專利名稱：氯尼達明的結晶形式iii、其制備方法和含有所述結晶形式iii的組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及形態I、II和III的氯尼達明晶體、它們的制備方法，和含有所述晶體的組合物。
背景技術：
氯尼達明化學名為1-(2，4-二氯苯甲基)-1H-吲唑-3-羧酸，最先由德國Angelopharm開發，1986年在意大利上市，1990年葡萄牙上市，美國、加拿大等處于III期臨床，法國、日本等處于II期臨床，澳大利亞等幾個國家處于注冊前。這是屬于吲唑環類取代衍生物，最早發現其有殺精作用。在進一步的藥理研究及作用機理的探索中發現其抗腫瘤活性，通過體內、外一系列研究表明，它是一種不同于傳統抗腫瘤藥的腫瘤熱敏藥。它不影響細胞的增生，主要作用于細胞的能量代謝。通過改變腫瘤細胞的線粒體超微結構，抑制惡變細胞的氧耗，達到抑殺腫瘤細胞的目的。臨床研究表明它可作用于各種屬性的瘤形成，特別是乳腺癌、肺癌、前列腺癌和腦癌，可與放療和其他治療手段一起聯合使用。
德國專利2310031(1972年)和美國專利3.895.026(1975年)都揭示了合成氯尼達明的方法由3-羧酸-吲唑與2，4-二氯氯芐在堿性條件下脫HCl縮合成產品氯尼達明。
合成實驗發現，氯尼達明有無定形和晶型的形態，晶型氯尼達明的溶解度明顯好于無定形，所以，所屬技術領域很需要穩定性好、易于制造和配制的氯尼達明新晶體。
發明內容
本發明的一個目的是提供易于制造和配制、對光、濕、熱穩定性良好、適于工業化生產和貯存的新的氯尼達明晶體。
本發明的再一個目的是提供含有所述晶體的組合物。
本發明的另一個目的是提供所述晶體的制備方法。
本發明的這些目的是通過下列構思達到的 本發明提供了形態I的氯尼達明晶體，在使用35kv，30mA的Cu-kα輻射源照射下，有下述以2θ角度和晶面間距d值表示的X射線粉末衍射光譜 2θd值 11.7 7.5 12.7 7.0 14.5 6.1 15.0 5.9 17.7 5.0 17.9 4.9 24.1 3.7 25.2 3.5 25.6 3.5 26.4 3.4 27.1 3.3 28.3 3.2 28.9 3.1 29.4 3.0 30.0 3.0 31.9 2.8。
該晶體的DSC吸熱轉變在211.0℃。
本發明的另一方面提供了制備形態I的氯尼達明晶體的方法，包括 A)將由10-45％成品氯尼達明和55-90％的稀堿水溶液組成的混合物，控制pH8-10，加熱到80℃以上直至回流，溶解后慢慢降低溫度到80℃-50℃，向溶液中滴加無機酸至pH 3-5，冷卻到室溫，析出所需的形態I的氯尼達明晶體；或者 B)將成品氯尼達明溶于結晶溶劑，加熱到回流，溶解，然后快速冷卻，結晶，得到所需的形態I的氯尼達明晶體；其中所述的結晶溶劑選自與成品氯尼達明的重量體積比如下的溶劑(1)1-15倍的五個碳以下的醇，(2)6-12倍的冰醋酸，(3)6-12倍的冰醋酸與甲醇或乙醇的混合溶液，其中甲醇或乙醇占混合溶液總體積的1％-30％，(4)8-15倍的乙醇與丙酮的混合溶液，其中丙酮占混合溶液總體積的1％-30％，(5)8-15倍的乙醇與乙酸乙酯的混合溶液，其中乙酸乙酯占混合溶液總體積的1％-30％。
所述的無機酸優選地選自鹽酸、硝酸、硫酸或磷酸；所述的稀堿水溶液優選地選自氫氧化鈉水溶液、氫氧化鉀水溶液。
本發明還提供了形態II的氯尼達明晶體，在使用35kv，30mA的Cu-kα輻射源照射下，有下述以2θ角度和晶面間距d值表示的X射線粉末衍射光譜 2θ d值 11.37.8 11.77.6 15.35.8 20.14.4 22.93.9 26.03.4 27.13.3 32.22.8。
該形態II氯尼達明晶體屬三斜晶系，P-1空間群，晶胞參數為a＝7.7117 b＝8.1384c＝11.987 α＝106.17° β＝93.05°γ＝96.96°R值為0.0450。
所述的形態II的氯尼達明晶體的CSC吸熱轉變在211.2℃。
