專利名稱：從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及植物有效成分的分離提取工藝，具體是從毛冬青地上部分分離提取 98%槲皮素的工藝。
背景技術：
槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，具有典型的黃酮醇化學結構，是一種具有多種生物 活性的黃酮類化合物，是黃酮類化合物的主要成分，藥用價值很高。它是一種重要的醫藥原 料和中間體，可作為藥品、保健品，具有良好的祛痰、止咳、平喘作用；并有降低血壓、增強毛 細血管抵抗力、減少毛細血管脆性、降血脂、擴張冠狀動脈，增加冠脈血流量等作用。臨床用 于治療慢性支氣管炎，輔助治療冠心病及高血壓。近些年的研究表明，槲皮素能顯著抑制促癌劑的作用、抑制離體惡性細胞的生長、 抑制艾氏腹水癌細胞DNA、RNA和蛋白質合成；抑制血小板聚集和5-羥色胺(5-HT)的釋放； 對ADP、凝血酶和血小板活化因子(PAF)誘導的血小板聚集均有明顯抑制作用，其中對PAF 的抑制作用最強；明顯抑制凝血酶誘導的兔血小板3H-5-HT釋放。此外，槲皮素具有預防和 減少糖尿病發生、降血糖、抗氧化作用 。我國是槲皮素及其苷_蘆丁的最大出口國，槲皮素 及其系列衍生物因具有多種顯著的藥理活性而廣泛應用于醫藥、保健品、化妝品領域。槲皮素雖廣泛存在于多種植物中，但含量都很低，一般只有0. 1%_1%，目前尚無從 植物中直接分離出高純度的槲皮素的報道，工業生產的槲皮素是以槐米為原料，先生產出 高純度的蘆丁，然后將蘆丁酸水解，再精制成槲皮素。用槐米生產槲皮素，以原料槐米中蘆 丁含量23%計，1噸槐米30000元，生產加工各項費用按8000元，從槐米原料到蘆丁的轉移 率85%，從蘆丁到槲皮素的轉移率85%，1噸槐米可得1000 X 23%X 85%X0. 495 X 85%=82kg槲 皮素，而加工1噸槐米投入成本38000元，即得每kg槲皮素(以槐米為原料)的生產成本為 38000 + 82=463元。而實際生產中，很難做到每批槐米中蘆丁的含量均達到23%，生產成本 就會有所不同，按全年平均生產總和計算，生產成本有的甚至高達550元/kg。槲皮素的市 場價格為50(Γ800元/kg，具體價格受市場行情的制約，生產企業基本上無利可賺。另外，生產技術也有缺陷，用飽和石灰水調節水提液的PH值，降低了蘆丁的提取 率；產品質量也存在問題，從槐米中提取槲皮素含量為96%-98%，少見有98%以上的槲皮素。
發明內容
本發明的目的是為克服現有技術的不足，而提供一種從毛冬青地上部分分離提取 98%槲皮素的工藝。這種工藝不僅能開辟了新的原料來源，而且能提高產量，降低成本，所得 的槲皮素的含量達到HPLC級98%以上。本發明所述槲皮素是以廣西特產的藥用植物一鮮毛冬青(Ilex pubescens Hook, et Arn)的地上部分為原料經切段一弱堿水提一調中濃縮一堿化板框過濾一酸化保溫沉淀 —過濾洗滌一結晶過濾一酸解一抽濾洗滌一脫色結晶一抽濾洗滌一真空干燥制成。具體工 藝包括如下步驟(1)切段取新鮮的毛冬青地上部分切成小段；
(2)弱堿水提將切成的小段投入提取罐中，用PH為8.5^10. 0的Na2CO3水溶液提取 3次，加入提取液的量為藥材重量的5、4、4. 5倍，提取時間為`1. 0,0. 5,0. 5h，提取溫度為 500C 60°C。過濾，合并前2次濾液，第3次濾液套提；
(3)調中濃縮用29Γ4%的稀硫酸將前2次合并濾液的PH調節至6.(Γ7. 0，真空減壓濃 縮至料液比1:0. 6 1. 2，控制真空度彡0. 07Mpa，溫度`50°C 60°C ；
(4)堿化板框過濾將濃縮液投入攪拌罐中，用Na2CO3調節濃縮液PH為9.(Til. 0，攪拌 均勻，然后板框過濾，得濾液；
(5)酸化保溫沉淀將濾液投入帶攪拌的搪瓷罐中，用29Γ4%的稀硫酸調節濾液的PH為 2. (Γ3. 0，于70°C 80°C保溫，然后用水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(6)過濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，并將沉淀洗滌至中性；
(7)結晶過濾將沉淀投入夾層鍋中，采用冷熱水結晶與重結晶法在不斷攪拌下加入濕 沉淀重量120倍的自來水，升溫至溶液呈沸騰狀態，保溫20min，趁熱過濾，濾液用水冷卻至 室溫，靜置沉淀6h，然后抽濾，得蘆丁結晶；
(8)酸解將蘆丁結晶投入帶攪拌的搪瓷罐，加入濕沉淀重量3(Γ40倍、濃度29Γ4%的 稀硫酸，控制溫度70°C 80°C，水解時間2. (Γ3. Oh ；
(9)抽濾洗滌將酸解液抽濾，得沉淀，再用水洗滌沉淀，至流出液中性止，然后將沉 淀投入夾層鍋中，在不斷攪拌下加入濕沉淀重量20倍的水，升溫至溶液呈沸騰狀態，保溫 lOmin，趁熱抽濾，收集沉淀；
