一種標記膽汁酸衍生物及其參照化合物、制備方法和應用的制作方法

專利名稱：一種標記膽汁酸衍生物及其參照化合物、制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種標記藥物衍生物及其參照化合物、及制備方法和應用，具體的涉 及一種標記膽汁酸衍生物及其參照化合物、及制備方法和應用。
背景技術：
核醫學可以利用某些放射性藥物中標記核素的特殊物理性質，對多種腫瘤及其病 灶進行顯像。這一獨特的腫瘤診斷方法在臨床中已日益受到人們的重視。目前，用于顯像 的放射性核素主要有131I、153Sm、117mSn、186Re、188Re和99mTc等。其中，99mTc更是以其優良的理 化性質在腫瘤診斷領域倍受關注。99mTc的半衰期為6. 01小時，γ射線能量為140keV，輻射 損傷小，具有很好的顯像分辨率，而且可以方便地從99Mo-99mTc發生器淋洗得到Na99mTcO4溶 液。正因為其具有價廉易得、輻射損傷小等優點，使其成為目前核醫藥研發時最常用的放射 性核素。現有放射性顯像藥物80%以上是與99mTc有關的放射性藥物。99mTc-高锝酸鈉(游離的99mTc形式)的生物學行為也非常優異。研究表明，實驗 動物靜脈注射99mTc-高錸酸鈉后，99mTc-高锝酸鈉只有很低的臟器吸收率，并很快地通過尿 排泄，它在人體內的生物半衰期< 10小時，因此即使99mTc標記的放射性藥物在體內發生核 素脫落也不會對人體造成嚴重的輻射損傷。99mTc的優良核性質以及99Mo-99mTc發生器的普 遍應用已使99mTc放射性藥物成為放射性藥物領域中的研究熱點。近年來，具有動力學惰性的低價氧化態锝化合物[99mTc(CO)3(H2O)3]+的合成取得 了巨大的突破，從而為99mTc放射性藥物的發展注入了新的活力。但[99mTc(CO)3(H2O)3] + 不能單獨作為放射性藥物，因為其不具有靶向性，且用它直接標記生物分子時，標記率很 低，標記化合物很不穩定。因此，標記生物分子時，中間需要雙功能螯合劑(bifunctional chelating agents, BFCA)連接。BFCA猶如一座橋梁，一端連接要標記的目標化合物，作為 靶向性分子或用于輔助治療，另一端絡合放射性核素99mTc。BFCA分子中既具有很強螯合力 的基團，又含有可以與靶向性分子、生物大分子、單克隆抗體蛋白等形成共價連接的基團， 即生物分子通過雙功能螯合劑與["mTc (CO) 3 (H2O) 3] +形成牢固的結合。人體內的膽汁酸主要有膽酸、鵝去氧膽酸、熊去氧膽酸、石膽酸和脫氧膽酸。膽汁 酸是人體內存在的天然配體，其代謝主要依賴肝腸循環，在肝腸循環期間，人體內膽汁池的 1. 5 4g膽汁酸每天循環6 15次，表明了肝和小腸中膽酸運輸系統的高運輸能力，也說 明膽酸能被肝膽腸等特異性識別，膽酸的運輸機理已經被很多學者研究，利用膽酸運輸系 統的高運輸能力，人們合成了很多膽酸類衍生物，一些研究者發現，對結構改造后的膽酸依 然能被膽酸運輸系統識別，尤其是在膽酸的3位和24位進行結構修飾。早先對膽酸進行放 射性標記的研究主要是來研究肝腸循環的機理，之后有人用釓(+3價)標記膽酸衍生物進 行MRI成像研究，也有人用In-Ill對膽酸衍生物進行了標記顯像研究。然而，利用肝膽對 膽酸及其衍生物進行特異性識別的放射性藥物合成與研究的還很少。99mTc標記物中的配體能夠引導核素到達腫瘤細胞，然后利用SPECT技術進行成 像，叢而達到診斷的目的，進而對病人進行有針對性的后續治療。但是，到目前為止，99mTc核素標記天然配體膽汁酸還沒見文獻報道，這是因為利用天然配體膽汁酸為原料也需要合成 合適的配體，然后引入容易與99mTc配位的雙功能螯合劑。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供了一種標記膽汁酸衍生物及其參照化合物、及 制備方法和應用。本發明第一次用放射性核素99mTc間接標記了膽汁酸，并且本發明的標記 膽汁酸衍生物具有良好的顯像效果。發明人經過大量的實驗設計，篩選出既可與金屬元素錸螯合，又能與膽汁酸連接 的雙功能螯合劑——二吡啶甲基胺類衍生物，首先合成了能螯合金屬錸的膽汁酸衍生物 (即本發明中的化合物III)，又以化合物III為基礎合成了膽汁酸二吡啶甲基胺類衍生物 的Re (CO) 3有機配合物，其結構式如V所示，這是放射性合成的冷實驗；最后合成了 99mTc標 記的膽汁酸二吡啶甲基胺類衍生物，其結構式如VI所示。因此本發明涉及一種如式VI所示的標記膽汁酸衍生物； 其中，A為-(CH2CH2) x-或者-(CH2CH2O)m (CH2CH2)η-，χ = 1 4，優選 1 或 3 ;m = 1 3，優選 1 ;n = 1 3，優選 1 ；隊=H, R2 = α -OH, R3 = α -OH ；或者 R1 = H，R2 = α -OH, R3 =H ；或者 R1 = H，R2 = β -OH, R3 = H ；或者 R1 = α -OH, R2 = H, R3 = H。本發明進一步涉及上述化合物VI的制備方法，其包含下列步驟用三水合三羰基 ■锝(fac-["mTc (CO) 3 (H2O)3I+)對化合物III進行放射性標記，即可； 其中，AdAnKrKRpR2* R3的定義均同前所述。其中，所述的標記的方法和條件均可為本領域此類標記的常規方法和 條件，優選的方法和條件如下有機溶劑中，在孵育器中，將三水合三羰基"""锝 (fac-["mTc (CO) 3(H2O)3I+)和化合物III反應，即可。其中，所述的有機溶劑可以為常規 的有機溶劑，較佳的為二甲亞砜(DMSO)、甲醇、丙酮、乙腈和乙醇中的一種或多種，優選乙 醇；溶劑與化合物III的體積質量比較佳的為10 100ml/g ；所述的三水合三羰基99m锝 (fac-["mTc (CO) 3(H2O)3I+)的放射性活度與化合物III的摩爾量之間的比例較佳的為Imci lXl(T4mmol Imci :2X l(T3mmol，更佳的為 2mci :5Xl(T4mmol 5mci :2Xl(T3mmol ；所述 的孵育器的轉速較佳的為1000 2000轉/分，更佳的為1300轉/分；所述的反應的溫度 較佳的為65 85°C，更佳的為80°C ；所述的反應的時間較佳的以檢測反應完全為止，一般 為25 60分鐘，最佳的為30分鐘；在反應完成后，較佳的用放射性HPLC進行分離提純。現有放射性標記技術都是在NaCl水溶液中進行，本發明中的膽汁酸酰胺類化合 物(化合物III)的水溶性中等，在標記時為了得到更高的標記率，調整了反應條件，加入有 機溶劑如乙醇助溶后，使標記率大大提高。本發明中，所述的化合物III可由下列方法制得有機溶劑中，將化合物11和化合 物IV進行縮合反應，即可；
(HI)其中，A、XAnKrKRpR2和R3的定義均同前所述。其中，所述的縮合反應的方法和條件均可為本領域中一個氨基和兩個醛基進行縮 合反應的常規方法和條件，本發明通過仔細調節反應物的摩爾比、反應溫度等條件，制得了 純的膽汁酸酰胺類衍生物(化合物III)，因此本發明特別優選下述方法和條件鹵代烷烴 溶劑中，在堿性催化劑的作用下，將化合物II和化合物IV進行縮合反應，即可。其中，所述 的鹵代烷烴較佳的為1，2_ 二氯乙烷、二氯甲烷和三氯甲烷中的一種或多種，優選1，2_ 二氯 乙烷；溶劑與化合物II的體積質量比較佳的為5 50ml/g，更佳的為15ml/g ；所述的化合 物IV與化合物II的摩爾比較佳的為2. 1 1 3 1，更佳的為2. 3 1 ；所述的堿性催 化劑較佳的為三乙酰氧基硼氫化鈉、硼氫化鈉和硼氫化鉀中的一種或多種，優選三乙酰氧 基硼氫化鈉；所述的堿性催化劑與化合物IV的摩爾比較佳的為1 1.2 1 3，更佳的 為1 1.5 1 2. 5;所述的反應的溫度較佳的為10°C 30°C，更佳的為15°C 25°C ； 所述的反應的時間較佳的以檢測反應完全為止，一般為10 20小時，優選15 18小時。更佳的，還可以在上述反應體系中加入甲醇，甲醇可以使膽汁酸酰胺類化合物 (化合物II)在1，2-二氯乙烷中的溶解度大大增加，使反應時間加快，也使反應產率大大提 高，甲醇的加入量優選為能將化合物II溶解為止。本發明還涉及一種如式V所示的標記膽汁酸衍生物VI的參照化合物； 其中，Α,χ、!!!、!!、!^、!^* R3的定義均同前所述。本發明進一步涉及化合物V的制備方法，其包括下列步驟有機溶劑中，將化合物 III與化合物VII溴化三羰基錸四乙基胺配合物((Et4N) JRe(CO)3Br3])反應，即可； 其中，A、x、m、IuRpR2和R3的定義均同前所述。其中，所述的反應的方法和條件均可為本領域此類反應的常規方法和條件，優選 的條件如下所述的有機溶劑較佳的為甲醇、乙醇、丙酮和乙腈中的一種或多種，優選乙醇； 溶劑與化合物III的體積質量比較佳的為5 50ml/g ；所述的溴化三羰基錸四乙基胺配合 物與化合物III的摩爾比較佳的為1 1 2.5 1，更佳的1 1 2 1 ；所述的反應 的溫度較佳的為15°C 60°C，更佳的為25°C 35°C;所述的反應的時間較佳的以檢測完全 為止，優選0.5 2小時。其中，化合物III的制備方法以及條件均同前所述。其中，溴化三羰基錸四乙基胺配合物(Et4N) JRe(CO)3Br3]可采用現有技術合成 (Alberto R, Egli A, Abrum U,
et al，Synthesis and reactivity of (Et4N) 2 [Re (CO) 3Br3] Formation and Structural Characterization of the Clusters[Et4N] [Re (μ3-0H)(μ -OH) 3 (CO) 3] and[Et4N] [Re2 ( μ -OH) 3 (CO) 6]by AlkalineTitration J Chem Soc Dalton Trans,1994，2815-2820.)。本發明中，上述工藝步驟中的各優選條件可任意組合，即得到本發明的各優選實 例。本發明還涉及制備標記膽汁酸衍生物VI的中間體化合物III ； 其中，A為-(CH2CH2) χ-或者-(CH2CH2O)m (CH2CH2)η_，χ = 1 4，優選 1 或 3 ;m = 1 3，優選 1 ;n = 1 3，優選 1 ；隊=H, R2 = α -OH, R3 = α -OH ；或者 R1 = H，R2 = α -OH, R3 =H ；或者 R1 = H，R2 = β -OH, R3 = H ；或者 R1 = α -OH, R2 = H, R3 = H。更佳的，χ= 3 或者 m = 1，η = 1 ；隊=H，R2 = α -OH, R3 = α -OH。本發明還涉及制備標記膽汁酸衍生物VI的中間體化合物II ； 其中，A為-(CH2CH2) χ-或者-(CH2CH2O)m (CH2CH2)η_，χ = 1 4，優選 1 或 3 ;m = 1 3，優選 1 ;n = 1 3，優選 1 ；隊=H, R2 = α -OH, R3 = α -OH ；或者 R1 = H，R2 = α -OH, R3 =H ；或者 R1 = H，R2 = β -OH, R3 = H ；或者 R1 = α -OH, R2 = H，R3 = H ；但化合物 II 不包 括 A 為-(CH2CH2) 3", R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α -OH 時的具體化合物。本發明還涉及標記膽汁酸衍生物VI在制備肝膽顯像藥物中的應用。除特殊說明外，本發明涉及的原料和試劑均市售可得。本發明的積極進步效果在于本發明第一次用放射性核素99mTc間接標記了膽汁酸，并且本發明的標記膽汁酸衍 生物具有良好的顯像效果，是一種潛在的肝膽顯像藥物。


圖1為實施例5的(1)中制得的非放射性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸 酰胺三羰基錸配合物HPLC譜圖，t = 23. 80min。
圖2為實施例6的2中制得的放射性N-乙胺基[二(2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺 三羰基锝配合物HPLC譜圖，t = 23. 40min。圖3為實施例5的⑵中制得的非放射性N-己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸 酰胺三羰基錸配合物HPLC譜圖，t = 23. 79min。圖4為實施例7的2中制得的放射性N-己胺基[二(2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺 三羰基锝配合物HPLC譜圖，t = 23. 36min。圖5為實施例5的(4)中制得的非放射性N-己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]鵝去 氧膽酸酰胺三羰基錸配合物HPLC譜圖，t = 24. 50mino圖6為實施例8的2中制得的放射性N-己胺基[二(2_亞甲基吡啶)]鵝去氧膽 酸酰胺三羰基锝配合物HPLC譜圖，t = 24. 28min。
