專利名稱：一種牡荊素鼠李糖苷的制備方法
技術領域：
本發明涉及牡荊素鼠李糖苷的制備純化工藝，特別是一種從山楂和山楂葉中提取
牡荊素鼠李糖苷的方法。
背景技術：
牡荊素鼠李糖苷(Vitexin_2_0_rhamnoside，2_0_Rhamnosylvitexin)為山楂中
特有的黃酮苷類物質，分子式C27H3。014，分子量578. 52，結構如下
OH O 牡荊素鼠李糖苷被證實具有藥理活性，能夠治療心血管疾病，并能有很強的抑制 人類的乳癌細胞DNA的合成，具有抗氧化作用。據報道牡荊素鼠李糖苷在山楂葉中的含量 約0. 4 1. 3%。 牡荊素鼠李糖苷在植物中的分布不廣泛，因此關于其提取方法的報道較少，且不 是很深入，存在一些問題。如中國專利CN101050226《一種牡荊素衍生物分離方法》報道的 方法，用了硅膠作為層析填料，對黃酮苷類的吸附強度過大，洗脫較難，導致收率偏低。
發明內容
本發明的目的是為了提供一種能源消耗少，牡荊素鼠李糖苷得率75%以上，純度 達95%以上，產量大，易于實現工業化的牡荊素鼠李糖苷提取工藝。
本發明的目的是這樣來實現的 ①醇提將山楂或山楂葉粉碎后在70 90%的乙醇中回流提取1 1. 5小時，濾 去不溶物，再加入活性炭，回流攪拌1 1. 5小時脫色，過濾，減壓濃縮，得到濃縮液；
②大孔樹脂吸附上述濃縮液通過大孔樹脂柱進行飽和吸附，用乙醇溶液分段洗 脫，含牡荊素鼠李糖苷的洗脫液減壓濃縮，得浸膏； ③聚酰胺層析浸膏與聚酰胺拌樣上柱，用氯仿甲醇混合液分段洗脫，所得牡荊素 鼠李糖苷層析液減壓干燥，得粗品； 結晶上述粗品用正己烷飽和溶解，減壓濃縮至原體積的1/20 1/10，靜置結晶，再重結晶2次，即得淡黃色牡荊素鼠李糖苷結晶。 上述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于粉碎粒度為20-40目。 上述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述醇提步驟乙醇用量為原料質量
的10 12倍量。 上述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述活性炭用量為回流提取液質量 的0. 5 1 % 上述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述大孔樹脂柱可選用AB-8、 D101 或HZ-806大孔樹脂中的一種。 上述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述大孔樹脂吸附物質的洗脫為分 段洗脫過程先用4 5倍量柱體積的去離子水洗脫水溶性雜質，再用6 8倍量柱體積 30 40%乙醇洗脫有機雜質，最后用4 5倍量柱體積60 80%乙醇洗脫牡荊素鼠李糖 苷。 上述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述聚酰胺用氯仿甲醇系統分段洗 脫條件為先用8 10 : 1、用量2 3倍量柱體積的溶劑除雜，后用6 7 : 1、用量3 4倍量柱體積溶劑除雜，再用4 5 : 1、用量4 5倍量柱體積的溶劑洗脫牡荊素鼠李糖 苷。 綜上所述，本發明存在以下優點 1)除去提取以外的純化操作都在非加熱條件下完成，既防止了原料受熱不穩定， 也節省了能耗。 2)采用氯仿甲醇混合液能使黃酮苷元類雜質先于黃酮苷類被洗脫，結合分段洗脫 過程可以顯著減少雜質含量。 下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限 于下列實施方式。
具體實施例方式
實施例1 : 取lkg山楂和山楂葉(牡荊素鼠李糖苷含量l. 1%)，粉碎至20目，加入10L 70% 的乙醇中回流提取1小時，過濾后在濾液中加入50g活性炭，回流攪拌1小時，濾去活性 炭，減壓濃縮后過柱體積5L的AB-8大孔樹脂柱，用20L去離子水和30L 30%乙醇除雜后， 用20L 60%乙醇洗脫牡荊素鼠李糖苷，減壓干燥，所得浸膏拌樣后上聚酰胺層析柱，先用 10L 10 : l氯仿甲醇混合液洗脫雜質，后用15L7 : 1氯仿甲醇混合液洗脫雜質，再用20L 3.1 : l氯仿甲醇混合液洗脫牡荊素鼠李糖苷，收集牡荊素鼠李糖苷層析液，減壓干燥得 11.4g粗品，用正己烷飽和溶解，減壓濃縮至原體積的1/10，靜置結晶，再重結晶2次，最終 得到9. lg含量為95. 5%的牡荊素鼠李糖苷成品。
