專利名稱：從牛膽汁中提取膽紅素的方法
技術領域：
本發明涉及一種從動物膽汁中提取膽紅素的方法，尤其涉及一種從 牛膽汁中提取膽紅素的方法。
背景技術：
膽紅素作為人工牛黃的主要成分，在醫藥中廣泛得以利用。膽紅素 的提取主要是從動物膽汁中提取的。目前，有關膽紅素提取的方法不斷 增多，但總體歸納為二類， 一是直接法，也稱為一步法，如中國專利
97125601.2 "—步法提取膽紅素的工藝"；二是間接法，也稱為兩步法， 如中國專利88105159. 4公布的"牛膽汁提取膽紅素的生產工藝"、中國 醫藥雜志1990.21 (8)期中提供的"用鈣鹽法從牛膽汁中提取膽紅素"。 這兩類方法各有優劣，但考慮到穩定性，大多選用間接法。間接法生產 膽紅素，如上述的"用鈣鹽法從牛膽汁中提取膽紅素"，首先必須經過 鈣化階段，使膽紅素以鈣鹽的形式析出，其中所用的膽鈣鹽形成劑是石 灰水，然后將膽鈣鹽酸化，再用有機溶劑提取和精制，即得膽紅素精品。 上述間接法所存在的問題如下
一、 物動膽汁中主要含有膽紅素、膽綠素和膽酸等，其中膽紅素極 不穩定，對熱、光和氧很敏感，在膽汁的收集和保存過程中，膽紅素很 容易因受熱、見光、見空氣而被氧化形成膽綠素，從而影響膽紅素的收 率，這是影響膽紅素收率的重要因素之一。
二、 在上述生產工藝中的膽紅素鈣化階段，常因鈣化不完全而造成 膽紅素不同程度的損失，據計算，按上述鈣化過程，膽紅素損失的百分 率達到20%~30%，甚至更高。因此，鈣化過程是否完全，是影響膽紅素 收率的重要因素之二。影響膽紅素鈣化的主要因素是料液的酸度(PH
值)，其次是料液中鈣離子的濃度，溫度的影響不明顯，而且允許ra值
波動的范圍狹窄。如果能在保證酸度的前提下，又有足夠的鈣離子濃度，就可保證結合型膽紅素醋鍵斷裂而與足夠量的鈣離子結合，使膽紅素形 成鈣鹽而析出。但是，已有技術中所用的膽鈣鹽形成劑是呈強堿性的石
灰水(氫氧化鈣)，用它形成膽鈣鹽時，存在著PH值合適時轉離子濃度
低的情況，但為了提高鈣離子濃度而增加石灰水時，又會使ra值升高 而偏堿性，這種矛盾限制了膽鈣鹽的完全形成，影響膽鈣鹽的收率。 由于以上的兩個原因，現有間接法的膽紅素收率較低， 一般是在
0.003 0.005化間，最高也只能達到0.008先左右。
發明內容
本發明的目的是針對已有技術中的問題，提供一種改進的從牛膽汁 中提取膽紅素的方法，以提高膽紅素的收率。 為實現上述目的，本發明的步驟如下
一、 牛膽汁中膽綠素的還原
在鮮的或保存的牛膽汁中加入還原劑2 5毫升/升，所述的還原劑 為2 59^度的維生素C、磯氨化鈉、亞琉酸鈉或亞琉酸氫鈉，用氫氧 化鈉或鹽酸調節ra值為3.5 7.5，溫度為20 50"C,然后靜置1 2 小時，料液備用。
二、 膽鈣鹽的形成
將上步所得的料液置于容器中，用30%濃度的氫氧化鈉調節PH值至 10 12后，按照料液重量比例的2 7%加入膽鈣鹽形成劑，所述的膽鈣 鹽形成劑為氣化鈣或琉酸鈣，并緩緩加熱至60 651C,待有棕紅色膽鈣 鹽沉淀形成時，重新調節PH值至10 12后，繼續加熱至沸，保溫2 5 分鐘，過濾得膽鈣鹽。
三、 膽紅素的提取和精制
將上步所得的膽鈣鹽經熱水洗滌，尼龍布過濾、壓干后，加l倍體 積量的水研磨成糊狀，按膽鈣鹽重量的1%加入亞琉酸氫鈉或亞琉酸鈉， 撹拌下緩慢加入2倍體積的鹽酸至PH值為0. 5 2.0后，加入等體積的 三氣甲烷或二氯甲烷，緩慢推拌2 4小時，室溫，靜置分層，收集有 機溶劑層，減壓回收有機溶劑近干時，再加入殘留液10倍量的乙醇繼 續蒸餾，膽紅素精品即析出。本發明與已有技術相比的特點如下
一、 本發明在轉鹽形成之前，增加了一個還原步驟，它可以將牛膽 汁中本身含有的膽綠素和在收集或保存過程中氧化形成的膽綠素還原
成膽紅素，從而增加膽汁中膽紅素的含量。這是提高收率的重要步驟。
二、 本發明用的膽鈣鹽形成劑是呈中性的氯化鈣或硫酸鈣，它們在 分解而形成鈣離子時，不會改變料液的PH值，使鈣化程度高達97. 4%, 從而使鈣化造成的損失由現有工藝的30%左右降至2. 6%，大大提高了收
經過上述改進，本發明的收率可達到0.008 0.011%。
具體實施例方式
實施例1
1、 牛膽汁中膽綠素的還原