具體實施例方式下面用實施例來進一步說明本發明，但本發明并不受其限制。下列實施例中所用的原料膽汁酸酰胺類化合物可根據現有技術合成，如上述背景 技術內容中提及的各份文獻自行合成。 實施例1式Ia Id化合物的合成具體步驟如下(以Ia的合成為例)0· 817g(2mmol)膽酸溶于25ml甲醇后，磁力 攪拌下滴加0. 6ml濃鹽酸，回流條件下反應，TLC跟蹤反應，反應結束后，用5mol/LNa0H溶 液調節PH值約為7，再減壓旋蒸除去大部分甲醇，加適量水后用乙酸乙酯萃取(3*20ml)，有 機相分別用飽和碳酸氫鈉溶液、水、飽和食鹽水各洗一次，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑 后，快速柱層析分離，洗脫劑二氯甲烷甲醇=10 1，得一白色固體0.801g，產率95%， m.p. 155. 1-155. 9°C ；當膽汁酸為膽酸、鵝去氧膽酸、熊去氧膽酸、豬去氧膽酸時制得的膽汁 酸甲酯類化合物，分別用Ia、Ib、I。和Id。 Ia的鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3403, ν (C = 0) 1736, ν (C-O) 1074cm-1.1H NMR(CDCl3) : δ 0· 71 (s，3H，18_CH3)，0· 92 (s，3H，19_CH3)，1· 00 (d，3H，J = 6. 2Hz,21-CH3)，1. 03 1. 16 (m, 1H)，1· 30 1. 43 (m, 5H)，1. 51 2. 16 (m, 17H)，2. 15 2.25 (m, 3H)，2. 27 2. 39 (m, 1H)，3. 46 3. 49 (m, 1H, C3- β H)，3. 87 (s, 3H, -OCH3)，3. 88
3.89 (m, 1H, C7- β H)，4. 01 (br s, 1H, C12- β H).Ib的鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3416, ν (C = 0) 1786, ν (C-O) 1074cm-1.1H NMR(CDCl3) : δ 0· 66 (s，3H，18_CH3)，0· 91 (s，3H，19_CH3)，0· 93 (d，3H，J = 6. 5Hz，21-CH3)，0. 94 1. 01 (m，1H)，1. 08 1. 22 (m，3H)，1. 23 1. 53 (m，12H)，1. 60
1.74 (m, 3H)，1. 76 1. 87 (m, 3H)，1. 88 1. 94 (m, 1H)，1. 95 2. 03 (m, 2H)，2. 18 2. 25 (m, 2H) ,2. 33 — 2. 38 (m, 1H)，3. 44 3. 50 (m, 1H, C3- β H)，3. 666 (s, 3H, -OCH3)，3. 82 3. 86 (m, 1H, C7- β H) ·Ic的鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3412, ν (C = 0) 1786, ν (C-O) 1074cm-1.1H 匪R(CDCl3) : δ 0· 68 (s，3H，18_CH3)，0· 92 (d，3H，J = 6. 5Hz，21_CH3)，0· 94 (s， 3H, 19-CH3)，0. 98 1. 16 (m, 3H)，1. 21 1. 36 (m, 5H)，1. 38 1. 53 (m, 6H)，1. 54 1. 62 (m, 2H)，1. 63 1. 69 (m, 2H)，1. 76 1. 86 (m, 5H)，1. 87 1. 93 (m, 1H)，1. 97 2. 03 (m, 1H)，
2.18 2. 25 (m, 1H)，2. 32 2. 38 (m, 1H)，3. 51 3. 62 (m, 2H, C3- β H and C7- α H)，3· 66 (s, 3H, -OCH3).Id的鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3350, ν (C = 0) 1743, ν (C-O) 1123cm-1.
1H 匪R (CDCl3) : δ 0. 64(s，3H，18-CH3)，0· 92(d，3H，J = 6. 5Hz，21_CH3)，0· 93
0.98(m，1H)，1. 02(s，3H，19-CH3)，1· 09 1. 23 (m，3Η)，1. 25 1. 57 (m，12H)，1. 60
1.73 (m, 3H)，1. 75 1. 86 (m, 3H)，1. 88 1. 93 (m, 1H)，1. 95 2. 06 (m, 2H)，2. 18 2. 37 (m, 3H)，3. 60 3. 64 (m, 1H, C3- β H)，3. 67 (s, 3H, -OCH3)，4. 03 4. 08 (m, 1H, C6- β H).實施例2式II化合物膽汁酸酰胺的合成 (I)N-乙胺基膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α -OH,具體合成步驟 如下將1.64g(3.98mm0l)膽酸甲酯(式Ia)和IOml 1,2-乙二胺加入一 50ml單頸圓底 燒瓶，于73°C下回流反應8h，自然冷卻到室溫后，加適量冰水后充分攪拌，有大量白色固體 生成，抽濾，用大量水洗滌沉淀，真空干燥后得一白色固體1.63g，產率93%，m.p. 191. 8 192. 40C ；其鑒定數據如下
IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3371，v(C = 0) 1740cm-1.1H NMR(500MHz, CD3OD, δ ) :0· 70 (s，3H，18-CH3)，0. 91 (s，3H，19_CH3)，0. 94
0.98 (m, 1H)，1. 02 (d, 3H, J = 6. 4Hz，21-CH3)，1. 06 1. 13 (m, 1H)，1· 25 1. 47 (m, 7H)，
1.51 1. 66 (m, 7H)，1. 71 1. 97 (m, 9H)，2. 08 2. 15 (m, 1H)，2. 22 2. 31 (m, 4H)，2. 76 (t, 2H，J = 6. 3Hz，2，-CH2)，3. 25 (t，2H，J = 6. 3Hz，1，-CH2)，3. 33-3. 39 (m，1H，3-CH)，3. 77 3. 80 (m, 1H, 7-CH)，3. 94 (br s, 1H, 12-CH).(2) N-己胺基膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α _0Η，合成方法同實 施例2中的(1)，但后處理過程不同。具體過程如下將2. 5g(5. 92mmol)膽酸甲酯(式Ia) 和5g(43. 10mmol)l,6-己二胺加入一 50ml單頸圓底燒瓶，于73°C下回流反應8h，自然冷卻 到室溫后，得一白色固體，加25ml水使其全部溶解，然后用CH2Cl2 (3 X 30ml)萃取，有機相用 飽和食鹽水洗1次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓旋蒸去溶劑，得一油狀液體，快速柱層析分 離，洗脫劑甲醇氨水=85 1，得一白色固體2. 85g，產率95%，m.p. 118. 1 118. 3°C;其鑒定數據如下IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3350，v(C = 0) 1646cm-1.1H NMR(CD3OD) : δ 0. 70 (s，3H，18_CH3)，0. 91 (s，3H，19_CH3)，0. 92 0. 97 (m，1H)， 1. 02 (d, 3H, J = 6. 2Hz,21-CH3) ,1.06 — 1. 16 (m, 1H)，1. 25 1. 46 (m, 10H) ,1.48 — 1. 68 (m, 13H)，1. 71 2. 03(m，9H)，2· 08 2· 13 (m, 1H)，2· 18 2· 27 (m，3Η)，2. 75(t，2H，J = 7· 4Hz, 6' -CH2)，3· 15(t，2H，J = 7. OHz, 1' -CH2), 3. 33 3. 39 (m, 1Η, C3- β H), 3. 73 3. 79 (m, 1Η, C7- β H)，3· 94 (br s, 1Η, C12- β H).(3) N-乙胺基鵝去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = H，合成方法和過程同 實施例2中的(2).產率90%，m. p. 75. 7 76. 3°C ；其鑒定數據如下IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3358，v(C = 0) 1646cm-1.1H NMR (400MHz, CD3OD, δ ) :0. 68 (s，3H，18—CH3)，0. 92 (s，3H，19_CH3)，0. 97 (d， 3H, J = 6. 5Hz，21-CH3)，1. 06 1. 12 (m, 1H)，1· 14 1. 21 (m, 3H)，1· 27 1. 38 (m, 5H)，
1.41 1. 53 (m, 5H)，1. 56 1. 65 (m, 2H)，1. 68 2. 01 (m, 12H)，2. 08 2. 15 (m, 1H)，2. 02
2.28(m，2H)，2. 74(t，2H，J = 6. 4Hz，2，-CH2)，3. 24 (t，2H，J = 6. 4Hz，1，-CH2)，3. 32
3.36 (m, 1H, 3-CH)，3. 71 3. 79 (m, 1H, 7-CH).(4) N-己胺基鵝去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = H，合成方法和過程同 實施例2中的(2).產率93%，m. p. 69. 0 69. 5°C ；其鑒定數據如下IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3375，v(C = 0) 1646cm-1.1H NMR (400MHz, CD3OD, δ ) :0. 68 (s，3H，18—CH3)，0. 92 (s，3H，19_CH3)，0. 96 (d， 3H, J = 6. 6Hz，21-CH3)，1. 01 1. 21 (m,5H), 1. 22 1. 40 (m，11H)，1. 46 1. 56 (m, 10H)，1. 57 1. 68 (m, 2H)，1. 68 2. 02 (m, 8H)，2. 05 2. 12 (m, 1H)，2. 18 2. 27 (m, 2H)， 2. 703(t，2H，J = 7. 4Hz，6，-CH2)，3. 152(t，2H，J = 7. 0Hz，1，-CH2)，3· 33 3. 39 (m, 1Η,
143-CH)，3. 76 3. 81 (m, 1H, 7-CH).(5) N-乙胺基熊去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = β -OH, R3 = H，合成方法和過程同 實施例 2 中的(2).產率 91%，m. ρ· 223. 9 224. 2°C ；其鑒定數據如下IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3411，v(C = 0) 1650cm-1.1H NMR (CD3OD) : δ 0. 70 (s，3H，18_CH3)，0. 96 (s，3H，19_CH3)，0. 98 (d，3H，J = 2. 9Hz，21-CH3)，1. 02 1. 17 (m，3H)，1. 15 1. 36 (m，7H)，1. 37 1. 50 (m，7H)，1. 51 1. 63 (m, 5H)，1. 75 1. 91 (m, 6H)，2. 01 2. 04 (m, 1H)，2. 05 2. 13 (m, 1H)，2. 22 2. 29 (m, 1H)，2. 71 (t, 2H, J = 6. 4Hz,2' -CH2)，3. 22 (t, 2H, J = 6. 4Hz,l' -CH2)，3. 41 3. 53 (m, 2H, C3- β H and C7- α H).(6) N-己胺基熊去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = β -OH, R3 = H，合成方法和過程同 實施例2中的(2).產率92%，m. p. 54. 4 55. 6°C ；其鑒定數據如下IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3297，v(C = 0) 1650cm-1.1H NMR (CD3OD) : δ 0. 69 (s，3H，18_CH3)，0. 95 (s，3H，19_CH3)，0. 96 (d，3H，J = 6. 6Hz，21-CH3)，0. 98 1. 10(m，lH)，l. 14 1. 36 (m，15H)，1. 38 1. 51 (m，10H)，1. 55
