專利名稱：：一種從藿香中同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種從藿香中同時提取精油、黃酮和二萜類成分的工藝，屬中草藥資源的加工利用
技術領域：
。
背景技術：
：廣藿香(/fc^a尸ogo他wo^s，又稱天竺薄荷、綠葉刺蕊草)，系一種一年生草本植物，同時也是東南亞一帶非常有名的一種常用草藥材，一般以陰干的地上部分或莖稈入藥。原產亞洲菲律賓等亞熱帶地區，我國主產于廣東、海南；有栽培。廣藿香是臨床上常用的芳香化濕藥，其味辛，性微溫，歸脾、胃、肺經，具有芳香化濁、開胃止嘔、發表解暑的功能。臨床上主要用丁濕濁中阻、脘痦嘔吐、暑濕倦怠、胸悶不舒、寒濕閉暑、腹痛腹瀉、鼻淵頭痛等癥的治療111。藿香(i^^a^gosto^M，又稱土霍香、排香草、大葉薄荷)，系一種多年生草本植物，同時也是我國特有的一種常用中草藥材，一般以陰干的地上部分或莖稈入藥。主產四川、江蘇、浙江、湖南；有栽培。性微溫，味辛。祛暑解表，化濕和胃。用于暑濕感冒、胸悶、腹痛吐瀉[11。研究報道表明，藿香揮發油能刺激胃粘膜，促進胃液分泌，提高消化能力，對胃腸道有解痙作用121。并具有顯著的抗菌作用，能抑制引起上呼吸道感染的病原體生長繁殖，具有治療感冒的作用。此外，廣藿香和藿香中不僅含有豐富的揮發油，而且含有金和歡素、田薊苷、蒙花甙、藿香甙、異藿香甙、藿香素、芹菜素、芹菜素-7-葡萄糖苷、6-甲氧基芹菜素、木犀草素、木犀草素-7-葡萄糖苷等黃酮類化合物和山楂酸，齊墩果酸，3-乙酰齊墩果醛，3-乙酰齊墩果酸，a-香樹精，(3-香樹精，菜油甾醇，菜油甾烷醇，熊果酸，古柯二醇，古柯二醇-3-乙酸酯等三萜類化合物，具有廣泛的生理活性，有保肝、抗腫瘤、抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、抗帶狀皰疹病毒、增加免疫力等諸多功效131關于藿香中的藥理活性成分的分離提取技術，目前多集中在香精油的分離提取方面。從藿香中同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝國內外尚未見報道。1陳士林，《中草藥大典》[OL],2006年8月版。軍事科學出版社。http:〃tieba.baidu.com/fkz4306210792PatwardhanSA,gopraAS.AnoctamethoxyflavonefromAgastacherugosa.Phytochemistry，1981,20(6)1485~14593封錫志，徐綏緒，《藿香屬植物化學及藥理活性的研究進展》[J]1998，15(2),144-148
發明內容本發明發明了一種從藿香中同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝。較為獨特的是，它充分考慮了藿香藥材中所含有效成分的特性，對其中所含的各種有效成分進行了分別的提取，實現了藿香藥材中各類活性成分的分離。按照本發明進行操作，能夠以極高的提取率獲得藿香中所含有的揮發性精油、黃酮類成分和三砲類成分，而不會導致活性成分的丟失或破壞。這對于藿香藥材資源的綜合利用而言是至關重要的。按照本發明加工生產的藿香精油、藿香黃酮和藿香三萜將作為新型天然藥物原料和功能保健飲料原料被廣泛應用于藥品、保健品等領域。具體來說，首先，我們發現藿香中所含有的黃酮類和三萜類成分非常穩定，在我們所采取的水蒸汽蒸餾工藝條件下，可以完好的保留在水蒸汽蒸餾后的殘渣中，既不會隨著精油被水蒸氣蒸出，也不會在水蒸汽蒸餾的高溫濕熱環境中被降解。由此奠定了從藿香中同時提取精油、黃酮和三萜類成分的基礎。其次，我們發現采用水蒸汽蒸餾技術可有效避免將藿香藥材放在水中長時間煎煮而導致的水煎液所含成分過于復雜以及其中的黃酮和三萜類成分的含量偏低的問題。在我們所采取的水蒸汽蒸餾工藝條件下，所得到的藥材蒸餾殘渣經干燥后，其中所含的黃酮和三萜類活性成分可被有效的保留下來。我們發現，在水蒸汽蒸餾中，冷凝溫度對于精油的得率而言是最為重要的。冷凝溫度應當在0~25°C范圍內。在黃酮類和三萜類成分的分離提取中，水蒸汽蒸餾殘渣的干燥方式以及干燥后的水分含量是至關重要的。干燥應當在0120°C，0.001^0.5MPa的條件下進行，水蒸汽蒸餾殘渣應當被干燥到水分含量15%以下。其他各項參數，藿香原料為藿香(Wer6a^gastoc/!"，又稱土霍香、排香草、大葉薄荷)或廣藿香(Z/e^aPogw/ewo^s,又稱天竺薄荷、綠葉刺蕊草)，可以是新鮮的或干燥的全草，也可以是新鮮的或干燥的葉子、莖稈或其他任何局部部分。水蒸汽蒸餾的餾出液收集量為藿香藥材的量的2~10倍。