專利名稱：虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法
技術領域：
本發明涉及一種從虎杖藥材中制備白藜蘆醇的方法。
背景技術：
中藥虎杖(Rhizoma polygoni cuspidati)系蓼科植物虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.)的干燥根莖及根。具有祛風利濕、散淤定痛、止咳化痰的功效， 臨床可用于治療關節痹痛、濕熱黃疸、癰腫瘡毒等多種疾病。主要含有大黃素甲醚、大黃素、 大黃酸、白藜蘆醇、白藜蘆醇甙等化學成分。 白藜蘆醇(3，4' ，5-三羥基二苯代乙烯，resveratro1)是中藥虎杖的主要有效成 分，具有抗氧化、抗增生、抑制血小板聚集、血管舒張等作用。尤其人們亦發現白藜蘆醇能夠 抑制腫瘤細胞生長、降低動物腫瘤生長速度，對腫瘤的預防、與治療有一定的作用，成為人 們研究的熱點。 白藜蘆醇的生產、制備方法有多種，如層析法(專利號00121100. 5)、超臨界流體 萃取法(專利號02139912. 3)、酶解法(專利號:200810014833. 8)等。柱層析方法(如硅 膠)需要消耗大量的有機溶劑，并且由于填料對白藜蘆醇有很強的吸附作用，因此，該方法 成本高、耗時長、收率低。超臨界流體萃取法所需儀器昂貴，在許多生產單位及實驗室難以 實現普及。
發明內容
本發明的目的在于提供一種結構合理，方法簡單、成本低、便于實現白藜蘆醇規模 化生產的虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法。
本發明的技術解決方案是 —種虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法，其特征是依次包括下列步驟 (1)回流提取將虎杖藥材粉碎，然后用乙醇浸泡、回流提取，并經減壓濃縮干燥、
研磨，得干浸膏粉末； (2)過濾或抽濾將上述干粉末，按重量/體積比為1 : 40 100加水，然后超聲 分散溶解、過濾或抽濾，得濾渣和水層； (3)液_液萃取在上述水層中加入叔丁基甲醚、石油醚_乙酸乙酯或乙醚萃取， 得有機層； (4)洗滌、濃縮干燥上述有機層中加入pH為8 9的堿性水溶液或5XNaHC03溶 液，振搖，洗滌至水層由紅色變為無色；洗滌后的有機層減壓濃縮干燥，即獲得白藜蘆醇粗 乙醇為95%乙醇，虎杖藥材與95%乙醇的重量/體積比為1 : 5。
步驟(3)中水層與加入叔丁基甲醚、石油醚-乙酸乙酯或乙醚的體積比為l : 1。
步驟(4)中pH為8 9的堿性水溶液或5% NaHC03溶液的用量與所述有機層的 體積比為1 : 2。
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本發明方法簡單、成本低、收率^ 90%，便于實現白藜蘆醇規模化生產。
下面結合附圖和實施例對本發明作進一步說明。
圖1、圖2、圖3是表示虎杖藥材經95%乙醇提取、濃縮、干燥后，獲得的乙醇提取物 色譜圖。其中 圖1是白藜蘆醇對照品色譜圖。
圖2是大黃素對照品色譜圖。 圖3是虎杖乙醇提取物色譜圖。其中色譜峰1、2、5為未知物色譜峰，3白藜戸醇， 4大黃素。 圖4、圖5、圖6是乙醇提取物經研磨、加水超聲分散溶解后，再經過濾獲得的濾渣 及水層色譜圖，其中TLC譜圖是以石油醚-乙酸乙酯(1 : 1)為展開劑。譜圖顯示，通過過 濾，能夠除去全部或部分極性小的成分(如大黃素、大黃素甲醚等)及殘存的藥材粉末，而 極性相對較大的白藜蘆醇損失較少，絕大部分仍保留在水層。其中
圖4是虎杖乙醇提取物溶液抽濾后濾渣色譜圖。
圖5是虎杖乙醇提取物溶液抽濾后水層色譜圖。 圖6是虎杖乙醇提取物抽濾前后TCL圖。圖6中1為虎杖乙醇提取物，2為濾渣，
3為水層濃縮物，4為白藜蘆醇對照；①為白藜蘆醇斑點，②為大黃素斑點。 圖7、圖8、圖9是表示水層經叔丁基甲醚萃取后，得到的有機層及水層色譜圖，其
中TLC譜圖是以氯仿-甲醇(8 : 2)為展開劑。譜圖顯示叔丁基甲醚可將水層中的絕大部
分白藜蘆醇轉移至有機層，提取回收率^ 90%。其中 圖7是叔丁基甲醚萃取后有機層色譜圖。 圖8是叔丁基甲醚萃取后水層HPLC色譜圖。 圖9是叔丁基甲醚萃取前后TCL譜圖。圖9中；1萃取前，2萃取前后有機層，3萃 取后水層，①為白藜蘆醇斑點，②為大黃素斑點。 圖10、圖11、圖12是前述叔丁基甲醚有機層經5% NaHC(^溶液洗滌后，有機層及