本發明還提供了制備形態II的氯尼達明晶體的方法，將成品氯尼達明溶于結晶溶劑，加熱溶清，然后靜置，緩緩降至15-25℃靜止結晶，過濾得所需的氯尼達明形態II，其中所述的結晶溶劑選自與成品氯尼達明的重量體積比如下的溶劑(1)15.5-25倍的冰醋酸，(2)12.5-25倍的冰醋酸與甲醇或乙醇的混合溶液，其中甲醇或乙醇占混合溶液總體積的1％-80％。
本發明進一步提供了形態III的氯尼達明晶體，在使用40kv，300mA的Cu-kα輻射源照射下，有下述以2θ角度和晶面間距d值表示的X射線粉末衍射光譜 2θ d值 5.316.6 11.17.9 11.57.7 13.26.7 14.06.28 16.85.3 21.54.1 22.24.0 22.53.9 23.23.8 27.53.2。
該形態III的氯尼達明晶體屬三斜晶系，P-1空間群，晶胞參數為a＝5.2879 b＝8.1754c＝16.768 α＝80.09°β＝89.89°γ＝80.65°R值為0.0477。
所述的形態III的氯尼達明晶的DSC吸熱轉變在211.3℃。
所述的DSC數據在DSC Q100 V7.3 Build 249儀器上測得。
本發明還涉及制備形態III的氯尼達明晶體的方法，包括 將成品氯尼達明溶于15.5-18倍w/v的溶劑中，加熱至回流，溶清，然后靜置，緩緩降溫至35-45℃，靜止結晶得所需的晶狀氯尼達明形態III，其中所述溶劑為冰醋酸。
此外，本發明還提供了一種藥物組合物，它包含上述的形態I、II或III的氯尼達明晶體中的一種或多種，以及藥學上可接受的載體。
圖1形態I的X-粉末衍射圖；縱坐標 強度(cps)，橫坐標2θ(°) 圖2形態I的DSC差熱掃描圖；縱坐標 熱流(W/g)，縱坐標溫度(℃) 圖3形態I的紅外光譜(IR)；縱坐標 透光度％，橫坐標波數(cm-1) 圖4形態II的X-粉末衍射圖；縱坐標 強度(cps)，橫坐標2θ(o) 圖5形態II的分子的空間立體結構； 圖6a形態II在A方向的晶胞堆積圖； 圖6b形態II的晶胞堆積圖中一堆的展開圖； 圖7形態II的分子間形成氫鍵的情況； 圖8形態II的差熱掃描圖；縱坐標熱流(W/g)，橫坐標溫度(℃) 圖9形態II的紅外圖譜；縱坐標透光度％，橫坐標波數(cm-1) 圖10形態III的X-粉末衍射圖；縱坐標強度(cps)，橫坐標2θ(°) 圖11形態III的分子的空間立體結構； 圖12a形態III在A方向的晶胞堆積圖； 圖12b形態III在B方向的晶胞堆積圖； 圖13形態III的晶胞堆積圖中一堆的展開圖； 圖14形態III的分子間形成氫鍵的情況； 圖15形態III的差熱掃描圖；縱坐標熱流(W/g)，橫坐標溫度(℃) 圖16形態III的紅外圖譜；縱坐標透光度％，橫坐標波數(cm-1) 圖17形態III的差熱失重掃描圖；左側縱坐標重量(％)，右側縱坐標導出的重量(％、℃)，橫坐標溫度(℃) 圖18氯尼達明晶體形態I片的溶出曲線；縱坐標溶出度(％)，橫坐標時間(分鐘) 圖19含氯尼達明晶體形態II片的溶出曲線；縱坐標溶出度(％)，橫坐標時間(分鐘) 圖20含氯尼達明晶體形態I和無定形氯尼達明混合物的片劑的溶出曲線；縱坐標溶出度(％)，橫坐標時間(分鐘)
具體實施例方式 參考Ger.2310031 1972年，US.3.895.026.1975年這兩篇專利的實施例。即由3-羧酸-吲唑與2，4-二氯氯芐在堿性條件下脫HCl縮合，精制成產品氯尼達明。而3-羧酸-吲唑則由吲哚醌開環，重氮化，還原，閉環而成。
除非另有說明，在本文中，溫度是指攝氏溫度(℃)，室溫是指15-25℃。
業已用選自X-射線粉末衍射，X-射線單晶衍射，DSC差示熱分析圖，紅外光譜圖等分析手段對本發明的氯尼達明晶體的特征進行表征，一般用XRD來標征晶體的組成或對其進行鑒定。由結晶化合物得到的衍射圖對于一給定的結晶形態往往是特征性的，雖然弱的或很弱的衍射峰在由連續批號的結晶得到的同樣的衍射圖中可能并不總是出現。尤其是在試樣中有顯著量的其它結晶形態時。譜帶的相對強度可能會因為由例如結晶習性、粒徑和其它條件的差異而產生的優勢取向效果而變化。因此，衍射峰的相對強度并非最后對所針對的結晶形態是特征性的，相反，更應注意峰的相對位置而不是它們的幅度。以決定是否氯尼達明結晶是本文中所述的一種。
