3,23,28位修飾的23-羥基白樺酸類衍生物、其制備方法、制劑及用途的制作方法

專利名稱：3,23,28位修飾的23-羥基白樺酸類衍生物、其制備方法、制劑及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類經(jīng)修飾的23-羥基白樺酸衍 生物。本發(fā)明還公開了這些23-羥基白樺酸衍生物的制備方法、含有這些23-羥基白樺酸 衍生物的藥物組合物及這類23-羥基白樺酸衍生物用于抗腫瘤的用途。
背景技術(shù)：
23-羥基白樺酸是與白樺酸結(jié)構(gòu)相似的化合物，23-羥基白樺酸是從中草藥白頭 翁(Pulsatilla chinensis Regel)中提取的一種五環(huán)三萜類化合物，白頭翁始載于《神 農(nóng)本草經(jīng)》，屬于毛茛科白頭翁屬植物，具有清熱解毒、涼血止痢、燥濕殺蟲的功效。臨床上 主要用于治療細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、婦科陰道炎等?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)白頭翁除了抗菌和 抗病原蟲作用外，還具有抗癌、殺精、治療內(nèi)毒素血癥等作用。從白頭翁中分離得到皂苷元 23-羥基白樺酸(23-Hydroxybetulinic acid)，結(jié)構(gòu)與白樺酸很相近。CN 1491651A公開了 23-羥基白樺酸對小鼠黑色素瘤、腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腸道腫瘤、肺癌、肝癌以及愛滋病的預(yù)防和 治療有很好的作用。CN1682740A公開了白樺酸具有糖原磷酸化酶抑制劑作用。從天然產(chǎn)物中提取有效成分并進(jìn)行結(jié)構(gòu)簡化和修飾，以發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎的先導(dǎo)物 是抗腫瘤藥物研究的一個重要方向。20世紀(jì)末，藥物化學(xué)家們在植物抗腫瘤活性成分的 基礎(chǔ)上，開發(fā)了很多新的具有良好療效的藥物，比如紫杉醇和喜樹堿。人們對白樺酸進(jìn) 行結(jié)構(gòu)改造，試圖找到藥理活性更好的化合物，如Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2004，14，3169-3172.中公開了對白樺酸結(jié)構(gòu)修飾的一系列衍生物，并對這系列衍 生物做了藥理學(xué)研究，試驗結(jié)果表明，部分經(jīng)修飾的化合物的抗腫瘤活性與白樺酸相當(dāng)，還 有個別化合物在一些腫瘤細(xì)胞中的活性高于白樺酸。目前在抗腫瘤領(lǐng)域，大多數(shù)的研究者認(rèn)為白樺酸及其衍生物是通過抑制血管生成 來達(dá)到抗腫瘤的目的，但多年來仍沒有這類化合物進(jìn)入臨床試驗階段。臨床需要藥效更好 的抗腫瘤藥物。

發(fā)明內(nèi)容
為尋找具有更強(qiáng)抗腫瘤活性的新藥，本發(fā)明選取五環(huán)三萜類的天然產(chǎn)物23-羥基 白樺酸進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾研究，從而提供了一系列具有通式(I)結(jié)構(gòu)特性的衍生物。通式(I) 拓展了現(xiàn)有的23-羥基白樺酸衍生物的結(jié)構(gòu)特征和結(jié)構(gòu)范圍。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是研究新結(jié)構(gòu)類型的具有抗腫瘤活性的23-羥基白樺 酸衍生物，并進(jìn)一步提供一種治療腫瘤及其它疾病或病癥的藥物組合物。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案通式I所示23-羥基白樺酸衍生物或其可藥用鹽 其中 R1 代表 OH、OCOR4 ； R2 代表 Cl、0M、0G、OR4、NHR4, N (R4)2, OR4COOR4, NHR4COOR4, NHR4NH2, OR4OH ；R3 代表 0、NOR4、NNHR4 ；R4代表H、非取代或X取代的C1-Cltl直鏈或支鏈的烷烴、烯烴、炔烴、環(huán)烷烴、苯基、
芐基、萘基，聯(lián)苯甲基；X 代表 H、Cl、Br、F、I、CN、NH2, NO2, CF3> OH、OCH3> C00H, COOCH3, C1-C10 直鏈或支鏈 的烷烴、烯烴、炔烴、環(huán)烷烴、苯基、芐基、萘基；M 代表 Na、K、Li;G代表糖苷或乙酰化的糖苷；本發(fā)明通式I的23羥基白樺酸衍生物或其鹽，其中其中R1優(yōu)選代表0H、OAc ；R2 優(yōu)選代表 0G、OH、NH2, CH2CH3、CH2CH = CH2, NHCH2CH2NH2, OCH2CH2OH, N^O、
