專利名稱：：高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法
技術領域：
：本發明屬于植物化學
技術領域：
，具體涉及從萬壽菊花粒中分離、純化高含量葉黃素酯的方法。
背景技術：
：US4，048，203溶解萬壽菊油樹脂于含有不超過4個碳原子的熱垸醇中，通過冷卻溶液沉淀出葉黃素酯，過濾除去烷醇后再真空干燥，但此法得到的葉黃素酯濃縮物含量只有51%，沒有達到高含量的要求。US6，191,293用烴類溶劑充分浸提萬壽菊花冠(或花)，從而去除植物殘渣，蒸發提取物從而獲得萬壽菊油樹脂，在室溫下通過醇沉得到浸膏。這種方法得到的含油樹脂中葉黃素酯的純度因原料的質量不同而變化較大。CN1，432，567A用丙酮浸提萬壽菊油樹脂，再用丁醇或異丙醇等結晶丙酮的濃縮母液，經過乙醇洗滌最終得到含量較高的葉黃素酯，此方法能夠得到較高純度的葉黃素酯，但收率較低，且沒有解決高純度葉黃素酯的穩定性問題。萬壽菊花粒中通常含有農藥、重金屬和溶劑殘留，通過結晶后仍然將其去除掉，這樣的產品應用于食品藥品中會帶來很多安全上的問題。CN1，872，839A用醇類和正己烷組成的混合溶劑回流溶解萬壽菊油樹脂，降溫結晶后除去萬壽菊油樹脂中醇溶性雜質，將得到的結晶進一步溶解于正己烷中，再降溫結晶，得到的晶體真空干燥去除溶劑，最終得到含量較高的葉黃素酯。此方法運用溶劑量過大，原料與提取溶劑的比例高達1:8，從而降低了其生產設備利用率，最后一步用乙醇淋洗，洗滌不充分，正己烷殘留高，即使真空烘干時實時監測，殘留在產品的正己垸也很難被快速去除掉，且烘干時間越長，產品降解也就越快。
發明內容為解決現有技術中存在的葉黃素酯收率低、農藥殘留和重金屬物質殘留量高，穩定性較差等問題。本發明提供了以下技術方案(1)在207(TC條件下，溶解萬壽菊花粒于正丁烷或丙酮屮，攪拌0.55小時，充分提取其中的有效成分，過濾，得到提取液。(2)為了脫除萬壽菊花粒中的重金屬.農藥殘留和乙氧基喹啉，經過反復實驗，決定加入吸附劑。將步驟(1)中得到的提取液加入吸附劑，在2070。C下攪拌0.55小時并過濾，收集母液。(3)將歩驟(2)中得到的母液真空干燥，脫去溶劑得到濃縮物，從而去除提取花粒時帶入的正丁烷或丙酮。(4)將歩驟(3)中得到的濃縮物溶于異丙醇或丁醇中，207(TC下攪拌0.55小時，形成均一溶液后緩慢降溫至-10l(TC保持618小時后過濾。(5)用低級醇洗滌異丙醇或丁醇結晶過濾得到的濾餅，以除去異丙醇或丁醇和溶于低級醇的雜質，低級醇洗滌后的濾餅加入抗氧化劑，再千燥除去殘留的低級醇，最終得到高純度的葉黃素酯。實踐證明，下述任意一項工藝條件為上選1、步驟(1)所述萬壽菊花粒與正丁烷或丙酮的質量比l:520。2、步驟(2)所述吸附劑選自活性炭、白土、硅藻土、EDTA鈉鹽或上述兩種或兩種以上以任意比例組成的混合物；當吸附劑與萬壽菊花粒的質量比為1:110時為上選。3、步驟(3)所述的濃縮物溶殘小于3wt%。4、步驟(4)所述丁醇為正丁醇、叔丁醇中的一種，濃縮物與異丙醇或丁醇的質量比為1:1.020。5、步驟(5)所述低級醇為甲醇、乙醇中的一種，異丙醇或丁醇結晶過濾得到的濾餅與低級醇的質量比為1:330，抗氧化劑為維生素E、維生素C、維C鈉、維C棕櫚酸酯或上述兩種或兩種以上的抗氧化劑以任意比例混合而成的混合物。6、步驟(5)所述干燥條件為307(TC烘干224小時。本發明專利所述萬壽菊花粒指萬壽菊花經過發酵、壓搾、烘干等工序制成的萬壽菊顆粒。整個制備過程中，全程N2氣保護，使葉黃素酯的降解速率降至最低，使葉黃素酯產品產業化收率提高。本發明的有益效果在于在正丁垸或丙酮提取液中加入吸附劑，并進行過濾，可以有效去除萬壽菊花粒中的葉綠素及花粉粒等雜質，進一步再通過控制濃縮物的溶劑殘留，不僅可以提高最終得到的葉黃素酯產品的含量(總酯含量5高達90wt。