專利名稱：蛋白質偶聯物及其藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及藥物制劑技術，更具體地說，涉及新型的蛋白質偶聯物及其 制備方法和含有該蛋白質偶聯物的藥物組合物。
背景技術：
在藥物研究中發現，有近40%的藥物是水難溶性的， 一些藥物甚至難溶 于有機溶劑，導致其生物利用度低。在制劑過程中，采用環糊精包合技術、 表面活性劑增溶、乳劑、微乳及固體分散技術等可解決一些難溶性藥物的低 生物利用度問題，但仍有大量的藥物由于生物利用度問題而被放棄使用。而 納米混懸技術給這些藥物提供了重現自身價值的機會。納米混懸劑系釆用少 量表面活性劑或其它載體穩定純藥物粒子所形成的一種亞微米膠體分散體 系。近年來的研究發現，納米混懸劑能增加藥物溶出度、提高藥物的生物利 用度、增加藥物穩定性及提高藥效，這使得那些溶解性差的抗生素類藥物、 抗腫瘤藥物和一些治療窗窄的藥物能發揮更好的作用。而且一些水溶性藥物
也可以制成納米混懸劑增加靶向性或可以緩釋(朱建芬,吳祥根；納米混懸劑
的制備方法及在藥劑學中應用的研究進展[J];中國醫藥工業雜志；2006年03 期196-200 )。
2005年，FDA批準了 American Pharmaceutical Partners公司開發的以人血 清白蛋白(HSA)為載體的紫杉醇產品Abraxane， Abranane具有勝過紫杉醇 注射液(Taxol)的顯著優點。該產品是將紫杉醇與人血清白蛋白結合的一種 納米混懸制劑。由于Abraxane的溶解度較紫杉醇大大提高，不必使用毒性溶 劑，無需前驅給藥預防過敏反應，可采用標準靜脈輸注導管、以較Taxol高 50%的劑量、于30分鐘內靜脈給藥。臨床試驗顯示，Abraxane用于治療經蒽環 類藥物輔助聯合化療失敗或6個月內又復發的轉移性乳腺癌病人后，其療效 反應率和病人存活率都顯著優于Taxol。研究顯示Abraxane在快速生長的腫瘤
中可以被動積蓄。Abraxane中紫杉醇納晶保持長時間穩定的原因在于 一方 面在于人血清白蛋白分子間在高壓和高剪切力作用下二硫鍵交聯在紫杉醇納 晶周圍形成一層外殼；另 一方面在于人血清白蛋白分子荷電所形成的空間靜 電排斥力。國際專利申請((公布號WO/1998/014174)發明名稱PROTEIN STABILIZED PHARMACOLOGICALLY ACTIVE AGENTS, METHODS FOR THE PREPARATION THEREOF AND METHODS FOR THE USE THEREOF ) 介紹了 Abraxane的制備方法。
人血清白蛋白作為注射用紫杉醇納米混懸劑的載體已經取得了很大的成 功，但還存在不足 一方面Abraxane為一皮動靶向制劑，尚可進一步研究制成 主動靶向制劑，提高靶向于腫瘤組織的能力；另一方面在我們的研究中發現 對紫杉醇、環孢素A外的其他藥物的納晶穩定性能較弱。
發明內容
本發明的目的是提供一種新型的蛋白質偶聯物。
本發明的另 一個目的是提供包含上述蛋白質偶聯物的藥物組合物。
本發明的另 一個目的是提供上述蛋白質偶聯物及包含上述蛋白質偶聯物 藥物組合物的制備方法。
具體地說，本發明公開了一種新型的蛋白質偶聯物，該偶聯物為蛋白質 與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的偶聯物，其中，所述的蛋白質是血 清白蛋白，選自人血清白蛋白、重組人血清白蛋白或牛血清白蛋白，優選地 為人血清白蛋白；所述內源性物質選自膽酸或其衍生物、寡聚透明質酸、磷 脂酰絲氨酸、葉酸中的一種或者兩種以上的組合。