三種晶狀氯尼達明形態的差熱掃描(DSC)吸熱轉變峰和吸熱開始溫度值接近，由連續批號的結晶得到的同樣的差熱掃描圖(DSC)也有約0.5-0.7的差異，可能與結晶度，不同次取樣，實驗誤差等因素有關，同時也說明在相同的結晶過程中也可以同時析出，它們的相對穩定性較難區別，所以DSC可作為參考。合成的結晶現象也正相符。
三種晶狀氯尼達明形態的紅外圖譜在它們的指紋區也可看到彼此的不同。
晶狀氯尼達明形態I 圖1顯示了該形態在使用Cu-kα輻射源，35kv，30mA，(DMAX-IIID)下測得到的X射線粉末衍射光譜數據如下 序號 2θ 強度 寬度d值 I 1 11.720316.2407.544766 2 12.680135.2406.975528 3 14.560294.2706.078862 4 14.980114.2705.909324 5 17.660137.2105.018129 6 17.940477.2404.9404100 7 18.88054 4.696511 8 19.68038 4.50738 9 19.96042 4.44479 1021.32045 4.16429 1121.88058 .2404.058812 1222.30040 3.98338 1322.48041 3.95189 1422.84050 3.890410 1523.72088 .3003.748018 1624.06099 .1803.695821 1724.340110.2703.653923 1825.220165.2703.528435 1925.660115.3003.468824 2026.400103.2103.373322 2126.620111.2703.345923 2227.14077 .2103.282916 2328.300120.2403.151025 2428.860102.2703.091121 2529.360133.3903.039628 2630.040100 .3002.972321 2731.86099.3602.806521 2832.960342.71537 2933.460372.67598 3036.56063.2402.455813 3137.040492.425110 3239.360412.28739 3341.600322.16927 3442.580292.12156 3546.300321.95937 3647.720361.90438 3758.040291.58786 晶狀氯尼達明形態I的差熱掃描圖(DSC)在約211.0℃有吸熱轉變，吸熱開始溫度在約210.1℃(參見圖2)，并具有基本上如圖3所示的紅外光譜。
氯尼達明形態II 第二種氯尼達明新晶態——晶狀氯尼達明形態II，其特征在于，其使用Cu-kα輻射源，35kv，30mA，(DMAX-IIID)測得的以2θ角度和晶面間距(d值)表示的X射線粉末衍射光譜數據如下 序號 2θ 強度 寬度d值 I 1 11.300487.2407.824190 2 11.660197.2707.583336 3 13.16046 6.72229 4 14.38063 6.154512 5 15,320391.2705.778972 6 16.24047 5.45359 7 17.08089 .2105.187216 8 20.120131.2704.409724 9 20.64046 4.29989 1021.68034 4.09586 1122860 368.2403.887068 1223.620122.2403.763623 1324.380125 .2703.648023 1424.94085.3603.567316 1525.360603.509211 1626.020440 .2703.421781 1726.72098.2403.333618 