/。以上)，還可以避免溶劑交叉，解決葉黃素酯最終收率不高的問題。在醇類溶劑洗滌濾餅后加入抗氧化劑，可以防止葉黃素酯產品在烘干過程中被氧化，實驗證明在葉黃素酯產品中加入適量的抗氧化劑，可以保證其在室溫真空包裝條件下，長時間不變質，葉黃素酯產品還可以制成5%20%的油溶物或粉末，實驗表明，葉黃素酯產品在低含量狀態下更加趨于穩定，制成油溶物或粉末進一步提高了其穩定性。在正丁烷或丙酮溶液中加入吸附劑活性炭、活性白土、凹凸棒土、硅藻土、EDTA鈉鹽或上述兩種或兩種以上以任意比例組成的混合物。可以有效脫除萬壽菊花粒中的農藥殘留和重金屬物質，實驗表明，通過吸附劑處理后獲得的葉黃素酯晶體，各項重金屬指標均符合國際要求。具體實施例方式實施例l稱取ioog總酯含量為4.lwty。的萬壽菊花粒與iooog丙酮混合，于7crc下加熱攪拌0.5小時后過濾，得到丙酮提取液。在丙酮提取液中加入50gEDTA鈉鹽和50g白土，7(TC下攪拌0.5h，過濾，真空脫去丙酮得到濃縮物(控制濃縮物的溶殘必須小于其質量的3%)。加入濃縮物質量10倍的叔丁醇，5CTC下攪拌溶解lh后，緩慢冷卻溶液至l(TC。溶液在l(TC下放置18小吋后，過濾，得到濾餅，與其質量15倍的甲醇混合攪拌洗滌，洗滌次數共三次，每次用固體質量5倍的甲醇。在甲醇充分洗滌后的固體中加入0.5g抗氧化lFU維生素E，3(TC下烘干24h，得到產品15g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為92%，其中全反式葉黃素玉米黃質(摩爾比)二92:6。鉛含量為0.24ppm，重金屬含量為0.28ppm。實施例2稱取100g總酯含量為4.1討％的萬壽菊花粒與2000g丙酮混合，于4(TC下加熱攪拌1.0小時后過濾，得到丙酮提取液。在丙酮提取液中加入15gEDTA鈉鹽、15g凹凸棒土和8g白土，6(TC下攪拌lh，過濾，真空脫去丙酮得到濃縮物(控制濃縮物的溶殘必須小于其質量的3%)。加入濃縮物質量3倍的異丙醇，40°C下攪拌溶解2h后，緩慢冷卻溶液至5°C。溶液在5t:下放置12小時后，過濾，得到濾餅，與其質量9倍的甲醇混合攪拌洗滌，洗滌次數共三次，每次用固體質量3倍的甲醇。在甲醇充分洗滌后的固體中加入0.4g抗氧化劑維生素C鈉鹽，4(TC下烘干16h，得到產品12g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為93%，其中全反式葉黃素玉米黃質(摩爾比)二90:5。鉛含量為0.20ppm，重金屬含量為0.25ppm。實施例3稱取120g總酯含量為4.8wti的萬壽菊花粒與1500g正丁烷混合，于20。C下加熱攪拌5小時后過濾，得到正丁烷提取液。在正丁烷提取液中加入12g白土，3(TC下攪拌4h，過濾，真空脫去正丁烷得到濃縮物(控制濃縮物的溶殘必須小于其質量的3%)。加入濃縮物質量1倍的正丁醇，2(TC下攪拌溶解5h后，緩慢冷卻溶液至(TC。溶液在0。C下放置10小時后，過濾，得到濾餅，與其質量3倍的乙醇混合攪拌洗滌，洗滌次數共三次，每次用固體質量1倍的乙醇。在乙醇充分洗滌后的固體中加入0.8g抗氧化劑維生素E，45"下烘干10h，得到產品13g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為90%，其中全反式葉黃素玉米黃質(摩爾比)二93:5。鉛含量為0.18ppm，重金屬含量為0.33ppm。實施例4稱取100g總酯含量為5.3wt。/。的萬壽菊花粒與800g丙酮混合，于5(TC下加熱攪拌0.5小時后過濾，去除不溶物，得到丙酮提取液。在丙酮提取液中加入20g活性炭和10g白土，50。