專利名稱：一種利用超濾技術從牡蠣中提取天然牛磺酸的方法
技術領域：
本發明涉及到一種海洋海洋活性物質及其提取方法，屬食品科學技術領域。
背景技術：
牡蠣屬雙殼貝類，牡蠣肉含有豐富的蛋白質、氨基酸、糖原及微量元素，是一種營養價值極高的海產品。研究表明，牡蠣具有多種生物活性，如提高機體免疫力、抗疲勞、抗腫瘤、保護肝臟等作用，因此人們開始研究從牡蠣中提取功能物質的方法。在現有技術中，公開號為1313403，專利號為01109816. 3的中國專利申請公開了一種名為“天然牛磺酸生產工藝”的專利文獻，其工藝為以珍珠貝殼為原料，利用蛋白酶、胰酶，食用乳酸、NaoH為輔料， 進行酶解生產富含鈣、天然氨基酸、微量元素的牛磺酸復合物。公開號為100999743，專利號為200710006670. 2的中國專利申請公開了一種名為“一種從牡蠣中提取天然牛磺酸的方法”的專利文獻，其工藝為將牡蠣肉制備成漿液、超聲波-酶解破碎15 20min、滅酶過濾、 濃縮、利用5%的三氯乙酸進行一級分離，之后再利用6%的CTAB進行二級分離、分離液利用活性炭處理、樹脂吸附純化、乙醇沉淀和結晶和干燥最終得到牛磺酸晶體。廣西大學生命科學與技術學院的粟桂嬌在食品科學2005年9期上發表的“車螺肉酶解中提取分離天然牛磺酸工藝”一文中介紹了牛磺酸的提取方法，利用酸性蛋白酶及水解提取牛磺酸，并用Hcl、 NaOH沉淀酸+堿蛋白，H+離子交換樹脂進行分離純化，乙醇沉淀，最后得到牛磺酸晶體。上述方法的缺陷在于1.在酶解后沉淀蛋白的過程中引入了其他雜質離子，為之后的離子分離；2.采用胰酶、酸性蛋白酶都用酸或堿調節pH值，即操作復雜，又引入了雜質 1 子。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提出一種利用超濾技術從牡蠣中提取天然牛磺酸的方法。本發明是通過以下技術方案實現的。本發明是一種利用超濾技術從牡蠣中提取天然牛磺酸的方法，其特點是，(1)原料勻漿，將清洗過的牡蠣肉放入組織攪碎機中攪成糊狀，然后按照固液比為 19添加去離子水；(2)酶解，將上述勻漿液的溫度控制在45°C，在所述的勻漿液中加入中性蛋白酶， 所述的中性蛋白酶的添加量應在1200u/g，然后保溫酶解上述勻漿液，處理時間為他；(3)滅酶離心，酶解完成后，將所述酶解液的溫度提高到100°C，保持IOmin后，用 6000r/min的離心機離心15min ；(4)減壓濃縮，將上述酶解液放到旋轉蒸發儀上進行濃縮，濃縮到原體積的1/60， 得到濃縮液。(5)超濾去除蛋白，將上述酶解液通過10000U的超濾膜，得到蛋白質的分子量低于10000U的酶解液，然后將所述的酶解液通過1000U的超濾膜，進行第二次超濾，得到蛋白質的分子量低于1000U的酶解液。
(6)樹脂的吸附純化，用離子交換吸附法吸附色素和雜質純化所述的超濾酶解液， 得到牛磺酸粗提液；
(7)醇沉，將所述的牛磺酸粗提液中加入4倍體積的無水乙醇，之后將所述的牛磺酸粗提液置于4°C冰箱中過夜，得到牛磺酸沉淀物；
(8)結晶，將所述牛磺酸沉淀物適量溶于水，再放入4倍體積的無水乙醇，既有牛磺酸針狀晶體析出，反復操作，純度提高。
本發明的有益效果是，1.采用超濾法去除酶解液中的蛋白，與傳統方法相比減少了雜離子的引入；2.由于勻漿液的pH值接近中性，采用中性蛋白酶酶解，可以不用調節pH， 操作簡單。
