專利名稱：從披針葉黃華草地上部分中提取金雀花堿的方法
技術領域：
本發明屬于制藥技術領域，具體涉及從披針葉黃華草地上部分中提取金雀花堿的 方法。
背景技術：
披針葉黃華(T. Ianceolata R. Br.)又名牧馬豆、野決明，系豆科(Ieguminoseae) 野決明屬(Thermopsis)多年生草本植物。該屬植物主要分步于我國的青海、內蒙古、寧夏、 四川、甘肅等省區，俄羅斯，蒙古也有分布，生于沙漠草地、高山草甸草地、沙丘、林下灌叢以 及田邊、路旁，偶進入農田。據文獻報道，披針葉黃華的種子、花、莖葉、根均有毒，是因為其含有大量的金雀花 堿。金雀花堿類是指分子內具有吡啶酮環的三環或四環結構的喹諾里西啶類生物堿化 合物，主要包括三環結構的金雀花堿(cytisine)、N-甲基金雀花堿(N-methylcytisine)和 四環結構的臭豆堿(anagyrine)、黃華堿(thermopsine)等。披針葉黃華中的金雀花堿具有 極強的生理活性，在臨床上用金雀花堿0. 15%的水溶液供肌肉或靜脈注射，搶救因手術和 創傷引起的反射性呼吸暫停、休克和新生兒窒息等，近期研究表明，該類生物堿還具有抗心 律失常、抗微生物感染、抗潰瘍、升高白細胞等多方面的藥理作用，特別是該類化合物具有 較強的抗癌活性。另外，有研究稱含磷的金雀花堿衍生物還具有保肝作用；金雀花堿是美國 輝瑞公司生產的一種新型戒煙藥“Varenicline”的主要原料；含金雀花堿的農藥組合物是 一種高效廣譜的農藥。披針葉黃華中的金雀花堿提取，目前主要是以從種籽中提取為主，從種籽中提取 的金雀花堿純度較低，生產成本高。因此，現有技術存在缺陷，需要改進完善。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種從披針葉黃華草地 上部分中提取金雀花堿的方法。為實現上述目的，本發明提供一種從披針葉黃華草地上部分中提取金雀花堿的方 法，其中，包括以下步驟:Al，將盛花期采集的披針葉黃華草地上部分粉碎，經提取、濃縮得 浸膏，A2，將所述浸膏用酸水酸化，分離除去酸不溶性雜質，得到含金雀花堿的酸水液，A3， 將所述酸水液堿化，再用有機溶媒萃取，得到主要含金雀花堿的總生物堿，A4，將所述總生 物堿溶解于水，再用有機溶媒萃取，回收有機溶媒并結晶，得到純度較高的金雀花堿；A5，將 步驟A4得到的所述純度較高的金雀花堿溶解于有機溶媒，并進行柱層析，得到純度99%以 上的金雀花堿產品。所述的方法，其中，所述步驟Al具體執行以下操作將所述披針葉黃華草地上部 分粉碎至10-20目，裝入不銹鋼多功能提取罐中，共加入75% -85%的甲醇12倍量，分3次 熱回流提取，合并提取液，減壓濃縮至相對密度1. 15-1. 20。
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所述的方法，其中，所述步驟A3和A4中，調節溶液PH值至10_13，用有機溶媒萃 取，至薄層層析無明顯的生物堿反應為止。所述的方法，其中，所述用有機溶媒萃取的步驟重復兩次以上。
所述的方法，其中，所述柱層析使用氧化鋁柱進行。所述的方法，其中，所述氧化鋁目數為60-300目。所述的方法，其中，所述有機溶媒為甲苯、二甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、乙酸 乙酯中的一種或兩種以上混合物。所述方法，其中，所述酸化步驟采用鹽酸、硫酸、磷酸之一進行。所述方法，其中，所述堿化步驟采用氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、濃氨水之一進 行。所述方法，其中，所述結晶步驟中，結晶溶劑采用丙酮、乙醇、乙酸乙酯中的一種或 兩種以上混合。本發明的工藝路線簡單，制得的產品成本低、純度可達99%以上。
