專利名稱：具有靶向性溶血栓活性的寡肽、其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及了通式6a_f代表的具有靶向性溶血栓活性的寡肽及其制備方法，進一步涉及它們在大鼠動靜脈旁路插管血栓模型上的溶血栓和抗血栓作用及應用，本發明屬于生物醫藥領域。
背景技術：
P6A(ARPAK)為纖維蛋白β鏈降解產物之一，具有溶血栓活性。在Ρ6Α的代謝研究中發現了代謝產物ΡΑΚ。在大鼠動靜脈旁路插管溶血栓模型上，PAK的溶血栓活性比母體 Ρ6Α強。按照一般的認識，多肽在體內都會迅速降解。通過PAK的結構修飾延緩體內降解速率和提高溶血栓活性，是寡肽溶血栓藥物研究的重要途徑。通過RGD的結構修飾延緩體內降解速率和提高抗血栓活性，是寡肽抗血栓藥物研究的重要途徑。通過PAK和RGD相結合的結構修飾延緩體內降解速率和提高溶血栓活性，是具有溶血栓和抗血栓雙重作用的寡肽藥物研究的重要途徑。按照一般的認識，含多肽的兩親性分子，例如脂肪醇鏈修飾的多肽， 在適當的條件下通過分子間非共價鍵相互作用可發生自組裝，形成納米結構。借助納米結構可改善多肽在體內的輸送、延緩多肽在體內的降解速率和提高多肽的體內活性。根據這些認識，發明人提出了本發明。
發明內容
本發明的一個目的是提供具有靶向性溶血栓活性的寡肽。為了達到上述目的，本發明采用如下技術方案本發明提供一類具有靶向性溶血栓活性的寡肽，如通式6a_f所示
權利要求
1.一類具有靶向性溶血栓活性的寡肽，如通式6a_f所示
2.一種制備權利要求1所述具有靶向性溶血栓活性的寡肽的方法，包括如下步驟1)按照現有液相合成技術，逐步接肽合成B0c-Pr0-Ala-Lys(Z)；2)Boc-Asp (OBzl)與飽和脂肪醇縮合后再脫去側鏈保護基得到Boc-Asp-OCH2 (CH2) nCH3，其中 η = 6、8、10、12、14 或 16 ；3)按照現有液相合成技術，逐步接肽合成Arg(NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl ；4)將Boc-Asp-OCH2 (CH2) nCH3 與 Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl 縮合反應后脫去 N 端保護基得到 Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-OCH2 (CH2) nCH3 ；5)Boc-Pro-Ala-Lys (Z)與 Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-OCH2 (CH2) IiCH3縮合反應后，依次脫去C端保護基、側鏈保護基和N端保護基得到目標化合物。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其中縮合反應是在二環己基碳二亞胺(DCC)存在下于無水THF中進行；脫去N端保護基如Boc是在含氯化氫的乙酸乙酯中進行；脫去C端保護基如OBzl是在甲醇中進行皂化；脫去側鏈保護基如Z、0Bzl、N02是在甲醇中發生氫解。
4.根據權利要求2所述的制備方法，其包括如下步驟1)在二環己基碳二亞胺(DCC)存在下Boc-Pro在無水THF中與對硝基酚(HONp)脫水形成 Boc-Pro-ONp ；2)在含水的二氧六環中Boc-Pro-ONp與L-Ala縮合為Boc-Pro-Ala；3)在DCC和HOBt存在下Boc-Pro-Ala在無水THF中與Lys(Z)-OBzl縮合為 Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl ；4)在甲醇中將Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl 皂化為 Boc-Pro-Ala-Lys(Z)；5)在DCC存在下BoC-ASp(0Bzl)在無水THF中與飽和脂肪醇縮合為 Boc-Asp (OBzl) -OCH2 (CH2) nCH3 ；6)在甲醇中Boc-Asp (OBzl) -OCH2 (CH2) nCH3 氫解為 Boc_Asp-0CH2 (CH2) nCH3 ；7)在DCC和HOBt存在下Boc-Arg(NO2)在無水THF中與Gly-OBzl縮合為 Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl ；8)在甲醇中將Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 皂化為 Boc-Arg(NO2)-Gly ；9)在DCC和HOBt存在下Boc-Asp(OBzl)在無水THF中與Ser (Bzl) -OBzl縮合為 Boc-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl ；10)在含氯化氫的乙酸乙酯中Boc-Asp(OBzl) Ier(Bzl)-OBzl脫除Boc生成 Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-OBzl ；11)在DCC禾口HOBt存在下Boc-Arg(NO2)-Gly在無水THF中與 Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-OBzl 縮合為 Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-OBzl ；12)在含氯化氫的乙酸乙酯中Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (0Bzl)4er zl)-OBzl 脫除 Boc 生成 Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl ；13)在DCC 和 HOBt 存在下 Boc-Asp-OCH2 (CH2) nCH3 在無水 THF 中與 Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl 縮合為 Boc-Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-OCH2 ( CH2) nCH3 ；14)在含氯化氫的乙酸乙酯中Boc-Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-OC H2 (CH2) nCH3 脫除 Boc 生成 Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-OCH2 (CH2) nCH3 ；15)在DCC 和 HOBt 存在下 Boc-Pro-Ala-Lys (Z)在無水 THF 中與 Asp [Arg (NO2) -Gly-A sp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-OCH2 (CH2) nCH3 縮合為 Boc-Pro-Ala-Lys (Z) -Asp [Arg (NO2) -Gly -Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-OCH2 (CH2) nCH3 ；16)在甲醇中Boc-Pro-Ala-Lys (Z) -Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl]-0 CH2 (CH2) nCH3 氫解為 Boc-Pro-Ala-Lys-Asp (Arg-Gly-Asp-Ser) -OCH2 (CH2) n_CH3 ；17)在含氯化氫的乙酸乙酯中Boc-Pro-Ala-Lys-Asp(Arg-Gly-Asp-Ser)-OCH2(CH2) nCH3 脫 Boc 生成 Pro-Ala-Lys-Asp (Arg-Gly-Asp-Ser) -OCH2 (CH2) n_CH3。
5.權利要求1所述的具有靶向性溶血栓活性的寡肽在制備抗血栓藥物中的應用。
全文摘要
本發明提供了通式6a-f(式中n＝6、8、10、12、14和16)代表的6種靶向性溶血栓寡肽，提供了它們的制備方法，進一步提供了它們在大鼠頸動靜脈旁路插管血栓模型上的溶血栓、抗血栓作用，以及自主裝性能。結果表明這6種新型化合物不但具有優秀的溶血栓作用，而且在相同劑量下具有抗血栓活性，這說明本發明中的化合物在溶解血栓的同時有預防新血栓形成的作用優勢，從而提示6a-f代表的6種寡肽在臨床應用中具有更好的前景。
文檔編號C07K7/02GK102485746SQ201010576360
公開日2012年6月6日 申請日期2010年12月1日 優先權日2010年12月1日
發明者彭師奇, 秦天霞, 趙明 申請人:首都醫科大學