具體實施例方式
實施例一。一種利用超濾技術從牡蠣中提取天然牛磺酸的方法。
(1)原料勻漿，將清洗過的牡蠣肉放入組織攪碎機中攪成糊狀，然后按照固液比為 19添加去離子水；
(2)酶解，將所述勻漿液的溫度控制在45°C，在所述的勻漿液中加入中性蛋白酶， 所述的中性蛋白酶的添加量應在1200u/g，然后保溫酶解上述勻漿液，處理時間為他；
(3)滅酶離心，酶解完成后，將所述酶解液的溫度提高到100°C，保持IOmin后，用 6000r/min的離心機離心15min ；
(4)減壓濃縮，將上述酶解液放到旋轉蒸發儀上進行濃縮，濃縮到原體積的1/60， 得到濃縮液。
(5)超濾去除蛋白，將上述酶解液通過10000U的超濾膜，得到蛋白質的分子量低于10000U的酶解液，然后將所述的酶解液通過1000U的超濾膜，進行第二次超濾，得到蛋白質的分子量低于1000U的酶解液。
(6)樹脂的吸附純化，用離子交換吸附法吸附色素和雜質純化所述的超濾酶解液， 得到牛磺酸粗提液；
(7)醇沉，將所述的牛磺酸粗提液中加入4倍體積的無水乙醇，之后將所述的牛磺酸粗提液置于4°C冰箱中過夜，得到牛磺酸沉淀物；
(8)結晶，將所述牛磺酸沉淀物適量溶于水，再放入4倍體積的無水乙醇，既有牛磺酸針狀晶體析出，反復操作，純度提高。
權利要求
1. 一種利用超濾技術從牡蠣中提取天然牛磺酸的方法，其特征在于包括下述步驟(1)原料勻漿，將清洗過的牡蠣肉放入組織攪碎機中攪成糊狀，然后按照固液比為 19添加去離子水；(2)酶解，將上述勻漿液的溫度控制在45°C，在所述的勻漿液中加入中性蛋白酶，所述的中性蛋白酶的添加量應在1200u/g，然后保溫酶解上述勻漿液，處理時間為他；(3)滅酶離心，酶解完成后，將所述酶解液的溫度提高到100°C，保持IOmin后，用 6000r/min的離心機離心15min ；(4)減壓濃縮，將上述酶解液放到旋轉蒸發儀上進行濃縮，濃縮到原體積的1/60，得到濃縮液。(5)超濾去除蛋白，將上述酶解液通過10000U的超濾膜，得到蛋白質的分子量低于 10000U的酶解液，然后將所述的酶解液通過1000U的超濾膜，進行第二次超濾，得到蛋白質的分子量低于1000U的酶解液。(6)樹脂的吸附純化，用離子交換吸附法吸附色素和雜質純化所述的超濾酶解液，得到牛磺酸粗提液；(7)醇沉，將所述的牛磺酸粗提液中加入4倍體積的無水乙醇，之后將所述的牛磺酸粗提液置于4°C冰箱中過夜，得到牛磺酸沉淀物；(8)結晶，將所述牛磺酸沉淀物適量溶于水，再放入4倍體積的無水乙醇，既有牛磺酸針狀晶體析出，反復操作，純度提高。
全文摘要
一種利用超濾技術從牡蠣中提取天然牛磺酸的方法，屬食品科學技術領域。本方法主要采用以下步驟原料勻漿；酶解離心；超濾去除蛋白；離子交換去除色素及雜質；醇沉結晶。本發明的有益效果是超濾法去除蛋白，減少了其他雜質的引入。本發明的提出對于促進牛磺酸的提取利用以及我國海洋資源的高值化加工具有重要意義。
文檔編號C07C303/44GK102477004SQ20101055227
公開日2012年5月30日 申請日期2010年11月22日 優先權日2010年11月22日
發明者佟海菊, 劉亞南, 孫克巖, 宋欣, 張志勝 申請人:河北農業大學