圖1為本發明工藝流程圖；圖2為金雀花堿對照品高效液相色譜圖，其中峰1保留時間5. 047，峰高148150峰 面積 1151629 面積(% ) 100. 0000 ；圖3為實施例1樣品的高效液相色譜圖，其中峰1保留時間5 面積 1135225 面積(% ) 100. 0000 ；圖4為實施例2樣品的高效液相色譜圖，其中峰1保留時間5 面積 1142127 面積(% ) 100. 0000 ；圖5為實施例3樣品的高效液相色譜圖，其中峰1保留時間5 面積 1151629 面積(% ) 100. 0000。
具體實施例方式以下通過具體實施例，對本發明進行詳細說明。本發明薄層層析檢測的條件及結果1、薄層板(1)、市售硅膠G板(青島海洋化工廠)(2)、自制硅膠G板取薄層層析用的硅膠G，用0. 5%的羧甲基纖維素鈉水溶液調 成糊狀，攪拌至無氣泡，制成薄層板，臨用前在105°C的條件下活化30min。2、對照品金雀花堿(含量99. 5%以上)3、展開劑乙酸乙酯甲醇體積比3 2
4、顯色劑改良的碘化鉍鉀試劑5、薄層層析結果Rf值0. 23實施例1將盛花期采集的干燥的披針葉黃華草地上部分500kg，粉碎至10-20目，裝入4. 5
034 峰高 145466 峰
026 峰高 145687 峰
030 峰高 148150 峰
4噸不銹鋼多功能提取罐中，分三次加入2500kg、2000kg、1500kg 75%的甲醇，加熱回流提 取，加熱溫度62-65°C，提取時間第一次2小時，第二次2小時，第三次1小時，合并三次提取 液，減壓濃縮至相對密度1. 15(熱測)，得浸膏162kg。在浸膏內加入稀鹽酸溶液，調節PH值2-3使生物堿溶解于酸水內，分離除去酸不 溶性雜質。酸水層加濃氨水堿化，調節PH值10-11，用二甲苯萃取數次，至薄層層析無明顯 的生物堿反應為止，回收二甲苯，得總生物堿浸膏為15. Ikgo將此總生物堿溶解于水中，調 節PH值10-11，用二甲苯萃取數次，至薄層層析無明顯的生物堿反應為止，回收二甲苯得金 雀花堿黃色結晶1. 70kg。將金雀花堿黃色結晶用乙酸乙酯溶解，過60-100目氧化鋁柱，回 收乙酸乙酯，溶液中有大量的微黃色針狀結晶析出，分離結晶，干燥，得到金雀花堿1. 25kg， 收率為2. 5%。，用高效液相色譜法檢測純度為98. 7%，如圖3所示。實施例2 將盛花期采集的干燥的披針葉黃華草地上部分500kg，粉碎至10-20目，裝入4. 5 噸不銹鋼多功能提取罐中，分三次加入2500kg、2000kg、1500kg 85%的甲醇，加熱回流提 取，加熱溫度62-65°C，提取時間第一次2小時，第二次2小時，第三次1小時，合并三次提取 液，減壓濃縮至相對密度1. 20 (熱測)，得浸膏149kg。在浸膏內加入稀鹽酸溶液，調節PH值3-4使生物堿溶解于酸水內，分離除去酸不 溶性雜質。酸水層加20 %氫氧化鈉溶液堿化，調節PH值12-13，用二氯甲烷萃取數次，至 薄層層析無明顯的生物堿反應為止，回收二氯甲烷，得總生物堿浸膏為13.7kg。將此總生 物堿溶解于水中，調節PH值12-13，用二氯甲烷萃取數次，至薄層層析無明顯的生物堿反 應為止，回收二氯甲烷得金雀花堿黃色結晶1.66kg。將金雀花堿黃色結晶用丙酮溶解，過 100-200目氧化鋁柱，回收丙酮，溶液中有大量的微黃色針狀結晶析出，分離結晶，干燥，得 到金雀花堿1. 38kg，收率為2. 76%。，用高效液相色譜法檢測純度為99. 0% (如圖4所示)。實施例3 將盛花期采集的干燥的披針葉黃華草地上部分500kg，粉碎至10-20目，裝入4. 5 噸不銹鋼多功能提取罐中，分三次加入2500kg、2000kg、1500kg80%的甲醇，加熱回流提取， 加熱溫度62-65°C，提取時間第一次2小時，第二次2小時，第三次1小時，合并三次提取液， 減壓濃縮至相對密度1. 19 (熱測)，得浸膏156kg。在浸膏內加入稀鹽酸溶液，調節PH值2-3使生物堿溶解于酸水內，分離除去酸不 溶性雜質。酸水層加10%氫氧化鈉溶液堿化，調節PH值12-13，用三氯甲烷萃取數次，至 薄層層析無明顯的生物堿反應為止，回收三氯甲烷，得總生物堿浸膏為14.5kg。將此總生 物堿溶解于水中，調節PH值12-13，用三氯甲烷萃取數次，至薄層層析無明顯的生物堿反 應為止，回收三氯甲烷得金雀花堿黃色結晶1.88kg。將金雀花堿黃色結晶用丙酮溶解，過 200-300目氧化鋁柱，回收丙酮，溶液中有大量的微黃色針狀結晶析出，分離結晶，干燥，得 到金雀花堿1. 47kg，收率為2. 94%。，用高效液相色譜法檢測純度為99. 2% (如圖5所示)。上述實施例1至3中采用的高效液相色譜法檢測條件為色譜柱C18柱(4. 6mmX 250mm, 5um)流動相0· 05mol/L磷酸二氫鈉溶液(含磷酸 2ml)甲醇高氯酸鈉(85ml 15ml 1. Og)；檢測波長306nm、流速lml/min
