、從生物發酵過程獲得的劑、無機鹽、細胞提取物和防曬劑、抗紫外線A和/或B的活性有機或無機光防護劑、或其混合物。
35.如權利要求34所述的組合物，特征在于所述佐劑是合成來源的或為植物提取物，或從生物技術過程或從合成過程與生物技術過程的組合獲得。
36.如權利要求34至35任一項所述的組合物，特征在于所述佐劑選自熱激蛋白合成刺激劑組成的組。
37.如權利要求34至35任一項所述的組合物，特征在于所述佐劑選自防皺劑和/或抗老化劑組成的組。
38.如權利要求37所述的組合物，特征在于所述防皺劑和/或抗老化劑選自由下列所組成的組乙酰基六肽_8、乙酰基七肽_4、乙酰基八肽-3、五肽-18、乙酰基六肽-25、二氨基丙酰基二肽-33、二肽-10瓜氨酸、乙酰基四肽-5、乙酰基二肽-30瓜氨酸、乙酰基四肽-30、二甲基甲氧基色原烷醇、二甲基甲氧基色滿基棕櫚酸酯、假交替單胞菌(Pseudoalteromonas)發酵提取物、Ca2+通道拮抗劑、視黃醇及其衍生物、艾地苯醌及其衍生物、輔酶QlO及其衍生物、乳香酸及其衍生物、GHK及其衍生物和/或鹽類、肌肽及其衍生物、DNA修復酶、氯化物通道激動劑、水解小麥蛋白、水解大豆蛋白與三肽-I的混合物、鹽酸賴氨酸、卵磷脂與三肽-10瓜氨酸的混合物、及假交替單胞菌發酵提取物、水解小麥蛋白、水解大豆蛋白、三肽-10瓜氨酸與三肽-I的混合物。
39.如權利要求34至35任一項所述的組合物，特征在于所述佐劑選自愈合刺激劑和/或表皮再生刺激劑、和愈合輔助劑和/或表皮再生輔助劑組成的組。
40.如權利要求39所述的組合物，特征在于所述愈合刺激劑和/或表皮再生刺激劑或愈合輔助劑和/或表皮再生輔助劑選自假交替單胞菌發酵提取物和三肽-10瓜氨酸組成的組。
41.如權利要求34至35任一項所述的組合物，特征在于所述佐劑選自脫發延緩劑或毛發生長誘導劑組成的組。
42.如權利要求34至35任一項所述的組合物，特征在于所述佐劑選自防曬劑組成的組。
43.如權利要求34至35任一項所述的組合物，特征在于所述佐劑選自熱激蛋白組成的組。
44.如權利要求43所述的組合物,特征在于所述熱激蛋白為Hsp70。
全文摘要
通式(I)的肽R1-Wn-Xm-AA1-AA2-AA3-AA4-Yp-Zq-R2(I)、其立體異構體、其混合物和/或其化妝品上或藥學上可接受的鹽、制備方法、含有它們的化妝用組合物或藥物組合物、及它們用于治療和/或護理皮膚、粘膜和/或毛發及治療和/或護理通過Hsp刺激而改善或預防的病況、病癥和/或疾病的用途。
文檔編號C07K14/435GK102711790SQ201080047829
公開日2012年10月3日 申請日期2010年10月22日 優先權日2009年10月23日
發明者A·菲爾勒蒙蒂埃爾, C·卡雷諾塞萊馬, J·塞伯里安普切, N·阿爾米尼亞納多梅內克, W·凡丹內斯特, 安娜·森佩雷博內特 申請人:Bcn肽類股份有限公司, 利普泰股份公司