專利名稱：一種西貝堿的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種西貝堿的制備方法，尤其是一種采用超臨界CO2提取，柱層析吸附分離純化制備西貝堿的方法。
背景技術：
西貝堿又叫西貝素，是一種生物堿。
分子式C27H43NO3；分子量429.64； 分子結構式
性質西貝堿是一種無色棱柱狀結晶，熔點269℃，易溶于氯仿、乙酸乙酯，溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙醚，不溶于水及石油醚。
藥理研究表明，西貝堿對離體豚鼠回腸、兔十二指腸和大鼠子宮及整體狗小腸有明顯的松弛作用，對卡巴膽堿引起的豚鼠離體氣管收縮有較強的抑制作用，其解痙作用類似罌粟堿，能對抗氯化乙酰膽堿、二磷酸組胺和氯化鋇所引起的痙攣；同時也能擴張外周血管，但對心電圖無影響。
百合屬百合科(Liliaceae)草本植物，其地下鱗莖近球形或圓錐形，表面類白色。作為常用中草藥，化痰止咳潤肺，川貝母用于肺虛久咳，虛勞咳嗽，燥熱咳嗽，肺癰，瘰疬，癰腫，乳癰；伊貝母用于肺熱咳嗽，干咳少痰，陰虛勞嗽，咳痰帶血。主要成分為生物堿，并含皂苷及微量金屬元素。
國內從植物中提取西貝堿，原料主要是伊貝母和川貝母。西貝堿在伊貝母和川貝母中含量較低，現有提取工藝多是乙醇滲漉提取、氨水及混合溶液浸提。如宋衛中發表的“正交實驗優選咳安含片提取工藝”，該文獻采用70％乙醇滲漉提取，提取時間長。趙德永發表的“4種川貝母的總皂苷、總生物堿及西貝素的含量測定”，該文獻采用氨水濕潤、乙醚-氯仿-乙醇浸提，氯仿萃取，溶劑消耗量大，且未分離得到西貝素單體。朱子清天然藥物成分提取分離與制備，中國醫藥科技出版社，1994346.提出用碳酸鈉溶液拌和，苯、酸依次提取，堿化，乙醚反復萃取，無水碳酸鉀干燥，過氧化鋁柱，經乙酸乙酯-甲醇-氨水(20∶1∶1)洗脫，得西貝堿結晶，該方法操作繁瑣，溶劑復雜，有機溶劑殘留多。因此提供一種操作簡單、快速、提率高、純度高的西貝堿制備工藝具有現實意義。
發明內容
本發明的目的是為了提供一種從伊貝母或川貝母中制備西貝堿的方法。該工藝提取率高，純度理想，易擴大工業生產。
本發明是采用以下技術方案實現的 一種西貝堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟 1)超臨界CO2萃取將原料粉碎60-100目，加入堿性乙醇溶液浸泡；通CO2乙酸乙酯作夾帶劑，收集萃取物； 2)樹脂吸附將上述萃取物加入大孔樹脂，先用石油醚洗脫雜質，再經乙酸乙酯-乙醇-石油醚混合溶液梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集洗脫液； 3)重結晶上述洗脫液回收試劑至小體積，放置結晶，濾出結晶物加石油醚洗滌，95％乙醇回流飽和溶解，結晶1-3次，濾出低溫干燥即得產品。
所述的原料為百合科植物新疆貝母、伊犁貝母、卷葉貝母、甘肅貝母或暗紫貝母的鱗莖。
所述靜態浸泡溶劑堿性乙醇為pH10的乙醇，乙醇濃度為70-90％，堿可選氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或氨水，浸泡1-3小時。
所述超臨界萃取條件夾帶劑加入量為原料量的10-20％，萃取壓力25-40MPa，提取溫度40-60℃，CO2流量1-5ml/g生藥/min，動態提取150min-250min；解析壓力6-15MPa，解析溫度50-60℃。
所述大孔樹脂吸附條件大孔樹脂可選用D101、D180、HPD100或AB-8大孔吸附樹脂。
所述梯度洗脫條件先乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)4-5倍柱體積洗脫，TLC檢測，有西貝堿流出，再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脫，至無西貝堿流分。
所述結晶條件西貝堿流分濃縮至其體積的1/4-1/5，重結晶2-3次，養晶時間至少8小時。
綜上所述，本發明存在以下優點超臨界CO2萃取提取率高，溶劑用量小，性質穩定，生產安全，產品純度高。
下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式 下述實施例中西貝堿的檢測采用薄層色譜法(參照2005年版中國藥典伊貝母鑒別項下)， 具體方法如下 薄層色譜條件 薄層板2％氫氧化鈉制備的薄層板； 展開劑氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(8∶8∶3∶2)10℃以下放置的下層溶液； 展開，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液和3％亞硝酸鈉醇試液，在與對照品色譜相同的位置上顯相同的棕色斑點。