選用新鮮牛膽汁，在該膽汁中加入還原劑2 3毫升/升，所述的還 原劑采用3 596濃度的維生素C，用氫氧化鈉或鹽酸調節ra值等于3. 5 6，溫度為20 30。C,然后靜置2小時，料液備用；
2、 膽鈣鹽的形成
將上步所得的料液置于不銹鋼夾層鍋(夾層中可以通入蒸汽加熱 或通入冷水冷卻)中，用3096濃度的氫氧化鈉調節ra值至10 12后， 按照料液重量比例的3 7%加入硫酸鈣，并緩緩加熱至60 65'C，待有 棕紅色膽鈣鹽沉淀形成時，重新調節TO值至10 12后，繼續加熱至沸， 保溫5分鐘，過濾得膽鈣鹽；
3、 膽紅素的提取和精制
將上步所得的膽鈣鹽經熱水洗滌，尼龍布過濾、壓干后，加l倍體 積量的水研磨成糊狀，按膽鈣鹽重量的1%加入亞硫酸氫鈉或亞硫酸鈉，
攪拌下緩慢加入2倍體積量的鹽酸至ra值為0. 5 2. 0后，加入等體積
的三氯甲烷或二氯甲烷，緩慢攪拌2 4小時，室溫，靜置分層，收集 有機溶劑層，減壓回收有機溶劑近干時，再加入殘留液10倍量的乙醇 繼續蒸餾，膽紅素精品即析出。 收率為0.011%。實施例2
1、牛膽汁中膽綠素的還原
選用冰凍保存的牛膽汁，在該牛膽汁中加入還原劑4 5毫升/升， 所述的還原劑為4 5%濃度的硼氫化鈉、亞硫酸鈉或亞硫酸氫鈉，用氫 氧化鈉或鹽酸調節PH值為5 7. 5,溫度為40 50'C，然后靜置1 2
小時，料液備用；
2、 膽鈣鹽的形成 將上步所得的料液置于不銹鋼鍋中，用30%濃度的氫氧化鈉調節
PH值至10 12后，按照料液重量比例的2 4%加入氯化鈣，并緩緩加 熱至60 65'C，待有棕紅色膽鈣鹽沉淀形成時，重新調節PH值至10 12后，繼續加熱至沸，保溫3分鐘，過濾得膽鈣鹽；
3、 膽紅素的提取和精制
將上步所得的膽鈣鹽經熱水洗滌，尼龍布過濾、壓干后，加l倍體 積量的水研磨成糊狀，按膽鈣鹽重量的1%加入亞硫酸氫鈉或亞硫酸鈉， 攪拌下緩慢加入2倍體積的鹽酸至ra值為0. 5 2. 0后，加入等體積的 三氯甲垸或二氯甲烷，緩慢攪拌2 4小時，室溫，靜置分層，收集有 機溶劑層，減壓回收有機溶劑近干時，再加入殘留液10倍量的乙醇繼 續蒸餾，膽紅素精品即析出。
收率為0. 010%。
本例的收率接近上例的收率，這說明本發明對鮮膽汁或保存的膽汁 不敏感，降低了對原料的苛刻要求，利于原料的保存。
權利要求
1、一種從牛膽汁中提取膽紅素的方法，其步驟如下(1)牛膽汁中膽綠素的還原在鮮的或保存的牛膽汁中加入還原劑2～5毫升/升，所述的還原劑為2～5％濃度的維生素C、硼氫化鈉、亞硫酸鈉或亞硫酸氫鈉，用氫氧化鈉或鹽酸調節PH值為3.5～7.5，溫度為20～50℃，靜置1～2小時，料液備用；(2)膽鈣鹽的形成將上步所得的料液置于容器中，用30％濃度的氫氧化鈉調節PH值至10～12后，按照料液重量比例的2～7％加入膽鈣鹽形成劑，所述的膽鈣鹽形成劑為氯化鈣或硫酸鈣，并緩緩加熱至60～65℃，待有棕紅色膽鈣鹽沉淀形成時，重新調節PH值至10～12后，繼續加熱至沸，保溫2～5分鐘，過濾得膽鈣鹽；(3)膽紅素的提取和精制將上步所得的膽鈣鹽經熱水洗滌，尼龍布過濾、壓干后，加1倍體積量的水研磨成糊狀，按膽鈣鹽重量的1％加入亞硫酸氫鈉或亞硫酸鈉，攪拌下緩慢加入2倍體積的鹽酸至PH值為0.5～2.0后，加入等體積的三氯甲烷或二氯甲烷，緩慢攪拌2～4小時，室溫，靜置分層，收集有機溶劑層，減壓回收有機溶劑近干時，再加入殘留液10倍量的乙醇繼續蒸餾，膽紅素精品即析出。
全文摘要
本發明是一種從牛膽汁中提取膽紅素的方法。它包括牛膽汁中膽綠素的還原、膽鈣鹽的形成、膽紅素的提取和精制三個步驟。本發明的改進點是增加了一個膽綠素的還原步驟，它可以將牛膽汁中本身含有的膽綠素和在收集或保存過程中氧化的膽綠素還原成膽紅素，從而增加膽汁中膽紅素的含量，這是提高收率的重要步驟。同時，本發明在膽鈣鹽形成步驟中加入呈中性的氯化鈣或硫酸鈣作為膽鈣鹽形成劑，它在分解而形成鈣離子時，不會改變料液的pH值，從而使料液中的膽鈣鹽形成完全，提高了收率。經過上述改進，本發明的收率可達到0.008～0.011％，比已有技術提高了0.003％。
文檔編號C07D207/00GK101429152SQ20081023207
公開日2009年5月13日 申請日期2008年11月4日 優先權日2008年11月4日
發明者暉 曹 申請人:陜西秦寶牧業發展有限公司