專利名稱：：一種由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種高耐油耐熱環(huán)保熱塑性彈性體的制備方法。
背景技術(shù)：
：目前市場(chǎng)上形形色色的補(bǔ)鈣保健品可歸為三類一類是無(wú)機(jī)鈣，又稱為第一代補(bǔ)鈣產(chǎn)品，如碳酸鈣、磷酸鈣及氧化鈣，或者來(lái)自于經(jīng)過(guò)機(jī)械加工的動(dòng)物貝殼骨骼;第二類是有機(jī)酸鈣，即第二代鈣劑，如葡萄酸鈣、乳酸鈣、檸檬酸鈣、醋酸鈣等；第三類是有機(jī)鈣，為第三代鈣劑，如氨基酸螯合鈣、L-蘇糖酸鈣。第一、二類鈣劑存在以下問(wèn)題一般都難溶解，有些堿性較強(qiáng)對(duì)胃腸有強(qiáng)烈刺激；含重金屬，如鉛、砷等常常超標(biāo)；離子型鈣劑適合在酸性環(huán)境下吸收，因此十二指腸和空腸的一小段吸收較好，再往下腸道呈堿性，鈣劑不能溶解，吸收就困難；離子型鈣劑還易被膳食中成分如草酸等的干擾，影響鈣的吸收。而第三類鈣劑氨基酸螯合鈣能以"氨基酸螯合物"的形式穩(wěn)定溶解于PH值大于7.0的堿性小腸液中，并能參與小腸絨毛上皮細(xì)胞對(duì)氨基酸的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程而被完全吸收，使鈣的吸收率有突破性的提高，臨床研究表明以其對(duì)老人和絕經(jīng)婦女的骨質(zhì)疏松癥狀、孕婦和小孩的缺鈣癥狀都有明顯的改善作用，對(duì)身體無(wú)任何副作用，且生物利用度高于一般的補(bǔ)鈣制劑。目前以氨基酸螯合鈣為原料的補(bǔ)鈣制劑在國(guó)內(nèi)還未得到充分的開(kāi)發(fā),更沒(méi)有由淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對(duì)上述現(xiàn)狀，旨在提供一種鈣含量髙，骨鈣的儲(chǔ)留率大的由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法。本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)方式為，一種由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法，制備步驟如下1)制備魚(yú)骨粉，將魚(yú)骨清洗、高壓蒸煮、清洗后用濃度為10%-12%的氫氧化鈉浸泡lh,用清水清洗至中性，再于85'C干燥，粉碎，過(guò)100目篩，2)酸解法提取魚(yú)骨粉中的鈣，酸濃度2.5-3mol/L，用量為lg魚(yú)骨粉2.5-3ml酸，在108'C下提取50-60min,所用酸為鹽酸、乳酸、乙酸或檸檬酸，33)制備復(fù)合氨基酸螯合鈣用含氨基酸總量為89.9%的復(fù)合氨基酸螯合魚(yú)骨粉中鈣離子，螯合條件是復(fù)合氨基酸與鈣離子的質(zhì)量比為3-5:1，pH=7-8，在70-90。C水浴內(nèi)反應(yīng)70-90min，離心取清液，將清液濃縮，用無(wú)水乙醇洗滌二次，離心取沉淀，8(TC烘箱干燥后粉碎，得復(fù)合氨基酸螯合鈣產(chǎn)品。本發(fā)明首次采用低值淡水魚(yú)加工副產(chǎn)物魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣，使淡水魚(yú)加工副產(chǎn)物得到充分利用，減少其對(duì)環(huán)境的污染，而且大大地提高了淡水魚(yú)副產(chǎn)物的附加值。