專利名稱：白頭翁皂苷類物質在制備抗血吸蟲藥物中的應用及其該物質的制備方法
技術領域：
本發明屬于醫藥、獸藥技術領域，涉及一種白頭翁皂苷類物質在制備抗血吸蟲藥 物中的應用及其該物質的制備方法，該有效組分具有顯著的抗血吸蟲活性，可以用于人或 其它哺乳動物血吸蟲病的預防治療。
背景技術：
白頭翁藥材取自毛茛科白頭翁屬植物白頭翁(Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel)的干燥根，味苦，性寒。歸胃、大腸經，具清熱解毒，涼血止痢之功。用于熱毒血痢， 陰癢帶下，阿米巴痢。據文獻報道，白頭翁中含原白頭翁素(Protoanemonin)、白頭翁素 (Anemonin)、白頭翁靈(Okinalin，C32H4602)、白頭翁英(Okinalein，C4H602)等，近年來國 內外學者從白頭翁屬植物中分離鑒定出幾十種五環三萜皂苷成分，這些皂苷主要為齊墩果 烷型和羽扇豆烷型兩種。白頭翁屬植物具有廣泛的藥理及生物活性，主要表現在抗腫瘤、抗 炎抗菌、抗病毒、細胞凋亡、抗生物酶、殺蟲、殺精等作用。蘭繼毓等研究發現白頭翁煎劑對 殺滅溶組織內阿米巴的效果較好。經檢索，沒有發現白頭翁藥材及其有效組分具有抗血吸 蟲活性的文獻報道。經過反復研究發現白頭翁水提液及醇提液均具有較強的抗血吸蟲活性，經過了系 統研究，準備開發以白頭翁有效組分為主要成分，用于預防或治療人或其它哺乳動物血吸 蟲病的藥物。但白頭翁水提液及醇提液作為混合物中混有部分不起作用的物質，需要大劑量使 用才有足夠的抗血吸蟲活性。將白頭翁水提液及醇提液的混合物精制得到單一成分的化合物，有望確保足夠的 抗血吸蟲活性的前提下，減少劑量。而單一成分的抗血吸蟲活性化合物和減少劑量是藥物 產業化中的兩個非常重要的因素。
發明內容
本發明提供一種白頭翁皂苷類物質在制備抗血吸蟲藥物中的應用及其該物質的 制備方法，該有效組分屬于單一成分的化合物，在低劑量的狀況下具有顯著抗血吸蟲活性， 可以用于人或其它哺乳動物血吸蟲病的預防治療。本發明所述的白頭翁皂苷類物質是單一成分的化合物，其化學名稱為 3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28_0_ α -L-吡喃鼠李 糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。3-0- α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用0-95%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加熱回流提取2-3次，每次l-3h，過濾，合并濾液。上述濾液于50-70°C減壓濃縮至0. 5-1. Og生藥 材/mL，0-4°C冷藏過夜，析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干 燥，收集干浸膏或噴干粉，即得白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過DlOl或AB-8或ADS-17大孔樹脂吸附，依次 用水、35-45%乙醇、95%乙醇洗脫，收集35-45%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明 35-45%乙醇洗脫部分為白頭翁抗血吸蟲有效部位。第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。或者第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用5-95%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加 熱回流提取2-3次，每次l_3h，過濾，合并濾液。上述濾液于50-70°C減壓濃縮至0. 5-1. Og 生藥材/mL，0-4°C冷藏過夜，析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進 行干燥，收集干浸膏或噴干粉，即得白頭翁提取物。其余技術方案類似。3-0- a -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷作為 單一成分的化合物可以用于制備人或其它哺乳動物血吸蟲病的預防治療，該單一成分的化 合物可以作為活性成分與藥物載體配制成藥劑學上的各種制劑，該單一成分的化合物在制 劑中的分散狀態可以是液體，也可以是固體，該制劑的給藥途徑可以是口服、注射和局部給 藥。通過藥理研究發現，3-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a _L_吡喃阿拉伯糖常春藤 皂苷元觀-0_ a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖 苷具有較強的抗血吸蟲作用。藥理研究結果如下1、化合物對20例尾蚴作用，0. M^ig/ml、一分鐘100%死亡。2、化合物對20例毛蚴作用，0. M^ig/ml、一分鐘100%死亡。3、化合物對20例蟲卵的作用，0. 244mg/mll小時和M小時卵出生率為0。4、體外化合物對20例成蟲的作用，8. 8mg/ml、100 %死亡和陽性對照吡奎酮 8. 8mg/ml作用相當。5、體內化合物對血吸蟲作用連續灌胃5天，劑量為40mg/Kg，減蟲率達到100%，
重復三次試驗，結果相近。6、化合物的PTS單體體外抗血吸蟲作用，藥物濃度8. 8 μ gl/mL ；用藥后16h即有 50%的蟲體死亡，洗滌后24h時蟲體已全部死亡。
其中化合物的PTS單體體外抗血吸蟲作用特別能體現充分的抗血吸蟲活性化合 物和低減少劑量兩大優點。附圖標記
圖1是本發明化合物的分子結構式；
圖2是本發明化合物的HPLC色譜圖；圖3為本發明化合物的負離子LC/MS/MS圖譜；圖4為本發明化合物的正離子LC/MS/MS圖譜。
具體實施例方式實施例l、3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用0-95%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加熱回 流提取2-3次，每次l-3h，過濾，合并濾液。上述濾液于50-70°C減壓濃縮至0. 5-1. Og生藥 材/mL，0-4°C冷藏過夜，析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干 燥，收集干浸膏或噴干粉，即得白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過DlOl或AB-8或ADS-17大孔樹脂吸附，依次 用水、35-45%乙醇、95%乙醇洗脫，收集35-45%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明 35-45%乙醇洗脫部分為白頭翁抗血吸蟲有效部位。第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；
第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。實施例2、3-0-a -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用70%乙醇浸泡0. 5h，12倍量加熱回流提取2 次，每次池，過濾，合并濾液。上述濾液于50°C減壓濃縮至0. 5g生藥材/mL，0°C冷藏過夜， 析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干 粉，即得白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過DlOl大孔樹脂吸附，依次用水、40%乙醇、 95%乙醇洗脫，收集40%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明40%乙醇洗脫部分為 白頭翁抗血吸蟲有效部位。
第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；
