作為抗癌化合物的取代三環葵烷化合物的制作方法

專利名稱：作為抗癌化合物的取代三環葵烷化合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一 系列作為抗癌化合物的取代三環葵烷化合物，及其藥學上可接受的鹽、酯或前藥，新化合物與藥學上可接受的栽體的組合物，和新化合物的應用。本發明化合物可以相應的抑制惡性肺瘤生長，通過靜脈、口服、皮下、動脈內給藥或局部給藥的方式給予惡性胂瘤患者進行治療，具有較高的靶向性、穩定性和較低的毒性。
背景技術：
癌癥已經成為威脅人類生命健康的最嚴重的疾病。由于老齡化人群始終在增加，預計癌癥的發病率會持續增長。目前治療癌癥使用的方法有手術、放療和化療。治療方式的選擇取決于癌癥的類型、位置和散布情況。化療是手術和放療的重要的輔助有段，對于不能手術和放療的癌癥只能借助于化療。
隨著對腫瘤細胞的基礎生物學研究的發展。目前鑒定了涉及瘤性轉化的細胞性活動和改變的細胞生長并且已經記錄了幾種人體肺瘤的癌發生中的多個步驟。已經鑒定了導致無法調節的細胞生長的癌基因并且將其表征為遺傳來源和功能并且詳細表征了調節細胞復制周期的特異性途徑并且已經克隆和表征了這種調節中涉及的蛋白質。此外，已經詳細闡明了介
導細胞凋亡反向調節細胞生長的分子(Kerr等，Cancer 1994， 73: 2013。目前已經證實操縱這些細胞調節途徑能夠終止腫瘤細胞中生長并且誘導其中的細胞凋亡(Cohen, and Tohoku， Exp . Med .，1992， 168 : 351;Fujiwara等，J. Natl. Cancer Inst. ， 1994， 86: 458 )。控制肺瘤細胞中的細胞生長和復制是重要的治療靶標。
研究表明三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮化合物對腫瘤細胞生長調節中涉及的蛋白質具有親和性，具有治療性和預防性作用，此類化合物能有效治療以異常細胞增值為特征的以下哺乳動物疾病例如腫瘤、息肉、子宮內膜異位癥、白血病、自身免疫性疾病、癌癥等。Walter報道了 10-氧雜-4-氮雜-三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮具有較好的抗腫瘤活性(Walter, W, G. J. Pharm. ScL 1989， 78: 66.)。另外有報道4-氮雜4- ( 2-甲基-2-亞硝基丙硫醇)-三環(5. 2. 1. 0")葵烷-8-烯-3，5-二酮具有治療Raynaud's綜合癥、炎癥、胃腸道病癥和中樞神經紊亂等病癥(US7， 238，814)。
本發明在大量實驗的基礎上，合成了未見報道的N， 1， 7， 8， 9， 10,10-不同取代的三環(5. 2. 1.02'6)葵烷-8-烯-3, 5-二酮系列化合物，研究表明此類化合物具有較強的抗腫瘤活性，某些化合物已經證明對一些類型的胂瘤具有顯著的治療作用。
按照本發明，這類新結構是具有強烈和持久效力的抑制腫瘤生長得的作用，同時降低了其副作用。

發明內容
本發明涉及取代的三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮化合物(I)及其藥學上可接受的鹽或前藥，新化合物與藥學上可接受的載體的組合物，和新化合物的應用。本發明化合物具有以下通式。
其中，W為具有1-IO個碳原子的直鏈的或帶支鏈的烷基、烷M或者芳香雜環取代基團，R2為鹵素(氟、氯、溴、碘)或具有1-10個碳原子的直鏈的或帶支鏈的烷基取代基團，113為氫原子或具有1-20個碳原子，可以具有1或2個雙鍵或三鍵的直鏈的或帶支鏈的脂肪族或芳香
5族基團。
本文所述的術語"烷基"被定義為包括飽和的一價烴鏈基團，具有直
鏈、支鏈或環狀的部分或其組合，非環狀烷基含有1-20個碳原子，優選l-6個碳原子，環烷基含有3-8個碳原子，也包括這樣的烷基部分，可選的地被1至5個取代基取代，取代基獨立地選自由卣素、羥基、巰基、氨基、硝基、氰基、氰硫基、酰基衍生物、磺酰基衍生物、亞磺酰基衍生物、烷基氨基、羧基、酯、醚、酰氨基、疊氮基、磺酸，氨磺酰基、硫代衍生物、氧基酯、氧基酰^J^、雜環、乙烯基、d—5烷氧基、Cw。芳氧基組成的基團。
