專利名稱：輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗菌肽的產(chǎn)生方法，尤其是一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法。
背景技術(shù)：
抗菌肽是生物體免疫防衛(wèi)系統(tǒng)產(chǎn)生的一類對(duì)抗外源性病原體致病作用的防 御性多肽活性物質(zhì)，是生物體先天免疫的重要組成成分，具有廣譜抗菌活性?？?菌肽除了抗細(xì)菌外，還具有抗病毒、抗真菌和抗腫瘤作用，是很好的天然抗菌藥 物來源，具有相對(duì)分子質(zhì)量小，熱穩(wěn)定性好，無免疫原性,抗菌廣譜等特點(diǎn)。抗 菌肽還是一種無毒副作用、無殘留、無細(xì)菌耐藥性的環(huán)保型制劑，具有熱穩(wěn)定、 水溶性好、廣譜殺菌等優(yōu)點(diǎn)，且對(duì)畜禽具有促生長(zhǎng)、保健和治療疾病的功能。因 此，抗菌肽的應(yīng)用前景被人們所看好。目前技術(shù)中抗菌肽的誘導(dǎo)，有的使用的材 料為家蠅，有的使用的材料為蚯蚓。但所能得到的抗菌肽較少，并且誘導(dǎo)的難度 也較大。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，以解決目 前抗菌肽誘導(dǎo)難度大，所得到抗菌肽少的問題。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為
一種輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于依次進(jìn)行以下步
驟
(1) 采用Y-射線輻照方法對(duì)家蠶進(jìn)行輻射，輻照劑量為0.1 Gy—200Gy;
(2) 正常飼養(yǎng)家蠶，飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到一40 一20'C環(huán)境中冷凍保存；
(3) 取出家蠶，將其剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。
一種輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于依次進(jìn)行以下步
驟
(1) 采用瞬間電壓110—7000伏，電流1一100毫安，電擊家蠶尾部；
(2) 正常飼養(yǎng)，飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到一40 一2(TC環(huán)境中冷凍保存；(3)取出家蠶，將其剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。 所述的輻照劑量為0.1 Gy—lGy，或者l Gy—10Gy，或者20 Gy—60Gy，
或者100Gy—180Gy。
電擊時(shí)采用瞬間電壓110—300伏，電流1一5毫安；或者瞬間電壓500 — 1200
伏，電流10—20毫安；或者瞬間電壓2000—5000伏，電流40—80毫安；或者瞬間
電壓5000—7000伏，電流80—100毫安。
本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，易于實(shí)施，并且能產(chǎn)生較多的抗菌肽，大大提高了抗菌肽 的提取效率。
具體實(shí)施方式
例l
一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，依次進(jìn)行以下步驟
(1) 用輻照射線對(duì)家蠶進(jìn)行輻射，輻照劑量選用0.73 Gy、 1.46 Gy、 2.19 Gy、 20Gy、 50Gy或100Gy;
(2) 正常飼養(yǎng)家蠶，飼養(yǎng)18-30小時(shí)后，放到一40 一20。C環(huán)境中冷凍保存；
(3) 取出家蠶，將其剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。 用不同劑量的Y-射線輻照家蠶產(chǎn)生的抗菌肽量幾乎沒差別，具體的見下
輻照的劑量 CGy)0.731.462.192050100
抑菌圈直徑1.9222.12.02.0
正常家蠶也產(chǎn)生抗菌肽，但抗菌肽的產(chǎn)量較低，其抑菌圈的直徑為1.4 mm
一種誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，依次進(jìn)行以下步驟
(1) 采用瞬間電壓110—7000伏，電流1一100毫安，電擊家蠶尾部；
(2) 正常飼養(yǎng)，飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到一40 一2(TC環(huán)境中冷凍保存;
(3) 取出家蠶，將其剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。
4例3
抗菌肽的提取采用乙酸浸提法。取用不同處理過的五齡家蠶分別稱重、冷凍、 剪碎并用組織搗碎機(jī)搗碎、勻漿。然后用等體積5%乙酸混合，4。C條件下攪拌過 夜后隔水煮沸15min，迅速冷卻?；旌衔镌?"C條件下8000rpm ，離心30min，取 上清液，4 。C條件下保存。沉淀物用等體積5%的乙酸混合，再次于4 。C攪拌、 浸提過夜，重復(fù)上述離心過程，取上清液,合并兩次上清液，調(diào)整pH值，再次離 心，棄沉淀，上清液冷凍干燥即為家蠶抗菌肽類物質(zhì)的粗制品。取上清液于另一 具塞塑料離心管內(nèi)于低溫下保存(若不立即進(jìn)行抗菌物質(zhì)的測(cè)定，可以在-2(TC 的冷凍箱內(nèi)保存30d)。
權(quán)利要求
1、一種輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于依次進(jìn)行以下步驟(1)采用γ-射線輻照方法對(duì)家蠶進(jìn)行輻射，輻照劑量為0.1Gy—200Gy；(2)正常飼養(yǎng)家蠶，飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到—40～—20℃環(huán)境中冷凍保存；(3)取出家蠶，將其剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。
2、 一種輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于依次進(jìn)行以下步驟(1) 采用瞬間電壓110—7000伏，電流1一100毫安，電擊家蠶尾部；(2) 正常飼養(yǎng)，飼養(yǎng)12-36小時(shí)后，放到一40 一2(TC環(huán)境中冷凍保存；(3) 取出家蠶，將其剪碎、搗碎、勻漿，提取其中的家蠶抗菌肽。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于所述的輻照劑量為0.1 Gy—lGy，或者l Gy—10Gy，或者20 Gy—60Gy，或者100Gy—180Gy。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的輻照或電擊誘導(dǎo)家蠶產(chǎn)生抗菌肽的方法，其特征在于采用瞬間電壓110—300伏，電流1一5毫安；或者瞬間電壓500—1200伏，電流10—20毫安；或者瞬間電壓2000—5000伏，電流40 — 80毫安；或者瞬間電壓5000一7000伏，電流80—100毫安。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種家蠶抗菌肽的誘導(dǎo)方法，所述的方法可通過射線進(jìn)行輻射，或者可以采用高壓電擊的方法來進(jìn)行誘導(dǎo)。采用射線進(jìn)行輻射時(shí)，輻射劑量在0.1Gy-200Gy范圍內(nèi)；采用高壓電擊進(jìn)行誘導(dǎo)時(shí)，瞬間電壓在110-7000伏，電流在1-100毫安，需電擊家蠶尾部一次。本發(fā)明所涉及的家蠶抗菌肽的誘導(dǎo)方法，簡(jiǎn)單易行，能有效誘導(dǎo)出較多的抗菌肽，使抗菌肽提取效率大為提高。
文檔編號(hào)C07K14/435GK101519443SQ20091011646
公開日2009年9月2日 申請(qǐng)日期2009年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月31日
發(fā)明者代君君, 吳傳華, 周業(yè)奉, 王儲(chǔ)炎, 田善富, 肖林珍, 濤 范, 范后文, 魏國清 申請(qǐng)人:安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所