1.63 (m, 4H)，1. 75 1. 91 (m, 6H)，2. 01 2. 12 (m, 2H)，2. 18 2. 23 (m, 1H)，2. 62 (t, 2H, J = 7·2Ηζ，2' -CH2), 3. 14 (t, 2H, J = 7. OHz, 1 ‘ -CH2)，3. 40 3. 51 (m，2H，C3-β H and C7-α H) ·(7) N-乙胺基豬去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = α -OH, R2 = H, R3 = H，合成方法和過程同 實施例 2 中的(2).產率 85%，m. ρ· 116. 8 117. 2°C ；其鑒定數據如下IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3342，v(C = 0) 1642cm-1.1H NMR(DMSO) : δ 0. 58 (s，3H，18_CH3)，0. 82 (s，3H，19_CH3)，0. 86 (d，3H，J = 7. 0Hz， 21-CH3)，0. 91 1. 02 (m, 1H)，1. 04 1. 26 (m, 10H)，1. 27 1. 40 (m, 5H)，1. 41 1. 56 (m, 4H), 1. 57 1. 70(m，3H)，1. 71 1. 83 (m，3H)，1. 86 1. 98 (m，3H)，2. 02 2. ll(m，lH)，
2.52 (d, 2H, J = 8. OHz, 2' -CH2)，2. 99 (dd, 2H, J1 = 16. OHz, J2 = 8. OHz, 1' -CH2)，3. 27
3.32 (m, 1H, C3- β H)，3. 78 3. 83 (m, 1H, C6- β H)，7. 712 (s，1H, -NH).(8) N-己胺基豬去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = α -OH, R2 = H, R3 = H，合成方法和過程同 實施例 2 中的(2).產率 86%，m. ρ· 115.0 116. 2°C ；其鑒定數據如下IR(KBr) :v(N_H and 0_H)3293，v(C = 0) 1646cm-1.1H NMR(DMSO) : δ 0. 58 (s，3H，18_CH3)，0. 82 (s，3H，19_CH3)，0. 86 (d，3H，J = 7. 5Hz， 21-CH3)，0. 92 1. 10 (m, 6H)，1. 12 1. 26 (m, 10H)，1. 26 1. 39 (m, 10H)，1. 40 1. 53 (m, 3H)，1. 58 1. 67 (m, 3H)，1. 71 1. 82 (m, 3H)，1. 86 1. 97 (m, 2H)，1. 99 2. 09 (m, 1H)， 2. 98(dd，2H，J1 = 15. 5Hz, J2 = 7. 5Hz,6' -CH2), 3. 29 (m, 2Η, 1' -CH2), 3. 55 3. 60 (m, 1Η,C3- β H)，3. 78 3. 83 (m, 1H, C6- β H), 7. 71 (s, 1H, -NH),實施例3式III化合物的合成 (I)N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α _0Η，具體合成步驟 如下0. 901g(2mmol)II溶于15mLl，2-二氯乙烷和2mL甲醇的混合溶劑中，然后滴加溶于 5mL 1，2-二氯乙烷的吡啶-2-甲醛0. 481g (4. 5mmol)，21°C下反應3h，之后在冰鹽浴條件 下，分批加入NaHB(OAc)3O. 949g(4. 5mmol)，于冰鹽浴中反應lh，然后在21°C下反應16h，之 后加20ml水淬滅反應，二氯甲烷萃取(3 X 20ml)，有機相用水、飽和食鹽水各洗一次，無水 硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸去溶劑，快速柱層析分離，洗脫劑二氯甲烷甲醇=20 1和二 氯甲烷甲醇=10 1，得淡黃色產品1.020g，產率81%，m.p. 72. 0 72. 6°C .其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3396, ν (C = 0) 1650, ν (C = N) 1593cm-1 ；1H NMR(500MHz, CDCl3, δ ) :0· 67 (s，3H，18-CH3)，0· 87 (s，3H，19_CH3)，0· 92
0.98 (m, 1H)，1. 02 (d, 3H, J = 5. 9Hz，21-CH3)，1. 06 1. 12 (m, 1H)，1. 23 1. 28 (m, 1H)，
1.32 1. 70 (m, 12H), 1. 72 1. 94 (m，8H)，2. 08 2. 15 (m，1H)，2. 21 2. 28 (m，3H)， 2.74(t，2H，J = 5. 6Hz，2，-CH2)，3· 34(t，2H，J = 5. 2Hz，1，-CH2)，3. 41 3. 44 (m, 1H, 3-CH)，3. 82 3. 86 (m, 1H，7-CH)，3. 87(s，4H，_N(CH2)2)，3. 97 (br s, 1H, 12-CH)，7. 17 (dd, 2H, J1 = 7. 3Hz, J2 = 5. OHz, δ -CH, Py), 7. 36(d,2H, J = 5. 6Hz, β -CH, Py), 7. 55 (s, 1H, -NH)，7. 63(td，2H，J1 = 7. 7Hz, J2 = 1. 5Hz, y-CH, Py) ,8. 54(d，2H，J = 4. 7Hz, σ -CH, Py)；HRMS calcd for C38HreN4O4[M+l]+633. 4380，found 633. 4380.(2)N_己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α _0Η，合成方法同實 施例 3 中的(1)，產率78%，111. .84. 1 84. 6°C .其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3350, ν (C = 0) 1646, ν (C = N) 1589cm-1 ；1H NMR(CDCl3) : δ 0· 67 (s，3H，18_CH3)，0· 87 (s，3H，19_CH3)，0· 92 0· 97 (m， 1H)，0· 98(d，3H，J = 6. 2Hz，21_CH3)，1. 03 1. 13 (m, 1H)，1. 20 1. 30 (m, 5H)，1. 34 1.61(m，13H)，1.62 1. 96 (m，11H)，2. 02 2. 09 (m，1H)，2. 15 2. 27 (m，3H)，2. 55(t，2H， J = 7. 4Hz,6 ‘ -CH2)，3. 17(dd，2H，J1 = 14. 5Hz, J2 = 7. 2Hz, 1 ‘ -CH2), 3. 39 3. 44 (m,
161H，C3- β H)，3. 78 3. 82 (m，1H，C7- β H)，3. 83 (s，4H，-N (CH2) 2), 3. 95 (br s，1H，C12- β H)， 6. ll(s，lH，-NH)，7. 15(dd，2H，J1 = 6. 8Hz, J2 = 5. 3Ηζ, δ -H, Py), 7. 53(d,2H, J = 7. 8Hz, β -H, Py), 7. 66(td，2H，J1 = 7. 6Hz, J2 = 1. 7Ηζ, γ-H, Py) ,8. 51(d，2H，J = 4. 7Ηζ, σ -H, Py).HRMS calcd for C42H64N4O4[Μ+1]+689. 5006，found 689. 5009.(3)Ν_乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]鵝去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = LR1 = H，R2 = α-0Η，R3 = H，合成方法同實施例 3 中的(1)，產率 80%，m. ρ· 70. 3 71. 6°C .其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3346, ν (C = 0) 1646，ν (C = N) 1597cm-1 ；1H NMR (500MHz, CDCl3, δ ) :0· 67 (s，3H，18—CH3)，0· 91 (s，3H，19_CH3)，0· 97 (d， 3H, J = 6. 5Hz，21-CH3)，1. 04 1. 51 (m, 14H)，1· 59 1. 72 (m, 3H)，1. 78 1. 97 (m, 7H)， 2. 08 2. 15(m，2H)，2. 18 2. 30 (m，2H)，2. 75(t，2H，J = 5. 6Hz，2，_CH2)，3. 35(dd，2H，J1 = 11. 2Hz, J2 = 4. 9Hz，1，-CH2)，3. 43 3. 48 (m, 1H，3-CH)，3. 80 3. 85 (m, 1H，7-CH)，3. 88 (s, 4H, -N (CH2) 2) ,7. 18 (ddd, 2H, J1 = 7. 4Hz，J2 = 5. OHz, J3 = 0. 9Hz，δ -CH, Py)，7. 36 (d, 2H, J = 7. 8Hz, β -CH, Py), 7. 48 (s, 1Η，-NH)，7· 63 UcI^HjJ1 = 7. 7Hz, J2 = 1. 8Ηζ, γ -CH, Py)， 8. 56(ddd，2H，J1 = 4. 2Hz, J2 = 1. 6Hz, J3 = 0. 8Ηζ, σ -CH, Py)；HRMS calcd for C38H56N4O3[Μ+1]+617. 4431, found 617. 4424.(4)Ν_己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]鵝去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = α-0Η，R3 = H，合成方法同實施例 3 中的(1)，產率 78%，m. ρ· 84. 1 84. 6°C .其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3354, ν (C = 0) 1650, ν (C = N) 1593cm-1 ；1H NMR (500MHz, CDCl3, δ) :0· 65 (s，3H，18-CH3)，0· 90 (s，3H，19_CH3)，0· 92 (d，3H， J = 6. 5Hz，21-CH3) ,0. 93 — 0. 99 (m, 1H)，1. 08 1. 19 (m，3H)，1· 21 1. 56 (m, 19Η), 1. 60 —
2.06 (m, 11Η)，2· 16 2. 25 (m，2Η)，2. 537(t，2H，J = 7. 3Hz，6，-CH2)，3. 19(dd，2H，J1 = 13. 4Hz, J2 = 6. 6Ηζ，Γ -CH2), 3. 41 3. 47 (m，1Η，3-CH)，3. 81 (s，4Η，_N(CH2) 2)，3. 80