優選的烷基是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基和2， 2-二甲基丙基，各自可選地被至少一個取代基取代，取代基選自由鹵素、羥基、巰基、氨基、硝基和氰基組成的基團。例如三氟甲基、三氯曱基、2，2，2-三氯乙基、l，l-二甲基-2，2-二溴乙基、l，l-二甲基-2,2，2-三氯乙基。
此處提到的烷氧基，為含有1-6個(優選地含有l-4個)碳原子，烴鏈為支鏈或直鏈。優選的烷氧基包括甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基和叔丁氧基。
此處提到的含有2 - 7個碳原子的鏈烯基，為直鏈的或帶支鏈的，例如乙烯基，或是直鏈的或帶支鏈的丙烯基，丁烯基，戊烯基，己烯基或庚烯基。雙鍵可以在鏈烯基的任何位置。
此處提到的含有2 - 7個碳原子的的炔基，為直鏈的或帶支鏈的，例如乙炔基，丙炔基，或直鏈的或帶支鏈的丁炔基，戊炔基，己炔基或庚炔基。三鍵可以在炔基的任何位置。
本文所用的術語"環烷基"表示來源于飽和環狀或多環烴的一價3-20碳基團，它可以可選地被任意適合的基團取代，包括不限于一個或多個選自烷基或如上關于烷基所述其它基團的部分。非限制性實例有環丙基、環丁基、環戊基、環戊基、環戊烯基、環戊基基、環庚基、環辛基等。
本文所用的術語"芳香族基團，，被定義為包括從由1-3個環組成并且
6含有6-30個碳原子的芳族烴基，例如苯基和萘基，各自可選地被多個取代基取代，取代基獨立地選自囟素、羥基、巰基、氨基、硝基、M、氰硫基、酰基衍生物、磺酰基衍生物、亞磺酰基衍生物、烷基氨基、氣基、酯、醚、酰氨基、疊氮基、磺酸，氨磺酰基、疏代衍生物、氧基酯、氧基酰氨基、雜環、乙烯基、Cw烷氧基、Cw。芳氧基、C^。烷基、d—i。烯基、Cw。炔基、d—u)卣代烷基，其條件是2個或更多取代基可以構成一個附著與芳環的環。
"雜環"、"雜環基，，或"雜環烷基"、"雜環基"，指具有一個環或多個稠合環、環中具有1-10個碳原子和l-4個選自氮、硫或氧的雜原子的飽和或不飽和基團，在稠合環系統中，假如連接點在雜環上，一個或多個環可以是環烷基、芳基或雜芳基。"取代的雜環，，、"取代的雜環烷基"或"取代的雜環基"指用與取代的環烷基中定義的相同的l-3個單、雙或三取代基取代的雜環基。
雜環基和雜芳基的例子包括但不限于氮雜環丁烷、吡咯、咪唑、吡啶、吡唑、嘧啶、吡喚、歧漆、中氮丐l、異巧1咮、叼1哚、二氫吲咮、吲唑、嘌呤、會嚷、異喹漆、哇淋、酞嚷、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、蝶啶、吵唑、咕啉、菲啶、菲咯啉、異噻唑、汾嗓、異噁唑、吩噻"秦、吩噁溱、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌、秦、二氫吲咮、鄰苯二甲酰亞胺、1,2， 3， 4 -四氫異喹啉、4，5，6，7-四氫苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯并[b]瘞吩、嗎啉基、硫代嗎啉基(也稱為疏嗎琳基)、哌啶基、吡咯烷、四氫呋喃基等。
本發明中式(I)代表的化合物藥學上可接受的鹽類化合物可以為氟化物、氯化物、溴化物、碘化物、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、枸櫞酸鹽、草酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、扁桃酸鹽、曱磺酸鹽或對曱苯磺酸鹽。
本發明中式(I)代表的化合物藥學上可接受的酯類化合物，指可在體內水解的酯，包括在人體內降解釋放出母體化合物或其鹽的酯，合適的酯基團包括例如衍生自藥學上可接受的脂族羧酸或脂族族醇，尤其是鏈烷酸(醇)、鏈烯酸(醇)、環烷酸(醇)和鏈烷二羧酸(二醇)的酯，其中優選的各烷基或烯基部分少于6個碳原子。
本文所述化合物對腫瘤細胞聲長調節中涉及的蛋白質具有親和性，具有治療性和預防性作用，此類化合物能有效治療以異常細胞增值為特征的
