具有調節血脂作用的α,β-苯基取代的丙烯酰胺衍生物的制作方法

專利名稱：具有調節血脂作用的α,β-苯基取代的丙烯酰胺衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的ot ， p -苯基取代的丙烯酰胺衍生物及其用于制備 預防和/或治療高脂血癥的藥物的用途。
背景技術：
血脂異常是動脈硬化、心血管疾病的重要危險因素。研究表明， 將血脂調整在正常水平，可降低心血管疾病的死亡率和發病率。因此， 尋找療效顯著、安全可靠的降血脂藥一直是醫藥工作者長期研究的課 題。目前臨床常用的口服調血脂藥物有他汀類藥物(是目前治療高脂 血癥的主要藥物)、貝特類(苯氧芳酸類)、煙酸類和中藥。這些調
脂藥物的化學結構中均不具有取代丙烯酰胺的基本結構骨架。
專利文獻CN 1194674C報道，2- ( 4-羥苯基)-3- ( 3, 5-二曱氧 苯基)-丙酸鈉的化合物(式A)具有降低甘油三脂的作用；
藥學學報2001， 36 ( 7 ): 502-506中報道了 ot-苯基取代肉桂酰胺類 化合物(式B ) ; J. Med. Chem. 1992， 35， 2293-2306報道了式C化合物， 其化學結構雖與本發明化合物的基本結構骨架相同，但表現為擴血管 和抗腫瘤活性。

發明內容
本發明人經研究發現具有式I的Ct ， P -苯基取代的丙烯酰胺衍生 物或其可藥用鹽具有良好的降低血脂的作用，從而可用于防治高血脂 癥。
因此，本發明第一方面涉及式I的ot, p-苯基取代的丙烯酰胺衍 生物，或其可藥用鹽，水合物或溶劑化物
Ri-Rn相同或不同，各自獨立地為氫、羥基、C廣Cs烷基、C「C6烷 氧基、含d-"的脂肪烴、芳香烴或磷酸酯的酯基、氨基、d-C6烷氨 基、酰氨基、磺烷基、磺酰氨基、磺酰脲基、胍基、羧基、d-"酰基、 硝基、氰基、鹵素、ox。 乂2或S02 (0X3)基團，其中Xm X2， X3相同 或不同，各自獨立地代表氫或金屬陽離子，NH/陽離子等任何已知的推 電子或吸電子基團，或含糖的甙。
本發明的另一方面涉及藥物組合物，其含有至少一種式I的ot, P-苯基取代的丙烯酰胺衍生物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物以
及一種或多種藥用載體或賦形劑。
其中，
6本發明的另一方面涉及制備式I的oc， p-苯基取代的丙烯酰胺衍
生物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物的方法。
本發明的再一方面涉及式I的oc， p-苯基取代的丙烯酰胺衍生
物，其可藥用鹽，水合物或溶劑化物用于制備預防和/或治療高脂血癥 的藥物的用途。
本發明所述的金屬陽離子選自鈉、鉀、鈣、鎂、鋅、硒、鉻等 堿金屬或堿土金屬陽離子。
本發明所述的含糖的甙包括但不限于葡萄糖甙、甘露糖甙等。 本發明優選的化合物為
其中R!、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 12、"均為H; R2為C6H ;"為0Ac; Rn為0CH3 的化合物，即下式II化合物
其中Rl 3. " 5、 6、 7. 8、 9、 12、 13均為H; R2為對曱基環己基；R!。為0Ac ; Ru為0CH3的化合物，即式III化合物
其中Rl 3. 4、 5、 6, 7、 8、 9、 n, n均為H; R2=C5H9 ; R10=OAc ; Ru=0CH^ 化合物，即式IV化合物
式II
式in
7式IV
其中R,、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 12、 13均為H; R產3-氮雜雙環[3. 3. 0])辛基;R。-0Ac; Ru-0CH3的化合物，即式V化合物
HaCO 、 CONH ""N^J^^
H3CCOO,
其中Rk…、5- 6, 7、 8、 9、 12、 13 均為H; R1Q-0Ac; Ru-0CH3的化合物，
即式VI化合物
式VI
其中L 4、5,6、7、8,9、12、13均為H; R2--CH2-C4H70 ; R10=OAc; Ru=0CH的化合物，即式VII化合物
式VII ;和
其中R,, 3、 4、 5、 6、 7, 8, 9、 n, u均為H; R2為C6H11; R,。為OH; Ru為0CH3的化合物，即下式VIII化合物
8式VIII
根據本發明，式I化合物可釆用本領域一般公知的合成方法制得，
