參與皰疹病毒的潛伏感染的因子及其利用的制作方法

專利名稱：參與皰疹病毒的潛伏感染的因子及其利用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種參與皰疹病毒的潛伏感染的因子及其利用，尤其涉及一種在皰疹 病毒的潛伏感染時進行特異性表達的新穎蛋白質、及編碼此蛋白質的基因、以及其利用。
背景技術：
皰疹病毒科的病毒是如下的病毒在核心蛋白質的周圍，分子量為80 150X106 道爾頓的多鏈線狀DNA進入由162個殼粒所構成的直徑約為IOOnm的20面體的衣殼中，且 包膜包圍此核衣殼(nucleocapsid)而成的整體大小約為150 200nm的病毒。皰疹病毒 幾乎在所有哺乳動物或兩棲類中均有發現，尤其是以人類為宿主的皰疹病毒科的病毒被稱 為人類皰疹病毒(HHV，human herpesvirus) 0 HHV被分類為α (單純皰疹病毒、水痘、帶狀 皰疹病毒等)、β (巨細胞病毒等)、以及Y (EB病毒(Epstein-Barr virus)等)亞科。此種皰疹病毒以“潛伏感染”為特征。所謂“潛伏感染”是指病毒在宿主細胞內不 產生感染性病毒粒子而持續存在的感染狀態，但在此潛伏感染中，病毒基因以及輔助此病 毒基因存在的基因產物也保存在宿主細胞內。已知當宿主由于某種原因(例如年齡增加、 身體不適(包括疲勞))而發生異常時，表現為潛伏感染的皰疹病毒會再次開始產生病毒粒 子并復制大量的病毒(再活化)。即，皰疹病毒具有如下的特異的性質如果宿主無異常，那么繼續潛伏感染，一旦 宿主的身體發生異常，并察覺到宿主的危機，則為了尋找其他健康的宿主而再活化。對于病毒的潛伏感染、再活化的理解，是研究此種皰疹科的病毒的生態所不可或 缺的。但是，皰疹病毒之中，關于潛伏感染的見解較多的只有屬于Y-皰疹病毒的EB病毒， 而其他病毒尚有許多不明之處。尤其是，關于參與皰疹病毒的潛伏感染的因子，目前除本發明者先前所揭示 的見解以外尚無其他信息。例如非專利文獻1中揭示了 HHV-6在末梢血液中分化度較高的 巨噬細胞中潛伏感染，從而明確了 HHV-6在宿主體內的潛伏感染部位。另外非專利文獻2 中記載有HHV-6于初感染時以非常高的比率轉移到腦內，并產生持續感染、潛伏感染。非專 利文獻3中揭示有在HHV-6的潛伏感染時進行表達的基因(潛伏感染基因)，且提示此基因 具有控制病毒的潛伏感染與再活化的作用。另外，非專利文獻4中揭示了 HHV-6的潛伏感染狀態中存在比較穩定且基因表達 活躍的狀態即“中間階段intermediate stage”，潛伏感染基因與由此基因編碼的蛋白質 (潛伏感染蛋白質)在此中間階段大量表達。此外非專利文獻5中記載有于慢性疲勞癥候 群患者的血清中存在針對在中間階段表達亢進的潛伏感染蛋白質的抗體。[非專利文獻1]Kondo. K et al. Latent human herpesvirus 6 infection of human monocytes/ macrophages(J Gen Virol 72 :1401—1408，1991)[非專利文獻2]Kondo. K et al. Association of human herpesvirus 6 infection of thecentralnervous system with recurrence of febrile convulsions. (J Infect Disl67 1197-1200，1993.)[非專利文獻3]Kon do. K e t al. Identification of human herpesvirus 6 latency-associatedtranscripts. (J Virol. 76 :4145_4151,2002)[非專利文獻4]Kondo K et al.Recognition of a Novel Stage of Beta-Herpesvirus Latencyin Human Herpesvirus 6. (J Virol. 77 :2258_2264，2003)[非專利文獻5]近藤一博著，“皰疹病毒感染與疲勞”，病毒，第55卷第1號p9-18 2005

發明內容
但是，與疾病有特異性相關的潛伏感染基因以及潛伏感染蛋白質尚未得到鑒定， 其功能或與慢性疲勞癥候群的發病機理的關系也不明確。此外，HHV-6有可能也參與慢性 疲勞癥候群以外的疾病。因此，業界強烈期待明確HHV-6的感染與疾病的關聯性，并且開發出有助于疾病 的客觀診斷或模型動物的建立的技術。本發明是鑒于所述問題研究而成，其目的在于確定參與HHV-6的潛伏感染的因 子，并且提供此因子的利用方法。本發明者為解決所述課題而進行了努力研究的結果，基于如下的獨自觀點由于 HHV-6具有潛伏感染、再活化這種特征性質，因此通過鑒定參與此潛伏感染、再活化的因 子，應可獲得關于HHV-6的感染與精神障礙的關聯性的見解，本發明者基于所述觀點反復 進行高度復雜的實驗，結果鑒定出在HHV-6的潛伏感染中于特異性基因活躍表達的中間階 段(intermediatestage)進行表達的新穎基因、以及由此新穎基因所編碼的新穎蛋白質 SITH-I (Small protein encoded by the Intermediate Transcript of HHV-6-1，由 HHV-6 的中間轉錄物編碼的小蛋白-1)。而且，對這些基因以及由此基因所編碼的蛋白質SITH-I 的功能進行了分析，結果發現如下的新的事實(i)SITH-l蛋白質具有使細胞內鈣濃度上 升的功能，(ii)另外，在情緒障礙患者體內有意義地檢測出針對這些SITH-I蛋白質的抗 體，另一方面，在健康者體內幾乎未檢測出此種抗體，從而完成本發明。本發明是基于所述 新的見解而成的，其包含以下的發明。(1) 一種基因，其特征在于其編碼以下(a)或(b)中所記載的蛋白質。(a)由序列編號1所示的氨基酸序列所構成的蛋白質。(b)由序列編號1的氨基酸序列中，一個或數個氨基酸經取代、缺失、插入及/或附 加的氨基酸序列所構成，且具有使細胞內鈣濃度上升的活性的蛋白質。(2) 一種基因，其特征在于其含有序列編號2所示的堿基序列作為開放閱讀框 (open reading frame)區域。(3) 一種基因，其特征在于其是在嚴格的雜交條件下與由下述堿基序列構成的DNA雜交，且編碼具有使細胞內鈣濃度上升的活性的蛋白質，其中，所述堿基序列與由序列 編號2或者3所示的堿基序列所構成的DNA互補。。
(4) 一種蛋白質，其特征在于其由根據⑴ ⑶中任一項所述的基因所編碼。(5) 一種蛋白質，其特征在于其是以下(a)或(b)中所記載的蛋白質(a)由序列編號1所示的氨基酸序列所構成的蛋白質，
(b)由序列編號1的氨基酸序列中，一個或數個氨基酸經取代、缺失、插入及/或附 加的氨基酸序列所構成，且具有使細胞內鈣濃度上升的活性的蛋白質。(6) 一種抗體，其特征在于其可識別根據⑷或(5)所述的蛋白質。(7) 一種重組表達載體，其包含根據⑴ (3)中任一項所述的基因。(8) 一種轉化體，其特征在于其是導入根據(1) (3)中任一項所述的基因或根 據(7)所述的重組表達載體而成。(9) 一種基因檢測工具，其特征在于使用根據⑴ ⑶中任一項所述的基因中 的至少一部分堿基序列或其互補序列作為探針。(10) 一種檢測工具，其特征在于使用具有根據(4)或(5)所述的蛋白質中的至 少一部分氨基酸序列的多肽作為探針。(11) 一種判定方法，其特征在于判定被實驗對象生物體內是否存在根據(6)所 述的抗體。(12)根據(11)所述的判定方法，其特征在于所述判定方法是使用根據(4)或
(5)所述的蛋白質或者其部分片段，從免疫學上檢測是否存在根據(6)所述的抗體。(13)根據(11)或(12)所述的判定方法，其特征在于所述判定方法是使用從被 實驗對象生物體內分離出的生物學樣本來進行。(14) 一種判定套件，其特征在于其是用于根據(11) (13)中任一項所述的判
定方法。(15)根據(14)所述的判定套件，其特征在于其包含選自以下所示的(i) (iii)的物質中的至少一種物質(i)根據(4)或(5)所述的蛋白質，(ii)⑴的部分片段，(iii)將(i)或(ii)固定化而得到的工具。(16) 一種診斷方法，其診斷被實驗者是否有精神障礙，其特征在于包括判定步 驟，使用根據(11) (13)中任一項所述的判定方法，判定所述被實驗者體內是否存在根據
(6)所述的抗體；以及判斷步驟，在所述判定步驟中判定存在根據(6)所述的抗體時，判斷 所述被實驗者患有精神障礙。(17)根據(16)所述的診斷方法，其特征在于所述診斷方法是使用從被實驗者體 內分離出的生物學樣本來進行。(18) 一種診斷方法，其診斷被實驗動物是否有精神障礙，其特征在于包括判定 步驟，使用根據(11) (13)中任一項所述的判定方法，判定所述被實驗動物體內是否存在 根據(6)所述的抗體；以及判斷步驟，在所述判定步驟中判定存在根據(6)所述的抗體時， 判斷所述被實驗動物有精神障礙。(19) 一種診斷套件，其特征在于其是用于根據(16) (18)中任一項所述的診 斷方法。(20)根據(19)所述的診斷套件，其特征在于其包含選自以下所示的(i) (iii)的物質中的至少一種物質⑴根據(4)或(5)所述的蛋白質，(ii)⑴的部分片段，(iii)將(i)或(ii)固定化而得到的工具。(21) 一種模型動物的判定方法，其判定被實驗動物是否可用作精神障礙的模型動物，其特征在于包括診斷步驟，通過根據(18)所述的診斷方法，診斷所述被實驗動物是否 有精神障礙；以及判定步驟，在所述診斷步驟中，以被實驗動物有精神障礙作為指標，判定 所述被實驗動物可用作精神障礙的模型動物。(22) 一種模型動物，其特征在于其是導入根據所述(1) (3)中任一項所述的 基因、此基因產物、或者根據所述(7)所述的重組表達載體而成。(23) 一種篩選方法，其篩選精神治療藥物的候選物質，其特征在于包括對精神 障礙的模型動物給予被實驗物質的步驟；通過根據(18)所述的診斷方法，診斷所述模型動 物的精神障礙是否得到治愈或改善的步驟；以及以所述模型動物的精神障礙得到治愈或改 善作為指標，判定所述被實驗物質是精神治療藥物的候選物質的步驟。此外，在所述(23)的篩選方法中，更優選結合根據(18)所述的診斷方法，進行例 如采用(迄今為止已知的)動物的異常行動或恐怖反應等的診斷方法。本發明的基因或蛋白質是在皰疹病毒的潛伏感染時進行特異性表達，且具有控制 潛伏感染與再活化的功能。另外，如下所述，由于明確本發明的蛋白質的抗體有意義地存在 于精神障礙患者體內，因此通過檢測有無此抗體，可發揮客觀診斷精神障礙的效果。另外，本發明的基因或蛋白質除用于本文中所記載用途以外，也可用于對各種疾 病的診斷，還可用于藥劑的篩選方法、模型動物的制作方法、以及各種套件等。本發明的其他目的、特征、以及優點可以通過以下所記載的內容而充分理解。另 夕卜，本發明的優點可以通過參照隨附圖式的以下說明而明了。