C下攪拌2h，過濾，真空脫去丙酮得到濃縮物(控制濃縮物的溶殘必須小于其質量的3%)。加入濃縮物質量20倍的叔丁醇，7CTC下攪拌溶解0.5h后，緩慢冷卻溶液至-l(TC。溶液在-l(TC下放置6小時后，過濾，得到濾餅，與其質量30倍的甲醇混合攪拌洗滌，洗滌次數共三次，每次用固體質量10倍的甲醇。在甲醇充分洗滌后的固體中加入1.0g抗氧化劑維生素E，5(TC下烘干8h，得到產品13g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為92%,其中全反式葉黃素玉米黃質(摩爾比)二93:6。鉛含量為O.20ppm，重金屬含量為0.25ppm。實施例5稱取110g總酯含量為5.3wt。/。的萬壽菊花粒與550g正丁烷混合，于3(TC下加熱攪拌3小時后過濾，去除不溶物，得到正丁垸提取液。在正丁烷提取液中加入10g活性炭和30g白土，5(TC下攪拌lh，過濾，真空脫去正丁垸得到濃縮物(控制濃縮物的溶殘必須小于其質量的3%)。加入濃縮物質量5倍的異丙醇，30。C下攪拌溶解3h后，緩慢冷卻溶液至-5°C。溶液在-5。C下放置10小時后，過濾，得到濾餅與其質量30倍的乙醇混7合攪拌洗滌，洗滌次數共三次，每次用固體質量io倍的乙醇。在乙醇充分洗滌后的固體中加入0.6g抗氧化劑維生素C棕櫚酸酯，7(TC下烘干2h，得到產品llg，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為88%,其中全反式葉黃素玉米黃質(摩爾比)=90:4。鉛含量為O.24ppm，重金屬含量為0.30卯m。實施例6稱取110g總酯含量為4.8wty。的萬壽菊花粒與1800g丙酮混合，于6(TC下加熱攪拌1小時后過濾，去除不溶物，得到丙酮提取液。在丙酮提取液中加入8g白土和20gEDTA鈉鹽，2(TC下攪拌5h，過濾，真空脫去丙酮得到濃縮物(控制濃縮物的溶殘必須小于其質量的3%)。加入濃縮物質量15倍的正丁醇，3(TC下攪拌溶解5h后，緩慢冷卻溶液至(TC。溶液在0'C下放置12小時后，過濾，得到濾餅，與其質量3倍的甲醇混合攪拌洗滌，洗滌次數共三次，每次用固體質量1倍的甲醇。在甲醇充分洗滌后的固體中加入0.6g抗氧化劑維生素C鈉鹽，4(TC下烘干8h，得到產品llg，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為90%,其中全反式葉黃素玉米黃質(摩爾比)=91:6。鉛含量為0.16ppm，重金屬含量為0.28卯m。在實施例16中，全程N2氣保護，使葉黃素酯的降解速率降至最低，使葉黃素酯產品產業化收率提高。實施例7本實施例檢測本發明的穩定性成品油穩定性的影響。一、穩定性試驗保存條件40°C，恒溫恒濕加入抗氧化劑后的穩定性實驗數據分光光度檢測總酯含量(wt%)液相面積歸一檢測葉黃素含量(wt%)名稱葉黃素酯葉黃素酯油溶物葉黃素酯葉黃素酯油溶物o個月72.2512.2382.1581.94檢l個月72.6412.0281.9481.96曰期2個月71.8912.3381.7780.774個月72.0612,2982.2082.206個月71.8512.0281.6181.618下表為本發明所述葉黃素酯晶體的污染物限制和檢測報告以及原料萬壽菊花粒的檢測報告-<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>權利要求1.一種高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于該方法包括以下步驟(1)在20～70℃條件下，溶解萬壽菊花粒于正丁烷或丙酮中，攪拌0.5～5小時，充分提取其中的有效成分，過濾，得到提取液；(2)為了脫除萬壽菊花粒中的重金屬.