專利名稱：：新型蛋白激酶調(diào)節(jié)劑和其治療應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新型酪氨酸磷酸化抑制劑衍生物、其制備、包含其的藥物組合物、和其在治療蛋白激酶相關(guān)疾患中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：蛋白酪氨酸激酶CPTK)是酶的一個(gè)家族，其將ATP的y-磷酸基(y-phosphate)轉(zhuǎn)移到底物蛋白上酪氨酸殘基的側(cè)鏈。PTK牽涉多種細(xì)胞過(guò)程，包括信號(hào)傳導(dǎo)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)。PTK對(duì)底物的磷酸化是細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的關(guān)鍵事件。一類PTK是受體酪氨酸激酶(RTK)。這些激酶屬于跨膜蛋白的家族并已牽涉在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中。一些受體激酶的主要生物活性是刺激細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，而另一些受體酪氨酸激酶參與抑制生長(zhǎng)和促進(jìn)分化。在一些情況中，單個(gè)酪氨酸激酶可抑制或刺激細(xì)胞增殖，這取決于表達(dá)其的細(xì)胞環(huán)境(Schlessinger和Ullrich,臉胸〃(1992),9(3):383-391》，RTK包括血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、胰島素、胰島素樣生長(zhǎng)因子l(IGF-l)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)的受體以及其它的受體。受體酪氨酸激酶包含至少三個(gè)結(jié)構(gòu)域胞外糖基化配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和可使酪氨酸殘基磷酸化的細(xì)胞質(zhì)催化結(jié)構(gòu)域。配體與膜結(jié)合受體的結(jié)合誘導(dǎo)形成受體二聚體和變構(gòu)變化，從而活化細(xì)胞間的激酶結(jié)構(gòu)域，這進(jìn)一步導(dǎo)致酪氨酸殘基上的受體自身磷酸化(自磷酸化和/或轉(zhuǎn)磷酸化)。受體磷酸化刺激活化的受體與靶分子的物理締合。一些靶分子轉(zhuǎn)而被14磷酸化，這是將信號(hào)傳遞到細(xì)胞質(zhì)的過(guò)程。由活化的受體產(chǎn)生的第二信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物分子，導(dǎo)致調(diào)節(jié)細(xì)胞功能諸如細(xì)胞分裂或分化的信號(hào)級(jí)聯(lián)。胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)綜述于Aaro勤n,&,e"ce(1991),254:1146-1153;Schlessinger,7h"A5,oc/ew.&/.(1988),13:443-447;Ullrich和Schlessinger,O〃(1990),61:203-212。已將多種細(xì)胞增殖疾患與PTK介導(dǎo)的途徑中的缺陷相關(guān)聯(lián)。正常激酶過(guò)表達(dá)、受體酪氨酸激酶的配體上調(diào)或活化突變?cè)斐傻腜TK活性增強(qiáng)是牽涉細(xì)胞增殖的許多疾病(包括癌癥)的特點(diǎn)。與細(xì)胞增殖疾患有關(guān)的具體受體酪氨酸激酶的例子包括血小板源性生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)、胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)、表皮生長(zhǎng)因子受體(EDFR)和相關(guān)的HER2。PTK牽涉在多種疾病中，使得PTK被鑒定為抗增殖藥物的靶。事實(shí)上，許多PTK阻滯劑已描述于文獻(xiàn)中，包括提議的作用機(jī)理(Levitzki等人,(1995),267:1782-88;Posner等人，Mo/.7%"rw"/.(1994),45:673-683)。申請(qǐng)人已開發(fā)了稱為酪氨酸磷酸化抑制劑的一族PTK抑制劑，設(shè)計(jì)為模擬酪氨酸底物(Levitzki等人，&離。(1995)，267:1782-88;Levitzki等人，說(shuō)oc'/2L，.尸k潔.(1990),40:913-920;Levitzki等人，/'AV/W,/.(1992),6:3275-3282;美國(guó)專利第5,217,999和5,773,476號(hào))。這些酪氨酸磷酸化抑制劑尤其是苯亞曱基丙二腈(malonitril)型酪氨酸磷酸化抑制劑的藥效團(tuán)是親水兒茶酚環(huán)和更親脂的取代的氰基-乙烯基基團(tuán)。動(dòng)力學(xué)研究已顯示，一些酪氨酸磷酸化抑制劑化合物是對(duì)于(vis-A-vis)酪氨酸底物的純的竟?fàn)幮砸种苿?，而?duì)ATP結(jié)合位點(diǎn)它們作用為非竟?fàn)幮砸种苿?Yaish等人，(1988),242:933-935;Gazit等人，丄Afet/.(:Td(1989),32:2344-2352)。盡管如此，許多酪氨酸磷酸化抑制劑已經(jīng)顯示了對(duì)底物和ATP結(jié)合位點(diǎn)兩者的竟?fàn)幮砸种?Posner等人，Mo/,/)/jar附wo/.(1994),45:673-683)。在酪氨酸磷酸化抑制劑的相關(guān)組中，親水兒茶酚環(huán)被親脂二氯-或二甲氧基-苯基基團(tuán)交換以產(chǎn)生在低的微摩爾范圍有效的EGFR激酶抑制劑。(Yoneda等人，/te,s.(1991),51:4430-4435)。然而，對(duì)具有增強(qiáng)的抑制性能的酪氨酸磷酸化抑制劑仍有未滿足的需求。發(fā)明概述本發(fā)明涉及可用作細(xì)胞中蛋白酪氨酸激酶(PTK)的抑制劑的新型酪氨酸磷酸化抑制劑化合物。這些新型酪氨酸磷酸化抑制劑化合物對(duì)以下受體(但不限于以下受體)顯示出增強(qiáng)的抑制性胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF1R)、血小板源性生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)、表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)和1GF1R-相關(guān)的胰島素受體(IR)。本發(fā)明進(jìn)一步涉及觸發(fā)IGF1R直接底物IRS1的絲氨酸磷酸化的化合物，從而提供增強(qiáng)這些新型酪氨酸磷酸化抑制劑的抑制活性的持久效應(yīng)。根據(jù)一方面，本發(fā)明提供由式1結(jié)構(gòu)表示的化合物i其中R1、R2、f^和R"獨(dú)立地選自H、d-C4烷基、?；退鈺r(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；R3和R7獨(dú)立地選自H、囟素、卣烷基和OR8，其中W是H、d-d烷基、?；蛩鈺r(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；R4是H或CN，包括其鹽、水合物、溶劑合物、多晶型物、光學(xué)異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、對(duì)映體、非對(duì)映體和混合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供由式1結(jié)構(gòu)表示的化合物，其中R3是鹵素(如F、Cl、Br或l)或鹵烷基(如CF3)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供由式1結(jié)構(gòu)表示的化合物，其中R1、R2、115和116各為H。