以下哺乳動物疾病例如腫瘤、息肉、子宮內膜異位癥、白血病、自身免疫性疾病、癌癥等。適合用本發明化合物進行治療的具體疾病優選的治療各種惡性腫瘤，藥物所作用的腫瘤性疾病為廣譜哺乳動物(包括人)身體引發的惡性腫瘤和癌癥，其中優選的作用于人類肺癌、人類非小細胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌和黑瘤，尤其是固體肺瘤(例如，肺、卵巢癌、乳腺、胃腸、結腸、胰腺、膀胱、腎、前列腺、腦)以及各種造血系統癌(例如，Hodgkin氏疾病、非Hodgkin氏'淋巴癌、白血癥)。其中所述的腫瘤性疾病選自白血病(包括急性白血病、急性淋巴白血病、急性髓細胞性白血病、成髓細胞白血病、前髓細胞性白血病、粒-單核細胞型白血病、單核細胞性白血病、紅白血病、慢性白血病、慢性髓細胞性白血病、慢性淋巴白血病)、真性紅細胞增多、淋巴瘤、何杰金病、非何杰金病、多發性骨髓瘤、特發性巨球蛋白血癥、實體瘤、肉瘤和癌、纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肉瘤、軟骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管內皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭腺癌、嚢腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細胞癌、肝癌、膽管癌、絨毛膜癌、精原細胞瘤、胚胎癌、維爾姆斯腫瘤、子宮頸癌、子宮癌、睪丸腫瘤、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神經膠質瘤、星形細胞瘤、成神經管細胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、成血管細胞瘤、聽神經瘤、少突神經膠質瘤、硬腦膜肉瘤、黑素瘤、神經母細胞瘤和視網膜神經細胞瘤等。
本發明化合物的治療方法包括將化合物以藥學上可接受的制劑形式給予患者，其劑量足以有效抑制所述異常細胞增值。因此，本發明提供治療患者的各種癌癥的的方法，所述方法包括給予癌癥患者lng/kg至500 ng/kg、更優選1 ^g/kg至約100 ^g/kg的抗增值化合物，其中癌癥的進一步增值被抑制，優選腫瘤對治療表現出部分反應或完全反應。本發明的化合物也可用作常規癌癥治療的輔助藥，以治療細胞凋亡抗 性腫瘤，并可用于治療其它疾病，以克服抗藥性。本發明的化合物可以與 至少一種常規癌癥治療同時或序貫給予。常規癌癥治療可以是放射治療、 化學治療和/或生物治療。優選的化學治療包括抗代謝藥、烷化劑、植 物堿和杭生素。優選的為阿西維辛、阿柔比星、鹽酸阿考達唑、阿克羅
寧、阿多來新、多柔比星、阿地白介素、阿利維A酸、別嘌醇鈉、六甲 蜜胺、安波霉素、醋酸阿美蒽醌、氨魯米特、安吖啶、阿那曲唑、氨茴霉 素、門冬酰胺酶、曲林菌素、阿扎胞苷、阿扎替派、阿佐霉素、巴馬司他、 苯佐替派、貝沙羅汀、比卡魯胺、鹽酸比生群、二曱磺酸雙奈法德、硫酸 博來霉素、布喹那鈉、溴匹立明、白消安、卡麥角林、卡普睪酮、卡醋 胺、鹽酸卡柔比星、塞來考昔、苯丁酸氮芥、西羅霉素、甲磺酸克立那托、 環磷酸胺、阿糖胞苷、達卡巴奉、鹽酸柔紅霉素、地西他濱、地扎胍寧、 地吖醌、多西他賽、屈洛昔芬、丙酸甲雄烷酮、達佐霉素、依達曲沙、鹽 酸依氟鳥氨酸、依沙,星、巴普氨酯、依匹哌啶、鹽酸表柔比星、厄布洛 唑、鹽酸依索比星、雌莫司汀、雌二醇氮芥磷酸鈉、依他硝唑、乙碘油 I131、依托泊苷、氯苯乙嘧胺、鹽酸法羅唑啉、法扎拉濱、芬維A胺、氟 尿嘧啶脫氧核苷、磷酸氟達拉濱、氟尿嘧啶、氟西他濱、磷喹酮、福司曲 星鈉、吉西他濱、醋酸戈舍瑞林、鹽酸伊達比星、異環磷酸胺、伊莫福新、 鹽酸依立替康、醋酸蘭瑞肽、來曲唑、醋酸亮丙瑞林、鹽酸利阿唑、洛美 曲索鈉、洛莫司汀、鹽酸洛索蒽醌、馬索羅酚、美登素、鹽酸氮芥、醋酸 甲地孕酮、醋酸美侖孕酮、美法侖、美諾立爾、巰噪呤、曱氨蝶呤、曱氧 沙林、氯苯氨啶、美妥替派、米丁度胺、米托潔林、米托馬星、絲裂霉素、 米托司培、米托坦、鹽酸米托蒽醒、麥考酚酸、諾考達唑、諾拉霉素、奧 昔舒侖、紫衫醇、帕米麟酸二鈉、培門冬酶、培利霉素、溴新斯的明、硫 酸培來霉素、培磷酰胺、派泊溴烷、派泊舒凡等。
