專利名稱：肽及其用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及肽和它們在治療細菌感染中的用途。
背景技術：
抗微生物肽是先天免疫系統的關鍵效應分子和所有真核生物抗微生物感染的第一道防線的必需成分。許多原核生物還利用抗微生物肽作為抗爭來自其他微生物挑戰的手段。許多抗微生物肽的特征是有利于與微生物膜帶負電荷的磷脂相互作用的陽離子特性，然后隨著膜的通透而導致微生物的裂解和死亡。例如，已表明抗微生物肽分子能夠在脂雙層聚集并形成電壓依賴性通道，導致微生物的內膜和外膜都通透(Lehrer，R.I.，J.Clin.Investigation，84553(1989))。這些分子的兩親性質還可以有利于通過靜電吸引使疏水性殘基插入到脂雙層中，而使極性殘基伸入膜和突出在膜上。
隨著感染率持續上升，而有效的控制方法變得越來越有限，藥物抗性微生物，特別是細菌變得越來越成問題。在過去的50來年，對抗生素的大量使用，加上抗生素的濫用處方和患者對治療方案的非依從性，已經選擇出了已發展出或已獲得抗生素耐受的微生物。抗藥生物體的傳播和控制正成為醫療保健中最顯著的問題之一。
特別值得注意的是，已發展出或已獲得對諸如甲氧苯青霉素(甲氧西林)等抗生素的各種不同水平抗性的葡萄球菌屬(Staphylococcus spp.)菌株。這些菌株一般被稱為甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(MRSA)。此外，凝固酶陰性葡萄球菌，如表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)，也已成為重要的醫院病原體。從裝置相關感染物中分離的大約80％的表皮葡萄球菌是甲氧苯青霉素抗性(MRSE)以及多重抗性的。用于由甲氧苯青霉素抗性細菌如MRSA和MRSE參與或引起的感染的治療選擇目前是有限的，迫切需要發現抑制或殺死這種生物體的新療法。
銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是機會致病菌，其導致尿路感染、呼吸系統感染、皮炎、軟組織感染、菌血癥和各種全身性感染，尤其是在免疫抑制的嚴重燒傷者和癌癥及AIDS患者中。由銅綠假單胞菌引起的呼吸道感染幾乎專有地在具有受損的下呼吸道或受損的全身性防御機制的個體中發生。原發性肺炎發生于慢性肺病和充血性心力衰竭患者。菌血癥性肺炎一般發生于接受化療的中性粒細胞減少的癌癥患者。常見囊性纖維化患者的下呼吸道被銅綠假單胞菌的粘液菌株定植，且很難治療。需要開發治療銅綠假單胞菌感染的有效方法。
盡管有來自數百萬年共存的進化壓力，但是由于微生物病原體并不易于獲得對陽離子肽的抗性，因此有許多開發陽離子肽作為潛在抗微生物療法的商業興趣和努力。例如，在發明人的共同在審申請WO 2006/018652中，發明人描述了可以用于治療微生物感染包括某些細菌感染的肽的確定。
仍然迫切需要能夠用于治療諸如那些由葡萄球菌和假單胞菌菌株引起的細菌感染的進一步的抗微生物活性物質。
發明內容
本發明部分基于發現精氨酸或賴氨酸的均聚物具有較強的殺菌性，因此能有效治療細菌感染。
一方面，本發明提供作為抗細菌劑使用的肽，其中所述肽的氨基序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
在本發明的優選肽中，所述序列的氨基酸為堿性氨基酸。
在優選肽中，所述堿性氨基酸選自賴氨酸、精氨酸和組氨酸，尤其是賴氨酸和精氨酸。更優選的堿性氨基酸為精氨酸。
在此所使用的“基本上”是相對修飾詞，旨在表明從所修飾的特征中允許的變異。具體地，通過“所述氨基酸序列中基本上所有的氨基酸都是相同的”，意味著序列中的全部或者高比例的氨基酸都是相同的。“高比例”涵蓋在序列中可以存在1或2個取代。