och2cooch2ch3、och2cooh、nhch2cooch3、NHCH2CooH ；R3 優(yōu)選代表 0、NOH、NOAc, NNHPh, NNHTs ；G代表吡喃葡萄糖或四乙?；倪拎咸烟?；本發(fā)明的部分化合物為3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸芐酯3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸3-羰基-23-羥基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸乙氧甲?；柞?-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(β -D_吡喃葡萄糖苷基)酯3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸N- (3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆_20 (29)-烯_28_?；?-甘氨酸甲酯3-肟基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙酯本發(fā)明包括一種用于治療哺乳動物，優(yōu)選于治療人類疾病或病癥的藥物組合物， 其包括治療腫瘤疾病的的有效量的通式(I)的化合物或其鹽和可藥用載體。本發(fā)明還包括通式⑴的化合物或其鹽在制備治療肝癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤、 宮頸癌、乳腺癌、白血病或腦瘤病癥的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通式I的23-羥基白樺酸衍生物可用下列方法制備得到反應(yīng)1 參照反應(yīng)1，將23-羥基白樺酸⑴溶于DMF，與溴節(jié)，碳酸鉀反應(yīng)12h，制得⑵化 合物。將所得式⑵的化合物溶于二氯甲烷中，加入4 二甲胺基吡啶，再加入叔丁基二甲基 氯硅烷，室溫反應(yīng)5小時制得化合物(3)，將(3)溶于二氯甲烷，用PCC氧化，2h，制得(4)化 合物。將所得式(4)的化合物溶于丙酮溶液中，加10%鹽酸室溫反應(yīng)2h，制得(5)化合物， 將化合物(5)氫解脫芐制得化合物(6)，將(6)與溴代物反應(yīng)，制得28位酯類衍生物；與羥 胺或胼反應(yīng)，制得3位肟或腙類衍生物。下面是本發(fā)明部分化合物的藥理實驗數(shù)據(jù)
儀器超凈工作臺(蘇州艾可林凈化設(shè)備有限公司)
恒溫CO2培養(yǎng)箱(德國Heraeus)
酶聯(lián)免疫檢測儀(美國BI0-RAD)
倒置生物顯微鏡(日本OLYMPUS)
平板搖床(江蘇省光明實驗儀器廠)
試劑RPMI1640(GIBCO)
胰蛋白酶(SIGMA)
胎牛血清(GIBCO)
MTT(SIGMA)
DMSO(SIGMA)
細(xì)胞株人肝癌細(xì)胞BEL7402
人肺癌細(xì)胞A549
人腦瘤細(xì)胞SF126
人早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞HL60
[方法]
1.取處于指數(shù)生長期狀態(tài)良好的細(xì)胞一瓶，加入0.05%胰蛋白酶消化液，消化使 貼壁細(xì)胞脫落，計數(shù)2 4X IO4個/ml，制成細(xì)胞懸液。2.取細(xì)胞懸液接種于96孔板上，180 μ 1/孔，置恒溫CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。3.換液，加入受試藥物，20 μ 1/孔，培養(yǎng)72小時。4.將MTT加入96孔板中，20 μ 1/孔，培養(yǎng)箱中反應(yīng)4小時。5.吸去上清液，加入DMS0，150 μ 1/孔，平板搖床上振搖5分鐘。6.用酶聯(lián)免疫檢測儀在波長為570nm處測定每孔的吸光值，并計算細(xì)胞抑制。
陰性對照組OD值一化合物組OD值
細(xì)胞抑制率％= _ χ οο%
陰性對照組OD值
6
具體實施例方式實施例13，23- 二羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸芐酯將23-羥基白樺酸(1.00g，2. Immo 1)溶于N，N_二甲基甲酰胺(20mL)中，加入碳酸 鉀(1.00g，7. 2mmol)，溴芐(0. 3ml, 2. 5mmol)，室溫攪拌12小時，乙酸乙酯(30ml)稀釋，水 洗三次，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮(粗品可直接用于下一步反應(yīng))， 柱層析(石油醚乙酸乙酯=2 1)，得白色粉末狀固體(1.07g，90% )。ESI-MS m/z 563. 3[M+H]+，585. 3[M+Na]+，601. 4[M+K] +實施例23-羥基-23-叔丁基二甲基硅氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸芐酯將3，23-二羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸芐酯(1. OOg, 1. 8mmol)溶于二氯 甲烷(30ml)中，加入4-二甲胺基吡啶(0. 3g,2. 5mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(0. 36g,