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供由式1結(jié)構(gòu)表示的化合物，其中W是氫、鹵素或OR8，RS為H或甲基。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明進(jìn)一步提供式l的化16合物，其中R"是H。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供式l的化合物，其中R4是CN。這種結(jié)構(gòu)的代表性和非限制性實(shí)例是選自由化合物2-18組成的組的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>物:其中R1、R2、RS和P^獨(dú)立地選自H、CrCj烷基、酰基和水解時(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；113和117獨(dú)立地選自H、卣素、卣烷基和OR8，其中RS是H、C,-C4烷基、?；蛩鈺r(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；R4是H或CN，包括其鹽、水合物、溶劑合物、多晶型物、光學(xué)異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、對(duì)映體、非對(duì)映體和'混合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供抑制蛋白酪氨酸激酶(PTK)的方法，其包括使PTK與有效抑制量的式1化合物接觸。本發(fā)明進(jìn)一步提供抑制受治療者的蛋白酪氨酸激酶(PT'K)的方法，其包括向受治療者施用治療上有效量的式1化合物的步驟以抑制受治療者的蛋白酪氨酸激酶(PTK)。在另一實(shí)施方式中，所述方法包括向受治療者施用包含治療上有效量的式1任何化合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供治療或預(yù)防受治療者的蛋白酪氨酸激酶(PTK)相關(guān)疾患的方法，其包括向受治療者施用治療上有效量的式任何化合物的步驟。在另一實(shí)施方式中，所述方法包括向受治療者施用包含治療上有效量的式1化合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述PTK相關(guān)疾患是細(xì)胞增殖疾患、代謝疾患或纖維變性疾患。在優(yōu)選實(shí)施方式中，所述PTK相關(guān)疾患是癌癥。在另一實(shí)施方式中所述PTK相關(guān)22疾患是糖尿病性腎病。本發(fā)明的可用性的進(jìn)一步實(shí)施方式和全部范圍將由以下給出的詳細(xì)描述而變得明顯。然而應(yīng)理解的是，盡管詳細(xì)描述和具體實(shí)施例指出了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但只是以示例方式提供，因?yàn)楦鶕?jù)這些詳細(xì)描述，在本發(fā)明主旨和范圍內(nèi)的各種變化和修改對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員將變得明顯。附圖簡(jiǎn)述圖1以圖解形式顯示本發(fā)明示例性新型酪氨s臾磷酸化抑制劑的合成過(guò)程。x和y獨(dú)立地選自氫、卣素、鹵烷基和or8，其中rS是H、C廣C4烷基、酰基或水解時(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)。圖2以圖解形式顯示本發(fā)明示例性新型酪氨酸磷酸化抑制劑的合成過(guò)程。X和Y獨(dú)立地選自氬、囟素、鹵烷基和or8，其中RS是H、C,-C4烷基、酰基或水解時(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)。圖3以圖解形式顯示本發(fā)明新型酪氨酸磷酸化抑制劑的合成中使用的中間產(chǎn)物的合成過(guò)程。圖4A和4B顯示化合物7誘導(dǎo)完整癌細(xì)胞中的IGF1R和其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制。圖4A顯示與對(duì)照(化合物#20)比較，接觸化合物7后癌細(xì)胞中IGF1R活化和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制?；衔?誘導(dǎo)IGF1R的直接底物IRS1的酪氨酸-磷酸化的減少，和IGFl-誘導(dǎo)的PKB和ERK途徑活化的抑制。圖4B表示癌細(xì)胞中IGFl-誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的劑量依賴性抑制。圖5A、5B和5C顯示化合物7誘導(dǎo)乳腺癌MCF7細(xì)胞中IRS1上的絲氨酸-磷酸化和IRS1的細(xì)胞水平降低。圖5A顯示以化合物7處理4小時(shí)誘導(dǎo)的IRS1的細(xì)胞水平降低。圖5B顯示以化合物7處理4小時(shí)后誘導(dǎo)的1RS1上的絲氨酸-磷酸化。圖5C顯示癌細(xì)胞中1RSI水平持久(接觸后24小時(shí))減少。圖6顯示以化合物7、8、9、10、11和13處理乳腺癌MCF7細(xì)胞后IRS1上的Ser-磷酸化。還證實(shí)了抑制IGF1R下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑即ERK和PKB的活化。23圖7A和7B顯示與化合物6相比，以化合物7、8和9處理卵巢癌A2780細(xì)胞。圖7A顯示以化合物6、7、8和9處理的細(xì)胞在孵育后經(jīng)歷凋亡(檢測(cè)裂解的PARP),以化合物6處理的細(xì)胞經(jīng)歷的凋亡略樣i地較弱。圖7B顯示不同于化合物6，化合物7、8和9誘導(dǎo)的IRS1上的Ser-磷酸化(由IRS1條帶向上移而檢測(cè))以及IRS1水平下降。圖8顯示與化合物11和19相比，以化合物7、8、9、10和13處理的轉(zhuǎn)移的黑素瘤YUMAC細(xì)胞中檢測(cè)到IRS1上的Ser-磷酸化以及PARP的裂解(凋亡)。圖9A、9B和9C顯示化合物7抑制完整細(xì)胞中PDGFR、EGFR和IR酪氨酸激酶的活化和下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。圖9A顯示化合物7抑制激素難治性前列腺癌PC3細(xì)胞中EGFR活化和EGF誘導(dǎo)的PKB和STAT3(EGFR的直接底物)的磷酸化。圖9B顯示化合物7在過(guò)表達(dá)PDGFR的NIH3T3細(xì)胞中抑制配體誘導(dǎo)的PDGFR活化和下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。圖9C顯示化合物7在過(guò)表達(dá)IR的NIH3T3細(xì)胞中抑制配體誘導(dǎo)的胰島素受體(IR)活化和下游調(diào)節(jié)。圖10顯示以化合物7(IP,1次/天，50mg/kg)處理棵小鼠導(dǎo)致激素難治性前列腺癌(HRPC)PC3腫瘤82%的生長(zhǎng)抑制。圖11顯示以化合物7(IP,I次/天，50mg/kg)處理棵小鼠經(jīng)過(guò)4周對(duì)小鼠體重?zé)o顯著影響(UT二未處理的、Veh4某介物(vehicle))。圖12顯示以化合物7或8(IP,1次/天，20mg/kg)處理棵小鼠導(dǎo)致卵巢癌A2780腫瘤87%的生長(zhǎng)抑制。圖13顯示與化合物6相比，化合物7、8和9對(duì)棵小鼠模型中卵巢癌A2780腫瘤的生長(zhǎng)抑制的高效力。圖H顯示以化合物8(IP,I次/天，50mg/kg)處理具有大于50mm3的卵巢A2780腫瘤的棵小鼠導(dǎo)致腫瘤82%的生長(zhǎng)抑制。圖15顯示以化合物8(IP,]次/天，50mg/kg)處理具有大于470mm3的卵巢A2780腫瘤的,果小鼠導(dǎo)致腫瘤大約85%的生長(zhǎng)抑制。圖16顯示以化合物7(月中瘤內(nèi)，1次/天，125昭/天)處理棵小鼠導(dǎo)致胰腺癌Panel肺瘤50%的生長(zhǎng)抑制。圖17顯示與化合物6相比，化合物7對(duì)棵小鼠模型中黑素瘤B16腫瘤的生長(zhǎng)抑制的效力。