用本發(fā)明制備的復(fù)合氨基酸螯合鈣經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，大鼠的股骨鈣含量為38.11±5.30，股骨鈣的儲(chǔ)留率11.00±5.30，如與VD3配伍，更可增加其生物利用率，提高補(bǔ)鈣的效果。用本發(fā)明制備的復(fù)合氨基酸螯合鈣的補(bǔ)鈣作用與葡萄糖酸鈣相當(dāng)，高于碳酸轉(zhuǎn)，但鈣儲(chǔ)留率顯著高于葡萄糖酸藥組和碳酸鈣組。圖1是鹽酸濃度對(duì)鈣提取的影響，圖2是鹽酸用量對(duì)該提取率的影響，圖3是反應(yīng)時(shí)間對(duì)鈣的提取率的影響。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的制備步驟為，魚(yú)骨清洗、蒸煮、氫氧化鈉浸泡，洗至中性，干燥，粉碎，酸解法提取魚(yú)骨粉中的鈣，用復(fù)合氨基酸螯合魚(yú)骨粉中鈣離子，離心取清液，用無(wú)水乙醇洗滌二次，離心取沉淀，干燥粉碎得復(fù)合氨基酸螯合鈣產(chǎn)品。產(chǎn)品采用膠囊包裝，每粒含復(fù)合氨基酸螯合鈣1000毫克，VD3200IU或復(fù)合氨基酸螯合鈣650毫克，酪蛋白磷酸肽(含量》21%)350毫克。經(jīng)檢測(cè)，產(chǎn)品菌落總數(shù)(cfu/g)《3000、大腸桿菌(MPN/100g)《30、霉菌(cfu/g)《50。魚(yú)骨清洗、高壓蒸煮、清洗后，用氫氧化鈉浸泡lh，本申請(qǐng)人對(duì)所用氫氧化鈉濃度對(duì)出油率的影響作了試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1表l<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>從表中可見(jiàn)，10%、12%濃度的去油率相等，因下一步要將其洗至中性，應(yīng)盡量選擇濃度低的，因此最佳氫氧化鈉濃度選擇為10%。酸解法提取魚(yú)骨粉中的鈣，本申請(qǐng)人作了酸的選擇、酸濃度、酸用量和反應(yīng)時(shí)間的選擇實(shí)驗(yàn)。本申請(qǐng)人用鹽酸、乳酸、乙酸酸解魚(yú)骨粉作了酸的選擇試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>由表2可知鹽酸分解骨粉轉(zhuǎn)化鈣的能力最強(qiáng)，乳酸次之，乙酸又次，檸檬酸最差，故本發(fā)明的酸解法選擇用鹽酸。本申請(qǐng)人作了酸濃度選擇實(shí)驗(yàn)，參照?qǐng)Dl，鹽酸濃度對(duì)魚(yú)骨粉中鈣的提取有直接影響，隨著鹽酸濃度增加，可溶性鈣含量顯著提高，至3mol/L時(shí)達(dá)到最高，再增加濃度可溶性含量基本趨于平衡。因此，本發(fā)明確定最佳鹽酸濃度為3mol/L。本申請(qǐng)人作了鹽酸用量的選擇實(shí)驗(yàn)，參照?qǐng)D2，隨著鹽酸用量的增加，魚(yú)骨中鈣的溶出率不斷增加，呈直線上升趨勢(shì)，直至3ml時(shí)基本趨于平衡，由于考慮下一步螯合時(shí)要調(diào)節(jié)pH值所以盡量少的選擇鹽酸用量，因此，本發(fā)明選擇3邁1為最佳鹽酸用旦里。本申請(qǐng)人作了反應(yīng)時(shí)間的選擇實(shí)驗(yàn)，參照?qǐng)D3，隨著時(shí)間的增加，鈣的提取率先增加，到60min時(shí)達(dá)到最高，而后隨著時(shí)間繼續(xù)增加，鈣的提取率反而有所下降。其原因是隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，酸的分子運(yùn)動(dòng)加快，揮發(fā)性增強(qiáng)，反而不利于對(duì)鈣的提取。