在一個優選方面，本發明提供作為藥物使用的包含根據式(I)的氨基酸序列的肽或其肽變體， (X) (I) 其中X為氨基酸，精氨酸或賴氨酸。
在本發明的肽中，X可以為精氨酸。
在本發明的肽中，X可以為賴氨酸。
在本發明的肽中，X可以為組氨酸。
在本發明的一個優選方面，所述肽包含5至15個堿性氨基酸組成的序列。
在一個優選方面，本發明的肽包含9至15個例如10至15或10至13個堿性氨基酸組成的序列，其中所述氨基酸序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。更優選地，本發明的肽包含9至13個例如11至13個堿性氨基酸序列，其中所述序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
在進一步優選方面，本發明提供作為藥物使用的包含根據式(II)的氨基酸序列的肽或其肽變體， (X)n(II) 其中X為氨基酸，精氨酸或賴氨酸，且n為5至15之間的整數。
在本發明的優選肽中，X為精氨酸。
在本發明的肽中，n可以是9至15之間的整數，如9、10、11、12、13、14或15。在本發明的優選肽中，n為9至14之間的整數，例如11至14之間的整數。優選n為13或14。
在式(I)的肽中，X可以是D-或L-氨基酸。
在一個優選方面，本發明提供由根據式(I)的氨基酸組成的線性肽。
本發明還包括上述氨基酸的已知的異構體(結構、立體、構象和構型)和結構類似物，包括模擬肽以及經自然(如翻譯后修飾)或化學修飾的那些，所述化學修飾包括但不限于磷酸化、糖基化、磺酰化和/或羥基化。
此外，可以修飾所述肽的氨基酸序列以得到肽變體，所述肽變體包括肽中至少一個氨基酸殘基取代另一個氨基酸殘基例如堿性或非堿性殘基，包括利用D而不是L型的取代，其中所述變體保留相應非變體肽的部分(通常至少10％)或全部生物學活性。因此，本發明提供肽變體，其中一個或更多個式(I)的賴氨酸或精氨酸殘基被一個或更多個其他殘基(如組氨酸)取代。
在此所使用的術語“肽”，概括地說，是指通過肽鍵連接在一起的多個氨基酸殘基。與多肽、寡肽和蛋白的含義相同，可替換使用。
本發明的肽一般是合成肽。所述肽可以是分離、純化的肽或其變體，其可以例如通過固相肽合成法、通過酶催化肽合成或借助于重組DNA技術在體外合成。
本發明的肽可以以不同的形式如游離酸、游離堿、酯和其他前藥、鹽和互變異構體存在，且本發明包括肽的所有變體形式。因此，本發明包括肽的鹽或前藥。
本發明的肽可以以藥學上可接受的鹽的形式給予。因此，本發明包括本發明的肽的藥學上可接受的鹽，其中該母體化合物通過制備其酸式鹽或堿式鹽進行修飾，所述酸式鹽或堿式鹽例如由如無機或有機酸或堿形成的常規無毒鹽或季銨鹽。這種酸加成鹽的實例包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、palmoate、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。堿式鹽包括銨鹽，堿金屬鹽如鈉和鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣和鎂鹽，與有機堿成的鹽如二環己基胺鹽，N-甲基-D-谷氨酸鹽以及與氨基酸如精氨酸、賴氨酸等成的鹽。另外，含氮的堿性基團可以被試劑季銨化，所述試劑諸如低級烷基鹵化物如甲基、乙基、丙基和丁基氯、溴和碘；二烴基硫酸鹽如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸鹽；長鏈鹵化物如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基氯、溴和碘，芳烷基鹵化物如苯甲基和苯乙基溴以及其他。