2.4mmol)，室溫攪拌4小時，蒸除二氯甲烷，乙酸乙酯稀釋，10 %鹽酸洗至酸性，飽和食鹽水 洗至中性，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮(粗品固體可直接用于下一步反應(yīng))，柱層析(石油 醚乙酸乙酯=20 1)，得白色固體(1. llg，92% )。1H-匪R(CDCl3, 300MHz) δ 0. 06 (6Η, s, Si-(CH3)2) ,0. 75,0. 84,0. 93,1. 67 (6Hfor 0. 84, each 3H for others, s，24，25，26，27 and 30-CHs)，0. 90 (9H, s, t_Bu)，2. 13-2. 20 (1H, m)，2. 25-2. 28 (1H, m)，3· 01 (1Η, m, H-19)，
3.33，3. 65 (each 1H, d, J = 9. 3Hz，H-23)，3. 56 (1H, m, H_3)，4. 59，4. 72 (each 1H, s, H_29)， 5. 09，5. 15 (each 1H, d, J = 12. 2Hz, CH2-Ph)，7. 32-7. 35 (5H, m, H-Ph)；實施例33-羰基-23-叔丁基二甲基硅氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸芐酯將3-羥基-23-叔丁基二甲基硅氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸芐酯(1. 03g, 1. 5mmol)溶于二氯甲烷(30ml)中，加入氯鉻酸吡啶(0. 5g，2. 3mmol)，室溫攪拌3小時，蒸 除二氯甲烷，乙酸乙酯稀釋，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析(石 油醚乙酸乙酯=30 1)，得白色固體(0.91g，89% )，mp ISl-ISrC-1H-^R(O)Cl3, 300MHz) δ 0. 07 (6Η, s, Si-(CH3)2)，0. 80，0. 83，0. 86,0. 96，1. 68 (each 3H, s，24，25，26， 27and 30_CH3)，0. 87 (9H, s, t_Bu)，1. 97 (3H, s，Ac)，2. 18-2. 32 (2H, m)，2. 37-2. 42 (2H, m)， 3. 04 (1H, m, Η-19)，3· 28,3. 56 (each 1Η, d, J = 9. IHz, H-23) ,4. 61,4. 73 (each 1H, d, J = 1· 2Hz，H-29)，5· 09，5· 16 (each lH，d，J= 12. 2Hz, CH2-Ar), 7. 35-7. 38 (5H,m,H-Ar) ； ESI-MS m/z :675. 5[M+H]+,697. 5[M+Na]+,714. 5[M+K]+.實施例4
8
3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸芐酯將3-羰基-23-叔丁基二甲基硅氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸芐酯(0_8g，
1.2mmol)溶于丙酮(30ml)中，加入10%鹽酸(2ml)，室溫攪拌2小時，乙酸乙酯稀釋， 水洗至中性，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析(石油醚乙酸乙酯= 5 1)，得白色固體 5(0. 6g，90% )，mp 175_178°C . IR(film，cnT1) 3444，3067，2950，2863， 1732，1705，1640，1459，1381，1257，1121，1087，881，835，775，701 ；1H-NMR(CDCl3, 300MHz) δ 0. 74，0. 88，0. 92，0. 95，1. 61 (each 3H, s, 24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 48-2. 60 (1H, m)，