本發明的任一項化合物可以作為與由鉑、鈦、釩、鈮、鋁、錸或錫 的含有金屬的抗腫瘤藥物的組合物，優選的含有金屬的抗腫瘤藥物為順 鈾、卡柏、奧沙利粕、teraplatin 、 Platiniuln-DACH 、奧馬賴、二氯 環戊二烯鈥、二氯環戊二烯釩、二氯環戊二烯鈮、二氯環戊二烯鋁、二氯環戊二烯錸、二卣代二有機錫或其它含有金屬的抗腫瘤藥物。
作為其他腫瘤治療手段的輔助治療方案，優選的放射治療包括光動 力學治療、放射性核苷酸和放射免疫治療。優選的生物治療包括免疫治療、 分化劑和靶向癌細胞生物學的藥物。以上概述給出了相當廣泛的本發明的 某些特征，以便理解其后的發明詳述，也便于更好地了解本發明的所屬領 域。根據以下發明詳述，本發明的其它目的和特征將會是顯而易見的。然 而，可以理解，實施例僅僅是為了說明的目的，并不作為本發明的限制性 定義，只有所附權利要求書才對本發明進行限定。
根據臨床需要可制成不同給藥方式和劑型，藥物制劑的給藥方式為 全身給藥或局部給藥，劑型包括靜脈、口服、皮下、動脈內給藥或局部 給藥的方式對患者進行治療。
本發明的上述目的可以通過下列合成路線來實現 通過1， 2， 3， 4， 5-取代的環戊二烯和N-取代的馬來酸酐反應得到目 標化合物。
具體的合成路線如下圖所示:
(l)
具體實施例方式
下面用實施例具體說明本發明，這些實施例不應理解為任何意義上 的對本發明的限制。
實施例1 10， lO-二甲氧基-1， 7， 8， 9-四氯-4-氮雜-N-乙基-三 環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(1)的合成
將2. 6g(10mmo1) 3， 3-二曱氧基-1， 2， 3， 4-四氯環戊二烯溶于 于80mL乙醚中，加入N-乙基馬來酰胺1.5g(12mmo1),回流攪拌反應5 個小時，蒸處溶劑，柱層析得到白色固體(l) , 3. lg,收率81%。熔點124-126匸。元素分析C13H13N04C14:理論值％: C40. 13, H 3. 37， N 3. 60; 實驗值％: C復22， H3.46, N 3. 63。 NMR: S(ppm， CD3C1) ， 3. 65 (s， 3H)， 3. 61(s， 2H)， 3. 59(s， 3H) ， 3.49(m， 2H) ， 1.09(m， 3H)。
實施例2 10， 10-二曱氧基-l， 7, 8, 9-四溴-4-氮雜-N-乙基-三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(2 )的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二甲氧基-l， 2， 3, 4-四溴環戊二 烯和N-乙基馬來酰胺反應。得淡黃色固體(2)，收率73%,熔點105-109 X:。元素分析d化3N04Br4，理論值％: C 47.73, H 4.01， N 4.28;實 驗值％: C 47. 79 H 4. 06, N 4. 36。力-隨:S(ppm， CD3C1), 3.67(s, 3H), 3.62(s， 2H)， 3. 58(s， 3H) ， 3.46 (m， 2H) ， 1.07(m， 3H)。
實施例3 10， 10-二甲氧基-1， 7， 8， 9-四甲基-4-氮雜-N-乙基-三環(5. 2, 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(3 )的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二甲氧基-1, 2， 3， 4-四甲基環戊 二烯和N-乙基馬來酰胺反應。得白色固體(3)，收率78%，熔點lM-l39 ■C。元素分析(:17}125冊4，理論值％: C 66.43， H 8. 20, N 4. 56;實驗值 %: C 66.49 H 8.26， N 4. 66。
NMR: S(ppm， CD3C1) ，3. 67 (s， 3H)， 3. 62(s， 2H)， 3. 58(s， 3H), 3. 46 (m， 2H) ， 2. 34 (m， 6H) ， 1. 34 (m， 6H)， 1.07(m， 3H)。