本發明的肽或肽變體的羧基鹽可以通過使肽與一當量或更多當量的期望堿相接觸的常見方法制備，所述堿例如金屬氫氧化物堿如氫氧化鈉；金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽如碳酸鈉或碳酸氫鈉；或者胺堿如三乙胺、三乙醇胺等。
給藥和藥物制劑 本發明另一方面提供包含本發明的藥學上有效量的肽的藥物組合物。
所述組合物還包含藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。在此使用的短語“藥學上可接受的”用于指那些在正確的醫學判斷范圍內，適合用于與人或有些情況可能是動物的組織相接觸的化合物、材料、組合物和/或劑型，它們沒有過度的毒性、刺激性、過敏性反應或其他問題或并發癥，與合理的效益/風險比相稱。
為達到期望的效果，肽、其變體或它們的組合可以單次或多次劑量給予，例如，以至少大約0.01mg/kg體重至大約500-750mg/kg體重，至少大約0.01mg/kg體重至大約300-500mg/kg體重，至少大約0.1mg/kg體重至大約100-300mg/kg體重或者至少大約1mg/kg體重至大約50-100mg/kg體重或者至少大約1mg/kg體重至大約20mg/kg體重的劑量給予，不過其他劑量也能提供有益效果。
為制備組合物，肽被合成或以其他方式獲得，根據需要或期望純化，隨后凍干并使其穩定。然后可將所述肽調整至適當的濃度并任選與其他試劑組合。
因此，包含本發明的治療肽的一種或更多種合適的單位劑型可以通過各種途徑給予，所述途徑包括口服、局部、腸胃外(包括皮下、靜脈內、肌內和腹膜內)、陰道、直腸、皮膚、經皮、胸內、肺內和鼻內(呼吸)途徑。該治療肽還可以制成脂質制劑或者配制用于緩釋(例如，使用微膠囊，參見WO 94/07529和第4,962,091號美國專利)。適當地，該制劑可以方便地以分散單位劑型提供，并可以通過制藥領域熟知的任何方法制備。這些方法可以包括將治療劑與液體載體、固體基質、半固體載體、微細的固體載體或它們的組合混合的步驟，然后若有必要，將產品引入或成形為期望的遞送系統。
當本發明的治療肽制備用于口服給藥時，它們一般與藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑相結合形成藥物制劑或單位劑型。用于口服給藥，所述肽可以以粉末、顆粒形態、溶液、懸浮液或乳液存在。
包含本發明的治療肽的藥物制劑可以與常見賦形劑、稀釋劑或載體一起配制并制成片劑、膠囊劑、溶液劑、混懸劑、粉劑、氣霧劑等。
本發明的治療肽還可以制成便于口服給藥的酏劑或溶液劑，或者制成適合腸胃外給藥的溶液劑，所述腸胃外給藥例如通過肌內、皮下、腹腔內或靜脈內途徑進行。本發明的治療肽的藥物制劑還可以采用水溶液或無水溶液或分散體的形式，或者可選擇地，采用乳劑或混懸劑或軟膏的形式。
本發明的治療肽可以制成用于腸胃外給藥(如通過注射，例如團注或持續輸注)，并可以以單位劑型存在于安瓿、預裝注射器、小容量輸注容器或多劑量容器中。
這些制劑可以包含本領域內熟知的藥學上可接受的載體、介質(vehicle)和助劑。例如為制備溶液，可能使用除水之外的一種或多種從生理學角度上可接受的有機溶劑，該有機溶劑選自例如丙酮、乙酸、乙醇、異丙醇、二甲基亞砜、乙二醇醚如商品名為“Dowanol”的產品、聚乙二醇和聚氧乙烯、短鏈酸的C1-C4烷基酯、乳酸乙酯或乳酸異丙酯、脂肪酸甘油三酯如商品名為“Miglyol”的產品、豆蔻酸異丙酯(isopropyl mytrisate)，動物、礦物和植物油以及聚硅氧烷。