實施例1 取貝母藥材粉碎60目，取5kg投入提取塔，先加入100mlpH為10的75％乙醇浸泡2小時，密封，將提取溫度提高到50℃，分離塔溫度調至60℃，提取壓力38MPa，解析壓力10MPa，CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體凈化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。進入儲罐用高壓計量泵將CO2和500ml乙酸乙酯送入預熱器，通過預熱器到指定溫度和壓力，由提取塔下部夾帶乙酸乙酯一起進入與物料接觸，流速1.0L/min，調節塔內壓力，當提取壓力至40MPa，解析壓力至10MPa，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取3小時。停機后放出萃取物，收集萃取物，過D101大孔樹脂吸附，量取4BV石油醚洗脫雜質后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脫，薄層檢測，有西貝堿流分時再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脫，至無西貝堿流分結束洗脫，收集該段流分，回收試劑至其體積的1/4，放置結晶8小時。濾出粗晶物3.6g，粗結晶物用95％乙醇回流飽和溶解，放置結晶12小時，濾出，重結晶3次，低溫干燥得產品1.86g，含量98.8％。
實施例2 取貝母藥材粉碎80目，取8kg投入提取塔，先加入160mlpH為10的80％乙醇浸泡1小時，密封，將提取溫度提高到40℃，分離塔溫度調至50℃，提取壓力35MPa，解析壓力8MPa，CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體凈化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。進入儲罐用高壓計量泵將CO2和1200ml乙酸乙酯送入預熱器，通過預熱器到指定溫度和壓力，由提取塔下部夾帶乙酸乙酯一起進入與物料接觸，流速1.0L/min，調節塔內壓力，當提取壓力至35MPa，解析壓力至8MPa，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取200分鐘。停機后放出萃取物，收集萃取物，過HPD100大孔樹脂吸附，量取5BV石油醚洗脫雜質后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脫，薄層檢測，有西貝堿流分時再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脫，至無西貝堿流分結束洗脫，收集該段流分，回收試劑至其體積的1/5，放置結晶。濾出粗晶物5.7g，粗結晶物用95％乙醇回流飽和溶解，放置結晶10小時，濾出，重結晶2次，低溫干燥得產品2.6g，含量99％。
實施例3 取貝母藥材粉碎100目，取6kg投入提取塔，先加入120mlpH為10的90％乙醇浸泡1小時，密封，將提取溫度提高到45℃，分離塔溫度調至55℃，提取壓力25.5MPa，解析壓力6MPa，CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體凈化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。進入儲罐用高壓計量泵將CO2和600ml乙酸乙酯送入預熱器，通過預熱器到指定溫度和壓力，由提取塔下部夾帶乙酸乙酯一起進入與物料接觸，流速1.0L/min，調節塔內壓力，當提取壓力至35MPa，解析壓力至8MPa，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取200分鐘。停機后放出萃取物，收集萃取物，過D180大孔樹脂吸附，量取4BV石油醚洗脫雜質后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脫，薄層檢測，有西貝堿流分時再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脫，至無西貝堿流分結束洗脫，收集該段流分，回收試劑至其體積的1/5，放置結晶。濾出粗晶物4.2g，粗結晶物用95％乙醇回流飽和溶解，放置結晶13小時，濾出，重結晶3次，低溫干燥得產品2.2g，含量98.7％。