所述的膽酸及其衍生物，其中膽酸的化學式為3a,7a, 12a-三羥基膽甾烷 -24隱酸，也稱為膽烷酸、colalin 、 cholalic acid等;膽酸衍生物，選自去氧膽 酸、去氫膽酸、鵝去氧膽酸、熊去氧膽酸、豬去氧膽酸、石膽酸、甘氨膽酸、 牛磺膽酸、甘氨鵝脫氧膽酸、牛^黃鵝脫氧膽酸、甘氨去氧膽酸、牛磺去氧膽 酸、甘氨豬去氧膽酸、牛磺豬去氧膽酸、甘氨熊去氧膽酸、牛磺熊去氧膽酸、 甘氨石膽酸、牛磺石膽酸等。
所述的寡聚透明質酸在本發明中是指分子量為1000 ~ 10000道爾頓的透
明質酸。
人血清白蛋白、重組人血清白蛋白、牛血清白蛋白、葉酸、磷脂酰絲氨 酸在本發明中無特殊限制。
本發明所述內源性物質的羧基任選地與胱氨酸或半胱氨酸的氨基進行酰 胺反應，生成相應的含有二硫鍵或巰基的衍生物。白蛋白中含有較多的半胱 氨酸殘基，在受熱的情況下可以和上述含有二硫鍵或巰基的衍生物進行交聯， 得到新型蛋白質偶聯物。該偶聯物的結構特征為內源性物質的羧基與半胱氨 酸或胱氨酸結構的伯氨基通過酰胺鍵偶聯后再通過半胱氨酸結構與血清白蛋 白以二硫鍵偶聯，蛋白質之間通過二硫鍵進一步偶聯。
在本發明的新型蛋白質偶聯物的結構中，基本上每個血清白蛋白與1 -35 個本發明所述內源性物質通過上述方式偶聯；而且，基本上每個本發明所述 內源性物質有l-25個羧基與l-25個半胱氨酸結構的伯氨基通過酰胺鍵偶聯，再 通過半胱氨酸結構與單個或多個血清白蛋白以l-25個二硫^t偶聯；新型蛋白 質偶聯物同時可以有半胱氨酸通過二硫4建與之偶聯；本發明所述內源性物質 中的一種或幾種可以混合通過上述方式與血清白蛋白以二石危鍵偶聯；上述結 構均在本發明的保護范圍內。
此外，本發明還提供了含有藥劑和藥用載體的藥物組合物，其中的藥用 載體含有上述新型蛋白偶聯物。
任何適當的藥劑可用于本發明的藥物組合物中，適當的藥劑包括但不僅 限于解熱鎮痛劑、平喘藥、抗生素、抗抑郁藥、抗糖尿病藥、抗炎藥、抗腫 瘤藥、抗焦慮藥、免疫制劑、鎮靜催眠劑、抗心絞痛藥、抗精神病藥、抗躁 狂藥、抗關節炎藥、抗心律失常藥、抗痛風藥、抗凝劑、血栓溶解劑、抗纖 溶劑、血液流變學藥物、抗血小板藥物、抗驚厥藥、抗巴金森藥物、抗組胺 藥、用于鈣調節的藥物、抗病毒藥物、支氣管擴張劑、激素、降脂藥、蛋白 質、多肽、核酸、抗潰瘍或抗反流藥物、止吐藥、診斷藥劑、和營養性藥品。 其中優選地，藥劑是抗肺瘤藥，具體的包括但不僅限于紫杉醇及其衍生物、 多西他賽、喜樹堿及其衍生物、依托泊苷、替尼泊苷、鹽酸阿霉素、環磷酰 胺、放線菌素、博來霉素、正定霉素、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素、曱氨 喋呤、5-氟尿嘧啶、卡鉑、卡氮芥、洛莫司汀、順鉑、長春堿、長春新堿、
三苯氧胺、哌酰硫烷、苯芥膽甾醇。更優選地，藥劑是紫杉醇或其衍生物[具 體的紫杉醇衍生物，參見"李燕，王永華，房華，等.紫杉醇類衍生物的定
量結構-抗癌活性關系研究進展，《中國藥理學通報》，2008, 24 ( 3 ): 288 ~
喜樹堿或其衍生物[具體的喜樹堿衍生物，參見"游亮，張萬年，張麗君，繆 震元.喜樹堿及其衍生物最新研究進展，《中國藥物化學雜志》，2007， 17 (5 ) : 327-332"，該文獻的內容及其參考文獻全部地引入這里作為參考]。 最優選地，藥劑是紫杉醇。
本發明還提供了上述新型蛋白質偶聯物及其藥物組合物的制備方法。
本發明提供了制備本發明的蛋白質偶聯物的方法，其包括如下步驟
1 )所述的蛋白質、和一種以上的胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質溶 于適當的溶劑中；
2) 步驟l)所得到的混合物受熱，溫度為20-80度，優選25-70度，最優 選30-60度；
3) 分離去除未交聯的胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質；
4) 千燥；