3.85(m，1H，7-CH)，5. 59(s，1H，-NH)，7. 15(m，2H，δ-CH, Py), 7. 54(d,2H, J = 7. 8Hz, β -CH, Py), 7. 66(td，2H，J1 = 7. 7Hz, J2 = 1. 7Hz, y-CH, Py) ,8. 52(dd，2H，J1 = 4. 7Hz, J2 = 0. 7Hz, σ -CH, Py ；HRMS calcd for C42H64N4O3[M+l]+673. 5057，found 673. 5059.(5)N_乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]熊去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = LR1 = H，R2 = β _0H，R3 = H，合成方法同實施例 3 中的(1)，產率 80% ；m. ρ· 71. 5 72. 3°C .其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3301, ν (C = 0) 1646, ν (C = N) 1593cm-1 ；1H NMR(CDCl3) : δ 0· 68 (s，3H，18_CH3)，0· 95 (s，3H，19_CH3)，0· 97 (d，3H，J = 6. 5Hz，21-CH3)，1. 03 1. 56 (m，15H)，1. 57 1. 68 (m，5H)，1. 75 1. 83 (m，4H)，1. 89 1. 96 (m, 1H)，2. 01 2. 05 (m, 1H)，2. 10 2. 16 (m, 1H)，2. 25 2. 32 (m, 1H)，2. 74 (t, 2H, J=5. 6Hz，2 ‘ -CH2)，3. 34 (dd, 2H, J1 = 10. 9Hz, J2 = 5. OHz, 1' -CH2)，3. 53 3. 62 (m, 2H, C3_3H and C7-α H)，3· 87 (s，4H，-N(CH2)2) ,7. 18(ddd，2H，J1 = 7. 4Hz, J2 = 4. 8Hz, J3 =
0.8Hz, δ -H, Py)，7. 35 (d, 2H, J = 7. 8Hz, β -H, Py)，7. 51 (s, 1H, -NH)，7. 63 (td, 2H, J1 = 7. 7Hz, J2 = 1. 8Hz, γ-H, Py) ,8. 55(dd，2H，J1 = 3. 4Hz, J2 = 0. 8Hz, σ -H, Py)；HRMS calcd for C38H56N4O3[Μ+1]+617. 4431, found 617. 4419.(6)N_己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]熊去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = β _0H，R3 = H，合成方法同實施例 3 中的(1)，產率 79% ；m. ρ· 63. 1 64. 6°C .其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3366, ν (C = 0) 1646，ν (C = N) 1597cm-1 ；1H NMR(CDCl3) : δ 0· 67 (s，3H，18_CH3)，0· 92 (s，3H，19_CH3)，0· 94 (d，3H，J =
3.5Hz,21-CH3)，1. 01 1. 13 (m, 1H)，1· 15 1. 40 (m, 10H)，1. 41 1. 49 (m, 7H)，1. 50 1.61(m，7H)，1.62 1. 76 (m，5H)，1. 77 2. 13 (m，3H)，2. 18 2. 23 (m，3H)，2. 55 (t，2H， J = 9. 3Hz，6 ‘ -CH2)，3. 19(dd，2H，J1 = 13. OHz, J2 = 8. OHz, 1 ‘ -CH2)，3. 51 3. 60 (m, 2H, C3- β H and C7-α H)，3· 83 (s，4H，-N(CH2) 2)，5· 51 (s，1H，-NH)，7· 15 (m，2H，δ-H，Py)， 7. 54 (d, 2H, J = 5. OHz, β -H, Py)，7. 66 (td, 2Η, J1 = 9. 5Hz, J2 = 2. OHz，γ -H, Py)，8. 52 (d, 2Η, J = 6. OHz, σ -H, Py)；HRMS calcd for C42H64N4O3[M+l]+673. 5057，found 673.5045.(7)Ν_乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]豬去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = LR1 = α-0Η，R2 = H，R3 = H，合成方法同實施例 3 中的(1)，產率 76% ；m. ρ· 73. 0 73. 6°C .其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3321, ν (C = 0) 1646, ν (C = N) 1589cm-1 ；1H NMR(CDCl3) : δ 0· 64 (s，3H，18_CH3)，0· 90 (s，3H，19_CH3)，0· 96 (d，3H，J = 6. 5Hz，21-CH3)，1. 03 1. 22 (m，8H)，1. 23 1. 49 (m,8H), 1. 51 1. 60 (m，4H)，1. 66
1.99 (m, 6H)，2. 09 2. 28 (m, 2H)，2. 74 (t, 2H, J = 5. 6Hz，2 ‘ -CH2)，3. 34 (dd, 2H, J1 = 10. 9Hz, J2 = 5. 0Hz, 1' -CH2)，3· 60 3· 65 (m, 1H, C3- β H)，3· 87 (s,4H, -N(CH2) 2)，3· 98
4.03 (m, 1Η, C6- β H)，7· 18 (ddd, 2Η, J1 = 7. 3Hz，J2 = 5· OHz, J3 = 0. 7Ηζ，δ -H, Py)，7. 35 (d, 2Η, J = 7. 8Ηζ, β -H, Py)，7. 53 (s, 1Η, -NH)，7. 63 (td, 2Η, J1 = 7. 6Hz, J2 = 1. 8Ηζ, γ -H, Py)，8. 55 (dd, 2Η, J1 = 4. 7Ηζ，J2 = 0· 7Ηζ，σ -H, Py)；HRMS calcd for C38H56N4O3[M+l]+617. 4431, found 617. 4431.(8)Ν-己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]豬去氧膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = α -OH H，R2 = H，R3 = H，合成方法同實施 例 3 中的(1)，產率 71% ；m. p. 70. 4 72. 3°C ·其鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3371, ν (C = 0) 1642, ν (C = N) 1593cm-1 ；1H NMR(CDCl3) : δ 0· 63 (s，3H，18_CH3)，0· 90 (s，3H，19_CH3)，0· 92 (d，3H，J = 6. 4Hz，21-CH3)，0. 98 1. 20 (m，7H)，1. 21 1. 49 (m，15H)，1. 50 1. 77 (m，7H)，1. 82 1. 96(m，5H)，2· 00 2. 08 (m，2H)，2· 18 2. 23 (m, 1H)，2. 54(t，2H，J = 7. 2Hz，6 ' -CH2)，3. 19(dd，2H，J1 = 13. 3Hz, J2 = 6·7Ηζ，1 ‘ -CH2), 3. 59 3. 63 (m, 1H, C3-β H)，3· 81 (s， 4H, -N (CH2) 2)，4. 02 4· 07 (m, 1Η, C6- β H)，7· 14 (dd，2Η, J1 = 6. 9Hz，J2 = 5· 5Ηζ，δ -H, Py)， 7. 53(d，2H，J = 7. 8Ηζ, β -H, Py) ,7. 66 Ud^HjJ1 = 7. 7Hz, J2 = 1. 7Ηζ, γ-H, Py), 8. 51 (d, 2Η, J = 4. 5Ηζ, σ -H, Py)；HRMS calcd for C42H68N4O3[M+l]+673. 5012，found 673. 5032.(9)Ν_乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α _0Η，具體合成步驟 如下0. 901g(2mmOl)II溶于15mL三氯甲烷和2mL甲醇的混合溶劑中，然后滴加溶于5mL 三氯甲烷的吡啶-2-甲醛0. 642g (6mmol)，21°C下反應3h，之后在冰鹽浴條件下，分批加入 NaHB4O. 076g(2mmol)，于冰鹽浴中反應lh，然后在30°C下反應20h，之后加20ml水淬滅反 應，二氯甲烷萃取(3 X 20ml)，有機相用水、飽和食鹽水各洗一次，無水硫酸鈉干燥，過濾， 減壓蒸去溶劑，快速柱層析分離，洗脫劑二氯甲烷甲醇=20 1和二氯甲烷甲醇= 10 1，得淡黃色產品，產率79%，m. P. 72.0 72. 6°C .其它鑒定數據同(1)。(IO)N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α _0Η，具體合成步驟 如下0. 901g(2mmOl)II溶于15mL 二氯甲烷和2mL甲醇的混合溶劑中，然后滴加溶于5mL 二氯甲烷的吡啶-2-甲醛0. 535g (5mmol)，21°C下反應3h，之后在冰鹽浴條件下，分批加入 KHB4O. 135g(2. 5mmol)，于冰鹽浴中反應lh，然后在10°C下反應20h，之后加20ml水淬滅反 應，二氯甲烷萃取(3X20ml)，有機相用水、飽和食鹽水各洗一次，無水硫酸鈉干燥，過濾， 減壓蒸去溶劑，快速柱層析分離，洗脫劑二氯甲烷甲醇=20 1和二氯甲烷甲醇= 10 1，得淡黃色產品，產率77%，m. P. 72.0 72. 6°C .其它鑒定數據同(1)。實施例4式VII化合物溴化三羰基錸四乙基胺配合物的合成在氮氣保護的條件下，稱取0. 2527g(l. 2mmol)溴化四乙基胺(瑞士 Fluka公司產 品)與0. 2076g(0. 5mmol)溴代五羰基錸(瑞士 Fluka公司產品)，加入溶劑二乙二醇二甲 醚50. OmL，在磁力攪拌的條件下先慢慢加熱到80°C，反應10分鐘后固體完全溶解，再升溫 至120°C反應8小時，此時溶液中有淡黃色固體生成。趁熱過濾，用冷的二乙二醇二甲醚和 無水乙醚洗滌幾次，置于干燥器中干燥。干燥后黃色粉末再用無水乙醇洗滌，過濾，真空干 燥得產物，得0. 3727g淺黃色固體產品，產率為95%。鑒定數據如下IR(KBr) :v(C = 0) 1650，1564cm-1實施例5式V化合物的合成 (I)N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α _0Η，具體合成步驟 如下IOOmg(0. 158mmol)III 溶于 5mL 無水乙醇中，然后加入(Et4N)2 [Re (CO) 3Br3]121mg( 0. 158mmol)，室溫(25°C )下反應lh，減壓旋蒸去溶劑，板層析分離，得98mg，產率70 %， m. ρ· 125. 7 127. 4°C .鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3416, ν (C = 0) 1642, ν (C = N) 1405cm-1 ；1H NMR(500MHz, CD3OD, δ ) :0· 70 (s，3H，18-CH3)，0· 91 (s，3H，19_CH3)，0· 92
0.98 (m, 1H)，1. 05 (d, 3H, J = 6. 3Hz，21-CH3)，1· 10 1. 17 (m, 1H)，1. 22 1. 30 (m, 2H)，