農藥殘留和乙氧基喹啉，經過反復實驗，決定加入吸附劑，將步驟(1)中得到的提取液加入吸附劑，在20～70℃下攪拌0.5～5小時并過濾，收集母液；(3)將步驟(2)中得到的母液真空干燥，脫去溶劑得到濃縮物，從而去除提取花粒時帶入的正丁烷或丙酮；(4)將步驟(3)中得到的濃縮物溶于異丙醇或丁醇，20～70℃下攪拌0.5～5小時，形成均一溶液后緩慢降溫至-10～10℃，保持6～18小時后過濾；(5)用低級醇洗滌異丙醇或丁醇結晶過濾得到的濾餅，以除去異丙醇或丁醇和溶于低級醇的雜質，低級醇洗滌后的濾餅加入抗氧化劑，再干燥除去殘留的低級醇，最終得到高純度的葉黃素酯。2.根據權利要求1所述的高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于其步驟(l)所述萬壽菊花粒與正丁垸或丙酮的質量比為1:520。3.根據權利要求1所述的高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于其步驟(2)所述吸附劑選自活性炭、白土、硅藻土、EDTA鈉鹽或上述兩種或兩種以上的吸附劑以任意比例組成的混合物。4.根據權利要求1或3所述的高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于所述吸附劑與萬壽菊花粒的質量比為1:110。5.根據權利要求1所述的高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于其步驟(3)所述的濃縮物溶殘必須小于3wt%。6.根據權利要求1所述的高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于其步驟(4)所述丁醇為正丁醇、叔丁醇中的一種，濃縮物與異丙醇或丁醇的質量比為1:1.020。7.根據權利要求1所述的一種高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于其步驟(5)所述低級醇為甲醇、乙醇中的一種，異丙醇或丁醇結晶過濾得到的濾餅與低級醇的質量比為1:330，抗氧化劑為維生素E、維生素C、維C鈉、維C棕櫚酸酯或上述兩種或兩種以上的抗氧化劑以任意比例混合而成的混合物。8.根據權利要求1所述的高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于其步驟(5)所述干燥條件為307(TC烘干224小時。9.根據權利要求1所述的高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，其特征在于在整個制備過程中，全程N2氣保護。全文摘要高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法，在20～70℃下，溶解萬壽菊花粒于正丁烷或丙酮中，攪拌0.5～5小時，過濾得到提取液。向提取液中加入吸附劑，20～70℃下攪拌0.5～5小時并過濾，收集母液真空干燥得到濃縮物。將濃縮物溶于異丙醇或丁醇，20～70℃攪拌0.5～5小時，形成均一溶液后緩慢降溫至-10～10℃，6～18小時后過濾。用低級醇洗滌后的濾餅加入抗氧化劑，再干燥除去低級醇，最終得到高純度葉黃素酯。本發明具有污染物脫除效果明顯，產業化收率高、產品降解速率低的特點；進一步將葉黃素酯制成油溶物，穩定性更強，解決了葉黃素酯類產品易氧化不易保存等問題。文檔編號C07C403/24GK101486671SQ20091001049公開日2009年7月22日申請日期2009年2月27日優先權日2009年2月27日發明者波馮,強劉,吳文忠,徐維鋒,媛黃申請人:大連醫諾生物有限公司