這里，所述蛋白質、內源性物質的定義同上，所述適當的溶劑可選自水、 曱醇、無水乙醇、含一定量水的乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、 叔丁醇、二甲基亞砜、N,N - 二曱基曱酰胺、N,N - 二曱基乙酰胺、乙酸 甲酯、乙酸乙酯、醋酸異丙酯、丙酮、甲基乙基酮、甲基異丁基酮、甲苯、 四氫呋喃、1,4 一二氧六環、二甲氧基乙烷、二氯甲烷、二氯乙烷、三氯曱 烷、四氯曱烷或乙醚中的一種，或者兩種以上的組合，優選地，溶劑是水、 乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、或四氯甲烷中的一種，或者兩種以上的組 合；
所述分離未交聯的胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質可以采用超濾、 高速離心、透析等方法，優選超濾、高速離心法；
所述溶液的干燥方法包括冷凍干燥、噴霧干燥、減壓干燥、常壓干燥等， 優選冷凍千燥、噴霧干燥和減壓千燥；
更具體地說，上述的制備方法包括
將血清白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質溶于水中，溶液受 熱，分離未交聯的胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質，千燥，即得到本發 明蛋白質偶聯物。
或者將胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質溶于適當的其它非水溶劑中 后與血清白蛋白水溶液混合形成乳液，再經過受熱、分離、千燥，得到本發
明蛋白質偶聯物。
其中，血清白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的摩爾比為
0.001:1-1000:1，優選為O.Ol :1-100，更優選為35: 1-1: 35;
血清白蛋白的水溶液濃度為O.OOl %-50% ( w/v),優選為0.01%-10% (w/v) j
胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的水溶液濃度為0.00001 % -50% (w/v),優選為0.0001 %-10% (w/v).
或者胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的非水溶劑濃度為0.001% ~ 50% (、v/v)，優選為0.01% ~30% (w/v);
胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質中羧基偶聯程度為2% ~99%,優選 為2% ~ 50%。
本發明提供了制備含有本發明蛋白質偶聯物的藥物組合物的方法，可選 用下列兩種方法中的一種
A.制備所述的蛋白質偶聯物；將偶聯物與藥劑混合；
1 )將所述的蛋白質偶聯物和藥物溶于適當的溶劑中；
2) 步驟l )所得到的混合物受熱，溫度為20-80度，優選25-70度，最優 選30-60度；
3) 干燥；
這里，所述的蛋白質、內源性物質、適當的溶劑、干燥方法同上。 更具體地說，該制備方法為
將蛋白質偶聯物溶于水中，藥物溶于適當的溶劑中，混合兩種溶液形成
乳液，受熱，千燥，即得到本發明蛋白質偶聯物包裹的藥物納米混懸劑； 其中，
蛋白質偶聯物的水溶液濃度為0.001%-50% (w/v)，優選為0.01%-10% (w/v);
藥物溶液的濃度為O.OOl % ~50% (w/v)，優選為0.01% ~30% (w/v);
蛋白質偶聯物的水溶液與藥物溶液的體積比為0.0001 : 1 ~ 10000: 1,優 選為5:1 ~ 100:1;B.