圖1是示意性地表示潛伏感染特異性基因的結構與分析用引物的位置的圖。圖2是表示通過PCR法對HHV-6基因產物進行擴增的結果的圖。圖3是表示通過RACE法對新穎潛伏感染特異性基因mRNA進行分析的結果的圖。圖4是表示通過酵母雙雜交(Yeast Two-hybrid)法，鑒定與蛋白質SITH-1結合 的宿主蛋白質的結果的圖。圖5是表示利用蛋白質SITH-I使星形膠質細胞樣神經膠質細胞株內的CAML增加 的圖。圖6是表示由SITH-I所引起的神經膠質細胞內鈣濃度的上升的圖。圖7是表示對于具有精神障礙的患者的SITH-I的抗體效價的圖。圖8是表示通過懸尾實驗所獲得的SITH-I的效果的研究結果的圖。圖9是表示通過強迫游泳實驗所獲得的SITH-I的效果的研究結果的圖。圖10是表示通過恐怖反應(Pr印ulse inhibition，前脈沖抑制)所獲得的SITH-1 的效果的研究結果的圖。圖11是表示利用腺病毒載體使SITH-I在小鼠的神經膠質細胞內表達，3周后通過轉輪旋轉來測定自主活動量的結果的圖。圖12是表示利用慢病毒載體使SITH-I在小鼠的神經膠質細胞內表達，8周后通過 轉輪旋轉來測定自主活動量的結果的圖。圖13是表示以SITH-I作為指標，對并發抑郁癥的其他疾病進行診斷的結果的圖。
具體實施例方式以下，對本發明的一個實施方式進行詳細說明，但本發明并不限定于以下所記載 的內容。首先，為了有助于理解本發明，對本發明者完成本發明的經過進行簡單說明。本發 明者推測人類皰疹病毒中HHV-6的感染很可能是導致精神障礙、特別是伴有情緒障礙的 精神障礙的原因之一。其理由如下(i)在先前認為HHV-6是其致病原因之一的慢性疲勞 癥候群(CFS，chronic fatiguesyndrome)的癥狀中，可見抑郁癥狀等在精神障礙中常見的 癥狀；(ii)HHV-6在腦內產生潛伏感染；(iii)此外在CFS患者的血清中，高比率地檢測出 與目前為止所鑒定出的HHV-6的潛伏感染特異性基因的蛋白質產生反應的抗體，或者雖然 基因或蛋白質尚未鑒定，但與在HHV-6的潛伏感染細胞中進行表達的未知蛋白質產生反應 的抗體。另外，本發明者根據HHV-6在腦內主要在負責人類的思考或情感的額葉或海馬區 域等中潛伏感染這一事實、及在腦內產生潛伏感染的病毒包括HHV-6在內僅有幾種這一事 實，推測出HHV-6與精神障礙的關系。此外，已知HHV-6在星形膠質細胞等神經膠質細胞中 產生潛伏感染，而此星形膠質細胞等神經膠質細胞在血清素等與抑郁癥有關的腦內物質的 代謝中具有重要作用，就此方面而言，本發明者也獨自認為HHV-6有可能與情緒障礙等精 神障礙有關。因此，本發明者推測在CFS患者中，因HHV-6在腦中的潛伏感染而導致產生精神癥 狀的患者應占相當大的比率。其中，本發明者尤其懷疑HHV-6與抑郁癥或躁郁癥等情緒障 礙有關。情緒障礙是可見于抑郁癥或躁郁癥等精神障礙的癥狀，其代表為僅可見抑郁癥 狀的“抑郁癥”、以及反復可見躁狂狀態與抑郁狀態的“躁郁癥”。原因可以列舉壓力、基因 異常、感染等各種原因，但尚未確定。情緒障礙最近有增加的傾向，成為嚴重的社會問題，因 而期待盡早辨明病因、病態，并開發出診斷方法以及治療方法。其中，也存在情緒障礙傾向 于定性上的診斷，而客觀診斷較困難的問題。另外，有助于情緒障礙的研究或治療法的開發 的模型動物的開發也不充分，而延緩原因查明或治療方法的開發。因此，本發明者認為有必要明確HHV-6的感染與情緒障礙、精神障礙的關聯性，并 且開發出一種有助于情緒障礙、精神障礙的客觀的診斷或模型動物的建立的技術。再者，當然這些推測是本發明者長年在本研究領域進行努力研究才摸索到的獨自 推測，不是一般的從業人員能夠容易想到的。以下，依序對本發明的蛋白質、基因等進行詳細說明。(1)本發明的蛋白質、基因
(1-1)結構本發明提供一種參與皰疹病毒的潛伏感染的因子，更詳細而言提供一種在皰疹病毒的潛伏感染時進行特異性表達的蛋白質以及編碼此蛋白質的基因。此處，所謂“在皰疹病 毒的潛伏感染時進行特異性表達”是指在感染皰疹病毒的宿主中，當皰疹病毒潛伏感染(未 增殖感染)時，源自皰疹病毒的基因或基因產物進行特異性表達。作為所述蛋白質以及基因，例如可以列舉(a)由序列編號1所示的氨基酸序列所 構成的蛋白質、以及編碼此蛋白質的基因。由序列編號1所示的氨基酸序列所構成的蛋白質，如下述實施例所示，是被分離、 鑒定出其是在人類皰疹病毒-6(HHV-6)的潛伏感染時進行特異性表達的蛋白質，以下將其 禾爾為 SITH-1(Small protein encoded by thelntermediate Transcript of HHV-6-1)蛋 白質。SITH-l蛋白質是具有序列編號1所示的氨基酸序列，由159個氨基酸所構成，且分子 量約為17. 5kDa的蛋白質。SITH-1蛋白質是由SITH-1基因進行編碼。此SITH-1基因的cDNA如序列編號3 所示，具有1795個堿基對(約1.79kbp)的長度，第954位至第956位的堿基序列為起始 密碼子(Kozak ATG)，第1431位至第1433位的堿基序列為終止密碼子(TAA)。因此，所述 SITH-1基因具有序列編號3所示的堿基序列中的第954位至第1430位為止的堿基序列作 為開放閱讀框(0RF)區域，此0RF具有477個堿基對(約0. 48kbp)的長度。將SITH-1的 cDNA之中表示0RF區域的堿基序列示于序列編號2。再者，序列編號2所示的堿基序列是 以包含終止密碼子的3個堿基的形式進行記載。另外，作為本發明的蛋白質以及基因，可以列舉(b)由序列編號1的氨基酸序列 中，一個或數個氨基酸經取代、缺失、插入及/或附加的氨基酸序列所構成，且在皰疹病毒 的潛伏感染時進行特異性表達的蛋白質，以及編碼此蛋白質的基因。所述“一個或數個氨基酸經取代、缺失、插入及/或附加”，是指通過部位特異性突 變誘發法等公知的變異肽制作法，使可以取代、缺失、插入及/或附加的程度的數量(優選 10個以下，更優選7個以下，再更優選5個以下)的氨基酸經取代、缺失、插入及/或附加。 如此，所述(b)的蛋白質可以稱為所述(a)的蛋白質的變異蛋白質。再者，此處的“變異”主 要是指通過公知的變異蛋白質制作法而人為導入的變異，但也可以是將天然存在的相同的 變異蛋白質分離純化者。此外，作為本發明的基因，可以列舉(c)在嚴格的雜交條件下與由下述堿基序列 構成的DNA雜交，且編碼在皰疹病毒的潛伏感染時進行特異性表達的蛋白質，其中，所述堿 基序列與由序列編號2所示的堿基序列所構成的DNA互補。。所述“在嚴格的雜交條件下雜交”是指只當在序列間存在至少90%的同源性，優選 至少95%的同源性，最優選至少97%的同源性時產生雜交。作為“嚴格的雜交條件”的具體 例，例如可以列舉如下條件在雜交溶液(包含50 %的甲酰胺、5 X SSC(150mM的NaCl、15mM 的檸檬酸三鈉)、50mM的磷酸鈉(pH為7. 6) ,5XDenhardt溶液、10 %的硫酸葡聚糖、以及 20 u g/ml的變性剪切鮭魚精子DNA)中于42°C下培養一晚后，在約65°C下于0. 1XSSC中清 洗過濾器。另夕卜，所述雜交可以通過J. Sambrook et al. Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2d Ed.，Cold Spring Harbor Laboratory (1989)中所記載的方法等先前公知的方 法來進行，并無特別限定。通常，溫度越高、鹽濃度越低，則嚴格度越高(變得難以雜交)。此外，在本說明書中，術語“基因”可以與“多核苷酸”、“核酸”或“核酸分子”交換 使用。“多核苷酸”是指核苷酸的聚合物。因此，本說明書中的術語“基因”中不僅包括雙鏈DNA，也包括構成其的正義鏈(sensestrand)以及反義鏈(antisense strand)之類的各 單鏈DNA或RNA(mRNA等)。反義鏈可以用作探針或反義藥劑。“DNA”例如包括通過克隆 (cloning)或化學合成技術、或者這些技術的組合而獲得的cDNA或基因組DNA等。即，DNA 可以是包括作為動物的基因組中所含有的形態的內含子等非編碼序列的“基因組”型DNA， 也可以是利用逆轉錄酶或聚合酶并經由mRNA而獲得的cDNA，即不含有內含子等非編碼序 列的“轉錄”型DNA。此外，本發明的基因也可以是除了編碼所述(a)或(b)中所記載的氨 基酸的序列以外，還包含非翻譯區域(UTR)的序列或載體序列(包含表達載體序列)等序 列的基因。另外，這些mRNA或者cDNA的翻譯區域的末端及/或內部也可以包含調節序列或 聚腺苷酸序列等任意多核苷酸。另外，當本發明的蛋白質可以由多個等位基因編碼時，所有 等位基因、其轉錄產物、以及cDNA包括在所述核酸的范疇內。此外，在本說明書中，“核酸” 這一術語包括任意單純核苷酸及/或包含修飾核苷酸的多核苷酸，例如cDNA、mRNA、全RNA、 hnRNA等。“修飾核苷酸”除了含有肌苷(inosine)、乙酰胞苷(acetylcytidine)、甲基胞苷 (methylcytidine)、甲基腺昔(methyladenosine)、甲基鳥昔(methylguanosine)的憐酸酉旨 以外，還包括可以在紫外線或化學物質的作用下后天生成的核苷酸。
術語“堿基序列”可以與“核酸序列，，交換使用，其是以脫氧核糖核苷酸(分別簡 寫為A、G、C以及T)的序列來表示。另外，多核苷酸或多核苷酸的“堿基序列”是指相對于 DNA分子或多核苷酸的脫氧核糖核苷酸的序列，并且是指相對于RNA分子或多核苷酸的核 糖核苷酸(A、G、C以及U)的對應序列(此處所確定的脫氧核苷酸序列中的各胸腺嘧啶脫氧 核苷酸(T)可以被核糖核苷酸的尿苷(U)取代)。例如，使用脫氧核糖核苷酸的略語所表示的“具有序列編號2或4的序列的RNA分 子”是指具有序列編號2或4的各脫氧核苷酸A、G或C被對應的核糖核苷酸A、G或C取代， 而且脫氧核苷酸T被核糖核苷酸U取代的序列的RNA分子。另外，“包含序列編號2或4中 所示的堿基序列的多核苷酸或其片段”是指包含序列編號2或4的各脫氧核苷酸A、G、C及 /或T所示的序列的多核苷酸或其片段部分。另外，本發明的基因的片段(部分序列)例如可以用作聚合酶鏈反應(PCR)的引 物、或者雜交探針。所述片段(多核苷酸)可以將本發明的基因的同系物(homolog)、直系 同源物(ortholog)特異性地PCR擴增，另外也可以用作將本發明的基因的同系物、直系同 源物特異性雜交的雜交探針。即，在優選實施方式中，本發明的基因的片段可以作為用于通 過聚合酶鏈反應(PCR)擴增靶序列的引物、或者作為根據先前的DNA雜交技術的探針中的 任意者而用于診斷。另外，作為本發明的基因的片段的其他用途，可以列舉Verma等人所著的Human Chromosomes :a Manual of Basic Techniques, Pergamon Press, New York(1988)中所記 載的針對用于提供正確的染色體位置的分裂中期染色體展開物的原位(in situ)雜交(例 如FISH)；以及用于檢測本發明的mRNA在特定組織中的表達的北方墨點分析。另外，本發明的基因中可以包含以下的物質，但并不限定于這些物質由其本身編 碼成熟蛋白質的氨基酸序列的多核苷酸；成熟的蛋白質的編碼序列以及進一步的序列(例 如編碼前導序列(leader sequence)的序列)(例如前蛋白(pr印rotein)序列或蛋白原 (proprotein)序列或前蛋白原(pr印roprotein)序列)；內含子、非編碼5'序列以及非編 碼3'序列(例如在轉錄、mRNA加工(包含重組以及聚腺苷酸化信號)中承擔作用的轉錄非