優選的給藥途徑為局部給藥。對于局部給藥，肽可以按照本領域內已知的用于直接施用于目標部位例如指甲和皮膚的方式進行配制。主要適用于局部施用的形式采用例如漆劑(laquer)、乳膏、乳劑(milk)、凝膠、粉劑、分散體或微乳液、較大或較小程度上增稠的洗劑、浸漬墊(impregnated pad)、軟膏或棒劑、氣霧劑制劑(如噴霧劑或泡沫劑)、皂劑、清潔劑、洗劑或皂塊的形式。用于此目的的其他常規形式包括傷口敷料、涂層繃帶或其他聚合物遮蓋物、軟膏、乳膏、洗劑、糊劑、凝膠劑、噴霧劑和氣霧劑。因此，本發明的治療肽可以通過貼劑或繃帶遞送用于皮膚給藥。
本發明的肽可能可以例如通過一些經皮遞送裝置的形式經皮給藥。這種裝置是有利的，尤其是對于抗生素化合物給藥而言，因為相對于例如口服或靜脈內藥物，它們可以允許延長治療期。經皮遞送裝置的實例可以包括如適于通過患者皮膚釋放肽的貼劑、敷料、繃帶或硬膏劑。本領域技術人員熟悉可用于經皮遞送化合物或物質的材料和技術，示例性的經皮遞送裝置在GB2185187、US3249109、US3598122、US4144317、US4262003和US4307717中有記載。例如，本發明的肽可以與一些基質或物質，如非水成聚合物載體相結合，使其適合用于經皮遞送系統。所述肽/基質或物質混合物還可以使用機織物或編織物、無紡布、相對透氣的網眼織物來進一步加強，以制備可暫時附著于患者身體特定部位的貼劑、繃帶、硬膏劑等。以這種方式，經皮遞送裝置與患者皮膚接觸時，按需要直接在感染部位或通過皮膚釋放出化合物或物質。
本發明的肽還可以作為消毒或清潔助劑用于例如在體表上減少和/或消除細菌引起的感染。例如，在作為消毒或清潔劑使用之前，本發明的肽可以加入或稀釋于合適的賦形劑或溶液中。示例性的賦形劑已在上文描述。這種消毒或清潔溶液可以用于消毒如家具、地板、包括諸如專業醫院設備和/或外科手術設備的設備。在另一個實施方案中，本發明的肽可以用于消除和/或減少身體部位尤其是例如手上的細菌污染。所述肽可以作為水或非水溶液稀釋(溶解于水、非水或有機溶劑中)，可以被施用到身體部位，例如手。
本發明的肽還可以給藥至呼吸道。因此，為了在本發明的方法中使用，本發明還提供氣霧劑藥物制劑和劑型。一般地，這種劑型包含有效治療或預防特定感染、適應癥或疾病的臨床癥狀的本發明的至少一種試劑的量。依照本發明的方法治療的感染、適應癥或疾病的一種或更多種癥狀在統計學上的任何顯著性減輕，都被認為是在本發明的范圍內治療該感染、適應癥或疾病。
本發明的肽可以作為與一種或更多種已知的抗微生物劑一起的組合療法提供。通常本發明的肽以用于感染治療的單一療法提供。
應用 本發明的肽可以用于治療或預防各種細菌感染。
因此，本發明另一方面提供根據本發明的肽或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療或緩解由細菌參與或引起的感染的藥物中的用途。所述細菌可以是革蘭氏陰性或革蘭氏陽性菌。
根據本發明的應用，所述細菌感染可以由選自以下但是不限于以下的細菌引起乏養菌屬(Abiotropha spp)、無色桿菌屬(Achromobacter spp)、氨基酸球菌屬(Acidaminacoccus spp)、不動桿菌屬(Acinetobacter spp)、放線桿菌屬(Actinobacillus spp)、馬杜拉放線菌屬(Actinomadura spp)、放線菌屬(Actinomyces spp)、氣球菌屬)(Aerococcus spp)、氣單胞菌屬(Aeromonas spp)、產堿桿菌屬(Alcaligenes spp)、厭氧孤菌屬(Anaerovibrio spp)、無形體屬(Anaplasma spp)、隱秘桿菌屬(Arcanobacterium spp)、節桿菌屬(Arthrobacterspp)、芽孢桿菌(Bacillus spp)、擬桿菌屬(Bacteroides