1 )將所述的蛋白質、 一種以上的胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質和 藥物溶于適當的溶劑中；
2)步驟l)所得到的混合物受熱，溫度為20-80度，優選25-70度，最優 選30-60度；
這里，所述的蛋白質、內源性物質、適當的溶劑、干燥方法同上。 更具體地說，該制備方法為
將血清白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質溶于水中，藥物溶 于適當的溶劑中，混合兩種溶液形成乳液，受熱，任選地分離未交聯的胱氨 酸或半胱氨酸修飾的寡聚透明質酸，干燥，即得到本發明蛋白質偶聯物包裹 的藥物納米混懸劑；
或者將胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質和藥物溶于適當的溶劑中， 與血清白蛋白水溶液混合形成乳液，受熱，千燥，即得到本發明蛋白質偶聯 物包裹的藥物納米混懸劑。在本方法中蛋白質偶聯物和藥物納米混懸劑同時制備。
其中，
血清白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的摩爾比為 0.001:1-1000:1，優選為0.01:1掘:1 ，更優選為35:1-1:35。;
血清白蛋白的水溶液濃度為0.001 % -50% ( w/v ),優選為0.01 % -10%
(w/v);
胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的水溶液濃度為0.00001 % -50% (w/v),優選為0.0001 % -10% (w/v);
胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的非水溶劑濃度為0.001 % ~50% (w/v)，優選為0.01% ~30% (w/v);
藥物溶液的濃度為0.001% ~50% (w/v)，優選為0.01% ~30% (w/v);
血清白蛋白和胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的水溶液與藥物溶液 的體積比為0.0001 : 1 ~ 10000: 1，優選為5 : 1 ~ 100: 1;
血清白蛋白水溶液與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質和藥物的溶液 的體積比為0.0001 : 1 ~ 10000: 1，優選為5 : I ~ 100: 1。
在本發明蛋白質偶聯物及其藥物組合物的制備方法中， 含有二硫鍵或巰基的化合物在受熱的情況下即可進行交聯，因此凡是可 以產生熱量的設備或方法均可能使血清白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內 源性物質進行偶聯，所以這些設備或方法例如超聲、微波、紅外、噴霧干燥 等、高壓均質、高速剪切、高速攪拌、真空干燥等均在本發明的保護范圍內， 優選高壓均質機對血清白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的水溶 液或乳液進行均質，由于高壓和剪切力產生的熱量，血清白蛋白與胱氨酸或 半胱氨酸修飾的內源性物質會偶聯。
本發明的有益技術效果為 一般的修飾白蛋白方法需要毒性有機溶劑和 催化劑，產物難于分離精制， 一般不能用于靜脈注射。本發明以氨基酸殘基 中二硫鍵的交聯為反應基礎，采用制劑設備和方法對人血清白蛋白進行化學 修飾，設計思路獨特，不需要毒性有機溶劑和催化劑，反應簡單易行，產物 易于分離精制和進行質量控制。
此外，本發明通過人體內源性物質寡聚透明質酸和葉酸修飾血清白蛋白 可以制備具有主動靶向腫瘤特點的新型納米混懸劑栽體，提高抗腫瘤藥物的 靶向性。血清白蛋白作為納米混懸劑的載體，對紫杉醇外的其他抗腫瘤藥物 的納晶穩定性能較弱，體系中也不能加入其它表面活性劑，否則穩定性更差。 本發明通過人體內源性物質磷脂酰絲氨酸和去氧膽酸修飾血清白蛋白，增加 了血清白蛋白作為注射用納米混懸劑載體的適用抗腫瘤藥物范圍，例如多西