1.33 1. 46 (m, 5H)，1. 51 1. 68 (m, 6H)，1. 71 2. 08 (m, 8H)，2. 20 2. 38 (m, 4H)，3. 32 3. 40 (m, 1H, 3-CH), 3. 75 (t, 2H, J = 7. 1Hz，2，-CH2)，3. 76 3. 78 (s，1H，7-CH)，3. 92 3. 96(m，1H，12-CH)，3. 95(t，2H，J = 4. 3Hz，1，-CH2)，4. 90 5. 06 (m，4H，-N (CH2) 2)， 7. 37 (t, 2H, J = 6. 6Ηζ, δ -CH, Py)，7. 58 (d, 2H, J = 7. 8Ηζ, β -CH, Py)，7. 95 (td, 2H, J1 = 7. 8Hz, J2 = 1. 5Hz, y-CH, Py) ,8. 32 (s, 1H, -NH), 8. 85(d，2H，J = 6. OHz, σ -CH, Py)；13C NMR (125MHz, CD3OD, δ ) 37. 21 (Cl) ,31.5 (C2) , 73. 2 (C3) ,40. 8 (C4), 43. 3(C5)，36· 8(C6)，69· 9(C7)，41· 3 (C8)，28. 2 (C9)，36. 2 (ClO)，29. 9 (Cl 1)，74. 3(C12)， 47. 8(C13) ,43. 5 (C14) , 24. 5 (C15) , 29. 1 (C16) ,48. 4(C17)，13. 3 (C18) ,23. 5 (C19)， 36. 9(C20) , 18. 1 (C21) ,34. 4(C22) ,33. 5 (C23) , 177. 7 (C24) ,43. 3 (Cl，) ,69. 4(C2'), 68. 9 (2C, PyCH2)，162. 2 (2C, Py- α C)，127. 3 (2C, Py- β C)，142. 0 (2C, Py- γ C)，125. 0 (2C, Py- δ C)，153. 4 (2C, Py- σ C)，197. 4 (3C, fac-Re (CO) 3) ·元素分析結果計算值[C41H56N4O7ReBr· 0. 5CH2C12]，C 48. 61 ；H 5. 60 ；N 5. 46 ；測 定值，C48. 46 ；H 5. 56 ；N 5. 61。HPLC結果見圖1，測試條件與實施例6中(2)中的條件相同。(2) N-己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α-OH 時，合成方法同 實施例 5 中的(1)，產率75%，111.口· 137. 6 138. 3°C .鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3436, ν (C = 0) 1634，ν (C = N) 1442cm-1 ；
1H NMR (CD3OD, 500ΜΗζ) δ :0· 71 (s，3Η，18_CH3)，0· 90 (s，3Η，19_CH3)，0· 92
0.98 (m, 1H)，1. 03 (d, 3H, J = 6. 5Hz，21_CH3)，1. 05 1. 13 (m, 1H)，1. 21 1. 65 (m, 19H)，
1.66 1. 98 (m, 10H)，2. 08 2. 13 (m, 1H)，2. 20 2. 30 (m, 3H)，3. 20 (t, 2H, J = 6. 7Hz, 6 ‘ -CH2)，3. 33 3. 39 (m, 1H, 3-CH)，3. 78 (t, 2H, J = 2. 4Hz, 1 ‘ -CH2)，3. 79 3. 81 (m, 1H, 7-CH), 3. 95 (br s，1H，12-CH)，4. 83 4.91(m，4H，-N(CH2)2)，7. 37 (t，2H，J1 = 6. 6Hz, δ -CH,Py) ,7. 58(d，2H，J = 7. 8Hz, β -CH,Py) ,7. 94 UcI^HjJ1 = 7. 8Hz, J2 = 1. 5Hz, y-CH, Py), 7. 98 (br s，1H，-NH)，8. 85 (d，2H，J = 5. 5Hz，σ -CH, Py)；13C NMR(CD3OD, 125MHz) δ :37. 2 (Cl)，31. 5 (C2)，73. 2 (C3)，40. 8 (C4)，43. 3 (C5)， 36. 8 (C6)，72. 1 (C7)，41. 3 (C8)，28. 2 (C9)，36. 2 (ClO)，29. 9 (Cll)，74. 3 (C12)，47. 8 (C13)， 43. 5 (C14) , 24. 5 (C15) , 29. 0(C16) ,48. 4(C17)，13. 3 (C18) ,23. 5 (C19) ,37. 2 (C20)，
18.1 (C21), 34. 6 (C22), 33. 8 (C23), 177. 1 (C24), 40. 4 (Cl ‘ ), 30. 5 (C2 ‘ ), 26. 6 (C3 ‘)， 27. 7(C4 ‘ ) ,27. 9(C5 ‘ ) ,69. 3(C6 ‘ ), 69. 1 (2C, PyCH2), 162. 5 (2C, Py- α C), 127. 2 (2C, Py-β C)，141. 9 (2C, Py- γ C)，124. 9 (2C, Py- δ C)，153. 4(2C, Py- σ C)，197. 6 (3C, fac-Re (CO) 3)；元素分析結果計算值[C45H64N4O7ReBr· 2CH2C12]，C 46. 69% ；H 5. 66% ;N 4. 63%； 測定值，C 46. 79% ；H 5. 26% ；N 5. 03% 0HPLC結果見圖3，測試條件與實施例6中(2)中的條件相同。(3)N_乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]鵝去氧膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = LR1 = H，R2 = α-0H，R3 = H，合成方法同實施例 5 中的(1)，產率 76%, m-p. 166. 8 168. 6°C ·鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3316, ν (C = 0)2030, ν (C = 0) 1916，ν (C = 0) 1646cm-1 ；1H NMR (CD3OD) δ 0· 68 (s，3H，18_CH3)，0· 92 (s，3H，19_CH3)，0· 99 (d，3H，J =
6.5Hz，21-CH3)，1. 03 1. 13 (m，1H)，1. 15 1. 22 (m，2H)，1. 28 1. 39 (m，7H)，1. 41 1. 56 (m, 6H)，1. 57 1. 67 (m, 2H)，1. 71 1. 78 (m, 1H)，1. 82 1. 89 (m, 4H)，1. 90 2. 01 (m, 3H), 2. 18 2. 36 (m, 3H), 3. 33 3. 40 (m, 1H，3-CH)，3. 74(t，2H，J = 7. OHz, 2 ‘ -CH2)， 3.72 3. 79 (s，1H，7—CH)，3. 94 (t，2H，J = 7. IHz，1 ‘ -CH2)，4. 90 5. 03 (m，4H，-N (CH2) 2)，
7.37 (t, 2H, J = 6. 5Ηζ, δ -CH, Py)，7. 56 (d, 2H, J = 7. 9Ηζ, β -CH, Py)，7. 94 (t, 2H, J = 7. 8Hz，y -CH, Py)，8. 85 (d, 2H, J = 5. 5Hz，σ -CH, Py)；13C NMR(CD3OD) δ 37. 2 (Cl) , 31. 7 (C2) , 73. 2 (C3) , 40. 8 (C4) , 43. 5 (C5), 36. 5 (C6)，69. 9 (C7) ,41. 1 (C8)，36. 2 (C9)，36. 9 (ClO)，22. 1 (Cl 1) ,41. 4 (C12)，44. 0 (C13)， 51. 9 (C14)，24. 9(C15)，29. 6(C16)，57. 6(C17)，12. 5(C18)，23. 7 (C19)，37. 2 (C20)，
19.2 (C21), 34. 4 (C22), 33. 5 (C23), 177. 6 (C24), 44. 0 (Cl ‘ ) ,69. 3(C2 ‘ ) ,68. 9(2C, PyCH2)，162. 2 (2C, Py- α C)，127. 3 (2C, Py- β C)，142. 0 (2C, Py- γ C)，124. 9 (2C, Py- δ C)， 153. 4 (2C, Py- σ C)，197. 4 (3C, fac-Re (CO) 3)；元素分析結果計算值[C41H56N4O6ReBr· 1/2CH2C12]，C 49. 37 ；H 5. 69，N5. 55 ；測定 值，C 49. 30，H 6. 02，N 5. 53.(4)N_己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]鵝去氧膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，R1 = H，R2 = α-0H，R3 = H，合成方法同實施例 5中的(1)，產率 78%，m. ρ· 213. 2 215. 4°C .鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3419, ν (C = 0)2026, ν (C = 0) 1916，ν (C = 0) 1650cm-1 ；1H NMR(CD3OD) δ 0· 68 (s，3H，18_CH3)，0· 91 (s，3H，19_CH3)，0· 92 0· 96 (m，1H)，
0.97(d，3H，J = 6. 5Hz，21-CH3)，1. 06 1. 21(m，3H)，1. 23 1. 38 (m, 6H)，1· 41 1. 62 (m, 14H), 1. 66 2. 02(m，10H)，2· 08 2. 14 (m，1H)，2. 20 2. 29 (m，2H)，3. 19 (t，2H，J = 6. 5Hz，6 ‘ -CH2)，3. 30 3. 40 (m，1H，3-CH)，3. 78 3. 80 (m，2H，1 ‘ -CH2)，3.81 3.83 (m， 1H，7-CH)，4· 83 4· 89 (m，4Η，-N(CH2) 2)，7· 37 (t，2Η，J = 6. 7Hz, δ -CH, Py) ,7. 56 (d, 2H, J = 7. 9Hz, β -CH, Py), 7. 94(td,2H, J1 = 7. 8Hz, J2 = 1. 4Hz, y-CH, Py) ,8. 85 (d, 2H, J = 5. 4Hz, σ -CH, Py) ； 13C 匪R (CD3OD) δ 37. 2 (Cl)，31. 7 (C2)，73. 1 (C3)，40. 4 (C4)， 41. 4(C5)，36. 2(C6)，72· 2 (C7)，40. 8 (C8)，34. 5 (C9)，36. 8 (ClO)，22. 1 (Cll) ,41. 1 (C12)，
43.5(C13)，51· 8 (C14)，24. 9 (C15)，29. 6 (C16) , 57. 7 (C17)，12. 5 (C18) , 23. 7 (C19)，
36.5 (C20), 19. 2 (C21), 34. 4 (C22), 33. 7 (C23), 177. 6 (C24), 44. 0 (Cl ' )，30. 6 (C2 ')， 26. 5(C3' ) ,27. 7(C4' ) ,27. 9(C5' ) ,69. 3(C6' ), 69. 1 (2C, PyCH2), 162. 5 (2C, Py- α C), 127. 2 (2C, Py- β C)，141. 9 (2C, Py- y C)，124. 9 (2C, Py- δ C)，153. 5 (2C, Py- σ C)，197. 5 (3C, f ac-Re (CO) 3)；元素分析結果計算值[C45H64N4O6ReBr· 3/2CHC1J，C 48. 54，H 5. 86，N4. 87 ；測定 值，C 48. 11，H 5. 69，N 5. 21.HPLC結果見圖5，測試條件與實施例6中(2)中的條件相同。(5)N_乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]熊去氧膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = LR1 = H，R2 = β _0H，R3 = H，合成方法同實施例 5 中的(1)，產率 73%，m. ρ· 226. 7 228. 3°C .鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3319, ν (C = 0)2026, ν (C = 0) 1920, ν (C = 0) 1650cm-1 ；1H NMR (CD3OD) δ 0· 70 (s，3H，18_CH3)，0· 96 (s，3H，19_CH3)，0· 99 (d，3H，J =