1827.140540 .2703.2829100 1928.780453.09958 2029.740443.00168 2130.36076.2402.941714 2231.040332.87886 2332.20088.2702.777716 2433.640462.66209 2534.660412.58598 2635.180372.54897 2737.360382.40507 2838.240432.35178 2938.760352.32136 3042.180472.14079 3145.300342.00026 3246.280361.96017 3347.780401.90207 3449.960541.824010 3554.240301.68976 3656.060291.63915 3759.140251.56095 以Mo-kα輻射源，(理學RAXS-IV型)，形態II的單晶X-射線衍射數據如下該晶體的分子式為C15H10Cl2N2O2，分子量為321.15，該晶體屬三斜晶系，P-1空間群，晶胞參數為a＝7.7117 b＝8.1384 c＝11.987 α＝106.17 β＝93.05 γ＝96.96，R值為0.0450 如圖8所示，晶狀氯尼達明形態II在約211.2℃有吸熱轉變，吸熱開始溫度在約208.8℃；圖9顯示了該晶體的的紅外光譜。
結晶氯尼達明形態III 第三種氯尼達明新晶態——晶狀氯尼達明形態III，其特征在于，其使用Cu-kα輻射源，40kv，300mA測得的以2θ角度和晶面間距(d值)表示的X射線粉末衍射光譜數據如下
單晶結構解析——形態III 1.該晶體的分子式為C15H10Cl2N2O2，分子量為321.15； 2.該晶體屬三斜晶系，P-1空間群，晶胞參數為a＝5.2879 b＝8.1754 c＝16.768α＝80.09 β＝89.89 γ＝80.65，R值為0.0477 圖11顯示了形態III的分子的空間立體結構；圖12a和圖12b分別顯示了形態III在A、B方向的晶胞堆積圖；圖13為圖12a中一堆的的展開圖，分子間通過氫鍵和π-π作用力結合，平面C1a C2a C3a C4a C5a C6a與C1b C2b C3b C4b C5b C6b的距離為3.3250 平面C1b C2b C3b C4b C5b C6b與C1c C2c C3cC4c C5c C6c的距離為3.3213 平面C8a C9a C10a C11a C12a C13a與C8b C9b C10b C11b C12b C13b的距離為3.2860 平面C8b C9b C10b C11b C12b C13b與C8c C9c C10cC11c C12c C13c的距離為3.2900； 圖14為形態III的分子間形成氫鍵的情況，一個分子羧基與另一個分子的羧基形成了分子間氫鍵。
表7p-1的原子坐標(atomic coordinates)(×104)和 各向同性替代參數(A2×103) U(eq)被定義為正交的Uij張量的蹤跡的1/3
表8p-1的鍵長〔A〕和角度〔度〕
用來產生等同原子的對稱轉換 表9對于p-1的各向同性替代參數
各向同性替代因子指數有這樣的形式-2pi2[h2a*2U11+...+2h k a*b*U12]
表10p-1的氫坐標(hydrogen coordinates)(×104)和 各向同性替代參數(A2×103)
表11p-1的扭轉角〔度〕
用來產生等同原子的對稱轉換 表12p-1的氫鍵(A和度)
用來產生等同原子的對稱轉換 #1 -x+2，-y+1，-z 圖15顯示了晶狀氯尼達明形態III的差熱掃描圖(DSC)，它在約183℃有小吸熱峰；在約196℃有放熱轉變；在約211.4℃有吸熱轉變，吸熱開始溫度在約208.7℃。
圖16顯示了晶狀氯尼達明形態III的紅外光譜。
圖17顯示了晶狀氯尼達明形態III的差熱失重掃描圖(DTG)。
本發明還提供了一種藥物組合物，它包含上述的形態I、II或III的氯尼達明晶體中的一種或多種，以及藥學上可接受的載體。含有新結晶形態的氯尼達明的組合物有更好的溶出度，結晶態氯尼達明的溶解度與無定形明顯不同，前者的組合物有明顯優勢。