實施例4 10， 10-二曱氧基-1, 7， 8， 9-四氯-4-氮雜-N-苯基-三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(4 )的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二曱氧基-1， 2， 3， 4-四氯環戊二 烯和N-苯基馬來酰胺反應。得淡黃色固體(O,收率77%,熔點l25-127 X:。元素分析d7H!3NOXl4，理論值％: C 46.71， H 3.00， N 3.20;實 驗值°/。 C 46. 75 H 3. 06， N 3. 26。 ^-NMR: S(ppm， CD3C1) ， 7. 45 (m， 3H)， 7.13(m， 2H)， 3.80(s， 2H) ， 3. 65 (s， 3H) ， 3. 61 (s， 3H)。
實施例5 10， lO-二甲氧基-1, 7， 8， 9-四溴-4-氮雜-N-苯基-三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(5 )的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二曱氧基-1， 2， 3， 4-四溴環戊二 烯和N-苯基馬來酰胺反應。得黃色固體(5)，收率68%，熔點106-109
ii*C。元素分析C"Hu歸r4，理論值%: C 54.42， H 3.49， N 3.73;實 驗值％: C 54. 49 H3. 46， N 3. 76。H-NMR: S(ppm， CD3C1) ， 7. 48 (m, 3H)， 7. 15(m， 2H)， 3. 83(s， 2H) ， 3. 68(s， 3H) ， 3. 63(s， 3H)。
實施例6 10, lO-二曱氧基-1, 7， 8, 9-甲基-4-氮雜-N-苯基-三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(6 )的合成
合成方法同實施例l，由13, 3-二甲氧基-1, 2， 3， 4-四曱基環戊 二烯和N-苯基馬來酰胺反應。得黃色固體(6)，收率78%，熔點134-136 C。元素分析CnH25N04，理論值％: C 70.96, H 7.09, N 3.94;實驗值 0/。C 70.90 H7. 06， N 3.96。'H-NMR:S(ppm， CD3C1)， 7.46 (m， 3H) ， 7.13(m， 2H)， 3. 82(s， 2H)， 3, 64(s, 3H) ， 3. 60(s， 3H) ， 2. 34 (m， 6H) ， 1.34(m， 6H)。
實施例7 10， lO-二甲氧基-1， 7, 8， 9-四氯-4-氮雜-N-千基-三 環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(7 )的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二甲氧基-1， 2, 3, 4-四氯環戊二 烯和N-節基馬來酰胺反應。得淡黃色固體(7)，收率72%，熔點113-116 匸。元素分析C]8H15N04C14，理論值％: C 47.92， H 3.35, N 3.10;實 驗值％: C 47. 95 H 3. 26, N 3. 16。 'H-NMR: S(ppm， CD3C1) ， 7. 37(m， 2H)， 7.26(m， 3H)， 455 (s， 2H), 3.62(s， 6H) ， 3. 55(s， 3H)。
實施例8 10， 10-二甲氧基-1， 7, 8， 9-四氯-4-氮雜-N-(2-氯苯 基)-三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(8 )的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二甲氧基-1， 2， 3, 4-四氯環戊二 烯和N-(2-氯苯基)馬來酰胺反應。得淡黃色固體(8),收率72%,熔 點122-125"C。元素分析C17H12N04C1"理論值%: C 43. 30， H 2. 56, N 2. 97; 實驗值°/。C 43. 35 H 2.51， N 2.90。 5(ppm,CD3Cl)， 7.45 (m， 1H) ， 7.22(m， 2H), 7.15(m， 1H)，3. 81(s， 2H) ， 3.64(s， 3H) ， 3.61(s， 3H)。