6.5Hz，21-CH3)，1. 01 1. 05 (m，1H)，1. 08 1. 38 (m，10H)，1. 39 1. 49 (m,6H), 1. 50
1.61 (m, 4H)，1. 77 1. 90 (m, 5H)，2. 01 2. 07 (m, 1H)，2. 15 2. 22 (m, 1H)，2. 31 2. 37 (m, 1H)，3. 40 3. 50 (m，2H，3-CH and 7_CH)，3· 74 (t，2H，J = 7. OHz，2 ' -CH2)，3· 94 (t，2Η， J = 7. IHz，1' -CH2)，4. 90 5. 05 (m，4H，-N (CH2) 2)，7. 37 (t，2H，J = 6. 6Hz，δ -CH, Py),
7.57(d，2H，J = 8. OHz，β -CH, Py) ,7. 94 UcI^HjJ1 = 7. 8Hz, J2 = 1. 4Ηζ, γ-CH, Py, 8. 85 (d, 2Η, J = 5. 4Ηζ, σ -CH, Py) ； 13C 匪R (CD3OD) : δ 38. 3 (Cl)，31. 3 (C2)，72. 4 (C3)，38. 9 (C4)，
44.3(C5)，36. 4(C6)，72. 3 (C7)，41. 0 (C8)，35. 5 (C9)，36. 8 (ClO)，22. 7 (Cl 1)，41. 9 (C12)， 44. 8(C13)，56. 9 (C14)，28. 2 (C15)，30. 0 (C16) , 57. 8 (C17)，12. 9 (C18) , 24. 2 (C19)，
37.1 (C20), 19. 3 (C21), 34. 4 (C22), 33. 5 (C23), 177. 6 (C24), 45. 1 (Cl ' ) ,69. 9(C2 ')， 68. 9 (2C, PyCH2)，162. 2 (2C, Py- α C)，127. 3 (2C, Py- β C)，141. 9 (2C, Py- γ C)，124. 9 (2C, Py- δ C)，153. 4 (2C, Py- σ C)，197. 3 (3C, fac-Re (CO) 3) ；Anal. Calcd for found元素分析結果計算值[C41H56N4O6ReBr· 3/2CH2Cl2]，C 46. 64，H 5. 43，Ν5· 11 ；測定 值，C 46. 32，H 5. 88，N 5. 01.(6) N-己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]熊去氧膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成
其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 3，隊=H，R2 = β-OH，R3 = H，合成方法同實施例 5 中的(1)，產率 65%, m. ρ· 225. 6-226. 5°C ·鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3416, ν (C = 0)2026, ν (C = 0) 1920, ν (C = 0) 1642cm-1 ；1H NMR (CD3OD) δ 0· 71 (s，3H，18_CH3)，0· 95 (s，3H，19_CH3)，0· 97 (d，3H，J = 6. 6Hz，21-CH3)，1. 01 1. 08 (m, 2H)，1· 10 1. 33 (m, 7H)，1· 36 1. 44 (m, 11H)，1. 51 1. 62(m，6H)，1. 78 2. 10 (m, 10H) ,2. 21 2. 25 (m, 1H)，3. 20(t，2H，J = 6. 8Hz,6' -CH2)， 3.42 3. 51(m，2H，3-CH and 7-CH)，3. 73 3. 82 (m，2H，1 ‘ -CH2), 4. 83 4. 87 (m， 4H, -N(CH2)2) ,7. 36(t，2H，J = 6. 5Ηζ, δ -CH, Py), 7. 55(dd，2H，J1 = 7. 9Hz, J2 = 2. 5Ηζ, β -CH, Py) ,7. 93 Ud^HjJ1 = 7. 8Hz, J2 = 1. 4Ηζ, γ-CH, Py) ,8. 85(d，2H，J = 5. 4Ηζ, σ -CH, Py) ； 13C NMR (CD3OD) : δ 38. 9 (Cl)，31. 4 (C2)，72. 4 (C3)，40. 4 (C4)，44. 3 (C5)，36. 4 (C6)， 72. 3(C7)，41· 0(C8)，35· 5(C9)，37· 2(C10)，22· 7(C11)，41· 9(C12)，44· 8(C13)，56· 9(C14)， 28. 3(C15)，30. 0(C16)，57. 8(C17)，12. 9 (C18)，24. 2 (C19)，38. 3 (C20)，19. 3 (C21)，
34.5 (C22), 33. 8 (C23), 177. 1 (C24), 45. 1 (Cl ‘ )，30. 6 (C2 ‘ )，26. 5 (C3 ‘ ) ,27. 7(C4')， 27. 9(C5 ‘ ) ,72. 2(C6 ‘ ), 69. 1 (2C, PyCH2), 162. 5 (2C, Py- α C), 127. 2 (2C, Py- β C), 141. 9 (2C, Py- γ C)，124. 9 (2C, Py- δ C)，153. 5 (2C, Py- σ C)，197. 9 (3C, fac-Re (CO) 3)；元素分析結果計算值[C45H64N4O6ReBr],C 52. 82，H 6. 31，N 5. 47 ；測定值，C 52. 44，H 6. 17，N 5. 56.(7)N_乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]豬去氧膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = LR1 = α-0H，R2 = H，R3 = H，合成方法同實施例 5 中的(1)，產率 68%，m. ρ· 220. 4 222. 1°C .鑒定數據如下IR(KBr) :v (O-H) 3319, ν (C = 0)2030, ν (C = 0) 1916，ν (C = 0) 1650cm-1 ；1H NMR (CD3OD) δ 0· 68 (s，3H，18_CH3)，0· 92 (s，3H，19_CH3)，0· 99 (d，3H，J = 6. 4Hz，21-CH3)，1. 02 1. 26 (m，7H)，1. 27 1. 50 (m，10H)，1. 56 1. 65 (m，4H)，1. 73 1. 92(m，4H)，1. 94 2. 03 (m，1H)，2. 18 2. 28 (m，1H)，2. 30 2. 38 (m，1H)，3. 49 3. 53 (m, 1H, 3_CH)，3. 75 (t，2H，J = 7. IHz，2 ' -CH2)，3. 94 (t，2H，J = 6. 7Hz，1 ' -CH2)， 3.97 4.02(m，lH，6-CH)，4. 90 5. 05 (m，4H，-N (CH2) 2)，7. 37 (t，2H，J = 6. 6Hz，δ -CH, Py)，7. 56(t，2H，J = 7. 7Hz，β -CH, Py)，7. 94 (td，2H，J1 = 7. 8Hz，J2 = 1. 5Hz，y-CH, Py) ,8. 85(d，2H，J = 5. 5Hz, σ -CH, Py ； 13C 匪R (CD3OD) δ 36. 8 (Cl)，30. 3 (C2)，72. 7 (C3)，
35.9(C4)，44. 3(C5)，69· 9(C6)，36· 5 (C7)，33. 4 (C8)，34. 3 (C9)，37. 1 (ClO) ,22. 2 (Cll)， 37. 2 (C12)，41. 6(C13)，50. 2(C14)，24. 4(C15)，25. 6(C16)，57. 7 (C17)，12. 8 (C18)， 19. 3 (C19)，36. 8 (C20)，19. 2 (C21)，29. 6 (C22) ,31. 4 (C23)，177. 6 (C24)，44. 3 (Cl ‘)， 57. 9 (C2 ‘ )，68. 9 (2C, PyCH2)，162. 2 (2C, Py- α C)，127. 3 (2C, Py- β C)，142. 0 (2C, Py- γ C)， 124. 9 (2C, Py- δ C)，153. 4 (2C, Py- σ C)，197. 5 (3C, fac-Re (CO) 3)；元素分析結果計算值[C41H56N4O6ReBr· 2CH2C12]，C 45. 43，H 5. 31，N4. 92 ；測定 值，C 45. 21，H 5. 51，N 4. 97.(8)N-己胺基[二(2-亞甲基吡啶)]豬去氧膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = LR1 = H，R2 = α-0H，R3 = H，合成方法同實施例 5
23中的(1)，產率 73%，m. ρ· 214. 8 215. 6°C .鑒定數據如下IR(KBr) ν (O-H) 3428, ν (C = 0)2030, ν (C = 0) 1924, ν (C = 0) 1634cm-1 ；1H NMR (CD3OD) δ 0· 67 (s，3H，18_CH3)，0· 91 (s，3H，19_CH3)，0· 95 (d，3H，J = 8. 4Hz,21-CH3)，1. 12 1. 22 (m, 7H)，1· 23 1. 57 (m, 14H)，1· 58 1. 68 (m, 7H)，1. 75 1. 82 (m, 2H)，1. 84 2. 03 (m, 5H)，2. 07 2. 14 (m, 1H)，2. 20 2. 26 (m, 1H)，2. 02 2. 11 (m, 1H)，3. 20 (t，2H，J = 6. 9Hz，6 ‘ -CH2)，3. 48 3. 53 (m, 1H, 3-CH)，3. 78 3. 81 (m，2H， 1 ‘ -CH2)，3. 98 4. 03 (m，1H，6-CH)，4. 84 4. 88 (m, 4H, -N (CH2) 2)，7. 36 (t，2H，J = 6. 3Hz， δ -CH,Py) ,7. 55(d，2H，J = 7. 9Ηζ, β -CH,Py) ,7. 94 UcI^HjJ1 = 7. 8Hz, J2 = 1. 4Ηζ, γ-CH, Py)，8· 86(d，2H，J = 5. 4Ηζ, σ -CH, Py) ； 13C 匪R (CD3OD) δ 37. 1 (Cl)，30. 3 (C2)，72. 7 (C3)， 35. 9 (C4)，44. 3 (C5)，72. 2 (C6)，36. 5 (C7)，33. 7 (C8)，34. 5 (C9)，37. 2 (ClO)，22. 2 (Cll)， 37. 2 (C12)，41. 6(C13)，50. 2(C14)，24. 4(C15)，25. 6(C16)，57. 7 (C17)，12. 8 (C18)， 19. 3 (C19)，40. 4 (C20)，19. 2 (C21)，29. 5 (C22) ,31. 4 (C23)，177. 0 (C24)，57. 9 (Cl ‘)， 30. 6(C2 ‘ ) ,26. 5(C3 ‘ )，27. 7 (C4 ‘ )，27. 9 (C5 ‘ )，68.9(C6' )，69. 1 (2C，PyCH2)， 162. 5 (2C, Py- α C)，127. 2 (2C, Py- β C)，141. 9 (2C, Py- γ C)，124. 9 (2C, Py- δ C)，153. 5 (2C, Py- σ C)，197. 6 (3C, fac-Re (CO) 3)；元素分析結果計算值[C45H64N4O6ReBr],C 52. 82，H 6. 30，N 5. 47 ；測定值，C 52. 61，H 6. 00，N 5. 64.(9) N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = 1，R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α -OH,具體合成步驟 如下IOOmg (0. 158mmol)化合物III溶于5mL無水甲醇中，然后加入(Et4N) 2 [Re (CO) 3Br3] 3 02mg(0. 395mmol)，15°C下反應lh，減壓旋蒸去溶劑，板層析分離，產率69 %，m. p. 125. 7 127. 4°C.其他鑒定數據同(1)。(IO)N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺三齒三羰基錸鰲合物的合成其中，A表示-(CH2CH2)x-, χ = IjR1 = HjR2 = α -OH, R3 = α _0Η，具體合成步驟如 下IOOmg (0. 158mmol)化合物 III 溶于 5mL 乙腈中，然后加入(Et4N)2 [Re (CO) 3Br3] 194mg (0. 253mmol)，60°C下反應lh，減壓旋蒸去溶劑，板層析分離，產率69%,m. p. 125. 7 127. 4°C · 其他鑒定數據同(1)。實施例699mTc對式III化合物進行的放射性化學合成1. fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 的放射化學合成 (a) NaBH4, Na2CO3,酒石酸鉀鈉，30min ；fac-[99mTc (CO)3 (H2O)3] +的合成主要是按照文獻(Journal of Pharmaceuticaland Biomedical Analysis，2007，43 1576-1579.)的方法，略有改動。a. 15. Omg KNaC4H4O6 ·4Η20，4. Omg無水Na2CO3 6. Omg NaBH4,混合于 IOmL 的小瓶中。