實施例2 : 取lkg山楂和山楂葉(牡荊素鼠李糖苷含量0.9% )，粉碎至30目，加入11L80% 的乙醇中回流提取1. 25小時，過濾后在濾液中加入70g活性炭，回流攪拌1. 25小時，濾去 活性炭，減壓濃縮后過柱體積5L的D101大孔樹脂柱，用23L去離子水和35L 30%乙醇除 雜后，用23L65 %乙醇洗脫牡荊素鼠李糖苷，減壓干燥，所得浸膏拌樣后上聚酰胺層析柱，先
4用13L 9 : l氯仿甲醇混合液洗脫雜質，后用18L 6.5 : 1氯仿甲醇混合液洗脫雜質，再用 23L 3.5 : l氯仿甲醇混合液洗脫牡荊素鼠李糖苷，收集牡荊素鼠李糖苷層析液，減壓干燥 得10. 8g粗品，用正己烷飽和溶解，減壓濃縮至原體積的1/15，靜置結晶，再重結晶2次，最 終得到7. 7g含量為96. 4%的牡荊素鼠李糖苷成品。
實施例3 : 取lkg山楂和山楂葉(牡荊素鼠李糖苷含量1.0% )，粉碎至40目，加入12L90X 的乙醇中回流提取1. 5小時，過濾后在濾液中加入100g活性炭，回流攪拌1. 5小時，濾去活 性炭，減壓濃縮后過柱體積5L的HZ-806大孔樹脂柱，用25L去離子水和40L 30%乙醇除 雜后，用25L 70%乙醇洗脫牡荊素鼠李糖苷，減壓干燥，所得浸膏拌樣后上聚酰胺層析柱， 先用15L 8 : 1氯仿甲醇混合液洗脫雜質，后用20L6 : l氯仿甲醇混合液洗脫雜質，再用 25L4 : l氯仿甲醇混合液洗脫牡荊素鼠李糖苷，收集牡荊素鼠李糖苷層析液，減壓干燥得 14. 8g粗品，用正己烷飽和溶解，減壓濃縮至原體積的1/20，靜置結晶，再重結晶2次，最終 得到8. 7g含量為98. 1%的牡荊素鼠李糖苷成品。
權利要求
一種牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于包括以下幾個步驟①醇提將山楂或山楂葉粉碎后在70～90％的乙醇中回流提取1～1.5小時，濾去不溶物，再加入活性炭，回流攪拌1～1.5小時脫色，濾過，減壓濃縮，得到濃縮液；②大孔樹脂吸附上述濃縮液通過大孔樹脂柱進行飽和吸附，用水和不同濃度乙醇溶液分段洗脫，含牡荊素鼠李糖苷的洗脫液減壓濃縮，得浸膏；③聚酰胺層析浸膏與聚酰胺拌樣上柱，用氯仿甲醇混合液分段洗脫，所得牡荊素鼠李糖苷洗脫液減壓干燥，得粗品；④結晶上述粗品用正己烷飽和溶解，減壓濃縮至原體積的1/20～1/10，靜置結晶，再重結晶2次，即得淡黃色牡荊素鼠李糖苷結晶。
2. 根據權利要求l所述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于粉碎粒度為20-40目。
3. 根據權利要求1所述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述醇提步驟乙醇用 量為原料質量的10 12倍量。
4. 根據權利要求1所述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述活性炭用量為回 流提取液重量的O. 5 1%。
5. 根據權利要求1所述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述大孔樹脂柱可選 用AB-8、 D101或HZ-806大孔樹脂中的一種。
6. 根據權利要求1所述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述大孔樹脂吸附物 質的洗脫步驟為先用4 5倍量柱體積的去離子水洗脫水溶性雜質，再用6 8倍量柱體 積30 40%乙醇洗脫有機雜質，最后用4 5倍量柱體積60 80%乙醇洗脫牡荊素鼠李 糖苷。
7. 根據權利要求1所述牡荊素鼠李糖苷的制備方法，其特征在于所述聚酰胺用氯仿甲 醇系統分段洗脫條件為先用8 10 : 1、用量2 3倍量柱體積的溶劑除雜，后用6 7 : 1、用量3 4倍量柱體積溶劑除雜，再用4 5 : 1、用量4 5倍量柱體積的溶劑洗 脫牡荊素鼠李糖苷。
全文摘要
本發明涉及一種產量大，易于實現工業化的分離提純牡荊素鼠李糖苷的方法。工藝步驟包括醇提、大孔樹脂吸附、聚酰胺層析、萃取結晶。采用本發明生產牡荊素鼠李糖苷，能源消耗少、純度極高。
文檔編號C07D407/04GK101759688SQ20091023406
公開日2010年6月30日 申請日期2009年11月20日 優先權日2009年11月20日
發明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司