專利名稱：綿茵陳中有機酸的分離富集方法
綿茵陳中有機酸的分離富集方法
技術領域：
本發明涉及有機酸類化合物的富集方法，具體涉及從綿茵陳藥材中富集 有機酸類化合物的方法。
背景技術：
茵陳為菊禾斗豐直物、濱蒿JWe附/s/a scopar/a Waldst. et Kit或茵陳蒿JWewz/s/a c"p///fln& Thunb的干燥地上部分。春季幼苗高6 10cm時采收或秋季花蕾長 成時采割，除去雜質及老莖，曬干。春季采收的習稱"綿茵陳"，秋季采割的稱 "茵陳蒿"，我國現多以綿茵陳入藥。茵陳性微寒，味微苦、辛，歸肝、膽、脾、 胃、膀胱經。清濕熱，退黃疸。用于黃疸尿少，濕瘡瘙癢；傳染性黃疸型肝 炎。
研究發現，茵陳中含有多種化學成分，如有機酸、黃酮、香豆素等，其 中有機酸類化合物為綿茵陳中的主要成分，含量較高的有3-咖啡酰喹尼酸(綠 原酸)、3,5 —二咖啡酰喹尼酸、3,4 —二咖啡酰喹尼酸等，這些有機酸具有抗 菌解毒、消炎利膽等藥理作用，是綿茵陳中的主要藥效成分。
有機酸類化合物常用的純化方法有溶劑萃取法、硅膠柱層析法等，這類 方法需使用較多的有毒溶劑，增加了脫溶劑步驟，提出了更高的檢測要求， 增加了分離富集的成本。
大孔吸附樹脂是一類新型非離子型高分子化合物，應用于工業脫色、環 境保護、抗生素的提取分離等領域己近20年，近年來在中藥有效組分(中藥中一大類結構及性質相近的成分)或天然產物提取分離方面得到了廣泛的應 用，大孔樹脂法也應用于茵陳提取物的純化中(曾元兒等,綿茵陳提取液的大
孔樹脂靜態吸附工藝影響因素考察,中成藥,2007,29(2):199-201;王鳳云等,綿茵 陳提取液的大孔樹脂動態吸附工藝研究，中成藥,2007,29(4):509-511);但其分 離純化的目標不明確。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種綿茵陳有機酸的分離 富集方法。
本發明的目的是通過以下技術方案來實現的
一種綿茵陳有機酸的分離富集方法，其特征在于，具體步驟為
(1) 將綿茵陳藥材和質量百分比為0% 30%乙醇加入到提取設備中， 加熱回流提取0.5 2h，溶劑乙醇倍量為綿茵陳藥材質量的10 25倍，提取l 3次，經過濾制得綿茵陳提取液，減壓濃縮至綿茵陳藥材體積的1 3倍；
(2) 在步驟(1)制得綿茵陳提取液中加入乙醇，乙醇質量百分比為60 80%，放置過夜，時間為10 14h，離心，過濾得到清液，減壓濃縮至綿茵陳 藥材體積的1 3倍，制得綿茵陳濃縮液；
(3) 將步驟(2)制得綿茵陳濃縮液，用濃度為0.1 2mol/L的鹽酸溶液 調節綿茵陳濃縮液的pH至2 5，過濾，制得綿茵陳濾液；
(4) 將步驟(3)制得綿茵陳濾液，經大孔吸附樹脂吸附，先用2 3倍 柱體積的水洗脫雜質并棄去清洗液，再用3 6倍柱體積、質量百分比為40 60%乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥后，制得有機酸富集物；
所述的大孔吸附樹脂為苯乙烯大孔吸附樹脂；最終，有機酸組分得率為1.7%，其中綠原酸含量為4.5%、 3,5-二咖啡酰 喹尼酸含量為1.3%， 3,4-二咖啡酰喹尼酸的含量為1.4%。 與現有技術相比，本發明的積極效果是
本發明采用大孔吸附樹脂對綿茵陳中有機酸組分進行分離富集，制備工 藝簡單，成本低廉，環境友好，方法穩定，適合工業化生產。
圖1本發明的實施例1綿茵陳有機酸組分的高效液相色譜圖； 圖2本發明的實施例1綿茵陳有機酸組分中綠原酸的洗脫曲線； 圖3本發明的實施例1綿茵陳有機酸組分中3,4-二咖啡酰喹尼酸的洗脫 曲線。
具體實施方式
以下提供本發明綿茵陳中有機酸的分離富集方法的具體實施方式
。 實施例l