(10)脫色結晶將沉淀投入攪拌罐中，采用冷熱乙醇結晶與重結晶法在不斷攪拌下加 入濕沉淀重量25倍濃度70%乙醇，升濕至溶液呈沸騰狀態；然后加入濕沉淀重量59Γ7%的 活性炭，保溫20min，趁熱過濾；濾液轉入沉淀罐中，通自來水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(11)抽濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用純化水洗滌沉淀，至流出液近無色 止；濾液送濃縮回收乙醇，析出的沉淀同法抽濾后投入下批物料純化；
(12)真空干燥將沉淀真空干燥，控制真空度彡0.07Mpa，溫度50°C飛0°C，得成品-槲 皮素。產品經檢測成品為黃綠色粉末，槲皮素含量> 98%。本發明的優點是
(1)找到了提取槲皮素的新原料——毛冬青地上部分；
(2)降低了槲皮素的生產成本，增加企業利潤，節能減排，提升產品的市場競爭力；
(3)建立工業化生產槲皮素的標準生產線以及配套設備，為工業化生產奠定了基礎；
(4)此工藝解決了現有的槲皮素純度問題，將槲皮素的含量做到HPLC級98%以上。
圖1為本發明實施例從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝流程圖。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步的闡述，但不是對本發明保護內容的限定。實施例1參照圖1，本發明從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝，包括如下步驟
(1)切段取新鮮毛冬青地上部分1000kg，切段至0.5-2cm ；
(2)弱堿水提取將藥材小段投入6cm3提取罐中，用PH為8.5的Na2CO3水溶液提取3 次，加入提取液的量第1次為5000L，第2次為4000L，第3次為4500L，提取時間為1. 0、 0. 5,0. 5h，提取溫度為50°C飛0°C。過濾，合并前2次濾液，第3次濾液套提，作為下批物料 的第1次提取液。殘渣棄去；
(3)調中濃縮用濃度為2%的稀硫酸將前2次合并濾液的PH調節至6.(Γ7. 0，真空減 壓濃縮至料液比1:0. 6 1.2，即IOOOkg原料的提取液濃縮至600廣1200L左右，控制真空度 彡 0. 07Mpa，溫度 50°C "60°C ；
(4)堿化板框過濾將濃縮液投入攪拌罐中，用Na2CO3調節濃縮液PH為9.(Til. 0，攪拌 均勻，然后板框過濾，得濾液；
(5)酸化保溫沉淀將濾液投入帶攪拌的搪瓷罐中，用濃度為2%的稀硫酸調節濾液的 PH為2. 0 3. 0，于70°C 80°C保溫3(T40min，然后通自來水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(6)過濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用自來水洗滌沉淀，至流出液中性
止；
(7)結晶過濾將沉淀投入夾層鍋中，采用冷熱水結晶與重結晶法在不斷攪拌下加入濕 沉淀重量120倍的自來水，升溫至溶液呈沸騰狀態，保溫20min，趁熱過濾，濾液通自來水冷 卻至室溫，靜置沉淀6h，然后抽濾，得蘆丁結晶；
(8)酸解將蘆丁結晶投入帶攪拌的搪瓷罐，加入濕沉淀重量3(Γ40倍、濃度29Γ4%的 稀硫酸，控制溫度70V 80°C，水解時間2. (Γ3. Oh ；
(9)抽濾洗滌將酸解液抽濾，得沉淀，再用自來水洗滌沉淀，至流出液中性止。然后 將沉淀投入夾層鍋中，在不斷攪拌下加入濕沉淀重量20倍的自來水，升溫至溶液呈沸騰狀 態，保溫lOmin，趁熱抽濾，收集沉淀；
(10)脫色結晶將沉淀投入攪拌罐中，采用冷熱乙醇結晶與重結晶法在不斷攪拌下加 入濕沉淀重量25倍濃度70%乙醇，升濕至溶液呈沸騰狀態；然后加入濕沉淀重量59Γ7%的 活性炭，保溫20min，趁熱過濾；濾液轉入沉淀罐中，通自來水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(11)抽濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用純化水洗滌沉淀，至流出液近無色 止；濾液送濃縮回收乙醇，析出的沉淀同法抽濾后投入下批物料純化；
(12)真空干燥將沉淀真空干燥，控制真空度彡0.07Mpa，溫度50°C飛0°C，得成品-槲 皮素 9. 0 12· Okgo成品經檢測為黃綠色粉末，收率為9. 0-12. 0%，槲皮素含量彡98%。槲皮素為3，3’，4’ 5，7-五羥基黃酮，分子式C15HltlO7,分子量302. 23，其結構式如
下.