實施例9 10, 10-二甲氧基-l， 7， 8， 9-四氯-4-氮雜-N-(2-氟苯 基)-三環(5. 2. 1. 02'6)葵烷-8-烯-3, 5-二酮(9 )的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二甲氧基-1， 2, 3, 4-四氯環戊二 烯和N-(2-氟苯基)馬來酰胺反應。得淡黃色固體(9)，收率72%，熔
12點118-1221C。元素分析CnHnN(U:i4F，理論值%: C 44. 87， H2. 66， N 3.08;實驗值%: C 44.80 H 2.59, N 2.99。 S(ppm, CD3C1), 7.44(m， 1H), 7,20(m， 2H)， 7.13(m， 1H)， 3.80(s， 2H)， 3.63(s， 3H) ， 3. 60(s， 3H)。
實施例IO 10, lO-二曱氧基-1， 7， 8， 9-四氯-4-氮雜-N-(4-甲苯 基)-三環(5. 2.1. 02'6)葵烷-8-烯-3， 5-二酮(10)的合成
合成方法同實施例l，由3， 3-二甲氧基-l， 2, 3， 4-四氯環戊二 烯和N-(4-曱苯基)馬來酰胺反應。得淡黃色固體(IO),收率72%,熔 點101-104TC。元素分析C18H15N04C14，理論值%: C 47. 92， H 3. 35, N 3. 10; 實驗值°/。C 44. 80 H 3.39， N 3.02。 S(ppm，CD3Cl)， 7.42 (m， 3H) ， 7. ll(m， 2H)， 3. 82(s， 2H)， 3.64(s， 3H) ， 3. 61(s， 3H) ， 2. 35(s， 3H)。
實施例ll細胞毒性藥理實驗
用SRB法測定目標化合物對3種人癌細胞的增殖抑制作用。取對數生 長期的人胃癌SGC-7901細胞、人宮頸癌HeLa細胞、人早幼粒性白血病 HL-6Q細胞、人肝癌細胞Bet-74Q2和人口腔上皮癌細胞KB等5種人癌細胞 以4xl04個/mL細胞接種于96孔板內。在37 X:、體積分數5 %的0)2飽 和濕度培養箱中培養12 h ，加入待測化合物處理48 h后，浮游細胞HL-60 需每孔加入50pL 4 C預冷的體積分數80 °/。的三氯醋酸，使其最終達到體 積分數為16 。/。；貼壁細胞則需每孔加入50jiL 4"C預冷的體積分數為50 % 三氯醋酸，使其最終達到體積分數為IO %。 4'C水箱固定細胞1 h后，每孔 加入50pL體積分數為O. 4 。/。的磺酰羅丹明B ，室溫染色30min。最后每孔 加入150pL 10腿ol . 1/的Tris堿，在微量振蕩器上振蕩15 min ，直至染 料全部溶解。利用酶標儀在540 nm處測每孔溶液的吸光度值(A值)、 空白孔吸光度值。按以下公式計算目標化合物對腫瘤細胞體外增殖的抑制 率(inhibition rate ， IR):
<formula>formula see original document page 13</formula>
用ICPl. 0. 0軟件計算藥物的半數抑制濃度(IC5。)。并與陽性對照藥羅 菲昔布和5-氟尿嘧啶比較。結果顯示化合物2(23. 1)， 3(35.2)， 5(21.0)， 7(35. 4)對人胃癌SGC-7901細胞和人宮頸癌HeLa細胞的I"值低于低于P曰性對照藥(59.6);化合物1(13.1)， 6(18.1), 8(25.1)， 9(28.1)， 10(29.1)對人早幼粒性白血病HL-60細胞的IC^值低于陽性對照藥 (53.1)。所測試化合物對人早幼粒性白血病HL-60細胞、人肝癌細胞 Bet-7402和人口腔上皮癌細胞KB均有較強的抑制活性。
實施例12樣品體外培養抗胖瘤作用實驗