10翻譯序列)；對如提供進一步的功能性的進一步的氨基酸進行編碼的進一步的編碼序列。因此，例如編碼蛋白質的序列可以與標記序列(marker sequence)(例如對使經融 合的蛋白質的純化變得容易的肽進行編碼的序列)融合。在本發明的優選實施方式中，標 記氨基酸序列可以是6X組氨酸肽(例如pQE載體(Qiagen，INC.)中所提供的標簽)。如 Gentz 等人所著的 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86 =821-824(1989)中所記載般，6 X 組氨酸肽 可用于融合蛋白質的簡便純化。另外，除所述以外，也能夠利用許多公共的及/或可以從商 業途徑獲得的標記氨基酸序列。例如，如Wilson等人所著的Cell 37:767(1984)中所記載 般，“HA”標簽是與源自流感血凝素(HA)蛋白質的抗原表位對應的用于純化的肽。除此以 外，使本發明的蛋白質的N末端或C末端融合Fc而成的融合蛋白質也可以用于純化。另外，本發明也包括本發明的基因的變異體。所述變異體如天然等位基因變異體 般，可以天然形成。利用“等位基因變異體”可謀求占據生物的染色體上的特定的基因座的 基因的幾個可交換形態之一。另外，天然中不存在的變異體例如可以使用此領域中公知的 誘變技術來生成。此種變異體如上所述般，包含通過一個或數個核苷酸取代、缺失或附加而 生成的變異體。取代、缺失或附加可以包含一個以上的核苷酸。變異體可以在編碼或非編 碼區、或者此兩者間變化。編碼區中的變異可以生成保存性或非保存性氨基酸取代、缺失或 附加。另外，作為本發明中所含有的優選蛋白質，除成熟蛋白質以外，可以列舉包含細胞 外區域、跨膜區域、細胞內區域、或者跨膜區域的全部或一部分缺失的細胞外及細胞內區域 的蛋白質。在本說明書中，術語“蛋白質”可以與“多肽”或“肽”交換使用。此外，本發明 提供由序列編號2所示的堿基序列所編碼的蛋白質的一個或數個氨基酸經取代、附加或缺 失的多肽。優選保存性或非保存性氨基酸取代、缺失或附加，特別優選沉默取代(silent substitution)、附加以及缺失，這些不會使本發明的蛋白質或其一部分的特性以及活性發 生變化。就這些方面而言，特別優選保存性取代。此外，本發明的蛋白質不僅可為從天然中分離出的蛋白質，也可以化學合成或重 組生成。即，本發明的蛋白質可以是從細胞、組織等中分離純化的狀態，也可以是編碼蛋白 質的基因導入到宿主細胞中，并使該蛋白質在細胞內表達的狀態。另外，本發明的蛋白質也 可以是包含附加多肽的蛋白質。另外，本發明涉及具有本說明書中所記載的蛋白質的抗原表位保有部分的氨基酸 序列的多肽。具有本發明的蛋白質的抗原表位保有部分的氨基酸序列的多肽，只要包含具 有至少6個、7個、8個、9個、10個氨基酸的多肽的部分即可，此外，也可包含至由序列編號2 或4所示的堿基序列編碼的蛋白質、或者具有序列編號1所示的氨基酸序列的蛋白質的所 有氨基酸序列的長度為止的任意長度(包含整體)的抗原表位保有部分多肽。S卩，本發明提供本發明的蛋白質的抗原表位保有肽。如下述的實施例所示，本發明 的蛋白質是免疫原性蛋白質。因此，在本發明的蛋白質中，引起抗體應答的抗原表位部分可 以通過該領域中公知的方法鑒定。例如在Geysen，H. M.等人所著的Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81 =3998-4002(1984)中揭示有充分純化至可以用于酶聯免疫吸附測定的反應的程 度的數百個肽在固體支持體上的迅速同時合成的順序。繼而，合成肽與抗體的相互作用可 以不將其從支持體上去除而容易地檢測出。在此方式中，保有所需的蛋白質的免疫原性表 位的肽可以由從業人員日常性地鑒定。例如Geysen等人通過合成可包括蛋白質的全部213個氨基酸序列的所有208種六肽的重復組進行7氨基酸的辨明，而對口蹄疫病毒的外殼蛋 白質中在免疫學上較重要的抗原決定部位進行了定位。繼而，合成所有20個氨基酸依次在 抗原表位內的各位置被取代的肽的完整的取代組，然后確定賦予用以與抗體的反應的特異 性的特定氨基酸。因此，本發明的抗原表位保有肽的肽類似物可以通過該方法而日常性地 制作。在GeySen(1987)的美國專利第4，708，781號中，更加詳細地記載了對保有所需的蛋 白質的免疫原性表位的肽進行鑒定的此方法。當蛋白質整體為免疫原時，將“免疫原性表位”定義為引起抗體應答的蛋白質的一 部分。一般認為這些免疫原性表位被分子上的2、3的焦點所限制。另一方面，能夠結合抗 體的蛋白質分子的區域可以定義為“抗原性表位”。蛋白質的免疫原性表位的數量通常少 于抗原性表位的數量。例如參照Geysen，H.M.等人所著的Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 3998-4002(1984)。本發明的抗原性表位保有肽在引發產生包含與本發明的蛋白質特異性結合的單 克隆抗體的抗體方面有用。因此，通過使來自經抗原之抗原表位保有肽進行免疫化的供體 的脾臟細胞融合而獲得的雜交瘤(hybridoma)的大部分，通常會分泌出與天然的蛋白質具 有反應性的抗體。由抗原性表位保有肽引發產生的抗體可用于檢測模擬蛋白質，而且針對 不同的肽的抗體可以用于追蹤接受翻譯后加工的蛋白質前體的各區域的最終結果。已知在 免疫沉淀分析法中，連較短的肽(例如約9個氨基酸)也可以與更長的肽結合并且取代，因 此肽以及抗肽抗體可以用于有關模擬蛋白質的各種定性或定量的分析法，例如競爭性分析 法。例如參照Wilson，I.A.等人所著的Cell 37:767-778(1984)777。另外，本發明的抗蛋 白質抗體也可用于模擬蛋白質的純化(例如使用該領域中眾所周知的方法，并采用吸附層 析法)。根據所述的準則而設計的本發明的抗原性表位保有肽，優選包含本發明的蛋白質 的氨基酸序列內所含有的至少7個、更優選至少9個、最優選約15個 約30個氨基酸之間 的序列。但是，包含本發明的蛋白質的氨基酸序列的約30個 約50個氨基酸或乃至全部 的任意長度以及整體的，包含本發明的蛋白質的氨基酸序列的更大部分的肽或多肽也認為 是本發明的抗原表位保有肽，而且其在誘導與模擬蛋白質反應的抗體方面有用。優選以在 水性溶劑中提供實質性的溶解性的方式選擇抗原表位保有肽的氨基酸序列(即，抗原表位 保有肽的序列包含相對親水性的殘基，而且優選避免為高度疏水性序列)；而且特別優選 包含脯氨酸殘基的序列。本發明的抗原表位保有肽可以通過使用本發明的基因制造重組蛋白質的任意先 前方法來產生。例如，較短的抗原表位保有氨基酸序列可以在重組體產生及純化期間、以及 用于產生抗蛋白質抗體的免疫化期間與作為載體而發揮作用的更大的多肽融合。另外，抗 原表位保有肽可以使用化學合成的公知方法來合成。另外，本發明還包括如下者為了實現向經翻譯的蛋白質的小胞體的管腔內、或者 周質空間內、或者細胞外環境內的分泌，而將適當的分泌信號編入所表達的蛋白質中。所述 分泌信號可以相對于多肽而為內因性，這些信號也可以是異種信號。因此，本發明的蛋白質能夠以如融合蛋白質般經改造的形態進行表達，而且不僅 可以包含分泌信號，也可以包含附加的異種的功能性區域。例如，為了改善附加的氨基酸， 特別是帶電氨基酸的區域在宿主細胞內的于純化期間、或者連續操作及保存期間的穩定性以及持續性，可以將其附加在蛋白質的N末端。另外，為了使純化變得容易，可以將肽部分 附加在蛋白質上。此種區域可以在最終制備蛋白質之前去除。尤其是為了產生分泌或排 出、改善穩定性、以及使純化變得容易而進行的肽部分對蛋白質的附加，是在本領域中已眾 所周知且日常性的技術。優選的融合蛋白質，包含源自對蛋白質的可溶化有用的免疫球蛋白的異種區域。 例如，EP A 0 464 533(另外，加拿大對應申請案2045869)中揭示有包含其他人類蛋白 質或其一部分，并且包含免疫球蛋白分子中的恒定區的各種部分的融合蛋白質。在大多 數情況下，融合蛋白質中的Fc部分十分有利于在治療以及診斷中使用，因此例如產生經 改善的藥物動力學的特性(EP A 0232 262)。另一方面，在幾種應用中，較理想的是融合 蛋白質以所記載的有利的形態獲得表達、檢測以及純化后可缺失Fc部分。此種情形是判 明Fc部分是在治療以及診斷中的使用的妨礙的情形(例如將融合蛋白質用作免疫抗原 的情形)。在藥物篩選中，例如hIL-5之類的人類蛋白質以用于鑒定hIL-5的拮抗劑的高 處理能力篩選分析法為目的而與Fc部分融合。參照D. Bennett等人所著的Journal of Molecular Recognition Vol. 8 :52_58 (1995)、以及 K. Johanson 等人所著的 The Journal of Biological Chemistry Vol. 270，No.16,9459-9471 頁(1995)。(1-2)功能關于本發明的蛋白質的功能，列舉上述的SITH-1蛋白質為例進行詳細說明。SITH-1基因如下述實施例所示，常在HHV-6潛伏感染的細胞的細胞質中進行表 達，另一方面，在增殖感染細胞中未見其表達。編碼SITH-1蛋白質的基因，是由與目前為止 所報告的HHV-6潛伏感染特異性基因(H6LT)具有互補鏈關系的DNA所編碼，其表達會在 HHV-6的潛伏感染的中間階段增強。根據這些事實，可以認為SITH-1蛋白質是在HHV-6的潛伏感染時進行特異性表達 的蛋白質，且可知其是與目前為止鑒定出的參與HHV-6的潛伏感染的蛋白質明顯不同的蛋 白質。此外，本發明者進行SITH-1蛋白質的功能分析的結果，可知SITH-1蛋白質與作為 宿主蛋白質的CAML(calcium-modulating cyclophilin ligand，鈣離子信號調節親環素配 體，Accessions ；U18242)結合，并使星形膠質細胞等神經膠質細胞的細胞內鈣濃度上升。 CAML是如下的蛋白質已知其在宿主生物體內大量存在于腦與淋巴球中，且使細胞內的鈣 濃度上升。另外，可以認為由SITH-1蛋白質的表達所引起的細胞內鈣濃度的上升會帶來潛 伏感染細胞內的全面的信號傳遞活化，并有助于HHV-6的有效率的再活化。此處所謂“神經膠質細胞”是指包含星形膠質細胞(astrocyte)、少突膠質細胞 (oligodendrocyte)、小膠質細胞(microglia)以及室管膜細胞(印endymalcell)之類的中 樞神經系統的神經膠質細胞的成熟細胞、前體細胞的所有神經膠質細胞，除此以外，還可包 括末梢神經系統中的衛星細胞(satellite cell)、雪旺細胞(Schwann cell)以及末梢神經 膠質細胞(terminal gliocyte)。已知HHV-6在腦內的星形膠質細胞等神經膠質細胞中潛伏感染，可認為如果潛伏 感染時或處于活性較高的潛伏感染狀態即中間階段的HHV-6使SITH-1獲得表達，則星形膠 質細胞等神經膠質細胞內的鈣濃度會上升。根據最近的精神科學領域的研究，一般認為使 腦的細胞中的細胞內鈣濃度上升與情緒障礙等精神障礙有很大的關系。