2.95 (1H, m, H-19), 3. 33, 3. 56 (each 1H, d, J = 11. 3Hz，H-23)，4. 53，4. 66 (each 1H, s, H-29) ,5. 02,5. 09 (each 1H, d, J = 11. 1Hz, CH2-Ar), 7. 23-7. 31 (5H, m, H-Ar) ； ESI-MS m/z 561. 3[M+H]+，583. 3[M+Na]+，599. 0[M+K]+.實施例53-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸將3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸芐酯(0. 5g,0. 89mmol)溶于四 氫呋喃(15ml)中，加入10%鈀碳(0. Ig)，室溫常壓氫化，TLC跟蹤反應(yīng)至原料大部分反應(yīng) 但不完全反應(yīng)，過濾，濃縮，柱層析(石油醚丙酮=4 1)，得白色固體(0.3g，71% )，mp 227-229 °C . IR(film, cnT1)3435，3069，2946，2870，1688，1642，1455，1376，1239，1047，882 ； 1H-NMR(DMSOdOOMHz) δ 0. 77,0. 91,0. 97,1. 66 (6Η for 0. 77, each 3H for others, s, 24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 96 (1H, m, H-19)，3. 25 (2H, m, H-23)，4. 57，4. 70 (2H, s, H-29)， 4. 82 (1H, t, J = 5. 4Hz, OH)，12. 07 (1H, s, C00H) ； ESI-MS m/z :471. 4[M+H]+，493. 4[M+Na]+.實施例63-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸乙氧甲酰基甲酯將3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0. IOg, 0. 21mmol)溶于 DMF(8ml)中，加入碳酸鉀(0. IOg,0. 72mmol)和溴乙酸乙酯(1.5 equiv mol)，室溫攪拌12 小時。乙酸乙酯(15ml)稀釋，水洗三次，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮， 粗品柱層析(石油醚乙酸乙酯=3 1)，得白色固體7b(0.086g，73% )，mp 134_137°C . IR(film, cm—1)3449，3069，2947，2869，1761，1734，1680，1638，1459，1378，1213，1123， 1049，876 !1H-Wr(CdcI3JOOMHz) : δ 0. 98，1. 00，1. 04，1. 69(6H for 1. 00，each 3H for others, s，24，25，26，27and 30_CH3)，1. 29 (3H, t, J = 7. 2Hz, CH2CH3), 2. 25-2. 34 (3H, m)，
2.58-2. 62 (1H, m)，2. 98 (1H, m, H-19) ,3. 41,3. 64 (each 1H, d, J = 11. 3Hz，H-23)，4. 23 (2H, m, CH2CH3)，4. 59 (2H, s, COOCH2)，4. 60,4. 73 (each 1H, s, H-29)；實施例73-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸_ (2’ -氰基聯(lián)苯_4_基)甲酯方法同上?；衔?-羰基-23-羥基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸與4’ -溴甲 基聯(lián)苯-2-腈室溫反應(yīng)12小時，粗品柱層析(石油醚乙酸乙酯=2 1)，得白色固體 7e(0.073g，52 % )，mp 111-114. IR(film，cnT1) 3455，3068，2946，2868，2224，1725，1696， 1641，1457，1377，1152，1122,881,764 ；1H-WR (CDCl3, 300MHz) δ 0. 84,0. 96,0. 99，1. 01， 1. 69 (each 3H, s, 24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 57-2. 66 (1H, m)，3. 04 (1H, m, H-19) ,3. 40,
3.63 (each 1H, d, J = 11. 3Hz, H-23) ,4. 61,4. 74 (each 1H，s，H-29)，5. 19 (1H，dd，J = 23. 1,12. 6Hz, CH2-Ar), 7. 46-7. 77 (8H，m, H-Ar). ESI-MSm/z :561. 3 [M+H]+，583. 3 [M+Na]+，