權利要求
從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝，其特征是包括如下步驟(1)切段取新鮮的毛冬青地上部分切成小段；(2)弱堿水提將切成的小段投入提取罐中，用PH為8.5~10.0的Na2CO3水溶液提取3次，加入提取液的量為藥材重量的5、4、4.5倍，提取時間為1.0、0.5、0.5h，提取溫度為50℃~60℃，過濾，合并前2次濾液，第3次濾液套提；(3)調中濃縮用2%~4%的稀硫酸將前2次合并濾液的PH調節至6.0~7.0，真空減壓濃縮至料液比1:0.6~1.2，控制真空度≥0.07Mpa，溫度50℃~60℃；(4)堿化板框過濾將濃縮液投入攪拌罐中，用Na2CO3調節濃縮液PH為9.0~11.0，攪拌均勻，然后板框過濾，得濾液；(5)酸化保溫沉淀將濾液投入帶攪拌的搪瓷罐中，用2%~4%的稀硫酸調節濾液的PH為2.0~3.0，于70℃~80℃保溫，然后用水冷卻至室溫，靜置沉淀6h；(6)過濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，并將沉淀洗滌至中性；(7)結晶過濾將沉淀投入夾層鍋中，采用冷熱水結晶與重結晶法在不斷攪拌下加入濕沉淀重量120倍的自來水，升溫至溶液呈沸騰狀態，保溫20min，趁熱過濾，濾液用水冷卻至室溫，靜置沉淀6h，然后抽濾，得蘆丁結晶；(8)酸解將蘆丁結晶投入帶攪拌的搪瓷罐，加入濕沉淀重量30~40倍、濃度2%~4%的稀硫酸，控制溫度70℃~80℃，水解時間2.0~3.0h；(9)抽濾洗滌將酸解液抽濾，得沉淀，再用水洗滌沉淀，至流出液中性止，然后將沉淀投入夾層鍋中，在不斷攪拌下加入濕沉淀重量20倍的水，升溫至溶液呈沸騰狀態，保溫10min，趁熱抽濾，收集沉淀；(10)脫色結晶將沉淀投入攪拌罐中，采用冷熱乙醇結晶與重結晶法在不斷攪拌下加入濕沉淀重量25倍濃度70%乙醇，升濕至溶液呈沸騰狀態；然后加入濕沉淀重量5%~7%的活性炭，保溫20min，趁熱過濾；濾液轉入沉淀罐中，通自來水冷卻至室溫，靜置沉淀6h；(11)抽濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用純化水洗滌沉淀，至流出液近無色止；濾液送濃縮回收乙醇，析出的沉淀同法抽濾后投入下批物料純化；(12)真空干燥將沉淀真空干燥，控制真空度≥0.07Mpa，溫度50℃~60℃，得成品 槲皮素。
2.用權利要求1所述的工藝制成的含量>98%的槲皮素。
全文摘要
本發明公開了一種從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝，其特征是以毛冬青地上部分為原料經切段→弱堿水提→調中濃縮→堿化板框過濾→酸化保溫沉淀→過濾洗滌→結晶過濾→酸解→抽濾洗滌→脫色結晶→抽濾洗滌→真空干燥制成。本發明的優點是(1)找到了提取槲皮素的新原料——毛冬青地上部分；(2)降低了槲皮素的生產成本，增加企業利潤，節能減排，提升產品的市場競爭力；(3)建立工業化生產槲皮素的標準生產線以及配套設備，為工業化生產奠定了基礎；(4)此工藝解決了現有的槲皮素純度問題，將槲皮素的含量做到HPLC級98%以上。
文檔編號C07D311/30GK101985439SQ201010550720
公開日2011年3月16日 申請日期2010年11月18日 優先權日2010年11月18日
發明者劉庚貴, 周迪平, 蔣新芳 申請人:桂林市三棱生物制品有限公司