因此，本發(fā)明選擇最佳反應(yīng)時(shí)間為60min。本申請(qǐng)人運(yùn)用正交試驗(yàn)對(duì)固體復(fù)合氨基酸與魚(yú)骨粉中鈣離子的螯合條件進(jìn)行了研究。正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3，<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>為了檢驗(yàn)復(fù)合氨基酸螯合鈣的生物利用率，本申請(qǐng)人以復(fù)合氨基酸螯合鈣、上海黃海制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)的葡萄糖酸鈣片、鈣爾奇D碳酸鈣制劑喂飼缺鈣動(dòng)物模型Wister大鼠，采用原子吸收法測(cè)定大鼠的血鈣、尿鈣、糞鈣和骨鈣。結(jié)果見(jiàn)表5、表6:表5大鼠鈣代謝結(jié)果(x±sd，n=8)HI糞中含鈣量尿中含鈣臺(tái)表觀吸收率存留率(％)(nnnol.L-1)(mg/d.只)(mg/d.只)(%)低鈣組1.65±0.839.7±3.802.07±0.5369.0±11.262.4±10.4活性轉(zhuǎn)2.24±1.457.28±4.46*2.28±1.0685.1土5.080.5±9.9組葡萄糖1.95±0.498.66±4.0419.70±10.8583.4±7.445.3±23.7酸鈣組**豕*藥爾奇2.92±0.345.76±4.510.53±6.8988.4土9.267.7±17.1組****與低鈣組比較，*P<0.05;**P〈0.01;與葡萄糖酸鈣組比較AAP〈0.01;與碳酸鈣組比較fP〈0.05表6大鼠股骨系數(shù)(x土sd,r^8)組別骨鈣(mg)儲(chǔ)留鈣(mg)股骨鈣的儲(chǔ)留率(%)低鈣組13.3±8.367J9±8.36<25.5±27.8活性鈣組40.0±14.2**34.5±14.2**71.6±33.9*葡萄糖酸鈣組40.1±12.9**34.6±12.9**67.3±25.7*轉(zhuǎn)爾奇組30.1±11.8*24.5±11.8*48.7±23.1與低鈣組比較，*P〈0.05;**P<0.01由表5、表6可知1)鈣代謝:低鈣對(duì)照組經(jīng)4周低鈣飼料喂養(yǎng),體內(nèi)缺鈣較為嚴(yán)重，已難以繼續(xù)維持血鈣的穩(wěn)定。大鼠經(jīng)4周補(bǔ)鈣，血鈣略有上升，但比較補(bǔ)轉(zhuǎn)前后的血清轉(zhuǎn)含量，差異并無(wú)顯著性(pX).05),而碳酸鈣組血鈣顯著高于低鈣組。葡萄糖酸鈣組尿中鈣非常顯著高于低鈣組，鈣爾奇D組尿中鈣顯著高于低鈣組。這兩組鈣的表觀吸收值和表觀吸收率非常顯著高于低鈣組。復(fù)合氨基酸螯合鈣組糞中鈣含量顯著高于低鈣組，鈣的表觀吸收值也顯著高于低鈣組，鈣儲(chǔ)留率與葡萄糖酸鈣組和鈣爾奇D組比較有顯著差異.但其表觀吸收率未見(jiàn)顯著差異。2)骨鈣各組大鼠的骨鈣含量則顯示出較大差異，各補(bǔ)鈣組大鼠骨鈣含量均高于低鈣對(duì)照組,其中復(fù)合氨基酸螯合鈣與葡萄糖酸鈣組股骨鈣和儲(chǔ)留鈣非常顯著高于低鈣組，鈣爾奇D組股骨鈣和儲(chǔ)留鈣也顯著高于低鈣組。復(fù)合氨基酸螯合鈣與葡萄糖酸鈣組股骨鈣和儲(chǔ)留鈣顯著高于低鈣組。但是各組大鼠股骨密度未見(jiàn)明顯改變。由以上結(jié)果可知復(fù)合氨基酸螯合鈣有一定補(bǔ)鈣作用，其作用與葡萄糖酸轉(zhuǎn)相當(dāng)，高于碳酸鈣。鈣儲(chǔ)留率顯著高于葡萄糖酸鈣組和碳酸鈣組，證明本復(fù)合氨基酸螯合鈣生物利用率優(yōu)于鈣爾奇D制劑與葡萄糖酸鈣相當(dāng)。