該抑制劑以20mg/kg,1次/天的劑量IP施用。圖18顯示化合物8對(duì)棵小鼠模型中人類黑素瘤YUMAC腫瘤的生長(zhǎng)抑制的效力。化合物8以20mg/kg,1次/天的劑量IP施用。圖19A和19B顯示化合物6對(duì)MCF7細(xì)胞的作用。圖19A顯示化合物6抑制IGF1誘導(dǎo)的IGF1R活化和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(IGF1R的自磷酸化、IGF1-誘導(dǎo)的IRS1酪氨酸磷酸化和IGF1誘導(dǎo)的Akt/PKB活化)。圖19B顯示化合物6對(duì)IRS1水平無(wú)作用。圖20A和20B顯示化合物6對(duì)HRPCPC3細(xì)胞中EGFR活性的作用。圖20A顯示化合物6抑制EGF誘導(dǎo)的EGFR和其下游元件STAT3和PKB的磷酸化。圖20B顯示以化合物6處理PC3細(xì)胞后，蛋白水平相等，且未檢測(cè)到對(duì)STAT3、PKB或ERK的作用。圖21顯示在生長(zhǎng)因子富集的培養(yǎng)基存在下，化合物7(IC50=2.3pM)劑量依賴性地抑制原代角質(zhì)形成細(xì)胞的生長(zhǎng)。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及新型酪氨酸磷酸化抑制劑衍生物，其為強(qiáng)效的PTK抑制劑。本發(fā)明進(jìn)一步提供抑制PTK如IGF-1受體(IGF1R)的方法。該化合物可用于治療或預(yù)防PTK相關(guān)的疾病狀態(tài)，尤其是與PTK介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的缺陷相關(guān)聯(lián)的PTK相關(guān)疾患。牽涉細(xì)胞增殖的疾病的例子是癌癥和銀屑病。本發(fā)明的化合物與此前公開的酪氨酸磷酸化抑制劑衍生物(Blum等人,S"兒'/^w.(2000),39:15705-15712;美國(guó)專利第5,773,476和5,217,999號(hào))相比，被設(shè)計(jì)為對(duì)于蛋白酪氨酸激酶(PTK)具有增強(qiáng)的抑制效力。申請(qǐng)人令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，在兒茶酚藥效團(tuán)上引入其它取代基大大地增強(qiáng)了抑制效力。而且，還發(fā)現(xiàn)在第二芳環(huán)上引入其它取代基顯著地增強(qiáng)了新化合物的抑制效力。此外，顯示所描述分子的亞家族觸發(fā)了用作IGF-1R的直接底物的IRS1的絲氨酸磷酸化。不希望受限于任何理論或作用機(jī)理，該磷酸化可導(dǎo)致IRS1與TGF-1R的解偶，從而阻滯IGF-1R信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。而且,IRSl的這種Ser-磷酸化通常伴有IRS1水平下降。顯示這些過(guò)程增強(qiáng)這些酪氨酸激酶抑制劑的抑制潛力，從而引起持久效應(yīng)。本發(fā)明提供的化合物由如下通式1表示其中r1、r2、rS和W獨(dú)立地逸自h、c廣C4烷基、酰基和水解時(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；R"和F^獨(dú)立地選自H、卣素、卣烷基和ORx,其中RS是H、C廣C4烷基、?；蛩鈺r(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；R4是H或CN,包括其鹽、水合物、溶劑合物、多晶型物、光學(xué)異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、對(duì)映體、非對(duì)映體和混合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供由式1結(jié)構(gòu)表示的化合物，其中R'、R2、115和W各獨(dú)立地為H或甲基。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供由式l結(jié)構(gòu)表示的化合物，其中W是卣素(如F、Cl、Br、1)、羥基或鹵烷基(如CF》。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供由式1結(jié)構(gòu)表示的化合物，其中R"是CN。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供由式l結(jié)構(gòu)表示的化合物，其中R"是H、卣素或OR8,RS為H或曱基。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明進(jìn)一步提供式1的化合物，其中R"是H。這種結(jié)構(gòu)的代表性和非限制性實(shí)例是選自由化合物2-18組成的組的化合物26<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>S不希望受限于任何理論或作用機(jī)理，當(dāng)羥基由甲基基團(tuán)封閉時(shí)，即該化合物由第l、2、5&6位的甲氧基基團(tuán)組成時(shí)，與在等同位置具有羥基基團(tuán)的化合物相比，該化合物的活性顯著下降。因此化合物2-5與化合物6-19和類似化合物相比活性較低。化學(xué)定義"烷基"基團(tuán)指飽和的脂肪族烴，包括直鏈、支鏈和環(huán)狀烷基基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方式中，烷基基團(tuán)具有1-12個(gè)碳，在此稱為d-Cu-烷基。在另一個(gè)實(shí)施方式中，烷基基團(tuán)具有l(wèi)-6個(gè)碳，在此稱為C廣CV烷基。在另一個(gè)實(shí)施方式中，烷基基團(tuán)具有卜4個(gè)碳，在此稱為CrCr烷基.。烷基基團(tuán)可為未取代的，或由選自卣素、羥基、烷氧基羰基、酰氨基、烷基酰氨基、二烷基酰氨基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、硫基(thio)和硫代烷基的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代。"鞋基"基團(tuán)指OH基團(tuán)。"烷氧基"基團(tuán)指-O-烷基基團(tuán)，其中R是如上定義的烷基。"硫基"基團(tuán)指-SH基團(tuán)。"烷硫基"基團(tuán)指-SR基團(tuán)，其中R是如上定義的烷基。"氨基"基團(tuán)指NH2基團(tuán)。烷基氨基基團(tuán)指-NHR基團(tuán)，其中R是如上定義的烷基。二烷基氨基基團(tuán)指-NRR'基團(tuán)，其中R和R'是如上定義的烷基。"酰氨基"基團(tuán)指-C(0)NH2基團(tuán)。烷基酰氨基基團(tuán)指-C(O)NHR基團(tuán)，其中R是如上定義的烷基。二烷基酰氨基基團(tuán)指-C(O)NRR'基團(tuán)，其中R和R，是如上定義的烷基。"硫代酰胺"基團(tuán)指C(S)NHR，其中R是烷基、芳基、烷基芳基或氫。本文單獨(dú)或作為另一基團(tuán)的部分使用的術(shù)語(yǔ)"卣素"或"卣"指氯、溴、氟和碘。術(shù)語(yǔ)"卣烷基"指有一些或全部的氫獨(dú)立地被卣素基團(tuán)代替的烷基基團(tuán)，包括但不限于三氯甲基、三溴甲基、三氟甲基、三碘甲基、二氟曱基、氯二氟甲基、五氟乙基、1,1-二氟乙基溴甲基、氯曱基、氟甲基、碘甲基和類似基團(tuán)。水解時(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)的例子包括但不限于酯、酸酐、氨基曱酸酯、碳酸酯及類似官能團(tuán)。例如，當(dāng)R、R^RS或R"中的任一是?；鶊F(tuán)(COR)時(shí)，所得的官能團(tuán)是酯(OCOR)。當(dāng)R1、R2、115或116中的任一是酰胺基團(tuán)(CONHR)時(shí)，所得的官能團(tuán)是氨基曱酸酯(OCONHR)。當(dāng)R1、R2、R5或!