他賽。采用所述納米混懸劑載體，可使荷瘤棵鼠瘤體的相對攝取率(re)提高 25-60 % ，把向效率(te)提高20-80 % ，峰濃度比(Ce)提高15-80 % 。
具體實施方式
實施例l
超聲波處理制備葉酸-牛血清白蛋白偶聯物
將30.0ml牛血清白蛋白(1 % ， w/v)和胱氨酸修飾的葉酸(O.T/。 ， w/v)溶液 在60kHz的超聲處理器內處理2分鐘，加水稀釋，分子量為l萬的超濾膜超濾， 濃縮液冷凍干燥，即得到葉酸偶聯的牛血清白蛋白。
實施例2
用高壓勻質法制備寡聚透明質酸-人血清白蛋白偶聯物
將200.0ml人血清白蛋白(1 % , w/v)和胱氨酸修飾的寡聚透明質酸(0.1 % , w/v，寡聚透明質酸分子量為3500，胱氨酸偶聯度為10%)溶液轉移到高壓勻 質器內，高壓勻質循環5次，勻質液加水稀釋，分子量為3萬的超濾膜超濾， 濃縮液冷凍干燥，即得到寡聚透明質酸偶聯的人血清白蛋白。
實施例3
用高壓勻質法制備含有葉酸-人血清白蛋白偶聯物的紫杉醇納米混懸劑
將200mg紫杉醇(Paclitaxel)溶于2.7ml的氯仿和0.3ml的無水乙醇中，加入 97.0ml人血清白蛋白(3。/。 ， w/v)和胱氨酸修飾的葉酸(0.3。/。 ， w/v)水溶液，混 合物在低轉速下勻漿5分鐘，以形成粗制乳化液，然后將其轉移到高壓勻質器 內，高壓勻質循環8次，勻質液在40。C減壓下蒸發20分鐘迅速除去二氯甲烷， 得到的分散液為半透明，紫杉醇顆粒的直徑一般為130 ~ 160nm，加水稀釋， 分子量為l萬的超濾膜超濾，將濃縮液冷凍千燥48小時，不加任何凍千支撐劑。 所得餅塊加入無菌水或生理鹽水后很易再構成原來的分散液，再構成后顆粒 大小與冷凍干燥前相同。
本實施例中人血清白蛋白的葉酸偶聯物和紫杉醇納米混懸劑同時制備， 人血清白蛋白的葉酸偶聯物包圍在紫杉醇純藥物納米顆粒外作為穩定劑。
實施例4
用高壓勻質法制備含有磷脂酰絲氨酸-人血清白蛋白偶聯物的多西他賽 納米混懸劑
將30mg多西他賽、30mg胱氨酸修飾的磷脂酰絲氨酸溶于3.Oml二氯曱烷， 加入30.0ml人血清白蛋白(1 % ， w/v)，混合物在低轉速下勻漿5分鐘，以形成 粗制乳化液，然后將其轉移到高壓勻質器內，高壓勻質循環8次，勻質液在 4(TC減壓下蒸發30分鐘除去二氯甲烷，得到的分散液為半透明，多西他賽顆 粒的直徑一般為180 230i皿，冷凍干燥48小時，不加任何凍千支撐劑。所得 餅塊加入無菌水或生理鹽水后很易再構成原來的分散液，再構成后顆粒大小 與冷凍干燥前相同。
本實施例中人血清白蛋白的磷脂酰絲氨酸偶聯物和多西他賽納米混懸劑 同時制備，人血清白蛋白的磷脂酰絲氨酸偶聯物包圍在多西他賽純藥物納來 顆粒外作為穩定劑。
實施例5
葉酸-人血清白蛋白偶聯物的紫杉醇納米混懸劑用高壓勻質法制備含有 膽酸-牛血清白蛋白偶聯物的尼莫地平納米混懸劑
將30mg尼莫地平、30mg胱氨酸修飾的膽酸溶于3.0ml乙醇中，加入30.0ml 人血清白蛋白(2 % )中，然后迅速轉移到高壓勻質器內，高壓勻質循環6次，勻 質液在40。C減壓下蒸發除去大部分乙醇，得到的分散液為半透明，尼莫地平 顆粒的直徑一般為320 460nm，真空干燥8小時，再加入生理鹽水后很易再 構成原來的分散液，再構成后顆粒大小與真空干燥前相同。
本實施例中牛血清白蛋白的膽酸偶聯物和尼莫地平的膽酸偶聯物納米混 懸劑同時制備，牛血清白蛋白的膽酸偶聯物包圍在尼莫地平純藥物納米顆粒 外作為穩定劑。
實施例6
用人乳腺癌細胞抹MCF-7接種棵鼠右前肢皮下，待瘤體直徑長至約IO mm時開始實驗，隨機分組，分別尾靜脈注射相同劑量的Abraxane、葉酸-人 血清白蛋白偶聯物的紫杉醇納米混懸劑(按實施例3制備)，測定不同時間體
內血濃和不同組織內的藥物分布，用3P97軟件進行數據處理，結果與 Abraxane相比，人乳腺癌棵鼠瘤體的相對攝取率(re)提高55 % ，靶向效率
(te)提高48%，峰濃度比(Ce)提高42%。