精餾在常壓下進行，精油的收集量為餾出液的量的1%~20%。黃酮和三萜類成分的乙醇提取在50。C回流的條件下進行，所用乙醇的濃度為80~100%v/v，料液比為1:5-1:10，提取時間為0.5~2h，提取次數為1~3次。乙醇溶劑的回收在050。C，0.0014.5MPa條件下進行，回收至膏狀物中的乙醇含量低于3%終止。黃酮類和三萜類成分的丙酮提取分離在30。C回流的條件下進行，所用丙酮為無水丙酮，料液比為1:21:5，提取時間為0.52h,提取次數為13次。丙酮溶劑的回收和脫除在050。C，0.001-0.5MPa條件下進行，回收至固體粉末中的丙酮含量低于0.3%終止。具體實施方式下面的實例將具體說明本發明的操作方法，但不能作為對本發明的限定。實例一取廣藿香莖100g,置于水蒸汽蒸餾裝置上，連接蒸汽發生裝置，進行水蒸汽蒸餾，用20。C的自來水冷凝，收集餾出液，蒸餾至餾出液込到300ml終止。殘渣放置在室溫下晾干；餾出液精餾得到精油2.5g。殘渣晾至水分含量低于15%后，按照1:4的料液比用濃度為95%v/v的乙醇在回流溫度(78.5'C)下提取3次，每次30min，得到乙醇提取液。乙醇提取液回收溶劑，得到棕黃色至棕褐色的膏狀物13.05g。膏狀物按照l:4的料液比用丙酮在回流溫度(56.5'C)下提取3次，每次30min，將膏狀物分為丙酮抽提物和不溶于丙酮的固體粉末兩個部分。丙酮抽提物回收丙酮并干燥，得到固體粉末6.7g，即為藿香黃酮。不溶于丙酮的殘渣，脫除丙酮溶劑并干燥后，得到固體粉末0.73g，即為藿香三萜。實例二取20kg新鮮藿香葉，漂洗后裝入1000L蒸餾釜中，通入蒸汽進行水蒸汽蒸餾，用4。C的水冷凝，收集餾出液，蒸餾至餾出液達到100kg終止。收集蒸餾釜中的殘渣，置真空烘箱中于60°C下烘干至水分含量低于10Q/。，餾出液置分餾釜中分餾，收集前0.5%的餾分，得到0.5kg精油。在水分含量達到要求后，按照1:4的料液比用95%v/v的乙醇在75°C下浸泡提取3次，毎次30min,得到乙醇提取液。提取液置蒸發濃縮裝置上冋收乙醇，得到棕黃色至棕褐色的膏狀物2.5kg。膏狀物按照l:4的料液比加入丙酮，在回流溫度(56.5'C)下提取3次，得到丙酮提取液。回收溶劑丙酮，并將所形成的半固體置真空烘箱中于60。C下烘干，得到藿香黃酮固體粉末1300g;不溶于丙酮的殘渣，在脫除丙酮溶劑并干燥后，得到藿香三萜類固體粉末140g。實例三對一份新鮮藿香葉水蒸汽蒸餾得到的精油樣品進行了組成的測定，測定結果見表1。測定結果表明，自新鮮藿香葉得到的精油的主要成分主要為順式-異薄荷酮和反式-異薄荷酮，其含量分別為34.11%和15.42%。其余為胡椒酮、己烯醛、S杜松萜烯、杜松醇、a衣蘭油烯、檸檬烯、胡薄荷酮等40種成分，其中的胡椒酮有平喘作用，對豚鼠過敏性休克有保護作用，且隨劑量增加，有一定量效關系，可用于哮喘的治療。胡薄荷酮有抗組胺作用，己烯醛具有有效的抗菌活性，D-檸檬烯具有抗腫瘤功效，抑菌活性，祛痰、止咳功效，溶解膽結石作用，表明本工藝加工得到的精油具有很好的藥效作用。表1新鮮藿香葉水蒸餾餾出物的化學組成<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>521.493483-76-1204.35C15H24S-杜松萜烯2.948621.21431983-22-9204.35C15H24a-衣蘭油烯2.885711.385138-86-3136.23Ci。Hi6dl-擰檬烯2.807816.81715932-80-6152.23胡薄荷酮2.411921扁23986-74-5204.35C|5H24大根香葉烯D2,1571013.4532442-10-6170.25C10H18O2乙酸-卜辛烯-3-醇酯2馬1121.43339029-41-9204.35C15H24"杜松萜烯1,3171223.12419912-62-0222.37C15H260T-衣蘭醇1.2931323.273481-34-5-222.37Cl5H260a-杜松醇1.281418.5773242-08-8204.35C15H24Y-欖香烯1.191521.12821747-46-6204.35C15H24喇叭烯1.0341620.371489-39"4204.35C15H24(+)-香木蘭烯0.8191719.554515-13-9204.35C15H24p-欖香烯0.7811820.88330021-74-0204.35C15H24y-衣蘭油烯0.7231917.7613536-54-7194.27Cl2H1802香檜酰基乙酸