^中的任一是羧基(carboxylategro叩)(COOR)時(shí)，所得的官能團(tuán)是碳酸酯(OCOOR)。包括本發(fā)明化合物的所有立體異構(gòu)體，無(wú)論以混合物或純的或大致純的形式。這些化合物可在任何原子具有不對(duì)稱中心。因此，化合物可以對(duì)映體或非對(duì)映體形式或其混合物存在。本發(fā)明包括任何外消旋物(即含有等量的各種對(duì)映體的混合物)、對(duì)映體富集的混合物(即對(duì)一種對(duì)映體富集的混合物)、純對(duì)映體或非對(duì)映體、或其任何混合物的應(yīng)用。手性中心可命名為R或S或R,S或d,D、l,L或d,l、D,L。包含氨基酸殘基的化合物包括D-氨基酸、L-氨基酸、或氨基酸的外消旋衍生物的殘基。此外，本發(fā)明的數(shù)種化合物包含一個(gè)或多個(gè)雙鍵。本發(fā)明意為包括所有結(jié)構(gòu)和幾何異構(gòu)體，包括每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地順式、反式、E和Z異構(gòu)體。本發(fā)明的一種或多種化合物可以鹽存在。術(shù)語(yǔ)"鹽"包括堿加成鹽和酸加成鹽，包括但不限于羧酸鹽或與胺的氮形成的鹽，且包括與以下討論的有機(jī)和無(wú)機(jī)的陰離子和陽(yáng)離子形成的鹽。該術(shù)語(yǔ)進(jìn)一步包括堿性基團(tuán)(諸如氨基基團(tuán))與有機(jī)或無(wú)機(jī)酸的標(biāo)準(zhǔn)酸堿反應(yīng)形成的鹽。這種酸包括鹽酸、氫氟酸、三氟乙酸、硫酸、磷酸、乙酸、琥珀酸、檸檬酸、乳酸、馬來(lái)酸、富馬酸、棕櫚酸、膽酸、樸酸、粘酸、D-谷氨酸、D-樟腦酸、戊二酸、鄰笨二甲酸、酒石酸、月桂酸、硬脂酸、水楊酸(salicyclic)、曱磺酸、笨磺酸、山梨酸、苦味酸、笨甲酸、肉桂酸及類似酸。術(shù)語(yǔ)"有機(jī)或無(wú)機(jī)陽(yáng)離子"指羧酸鹽的羧酸根陰離子的抗衡離子。抗32tf離子選自石威金屬和石成土金屬(諸如鋰、鈉、鉀、鋇、鋁和鈣)；銨和單-、二-和三-烷基胺諸如三甲胺、環(huán)己胺；和有機(jī)陽(yáng)離子，諸如二千基銨、千基銨、2-輕基乙基銨、雙(2-羥基乙基)銨、苯基乙基千基銨、二千基乙二銨(dibenzylethylenediammonium)和類4以陽(yáng)離子。見于例i口，Berge等人，丄P/w，.(1977),66:1-19，其通過(guò)引用并入本文。上述術(shù)語(yǔ)包括的其它陽(yáng)離子包括普魯卡因、奎寧和N-甲基葡糖胺的質(zhì)子化形式，和諸如甘氨酸、鳥氨酸、組氨酸、苯基甘氨酸、賴氨酸和精氨酸等堿性氨基酸的質(zhì)子化形式。而且，還包括羧酸與氨基基團(tuán)形成的本化合物的任何兩性離子形式。本發(fā)明還包括式1化合物或化合物2-19中任一種的溶劑合物及其鹽。"溶劑合物，，指本發(fā)明化合物與一種或多種溶劑分子的物理締合。該物理締合包括不同程度的離子和共價(jià)鍵合，包括氫鍵合。在某些情形中該溶劑合物能夠分離。"溶劑合物"包括溶液相的和可分離的溶劑合物。合適的溶劑合物的非限制性例子包括乙醇鹽、甲醇鹽及類似物。"水合物"是一種溶劑合物，其中溶劑分子是水。本發(fā)明還包括式1化合物或化合物2-19中任一種的多晶型物及其鹽。術(shù)語(yǔ)"多晶型物"指物質(zhì)的特定晶態(tài)，可由特定物理性質(zhì)諸如X-射線衍射、IR光諳、熔點(diǎn)及類似性質(zhì)來(lái)表征。治療應(yīng)用本發(fā)明提供有效抑制蛋白酪氨酸激酶的化合物和組合物。這些化合物和組合物可潛在地用于治療與蛋白酪氨酸激酶改變的或異常的活性諸如蛋白酪氨酸激酶活性增強(qiáng)相關(guān)聯(lián)的疾病。因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供抑制蛋白酪氨酸激酶(PTK)的方法，其包括使PTK與有效抑制量的式1-19任一表示的化合物接觸。本發(fā)明進(jìn)一步提供治療或預(yù)防受治療者的蛋白酪氨酸激酶(PTK)的方法，其包括向受治療者施用治療上有效量的式l-19表示的任何化合物的步驟。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該方法包括向受治療者施用包含治療上有效量的式卜19表示的任何化合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供抑制受治療者的蛋白酪氨酸激酶(PTK)相關(guān)疾患的33方法，其包括向受治療者施用治療上有效量的式1-19表示的任何化合物的步驟。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該方法包括向受治療者施用包含治療上有效量的式l-19表示的任何化合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。"蛋白酪氨酸激酶"(PTK)是一種蛋白，屬于將ATP的，磷酸基轉(zhuǎn)移到底物蛋白上酪氨酸殘基的側(cè)鏈的一個(gè)酶家族。PTK牽涉多種關(guān)鍵的細(xì)胞過(guò)程，包括信號(hào)傳導(dǎo)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)。本文所用的蛋白酪氨酸激酶指受體酪氨酸激酶(RTK)以及細(xì)胞酪氨酸激酶(CTK或非受體酪氨酸激酶)。因此本發(fā)明的化合物有效抑制受體和非受體蛋白酪氨酸激酶。細(xì)胞酪氨酸激酶(CTK或非受體酪氨酸激酶)是一種細(xì)胞內(nèi)蛋白，其參與細(xì)胞中的信號(hào)傳導(dǎo)，包括向核的信號(hào)傳導(dǎo)。CTK的例子是癌蛋白質(zhì)的Src家族。受體酪氨酸激酶(RTK)是參與跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的跨膜蛋白。一些受體酪氨酸激酶的主要生物活性是刺激細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，而另一些受體酪氨酸激酶參與阻止生長(zhǎng)和促進(jìn)分化。RTK包括血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、胰島素、胰島素樣生長(zhǎng)因子-l(IGF-l)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)的受體。本文所用的術(shù)語(yǔ)"蛋白酪氨酸激酶相關(guān)疾患"指特征為PTK活性異常或改變的疾患?；钚援惓；蚋淖冞M(jìn)一歩指(i)在通常不表達(dá)PTK的細(xì)胞中PTK過(guò)表達(dá)；(ii)PTK表達(dá)增加導(dǎo)致不必要的細(xì)胞增殖、分化和/或生長(zhǎng)；或(iii)PTK表達(dá)減少導(dǎo)致不必要的細(xì)胞增殖、分化和/或生長(zhǎng)下降。PTK的過(guò)度活性指編碼特定PTK的基因的擴(kuò)增或產(chǎn)生可與細(xì)胞增殖，分化和/或生長(zhǎng)相關(guān)的PTK活性水平。過(guò)度活性也可由作為突變諸如PTK負(fù)責(zé)配體結(jié)合的片段缺失的結(jié)果的配體獨(dú)立性或組成型活化造成。因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及含有式l-19表示的任何化合物的制劑，其通過(guò)影響蛋白酪氨酸激酶的酶促活性，從而干涉這種蛋白介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑來(lái)調(diào)節(jié)PTK活性信號(hào)傳導(dǎo)。蛋白酪氨酸激酶相關(guān)疾患的例子是細(xì)胞增殖疾患、代謝疾患或纖維變性疾患和炎癥。蛋白酪氨酸激酶介導(dǎo)的細(xì)胞增殖疾患的例子是癌癥、銀屑病、糖尿病性腎病、血管增生疾患和腎小^求膜(mesangia)細(xì)胞增殖疾患。癌癥是一種疾患，其中細(xì)胞群體已經(jīng)以不同程度變得對(duì)通常管理增殖和分化的控制機(jī)制不響應(yīng)。癌癥指各種類型的惡性瘤和肺瘤，包括向不同位置的轉(zhuǎn)移(metastasis)。