例如可參見CN 1989090A中描述的方法。
本發明的a ， p-苯基取代丙烯酰胺類化合物具有明顯的調節血脂作用，可用于防治高脂血癥。與現有的降血脂藥相比其結構新穎，沒有他汀類降血脂藥的肌毒性，且毒性比式A化合物低，故具有臨床實用性。
式I化合物的可藥用鹽包括與藥學上可接受的無機酸或有機酸或者無機堿或有機堿形成的常規鹽以及季銨的酸加成鹽。合適的酸加成鹽的例子包括與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、高氯酸、富馬酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、羥基乙酸、曱酸、乳酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、樸酸、丙二酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、富馬酸、曱苯磺酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、幾基萘甲酸、氫碘酸、蘋果酸、鞣酸等形成的鹽。合適的堿加成鹽的例子包括與鈉、鋰、鉀、鎂、，鋁、鈣、鋅、N，N， -二節基乙二胺、氯代普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺和普魯卡因形成的鹽。
本發明化合物既可單獨也可以藥物組合物的形式使用。本發明的藥物組合物包含有效劑量的本發明式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物以及一種或多種適宜的可藥用載體。本發明所述的藥用載體包括但不限于離子交換劑，氧化鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白如人血白蛋白，緩沖物質如磷酸鹽，甘油，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，鹽或電解質，如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠態氧化硅，三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，纖維素物質，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸酯，蜂蠟，羊毛脂。
9說
根據本發明，ct， p-苯基取代的丙烯酰胺衍生物可按已知方法制
成腸道或非腸道給藥的制劑，如片劑、膠嚢劑、顆粒劑、注射劑、栓劑、貼劑等。
含有本發明ot ， 苯基取代的丙烯酰胺衍生物的藥物組合物可以
下面的任意方式施用口服，噴霧吸入，直腸用藥，鼻腔用藥，頰部用藥，局部用藥，非腸道用藥，如皮下、靜脈、肌內、腹膜內、鞘內、心室內、胸骨內和顱內注射或輸入，或借助一種外植儲器用藥。其中優選口服、腹膜內或靜脈內給藥方式。
另外需要指出，本發明化合物的使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括患者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營養狀況、化合物的活性強度、服用時間、代謝速率、病癥的嚴重程度以及診治醫師的主觀判斷。優選的使用劑量介于0. 01 ~ 100mg/kg體重/天，其中最優劑量在5mg/kg-10mg/kg體重/天。
具體實施例方式
下面實施例是對本發明的進一步詳細說明但不意味著對本發明的任何限制。實施例1
順式-oc-苯基-p-(3'-甲氧基-4'-羥基-苯基)-N-環己基-丙烯酰胺(N351)的制備
將3. 12g ( 0. Olmol )順式-2-苯基-3- ( 3' -甲氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-丙烯酸置于100ml三口瓶中，加入6ml氯化亞砜，油浴控溫70~80°C，磁力攪拌，回流2 3h。然后減壓蒸除多余的S0C12，再加入適量甲苯，減壓抽干。得到順式-oc-苯基-p-(3'-曱氧基-4'-乙酰
氧基-苯基)-丙烯酰氯粗品。
將酰氯用苯稀釋，然后滴加到6. 0g ( 0. 06mol )環己胺和5亳升苯的混合溶液中，加畢，室溫反應0.5h。依次用酸洗、水洗至中性。析出白色固體，抽濾得2.5g。該固體用95%乙醇重結晶，得白色片狀結晶2. 0g，收率60%，熔點115~118°C。分子式C22H25N03,分子量MS(FAB)M/Z: 352. 0 (M+1)峰。