第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。實施例3、3-0_a -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用60%乙醇浸泡池，6倍量加熱回流提取33 次，每次lh，過濾，合并濾液。上述濾液于70°C減壓濃縮至l.Og生藥材/mL，4°C冷藏過夜， 析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干 粉，即得白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過AB-8大孔樹脂吸附，依次用水、35%乙醇、 95%乙醇洗脫，收集35%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明40%乙醇洗脫部分為 白頭翁抗血吸蟲有效部位。第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；
第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。實施例4、3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用80%乙醇浸泡lh，8倍量加熱回流提取2次， 每次2h，過濾，合并濾液。上述濾液于60°C減壓濃縮至0. Sg生藥材/mL，2°C冷藏過夜，析 膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干粉， 即得白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過ADS-17大孔樹脂吸附，依次用水、45%乙 醇、95%乙醇洗脫，收集45%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明40%乙醇洗脫部分為白頭翁抗血吸蟲有效部位。第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；
第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。實施例5、3-0_a -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用95%乙醇浸泡lh，8倍量加熱回流提取2次， 每次2h，過濾，合并濾液。上述濾液于60°C減壓濃縮至0. Sg生藥材/mL，2°C冷藏過夜，析 膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干粉， 即得白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過ADS-17大孔樹脂吸附，依次用水、45%乙 醇、95%乙醇洗脫，收集45%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明40%乙醇洗脫部分 為白頭翁抗血吸蟲有效部位。第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；
第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。實施例6、3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用5%乙醇浸泡lh，8倍量加熱回流提取2次， 每次2h，過濾，合并濾液。上述濾液于60°C減壓濃縮至0. Sg生藥材/mL，2°C冷藏過夜，析 膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干粉， 即得白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過ADS-17大孔樹脂吸附，依次用水、45%乙醇、95%乙醇洗脫，收集45%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明45%乙醇洗脫部分 為白頭翁抗血吸蟲有效部位。第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；
第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。實施例7、3-0-a -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備 方法為第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用水浸泡池，6倍量加熱回流提取33次，每次 lh，過濾，合并濾液。上述濾液于70°C減壓濃縮至l.Og生藥材/mL，4°C冷藏過夜，析膠，濾 過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干粉，即得 白頭翁提取物。第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過AB-8大孔樹脂吸附，依次用水、40%乙醇、 95%乙醇洗脫，收集40%乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明40%乙醇洗脫部分為 白頭翁抗血吸蟲有效部位。第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0) 的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份；第三組甲醇7份水3份；第四組甲醇8份水2份；第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/ MS/MS測試，該化合物為3-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷 元觀-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。實施例8、3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷在制備 抗血吸蟲藥物中的應用。實施例9 用本發明實施例1-7中的方法制備的化合物為原料。1、片劑制備處方(50片)成分重量(g)
本發明化合物 5.0乳糖4.8糊精9微晶纖維素6硬脂酸鎂0.2按照常規片劑的操作方法，以上混合均勻，濕法制粒，最后加入硬脂酸鎂混合均勻 壓制成每片500mg。本發明化合物是3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂 苷元觀-0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。 由實施例1的方法提供。2:膠囊制備處方(90粒)成分重量(g)本發明化合物8乳糖5糊精9微晶纖維素5按照常規片劑的操作方法，以上混合均勻，濕法制粒，灌裝成膠囊，每粒300mg。本發明化合物是3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂 苷元觀-0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。 由實施例2的方法提供。3:巴布劑制備
處方
成分重量(g)
本發明化合物2
聚丙烯酸酯18
月桂氮卓酮0. 6
月桂酸1. 8
丙二醇5. 4
乙酸乙酯15按照通常巴布劑的做作進行，將上述攪拌均勻，涂布于聚酯防粘層上，60度干燥2 分鐘后，覆蓋聚氨基甲酯膜背襯層，切片即可。本發明化合物是3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂 苷元觀-0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。 由實施例3的方法提供。4:粉針劑制備處方成分重量(g)本發明化合物0.05