酯0.7222021.547483-77-2202.34Ci5H22菖蒲萜烯0.5882122.3126750-60-3220.35C15H240匙葉桉油烯醇0.5872217.85989-83-8150.22麝香草酚0.5822322.425489-41-8222.37C15H26O藍桉醇0.4842420.04214912-44-8204.35C15H24依蘭烯0.4332518.09754324-99-1194.27C12H18O2乙酸菊烯酯0.432620.70754324-03-7204.35C15H24表二環倍半水芹烯0.4172721.73824406-05-1204.35C15H24a-杜松砲烯0.3952811.24521195-59-5134.22C10H141，3,8-p-薄荷三烯0.3652920.654523-47-7204.35C15H24p-杜松萜烯0.3423018.8317699-14-8204.35C15H24a-畢澄茄烯0.2973122.549552-02-3222.37C15H26O綠花白千層醇0.2713219.495208-59-3204.35C15H24P-波旁烯0.2693320.834150320-52-8204.35C15H24l-甲基-6-亞甲基-4-異丙基1，2'3，5,7，8，8a八氫萘0.2213415.3310458-14-7154.25CioHigO薄荷酮0.2163519.3453856-25-5204.35C15H24古巴烯0.1873615.36629606-79-9152.23CioHi6。異胡薄荷酮0.1783721.68216728-99-7204.35Ci5H241，2，3，4,4A，7-六氫-l,6-二甲基-4-(l-甲基乙基)-萘0.163820,22613744-15-5204.35C15H24P-畢澄茄烯0.1513920.51419435-97-3222.37C15H26。S-杜松醇0.1354019.64295910-36-4204.35C15H24(-)-異喇叭烯0.132實例四對一份廣藿香藥材得到的黃酮和三萜類成分的樣品進行了組成的測定。測定結果表明，所得到的藿香總黃酮中含有金和歡素、田薊苷、蒙花甙、藿香甙、異藿香甙、藿香素、芹菜素、芹菜素-7-葡萄糖苷、6-甲氧基芹菜素、木犀草素、木犀草素-7-葡萄糖苷等黃酮類化合物，其中的主要黃酮類成分為藿香甙和異藿香甙，其含量分別為25.8%和8.21%。所得到的三萜類物質中含有山楂酸，齊墩果酸，3-乙酰齊墩果醛，3-乙酰齊墩果酸，a-香樹精，p-香樹精，菜油甾醇，菜油甾烷醇，熊果酸，古柯二醇，古柯二醇-3-乙酸酯等三萜類化合物，其中的主要三萜類成分為山揸酸，其含量為34.6%。這些成分具有廣泛的生理活性，有保肝、抗腫瘤、抗HIV-1及HIV-1蛋白嗨活性、抗帶狀皰疹病毒、增加免疫力等諸多功效，具有提神醒腦、健胃防暑等生理作用，效果顯著，無毒副作用。實例五以健康昆明種小白鼠(雌雄各半，4周齡，體重18-22g,由無錫市惠山江南實驗動物場提供批準號SCXK(蘇)2002-0006)為實驗動物，對所得到的精油進行急性毒性試驗，所得結果見表2和表3。表2供試樣品對小鼠體重的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表3急性毒性實驗結果組別小鼠數量給藥劑量一周體重增長增長率死亡數空白對照組100.5mL/只3.374g14.79%0試驗組1025000mg/kg1.579g6.63%0通過觀察，給藥后lh內小鼠活動均減少，4h后逐漸恢復正常活動。試驗組2d內進食量有所減少，以后的5d內小鼠食欲、精神、毛色均正常；7d后，脫頸處死，肉眼尸檢未見心、肝、脾、肺、腎等主要臟器病變和中毒現象。觀察期7d內每天稱重，試驗組小鼠的體重在給藥后2d內下降，說明這2d小鼠的進食量減少，以后的5d內，體重逐漸恢復并不斷增加。研究結果表明，在供試樣品大劑量灌胃的情況下，未出現小鼠死亡，也未有明顯毒性反應。說明其毒性，其最大安全劑量在25g/Kg以上。權利要求1.一種從藿香中同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝。該工藝由下列步驟組成1)對藿香原料進行水蒸汽蒸餾或水上蒸餾，得到無色透明的餾出液和料渣；2)對所得到的餾出液進行精餾，得到無色透明的精油；3)對所得到的料渣進行干燥和乙醇提取，然后回收乙醇溶劑，得到棕黃色至棕褐色的膏狀物；4)對所得到的膏狀物進行丙酮提取，將膏狀物分為可溶于丙酮和不溶于丙酮的兩個部分；5)可溶于丙酮的部分，回收丙酮溶劑并干燥后，得到固體粉末，即為藿香黃酮；6)不溶于丙酮的部分，脫除丙酮溶劑并干燥后，得到固體粉末，即為藿香三萜類成分。