'HNMR(DMSO): 5 1. 003-1. 841 (m， IIH，-C6HU) ， 5 3. 427 (s， 3H， -OCH3),5 3. 871(m，lH，-NH)， 5 5. 301 (d， 1H， P -H) ， 5 6. 301(d，lH，) 56. 728 (m， 2H， ) 5 7. 268-7. 484 (m， 5H， 2， 3， 4， 5， 6-H) ， 5 7. 761 (s， 1H, -0H)
實施例2
順式-oc-苯基-P- ( 3'-曱氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-N-環己基丙烯酰胺(N393 )的制備
稱取4. 0gN351置于100ml三口瓶中，加入50ml四氬吹喃4吏其溶解，加入1.5g無水碳酸鉀，lml乙酸酐，80匸下回流2h， TLC(石油醚乙酸乙酯-l: l)監測，至N351消失，蒸除四氫呋喃，得到白色固體。該固體用90%乙醇重結晶，得白色結晶2. 5g,收率56% ，熔點126~8。C。
元素分析分子式C24H27N04分子量 393. 48
理論值(％) : C 73. 28 ; H 6.87 ; N 3.56實測值(°/。) C 73. 44 ; H 7.20 ; N 3.28
MS(FAB)M/Z : M+394. 4 (M+l峰)
力NMR(DMS0): 5 1. 009-1. 855 (m， IIH，-C6H ) ， 5 2. 260 (s， 3H, -C0CH3):
5 3. 364 (s，3H，-OCH3), 5 5. 345 (d， 1H， -NH), 5 6. 438 (d， 1H， 5'-H) ， 5
6. 736-6. 864 (m，2H，2 ' 6 ' -H)，5 7. 266 (t, 2H， 2， 6-H) ， 5
7. 397-7. 493 (m， 3H， 3， 4， 5-H) ， 5 7. 792 (s， 1H， P -H)。
實施例3
順式-ot -苯基-P - (3'-甲氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-N-( 3-氮雜雙環[3. 3. O]-辛基)-丙烯酰胺(N420 )的制備
將5. 0g 3-氮雜雙環[3. 3. O]辛基鹽酸鹽溶于水，加等摩爾的氫氧化鈉，后用乙酸乙酯萃取三次，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸除乙酸乙酯，得到3-氮雜雙環[3. 3. O]-辛基胺。將其滴加到順
ii式-ot-苯基-p-(3'-甲氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-丙稀酰氯的甲苯溶液中，加畢，室溫反應0. 5h。依次用水洗、酸洗、飽和食鹽水洗至中性，無水硫酸鈉干燥。抽濾，將濾液抽干。經硅膠柱層析，得白色固體0. 6g。收率14.3%,熔點136~138°C。分子式C2。H28N204，分子量420. 51。
元素分析(％):理論值C 71.42 ; H 6. 67 ; N 6. 67實測值C 71. 12 ; H 6. 63 ; N 6. 42MS(FAB)M/Z: M+421. 2 (M+l峰)
實施例4
順式-a-苯基-P -(3'-甲氧基-4'-乙酰氧基-苯基)丙烯酰胺(N311)的制備
將順式-oc-苯基-p-(3'-甲氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-丙烯酰氯粗品的丙酮溶液滴加到IO. 0g冰冷氨水中，加畢室溫攪拌O. 5h,析出紅棕色固體，抽濾，水洗至中性，再用乙醚洗滌2 3次，得白色固體，千燥，95%乙醇重結晶，得白色固體1.9g。收率61.1°/。；熔點148~150°C。分子式C18H N04，分子量311. 34元素分才斤(％):理論值C 69.44 ;H 5. 55 ;N 4. 50實測值C 69. 30 ;H 5. 51 ;N 4. 53
實施例5
按CN 1989090A中/>開的方法制備以下化合物順式-a-苯基-p-(3'-曱氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-N-(mix-4-甲基環己基)-丙烯酰胺(M-N407)熔點136-140"C.