為了了解復(fù)合氨基酸螯合鈣配伍化合物(CPP/VD3)前后的生物利用率,獲得較好的臨床補(bǔ)鈣配方，本申請(qǐng)人以含鈣量相等(30mg/d)的復(fù)合氨基酸螯合鈣、復(fù)合氨基酸螯合鈣+CPP、復(fù)合氨基酸螯合轉(zhuǎn)+VD3、樂(lè)力喂詞缺鈣動(dòng)物模型大鼠4周，結(jié)果見(jiàn)表7、表8:表7:大鼠鈣代謝結(jié)果(x土sd，『10)組別血轉(zhuǎn)(咖ol/U糞鈣(mg/d.只)尿鈣(mg/d.只)鈣儲(chǔ)留率(%)低鈣組0.64±0.275.37±3.473.94±3.0185.28±11.48復(fù)合氨基酸螯合鈣組0.510.36###7.103.28#26.54±9.95###47.21±18.77###復(fù)合氨基酸螯合鈣+CPP組0.650.58##3.911.17△5.76±3.35△△△#89.39±5.44復(fù)合氨基酸螯合^5+VD3組'4.852.33**##7.681.45###1.16±'0.37△###97.84±0.65*△AA樂(lè)力組1.57Q.42**3.801.112.460.5395.790.95表注與A組(低鈣組)比較，*P<0.05;**P<0.01;***P〈0.001;與B組(復(fù)合氨基酸螯合鈣組)比較AP〈0.05;AAP〈0.01;AAAP〈0.001;與E組(樂(lè)力組)比較ffP〈0.05;##P<0.01###P〈0.001表8:大鼠股骨系數(shù)(x土sd，『10)組別骨鈣骨密度儲(chǔ)留鈣股骨'眄的儲(chǔ)留率(mg)(g/cm3)(1Dg)(90低鈣組32.25±5.542.620.215.155.5415.5016.45復(fù)合氨基酸螯合鈣38.11±5.302.790.2411.005.3016.708.14組*±±±復(fù)合氨基酸螯合鈣38.23±5.482.900.2211.135.4818.219.74±±±復(fù)合氨基酸螯合鈣43.15±5.083.200.1816.045.0826.428.93十VD3組±±*'*±△#△A樂(lè)力組37.23±4.103.050.329.013.0314.354.84±**±±8表注與A組(低鈣組)比較，*P<0.05;**P〈0.01;***P<0.001;與B組(復(fù)合氨基酸螯合鈣組)比較厶P〈0.05;AAP〈0.01;AAAP〈0.001;與E組(樂(lè)力組)比較并P<0.05;##P<0.01###P<0.001由表7、表8可知1)鈣代謝:復(fù)合氨基酸螯合鈣加上CPP后，尿、糞中鈣的排出量減少，韓的吸收率顯著改善，鈣的儲(chǔ)留率非常顯著地上升，P〈0.001;復(fù)合氨基酸螯合鈣加上VD3后，大鼠的血鈣上升非常顯著，尿鈣、糞鈣的排出量減少,鈣的儲(chǔ)留率非常顯著上升，p〈0.001。2)大鼠股骨系數(shù)的影響復(fù)合氨基酸螯合鈣加上CPP后，各指標(biāo)與單獨(dú)使用復(fù)合氨基酸螯合鈣無(wú)顯著差異；復(fù)合氨基酸螯合鈣加上VD3后，股骨重量、密度顯著上升，p〈0.001,骨鈣的儲(chǔ)留鈣顯著上升，P〈0.05。各實(shí)驗(yàn)組大鼠經(jīng)4周補(bǔ)鈣，股骨重量、密度、股鈣均有上升。與VD3合用后，股骨重量、密度顯著增加，與單用復(fù)合氨基酸螯合鈣相比，P<0.01，大鼠的股骨鈣儲(chǔ)留率、血鈣、鈣的儲(chǔ)留率升高，P〈0.001,且與樂(lè)力相比，大鼠的股骨鈣、股骨儲(chǔ)留鈣和儲(chǔ)留率均顯著升高，P〈0.05和P〈0.01。