綿茵陳藥材50g，以其16倍量14%乙醇回流提取2小時，過濾。藥渣再 用16倍量14%乙醇溶液回流提取2小時，過濾，合并濾液，減壓濃縮至l倍 綿茵陳藥材體積。加入95%乙醇，使溶液含醇量達70%，靜置12h，離心、 過濾，濾液減壓濃縮至1倍綿茵陳藥材體積。用0.5mol/L HC1調節pH至3.0， 離心、過濾。
將已預處理好的HZ-816大孔樹脂裝入內徑16mm，高800mm的玻璃柱 內，加入上述制備得到的提取液50mL，經大孔樹脂吸附，以3倍樹脂床層體積的去離子水，1/2 BV/h的流速洗去水溶性雜質；再以4倍床層體積50%乙 醇，1/2 BV/h的流速進行洗脫，收集洗脫液。將上述洗脫液減壓濃縮后，稠 浸膏經60。C真空干燥，得綿茵陳有機酸組分的得率為1.7%，其中綠原酸含量 為4.5%， 3,5 — 二咖啡酰喹尼酸含量為1.3%， 3,4 — 二咖啡酰喹尼酸含量為 1.4%。
圖1為綿茵陳有機酸組分的高效液相色譜圖；具體為對照品對照及 LC-MS鑒定結果，其中1、 2、 4為綠原酸異構體，3為綠原酸，5、 6、 7為 異綠原酸，8為3，5-二咖啡酰喹尼酸，9為3,4-二咖啡酰喹尼酸；圖2為綿茵 陳有機酸組分中綠原酸的洗脫曲線；圖3為綿茵陳有機酸組分中3,4-二咖啡酰 喹尼酸的洗脫曲線。
實施例2
綿茵陳2kg，以其16倍量14%乙醇回流提取2次，每次1小時，將所得 的提取液濃縮至約1.5倍綿茵陳藥材體積，加入95%乙醇，調節至含醇量為 70%，靜置過夜，過濾。濾液減壓濃縮至1倍綿茵陳藥材體積，用0.3mol/LHCl 調節pH至2.5。離心。上清液立即以1/4BV/h流速上樣，以3倍樹脂體積的 去離子水沖去雜質；再用3倍樹脂體積50%的乙醇洗脫，收集洗脫液。將上 述洗脫液于60'C以下減壓濃縮至稠浸膏，然后于真空烘箱內60"C真空干燥至 恒重，得綿茵陳有機酸粉末32g，收率為1.6%，其中綠原酸含量為4.7%， 3,5 一二咖啡酰喹尼酸含量為1.2%， 3,4—二咖啡酰喹尼酸為1.3%。
以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普 通技術人員，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍內
權利要求
1.一種綿茵陳有機酸的分離富集方法，其特征在于，具體步驟為(1)將綿茵陳藥材和質量百分比為0％～30％乙醇加入到提取設備中，加熱回流提取0.5～2h，溶劑乙醇倍量為綿茵陳藥材質量的10～25倍，提取1～3次，經過濾制得綿茵陳提取液，減壓濃縮至綿茵陳藥材體積的1～3倍；(2)在步驟(1)制得綿茵陳提取液中加入乙醇，乙醇質量百分比為60～80％，放置10～14h，離心，過濾得到清液，減壓濃縮至綿茵陳藥材體積的1～3倍，制得綿茵陳濃縮液；(3)將步驟(2)制得綿茵陳濃縮液，用濃度為0.1～2mol/L的鹽酸溶液調節綿茵陳濃縮液的pH至2～5，過濾，制得綿茵陳濾液；(4)將步驟(3)制得綿茵陳濾液，經大孔吸附樹脂吸附，先用2～3倍柱體積的水洗脫雜質并棄去清洗液，再用3～6倍柱體積、質量百分比為40～60％乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥后，制得有機酸富集物。
2. 如權利要求1所述的綿茵陳有機酸的分離富集方法，其特征在于，所 述的大孔吸附樹脂為苯乙烯大孔吸附樹脂。
全文摘要
本發明涉及一種綿茵陳中有機酸的分離富集方法，由乙醇進行提取濃縮后的綿茵陳提取物，經醇沉、濃縮、調節pH值后，用大孔吸附樹脂吸附并以一定濃度的乙醇洗脫富集，減壓濃縮干燥，得到有機酸富集物。本發明的優點具有簡單易行、產物中有機酸含量高、成本低廉和環境友好等特點。
文檔編號C07B63/00GK101580447SQ200910053150
公開日2009年11月18日 申請日期2009年6月16日 優先權日2009年6月16日
發明者姜志宏, 慧 孫, 瑞 張, 祝付蘭, 羅國安, 坪 胡 申請人:華東理工大學