b.向其中通入充CO 30min。c.向上述小瓶中加入l_2ml新淋洗的99mTc04_溶液(IOmCi)，70_80°C水浴30min， 冰水浴冷卻，即得 fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] +。2.采用fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] +對N-乙胺基[二(2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺配 體進行放射性標記的步驟取fac-["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 溶液 0. 4ml (1. 2mci)，加入 2 X l(T3mol/L 式 III 化合物 N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的乙醇溶液1.2ml，用封口膜封好，置于孵育器 上，控溫80°C，轉速1300轉/分，時間30min，然后采用高效液相色譜(HPLC) [HPLC系統 Merck-Hitachi L-7000 system (連接有 UV 檢測器和 EG&G Berthold LB 508 放射性檢測 器)，色譜柱為C-18ec反相柱，Φ3πιπι*250πιπι，5μπι;ΗΡΙΧ洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶 液B 0. 05ΜΤΕΑΡ 三乙胺磷酸鹽緩沖溶液，ρΗ = 2. 76)梯度:0-3min, 15% A,3-6min, 15-25% A,6-9min,25-35% A, 9-22min, 35-98 % A, 22-25min, 98-25 % A, 25-30min, 25-15 % A ；在流 速為lmL/min條件下進行分析、分離，分離后放射化學純度達95%。用放射性監測器測得 放射性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺锝配合物在HPLC于同樣條件下保留時 間為23.56min，如圖2所示。HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液B :TEAP三乙胺磷 酸鹽緩沖溶液，PH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% Α) ；3-6min, 15-25% A ；6-9min, 25-35% A ； 9-22min, 35-98% A ；22-25min, 98-25% A ；25-30min, 25-15% A.流速 Iml mirT1· HPLC 圖譜 見圖2。式III中的其它化合物的放射性化學合成與上述方法類似。實施例799mTc對式III化合物進行的放射性化學合成1. fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 的放射化學合成方法和條件均與實施例6中的(1)相同。2.采用fac-["mTc (CO) 3 (H2O) 3]+對N-乙胺基[二(2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺配 體進行放射性標記的步驟取fac-["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 溶液 0. 4ml (1. 2mci)，加入 l(T3mol/L 化合物 III N-乙 胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的二甲亞砜溶液1.2ml，用封口膜封好，置于孵育器 上，控溫65°C，轉速1000轉/分，時間30min，然后采用高效液相色譜(HPLC) [HPLC系統 Merck-Hitachi L-7000 system (連接有 UV 檢測器和 EG&G Berthold LB 508 放射性檢測 器)，色譜柱為C-18ec反相柱，Φ3mm*250mm, 5 μ m ；HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液 B 0. 05MTEAP三乙胺磷酸鹽緩沖溶液，ρΗ = 2. 76)梯度:0-3min, 15% A, 3-6min, 15-25% A, 6-9min, 25-35% A, 9-22min, 35-98 % A, 22-25min, 98-25 % A, 25-30min, 25-15 % A ；在流速 為lmL/min條件下進行分析、分離，分離后放射化學純度達95%。用放射性監測器測得放射 性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺锝配合物在HPLC于同樣條件下保留時間為 23. 56min，如圖2所示。HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液B :TEAP三乙胺磷酸鹽緩沖 溶液，PH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% Α) ；3-6min, 15-25% A ；6-9min, 25-35% A ；9_22min， 35-98% A ；22-25min,98-25% A ；25-30min, 25-15% A. T 流速 Iml mirT1·式 II 中的其它化 合物的放射性化學合成與上述方法類似。實施例S99mTc對式III化合物進行的放射性化學合成1. fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 的放射化學合成方法和條件均與實施例6中的(1)相同。
25
2.采用fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] +對N-乙胺基[二(2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺配 體進行放射性標記的步驟取fac-[99mTc (CO)3 (H2O)3]+溶液 0.4ml (1.2mci)，加入 l(T3mol/L 化合物 IIIN-乙 胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的乙腈溶液1.2ml，用封口膜封好，置于孵育器上， 控溫85°C，轉速2000轉/分，時間30min，然后采用高效液相色譜(HPLC) [HPLC系統 Merck-Hitachi L_7000system(連接有 UV 檢測器和 EG&G Berthold LB 508 放射性檢測 器)，色譜柱為C-18ec反相柱，Φ3πιπι*250πιπι，5μ m ；HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液 B 0. 05M TEAP 三乙胺磷酸鹽緩沖溶液，pH = 2. 76)梯度:0_3min，15% A，3_6min，15-25% A,6-9min,25-35% A, 9-22min, 35-98 % A, 22-25min, 98-25 % A, 25-30min, 25-15 % A ；在流 速為lmL/min條件下進行分析、分離，分離后放射化學純度達95%。用放射性監測器測得 放射性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺锝配合物在HPLC于同樣條件下保留時 間為23.56min，如圖2所示。HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液B :TEAP三乙胺磷 酸鹽緩沖溶液，PH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% Α) ；3-6min, 15-25% A ；6-9min, 25-35% A ； 9-22min, 35-98 % A ；22_25min，98-25 % A ；25_30min，25-15 % A.流速 ImlmirT1.式 III 中 的其它化合物的放射性化學合成與上述方法類似。上述未特別說明的原料或試劑均為常規市售產品。實施例9"mTc對式III化合物進行的放射性化學合成1. fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 的放射化學合成方法和條件均與實施例6中的(1)相同。2.采用fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] +對N-乙胺基[二(2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺配 體進行放射性標記的步驟取fac-[99mTc (CO)3 (H2O)3]+溶液 0.4ml (L2mci)，加入 l(T3mol/L 化合物 IIIN-乙 胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的二甲亞砜溶液1.2ml，用封口膜封好，置于孵育器 上，控溫65°C，轉速1000轉/分，時間30min，然后采用高效液相色譜(HPLC) [HPLC系統 Merck-Hitachi L-7000 system(連接有 UV 檢測器和 EG&G Berthold LB 508 放射性檢測 器)，色譜柱為C-18ec反相柱，Φ3mm*250mm, 5 μ m ；HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液 B 0. 05MTEAP三乙胺磷酸鹽緩沖溶液，pH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% A, 3-6min, 15-25% A, 6-9min, 25-35% A, 9-22min, 35-98 % A, 22-25min, 98-25 % A, 25-30min, 25-15 % A ；在流速 為lmL/min條件下進行分析、分離，分離后放射化學純度達95%。用放射性監測器測得放射 性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺锝配合物在HPLC于同樣條件下保留時間為 23. 56min，如圖2所示。HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液B :TEAP三乙胺磷酸鹽緩沖 溶液，PH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% Α) ；3-6min, 15-25% A ；6-9min, 25-35% A ；9_22min， 35-98% A ；22-25min,98-25% A ；25-30min, 25-15 % A. T 流速 Iml mirT1·式 III 中的其它 化合物的放射性化學合成與上述方法類似。實施例IO99mTc對式III化合物進行的放射性化學合成1. fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 的放射化學合成方法和條件均與實施例6中的(1)相同。2.采用fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] +對N-乙胺基[二(2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺配 體進行放射性標記的步驟