另外，實際上已知如實施例所示，如果使SITH-1蛋白質在小鼠的星形膠質細胞等 神經膠質細胞中表達，則會產生作為精神障礙的情緒障礙樣癥狀與過敏性亢進。此現象強 烈顯示在星形膠質細胞等神經膠質細胞中潛伏感染的HHV-6可以經由SITH-1蛋白質而引 起精神障礙。另外，HHV-6不僅可以在星形膠質細胞中潛伏感染，也可以在小膠質細胞等其他神 經膠質細胞中潛伏感染，因此抑郁癥或躁郁癥等精神障礙的原因不僅在于星形膠質細胞， 也可能是其他神經膠質細胞。根據以上的見解，本發明的蛋白質是保持與作為宿主蛋白質的CAML的結合活性， 并具有使細胞內鈣濃度上升的功能的蛋白質。另外，已判明通過使本發明的蛋白質在被認 為是此蛋白質會最強烈地進行表達的星形膠質細胞等神經膠質細胞中表達，可以誘導精神 障礙。因此，可以認為本發明的蛋白質會在皰疹病毒的潛伏感染時或者再活化早期進行表 達，并具有使宿主產生精神障礙的功能。(1-3)基因以及蛋白質的獲得方法本發明的基因以及蛋白質的獲得方法(或者生產方法)并無特別限定，可以列舉 以下所示的各方法作為代表性方法。〈蛋白質的獲得方法〉獲得本發明的蛋白質的方法(或者蛋白質的生產方法)如上所述并無特別限定， 首先可以列舉從含有本發明的蛋白質的生物學樣本(例如細胞、組織、生物個體等)等中單 純純化的方法。另外，純化方法也無特別限定，只要利用公知方法從細胞或組織中制備細胞 提取液，然后通過公知方法，例如使用管柱等對該細胞提取液進行純化即可。例如可以將從 細胞或組織中提取的粗蛋白質分層注入高效液相色譜儀(HPLC)中，來純化、分離本發明的 蛋白質。另外，作為其他獲得本發明的蛋白質的方法，也可列舉使用基因重組技術等的方 法。于此種情況時，例如可以采用如下的方法等將本發明的基因裝在載體等之上，然后通 過公知方法，將其可表達地導入到宿主細胞中，然后對在細胞內被翻譯而獲得的所述蛋白 質進行純化。關于基因的導入(轉化)或基因的表達等的具體方法見下文。此外，當如上所述般將外源基因導入宿主中時，由于結合外源基因表達之用而于 宿主內發揮功能的啟動子(promoter)的表達載體、以及宿主存在多樣的選擇，因此只要選 擇符合目的者即可。對所產生的蛋白質進行純化的方法因所使用的宿主、蛋白質的性質而 各異，但可以通過利用標簽等而較容易地純化目標蛋白質。關于制作變異蛋白質的方法也無特別限定。例如可以使用以下等眾所周知的變異 蛋白質制作法利用部位特異性突變誘發法(Hashimoto-Gotoh，Gene 152,271-275(1995) 等)、PCR法將點突變導入堿基序列中來制作變異蛋白質的方法，或者通過插入轉座子來制 作突變株的方法。通過使用這些方法，針對編碼所述(a)的蛋白質的cDNA的堿基序列，以 使一個或數個堿基被取代、缺失、插入及/或附加的方式對其加以改變，由此可制作變異蛋 白質。另外，變異蛋白質的制作也可以利用市售的套件。本發明的蛋白質的獲得方法并不限定于上述，例如也可以是使用市售的肽合成器 等進行化學合成的方法。另外，作為其他例，也可以利用無細胞類的蛋白質合成液，由本發 明的基因合成本發明的肽。
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〈基因的獲得方法〉獲得本發明的基因的方法(或者基因的生產方法)也如上所述般并無特別限定，例如可以列舉利用差異篩選(differential screening)(消減克隆(subtraction cloning))的方法。在該方法中，只要根據公知的技術，反復進行試驗管內的直接雜交，然后 對目標cDNA(本發明的基因)進行濃縮即可。關于所述差異篩選中的各步驟，只要在通常使用的條件下進行即可。由此所獲得 的克隆體可以通過制作限制酶圖譜以及確定其堿基序列(測序)而進一步詳細分析。通過 這些分析，可以容易地確認是否獲得了包含本發明的基因序列的DNA片段。另外，作為獲得本發明的基因的方法，可以列舉利用公知技術將包含本發明的基 因的DNA片段分離，并進行克隆的方法。例如只要制備與所述cDNA序列的一部分序列特異 性雜交的探針，然后篩選基因組DNA庫或cDNA庫即可。作為此種探針，只要是與所述各cDNA 序列或其互補序列的至少一部分特異性雜交的探針，則可以使用任意的序列、任意的長度。另外，作為獲得本發明的基因的方法，可以列舉使用PCR等擴增方法的方法。例如 從本發明的基因的cDNA序列中的5'側以及3'側的序列(或者其互補序列)中分別制備 引物，使用這些引物將基因組DNA(或者cDNA)等制成模板后進行PCR等，并將夾在兩引物 之間的DNA區域擴增，由此可以大量獲得包含本發明的基因的DNA片段。另外，也可以依據基因序列信息，使用公知的化學合成來合成具有該序列的多核 苷酸。(2)本發明的抗體本發明的抗體，是以本發明的蛋白質、例如所述(a)或(b)中所記載的蛋白質、 或者其部分肽作為抗原，通過公知方法而以多克隆抗體或單克隆抗體的形式獲得的抗 體。作為公知方法，例如可以列舉文獻(Harlow等人所著的“Antibodies :A laboratory manual (Cold Spring Harbor Laboratory，NewYork (1988))、巖崎等人所著的“單克隆抗體 雜交瘤與ELISA，講談社(1991)”)中所記載的方法。以所述方式獲得的抗體可以用于本發 明的蛋白質的檢測、測定等。例如，所述(1-1)欄中所記載的本發明的抗原表位保有肽是用于通過此領域中 眾所周知的方法誘導抗體。例如參照Chow，M.等人所著的Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 910-914 ；以及 Bittle，F. J.等人所著的 J. Gen. Virol. 66 =2347-2354 (1985) 通常，動物可 以利用游離肽而免疫化，但是抗蛋白質抗體效價可以通過將肽耦合于高分子載體(例如， 匙孔笠貝血藍蛋白(KLH，keyhole limpet hemocyanin)或破傷風類毒素)上而追加免疫。 例如，含有半胱氨酸的肽可以使用如間馬來酰亞胺苯甲酰-N-羥基丁二酰亞胺酯(MBS)之 類的連接子而耦合于載體上，另一方面，其他肽可以使用如戊二醛之類的更普通的連結劑 而耦合于載體上。如兔子、大鼠、以及小鼠之類的動物，是利用游離肽或載體-耦合肽中的 任意者，通過例如約IOOyg的包含肽或載體蛋白質以及福氏佐劑(freimd adjuvant)的乳 液的腹腔內及/或皮內注射而免疫化。為了提供例如使用吸附在固體表面的游離肽并通過 ELISA法而可以檢測出的有用的效價的抗蛋白質抗體，需要以例如約2周的間隔進行幾次 追加免疫注射。來自免疫化動物的血清中的抗蛋白質抗體的效價可以通過選擇抗蛋白質抗 體，例如通過利用該領域中眾所周知的方法在固體支持體上吸附肽、以及使所選擇的抗體 溶析而增加。
另外，在本說明書中，術語“抗體”是指免疫球蛋白(IgA、IgD、IgE、IgG、IgM以及它們的Fab片段、F(ab' )2片段、Fc片段)，作為例子可以列舉多克隆抗體、單克隆抗體、單 鏈抗體、抗個體基因型抗體以及人源化抗體，但并不限定于這些抗體。在本說明書中，術語“識別本發明的蛋白質的抗體”是指包含可以與所述本發明的 蛋白質特異性結合的完整的分子以及抗體片段(例如Fab以及F(ab' )2片段)。Fab以及 F(ab' )2片段欠缺完整抗體的Fc部分，其通過循環可更加迅速地被去除，而且可以幾乎不 具有完整抗體的非特異性組織結合(Wahl等人所著的J. Nucl. Med. 24 :316_325 (1983))。因 此優選這些片段。或者，能夠識別本發明的蛋白質的進一步的抗體可以通過使用抗個體基因型抗體 而由兩個步驟產生。此種方法是利用抗體本身是抗原這一事實，因此可以獲得與二次抗體 結合的抗體。根據該方法，本發明的蛋白質特異性抗體用于使動物(優選小鼠)免疫。繼 而，此種動物的脾細胞用于產生雜交瘤細胞，而雜交瘤細胞為了鑒定如下的克隆體而受到 篩選，此克隆體可產生與本發明的蛋白質特異性抗體結合的能力可以被本發明的蛋白質抗 原阻斷的抗體。此種抗體包含針對本發明的蛋白質特異性抗體的抗個體基因型抗體，而且 為了誘導本發明的蛋白質特異性抗體的進一步形成，其可用于使動物免疫。已明確Fab及F(ab' )2以及本發明的抗體的其他片段可以根據本說明書所揭示 的方法來使用。此種片段具有代表性的是通過使用如木瓜蛋白酶(產生Fab片段)或胃蛋 白酶(產生F(ab' )2片段)之類的酶的蛋白質分解進行切斷而產生。或者，本發明的蛋白 質結合片段可以通過重組DNA技術的應用或合成化學而產生。為了對人進行診斷，而使用體內(in vivo)的成像來檢測上升水平的本發明的蛋 白質時，可以優選使用“人源化”嵌合單克隆抗體。此種抗體可以使用源自生成所述單克 隆抗體的雜交瘤細胞的遺傳構建物而生成。用于生成嵌合抗體的方法在此領域中眾所周 知。總論參照 Morrison，Science 229:1202(1985) ；Oi 等，BioTechniques 4:214(1986)； Cabilly 等，美國專利第 4，816，567 號；Taniguchi 等，EP 171496 ；Morrison 等，EP 173494 ； Neuberger 等，WO 8601533 ；Robinson 等,WO 8702671 ；Boulianne 等,Nature 312 643(1984) ；Neuberger 等，Nature 314:268(1985)。(3)本發明的重組表達載體本發明的重組表達載體是包含編碼所述(a)或(b)中所記載的蛋白質的本發明的 基因的重組表達載體。例如可以列舉插入有cDNA的重組表達載體。在重組表達載體的制 作中，可以使用質粒(plasmid)、噬菌體(phage)、或者粘粒(cosmid)等，但并無特別限定。 另外，制作方法只要使用公知方法來進行即可。載體的具體種類并無特別限定，只要適當選擇可以在宿主(host)細胞中表達的 載體即可。S卩，為了對應于宿主細胞的種類使基因確實地表達而選擇適當的啟動子序列， 將其與本發明的基因組入各種質粒等中，并使用所獲得者作為表達載體即可。所述表達 載體例如可以利用噬菌體載體、質粒載體、病毒載體、逆轉錄病毒載體、染色體載體、游離 基因載體、以及源自病毒的載體(例如細菌質粒、細菌噬菌體、酵母游離基因、酵母染色體 外因子)、病毒(例如桿狀病毒(baculovirus)、乳頭多瘤空泡病毒(papovavirus)、痘苗 病毒(vaccinia virus)、腺病毒(adenovirus)、胃||| 病毒(avipoxvirus)、偽狂；^病病毒 (pseudorabies virus)、皰疹病毒、慢病毒(Ientivirus)以及逆轉錄病毒)、以及源自這些病毒的組合的載體(例如粘粒以及噬粒(phagemid))。通常將質粒載體導入如磷酸鈣沉淀物之類的沉淀物中、或者與帶電脂質的復合物中。當載體為病毒時，可以使用適當的包裝細胞株在體內包裝載體，繼而將其性狀導入宿主 細胞中。另外，逆轉錄病毒載體為可以復制、或者可以復制缺陷。當為后者時，病毒的增殖 通常只在互補宿主細胞中產生。另外，優選包含針對目標基因的順式作用(cis-acting)控制區域的載體。適當的 反式作用(trans-acting)因子可以由宿主供給、或者可以由互補載體供給、或者可以在導 入宿主中時由載體本身供給。作為與這方面有關的優選實施方式，較合適的是載體是提供 可為誘導性及/或細胞型特異性的特異性表達的載體。此種載體中特別優選的載體是通過 如溫度以及營養添加物之類的易于操作的環境因素而具有誘導性的載體。在細菌中使用時，優選的載體例如包括pQE70、pQE60、以及pQE_9(可以從Qiagen 公司獲得)；PBS 載體、Phagescript 載體、Bluescript 載體、pNH8A、pNH16a、pNH18A、 pNH46A(可以從 Stratagene 公司獲得)；以及 ptrc99a、pKK223_3、pKK233_3、pDR540、 PRIT5 (可以從Phrmacia公司獲得)。