權利要求
1.一種蛋白質偶聯物，其特征在于該偶聯物為白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質偶聯。
2. 根據權利要求l所述的蛋白質偶聯物，其中所述的白蛋白選自人血清 白蛋白.重《且,&血5青白蛋白或牛血清白蛋白。
3. 根據權利要求l所述的蛋白質偶聯物，其中所述的內源性物質選自膽 酸或其衍生物、磷脂酰絲氨酸、寡聚透明質酸或葉酸中的一種或者兩種以上 的組合。
4. 根據權利要求l所述的蛋白偶聯物，其中白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸 修飾的內源性物質的摩爾比為0.01:1 -10 0:1 。
5. 根據權利要求l所述的蛋白偶聯物，其中白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸 修飾的內源性物質的摩爾比為3 5:1 -1:35 。
6. —種包含藥劑和藥用載體的藥物組合物，其中所述的藥用載體包含權 利要求1至5中任一權利要求所述的蛋白偶聯物。
7. 根據權利要求6所述的藥物組合物，其中所述的藥劑選自解熱鎮痛 劑、平喘藥、抗生素、抗抑郁藥、抗糖尿病藥、抗炎藥、抗腫瘤藥、抗焦慮 藥、免疫制劑、鎮靜催眠劑、抗心絞痛藥、抗精神病藥、抗躁狂藥、抗關節 炎藥、抗心律失常藥、抗痛風藥、抗凝劑、血栓溶解劑、抗纖溶劑、血液流 變學藥物、抗血小板藥物、抗驚厥藥、抗巴金森藥物、抗組胺藥、用于鈣調 節的藥物、抗病毒藥物、支氣管擴張劑、激素、降脂藥、蛋白質、多肽、核 酸、抗潰瘍或抗反流藥物、止吐藥、診斷藥劑、和營養性藥品。
8. 根據權利要求7所述的藥物組合物，其中所述的藥劑為抗腫瘤藥
9. 根據權利要求8所述的藥物組合物，其中所述的藥劑選自紫杉醇或其 衍生物、多西他賽、或者喜樹堿或其衍生物。
10. 根據權利要求9所述的藥物組合物，其中所述的藥劑為紫杉醇。
11. 根據權利要求6所述的藥物組合物，其中白蛋白與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的摩爾比為0.01:1 -100:]，蛋白質偶聯物與藥劑的體積 比為0.0001:1隱10000:1。
12. 根據權利要求ll所述的藥物組合物，其中白蛋白與胱氨酸或半胱氨 酸修飾的內源性物質的摩爾比為35:1-1:35，蛋白質偶聯物與藥劑的體積比為 5:1-100:1。
13. 根據權利要求ll所述的藥物組合物，其中的藥劑為紫杉醇。
14. 根據權利要求12所述的藥物組合物，其中的藥劑為紫杉醇。
15. 權利要求1至5中任一權利要求所述蛋白偶聯物的制備方法，包括如 下步驟1 )所述的蛋白質、和一種以上的胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物 質溶于適當的溶劑中；2) 將步驟l )所得到的混合物受熱，溫度為20-80度，優選25-70度， 最優選30-60度；3) 干燥。
16. 權利要求6至14中任一權利要求所述藥物組合物的制備方法，包含下 列A、 B兩種方法中的一種A. 制備所述的蛋白質偶聯物；將偶聯物與藥劑混合；B. 將所述的蛋白質、 一種以上的胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質和 藥物溶于適當的溶劑中。
全文摘要
本發明公開了一種新型的蛋白質偶聯物，該偶聯物為蛋白質與胱氨酸或半胱氨酸修飾的內源性物質的偶聯物。此外，本發明還公開了包含上述蛋白質偶聯物的藥物組合物，以及上述蛋白質偶聯物及包含上述蛋白質偶聯物藥物組合物的制備方法。本發明不涉及毒性有機溶劑和催化劑，反應簡單易行，產物易于分離精制和進行質量控制，而且得到的藥物組合物主動靶向性提高。
文檔編號C07K1/10GK101357939SQ20081021201
公開日2009年2月4日 申請日期2008年9月11日 優先權日2008年9月11日
發明者呂慧俠, 張建軍, 緣 高 申請人:中國藥科大學