spp)、巴爾通氏體屬(Bartonella spp)、包特氏菌屬(Bordatella spp)、包特氏菌屬(Bordetella spp)、疏螺旋體屬(Borrelia spp)、短螺旋體屬(Brachyspira spp)、布氏桿菌屬(Brucella spp)、伯克霍爾德氏菌屬(Burkholderia spp)、鞘桿菌屬(Calymmatobacterium spp)、彎曲菌屬(Campylobacter spp)、二氧化碳嗜纖維菌屬(Capnocytophaga spp)、心桿菌屬(Cardiobacterium spp)、卡托氏菌(Catonella spp)、衣原體屬(Chlamydia spp)、金黃桿菌屬(Chryseobacteriumspp)、檸檬酸桿菌屬(Citrobacter spp)、梭菌屬(Clostridium spp)、棒狀桿菌屬(Corynebacterium spp)、考克斯氏體屬(Coxiella spp)、皮膚桿菌屬(Dermabacter spp)、脫硫弧菌屬(Desulfovibrio spp)、小桿菌屬(Dialisterspp)、氣球菌屬(Dolosicoccus spp)、狡詐菌屬(Dolosigranulum spp)、愛德華菌屬(Edwardsiella spp)、依格斯氏菌屬(Eggerthella spp)、埃立克體屬(Ehrlichia spp)、艾肯菌屬(Eikinella spp)、穩桿菌屬(Empedobacter spp)、腸桿菌屬(Enterobacter spp)、腸球菌(Enterococcus spp)、丹毒絲菌屬(Erysipelothrix spp)、埃希氏菌屬(Escherichia spp)、優桿菌屬(Eubacteriumspp)、費克藍姆菌屬(Facklamia spp)、產線菌屬(Filifactor spp)、黃色單胞菌屬(Flavimonas spp)、黃桿菌屬(Flavobacterium spp)、熒光桿菌屬(Fluoribacter spp)、弗朗西斯氏菌屬(Francisella spp)、梭形桿菌屬(Fusobacterium spp)、加德納菌屬(Gardnerella spp)、孿生菌屬(Gemella spp)、格魯比卡氏菌屬(Globicatella spp)、顆粒鏈菌屬(Granulicatella spp)、嗜血桿菌屬(Haemophilus spp)、哈夫尼亞菌屬(Hafnia spp)、螺桿菌屬(Helicobacter spp)、鹽球菌屬(Helococcus spp)、不活動粒菌屬Ignavigranumspp)、寄居昆蟲(Inquilinus spp)、金氏菌屬(Kingella spp)、克雷伯菌屬(Klebsiella spp)、克呂沃爾菌屬(Kluyvera spp)、不動蓋球菌屬(Kytococcusspp)、乳桿菌屬(Lactobacillus spp)、乳球菌屬(Lactococcus spp)、軍團菌屬(Legionella spp)、鉤端螺旋體(Leptospira spp)、纖毛菌屬(Leptotrichia spp)、明串珠菌屬(Leuconostoc spp)、李斯特菌屬(Listeria spp)、巨球形菌屬(Megasphaera spp)、微球菌屬(Micrococcus spp)、小多孢菌屬(Micropolyspora spp)、動彎桿菌屬(Mobiluncus spp)、莫拉氏菌屬(Moraxellaspp)、摩根菌屬(Morganella spp)、分枝桿菌屬(Mycobacterium spp)、支原體屬(Mycoplasma spp)、氣味黃桿菌(Myroides