另外，優選的真核生物載體包括pWLNEO、pSV2CAT、 pOG44、pXTl、以及 pSG (可以從 Stratagene 公司獲得)；以及 pSVK3、pBPV、pMSG 及 pSVL (可 以從Phrmacia公司獲得)。為了確認本發明的基因是否已導入宿主細胞中，進而確認其是否確實在宿主細胞 中表達，可以使用各種標記。即，表達載體優選包含至少一個選擇標記。作為此種選擇標 記，例如關于真核生物細胞培養，可以列舉二氫葉酸還原酶或新霉素耐性基因；關于大腸桿 菌以及其他細菌中的培養，可以列舉四環素耐性基因或氨芐西林(ampicillin)耐性基因 等耐藥性基因。另外，除此以外也可以使用宿主細胞中所缺失的基因作為標記，將包含此 標記與本發明的基因的質粒等作為表達載體導入宿主細胞中。由此，可以根據標記基因的 表達確認本發明的基因的導入。或者也可以使本發明的蛋白質以融合蛋白質的形式獲得 表達，例如也可以使用源自碗水母(aequoreacoerulescens)的綠色熒光蛋白質GFP (Green Fluorescent Protein)作為標記，使本發明的蛋白質以GFP融合蛋白質的形式獲得表達。 另外，本發明的基因也可以與包含用于在宿主細胞中的增殖的選擇標記的載體結合。另外，DNA插入優選可活動地連結于適當的啟動子(例如噬菌體λ PL啟動子、大 腸桿菌Iac啟動子、trp啟動子及tac啟動子、SV40早期啟動子及后期啟動子、以及逆轉錄 病毒LTR的啟動子)上。作為其他適當的啟動子，也可以利用從業人員周知的啟動子。在本發明中，適合使用的周知的細菌啟動子之中包括大腸桿菌IacI及IacZ啟動 子、T3啟動子及T7啟動子、gpt啟動子、λ PR啟動子及λ PL啟動子、以及trp啟動子。作 為適當的真核生物啟動子，可以列舉CMV前早期啟動子、IISV胸腺嘧啶脫氧核苷激酶啟動 子、早期SV40啟動子及后期SV40啟動子、逆轉錄病毒LTR的啟動子(例如勞氏肉瘤病毒 (RSV, RousSarcoma Virus)的啟動子)、以及金屬硫蛋白啟動子(例如小鼠金屬硫蛋白I啟 動子)。重組表達載體更優選包含用于轉錄開始、轉錄結束的部位，以及在轉錄區域中用 于翻譯的核糖體結合部位。利用載體構建物而獲得表達的成熟轉錄物的編碼部分在應翻譯 的多肽的起始部位包含轉錄開始AUG，而且在結束部位包含位于適當位置的終止密碼子。另外，利用高等真核生物的DNA的轉錄，可以通過向載體中插入增強子(enhancer)序列而增大。增強子以增大特定的宿主細胞型的啟動子的轉錄活性的方式發揮 作用，通常為約10 300bp的DNA的順式作用外因子。作為增強子的例子，可以列舉SV40 增強子(其位于復制起點的后期側上的100 270bp處)、巨細胞病毒的早期啟動增強子、 復制起點的后期側上的多瘤增強子、以及腺病毒增強子。另外，所述宿主細胞并無特別限定，可以優選使用先前公知的各種細胞。作為適 當的宿主的代表例，可以列舉菌體(例如大腸桿菌細胞、鏈霉菌(streptomyces)細胞、以 及鼠傷寒沙門氏桿菌(salmonella typhimurium)細胞)；真菌細胞(例如酵母細胞)；昆 蟲細胞(例如果蠅(drOSOphila)S2細胞以及甜菜夜蛾(spodoptera) Sf9細胞)；動物細胞 (例如CHO細胞、COS細胞、以及Bowes黑色素瘤細胞)；以及植物細胞。更具體而言，不僅可 以列舉人類或小鼠等哺乳類的細胞，而且例如以源自家蠶的細胞為首，可以列舉果蠅等昆 蟲、大腸菌(Escherichia coli)等細菌、酵母(作為出芽酵母的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或作為裂殖酵母的粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe))、作為線蟲 的秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditiselegans)、滑爪蟾(Xenopus laevis，非洲爪蟾)的卵母 細胞等，但并無特別限定。用于所述宿主細胞的適當的培養基以及條件可以利用該領域中 周知者。將所述表達載體導入宿主細胞中的方法，即轉化方法也無特別限定，可以優選使 用電穿孔法、磷酸鈣法、脂質體法、DEAE葡聚糖法、顯微注射法、陽離子性脂質媒介轉染、性 狀導入、感染等先前公知的方法。這些方法記載在如Davis等人所著的Basic Methods In Molecular Biology(1986)之類的許多標準研究室手冊中。再者，本發明也可以提供用于重組性地生成本發明的蛋白質的部分片段的包含編 碼本發明的蛋白質的部分片段的多核苷酸的重組表達載體，在重組表達載體中經基因操作 的轉化體(宿主細胞)。此外，本發明也可包括關于通過上述重組技術產生本發明的蛋白質、或者其片段 的發明。即，在本發明中，也可包括利用重組技術生產本發明的蛋白質或其片段的方法。通 過所述技術而生產的重組蛋白質，可以通過包括硫酸銨沉淀或乙醇沉淀、酸萃取、陰離子或 陽離子交換色譜法、磷酸纖維素色譜法、疏水性相互作用色譜法、親和色譜法、羥基磷灰石 色譜法、以及凝集素色譜法在內的眾所周知的方法從重組細胞培養物中回收，然后加以純 化。最優選將高效液相色譜法(“HPLC”)用于純化。(4)本發明的轉化體本發明的轉化體是導入有本發明的基因的轉化體，即導入有所述(3)項中所記載 的重組表達載體的轉化體。此處，所謂“導入有基因”是指通過公知的基因工程學方法(基 因操作技術)，可表達性地導入對象細胞(宿主細胞)內。另外，所述“轉化體”不僅包括細 胞、組織、器官，還包括生物個體。本發明的轉化體的制作方法(生產方法)可以列舉上述將重組表達載體轉化的方法。另外，成為轉化對象的生物也無特別限定，可以列舉所述宿主細胞中所例示的各種微生 物或動物(例如轉基因小鼠)。另外，只要選擇適當的啟動子或載體，則植物也可以作為轉 化的對象。(5)本發明的基因檢測工具本發明的基因檢測工具是將本發明的基因中的至少一部分堿基序列或其互補序列用作探針者。基因檢測工具可以在各種條件下用于本發明的基因的表達譜的檢測、測定等。作為本發明的基因檢測工具，例如可以列舉將與本發明的基因特異性雜交的所述 探針固定在基板(載體)上的DNA芯片。此處的“DNA芯片”主要是指將所合成的寡核苷酸 用于探針的合成型DNA芯片，但也包括將PCR產物等cDNA用于探針的粘附型DNA微陣列。用作探針的序列可以通過從cDNA序列中確定特征序列的先前公知方法來決 定。具體而言，例如可以列舉SAGE 基因表達系列分析(SerialAnalysis of Gene Expression)法(Science 276 1268,1997 ；Cell 88 243,1997 ；Science 270:484,1995; Nature 389 :300，1997 ；美國專利第 5，695，937 號)等。此外，制造DNA芯片時采用公知的方法即可。例如當使用合成寡核苷酸作為寡核 苷酸時，通過光刻(photolithography)技術與固相法DNA合成技術的組合，在基板上合成 該寡核苷酸即可。另一方面，當使用cDNA作為寡核苷酸時，使用陣列機將其粘附在基板上 即可。另外，與一般的DNA芯片相同，可以配置完全匹配探針(寡核苷酸)與在該完全匹 配探針中一個堿基經取代而成的錯配探針來進一步提升基因的檢測精度。此外，為了使不 同的基因同時進行檢測，也可以將幾種寡核苷酸固定在同一個基板上來構成DNA芯片。以下，對本發明的基因檢測工具進行更詳細的說明。〈基板〉作為本發明的基因檢測工具中所使用的基板的材質，只要是可以穩定固定寡核苷 酸的材質即可。例如可以列舉聚碳酸酯或塑料等合成樹脂、玻璃等，但并不限定于這些。基 板的形態也無特別限定，例如可以優選使用板狀、膜狀等的基板。<固定在基板表面的寡核苷酸>固定在本發明的基因檢測工具的基板表面的寡核苷酸，只要是以本發明的基因的 至少一部分堿基序列為基礎的寡核苷酸即可。通過在此寡核苷酸與來自樣本的核酸之間形 成雜交，可以檢測樣本中所包含的基因。再者，以下有時也將所述以本發明的基因的至少一 部分堿基序列為基礎的寡核苷酸稱為“捕捉寡核苷酸(capture oligo) ”。捕捉寡核苷酸只要以本發明的基因的堿基序列為基礎進行設計即可。因此，可以 是所述堿基序列本身，且只要與由檢測對象的樣本所制備的核酸形成特異性雜交，則可以 包含變異。變異的位置并無特別限定。捕捉寡核苷酸的長度(堿基數)并無特別限定，但如果過短，則雜交的檢測變得困 難，如果過長，則會允許非特異性雜交。本發明者對捕捉寡核苷酸的最佳長度進行反復研究 后，將標準長度設為12 50個堿基長度。優選12 40個堿基長度，更優選12 30個堿 基長度，再更優選13 22個堿基長度，但并不限定于這些。堿基長度主要依存于序列特性 (特定堿基的含有率，相同堿基的重復)，發明者確認結合性較佳者即使為短鏈也可以特異 性雜交。當捕捉寡核苷酸具有妨礙與來自樣本的核酸的雜交的發夾結構、環結構、或者其 以外的立體結構時，通過將構成捕捉寡核苷酸的一種以上的核苷酸取代為肌苷或者與任何 核苷酸均不配對的核酸，可解除其立體結構。捕捉寡核苷酸的合成法并無特別限定，通過公知方法(例如Maniatis，Τ. etal. , Molecular Cloning A Laboratory Manual, Second Edition, Cold SpringHarbor Laboratory Press (1989)中所記載的方法等)進行合成即可。一般可使用市售的DNA合成 機進行化學合成。在本發明的基因檢測工具中，優選不僅將所述基于本發明的基因的至少一部分堿 基序列的寡核苷酸固定在基板表面，而且將所謂的對照、捕捉寡核苷酸固定在基板表面。對 照、捕捉寡核苷酸包括陽性對照、捕捉寡核苷酸以及陰性對照、捕捉寡核苷酸。陽性對照、捕 捉寡核苷酸用于判定在下述探針制備步驟中擴增反應是否順利進行。陰性對照、捕捉寡核 苷酸用于確認未產生非特異性雜交，即未產生疑似陽性的雜交信號。本發明也包括將這些 陽性對照、捕捉寡核苷酸以及陰性對照、捕捉寡核苷酸固定在基板表面而成的基因檢測工 具。陽性對照、捕捉寡核苷酸以由檢測對象的樣本所制備的探針中所包含的堿基序列 為基礎進行設計即可。另外，當使用同一個基因檢測工具同時檢測幾個檢測對象樣本時，可 以針對各檢測對象的樣本來設計陽性對照、捕捉寡核苷酸，也可以根據由幾個檢測對象的 樣本所制備的探針中共通的堿基序列來進行設計。當所有由檢測對象的樣本所制備的探針 中不存在共通的堿基序列時，也可以針對幾組來設計陽性對照、捕捉寡核苷酸。或者，也可 以設計引物序列部分相同，且與成為對象的細菌的序列不同的人工序列，并將此序列的一 部分作為陽性對照、捕捉寡核苷酸。將所述人工序列作為模板來制備探針(在本說明書中， 將此種探針稱為對照探針)，并將其添加至由樣本所制備的探針中，由此可以驗證雜交的特 異性。此外，關于所述探針見下文。陰性對照、捕捉寡核苷酸優選設計為如下者在陽性對照、捕捉寡核苷酸的堿基序 列中，在1個堿基以上、且未滿此序列所具有的堿基數的20%的范圍內包含人為的堿基取 代的堿基序列。進行堿基取代的堿基數是由與雜交條件的關系所決定，選擇源自檢測對象 樣本的探針不會產生雜交的堿基數即可。檢測對象的樣本并無特別限定。另外，固定在1個基板上的捕捉寡核苷酸為至少 一種以上即可，并無特別上限。最優選將本發明的基因檢測工具也制成如下的工具，即將多 個本發明的基因的部分片段(分別具有不同的堿基序列者)作為捕捉寡核苷酸固定在1個 基板上的所謂微陣列型的工具。<寡核苷酸(捕捉寡核苷酸)的固定化>將寡核苷酸固定在基板表面的固定化方法并無特別限定，適當選擇使用公知方法 即可。例如可以利用物理性吸附、電性結合或者分子共價結合等一般雜交法中所使用的方 法。在本發明的基因檢測工具中，優選使用表面具有碳二亞胺基或異氰酸酯基的基材(美 國專利US5，908，746、日本專利特開平8-23975號)來進行固定化。當對寡核苷酸進行點樣(spotting)時，如果寡核苷酸的點量過少，則無法充分確 保寡核苷酸與探針之間的反應性，判定變得困難。另外，高集成度的點樣不僅在技術方面 存在問題，同時也耗費成本，進而在使用探針的熒光標識或化學發色等的雜交信號的檢測 中也需要更精密且昂貴的檢測裝置(例如掃描儀)。因此，優選將寡核苷酸以直徑為10 1，000 ym的尺寸固定在基板的表面。將寡核苷酸點樣在基板上的點樣方法并無特別限定。 例如可以使用點樣機將寡核苷酸溶液在基板上點樣，由此來進行。由此，寡核苷酸溶液通常 點樣為大致圓形。