9599. 0[Μ+Κ]+.實施例83-羰基-23-乙酰氧基_羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸將3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸(0. 50g, 1. lmmol)溶于吡啶 (IOml)中，加入乙酸酐(2ml)，室溫攪拌10h，乙酸乙酯(25ml)稀釋，10%鹽酸洗至酸性，水 洗兩次，飽和碳酸氫鈉洗至無氣泡產(chǎn)生，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析(石油醚丙 酮=6 1)，得白色固體(0. 049g，90% )，mp 129_132°C . IR(film，cnT1) 3428，3065，2941， 2867，1723，1687，1640，1455，1377，1153，1126，1061，884，753，696 ；3453，2951，2868，1745， 1695，1642，1461，1377，1237，1039，883 ；1H-NMR(CDCl3, 300MHz) δ 0. 94，0. 99，1. 70(9Η for 0. 99, each 3H for others, s，24，25，26，27and 30_CH3)，2. 03 (3H，s, Ac)，2. 24—2. 31 (2H， m)，2. 43-2. 51 (2H，m), 3. 01 (1H, m, H-19)，4. 05 (2H，dd, J = 15. 5,10. 9Hz, H_23)，4. 62，
4.75 (each 1H，s，H-29) ； ESI-MS m/z :513. 3 [M+H]+，511. 5 [Μ-ΗΓ.實施例9N- (3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_?；?-嗎啉將3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室溫攪拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至嗎啉(0. lmia. lmmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，室溫攪拌2h，濃縮，乙酸乙 酯(15ml)稀釋，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析(石油醚乙酸乙 酯=4 1)，得白色固體(0. 089g，78% )，mp 124_127°C . IR(film，cnT1) 3452，3071，2947， 2866，1742，1708，1630，1458，1411，1376，1263，1239，1188，1116，1037,881 ；1H-NMR (CDCl3, 300MHz) : δ 0· 95，0· 98，1· 00，1.69 (6H for 1.00，each 3H for others，s，24，25，26，27 and 30-CH3)，2. 03 (3H, s, Ac) ,2. 42-2. 51(2H，m)，3. 03(lH，m，and H-19) ,3. 63(8H，t，J = 8. OHz, H-morpholine)，4. 02，4. 08(each 1H, d,J = 10. 8Hz，H-23)，4. 59，4. 73(each 1H, s,H-29)，
5.09，5. 17 (each 1H, d, J = 10. 5Hz) ； ESI-MS m/z :582. 5 [M+H]+.實施例10N- (3-羰基-23-乙酰氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_?；?-甘氨酸甲酯將3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸(0. IOg,0. 20mmol)溶 于干燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 10ml)，室溫攪拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲 烷(5ml)溶解，滴加至甘氨酸甲酯鹽酸鹽(0. IOg,0. 80mmol)和4-二甲胺基吡啶(0. IOg, 0. 82mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，室溫攪拌4h，濃縮，乙酸乙酯(15ml)稀釋，10%鹽酸 洗至酸性，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析(石油醚乙酸乙酯= 4 1)，得白色固體(0. 075g，66% )，mp 96-99°C . IR(film，cnT1) 3407，3070，2951，2869， 1746，1705，1645，1521，1460，1375，1237，1038,882 ； 1H-Nmr(CdcI3JOOMHz) δ 0. 94， 0. 99,1. 69 (9Η for 0. 99, each 3H for others, s，24，25，26，27and 30_CH3)，2. 03 (3H，s, Ac) ,2. 41-2. 53 (3H, m)，3. 11 (1H, m, H-19) ,3. 76 (3H, s, COOCH3), 4. 00-4. 12 (4H, m, H-23, CONHCH2) ,4. 60,4. 74 (each 1H, s, H-29), 6. 04 (1H, t, J = 5. 3Hz, C0NH) ； ESI-MS m/z 584. 4[M+H]+，582. 4[Μ-ΗΓ.實施例110-[3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-?；鵠-乙二醇