圖18-20對含有氯尼達明不同形態的晶體或無定形的片劑作了溶出度比較，其各自的溶出數據如下
從上表可看出批號1，批號2的氯尼達明片溶出度良好. 從X-粉末衍射測試可看出批號3含的氯尼達明為形態I和無定形的混合物，其片劑溶出度較差。
合成實施例 將原料3-羧酸吲唑38.0克(0.234MOL)，氫氧化鈉28.1克(0.702MOL)，水650毫升投入1000毫升的三口瓶中，攪拌，加熱至100度，慢慢滴加2，4-二氯氯芐60克(0.307MOL)，30分鐘滴加完畢，在100度保溫下反應3-4小時，反應完畢后停止加熱，自然冷卻至室溫(25℃)，過濾，水洗，得濕品135.0克。濕品135.0克加稀鹽酸酸化，過濾得濕品，干燥后得成品61.5克。成品為無定形或其它晶型的混合物。
實施例1 將合成的氯尼達明10克，浸泡于40克水中，攪拌、加熱至80℃以上，同時加氫氧化鈉溶液調pH9左右，溶解，加適量活性炭，回流20分鐘，然后熱過濾，濾液自然緩緩降溫到80℃-50℃，同時滴加10％鹽酸，充分酸化，pH達4-5后，冷卻至室溫、靜置過夜，濾出，適量水洗，抽干，干燥得形態I氯尼達明晶體9.2克，MP205.5-207.5℃。
實施例2 將合成的氯尼達明10克，溶于冰醋酸80毫升，加熱攪拌，溶解完全，加適量活性炭，回流約30分鐘，然后熱過濾，濾液快速冷卻結晶，室溫放置過夜，次日過濾、干燥得形態I氯尼達明晶體9.0克，MP208.5-210.0℃。
實施例3 將合成的氯尼達明10克，溶于乙醇與冰醋酸(V/V＝1/1)的混合液200毫升中，加熱攪拌，溶解完全，加適量活性炭，回流約30分鐘，熱過濾，濾液慢慢冷卻至室溫，15-25℃靜止結晶1-3天，濾出，干燥得形態II氯尼達明晶體7.5克，MP207.5-210.5℃。。
實施例4 將合成的氯尼達明10克，溶于冰醋酸160毫升，加熱攪拌，溶解完全，回流約20分鐘，然后靜置，慢慢降至35-45℃，靜止結晶1-3天，濾出，干燥得形態III氯尼達明晶體7.0克，MP210.5-211.0℃。
權利要求
1.一種形態III的氯尼達明晶體，其特征在于，在使用40kv，300mA的Cu-kα輻射源照射下，有下述以2θ角度和晶面間距d值表示的X射線粉末衍射光譜
2θ d值
5.316.6
11.17.9
11.57.7
13.26.7
14.06.28
16.85.3
21.54.1
22.24.0
22.53.9
23.23.8
27.53.2。
2.一種形態III的氯尼達明晶體，其特征在于，該晶體屬三斜晶系，P-1空間群，晶胞參數為a＝5.2879 b＝8.1754 c＝16.768 α＝80.09°β＝89.89°γ＝80.65°R值為0.0477。
3.根據權利要求1或2所述的形態III的氯尼達明晶，其DSC吸熱轉變在211.3℃。
4.一種制備如權利要求1或2任一所述的形態III的氯尼達明晶體的方法，包括將成品氯尼達明溶于15.5-18倍w/v的溶劑中，加熱回流，溶清，然后靜置，緩緩降溫至35-45℃，靜止結晶得所需的晶狀氯尼達明形態III，其中所述溶劑為冰醋酸。
5.一種制備如權利要求3所述的形態III的氯尼達明晶體的方法，包括將成品氯尼達明溶于15.5-18倍w/v的溶劑中，加熱回流，溶清，然后靜置，緩緩降溫至35-45℃，靜止結晶得所需的晶狀氯尼達明形態III，其中所述溶劑為冰醋酸。
6.一種藥物組合物，其包含權利要求1所述的形態III的氯尼達明晶體，以及藥學上可接受的載體。
全文摘要
本發明提供了形態III的氯尼達明晶體、它的制備方法，和含有所述晶體的組合物。所述的形態III的氯尼達明晶體具有溶出性好的優點。
文檔編號C07D231/56GK101759644SQ20091021560
公開日2010年6月30日 申請日期2005年8月17日 優先權日2005年8月17日
發明者鄔曉琪, 郭殿武, 鐘偉勤, 姜新民 申請人:杭州民生藥業有限公司