可由式1-19表示的任何化合物治療的癌癥的非限制性例子是表現(xiàn)PTK活性改變的腦癌、卯巢癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、腎癌、膀胱癌、乳腺癌、肺癌、口和皮膚癌。本發(fā)明化合物可有效治療或預(yù)防的癌癥的具體例子是腺癌、腎上腺腫瘤、成釉細(xì)胞瘤、退行發(fā)育性肺瘤、甲狀腺細(xì)胞的退行發(fā)育性癌、血管纖維瘤、血管瘤、血管肉瘤、胺前體攝取脫羧化細(xì)胞瘤、嗜銀細(xì)胞瘤、男性細(xì)胞瘤、腹水瘤細(xì)胞、腹水瘤、成星形細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張、心房粘液瘤、基底細(xì)胞癌、良性瘤、骨癌、骨瘤、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦瘤、乳腺癌、伯基特淋巴瘤、癌瘤、小腦星形細(xì)胞瘤、子宮頸癌、櫻桃狀血管瘤、膽管癌、膽管瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨瘤、軟骨肉瘤、成絨毛膜細(xì)胞瘤、絨毛膜癌、結(jié)腸癌、常見急性淋巴母細(xì)胞性白血病、顱咽管瘤、嚢性癌、囊性纖維瘤、嚢瘤、細(xì)胞瘤、原位導(dǎo)管癌、導(dǎo)管乳頭狀瘤、無(wú)性細(xì)胞瘤、腦瘤、子宮內(nèi)膜癌、內(nèi)皮瘤、室管膜瘤、上皮癌、紅白血病、尤因肉瘤、結(jié)外^fr巴瘤、貓肉瘤、纖維腺瘤、纖維肉瘤、甲狀腺濾泡癌、神經(jīng)節(jié)神經(jīng)膠質(zhì)瘤、胃泌素瘤、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、成性腺細(xì)胞瘤、成血管細(xì)胞瘤、成血管內(nèi)皮細(xì)胞瘤、血管內(nèi)皮瘤、血管外皮細(xì)胞瘤、血淋巴管瘤(haematolymphangioma)、成血纟田月包瘤(haemocytoblastoma)、血纟田月包瘤(haemocytoma)、毛細(xì)胞性白血病、錯(cuò)構(gòu)瘤、肝癌、肝細(xì)胞癌、肝細(xì)胞瘤、組織瘤、霍奇金病、腎上腺樣瘤、浸潤(rùn)癌、浸潤(rùn)導(dǎo)管細(xì)胞癌、胰島素瘤、幼年血管纖維瘤、卡波西肉瘤、腎瘤、大細(xì)胞淋巴瘤、白血病、慢性白血病、急性白血病、脂肪瘤、肝癌、肝轉(zhuǎn)移、呂克癌、淋巴腺瘤、淋巴管瘤、淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴細(xì)胞性淋巴瘤、淋巴細(xì)胞瘤、淋巴管性水肺、淋巴瘤、肺癌、惡性間皮瘤、惡性畸胎瘤、肥大細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、黑素瘤、腦脊膜瘤、間皮瘤、轉(zhuǎn)移癌、Morton神經(jīng)瘤、多發(fā)性骨髓瘤、成髓細(xì)胞瘤、髓細(xì)胞性白血病、髓脂肪瘤、骨髓瘤、成肌細(xì)胞瘤、粘液瘤、鼻咽癌、腎胚細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)纖維瘤、神經(jīng)纖維瘤病、神經(jīng)35膠質(zhì)瘤、神經(jīng)瘤、非霍奇金淋巴瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、視神經(jīng)膠質(zhì)瘤、骨軟骨瘤、成骨肉瘤、骨肉瘤、卵巢癌、乳頭佩吉特氏病、肺上溝瘤(pancoasttumor)、月夷月泉癌、嗜4各細(xì)月包瘤(phaeochromocytoma)、嗜4各細(xì)月包瘤(pheochromocytoma)、漿細(xì)力包瘤、原發(fā)性腦瘤、突變瘤、泌乳素瘤、腎細(xì)月包癌、#見網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、橫紋月幾肉瘤(rhabdomyosarcoma),橫紋月幾肉瘤(rhabdosarcoma)、實(shí)體瘤、肉瘤、繼發(fā)性瘤、精原細(xì)胞瘤、皮膚癌、小細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、草莓樣血管瘤、T-細(xì)胞淋巴瘤、畸胎瘤、睪丸癌、胸腺瘤、滋養(yǎng)層瘤、致腫瘤性(tumourigenic)、前庭神經(jīng)鞘瘤、腎母細(xì)胞瘤(Wilm'stumor)或其組合。血管增生疾患指通常導(dǎo)致血管異常增殖的血管生成(antiogenic)和血管發(fā)生疾患。血管的形成和擴(kuò)展或者血管發(fā)生和血管生成分別地在多種生理過(guò)程諸如胚胎發(fā)育、黃體形成、創(chuàng)傷愈合和器官再生中起重要作用，以及在癌癥發(fā)展中起關(guān)鍵作用。血管增生疾患的其它例子包括關(guān)節(jié)炎和眼部疾病，諸如糖尿病性^L網(wǎng)膜病、再狹窄、視網(wǎng)膜病和動(dòng)脈粥樣硬化。腎小球膜細(xì)胞增殖疾患指由腎小球膜細(xì)胞異常增殖引起的疾患。腎小球膜增殖疾患包括各種人類腎病，諸如腎小球腎炎、糖尿病性腎病、惡性腎硬化、血栓形成性(thrombic)微血管病綜合征、移植排斥和腎小球病。在這方面，PDGFR已經(jīng)牽涉在腎小球膜細(xì)胞增殖的維持中。牽涉異常PTK活性的代謝疾患包括銀屑病、糖尿病、創(chuàng)傷愈合、炎癥和神經(jīng)變性疾病。例如，角膜和真皮創(chuàng)傷愈合中已經(jīng)指示EGFR。II型糖尿病中指示胰島素-R和IGF-1R受體的缺陷。纖維變性疾患指細(xì)胞外基質(zhì)的異常形成。纖維變性疾患的例子包括肝硬化和腎小球膜細(xì)胞增殖疾患。肝硬化的特征是細(xì)胞外基質(zhì)組分增加，導(dǎo)致形成肝的痣痕。本文所用的術(shù)語(yǔ)"治療"指消除、抑制、減緩或逆轉(zhuǎn)疾病進(jìn)程、改善疾病的臨床癥狀或阻止疾病的臨床癥狀出現(xiàn)。術(shù)語(yǔ)"預(yù)防"本文定義為阻止受治療者獲得疾患或疾病。本文所用的術(shù)語(yǔ)"施用，，指以一種方式使本發(fā)明化合物與輩巴蛋白酪氨36酸激酶在一起的方法，以該方式酪氨酸磷酸化抑制劑可直接(即通過(guò)與激酶本身相互作用)或間接地(即通過(guò)與酶的催化活性所依賴的另一分子相互作用)影響酪氨酸激酶的催化活性。如本文所用的，施用可在體外實(shí)現(xiàn)，即在試管中，或在體內(nèi)實(shí)現(xiàn)，即在活體有機(jī)體例如人類的細(xì)胞或組織中。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明包括向受治療者施用本發(fā)明化合物。本文所用的術(shù)語(yǔ)"接觸"指在如上定義的體內(nèi)條件或體外條件下使蛋白酪氨酸激酶與本文定義的化合物4妻觸。術(shù)語(yǔ)"治療上有效量"指被施用以緩解被治療疾患的一種或多種癥狀到某一程度的化合物的量。本文描述的式l-19表示的任何化合物的治療有效劑量最初可從細(xì)胞培養(yǎng)物和/或動(dòng)物;溪型估計(jì)。可在動(dòng)物^t型配制劑量，且該劑量可用于更準(zhǔn)確地確定對(duì)人類的有用劑量。術(shù)語(yǔ)"有效抑制量"指被施用以抑制所接觸的蛋白酪氨酸激酶到某一程度的化合物的量。藥物組合物本發(fā)明進(jìn)一步提供包含式1-19結(jié)構(gòu)表示的任何化合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。如本文所用，"藥物組合物"指治療上有效量的本發(fā)明化合物連同適合的稀釋劑、防腐劑、增溶劑、乳化劑、佐劑和/或栽體。本文所用的"治療上有效量"指對(duì)于給定病狀和施用計(jì)劃提供治療效果的量。這種組合物是液態(tài)或凍干的或以其它方式干燥的制劑，并包括各種緩沖劑成分(例如Tris-HCI.、乙酸鹽、磷酸鹽)、pH和離子強(qiáng)度的稀釋液；添加劑諸如白蛋白或明膠以防止吸附到表面；洗滌劑(例如Tween20、Tween80、PluronicF68、膽汁酸鹽)、增溶劑(例如甘油、聚乙烯甘油)、抗氧化劑(例如抗壞血酸、焦亞裙L酸鈉)、防腐劑(例如乙基汞硫代水楊酸鈉(Thimerosal)、苯甲醇、對(duì)羥基苯甲酸酯類)、填充物質(zhì)或張力調(diào)節(jié)劑(例如乳糖、甘露醇)；共價(jià)連接聚合物諸如聚乙二醇于蛋白、與金屬離子絡(luò)合、或?qū)⒉牧喜⑷刖酆匣衔?