元素分析分子式"51129冊4分子量407. 51理論值C 73. 69°/。
H 7. 17% N 3. 44%分析值C 73. 64% H 7.29% N 3.61%
12順式-cc -苯基-P — (3'-甲氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-N-( trans-4-曱基環己基)丙烯酰胺(T-N407)
將3. 12g ( 0. Olmol )順式-2-苯基-3- ( 3' -曱氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-丙烯酸置于100ml三口瓶中，加入6ml氯化亞砜，油浴控溫70~80°C，磁力攪拌，回流2 3h。然后減壓蒸除多余的S0C12,再加入適量甲苯，減壓抽干。得到順式-ct-苯基-p-(3'-甲氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-丙烯酰氯粗品。
將所得酰氯用甲苯稀釋，然后滴加到裝有反式-4-曱基環己胺(0. 03mol)和10毫升甲苯的混合溶液中，加畢，室溫反應O. 5h。依次用酸洗、水洗至中性。無水硫酸鈉干燥。抽濾，將濾液減壓抽干。得到固體，將此固體經硅膠柱層析分離，得到白色固體1.0g。收率24. 5%;熔點148 149。C。分子式C25H29N04，分子量407. 51
元素分析0i):理論值C 73. 71 ; H 7. 13 ;N 3. 44實測值C 73. 72 ; H 7. 22 ;N 3. 46
順式-oc -苯基-P - (3'-曱氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-N-( 2-亞曱基呋喃)丙烯酰胺(N395 )
收率80%，熔點119-121匸.元素分析分子式C23H25N05分子量395. 45理論值 C 69. 85% H 6. 37% N 3. 54%分沖斤值 C 69. 55% H 6. 32% N 3. 25%
順式-a -苯基-P - (3'-曱氧基-4'-乙酰氧基-苯基)-吡咯烷丙烯酰胺(N365 )
熔點113-116°C.
元素分析分子式(:221^04分子量365. 472理論值 C 72. 296% H 6. 34% N 3. 85%分析值 C 72. 475% H 6. 41% N 4. 08%
13實施例6 生物活性
下述的生物學實驗中，主要觀察了 N393化合物對小鼠急性毒性、 大鼠亞急性毒性及對高脂飼養誘導的高脂大鼠的降脂作用。
(1)N393、式A化合物的急性毒性實驗 動物昆明小鼠16-18克，
給藥方式樣品混懸于1% CMC液中，灌胃一次，觀察一周。 試驗結果N393的急性毒性明顯低于式A化合物(見表1)。
表1 N393,式A化合物急性毒性實驗
樣品藥量(g/kg)動物數死亡時間
N393244藥后5h全部死亡
124未見異常
式A64藥后5h死亡
34未見異常
(2) N393亞急性毒性試驗
Wistar大鼠，6周齡，按動物性別和體重等均衡和隨機原則分為對 照和受試藥N393組，每組14只，雌雄各半。灌胃N393 (U羧曱基纖 維素鈉混懸劑)5 g/kg，灌胃容積為0. 2ml/100克體重，對照組動物 則灌胃相應容積的1%CMC-Na。連續給藥兩個月，觀察對機體產生的毒 性反應及其嚴重程度、主要的毒性靶器官及其損害的可逆程度。試驗 結果在試驗期內，各組動物均活存到預定活殺期內。對照組和N393 組動物一般狀態， 一般藥物反應，外周血有形成份包括白細胞計數 (WBC)及分類、紅細胞計數(RBC)、血紅蛋白濃度(HB)、血細胞 比積(HCT)、網織紅細胞計數(Ret)和血小板計數(PLT)、凝血時 間包括凝血酶原時間(PT)、凝血酶時間(TT)及活化部分凝血活酶時 間(APTT)，血清化學包括天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉
14移酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、總蛋白(TP)、白蛋白 (Alb)、血糖(Glu)、總膽紅素(Bil)、肌酐(Cre)、總膽固醇(CH0)、鉀、 磷指標，系統尸解、臟器稱重和病理組織學檢查結果，N393藥物組與 對照組動物比較皆沒有明顯差別。所獲結果表明N393為基本無毒物 質。
