專利名稱：膽酰-l-賴氨酸的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種膽酰-L-賴氨酸的制備方法。
背景技術：
膽酰-L-賴氨酸(6-氨基-2-((4R) ~4~ ((3R，5S，7R，8R，9S，10S，12S，13R，17R) -3， 7，12-三羥基-10，13-二甲基十六氫-IH-環戊[a]菲-17-基)戊酰胺)己酸)是賴熒光素(先前稱為膽酰-賴氨酰熒光素或者CLF;N6-({3'，6' - 二羥基-3-氧代螺 [異苯并呋喃-1(3H)，9'-氧雜蒽]_5_基}氨基硫羰基)-N2-(3，7，12-三羥基-5-膽烷-24-酰)-L-賴氨酸)合成中的關鍵中間體。EP1，003，458(諾金歐洲公司)描述了將熒光膽汁酸衍生物、以及尤其是CLF用于測定人或者動物個體的肝機能的方法。C. O.Mills 等人在 BiocHimica&Biophysica Actal 115 (1991) 151-156 描述了通過 N- ε -CBZ-膽酰-L-賴氨酸(6-(芐氧羰基胺基)_2_ ((4R) -4- ((3R，5S，7R，8R，9S，10S， 125，13札171 )-3，7，12-三羥基-10，13-二甲基十六氫-1!1-環戊[a]菲-17-基)戊酰胺) 己酸)的轉移氫化合成的膽酰-L-賴氨酸。然而，Mills等人描述的操作(workup)工藝需要先用堿(NaOH)然后用酸(HCl)處理反應粗產物，繼之以進行反應粗混合物的色譜純化， 以便獲得想要的不含甲酸鹽的產品。當反應規模增大至生產公斤級(kilo quantities)的中間物時，這種操作工藝既昂貴又變得不可行且不經濟。W002/12267 (諾金歐洲公司)也描述了膽酰_L_賴氨酸的合成。萃取操作工序被用于這個例子中，憑此將甲醇的反應混合物注入至大約7體積的水中。然后用2體積的乙酸乙酯萃取生成的酸性水相兩次，以便除去有機雜質。生成的水溶液被調節至pH 4.5-5.0 并且被冷卻，以便沉淀出想要的產物。在給出的實施例中，在操作工藝中，190g起始物 N-N- ε -CBZ-膽酰-L-賴氨酸需要使用超過22升的溶劑/水。總之，在擴大規模上沒有一個現有的技術方法是可行的，在工業中很久以來一直需要一種可以被安全地和經濟地使用的方法，以便生產千或者數千批膽酰-L-賴氨酸，并且不需要延長的反應時間和精心的操作工序。
發明內容
本發明的主要的目的是提供一種制備膽酰-L-賴氨酸的高產量方法。本發明的另一個目的是提供用相對短的反應時間制備膽酰-L-賴氨酸的方法。本發明的又一個目的是提供制備基本為純品形式的膽酰-L-賴氨酸的方法，并且無需精心的操作工序，并且不需要進行色譜純化。本發明可以通過下列反應圖解來描述
權利要求
1.一種制備膽酰-L-賴氨酸的方法，其包括下述步驟(a)在包含一種以上烷醇的溶劑中，有催化劑的存在下，使N-ε -CBZ-膽酰-L-賴氨酸和氫源起反應；(b)除去所述催化劑；(c)可選地用水稀釋生成的反應混合物，并且可選地調節所述生成的反應混合物的PH 至PH小于或等于大約4;(d)除去大部分烷醇，同時確保所述生成的混合物中的烷醇含量維持在占剩余混合物的大約3% w/w以上；(e)用有機溶劑萃取來自步驟(d)的所述生成的混合物；(f)調節水層的PH至pH大約4.5或者以上，以便膽酰-L-賴氨酸使沉淀；(g)分離沉淀物。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述烷醇是甲醇。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(a)中的所述溶劑是乙醇和甲醇的混合物。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，甲醇對乙醇的比率范圍是5 lv/v至 20 lv/v。
5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，甲醇對乙醇的比率是約10 lv/v。
6.如權利要求1-5中任一項所述的方法，其特征在于，步驟(d)中所述生成的混合物中的烷醇含量維持在占剩余混合物的大約5% w/w以上。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟(d)中所述生成的混合物中的烷醇含量維持在占剩余混合物的大約5-10% w/w的范圍。
8.如上述任一項權利要求所述的方法，其特征在于，步驟(a)中的氫化過程是轉移氫化過程。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述轉移氫化過程利用甲醇中的甲酸。
10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，在大約25°C至45°C下進行所述轉移氫化過程。
11.如權利要求10所述的方法，其特征在于，在大約30°C至45°C下進行步驟(a)中的所述轉移氫化過程。
12.如權利要求10所述的方法，其特征在于，在大約35°C至45°C下進行步驟(a)中的所述轉移氫化過程。
13.如權利要求8-12中任一項所述的方法，其特征在于，如果轉移氫化過程不完全，則除去催化劑，并且添加新鮮催化劑直至觀察到完全轉化，必要時重新定量給料催化劑。
14.如上述權利要求中任一項所述的方法，其特征在于，步驟(e)中萃取過程使用的有機溶劑是乙酸乙酯。
15.基本上如本文所描述的制備膽酰-L-賴氨酸的方法。
全文摘要
一種制備膽酰-L-賴氨酸的方法，包括下述步驟(a)在包含一種以上烷醇的溶劑中在催化劑存在的情況下，使N-ε-CBZ-膽酰-L-賴氨酸和氫源起反應；(b)除去催化劑；(c)可供選擇地用水稀釋生成的反應混合物，并且可供選擇地調節生成的反應混合物的pH至pH小于或等于大約4；(d)除去大部分烷醇，同時確保所述生成的混合物中的烷醇含量維持在占剩余混合物的大約3％w/w以上；(e)用有機溶劑萃取來自步驟(d)的所述生成的混合物；(f)調節水層的pH至pH大約4.5或者以上，以便沉淀出膽酰-L-賴氨酸；(g)分離沉淀物。
文檔編號C07J41/00GK102317304SQ201080008029
公開日2012年1月11日 申請日期2010年2月10日 優先權日2009年2月12日
發明者D·托馬斯, T·H·羅伯特 申請人:諾金公司