諸如聚乳酸、聚乙醇酸(polglycolicacid)、水凝膠等)微粒制劑之內(nèi)或之上，或并入脂質(zhì)體、微乳、膠束、單層或多層嚢泡、紅細(xì)胞血影或球狀體之上。這種組合物將會(huì)影響物理狀態(tài)、溶解度、穩(wěn)定性、體內(nèi)釋放速率和體內(nèi)清除速率?？蒯尰虺掷m(xù)釋放組合物包括親脂貯庫(kù)(d叩Ot)(例如脂肪酸、蠟、油)中的制劑。本發(fā)明進(jìn)一步包括以聚合物(例如泊洛沙姆或泊洛沙胺(poloxamine))包衣的微粒組合物。本發(fā)明的組合物的其它實(shí)施方式包括微粒形式、保護(hù)性包衣、蛋白酶抑制劑或用于各種施用途徑(包括腸胃外、肺、鼻和口)的滲透增強(qiáng)劑。在一個(gè)實(shí)施方式中藥物組合物被腸胃外、癌旁(paracancerally)、跨粘膜、經(jīng)皮、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、心室內(nèi)、顱內(nèi)或腫瘤內(nèi)地施用。而且，本文所用的"藥學(xué)上可接受的載體"對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，且包括但不限于0.01-0.1M和優(yōu)選地0.05M的磷酸鹽緩沖液或0.8%鹽水。此外，這種藥學(xué)上可接受的載體可為水溶液或非水溶液、懸浮液和乳液。非水溶劑的例子是丙二醇、聚乙二醇、諸如橄欖油的植物油、和諸如油酸乙酯的可注射有機(jī)酯。水性載體包括水、醇/水溶液、乳液或懸浮液，包括鹽水和緩沖介質(zhì)。腸胃外i某介物包括氯化鈉溶液、葡萄糖林格氏液(Ringer'sdextrose)、葡萄糖和氯化鈉、乳酸林格氏液(lactatedRinger's)或不揮發(fā)油。靜脈內(nèi)媒介物包括液體和營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、電解質(zhì)補(bǔ)充劑，諸如基于葡萄糖林格氏液的補(bǔ)充劑，及類似物。還可存在防腐劑和其它添加劑，諸如例如，抗微生物劑、抗氧化劑、調(diào)整劑(colladngagent)、惰性氣體及類似物?？蒯尰虺掷m(xù)釋放組合物包括親脂貯庫(kù)(例如脂肪酸、蠟、油)中的制齊ij。本發(fā)明還包括以聚合物(例如泊洛沙姆或泊洛沙胺)包衣的微粒組合物且化合物偶合于針對(duì)組織特異性受體、配體或抗原的抗體或偶合于組織特異性受體的配體。本發(fā)明的組合物的其它實(shí)施方式包括微粒形式、保護(hù)性包衣、蛋白酶抑制劑或用于各種施用途徑(包括腸胃外、肺、鼻和口:)的滲透增強(qiáng)劑。已知通過(guò)共價(jià)連接于水溶性聚合物(諸如聚乙二醇、聚乙二醇與聚丙二醇的共聚物、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮或聚脯氨酸)而修飾的化合物在靜脈內(nèi)注射后表現(xiàn)出比相應(yīng)的未修飾化合物實(shí)質(zhì)上更長(zhǎng)的血液半衰期。這種修飾還可增加化合物在水溶液中的溶解度、消除聚集、增強(qiáng)化合物的物理和化學(xué)穩(wěn)定性、并大大減少化合物的免疫原性和反應(yīng)性。因此，可通過(guò)以與未修飾的化合物相比更低的頻率或更低的劑量施用這種聚合物-化合物加合物(abduct)而實(shí)現(xiàn)期望的體內(nèi)生物活性。在又另一實(shí)施方式中，可以控釋系統(tǒng)遞送藥物組合物。例如，可使用靜脈內(nèi)輸注、可植入的滲透泵、經(jīng)皮貼片、脂質(zhì)體或其它施用方式施用藥劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，可使用泵(參見例如Saudek等人，W.E"g/.J.MeJ.(1989),321:574-579。在另一實(shí)施方式中，可使用聚合物材料。在又另一實(shí)施方式中，可將控釋系統(tǒng)置于靠近治療目標(biāo)(即腦)，從而只需要系統(tǒng)劑量的一"t卩分(參見例i口，Goodson,A/ec//ca//4/;//ca〃c>m'q/'Ccw"c〃e<i7e/ea,s'ef,好逸^^刀入上述(1984),2:115-138。優(yōu)選地，將控釋裝置引入受治療者中靠近不適當(dāng)?shù)拿庖呋罨恢没蚍瘟鎏帯Ｆ渌蒯屜到y(tǒng)討論于Langer,S"亂x'(1990),2491527-1533的綜述)。藥物制劑可僅包含式1-19的一種或多種化合物，或可進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的載體，且可為固態(tài)或液態(tài)形式，諸如片劑、粉末、膠嚢、小丸(pellet)、溶液、懸浮液、酏劑、乳劑、凝膠、乳霜或栓劑(包括直腸和尿道栓劑)。藥學(xué)上可接受的載體包括樹膠、淀粉、糖、纖維素材料和其混合物。含有選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑的藥物制劑可通過(guò)例如，皮下植入小丸來(lái)施用于受治療者；在進(jìn)一步實(shí)施方式中，該小丸提供選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑在一段時(shí)間內(nèi)的控釋。該制劑還可由靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)或肌內(nèi)注射液態(tài)制劑，口服施用液態(tài)或固態(tài)制劑，或由局部應(yīng)用而施用。還可通過(guò)使用直腸栓劑或尿道栓劑實(shí)現(xiàn)施用。本發(fā)明的藥物制劑可通過(guò)已知的溶解、混合、粒化或形成片劑的工藝而制備。對(duì)于口服施用，將選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑或其生理上耐受的衍生物諸如鹽、酯、N-氧化物及類似物與慣用于該目的的添加劑(諸如媒介物、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑)混合，并由慣用方法轉(zhuǎn)變?yōu)檫m合施用的形式，諸如片劑、包衣片劑、硬或軟明膠膠嚢、水性、醇性或油性溶液。適合的惰性媒介物的例子是諸如乳糖、蔗糖或玉米淀粉的常規(guī)片劑基質(zhì)聯(lián)合粘合劑諸如39阿拉伯膠、玉米淀粉、明膠，或聯(lián)合崩解劑諸如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、海藻酸，或聯(lián)合潤(rùn)滑劑諸如硬脂酸或硬脂酸鎂。適合的油性媒介物或溶劑的例子是植物油或動(dòng)物油諸如葵花油或魚肝油。制劑可實(shí)現(xiàn)為干的和濕的顆粒。對(duì)于腸胃外施用(皮下、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)或肌內(nèi)注射)，將本發(fā)明化合物或其生理上耐受的衍生物諸如鹽、水合物及類似物轉(zhuǎn)化為溶液、懸浮液或乳液，如果需要?jiǎng)t使用為此目的慣用和適合的物質(zhì)，例如增溶劑或其它助劑。例子是無(wú)菌液體諸如水和油，加入或不加入表面活化劑和其它藥學(xué)上可接受的佐劑。示例性油是石油、動(dòng)物、植物或合成來(lái)源的油，例如花生油、大豆油或礦物油?？傊?，水、鹽水、葡萄糖水溶液和相關(guān)的糖溶液、和二醇類諸如丙二醇或聚乙二醇是優(yōu)選的液態(tài)載體，尤其是用于可注射的溶液。含有活性組分的藥物組合物的制備是本領(lǐng)域充分了解的。通常，這種組合物制備為遞送于鼻咽的多肽氣溶膠或?yàn)橐簯B(tài)溶液或懸浮液的注射液，然而還可制備為適于在注射前溶解或懸浮于液體中的固態(tài)形式。制劑還可為乳化的?；钚灾委煶煞滞ǔＥc藥學(xué)上可接受的和與活性成分相容的賦形劑混合。適合的賦形劑是例如，水、鹽水、葡萄糖、甘油、乙醇或類似物及其組合。此外，如果期望，組合物可含有微量輔助物質(zhì)，諸如潤(rùn)濕劑或乳化劑、pH緩沖劑，其增強(qiáng)活性成分的效力?