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柱溫25°C進樣濃度0.lmg/Ml進樣量10uL ；理論塔板數按金雀花堿峰計算應不低于5000。應當理解的是，對本領域普通技術人員來說，可以根據上述說明加以改進或變換， 而所有這些改進和變換都應屬于本發明所附權利要求的保護范圍。
權利要求
一種從披針葉黃華草地上部分中提取金雀花堿的方法，其特征在于，包括以下步驟A1，將盛花期采集的披針葉黃華草地上部分粉碎，經提取、濃縮得到浸膏；A2，將所述浸膏用酸水酸化，分離除去不溶于酸的雜質，得到含金雀花堿的酸水液；A3，將所述酸水液堿化，再用有機溶媒萃取，得到主要含金雀花堿的總生物堿；A4，將所述總生物堿溶解于水，再用有機溶媒萃取，回收有機溶媒并結晶，得到純度較高的金雀花堿；A5，將步驟A4得到的所述純度較高的金雀花堿溶解于有機溶媒，并進行柱層析，得到純度99％以上的金雀花堿產品。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟Al具體執行以下操作將所述 披針葉黃華草地上部分粉碎至10-20目，裝入不銹鋼多功能提取罐中，分3次加入濃度為 75% -85%的甲醇熱回流提取，3次總共加入甲醇的重量為所述披針葉黃華草地上部分的 12倍，合并所述熱回流提取得到的提取液，減壓濃縮至相對密度1. 15-1. 20。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟A3和A4中，調節溶液PH值至 10-13，用有機溶媒萃取，至薄層層析無明顯的生物堿反應為止。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述用有機溶媒萃取的步驟重復兩次以上。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述柱層析使用氧化鋁柱進行。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述氧化鋁目數為60-300目。
7.根據權利要求1至6任一所述的方法，其特征在于，所述有機溶媒為甲苯、二甲苯、二 氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯中的一種或兩種以上混合物。
8.根據權利要求1至6任一所述方法，其特征在于，所述酸化步驟采用鹽酸、硫酸、磷酸 之一進行。
9.根據權利要求1至6任一所述方法，其特征在于，所述堿化步驟采用氫氧化鈉、碳酸 鈉、碳酸氫鈉、濃氨水之一進行。
10.根據權利要求1至6任一所述方法，其特征在于，所述結晶步驟中，結晶溶劑采用丙 酮、乙醇、乙酸乙酯中的一種或兩種以上混合。
全文摘要
本發明公開一種從披針葉黃華草地上部分中提取金雀花堿的方法，包括以下步驟A1，將盛花期采集的披針葉黃華草地上部分粉碎，經提取、濃縮得到浸膏；A2，將所述浸膏用酸水酸化，分離除去不溶于酸的雜質，得到含金雀花堿的酸水液；A3，將所述酸水液堿化，再用有機溶媒萃取，得到主要含金雀花堿的總生物堿；A4，將所述總生物堿溶解于水，再用有機溶媒萃取，回收有機溶媒并結晶，得到純度較高的金雀花堿；A5，將步驟A4得到的所述純度較高的金雀花堿溶解于有機溶媒，并進行柱層析，得到純度99％以上的金雀花堿產品。
文檔編號C07D471/18GK101891740SQ201010240158
公開日2010年11月24日 申請日期2010年7月30日 優先權日2010年7月30日
發明者王小銀 申請人:王小銀