專利名稱：：一種阿霉素前體藥物的制備方法及其應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種阿霉素前體藥物和制備方法以及應用。
背景技術：
：癌癥在發達國家是導致死亡的第二大殺手。到目前為止，絕大多數癌癥仍然不能治愈。癌癥治療中主要困難是藥物選擇性低，在殺死癌細胞的同時，大量的正常組織和細胞也會死亡。因此尋求可以耙向性作用于腫瘤細胞的抗癌藥物成為研究的熱點。阿霉素(doxrubicin)屬蒽環類化合物，是最有效的抗癌藥物之一，在臨床上作為乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌等癌癥治療的首選用藥。但與其它抗癌藥物一樣，由于其易產生耐藥性，選擇性差，對正常組織也有細胞毒性，阿霉素的臨床應用遭遇瓶頸。阿霉素最嚴重的毒副作用是其心臟毒性，主要表現為慢性心肌病變和充血性心衰，其機制可能與氧應激反應有關。此外，由于選擇性較低，阿霉素同時作用于其它非腫瘤細胞，引起脫發，食欲下降，口腔潰瘍，腹瀉，血細胞減少等副作用；且由于阿霉素是與藥物產生耐藥性有關的P糖蛋白的底物，因此極易產生耐藥性。鑒于以上原因，在近20年中，人們針對阿霉素進行了大量的結構改造，開發出了近2000種阿霉素類似物，但僅有極少數的類似物進入了臨床研究階段或已經上市。這說明真正意義上的更好的蒽環類抗癌藥物仍未出現，針對阿霉素的改造和修飾仍在繼續，以期可減少毒性，增強腫瘤耙向性，提高療效。其中主要策略有制成阿霉素脂質體，制備阿霉素前體藥物以及合成類似物。前體藥物因其目的明確，易于控制成為修飾阿霉素的重要手段。目前對阿霉素前體藥物的設計主要集中在其13位的羰基和3'位的氨基，13位羰基主要改造方法為羰基成腙鍵，腙鍵在中性環境下穩定，在偏酸的環境下裂解釋放出阿霉素，而腫瘤細胞周圍pH較正常組織偏低，因此腙鍵的形成可起到腫瘤靶向作用；而3'的氨基則可與不同的物質相接以滿足各種需求。據文獻報道，L377202可被前列腺特異性抗原(PSA)識別并水解釋放出阿霉素，因此其可耙向性作用于PSA陽性的前列腺癌細胞，活性高于阿霉素同時毒性降低。阿霉素前體藥物V在pH5.0條件下釋放阿霉素的速度較pH7.4條件顯著增加，說明其是酸敏的腫瘤靶向前體藥物。a-亞麻酸(a-LNA)為全順式9,12,15-18碳三烯酸，屬"3系列不飽和脂肪酸，是組成人體各組織生物膜結構的具有廣泛生理活性和明顯藥理作用的人體必需脂肪酸之一。它廣泛存在于自然界中，動物乳汁、植物的葉、根、莖和果實、苔類、蕨類等低等植物和浮游生物中均含有一定量的a-亞麻酸，其中亞麻子及蘇子中含量最高,可達50%以上。但人體內本身并不能產生a-亞麻酸，只能從外源食物中攝取。a-亞麻酸具有豐富的藥理學作用，研究表明其對心血管系統有明顯的保健作用，可防治冠心病、腦血栓等心血管疾病，具有降血脂，降血壓，抗血栓作用。近年來研究又發現，a-亞麻酸還具有抗癌作用，文獻報道給斷乳的雌鼠喂食富含a-亞麻酸的食物后皮下接種乳腺癌細胞，結果證實a-亞麻酸對乳腺癌的生長和代謝都有抑制作用。a-亞麻酸對多種類型的腫瘤都有一定的抑制作用，如乳腺癌、肝癌、前列腺癌等，其抗癌活性可能與其抑制COX-2表達誘導腫瘤細胞調亡有關，且有報導稱一些腫瘤表面存在有與脂肪酸結合的受體，因此a-亞麻酸呈現一定的腫瘤靶向性及抗腫瘤活性。
發明內容本發明將阿霉素與a-亞麻酸結合得到一種阿霉素前體藥，可能會增強阿霉素的抗腫瘤作用，降低藥物毒副作用，提高靶向性，為抗腫瘤藥物的開發提供新的思路。本發明的前體藥是阿霉素與a-亞麻酸結合得到的阿霉素前體藥。阿霉素的結構式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>a-亞麻酸結構式如下H3C—(CH2)7-(CH=CHCH2)^COOH將阿霉素和a-亞麻酸在室溫條件下，加入DCC,DMAP催化合成阿霉素前體藥。該前藥可降低阿霉素的給藥劑量，提高療效，并具有一定的靶向性。圖l是游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對MCF-7乳腺癌細胞的細胞毒性研究曲線圖。圖2是游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對MDA-MB-231乳腺癌細胞的細胞毒性研究曲線圖。具體實施方式阿霉素-亞麻酸的合成路線<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>a:室溫，DCC,DMAP催化阿霉素前體藥物的體外抗腫瘤活性研究1目的通過IC5Q值的比較，以阿霉素為陽性對照，評價前藥抗腫瘤的活性。2研究方法將對數生長人乳腺癌細胞(MCF-7)、(MB-MDR-231)加入96孔培養板中，以阿霉素為對照，實驗孔加入不同濃度的前藥，培養48h后，每孔加入四甲基偶氮唑藍(MTT)20pl(5mg/ml)，溫浴4h，離心棄上清，每孔加入DMSO150pl使結晶完全溶解，作用30min并微振搖后，酶標儀490nm處檢測吸收度(OD)值，按公式計算細胞生長抑制率。細胞存活率對劑量對數線性回歸計算IC50值。3實驗結果細胞接種于96孔板中，接種密度為5X103，48h后將不同濃度的藥物加于細胞中孵育48h，加入MTT，4h后檢測。檢測結果見表l。細胞接種于96孔板中，接種密度為5X103，48h后將不同濃度的藥物加于細胞中孵育48h，加入MTT，4h后檢測。檢測結果見表2。表1游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對MCF-7乳腺癌細胞的IC50<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2游離阿霉素和阿霉素一a亞麻酸連接物對MDA-MB-231乳腺癌細胞的IC50<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>4結論由以上細胞結果可見，阿霉素一a亞麻酸連接物與游離阿霉素相比對兩株乳腺癌細胞的細胞毒性更強，且ICw值小于游離阿霉素，說明該前藥可降低阿霉素的給藥劑量，提高療效，并具有一定的靶向性，有很好的開發前景。權利要求1、一種阿霉素前體藥物的制備方法，其特征是阿霉素和α-亞麻酸在室溫條件下，加入DCC，DMAP催化合成阿霉素前體藥。2、阿霉素前體藥在治療癌癥中的應用。全文摘要本發明提供一種阿霉素前體藥物的制備方法及其應用，將阿霉素與α-亞麻酸在室溫條件下，加入DCC，DMAP催化合成阿霉素前體藥，該前藥可能會增強阿霉素的抗腫瘤作用，降低藥物毒副作用，提高靶向性，為抗腫瘤藥物的開發提供新的思路。文檔編號C07H15/00GK101353361SQ20081015056公開日2009年1月28日申請日期2008年8月8日優先權日2008年8月8日發明者周四元,宦夢蕾,張邦樂,梅其炳,滕增輝申請人:中國人民解放軍第四軍醫大學