；钚越M分可以中和的藥學(xué)上可接受的鹽形式配制為組合物。藥學(xué)上可接受的鹽包括酸加成鹽(與多肽或抗體分子的自由氨基基團(tuán)形成)，其與無(wú)機(jī)酸諸如例如，鹽酸或磷酸，或有機(jī)酸如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸及類似物形成。從自由羧基基團(tuán)形成的鹽還可衍生自無(wú)機(jī)堿諸如例如，氬氧化鈉、氳氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣或氬氧化鐵，和有機(jī)堿如異丙胺、三甲胺、2-乙基氨基乙醇、組氨酸、普魯卡因及類似物。對(duì)于局部施用于體表，使用例如乳霜、凝膠、滴劑及類似物，制備本發(fā)明化合物或其生理上耐受的衍生物諸如鹽、水合物及類似物，并以在生理上可接受的稀釋劑中的溶液、懸浮液或乳液施用，帶有或不帶有藥物載體。40在另一實(shí)施方式中，活性化合物可以嚢泡遞送，尤其是脂質(zhì)體(參見例如Langer,Sc/ewce(兩0)，249:1527-1533;Treat等人，/乂—v麵e,s/'w血Z)wraw朋dOwce/X感染性疾病和癌癥療法中的脂質(zhì)體)(1989),Lopez-Berestein和Fidler(編輯)，Liss,NY,353-365。展示以下實(shí)施例以便更完全地說(shuō)明本發(fā)明的某些實(shí)施方式。然而，它們決不應(yīng)被解釋為對(duì)本發(fā)明寬范圍的限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員可易于設(shè)想本文公開的原理的許多變化和修改而不偏離本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1:合成合成化合物6-8、11-13和15-17的一般程序圖解性地繪于圖1，并在下文公開合成如下標(biāo)號(hào)的中間化合物的一般程序(i)其中Y=H，(ii)其中Y=OMe以及(iii)其中Y=Bn在室溫?cái)嚢璋?:i.2當(dāng)量)和氰基乙酸甲酯(i當(dāng)量)直到觀察到產(chǎn)物沉淀。過(guò)濾收集產(chǎn)物，以乙醇洗滌兩次，并在減壓下千燥。獲得為白色固體的產(chǎn)物，產(chǎn)率70-80%。對(duì)于化合物(i):HNMR(300MHz,CDC13中)S6.85(m,3H),6.3(bs,1H),4.41(d,,/=6.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.87(s,3H),3.40(s,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)235.67;對(duì)C)2H14N203計(jì)算[請(qǐng)核實(shí)〗(MH+)235.25.對(duì)于化合物(ii):'HNMR(300畫z,CDC13中)S6.49(s,2H),6.37(bs,1H),4.40(d,,/=4.4Hz,2H),3.86(s,6H),3.84(s,3H),3.43(s,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)265.60;對(duì)C13H17N204計(jì)算(MI^)265.11.對(duì)于化合物(Ui):'HNMR(300MHz,CDC13中)S7.04(s,1H),6.79(s,1H),4.39(d,,/=6.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.87(s,3H),3.45(s,2H).41合成如下標(biāo)號(hào)的中間化合物的一般程序(iv)其中Y=H,(v)其中Y=OMe以及(vi)其中Y=Br:在回流下加熱無(wú)水甲苯(大約2mL/mmol化合物(i-iii))中的酰胺0當(dāng)量)和拉韋松試劑(Lawesson，sreagent)(0.55當(dāng)量)3小時(shí)(直到TLC指示酰胺消失)。冷卻反應(yīng)混合物并在減壓下蒸發(fā)。以快速色諳法純化殘余物以產(chǎn)生淺黃色固體，產(chǎn)率50-60%。對(duì)于化合物(iv):'HNMR(400MHz,CDCl3+丙酮-d6中)59.20(bs,1H),6.84(m,2H),6.78(d,/=8Hz,1H)4.71(d,J=5.1Hz,2H),3.89(s,2H),3.81(s,3H),3.80(s,3H).MS(CI):測(cè)量值(m/z)251.43;對(duì)C12H14N202S計(jì)算(MH+)250.32.對(duì)于化合物(v):'HNMR(300MHz，丙酮-d(,中)59.20(bs,1H),6.72(s,2H),4.77(d,,/=5.2Hz,2H)，4.06(s，2H),3.80(s,6H),3.71(s,3H).MS(CI):測(cè)量值(m/z)281.51:對(duì)C13H17N203S計(jì)算(MH+)281.34.對(duì)于化合物(vi):'HNMR(400MHz,CDCI3中)S7.08(s,IH)，6.82(s,IH)，4.78(d,,/=5.2Hz,2H),3.98(s,2H)，3.88(s,3H),3.87(s，3H).合成如下標(biāo)號(hào)的中間化合物的一般程序(vii)其中X=Br和Y=H，(viii)其中X=I和Y=H,(ix)其中X=F和Y=OMe，(x)其中X=CI和Y=OMe，(xi)其中X-Br和Y-OMe,(xii)其中X=I和Y=OMe,(xiii)其中X=CF3和Y二OMe，(xiv)其中X二Br和V^Br，以及(xv)其中X=OMe和Y=Bi"將催化量的/-丙氨酸(0.2當(dāng)量)加至p-氰基硫代酰胺(l當(dāng)量)和醛((1.2當(dāng)量)為商業(yè)可得的，除了3,4-二曱氧基-5-(三氟甲基)苯曱醛，其根據(jù)Backstrom等人，丄A/d(1989),32:841-846制備)的乙醇(大約20mL/mmol化合物(iv-vi))溶液。將溶液加熱至60"C持續(xù)0.5小時(shí)至過(guò)夜。沉淀、過(guò)濾收集產(chǎn)物，以H20、EtOH和醚洗滌，隨后在減壓下千燥以產(chǎn)生純的黃色固體，以70%至定量的產(chǎn)率。對(duì)于化合物(vii):HNMR(400MHz,CDC13中)S8.69(s,1H),7.95(bt，1H),7.70(d,J二2.0Hz,1H),7.67((!，/=2.0Hz,1H),6.91(m,3H),4.94(d,J=5.0Hz,2H),3.98(s,3H)，3.90(s,6H).對(duì)于化合物(viii):'HNMR(400MHz,CDC13中)S8.67(s,1H),7.95(bt:1H),7.86(d,./=2.0Hz,1H),7.72(d,2.0Hz,1H),6.92(m，3H),4.94(d,</=5.2Hz,2H),3.98(s,3H),3.90(s,6H).對(duì)于化合物(ix):NMR(400MHz,丙酮-(16中)S9.60(bs,1H),8.24(s，1H),7.55(m,3H),6.81(s,1H),4.98(s,2H),3.96(s,3H),3.83(s，6H),3.73(s,3H).對(duì)于化合物(x):'HNMR(400MHz,CDC13中)58.69(s,1H),7.99(bt,]H),7.58(d,,/=2.0Hz,1H),7.55(d,2.0Hz,1H),6.60(s,1H),4.92(d,,/=5.2Hz,2H),3.%(s,3H)，3.87(s,6H),3.84(s,3H).對(duì)于化合物(xi):'HNMR(300MHz,丙酮國(guó)4中)S9.62(bt，IH)，8.21(s.IH),7.81(s,IH),7.76(s,IH),6.79(s,2H),4.96(m,2H),3.94(s,3H),3.81(s,6H)，3.71(s,3H).MS(CI):測(cè)量值(m/z)494.73;對(duì)C21H22BrN205S計(jì)算(MH+)494.37.對(duì)于化合物(xii):'HNMR(400MHz，CDC13中)S8.66(s,IH),7.99(bt,IH),7.86(d,,/=2.0Hz,IH),7.72(d,2.0Hz,IH),6.60(s，2H)，4.93(d,5.0Hz,2H),3.97(s,3H),3.88(s,6H),3.86(s,3H).MS(CI):測(cè)量值(m/z)540.67;對(duì)C21H2lIN205S計(jì)算(M+)540.37.