(6)使用本發明的蛋白質或其部分片段的檢測工具本發明的檢測工具是將本發明的蛋白質中的至少一部分氨基酸序列用作探針的 檢測工具。即，也可以稱之為將本發明的蛋白質或其部分片段固定化的檢測工具。所述檢 測工具可以在各種條件下用于與本發明的蛋白質相互作用的物質(多肽、核酸、抗體等)的 檢測、測定等。作為本發明的檢測工具，例如可以列舉將與識別本發明的蛋白質的抗體特異性結 合的所述探針固定在基板(載體)上而成的檢測工具等。用作探針的氨基酸序列優選使用 本發明的蛋白質中的與本發明的抗體特異性相互作用的部分，即本發明的蛋白質的抗原表 位保有肽。作為本發明的檢測工具中所使用的基板的材質，只要是可以穩定固定寡肽的材質 即可。例如可以列舉聚碳酸酯或塑料等合成樹脂、玻璃等，但并不限定于這些。基板的形態 也無特別限定，例如可以優選使用板狀、膜狀等的基板。另外，將寡肽固體在基板上的方法可以利用先前公知方法，并無特別限定。例如可 以列舉利用共價結合法或吸附法使寡肽與不溶性載體結合的方法、利用高分子物質將寡 肽的四周包圍的包埋固定化方法(entrappingimmobilization method)、使用交聯劑等將 寡肽固定在支持體上的方法等。再者，可以根據欲固定化的基板與寡肽的配合性、固定化物 的利用目的而選擇最佳固定化方法。(7)本發明的基因、蛋白質等的有用性如上所述，本發明的基因以及蛋白質是在皰疹病毒的潛伏感染時進行特異性表達 者，可認為該蛋白質具有如下功能通過在腦內星形膠質細胞等神經膠質細胞中進行表達， 能夠誘發宿主的精神障礙。此外，令人感興趣的是明確本發明的基因以及蛋白質具有與精神障礙患者的關 聯性。更詳細而言，如下述實施例所示，在約5成的以情緒障礙為中心的各種精神障礙患者 體內檢測出抗SITH-1抗體，另一方面，在健康者體內幾乎未檢測出抗SITH-1抗體(在健康 者中檢測出抗SITH-1抗體的比率約小于2% )。如上所述，本發明者獨自發現本發明的蛋白質的特異性抗體有意義地存在于以情 緒障礙為中心的精神障礙患者體內，而在健康者體內幾乎未檢測出此種抗體這一現象。此 外，由于精神障礙是指意識、智力、記憶、情感、思考、行動之類的精神功能的障礙，因此本發 明中的“精神障礙”是指在日常生活或者社會生活中受到相當大的限制的狀態。另外，“情 緒障礙”是指持續的情緒或者情感的變化，異常地體驗抑郁或者高漲的情感，并給日常生活 功能或社會功能帶來障礙的狀態。關于此種“本發明的蛋白質的特異性抗體有意義地存在于精神障礙患者體內，而 在健康者體內幾乎未檢測出”的現象的詳細原因，目前正在努力研究中，但本發明的蛋白質 具有在潛伏感染被誘導再活化的中間階段會活躍地生成的性質。可認為皰疹病毒(例如 HHV-6)是通過壓力來誘導其再活化，從而制作本發明的蛋白質。可認為占精神障礙患者約 5成的具有針對本發明的蛋白質的抗體的患者，由于壓力或某種遺傳性因素，而導致本發明 的蛋白質在作為HHV-6的潛伏感染細胞的腦內星形膠質細胞等神經膠質細胞中大量地長 時間地進行表達。其結果為可認為星形膠質細胞等神經膠質細胞內的鈣濃度長時間地持 續上升，血清素的代謝等星形膠質細胞等神經膠質細胞的重要的功能受到阻礙，由此引發精神障礙。另外，可認為在慢性疲勞癥候群(CFS)患者的精神障礙中，針對本發明的蛋白質 的抗體的保有率較高的原因是因為CFS患者與健康人相比，大量的HHV-6在體內潛伏感染 的情況更多，且也容易產生本發明的蛋白質(SITH-1蛋白質)。此外，根據迄今為止所報告 的潛伏感染特異性基因產物與CFS患者的抗體反應的結果，也反應了 CFS患者與健康人相 比有更多HHV-6在體內潛伏感染這一事實(參照非專利文獻5)。如上所述，雖然只在精神障礙患者體內檢測出針對本發明的蛋白質的抗體這一現 象的詳細的機理尚不明確，但通過利用所述現象，可以提供有助于客觀判斷精神障礙的判 定方法或診斷方法。另外，同時本發明也涉及判定套件、診斷套件、模型動物的制作方法、藥 劑篩選方法。以下，對各方法進行詳細說明。(7-1)本發明的判定方法本發明的判定方法只要是可判定在被實驗對象生物體內是否存在識別本發明的 蛋白質的抗體、即識別所述(a)或(b)中所記載的蛋白質的抗體的方法即可。再者，術語 “被實驗對象生物”是指人類以及人類以外的哺乳類動物。對于抗體的測定，例如可以通過與此抗體所識別的蛋白質或其部分片段的結合反 應而檢測。即，在本判定方法中，優選使用此抗體所識別的蛋白質或其部分片段，判定此抗 體在免疫學(利用抗原抗體反應)上是否存在。此外，“部分片段”優選至少包含抗原表位 保有肽。作為本判定方法的一例，可以列舉如下方法使固定有本發明的蛋白質或其部分 片段的不溶性載體與從被實驗對象生物體內所采集的生物學樣本接觸后，加以清洗，然后 檢測與此不溶性載體上的蛋白質或其部分片段特異性結合的抗體。而且，與該不溶性載體 上的蛋白質或其部分片段特異性結合的抗體例如是來自被實驗對象生物的抗體，因此可以 使用針對被實驗對象生物的抗體的特異性抗體、即所謂的2次抗體而容易地檢測。此時，通 過使2次抗體含有染料、酶或者放射性或熒光標識來增強檢測，可使檢測變得更加容易。S卩，作為本判定方法中所使用的抗體測定法，可以列舉利用如熒光抗體法、斑點雜 交測定法、西方墨點法、酶聯免疫吸附測定法(包括ELISA、夾心ELISA法)、放射性免疫測 定法(RIA)、以及免疫擴散測定法之類的傳統免疫組織學方法的測定法。這些測定法為了分 子的固定化及檢測而利用如親和素(avidin)以及生物素(biotin)之類的分子，制備這些 試劑的技術以及使用其的方法可以利用從業人員所公知的技術。此外，作為本判定方法的 結果，可以獲得用于病理學試驗的組織切片的免疫組織學染色。另外，本判定方法優選使用從被實驗對象生物體內分離出的生物學樣本來進行。 術語“分離出的生物學樣本”只要是包含從被實驗對象生物體內采集的細胞、組織或者其殘 片等的樣本即可，除末梢血液、唾液、尿、糞便以外，還包含細胞樣本等，并無特別限定，就皰 疹病毒在末梢血液中的巨噬細胞中也潛伏感染這一事實而言，特別優選使用從被實驗對象 生物體內采集的末梢血液。在此情況下，還具有被實驗對象生物的侵襲度低這一優點。生物學樣本中存在的抗體的量，例如可使用線性回歸計算機運算法，通過與標準 制備物(例如健康者的標準樣本或者典型精神障礙患者的標準樣本)中所存在的量的比較 而簡單地計算出。用于檢測抗體的此種測定法，例如ELISA在Iacobelli等人所著的Breast Cancer Research and Treatment 11 :19-30 (1988)中有所記載。作為適合的酶標識，例如可以列舉來自可通過與基質反應催化生成過氧化氫的氧
22化酶群的酶標識。葡萄糖氧化酶由于具有良好的穩定性，而且其基質(葡萄糖)容易獲得， 因此特別優選。氧化酶標識的活性可以通過測定由酶_標識抗體/基質反應所形成的過 氧化氫的濃度來測定。除酶以外，作為其他適合的標識，可以列舉放射性同位素(例如碘 (1251、1211)、碳(14C)、硫(35S)、氚(3H)、銦(112In)、以及锝("mTc))，以及熒光標識(例如熒光 素及羅丹明)及生物素。從被實驗對象生物體內獲得的生物學樣本中的抗體(針對本發明的蛋白質的抗 體)水平，除可利用上述免疫測定法進行檢測以外，例如也可以利用圖像分析在體內進行 檢測。即，由于針對本發明的蛋白質的抗體也是蛋白質，因此通過使用可特異性識別此抗體 的抗體，可以利用圖像分析在體內檢測從被實驗對象生物體內獲得的生物學樣本中的抗體 (針對本發明的蛋白質的抗體)水平。作為用于抗體的體內圖像分析的抗體標識或者標記，可以列舉能夠通過X射 線照相術、NMR(Nuclear Magnetic Resonance,核磁共振)、或者 ESR(Electron Spin Resonance,電子自旋共振)進行檢測者。關于X射線照相術，作為適合的標識，可以列舉可 發射能夠檢測的放射線，但對被檢測體并無明顯傷害的鋇或者銫之類的放射性同位素。作 為適用于NMR以及ESR的標記，可以列舉能夠利用相關聯的雜交瘤的營養成分的標識而導 入抗體中的如氘之類的具有可檢測的特征性自旋的元素。利用如放射性同位素(例如131I、mIn、99mTC)、射線不透性(radio-opaque)基質、 或者通過核磁共振能夠檢測的物質之類的適當的可檢測的圖像分析部分，標識針對本發明 的蛋白質的抗體的特異性抗體或抗體片段，再將其導入被用于障礙試驗的哺乳動物體內 (例如非經口的、皮下、或者靜脈內)。本領域的技術人員可以理解用于產生診斷用的圖 像所必需的圖像分析部分的量是由被檢測體的大小以及所使用的圖像分析系統來決定。在 放射性同位素部分的情況下，對于人類被檢測體，所注射的放射活性的量通常約為5 20 毫居里的范圍的"mTc。繼而，標識抗體或者抗體片段優先儲存在包含針對本發明的蛋白 質的抗體的細胞的位置。此外，關于體內的腫瘤的圖像分析，在S.W.Burchiel等人所著的 “Immunopharmacokinetics ofRadiolabeled Antibodies and Their Fragments，， (Turner Imaging 第 13 章TheRadiochemical Detection of Cancer, Burchiel, S. ff.以及 Rhodes, B. A.編，Masson Publishing Inc. (1982))中有所記載。關于可以在本發明中利用的標識，以下揭示具體例。作為適合的酶標識的 例子，可以列舉蘋果酸脫氫酶(malate dehydrogenase)、金黃色葡萄球菌核酸酶 (staphylococcus nuclease)、_母乙醇月兌MBI (yeast alcoholdehydrogenase)、a _ 甘油 石舞酸月兌fiBI ( a -glycerophosphate dehydrogenase)、石舞酸丙||異構SI (triose phosphate isomerase)、過氧化物酶(peroxidase)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase)、天冬酉先胺酶 (asparaginase)、葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)、3 -半乳糖苷酶(3 -galactosidase)、 核糖核酸酶(ribonuclease)、脲酶(urease)、過氧化氫酶(catalase)、葡萄糖_6_磷酸脫 氧酶(glucose-6-phosphatedehydrogenase)、糖化酶(glucoamylase)、以及乙酉先膽堿酉旨酶 (acetylcholinesterase)。