(3) N393對高脂飼料誘導的高脂大鼠的降脂作用 連續灌胃N393 —周，觀察N393對高脂飼料誘導的高脂大鼠動物 模型的降脂效果。實驗選用180-220g雄性Wistar大鼠70只，分出 10只為正常對照組，喂以普通大鼠飼料，其余喂以特殊的高脂飼料(3% 膽固醇，0. 2%甲基硫氧嘧咬，80%豬油，基礎飼料)連續8周，8周后眼眶 后靜脈叢取血測血清膽固醇含量，挑選血清膽固醇含量顯著高于正常 對照組大鼠血清膽固醇含量的大鼠為高脂模型，按血清膽固醇值隨機 分組，水分供應充足，自由飲水進食，每只鼠籠飼養5只大鼠，每日光 照12h，室溫18-23'C，墊料每天換一次。受試藥物N393以1%羥曱基 纖維素鈉配制成液體，按照體重灌胃給藥，連續一周。觀察血清甘油三 酯、膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量。采用商業試劑盒， 按照操作說明測定血清中各項指標。所獲結果如表2。
表2. 口服一周N393對高脂飼料誘導的高脂大鼠的作用(》±《
n-7。_
血清總膽固血清高密度脂血清低密度脂蛋血清甘油三
組別
醇(mmol/L)蛋白(mmol/L) 白(mmol/L) 酯(mmol/L)
正常組 1.77 ± 0.27 0. 63 ±0.27
模型組 3, 62 土 1.13" 0.40 ±0.08'
N393 200mg/Kg 2. 46 士 0. 39' 0. 55 ± 0. 20
N393 50mg/Kg 3, 08 ± 0. 56 0. 54 ± 0, 16
1.28 ±0.20 1.48 ±0.47
2. 10 ±0.88" 5. 59 ±1.48*'
1.61±0. " 2. 65 ±0.74"
1.55 ±0.29 2. 93 ±0.72"
與正常組比較# P<0. 05, " P<0. 01;與模型組比較*P<0. 05， "P<0. 01 與模型組比較，N393藥物組，大鼠血清總膽固醇、甘油三酯和血清低密度脂蛋白均顯著降低(P〈0. 05)，血清高密度脂蛋白有明顯升 高(P<0. 05)，表明N393具有明顯的降脂效果。
權利要求
1. 式I的α，β-苯基取代的丙烯酰胺衍生物，或其可藥用鹽，水合物或溶劑化物式I其中，R1-R13相同或不同，各自獨立地為氫、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、含C1-C30的脂肪烴、芳香烴或磷酸酯的酯基、氨基、C1-C6烷氨基、酰氨基、磺烷基、磺酰氨基、磺酰脲基、胍基、羧基、C1-C6酰基、硝基、氰基、鹵素、OX1、X2或SO2(OX3)基團，其中X1，X2，X3相同或不同，各自獨立地代表氫或金屬陽離子，NH4+陽離子等任何已知的推電子或吸電子基團，或含糖的甙。
2.權利要求1的化合物，其選自<formula>formula see original document page 2</formula>;和
3. 藥物組合物，其含有至少一種權利要求l所述的式I的ot, p-苯基取代的丙烯酰胺衍生物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，以及 一種或多種藥用載體或賦形劑。
4. 權利要求3的藥物組合物，其為片劑、膠嚢、顆粒劑、貼劑、 栓劑、滴劑、注射劑或其它適宜劑型。
5. 權利要求l的式Iot, p-苯基取代的丙烯酰胺衍生物，或其可藥用鹽、水合物或溶劑化物用于制備預防和/或治療高脂血癥的藥物 的用途。
全文摘要
本發明涉及式I的α，β-苯基取代的丙烯酰胺衍生物及其用于制備預防和/或治療高脂血癥的藥物的用途，其中R₁-R₁₃的定義見權利要求。
文檔編號C07C235/00GK101486666SQ200810184620
公開日2009年7月22日 申請日期2008年12月11日 優先權日2007年12月14日
發明者馮麗萍, 吳祖澤, 唐仲雄, 孫莊蓉, 陳金龍 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所;北京三有利科技發展有限公司