結(jié)論合用CPP、VD3后鈣的生物利用率增加，尤以VD3的協(xié)同作用更為顯著，VD3是較好的與復(fù)合氨基酸螯合鈣配伍的成分。權(quán)利要求1、一種由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法，其特征在于制備步驟如下1)制備魚(yú)骨粉，將魚(yú)骨清洗、高壓蒸煮、清洗后用濃度為10％-12％的氫氧化鈉浸泡1h，用清水清洗至中性，再于85℃干燥，粉碎，過(guò)100目篩，2)酸解法提取魚(yú)骨粉中的鈣，酸濃度2.5-3mol/L，用量為1g魚(yú)骨粉2.5-3ml酸，在108℃下提取50-60min，所用酸為鹽酸、乳酸、乙酸或檸檬酸，3)制備復(fù)合氨基酸螯合鈣用含氨基酸總量為89.9％的復(fù)合氨基酸螯合魚(yú)骨粉中鈣離子，螯合條件是復(fù)合氨基酸與鈣離子的質(zhì)量比為3-5∶1，pH＝7-8，在70-90℃水浴內(nèi)反應(yīng)70-90min，離心取清液，將清液濃縮，用無(wú)水乙醇洗滌二次，離心取沉淀，80℃烘箱干燥后粉碎，得復(fù)合氨基酸螯合鈣產(chǎn)品。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法，其特征在于魚(yú)骨清洗、高壓蒸煮、清洗后用濃度為10%的氫氧化鈉浸泡lh。<3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法，其特征在于酸解法提取魚(yú)骨粉中的鈣，用量為lg魚(yú)骨粉用3ml酸，在108'C下提取60min，所用酸為濃度3mol/L的鹽酸。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法，其特征在于用復(fù)合氨基酸螯合魚(yú)骨粉中鈣離子的螯合條件是復(fù)合氨基酸與鈣離子的質(zhì)量比為3:1，pH=8，反應(yīng)時(shí)間70min，反應(yīng)溫度80'C。全文摘要本發(fā)明涉及一種由低值淡水魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣的方法。制備步驟為，魚(yú)骨清洗、蒸煮、氫氧化鈉浸泡，洗至中性，干燥，粉碎，酸解法提取魚(yú)骨粉中的鈣，用復(fù)合氨基酸螯合魚(yú)骨粉中鈣離子，離心取清液，用無(wú)水乙醇洗滌二次，離心取沉淀，干燥粉碎得復(fù)合氨基酸螯合鈣產(chǎn)品。本發(fā)明首次采用低值淡水魚(yú)加工副產(chǎn)物魚(yú)骨制備復(fù)合氨基酸螯合鈣，大大地提高了淡水魚(yú)副產(chǎn)物的附加值。用本發(fā)明制備的復(fù)合氨基酸螯合鈣經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，大鼠的股骨鈣含量為38.11±5.30，股骨鈣的儲(chǔ)留率11.00±5.30，如與VD3配伍，更可增加其生物利用率，提高補(bǔ)鈣的效果。用本發(fā)明制備的復(fù)合氨基酸螯合鈣的補(bǔ)鈣作用與葡萄糖酸鈣相當(dāng)，高于碳酸鈣，但鈣儲(chǔ)留率顯著高于葡萄糖酸鈣組和碳酸鈣組。文檔編號(hào)C07C229/76GK101648884SQ20091006328公開(kāi)日2010年2月17日申請(qǐng)日期2009年7月23日優(yōu)先權(quán)日2009年7月23日發(fā)明者宇喬,曾漢庭,熊光權(quán),俊王,薇程,薛淑靜,陳學(xué)玲申請(qǐng)人:湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工與核農(nóng)技術(shù)研究所