取fac-[99mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 溶液 0. 4ml (1. 2mci)，加入 l(T3mol/L 化合物 III N-乙 胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的乙腈溶液1.2ml，用封口膜封好，置于孵育器上， 控溫85°C，轉速2000轉/分，時間30min，然后采用高效液相色譜(HPLC) [HPLC系統 Merck-Hitachi L-7000 system (連接有 UV 檢測器和 EG&G Berthold LB 508 放射性檢測 器)，色譜柱為C-18ec反相柱，Φ3πιπι*250πιπι，5μ m ；HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液 B 0. 05M TEAP 三乙胺磷酸鹽緩沖溶液，pH = 2. 76)梯度:0_3min，15% A，3_6min，15-25% A,6-9min,25-35% A, 9-22min, 35-98 % A, 22-25min, 98-25 % A, 25-30min, 25-15 % A ；在流 速為lmL/min條件下進行分析、分離，分離后放射化學純度達95%。用放射性監測器測得 放射性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺锝配合物在HPLC于同樣條件下保留時 間為23.56min，如圖2所示。HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液B :TEAP三乙胺磷 酸鹽緩沖溶液，PH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% Α) ；3-6min, 15-25% A ；6-9min, 25-35% A ； 9-22min, 35-98 % A ；22_25min，98-25 % A ；25_30min，25-15 % A.流速 ImlmirT1.式 III 中 的其它化合物的放射性化學合成與上述方法類似。上述未特別說明的原料或試劑均為常規市售產品。實施例Il99mTc對式III化合物進行的放射性化學合成1. fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 的放射化學合成方法和條件均與實施例6中的(1)相同。2.采用fac-["mTc (CO) 3 (H2O) 3]+對N-乙胺基[二 (2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺配 體進行放射性標記的步驟取fac-[99mTc (CO)3 (H2O)3]+溶液 0.4ml (1.2mci)，加入 l(T3mol/L 化合物 IIIN-乙 胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的二甲亞砜溶液2. 4ml，用封口膜封好，置于孵育器 上，控溫85°C，轉速2000轉/分，時間30min，然后采用高效液相色譜(HPLC) [HPLC系統 Merck-Hitachi L-7000 system(連接有 UV 檢測器和 EG&G Berthold LB 508 放射性檢測 器)，色譜柱為C-18ec反相柱，Φ3mm*250mm, 5 μ m ；HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液 B 0. 05MTEAP 三乙胺磷酸鹽緩沖溶液，pH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% A, 3-6min, 15-25% A, 6-9min, 25-35% A, 9-22min, 35-98 % A, 22-25min, 98-25 % A, 25-30min, 25-15 % A ；在流速 為lmL/min條件下進行分析、分離，分離后放射化學純度達95%。用放射性監測器測得放射 性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺锝配合物在HPLC于同樣條件下保留時間為 23-56min，如圖2所示。HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液B :TEAP三乙胺磷酸鹽緩沖 溶液，PH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% Α) ；3-6min, 15-25% A ；6-9min, 25-35% A ；9_22min， 35-98% A ；22-25min,98-25% A ；25-30min, 25-15% A.流速 Iml mirT1·式 III 中的其它化 合物的放射性化學合成與上述方法類似。上述未特別說明的原料或試劑均為常規市售產品。實施例1299mTc對式III化合物進行的放射性化學合成1. fac- ["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 的放射化學合成方法和條件均與實施例6中的(1)相同。2.采用fac-["mTc (CO) 3 (H2O) 3]+對N-乙胺基[二 (2_亞甲基吡啶)]膽酸酰胺配 體進行放射性標記的步驟取fac-["mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 溶液 0. 4ml (1. 2mci)，加入 l(T4mol/L 化合物 III N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺的乙腈溶液1.2ml，用封口膜封好，置于孵育器上， 控溫85°C，轉速2000轉/分，時間30min，然后采用高效液相色譜(HPLC) [HPLC系統 Merck-Hitachi L-7000 system (連接有 UV 檢測器和 EG&G Berthold LB 508 放射性檢測 器)，色譜柱為C-18ec反相柱，Φ3πιπι*250πιπι，5μ m ；HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液 B 0. 05M TEAP 三乙胺磷酸鹽緩沖溶液，pH = 2. 76)梯度:0_3min，15% A，3_6min，15-25% A,6-9min,25-35% A, 9-22min, 35-98 % A, 22-25min, 98-25 % A, 25-30min, 25-15 % A ；在流 速為lmL/min條件下進行分析、分離，分離后放射化學純度達95%。用放射性監測器測得 放射性N-乙胺基[二(2-亞甲基吡啶)]膽酸酰胺锝配合物在HPLC于同樣條件下保留時 間為23.56min，如圖2所示。HPLC洗脫梯度(溶液A 無水甲醇；溶液B :TEAP三乙胺磷 酸鹽緩沖溶液，PH = 2. 76)梯度:0-3min, 15% Α) ；3-6min, 15-25% A ；6-9min, 25-35% A ； 9-22min, 35-98 % A ；22_25min，98-25 % A ；25_30min，25-15 % A.流速 ImlmirT1.式 III 中 的其它化合物的放射性化學合成與上述方法類似。
上述未特別說明的原料或試劑均為常規市售產品。
權利要求
一種如式VI所示的標記膽汁酸衍生物；其中，A為 (CH2CH2)x 或者 (CH2CH2O)m(CH2CH2)n ，x＝1～4；m＝1～3；n＝1～3；R1＝H，R2＝α OH，R3＝α OH；或者R1＝H，R2＝α OH，R3＝H；或者R1＝H，R2＝β OH，R3＝H；或者R1＝α OH，R2＝H，R3＝H。F2009100517676C0000011.tif
2.如權利要求1所述的標記膽汁酸衍生物，其特征在于x = 1或3 ；或者m = 1 ；或者
3.如權利要求1所述的化合物VI的制備方法，其特征在于包含下列步驟用三水合三 羰基99m锝對化合物III進行放射性標記，即可；其中，A、X、m、η、R1, R2和R3的定義均同權利要求1或2所述。
4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于化合物VI由下列方法制得有機溶劑 中，在孵育器中，將三水合三羰基99m锝和化合物III反應，即可；其中，所述的有機溶劑為二 甲亞砜、甲醇、丙酮、乙腈和乙醇中的一種或多種；所述的三水合三羰基99m锝的放射性活度 與化合物III的摩爾量之間的比例為Imci :lX10_4mmol Imci :2X10_3mmol ；所述的孵育 器的轉速為1000 2000轉/分；所述的反應的溫度為65 85°C;所述的反應的時間以檢 測反應完全為止；在反應完成后，用放射性HPLC進行分離提純。
5.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于所述的化合物III由下列方法制得有機溶劑中，將化合物II和化合物IV進行縮合反應，即可； 其中，Α、χ、m、η、R1, R2和R3的定義均同權利要求1或2所述。
6.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于所述的化合物III由下列方法制得 鹵代烷烴溶劑中，在堿性催化劑的作用下，將化合物II和化合物IV進行縮合反應，即可； 其中，所述的鹵代烷烴為1，2-二氯乙烷、二氯甲烷和三氯甲烷中的一種或多種；所述的化 合物IV與化合物II的摩爾比為2.1 1 3 1 ；所述的堿性催化劑為三乙酰氧基硼氫 化鈉、硼氫化鈉和硼氫化鉀中的一種或多種；所述的堿性催化劑與化合物IV的摩爾比為 1 1.2 1 3;所述的反應的溫度為10°C 30°C;所述的反應的時間以檢測反應完全為 止。
7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于在所述的反應的體系中還加入甲醇，甲 醇的加入量為將化合物II溶解為止。
8.一種如式V所示的標記膽汁酸衍生物VI的參照化合物； 其中，Α、χ、m、η、R1, R2和R3的定義均同權利要求1或2所述。
9.如權利要求8所述的化合物V的制備方法，其特征在于包括下列步驟有機溶劑中， 將化合物III與化合物VII溴化三羰基錸四乙基胺配合物反應，即可； 其中，Α、χ、m、η、R1, R2和R3的定義均同權利要求1或2所述。
10.如權利要求9所述的制備方法，其特征在于所述的有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮 和乙腈中的一種或多種；所述的溴化三羰基錸四乙基胺配合物與化合物III的摩爾比為 1 1 2.5 1 ；所述的反應的溫度為15°C 60°C ；所述的反應的時間以檢測完全為止。
11.一種制備標記膽汁酸衍生物VI的中間體化合物III ； 其中，Α、χ、m、η、R1, R2和R3的定義均同權利要求1或2所述t
12. —種制備標記膽汁酸衍生物VI的中間體化合物II ； 其中，Α、χ、m、η、R1, R2和R3的定義均同權利要求1或2所述，但化合物II不包括A為-(CH2CH2)3", R1 = H，R2 = α -OH, R3 = α -OH 時的具體化合物。
13.如權利要求1所述的標記膽汁酸衍生物VI在制備肝膽顯像藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種如式VI所示的標記膽汁酸衍生物；其中，A為-(CH2CH2)x-或者-(CH2CH2O)m(CH2CH2)n-，x＝1～4，優選1或3；m＝1～3，優選1；n＝1；R1、R2和R3獨自的為氫、α-OH或β-OH。本發明還公開了它的參照化合物、及制備方法和應用。本發明第一次用放射性核素99mTc間接標記了膽汁酸，并且本發明的標記膽汁酸衍生物具有良好的顯像應用前景。
文檔編號C07J43/00GK101891791SQ20091005176
公開日2010年11月24日 申請日期2009年5月22日 優先權日2009年5月22日
發明者張春春, 朱華, 沈玉梅, 黃立梁 申請人:中國科學院上海應用物理研究所