作為適合的放射性同位素標識的例子，可以列舉3H、mIn、125I、131I、32P、35S、14C、 51Cr、57T0、58C0、59Fe、75Se、152EU、9°Y、67CU、217Ci、211At、212Pb、47SC、1(l9Pd 等。mIn 是采用體內成像 時優選的同位素。其原因在于其可避免因利用1251或者1311所標識的單克隆抗體會被肝臟脫鹵化的問題。此外，此放射性核素具有更優選用于成像的、射線放射能(Perkins等 人所著的 Eur. J. Nucl. Med. 10 :296_301 (1985) ；Carasquillo 等人所著的 J. Nucl. Med. 28 281-287(1987))。例如，使用1_(P_異硫氰酸酯芐基)-DPTA與單克隆抗體耦合的mIn幾 乎未表現出進入非腫瘤性組織(特別是肝臟)的情況。因此，增強腫瘤局部化的特異性 (Esteban 等人所著的 J. Nucl. Med. 28 861-870 (1987))。作為適合的非放射性同位素標識的例子，可以列舉157Gd、55Mn、162Dy、52Tr、以及
56Fe0作為適合的熒光標識的例子，可以列舉152Eu標識、熒光素標識、異硫氰酸酯標識、 羅丹明標識、藻紅蛋白標識、藻藍蛋白標識、別藻藍蛋白標識、鄰苯二醛標識、以及熒光胺 (fluorescamine)標識。作為適合的毒素標識的例子，可以列舉白喉毒素、賴氨酸、以及霍亂毒素。作為化學發光標識的例子，可以列舉魯米諾(luminal)標識、異魯米諾 (isoluminal)標識、芳香族吖啶酯標識、咪唑標識、吖啶鹽標識、草酸酯標識、蟲熒光素 (luciferin)標識、熒光素酶(luciferase)標識、以及水母發光蛋白(aequorin)標識。作為核磁共振造影劑的例子，可以列舉如Gd、Mn、以及Fe之類的重金屬原子核。用于使所述標識與抗體結合的代表性技術是由Kennedy等人所著的(Clin. Chim. Acta 70:1-31(1976))以及 Schurs 等人所著的(Clin. Chim. Acta81 :1_40(1977))所提供。 后者中所提及的耦合技術是戊二醛方法、過碘酸方法、二馬來酰亞胺方法、間馬來酰亞胺芐 基-N-羥基-丁二酰亞胺酯方法，這些方法均作為參考而引用至本說明書中。(7-2)診斷方法本發明的診斷方法只要使用所述判定方法即可，其他具體的構成、條件等并無特 別限定。例如在被實驗對象的患者或被實驗動物體內，可以將存在本發明的抗體的情況作 為指標，判定此被實驗對象的患者或被實驗動物患有精神障礙。另外，當將本發明的抗體的 定量值作為指標進行診斷時，也能夠以健康者的定量值(正常值)或典型精神障礙患者的 定量值(疾病值)為參考設定適當的臨界值，如果超過或者低于此臨界值，則診斷為患有精 神障礙的可能性高。在本發明中，精神障礙的發病會導致所述抗體的量增加，因此例如將健 康者的定量值(正常值)設定為臨界值時，如果被實驗者的測定值超過此臨界值，則可判定 為患有精神障礙的可能性高。此外，在本說明書中，術語“被實驗者”是指人類，“被實驗動物”是指人類以外的動 物，例如包括小鼠、大鼠、以及猴子等，只要是人類以外的動物，任何動物均可成為“被實驗 動物”。因此，根據本診斷方法，可以簡便且正確地診斷被實驗對象生物是否患有精神障 礙、或者被實驗對象生物是否有患上精神障礙的可能性。另外，針對被實驗動物的診斷方 法，在例如開發精神障礙的治療藥時的藥劑篩選、或者用于試驗藥劑效果的動物實驗等中 非常有用。(7-3)判定套件、診斷套件本發明的判定套件或診斷套件只要是用于實施所述(7-1)項中所說明的判定方 法、或者所述(7-2)項中所說明的診斷方法者即可，其所包含的具體的構成、材料、機器等 并無特別限定。具體而言，為了從免疫學上檢測本發明的抗體，優選包含以下的(i) (iii)中的任意物質。(i)本發明的蛋白質，(ii) (i)的部分片段(優選包含抗原表位保有 肽)，(iii)將⑴或(ii)固定化的檢測工具。如果使用如上所述的構成的套件，則可簡便且可靠地實施本發明的判定方法或診 斷方法，因此此套件非常有用。另外，除所述構成以外，也可包含用于實施所述判定方法或診斷方法的各步驟的 物質。例如為了從被實驗對象生物體內采集樣本，也可以包含例如注射器等作為用于采集 末梢血液的器械，還可列舉用于實施本判定方法或診斷方法的所需物，例如各種試劑(例 如用于進行ELISA等免疫學反應的試劑類等)或實驗工具。另外，還可包含為了更加簡便 且正確地進行所述判定而需要的各種運算裝置(例如計算機等)或軟件。(7-4)模型動物的制作方法、判定法、篩選方法、評價方法本發明的診斷方法可以在除人類以外的精神障礙模型動物的制作法、判定有用性 的方法、以及使用此種模型動物的藥物篩選中，應用于判定藥物的有效性的方法。即，當制 作精神障礙模型動物時，如實施例中所述，可以利用載體等將SITH-1蛋白質導入動物的腦 內來制作精神障礙模型。另外，當判定精神障礙模型動物的有用性時，與所述判定方法或診 斷方法相同，可以根據有無本發明的抗體，判斷被實驗動物是否出現精神障礙的癥狀，如果 此動物出現精神障礙的癥狀，則判定其可用作精神障礙模型動物。在所述各種方法中，更優選結合利用目前為止已知的動物的行為障礙或恐怖反應 等的診斷方法來作為評價方法。具體而言，動物實驗的診斷可以使用懸尾實驗或強迫游泳 實驗等行為障礙相關試驗或、者恐怖反應等已知的腦功能試驗。另外，此處的“被實驗動物”只要是人類以外的動物即可，優選特別適合用作實驗 動物的小鼠、大鼠、豚鼠、狗、兔子、猴子、黑猩猩等。由于對于人類以外的動物的精神障礙的 判定(診斷)更加困難，所以此方法極為有用。此外，向此種模型動物給予精神治療藥物或 者抗精神病藥(治療或改善精神障礙的藥劑)的候選物質后，除行為障礙的檢查以外，如上 所述般檢測本發明的抗體，如果精神障礙得到治愈或改善，則可判斷所述候選物質具有抗 精神障礙作用。即，只要利用本發明的診斷方法，便可容易且可靠地篩選精神治療藥物的候 選物質。此處所謂“精神治療藥物的候選物質”可以是試驗者所期望的任意物質。此外，本發明的判定方法或診斷方法等的主題在于，通過檢測針對在皰疹病毒的 潛伏感染時進行特異性表達的蛋白質的抗體，提供用于判定是否患有精神障礙的客觀判定 方法，而并不在于本說明書中所具體記載的各個操作。因此，使用所述各操作以外的操作的 判定方法或診斷方法也屬于本發明的范圍。除此以外，由于皰疹病毒的感染與實施例中也提到的CFS等伴有免疫不全的疾 病(例如克羅恩病(Crohn disease)等自身免疫性疾病等)、或者藥物誘導超敏癥候群 (Drug-induced hypersensitivity syndrome)等被認為與HHV-6有關的皮膚疾病、或者由 HHV-6所引起的腦炎、腦病的關聯性，因此可認為本發明針對這些疾病也能夠客觀地診斷、 評價。即，通過利用本發明的蛋白質以及基因等，可將其用作提示HHV-6有參與的各種 疾病的疾病標記。另外，本發明也包括導入上述本發明的基因、此基因產物(例如由基因所編碼的 蛋白質)或者具有此基因的重組表達載體而成的模型動物。如上所述，本發明的基因與精神障礙相關，因此導入本基因、本基因產物(例如被基因編碼的蛋白質等)、或者具有該本 基因的重組表達載體而成的模型動物表現出精神障礙的癥狀。作為所述精神障礙的癥狀， 除躁郁癥樣癥狀、狂躁癥樣癥狀、抑郁癥樣癥狀以外，例如基于檢查方法還可列舉精神分裂 癥樣癥狀。成為對象的動物只要可用作實驗動物，則并無特別限定，特別優選哺乳動物，例如 可以列舉小鼠、大鼠、猴子等。另外，所述基因、基因產物以及重組表達載體的導入方法可利用先前公知方法，并 無特別限定。例如，此蛋白質在腦內的表達方法可以是利用腺病毒載體的方法，也可以是利 用逆轉錄病毒載體的方法(參照下述實施例)，當然也可以是利用除此以外的載體的方法。 另外，可以是通過一般的轉基因(制作轉基因小鼠)來導入基因的方法。此外，也可以是直 接將該蛋白質接種于腦內的方法。此種精神障礙模型動物可以較好地用于精神障礙的治療法的研究，藥劑效果的研 究、判定，藥劑以外的治療方法(溫熱療法等)的評價等，且非常有用。此外，也可以進行關于精神障礙的發病原因的研究。例如通過研究疲勞或壓力在 何種程度上對誘導精神障礙產生作用，而可用于精神障礙的發病預防的研究。以下揭示實施例來對本發明的實施方式進行更詳細的說明。當然，本發明并不限 定于以下的實施例，且詳細部分可能有各種形態。此外，本發明并不限定于上述實施方式， 可以在權利要求所示的范圍內進行各種變更，適當組合所揭示的各種技術方法而獲得的實 施方式也包括在本發明的技術范圍內。[實施例]<1.編碼潛伏感染蛋白質SITH-1的基因產物(mRNA)的鑒定>從非專利文獻1中所示的HHV-6潛伏感染的巨噬細胞中分離出信使RNA(mRNA)， 使用IE4RB作為隨機引物以及正義轉錄物(sense transcripts)的逆轉錄用引物，并使用 IE2FB作為反義轉錄物(anti-sense transcript)的逆轉錄用引物來進行逆轉錄反應。其 后使用引物IE4RB與IE2FB并利用PCR法使逆轉錄產物(cDNA)擴增，然后使用內側的引物 IE4RA與IE2FA并通過雙巢式(double-nested) PCR法使此產物擴增。圖1表示公知的增殖 感染時的mRNA與正義轉錄物(H6LT)與新穎潛伏感染特異性基因的位置關系、以及潛伏感 染特異性蛋白質SITH-1的開放閱讀框。SITH-1以及新穎潛伏感染特異性基因的序列信息 參照序列表。其結果為與由在HHV-6增殖感染的MT_4細胞中表達的mRNA擴增的351bp的產 物、以及非專利文獻3中所示的由HHV-6在巨噬細胞(MO)內的潛伏感染時所檢測出的潛 伏感染特異性基因產物(HHV-61atency-associated transcript :H6LT)擴增的351bp的產 物均不同的925bp的產物獲得擴增。由于與來自HHV-6DNA的擴增產物1241bpt不同，僅由HHV-6潛伏感染細胞的反義 轉錄產物的逆轉錄產物進行擴增，因此顯示其為目前尚未發現的新穎潛伏感染特異性基因 產物(參照圖2)。圖2中，“R”表示隨機引物，“S”表示正義轉錄產物，“anti-S”表示反義 轉錄產物。為了確定此新穎潛伏感染特異性基因mRNA的結構，實施5' -cDNA末端快速擴增 (5' -rapid amplification of cDNA ends) (RACE)法與 3' -RACE 法來確定 5'-末端與
263'-末端，同時確定整個堿基序列(參照圖3)。IE4RB 5' GATGCTCCTTCTTCCACATTACTGG 3‘IE2FB 5' CATCCCATCAATTATTGGATTGCTGG 3‘IE2FA 5' GAAACCAC-CACCTGGAATCAATCTCC 3‘.