spp)、奈瑟菌屬(Neisseria spp)、諾卡氏菌屬(Nocardia spp)、東方體屬(Orientia spp)、伯克氏菌屬(Pandoraeaspp)、巴氏桿菌屬(Pasteurella spp)、片球菌屬(Pediococcus spp)、消化鏈球菌屬(Peptostreptococcus spp)、光桿菌屬(Photorhabdus spp)、鄰單胞菌屬(Plesiomonas spp)、卟啉單胞菌屬(Porphyromonas spp)、普氏菌屬(Prevotellaspp)、丙酸桿菌屬(Propionibacterium spp)、變形桿菌屬(Proteus spp)、普羅威登斯菌屬(Providencia spp)、假單胞菌屬、勞爾氏菌屬(Ralstonia spp)、根瘤菌屬(Rhizobium spp)、紅球菌屬(Rhodococcus spp)、立克次體屬(Rickettsiaspp)、羅沙利馬體屬(Rochalimaea spp)、玫瑰單胞菌屬(Roseomonas spp)、羅氏菌屬(Rothia spp)、沙門氏菌屬(Salmonella spp)、新月形單胞菌(Selenomonas spp)、小蛇菌屬(Serpulina spp)、沙雷氏菌屬(Serratia spp)、志賀氏菌屬(Shigella spp)、Sneathia菌屬、葡萄球菌屬、窄食單胞菌屬(Stenotrophomonas spp)、鏈桿菌屬(Streptobacillus spp)、鏈球菌屬(Steptococcus spp)、鏈霉菌屬(Streptomyces spp)、Streptophomonas菌屬、高溫放線菌屬(Thermoactinomyces spp)、高溫單孢菌屬(Thermomonosporaspp)、密螺旋體屬(Treponema spp)、Tropheryma屬、脲原體屬(Ureaplasmaspp)、漫游球菌屬(Vagococcus spp)、韋榮氏球菌屬(Veillonella spp)、弧菌屬(Vibrio spp)、魏斯菌屬(Weisella spp)、威廉西亞菌屬(Williamsia spp)、耶爾森菌屬(Yersinia spp)。
根據本發明的應用，所述細菌感染可以由葡萄球菌屬例如金黃色葡萄球菌或表皮葡萄球菌引起，或者與其相關。所述金黃色葡萄球菌感染可以是甲氧苯青霉素抗性或甲氧苯青霉素敏感性的金黃色葡萄球菌菌株。
根據本發明的應用，所述細菌感染可以由假單胞菌屬例如銅綠假單胞菌引起，或者與其相關。
根據本發明的應用，所述細菌感染可以由丙酸桿菌屬例如痤瘡丙酸桿菌引起，或者與其相關。
根據本發明的應用，所述細菌感染可以由醫院細菌病原體，例如葡萄球菌屬(如金黃色葡萄球菌或表皮葡萄球菌)或假單胞菌屬(如銅綠假單胞菌)引起，或者與其相關。
本發明還提供本發明的肽或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療或緩解由細菌感染參與或引起的疾病或病癥的藥物中的用途。
所述疾病或病癥可以由革蘭氏陽性菌感染引起，或者與其有關，所述疾病或病癥，例如瘡(boil)、癤、蜂窩織炎、膿皰病、醫院感染、菌血癥、肺炎、骨髓炎、心內膜炎、腦膜炎、膿腫(abcesses)、囊性纖維化、胃腸感染、泌尿生殖器感染、敗血癥、咽炎、壞死性筋膜炎、急性腎小球腎炎、中耳炎(otilis media)、創傷感染(包括燒傷)、炭疽、腦炎、白喉、氣性壞疽、肉毒中毒以及破傷風。
所述疾病或病癥可以由革蘭氏陰性菌感染引起，或者與其有關，所述疾病或病癥包括淋病、腦膜炎、肺炎、中耳炎、骨髓炎、囊性纖維化、泌尿生殖器感染、腹膜炎、結膜炎、敗血癥、性病、菌血癥、醫院感染、痢疾、胃腸感染、傷寒、肺鼠疫、創傷感染、霍亂、腎臟感染、類鼻疽、結膜炎、百日咳、兔熱病、布氏菌病、軍團病、消化性潰瘍、斑疹傷寒、咽炎。