將3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室溫攪拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至乙二醇(0. lml, 1. 6mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液中，室溫攪拌4h，濃縮，乙酸乙 酯(15ml)稀釋，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析(石油醚乙酸乙 酯=5 1)，得白色固體(0. 069g，64% )，mp 111-114°C . 1H-WR(O)Cl3, 500MHz) δ 0· 94， 0· 98，0· 99，1· 00，1· 69 (each 3Η, s，24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 03 (3H，s，Ac)，2. 27 (2H， m)，2. 43-2. 50 (2H, m)，3. 00 (1H, m, H-19)，3. 84 (2H, t, J = 4. 7Hz, CE2OH)，4. 05 (2H, dd, J = 21. 5，10. 8Hz, H-23)，4· 24 (2H, m，28_C00CH2)，4· 62,4. 74 (each 1H, s, H-29)，6· 04 (1H, t, J =5. 3Hz, CONH) ；ESI-MS m/z :557. 3 [M+H]+·實施例123-羰基-23-乙酰氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸對腈基苯酯將3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室溫攪拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至對腈基苯酚(0. Ig,8. 4mmol)和4-二甲胺基吡啶(0. IOg,0. 82mmol)的四氫 呋喃(5ml)溶液中，室溫攪拌5h，濃縮，乙酸乙酯(15ml)稀釋，飽和食鹽水洗兩次，無水硫 酸鈉干燥，過濾，濃縮，大板(石油醚乙酸乙酯=4 1)，得白色固體(0.060g，50% )，mp 108-110°C . IR(film,cm-1)3446,3072,2950,2870,2230,1748，1706，1642，1601，1502，1459， 1377，1237，1211，1076,877 ；1H-NMR (CDCl3, 500MHz) δ 0. 95，1. 00，1. 02，1. 04，1. 71 (each 3H，s，24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 03 (3H，s，Ac)，2. 13(lH，m)，2. 30(lH，m)，2. 43-2. 50 (3H, m)，3. 01 (1H, m, H-19)，4. 06 (2H, dd, J = 25. 2,10. 8Hz, H-23)，4. 64，4. 75 (each 1H, s, H-29)，7. 17，7. 70 (each 2H, d, J = 8. 6Hz, H-Ar)；實施例13N-[3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酰基]-乙二胺將3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室溫攪拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至乙二胺(0. Ig,8. 4mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，室溫攪拌lh，濃縮，乙酸乙 酯(15ml)稀釋，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析(二氯甲烷甲醇 =15 1)，得白色固體 9e(0. 044g，41% )，mp 86_89°C . IR(film，cnT1) 3415，2926，2867， 1744，1707，1640，1522，1461，1376，1240，1038，882 ；1H-NMR(CDCl3, 300MHz) δ 0.94，0.99，
1.69 (9H for 0. 99, each 3H for others, s，24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 03 (3H，s, Ac)，