IE4RA 5 ‘ GACACATTCTTGGAAGCGATGTCG 3‘Nl 5' GCTGGGTAGTCCCCACCTTTCTAGA 3‘.α Fl 5' CTGAAGCATGTAAGCACATCTCTTGC 3‘α Rl 5' GCTTCGAGATCAGTAGTGGTACG 3‘<2.新穎潛伏感染特異性基因蛋白質SITH-I的功能分析>為了研究蛋白質SITH-I的功能，進行蛋白質SITH-I在細胞內所結合的宿主蛋白 質的鑒定。其方法為將蛋白質SITH-I作為誘餌蛋白(bait)，并通過酵母雙雜交法進行 人類胎兒腦cDNA庫的篩選。將其結果示于圖4。圖4中，A是通過SITH-I與CAML的結 合，而可見較強的半乳糖苷酶表達的酵母的克隆體。B是通過西方墨點法與抗CAML抗 體的染色，來確認可以通過體外的沉淀實驗(pull-down assay)并利用在大腸菌中表達的 GST-SITH-I融合蛋白質使在大腸菌中表達的CAML共沉淀的圖。C是表示通過西方墨點法與 抗FLAG抗體的染色確認利用表達載體將貼有FLAG標簽的SITH-I與CAML導入到293T細 胞中，通過抗CAML抗體可以使SITH-I共沉淀的結果的圖。如圖4所示，顯示蛋白質SITH-I 與 CAML(Calcium-signalmodulating cyclophilin ligand)強力結合(圖 4)。有報告稱，CAML是在淋巴球或腦內表達較強的蛋白質，已知其具有使細胞內鈣濃 度上升的功能。因此，對蛋白質SITH-I是否經由CAML使細胞內鈣濃度上升進行了研究。具 體而言，利用抗SITH-I抗體與抗CAML抗體，通過熒光抗體法對SITH-I獲得表達的星形膠 質細胞樣神經膠質細胞株(U373)與未處理的U373細胞進行染色。其結果為如果使蛋白 質SITH-I在星形膠質細胞株(U373)中獲得表達，則可觀察到CAML的量與未處理的U373 細胞相比有所增加(圖5)。此外，U373細胞中的CAML表達水平在未處理時并不強，但通過 使SITH-I表達，觀察到CAML的量增加。另外，利用毒胡蘿卜素(TGjhapsigargin)來刺激使用逆轉錄病毒載體將SITH-1 導入星形膠質細胞樣神經膠質細胞株(U373)中所得者、以及僅導入載體者，再使用Fura2 測定細胞內鈣濃度。其結果為實際測定細胞內鈣濃度時，與僅導入載體的細胞相比， SITH-I獲得表達的星形膠質細胞的細胞內鈣濃度會因毒胡蘿卜素(TG)刺激而顯著上升 (圖 6)。由此可知，蛋白質SITH-I具有通過在蛋白質HHV-6的潛伏感染時進行表達，并使細胞內CAML的量增加，而使星形膠質細胞樣神經膠質細胞株的細胞內鈣濃度上升的功能。<3. SITH-I與精神障礙的關系>其次，對SITH-I與精神障礙的關系進行了調查。將其結果示于圖7。針對SITH-I 的抗體與非專利文獻5等中所報告的潛伏感染基因蛋白質不同，與慢性疲勞癥候群患者本 身的關聯性較低，但在具有精神障礙的患者中有高比率的抗體攜帶者。伴有精神癥狀的慢 性疲勞癥候群(CFS)患者主要表現出抑郁癥狀的情況居多，而兒童的CFS患者主要表現出 異常的興奮性的情況居多。雙極I型表示癥狀較強的躁郁病患者。另外，健康成人幾乎未 攜帶針對SITH-I的抗體。此外，以SITH-I獲得表達的293T細胞作為抗原，通過熒光抗體法來測定抗體效價。<4.通過SITH-I的表達制作精神障礙模型小鼠>利用腺病毒載體或者逆轉錄病毒載體，將在SITH-I的開放閱讀框上游附加有 于星形膠質細胞等神經膠質細胞中進行特異性表達的膠質纖維酸性蛋白(GFAP，glial fibrillary acidic protein)啟動子所成者注射到新生小鼠的腦內。在約4 5周后觀察 小鼠的行動，確認通過導入SITH-I而建立了精神障礙模型小鼠。有關精神障礙的試驗，是采用在抑郁癥或躁郁癥等的觀察中經常使用的通過懸尾實驗與強迫游泳實驗進行研究。具體而言，首先進行利用腺病毒載體而導入有SITH-I的小 鼠的懸尾實驗。其結果為導入有SITH-I的小鼠的不動時間顯著減少，可知此小鼠為躁狂 狀態(圖8)。繼而，進行利用逆轉錄病毒載體而導入有SITH-I的小鼠的強迫游泳實驗。其 結果為以高效價(high)導入有SITH-I逆轉錄病毒載體的小鼠與作為對照的導入有增強 型綠色熒光蛋白(EGFP, enhanced green fluorescence protein)基因的小鼠相比，不動時 間延長，顯示呈抑郁狀態。相對于此，可知以低效價(low)導入有SITH-I逆轉錄病毒載體 的小鼠的不動時間縮短，且呈躁狂狀態(圖9)。即，在懸尾實驗中觀察到躁狂狀態，而通過 強迫游泳實驗觀察到躁狂狀態與抑郁狀態。另外，通過導入SITH-I時的逆轉錄病毒載體的 效價觀察到躁狂狀態與抑郁狀態兩者的情況，不僅表示此模型可以成為抑郁癥與躁郁癥兩 者的模型，還提示SITH-I的表達量會影響精神障礙的癥狀。此外，通過測定前脈沖抑制(Pr印ulse inhibition)來研究在躁郁癥或精神分裂 癥中可觀察到異常的恐怖反應異常。具體而言，對利用腺病毒載體而導入有SITH-I的小 鼠的恐怖反應(前脈沖抑制)進行了調查。其結果如圖10所示可知導入有SITH-I的小 鼠的前脈沖抑制顯著減少，且小鼠對于刺激非常過敏。因此，在恐怖反應中也觀察到顯著異 常，顯示SITH-I對與精神障礙相關的腦功能有較大影響。<5.通過SITH-I的表達制作精神障礙模型小鼠2>其次，將SITH-I的開放閱讀框連結在GFAP啟動子下，并利用腺病毒載體使其在 小鼠的神經膠質細胞中進行表達，3周后通過轉輪活動(Wheelrurming activity)(轉輪旋 轉)測定自主活動量。將結果示于圖11。如該圖所示，SITH-I獲得表達的小鼠與作為對照的EGFP (enhancedgreen fluorescence protein)獲得表達的小鼠相比，自主活動亢進，顯示變成躁狂狀態的傾向。<6.通過SITH-I的表達制作精神障礙模型小鼠3>接著，將SITH-I的開放閱讀框連結在GFAP啟動子下，并利用慢病毒載體使其在小 鼠的神經膠質細胞中進行表達，8周后通過轉輪活動(轉輪旋轉)測定自主活動量。將其結 果示于圖12。 如該圖所示，SITH-I獲得表達的小鼠與作為對照的EGFP (enhancedgreen fluorescence protein)獲得表達的小鼠相比，自主活動量受到抑制，顯示變成抑郁狀態的 傾向。 如圖11與圖12所示，可知相同的SITH-I表現出躁狂狀態與抑郁狀態這一相反的 現象。認為其原因是存在以下的不同1)腺病毒載體中的SITH-I的表達量多于慢病毒載 體；2)由于慢病毒載體可以使SITH-I更長時間地獲得表達，因此觀察到SITH-I長時間表 達的影響。
這些通過SITH-I的表達可以制作躁狂狀態與抑郁狀態的模型小鼠的事實，與從 郁癥患者與抑郁癥患者兩者體內檢測出針對SITH-I的抗體這一臨床結果相符。
<7.以SITH-I作為指標的診斷〉針對利用SITH-I的診斷也可用于并發抑郁癥的其他疾病的診斷行了調查。將其 結果示于圖13。如圖13所示利用抗SITH-I抗體的診斷對于抑郁癥、躁郁癥、慢性疲勞癥候群之 類的情緒障礙具有非常高的特異性，在迄今為止的研究中，意外地發現所述診斷對于克羅 恩病患者也顯示較高的陽性率。但對于類似疾病的潰瘍性大腸炎未顯示出陽性。但是，已知克羅恩病是“抑郁癥狀”的并發非常多的疾病，圖13中的抗SITH-I抗 體陽性者是克羅恩病本身是重癥，且產生抑郁癥狀的并發的例子。此例子表示，在作為被分 類為自身免疫性疾病的慢性疾病的克羅恩病患者中，即使是表現出抑郁癥狀的重癥例，也 可以進行利用SITH-I的“抑郁癥”的診斷，可以認為利用抗SITH-I抗體的檢查“也可用于 由非精神科疾病的其他疾病所引起的抑郁癥的診斷”。[產業上的利用可能性]如上所述，本發明的基因以及蛋白質是參與皰疹病毒的潛伏感染的因子，通過以 其作為指標，可以客觀判定否患有精神障礙。因此，本發明不僅在學術、基礎研究上有價值， 在臨床醫學上也非常有意義。因此，在各方面具有產業上的可利用性。
權利要求
一種基因，其特征在于其編碼以下(a)或(b)中所記載的蛋白質，(a)由序列編號1所示的氨基酸序列所構成的蛋白質，(b)由序列編號1的氨基酸序列中，一個或數個氨基酸經取代、缺失、插入及/或附加的氨基酸序列所構成，且具有使細胞內鈣濃度上升的活性的蛋白質。
2.一種基因，其特征在于其含有序列編號2所示的堿基序列作為開放閱讀框區域。
3.一種基因，其特征在于其是在嚴格的雜交條件下與由下述堿基序列構成的DNA雜 交，且編碼具有使細胞內鈣濃度上升的活性的蛋白質，其中，所述堿基序列與由序列編號2 所示的堿基序列所構成的DNA互補。
4.一種蛋白質，其特征在于其由根據權利要求1至3中任一項所述的基因所編碼。
5.一種蛋白質，其特征在于其是以下(a)或(b)中所記載的蛋白質，(a)由序列編號1所示的氨基酸序列所構成的蛋白質，(b)由序列編號1的氨基酸序列中，一個或數個氨基酸經取代、缺失、插入及/或附加的 氨基酸序列所構成，且具有使細胞內鈣濃度上升的活性的蛋白質。
6.一種抗體，其特征在于其可識別根據權利要求4或5所述的蛋白質。
7.—種重組表達載體，其特征在于其包含根據權利要求1至3中任一項所述的基因。
8.一種轉化體，其特征在于其是導入根據權利要求1至3中任一項所述的基因或根 據權利要求7所述的重組表達載體而成。
9.一種基因檢測工具，其特征在于使用根據權利要求1至3中任一項所述的基因中 的至少一部分堿基序列或其互補序列作為探針。
10.一種檢測工具，其特征在于使用具有根據權利要求4或5所述的蛋白質中的至少 一部分氨基酸序列的多肽作為探針。
11.一種判定方法，其特征在于判定被實驗對象生物體內是否存在根據權利要求6所 述的抗體。
12.根據權利要求11所述的判定方法，其特征在于所述判定方法是使用根據權利要 求4或5所述的蛋白質或者其部分片段，從免疫學上檢測是否存在根據權利要求6所述的 抗體。
13.根據權利要求11或12所述的判定方法，其特征在于所述判定方法是使用從被實 驗對象生物體內分離出的生物學樣本來進行。
14.一種判定套件，其特征在于其是用于根據權利要求11至13中任一項所述的判定方法。
15.根據權利要求14所述的判定套件，其特征在于其包含選自以下所示的(i) (iii)的物質中的至少一種物質，(i)根據權利要求4或5所述的蛋白質，(ii)(i)的部分片段，(iii)將⑴或( )固定化而得到的工具。
16.一種診斷方法，其診斷被實驗者是否有精神障礙，其特征在于包括判定步驟，使用根據權利要求11至13中任一項所述的判定方法，判定所述被實驗者體 內是否存在根據權利要求6所述的抗體；以及判斷步驟，在所述判定步驟中判定存在根據權利要求6所述的抗體時，判斷所述被實驗者患有精神障礙。
17.根據權利要求16所述的診斷方法，其特征在于所述診斷方法是使用從被實驗者 體內分離出的生物學樣本來進行。
18.—種診斷方法，其診斷被實驗動物是否有精神障礙，其特征在于包括判定步驟，使用根據權利要求11至13中任一項所述的判定方法，判定所述被實驗動物 體內是否存在根據權利要求6所述的抗體；以及判斷步驟，在所述判定步驟中判定存在根據權利要求6所述的抗體時，判斷所述被實 驗動物有精神障礙。
19.一種診斷套件，其特征在于其是用于根據權利要求16至18中任一項所述的診斷方法。
20.根據權利要求19所述的診斷套件，其特征在于包含選自以下所示的(i) (iii) 的物質中的至少一種物質，(i)根據權利要求4或5所述的蛋白質，(ii)(i)的部分片段，(iii)將⑴或( )固定化而得到的工具。
21.—種模型動物的判定方法，其判定被實驗動物是否可用作精神障礙的模型動物，其 特征在于包括診斷步驟，通過根據權利要求18所述的診斷方法，診斷所述被實驗動物是否有精神障 礙；以及判定步驟，在所述診斷步驟中，以被實驗動物有精神障礙的情況作為指標，判定所述被 實驗動物可用作精神障礙的模型動物。
22.—種模型動物，其特征在于其是導入根據權利要求1至3中任一項所述的基因、 此基因產物、或者根據權利要求7所述的重組表達載體而成。
23.—種篩選方法，其篩選精神治療藥物的候選物質，其特征在于包括 對精神障礙的模型動物給予被實驗物質的步驟；通過根據權利要求18所述的診斷方法，診斷所述模型動物的精神障礙是否得到治愈 或改善的步驟；以及以所述模型動物的精神障礙得到治愈或改善作為指標，判定所述被實驗物質是精神治 療藥物的候選物質的步驟。
全文摘要
本發明的蛋白質以及基因是參與皰疹病毒的潛伏感染的因子。在約50％的精神障礙患者體內檢測出針對此因子的抗體，而在健康者體內幾乎未檢測出此種抗體。另外，導入有SITH-1的小鼠表現出躁郁癥或抑郁癥樣的精神障礙。因此，基于所述事實，可以提供一種能夠客觀地判定精神障礙的方法以及精神障礙模型動物。
文檔編號C07K14/03GK101809153SQ200880108759
公開日2010年8月18日 申請日期2008年9月25日 優先權日2007年9月27日
發明者小林伸行, 近藤一博 申請人:日本煙草產業株式會社;株式會社威魯斯醫科學研究所