根據本發明可治療的其他疾病或病癥，包括膿皮病、結核病、麻風病、布魯里(buruli)潰瘍、回歸熱、萊姆病、梅毒、呼吸道感染、泌尿生殖器感染。
根據本發明的應用，要治療的疾病或病癥可以是機會性細菌感染例如由通常不致病的細菌引起的細菌感染，或者由已知在身體部位通常與該細菌病原體的感染不相關的細菌病原體引起的細菌感染。例如，機會性感染可以由葡萄球菌屬如金黃色葡萄球菌或表皮葡萄球菌引起。一個另外的應用，要治療的疾病或病癥可以為機會性細菌感染，例如由假單胞菌屬如銅綠假單胞菌引起的，或與其相關的細菌感染。
細菌感染在免疫受損寄主中參與或引起主要的臨床疾病包括但是不限于，尿路感染、呼吸道感染、皮炎、軟組織感染、菌血癥、骨和關節感染、胃腸感染以及各種全身性感染，尤其是在嚴重燒傷、癌癥、囊性纖維化或AID患者中。對這些疾病的治療是本發明的優選方面。
在一個實施方案中，本發明提供式(I)的肽或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療細菌感染，如機會性細菌感染的藥物中的用途，在式(I)中，n為11至15之間的整數(尤其是11至13之間的整數)。
本發明的另一方面提供用于細菌感染的治療、預防或延緩進展的方法，該方法包括向患者給予治療有效量的根據本發明的肽或其藥學上可接受的鹽。
優選地，所述患者為哺乳動物，尤其是人。
本發明的方法可治療的細菌感染可以是機會性感染，例如社區獲得性感染或醫院感染。
在本發明的優選方法中，所述肽或其藥學上可接受的鹽旨在作為用于吸入或腸胃外給藥的制劑。
因此，在一個實施方案中，本發明提供用于細菌感染的治療、預防或延緩進展的方法，該方法包括向患者給予治療有效量的包含根據本發明的肽或其藥學上可接受的鹽的氣霧劑制劑。本發明還提供包含根據本發明的肽或其藥學上可接受的鹽的氣霧劑制劑，包括包含所述氣霧劑制劑的吸入器。
在另一個實施方案中，本發明提供用于細菌感染的治療、預防或延緩進展的方法，該方法包括向患者給予治療有效量的包含根據本發明的肽或其藥學上可接受的鹽的腸胃外制劑。本發明還提供包含根據本發明的肽或其藥學上可接受的鹽的腸胃外制劑(尤其是靜脈內)。
本發明涵蓋表1的內容，該表提供根據本發明可治療的細菌感染及其致病細菌的非排他性列表。
表1 革蘭氏陽性菌 革蘭氏陰性菌 其他細菌 根據本發明可治療的具體疾病和病癥的診斷，可以由本領域技術人員通過從血液、組織、尿液等中分離致病性細菌隨后測定肽的殺菌/抑菌作用很容易地確定。
保護的范圍包括含有或意圖含有本發明的化合物的仿制品或假品，不論它們是否在事實上包含了這種化合物，也不論任意一種該化合物是否以治療有效量包含。
可以理解地，與本發明的具體方面、實施方案或實施例相關聯描述的特征、整數、特性、化合物、化學組成部分和基團都可被應用于在此描述的任何其他方面、實施方案或實施例，除非與此不相容。
以下實施例例示本發明。
實施例 材料和方法 所有的肽都是通過與肽供應商NeoMPS SA(法國斯特拉斯堡)的合同進行固相合成制備，或者購自Sigma-Aldrich化學試劑公司(英國普爾)。
陽離子肽序列 分析的肽序列示于表2中。Ac表示在寡肽C-端的乙酰化修飾，NH2表示寡肽N-端的酰胺化。
培養基稀釋抗細菌敏感性試驗 使用為臨床和實驗室標準化協會(Clinical Laboratory Standard Institute，CLSI；前身為NCCLS)已批準的標準測定相關細菌菌株對肽的敏感性。使用“厭氧生長細菌的稀釋法抗微生物藥物敏感性試驗；批準標準-第7版M7-A7(Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria ThatGrow Anaerobically；Approved Standard-Seventh Edition M7-A7)”測試細菌的敏感性。