2.89 (2H, s)，3. 11 (1H, m, H-19) ,3. 37 (2H, m, C0NHCH2)，4. 02 (2H，dd, J = 16. 2,10. 8Hz, H-23)，4. 59，4. 74(each 1H, s, H-29) ；ESI-MS m/z 555. 5[M+H]+實施例143-肟基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸將3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0. 05g)溶于吡啶(6ml)中， 加入鹽酸羥胺(0. 05g,0. 7mmOl)，80°C反應(yīng)4h，乙酸乙酯(15ml)稀釋，10%鹽酸洗至酸性， 水洗兩次，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，粗品柱層析(二氯甲烷甲醇 =40 1)，得白色固體(0. 022g，43% )。Mp 245°C分解.IR(film，cnT1) 3439，3073，2940， 2870，1700，1640，1450，1386，1230，1189，1033,873 ；1H_NMR(DMS0，500MHz) δ 0.82,0.91，0. 94，0. 96，1. 65 (each 3H, s，24，25，26，27and 30_CH3)，1. 97 (3H, s，Ac)，2. 25-2. 33 (2H, m)，2. 62 (1H, m, H_2b)，2. 96 (1H, m, H-19)，4. 12 (2H, dd, J = 14. 6，10. 7Hz, H_23) ,4. 57, 4. 70(each 1H, s, H-29)，10. 46(1H, d, J = 18. 3，NOH)，12. 02(1H, s, COOH) ；ESI-MSm/z 484. 3[Μ-ΗΓ.實施例153-肟基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙酯化合物3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸乙酯與鹽酸羥胺反應(yīng)， 粗品柱層析(石油醚乙酸乙酯=5 1)，得白色固體(0.029g，56% )，mp 101_104°C . IR(film，cm-1)3415,2948,2869,1724，1642，1462，1379，1176，1155，1039，939，883 ； 1H-Nmr(Cdci3JOOmHz) δ ο. 95,o. 96, 1. 02,1. 05,1. 68(each 3η, s，24，25，26，27 and 30-CHs)，1. 81-1. 84 (1H, m)，1. 95 (1H, m)，2. 03-2. 12 (2H, m)，2. 24-2. 33 (2H, m)，2. 98 (1H, m, H-19) ,3. 08 (1H, m, H_2b)，3· 49，3. 62(eachlH, d, J = 11. 4Hz, Η-23)，4· 14 (2Η, m, 28-C00CH2)，4· 60,4. 73 (each 1H, s, H-29) ；ESI-MS m/z 514. 4[M+H]+.實施例163-對甲苯磺酰腙-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸芐酯將3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸芐酯(0. 05g)溶于甲醇(8ml) 中，加入對甲苯磺酰胼(2equiv mol)，回流反應(yīng)3h，冷卻，乙酸乙酯(15ml)稀釋，10%鹽酸 洗至酸性，水洗兩次，飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，粗品柱層析(石油 醚乙酸乙酯=3 1)，得白色固體(0. 040g，61% )，mp 108-111 °C · IR(film, cnT1) 3450， 2949,2866，1724，1640，1457，1378，1167，1122，1044 ；1H-NMR (CDCl3, 300MHz) δ 0. 76， 0. 85,0. 87,0. 91,1. 67 (each 3Η，s，24，25，26，27 and 30-CHs) , 2. 43 (3H, s, CH3-Ar),