水層色譜圖。經堿溶液洗滌，有機層中強酸性成分及極性大的成分均被洗去，只剩下白藜蘆
醇和大黃素兩種主要成分，其中白藜蘆醇純度達到64%以上。其中 圖10是5 % NaHC03洗滌后水層色譜圖。 圖11是5 % NaHC03洗滌后叔丁基甲醚有機層色譜圖。 圖12是5% NaHC03洗滌前后TCL譜圖。圖12中，1洗滌前有機層，2洗滌后有機 層，3白藜蘆醇對照品，①為白藜蘆醇斑點，②為大黃素斑點。
具體實施例方式
實施例1 : 取虎杖藥材lkg，粉碎、加5000ml95X乙醇浸泡12h、回流提取3次，每次lh。合 并提取液，減壓濃縮干燥，得到虎杖乙醇提取物的干浸膏，干浸膏粉末經研磨，得均勻一致
的粉末。上述粉末，按i : 20-ioo(例i : 20、i;60、i : ioo)重量/體積比(w/v)加水、
5(TC超聲分散溶解、抽濾，得濾渣和水層。水層按體積比l : 1(v/v)的比例加入叔丁基甲 醚，萃取3次，合并有機層，白藜蘆醇收率^ 90%。有機層加入5% NaHC03溶液，洗滌2次， 至水層由紅色變為無色，其中5XNaHC03溶液的用量與所述有機層的體積比為l : 2。取有機層，減壓濃縮干燥，即獲得白藜蘆醇含量^ 64%的粗品。
實施例2 : 取虎杖藥材lkg，粉碎、加5000ml 95%乙醇浸泡12h、回流提取3次，每次lh。合并 提取液，減壓濃縮干燥，得到虎杖乙醇提取物的干浸膏，干浸膏經研磨，得均勻一致的粉末。
上述粉末，按i : 20-ioo(例i : 20、i;60、i : ioo) (w/v)加水、5(TC超聲分散溶解、抽濾， 得濾渣和水層。水層按i : 1(v/v)的比例加入石油醚-乙酸乙酯(i : i)混合溶劑，萃取
三次，合并有機層，白藜蘆醇收率^ 90%。有機層加入適量5% NaHC(^溶液，洗滌2次，至 水層由紅色變為無色有機層加入5% NaHC03溶液，洗滌2次，至水層由紅色變為無色，其中 5XNaHC03溶液的用量與所述有機層的體積比為1 : 2。取有機層，減壓濃縮干燥，即獲得 白藜蘆醇含量>64%的粗品。
權利要求
一種虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法，其特征是依次包括下列步驟(1)回流提取將虎杖藥材粉碎，然后用乙醇浸泡、回流提取，并經減壓濃縮干燥、研磨，得干浸膏粉末；(2)過濾或抽濾將上述干粉末，按重量/體積比為1∶40～100加水，然后超聲分散溶解、過濾或抽濾，得濾渣和水層；(3)液-液萃取在上述水層中加入叔丁基甲醚、石油醚-乙酸乙酯或乙醚萃取，得有機層；(4)洗滌、濃縮干燥上述有機層中加入pH為8～9的堿性水溶液或5％NaHCO3溶液，振搖，洗滌至水層由紅色變為無色；洗滌后的有機層減壓濃縮干燥，即獲得白藜蘆醇粗品。
2. 根據權利要求1所述的虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法，其特征是乙醇為95%乙 醇，虎杖藥材與95%乙醇的重量/體積比為1 : 5。
3. 根據權利要求1或2所述的虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法，其特征是步驟(3)中 水層與加入叔丁基甲醚、石油醚-乙酸乙酯或乙醚的體積比為1 : 1。
4. 根據權利要求1或2所述的虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法，其特征是步驟(4)中 pH為8 9的堿性水溶液或5% NaHC03溶液的用量與所述有機層的體積比為1 : 2。
全文摘要
本發明公開了一種虎杖中白藜蘆醇的簡易制備方法，包括回流提取、過濾或抽濾、液-液萃取、洗滌、濃縮干燥等步驟。本發明方法簡單、成本低、收率高，便于實現白藜蘆醇規模化生產。
文檔編號C07C39/21GK101747157SQ200910264988
公開日2010年6月23日 申請日期2009年12月22日 優先權日2009年12月22日
發明者仇文靜, 汪冬庚, 章琴, 陶艷瓊, 鞠劍峰, 黃金華 申請人:南通大學