結果 肽的抗細菌活性示于表2中。
表2肽抗細菌的最小抑菌濃度(除非指明為(D)，所有的肽都是L異構體，*數值的單位為mg/ml)。
權利要求
1.作為抗細菌劑使用的肽，其中所述肽的氨基序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
2.如權利要求1所述的肽，其中所述序列中基本上所有的氨基酸都是堿性氨基酸。
3.如權利要求1或2所述的肽，其中所述堿性氨基酸選自賴氨酸、精氨酸和組氨酸。
4.如權利要求3所述的肽，其中所述堿性氨基酸選自賴氨酸和精氨酸。
5.作為藥物使用的肽或其肽變體，其包含根據式(I)的氨基酸序列，
(X)(I)
其中X為堿性氨基酸。
6.如權利要求5所述的肽，其中所述肽包含5至15個堿性氨基酸序列。
7.如權利要求5或權利要求6所述的肽，其中X為精氨酸。
8.如權利要求5或權利要求6所述的肽，其中X為賴氨酸。
9.如權利要求5或權利要求6所述的肽，其中X為組氨酸。
10.如前述任一項權利要求所述的肽或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療或緩解由細菌參與或引起的感染的藥物中的用途。
11.如權利要求10所述的用途，其中所述細菌為葡萄球菌屬(Staphylococcus spp)。
12.如權利要求10所述的用途，其中所述細菌為假單胞菌屬(Pseudomonas spp)。
13.如權利要求1至9中任一項所述的肽或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療或緩解由細菌感染參與或引起的疾病或病癥的藥物中的用途。
14.如權利要求13所述的用途，其中所述疾病或病癥選自瘡、癤、蜂窩織炎、膿皰病、醫院感染、菌血癥、肺炎、骨髓炎、心內膜炎、腦膜炎、膿腫、囊性纖維化、胃腸感染、泌尿生殖器感染、敗血癥、咽炎、壞死性筋膜炎、急性腎小球腎炎、中耳炎、創傷、炭疽、腦炎、白喉、氣性壞疽、肉毒中毒以及破傷風。
15.如權利要求13所述的用途，其中所述疾病或病癥選自淋病、腦膜炎、肺炎、中耳炎、骨髓炎、囊性纖維化、泌尿生殖器感染、腹膜炎、結膜炎、敗血癥、性病、菌血癥、醫院感染、痢疾、胃腸感染、傷寒、肺鼠疫、創傷、霍亂、腎臟感染、類鼻疽、結膜炎、百日咳、兔熱病、布氏菌病、軍團病、消化性潰瘍、斑疹傷寒、咽炎。
16.如權利要求13所述的用途，其中要治療的疾病或病癥由機會性細菌感染參與或引起。
17.如權利要求16所述的用途，其中所述疾病或病癥選自在嚴重燒傷、癌癥、囊性纖維化或AIDS患者中的尿道感染、呼吸道感染、皮炎、軟組織感染、菌血癥、骨和關節感染、胃腸感染和全身性細菌感染。
18.用于細菌感染的治療、預防或延緩進展的方法，包括向患者給予治療有效量的如權利要求1至9中任一項所述的肽或其藥學上可接受的鹽。
19.如權利要求18所述的方法，其中所述肽或其藥學上可接受的鹽經腸胃外給予。
20.如權利要求18所述的方法，其中所述肽或其藥學上可接受的鹽通過吸入給予。
21.一種氣霧劑制劑，其包含如權利要求1至9中任一項所述的肽或其藥學上可接受的鹽。
全文摘要
本發明涉及作為抗細菌劑使用的肽或其肽變體，其中所述肽的氨基序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
文檔編號C07K7/06GK101641371SQ200880009199
公開日2010年2月3日 申請日期2008年1月28日 優先權日2007年2月2日
發明者D·奧尼爾 申請人:諾瓦生命科學有限公司