2.如權利要求1所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于藿香原料為藿香(7/"to^gastoc/es,又稱土霍香、排香草、大葉薄荷)或廣藿香(Z/ertoPogoWemos&,又稱天竺薄荷、綠葉刺森草)，可以是新鮮的或干燥的全草，也可以是新鮮的或干燥的葉子、莖稈或其他任何局部部分。3.如權利要求l所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的水蒸汽蒸餾或水上蒸餾是指將藿香原料放入水與原料隔離開來的密閉容器中，通入蒸汽或對水進行加熱產生蒸汽，使蒸汽穿過料層，然后冷凝并收集所形成的蒸汽，得到餾出液和料渣的過程。4.如權利要求3所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的水蒸汽蒸餾或水上蒸餾在加熱溫度100~150°C,冷凝溫度0~25°C的條件下進行，餾出液的收集量為藿香原料的量的2~10倍。5.如權利要求1所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的精餾在常壓下進行，精油的收集量為餾出液的量的1%~20%。6.如權利要求l所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的干燥在0M20。C，0.001-0.5MPa條件下進行，干燥至料渣中的水分含量低于15%終止。7.如權利要求1所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的乙醇提取在50°C~回流的條件下進行，所用乙醇的濃度為80100。/。v/v,料液比為1:51:10，提取時間為0.5~2h，提取次數為1~3次。8.如權利要求1所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的乙醇溶劑的回收在0~50°C,0.001』.5MPa條件下進行，回收至膏狀物中的乙醇含量低于3%終止。9.如權利要求1所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的丙酮提取在30°C~回流的條件下進行，所用丙酮為無水丙酮，料液比為l:2:5，提取時間為0.5~2h，提取次數為1~3次。10.如權利要求l所述的同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝，其特征在于所述的丙酮溶劑的回收和脫除在050。C,0.0010.5MPa條件下進行，回收至固體粉末中的丙酮含量低于0.3%終止。全文摘要本發明屬天然產物的分離提取
技術領域：
。具體涉及一種從藿香中同時提取精油、黃酮和三萜類成分的工藝。它提供了一種新型的分離提取工藝，可以以藿香為原料同時分離提取藿香精油、藿香黃酮和藿香三萜類成分。所用原料既可以是藿香，也可以是廣藿香，既可以是新鮮的或干燥的全草，也可以是新鮮的或干燥的葉子、莖稈或其他任何局部部分。當以新鮮藿香葉子為原料時，其精油中含有順式-異薄荷酮、反式-異薄荷酮胡椒酮、己烯醛、δ～杜松萜烯、杜松醇、α～衣蘭油烯、檸檬烯、胡薄荷酮等40種揮發性成分，其中的主要揮發性成分為順式-異薄荷酮和反式-異薄荷酮，其含量分別為34.11％和15.42％。其總黃酮中含有金和歡素、田薊苷、蒙花甙、藿香甙、異藿香甙、藿香素、芹菜素、芹菜素-7-葡萄糖苷、6-甲氧基芹菜素、木犀草素、木犀草素-7-葡萄糖苷等黃酮類化合物，其中的主要黃酮類成分為藿香甙和異藿香甙，其含量分別為25.8％和8.21％。其三萜類物質中含有山楂酸，齊墩果酸，3-乙酰齊墩果醛，3-乙酰齊墩果酸，α-香樹精，β-香樹精，菜油甾醇，菜油甾烷醇，熊果酸，古柯二醇，古柯二醇-3-乙酸酯等三萜類化合物，其中的主要三萜類成分為山楂酸，其含量為34.6％。這些成分具有廣泛的生理活性，有保肝、抗腫瘤、抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、抗帶狀皰疹病毒、增加免疫力等諸多功效，具有提神醒腦、健胃防暑等生理作用，效果顯著，無毒副作用。文檔編號C07D311/00GK101285021SQ20081012383公開日2008年10月15日申請日期2008年6月6日優先權日2008年6月6日發明者姜瑞霞,湯魯宏,葛海鋒,超鄧,偉陳申請人:江南大學