實施例4 取貝母藥材粉碎80目，取2kg投入提取塔，先加入40mlpH為10的85％乙醇浸泡1.5小時，密封，將提取溫度提高到40℃，分離塔溫度調至60℃，提取壓力28MPa，解析壓力8MPa，CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體凈化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。進入儲罐用高壓計量泵將CO2和400ml乙酸乙酯送入預熱器，通過預熱器到指定溫度和壓力，由提取塔下部夾帶乙酸乙酯一起進入與物料接觸，流速1.0L/min，調節塔內壓力，當提取壓力至25MPa，解析壓力至6MPa，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取2小時。停機后放出萃取物，收集萃取物，過AB-8大孔樹脂吸附，量取4BV石油醚洗脫雜質后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脫，薄層檢測，有西貝堿流分時再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脫，至無西貝堿流分結束洗脫，收集該段流分，回收試劑至其體積的1/4，放置結晶。濾出粗晶物1.45g，粗結晶物用95％乙醇回流飽和溶解，放置結晶15小時，濾出，重結晶3次，低溫干燥得產品0.75g，含量98％。
權利要求
1.一種西貝堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟
1)超臨界CO2萃取將原料粉碎60-100目，加入堿性乙醇溶液浸泡；通CO2乙酸乙酯作夾帶劑，收集萃取物；
2)樹脂吸附將上述萃取物加入大孔樹脂，先用石油醚洗脫雜質，再經乙酸乙酯-乙醇-石油醚混合溶液梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集洗脫液；
3)重結晶上述洗脫液回收試劑至小體積，放置結晶，濾出結晶物加石油醚洗滌，95％乙醇回流飽和溶解，結晶1-3次，濾出低溫干燥即得產品。
2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的原料為百合科植物新疆貝母、伊犁貝母、卷葉貝母、甘肅貝母或暗紫貝母的干燥鱗莖。
3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述靜態浸泡溶劑堿性乙醇為pH10的乙醇，乙醇濃度為70-90％，堿可選氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或氨水，靜態浸泡1-3小時。
4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述超臨界萃取條件夾帶劑加入量為原料量的10-20％，萃取壓力25-40MPa，提取溫度40-60℃，CO2流量1-5ml/g生藥/min，動態提取150min-250min；解析壓力6-15MPa，解析溫度50-60℃。
5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述大孔樹脂吸附條件大孔樹脂可選用D101、D180、HPD100或AB-8大孔吸附樹脂。
6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述梯度洗脫條件先乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)4-5倍柱體積洗脫，TLC檢測，有西貝堿流出，再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脫，至無西貝堿流分。
7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述結晶條件西貝堿流分濃縮至其體積的1/4-1/5，重結晶2-3次，養晶時間至少8小時。
全文摘要
本發明涉及一種西貝堿的制備方法。工藝步驟包括貝母原料粉碎，采用超臨界CO2作溶劑，乙酸乙酯作夾帶劑，提取壓力25-40MPa，提取溫度40-60℃，靜態浸泡1-3小時，解析壓力為6-15MPa，解析溫度50-60℃，動態提取時間150-250min，萃取物經大孔樹脂吸附，乙酸乙酯-乙醇-石油醚梯度洗脫，洗脫液再經石油醚除雜、乙醇重結晶。該工藝提取率高，純度理想，生產周期短。
文檔編號C07D455/03GK101768160SQ20101010311
公開日2010年7月7日 申請日期2010年2月1日 優先權日2010年2月1日
發明者劉東鋒, 郭琴, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司