采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法測定所發明化合物對腫瘤細胞生長的 抑制效應。方法將含體積分數為10。/。新生小牛血清的RPMI-1640培養液 配制的小鼠肉瘤腹7jc抹(S一 、小鼠艾氏腹水瘤株(EAC)和小鼠肝癌腹水 抹(HeAP) 3種胂瘤細胞懸液分別接種于96孔培養板，每孔180j^L (接種 濃度為5 xi05/mL),同時加入受試化合物使每孔濃度分別為250、 50 、 10 、 2、 0.4ng/ mL共5個濃度，每個濃度均做3個復孔。將培養板置 于體積分數為5%0)2 、恒溫37 X:、 100 %相對濕度的培養箱內培養，72 h 后每孔分別加入50yL MTT (1 mg/mL),繼續培養4 h棄去上清液，每孔 加入150 mL二曱基亞砜(DMSO)，震蕩溶解后采用3550型酶標儀在波長 595 mn處測吸光度(^)值，計算細胞存活率p細胞存活/ % ="實驗組/^照組x 100%,將細胞存活率與化合物濃度的對數進行回歸統計處理，計算半數 抑制濃度(p^。)，并與陽性對照藥順鉑比較。結果顯示化合物2~8對 3種腫瘤細胞林均顯示出較強的抑制作用，作用均顯著性高于陽性對照 藥順鈿(P < 0. 01)。
權利要求
1. 式(I)為一種可用于治療腫瘤的取代的三環(5.2.1.02，6)葵烷-8-烯-3，5-二酮化合物及其藥學上可接受的鹽或前藥，及其與藥學上可接受的載體的組合物其中，R1為具有1-10個碳原子的直鏈的或帶支鏈的烷基、烷氧基或者芳香族取代基團，R2為鹵素(氟、氯、溴、碘)或具有1-10個碳原子的直鏈的或帶支鏈的烷基取代基團，R3為氫原子或具有1-20個碳原子，可以具有1或2個雙鍵或三鍵的直鏈的或帶支鏈的脂肪族或芳香族基團。
2. 前述權利要求的藥物，可以是藥學可接受的鹽類化合物為氟化物、氯化物、溴化物、碘化物、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、枸櫞酸鹽、草酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、扁桃酸鹽、曱磺酸鹽或對曱苯磺酸鹽。
3. 前述權利要求的藥物，可以是藥學可接受的酯類化合物，指可在體內水解的酯，包括在人體內降解釋放出母體化合物或其鹽的酯，合適的酯基團包括例如衍生自藥學上可接受的脂族羧酸或脂族族醇，尤其是鏈烷酸(醇)、鏈烯酸(醇)、環烷酸(醇)和鏈烷二羧酸(二醇)的酯，其中優選的各烷基或烯基部分少于6個碳原子。
4. 權利要求1至權利要求3中任一項的化合物或藥物組合物可以作為與其它抗腫瘤藥物的組合物，其中組合用抗腫瘤藥物選自小分子有機抗腫瘤分子、生物制劑或由鉑、鈦、釩、鈮、鋁、錸或錫的含有金屬的抗腫瘤藥物，包括凋亡誘導劑、多核苷酸(如核酶)、多肽(如酶)、藥物、生物模擬物、生物堿、烷化劑、抗癌抗生素、抗代謝劑、新生血管發生抑制劑等藥物，優選的含有金屬的抗腫瘤藥物為順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、teraplatin 、 Platiniuln-DACH 、奧馬賴、二氯環戊二烯鈥、二氯環戊二烯釩、二氯環戊二烯鈮、二氯環戊二烯鋁、二氯環戊二烯錸、二卣代二有機錫或其它含有金屬的抗腫瘤藥物。
5. 權利要求1至權利要求3中任一項的化合物或藥物組合物所作用的肺瘤性疾病為廣鐠哺乳動物(包括人)身體引發的惡性肺瘤和癌癥，其中優選的作用于人類肺癌、人類非小細胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌和黑瘤，尤其是固體腫瘤(例如，肺、卵巢癌、乳腺、胃腸、結腸、胰腺、膀胱、腎、前列腺、腦)以及各種造血系統癌(例如，Hodgkin氏疾病、非Hodgkin氏、淋巴癌、白血癥)。
6. 權利要求1至權利要求3中任一項的化合物或藥物組合物可以通過靜脈、口服、皮下、動脈內給藥或局部給藥的方式給予患惡性腫瘤的患者。
全文摘要
本發明涉及一系列作為抗癌化合物的取代三環葵烷化合物，及其藥學上可接受的鹽、酯或前藥，新化合物與藥學上可接受的載體的組合物，和新化合物的應用。本發明化合物可以相應的抑制惡性腫瘤生長，通過靜脈、口服、皮下、動脈內給藥或局部給藥的方式給予惡性腫瘤患者進行治療。
文檔編號C07D209/00GK101463003SQ20081014741
公開日2009年6月24日 申請日期2008年8月15日 優先權日2008年8月15日
發明者湖 劉 申請人:湖 劉