3.01 (1H，m，H-19) ,3.35，3. 54 (each 1H, d, J = 11. 5Hz，H-23)，4. 59，4. 72 (each 1H, s, H-29) ,5. 09, 5. 13 (each 1H, m, CH2-Ar)，7. 31-7. 36 (7H, m, H-Ar)，7. 82 (2H, m, H-Ar) ； ESI-MS m/z :729. 6[M+H]+，727. 3[Μ-ΗΓ，763. 6[M+Cir.實施例173-肟基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸烯丙酯化合物3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸烯丙酯與鹽酸羥胺反應(yīng)， 粗品柱層析(石油醚乙酸乙酯=5 1)，得白色固體(0.039g，76% )，mp 125_128°C . IR(film, cm-1)3426,2946,2869,1725，1643，1461，1378，1172，1123，1041，982，937，883 ； 1H-Nmr(Cdci3JOOmHz) δ o. 88, o. 89, o. 89,0. 93,1. 61 (each 3Η, s，24，25，26，27 and 30-CHs) ,2. 93-3. 06 (2H, m, H-19, H-2b), 3. 41,3. 54 (each 1H, d, J = 11. 4Hz，H-23)，
4.45-4. 55 (2H, m, 28_C00CH2)，4. 53，4. 66 (each 1H, s, H-29)，5. 16 (1H, d，J = 10. 5，= CH-c is) ,5. 26(lH，dd，J = 17. 1，1. 4Hz, = CH-trans), 5. 85(lH,m,CH = CH2) ； ESI-MS m/z 526. 4[M+H]+，524. 5[Μ-ΗΓ.實施例18片劑實施例1250g羥丙甲基纖維素E5 15g微晶纖維素MCC102 18g
12
8%聚維酮K30 適量硬酯酸鎂2g_1000 片取上述配方，用常規(guī)方法制備成片劑。
權(quán)利要求
通式I所示23 羥基白樺酸衍生物或其可藥用鹽其中R1代表OH、OCOR4；R2代表Cl、OM、OG、OR4、NHR4、N(R4)2、OR4COOR4、NHR4COOR4、NHR4NH2、OR4OH；R3代表O、NOR4、NNHR4；R4代表H、非取代或X取代的C1 C10直鏈或支鏈的烷烴、烯烴、炔烴、環(huán)烷烴、苯基、芐基、萘基，聯(lián)苯甲基；X代表H、Cl、Br、F、I、CN、NH2，NO2、CF3、OH、OCH3、COOH，COOCH3，C1 C10直鏈或支鏈的烷烴、烯烴、炔烴、環(huán)烷烴、苯基、芐基、萘基；M代表Na、K、Li；G代表糖苷或乙?；奶擒?。FSA00000185821500011.tif
2.權(quán)利要求1的23羥基白樺酸衍生物或鹽，其中 其中R1代表OH、OAc ；R2 代表 0G、OH、NH2、CH2CH3、CH2CH = CH2、NHCH2CH2NH2、0CH2CH20H、"二0、 NC0-(Q^CNoch2cooch2ch3、och2cooh、nhch2cooch3、nhch2cooh ;R3 代表 0、NOH、NOAc、NNHPh、NNHTs ； G代表吡喃葡萄糖或四乙?；倪拎咸烟?。
3.權(quán)利要求2的化合物為下列任意結(jié)構(gòu)3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸芐酯；3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸；3-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙氧甲?；柞ィ?-羰基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0 -D-吡喃葡萄糖苷基)酯；3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸；N- (3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-?；?-甘氨酸甲酯；3-肟基-23-羥基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙酯。
4.藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1的通式I的23-羥基白樺酸衍生物 及藥學(xué)上可接受的載體。
5.權(quán)利要求1的23-羥基白樺酸衍生物用于制備治療腫瘤疾病的藥物的用途。
6.權(quán)利要求5的用途，其中腫瘤疾病是肝癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤、宮頸癌、乳腺癌、白 血病或腦瘤。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類23-羥基白樺酸衍生物，本發(fā)明還公開了這些23-羥基白樺酸衍生物的制備方法以及含有所述化合物的藥物組合物和所述化合物在治療腫瘤疾病或病癥中的應(yīng)用。
文檔編號C07J63/00GK101928323SQ201010224698
公開日2010年12月29日 申請日期2010年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月13日
發(fā)明者葉文才, 吳曉明, 姚和權(quán), 孫飛, 張陸勇, 徐進(jìn)宜, 朱培清, 李贊, 查曉明, 江波, 袁勝濤 申請人:中國藥科大學(xué)