鹽酸適量甘露醇50按照常規凍干粉針的操作進行，將本發明化合物加適量注射用水溶解，加入甘露 醇，定容至1000ml，調節PH值至4. 0-5. 5之間，除菌過濾，冷凍干燥即得。本發明化合物是3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂 苷元觀-0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。 由實施例4的方法提供。5 水針劑的制備本發明化合物，溶于適量注射用水中，加入計量的注射用水溶性輔料，加 0. 1-0. 5 %的活性炭除去熱原，調節PH至6. 0-7. 5，經微孔濾膜超濾后，補充注射用水至規 定量，灌裝于安瓿瓶中或輸液瓶中，熔封/軋蓋，經檢驗合格后，包裝即得。本發明化合物是3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂 苷元觀-0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。 由實施例5的方法提供。6 滴丸劑制備處方成分重量(g)本發明化合物 0. Ig聚乙二醇6000 IOg聚乙二醇4000 20g聚山梨酯80 0. 3g乙醇Iml制成1000 丸制法將本發明化合物溶解于乙醇中溶解，加入已熔融的聚乙二醇6000、聚乙二 醇4000、聚山梨酯80組成的基質中，充分攪拌至均勻，以二甲基硅油為冷卻劑，15°C下滴制 成丸，擦丸，干燥，即得。本發明化合物是3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂 苷元觀-0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。 由實施例6的方法提供。7:溶液劑制備處方成分重量(g)本發明化合物 10.0蒸餾水IOOOml防腐劑 適量按照常規溶液劑的操作進行，將本發明化合物加適量蒸餾水溶解，加入防腐劑，定 容至1000ml，4°C冷藏過夜，濾過，即得。本發明化合物是3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂 苷元觀-0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。由實施例7的方法提供。 本實施例涉及的該單一成分的化合物可以作為活性成分與藥物載體配制成藥劑 學上的各種制劑，該單一成分的化合物在制劑中的分散狀態可以是液體，也可以是固體，該 制劑的給藥途徑可以是口服、注射和局部給藥。
權利要求
1.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28_0_ α -L-吡 喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷在制備所有藥物中的應用。
2.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28_0_ α -L-吡 喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷在制備抗血吸蟲藥物 中的應用。
3.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28_0_ α -L-吡 喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備方法，其特征 在于第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用0-95%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加熱回流提 取2-3次，每次l-3h，過濾，合并濾液；上述濾液于50-70°C減壓濃縮至0. 5-1. Og生藥材/ mL, 0-4°C冷藏過夜，析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥， 收集干浸膏或噴干粉，即得白頭翁提取物；第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過大孔樹脂吸附，依次用水、35-45%乙醇、95%乙 醇洗脫，收集35-45%乙醇洗脫部分；經抗血吸蟲藥理實驗，證明35-45%乙醇洗脫部分為 白頭翁抗血吸蟲有效部位；第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0)的 混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為 第一組甲醇5份水5份； 第二組甲醇6份水4份； 第三組甲醇7份水3份； 第四組甲醇8份水2份； 第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/MS/ MS測試，該化合物為3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4)-β-D-吡喃葡萄糖_(1 — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。
4.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28_0_ α -L-吡 喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷的制備方法，其特征 在于第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用0-95%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加熱回流提 取2-3次，每次l_3h，過濾，合并濾液；上述濾液于50-70°C減壓濃縮至0. 5-1. Og生藥材/ mL，0-4 °C冷藏過夜，析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥， 收集干浸膏或噴干粉，即得白頭翁提取物；第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過DlOl或AB-8或ADS-17大孔樹脂吸附，依次用 水、35-45 %乙醇、95 %乙醇洗脫，收集35-45 %乙醇洗脫部分；經抗血吸蟲藥理實驗，證明 35-45%乙醇洗脫部分為白頭翁抗血吸蟲有效部位；第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5 5-10 0)的 混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為 第一組甲醇5份水5份；第二組甲醇6份水4份； 第三組甲醇7份水3份； 第四組甲醇8份水2份； 第五組甲醇10份水0份；收集甲醇7份水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/MS/ MS測試，該化合物為3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2)-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 28-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 4) - β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷。
全文摘要
本發明涉及一種白頭翁皂苷類物質在制備抗血吸蟲藥物中的應用及其該物質的制備方法。本發明所述的白頭翁皂苷類物質是單一成分的化合物，其制備方法為將白頭翁藥材粉碎成粗粉，經過乙醇浸泡，回流提取，濃縮干燥，收集干浸膏，干浸膏用水溶解，經過大孔樹脂吸附，收集乙醇洗脫部分。再經反相硅膠柱，收集甲醇與水的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/MS/MS測試，該化合物為3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。
文檔編號C07J63/00GK102068445SQ20101062457
公開日2011年5月25日 申請日期2010年12月31日 優先權日2010年4月30日
發明者馮育林, 劉艷麗, 夏超明, 朱衛豐, 李孝賢, 李笑然, 楊世林, 簡輝, 羅曉健, 許瓊明 申請人:江西中醫學院