對(duì)于化合物(xiii):'HNMR(200MHz,CDC13中)8.75(s,IH),S8.22(btIH)，7.91(d,/=2.0Hz，IH),7.69(d，J=2.0Hz,IH),6.61(s，2H),4.94(d，t/=5.0Hz,2H),4.03(s,3H),3.88(s,6H),3.86(s,3H).對(duì)于化合物(xiv):NMR(400MHz,丙酮-d6+CDCl3中)S9.30(bt，1H),8.43(s，1H),7.72(d,/=2.0Hz,1H),7.17(d,J=2.0Hz,1H),7.07(d,t/=2.0Hz,1H),5.01((!,</=4.4Hz，2H),3.95(s,3H),3.87(s,3H),3.81(s,3H).對(duì)于化合物(xv):'HNMR(400MHz,CDC13中)58.74(s,1H),8.00(bt，1H),7.34(s，2H),7.14(s,1H),6.90(s,1H),4.96(d,,/=4.5Hz,2H)，3.96(s，6H),3.88(s,3H),3.86(s,3H).合成化合物6-8、11-13、15-17的一般程序?qū)⑷寤?對(duì)各羥基基團(tuán)1.5當(dāng)量過(guò)量)加至受保護(hù)產(chǎn)物在無(wú)水CH2C12(大約20mL/mmol化合物(vii-xv))中的冷溶液。使反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌2-4小時(shí)(直到HPLC指示形成期望的脫保護(hù)產(chǎn)物)。冷卻溶液，隨后以稀鹽酸處理。以乙酸乙酯萃取溶液三次，有機(jī)層經(jīng)Na2S04干燥，過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。從水/乙醇重結(jié)晶粗產(chǎn)物以獲得黃色固體，產(chǎn)率60-70%。對(duì)于化合物6:lHNMR(400MHz,丙酮-d(，中)59.45(bs,1H),8.13(s,IH),7.69(d,,/=2.1Hz,1H),7.66(d,./=2.1Hz,IH)，7.11(d,,/=2.0Hz,1H),6.97(d，J=2.0Hz,1H),4.90(d，,/=5.4Hz，2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)498.73;對(duì)C17HnBr2N204S計(jì)算(MH+)498.88.對(duì)于化合物7:'HNMR(300MHz,丙酮-dc,中)9.48(bs,IH)，8.08(s,IH)，7.66(d,./=2.0Hz,1H),7.63(d,./=2.0Hz,1H),6.46(s,2H),4.79(d,./=5.7Hz,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)438.40;對(duì)C17H14BrN205S計(jì)算(MH+)438.26.對(duì)于化合物8:]HNMR(200MHz,丙酮-de中)59.42(bs,IH)，8.24(s,1H),7.91(d,,/=2.1Hz,1H),7.64(d,./=2.1Hz，1H),6.47(s,2H),4.79(d，,/=5.5Hz，2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)484.80;對(duì)C17H14IN205S計(jì)算(M+)484.96.對(duì)于化合物ll:'HNMR(300MHz,丙酮46中)59.42(bs,1H),8.08(s,1H),7.61(d,J=2.0Hz,1H),7.49(d,J=2.0Hz,1H),6.47(s,2H),4.80(d,,/=4.6Hz,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)393.07;對(duì)0171"[14(^1^2055計(jì)算(MH+)44393.81.對(duì)于化合物12:^NMR(300MHz,丙酮-(16中)S9.47(bs,]H),8.10(s，1H),7.88(d,J=2.0Hz,1H),7.45(d,J=2.0Hz,1H),6.47(s,2H),4.81(d,</=5.4Hz,2H).對(duì)于化合物13:NMR(300MHz,丙酮-(16中)59.47(bs,1H),8.06(s:1H),7.80(d,J=2.1Hz,1H),7.71(d，H=2.1Hz,1H),6.48(s,2H),4.79(d,>5.4Hz，2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)427.33;對(duì)C18HMF3N205S計(jì)算(MH+)427.37.對(duì)于化合物15:'HNMR(400MHz,丙酮-(16中)S9.40(bs,1H),8,08(s:1H),7.82(d,J=2.0Hz,1H),7,72(d,/=2.0Hz,1H),6.93(m,1H),6.79(m,2H),4.86(d,=5.4Hz,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)422.80;對(duì)C17H14BrN204S計(jì)算(MH+)422.27.對(duì)于化合物16:^NMR(300MHz,丙酮-d6中)59.40(bs,1H),8.13(s:IH)，7.82(d,2.0Hz,1H),7.68(d,/=2.0Hz,1H),6.93(s,1H),6.78(s,2H)，4.86(d,=5.7Hz,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)468.67;對(duì)C17H13IN204S計(jì)算(M+)468.27.對(duì)于化合物17:'HNMR(400MHz,丙酮隱(16中)S9.45(bs,1H),8.13(sIH)，7.15(s，2H),7.08(d,,/=2.0Hz，1H),6.94(d，H=2.0Hz,IH)，4.90(d,,/=5.0Hz，2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)437.67;對(duì)Cl7Hl3BrN205S計(jì)算(M+)437.26.合成化合物5、9-10、14和18的一般程序圖解性地繪于圖2,并在下文公開合成如下標(biāo)號(hào)的中間化合物的一般程序(xvi)其中X=Br，(xvii)其中X=I，以及(xviii)其中X=CF3:45將催化量的哌啶(0.2當(dāng)量)加至醛((l當(dāng)量)為商業(yè)可得的，除了3,4-二甲氧基-5-(三氟甲基)苯甲醛，其根據(jù)Backstrom等人，丄MedC/jem.(1989),32:841-846制備)和丙二酸(1.5當(dāng)量)的吡啶溶液。將反應(yīng)混合物加熱至120。C^持續(xù)6小時(shí)。將溶液冷卻至室溫并逐滴加入濃HCl至pfK3。過(guò)濾收集白色固體，以水洗滌并在減壓下干燥。對(duì)于化合物(xvi):HNMR(300MHz,CDC13中)S7.65(d,./=15.9Hz),7.35(d,J-2.1Hz,1H),7.01(4^7=2.1Hz,1H),6.35(d,/=15.9Hz,1H),3.90(s,3H),3.88(s,3H).對(duì)于化合物(xvii):'HNMR(400MHz,CDC13中)S7.64(d,/=2.0Hz,1H),7.56(d,/=2.0Hz),7.04(d,J=2.0Hz,1H),6.35(d,7=16.0Hz,1H),3.92(s,3H),3.88(s,3H).對(duì)于化合物(xviii):&NMR(400MHz,CDC13中)S7.63(d,/=16Hz),7.61(s,1H),7.43(s,1H),6.50(d,J=16Hz,1H),3.90(s,3H),3.88(s,3H).合成如下標(biāo)號(hào)的中間化合物的一般程序(xix)其中X-Br和YOMe，(xx)其中X=I和Y=OMe，(xxi)其中X二CF3和Y=OMe以及(xxii)其中X=Br和Y=Br:在室溫?cái)嚢杌衔?xvi-xviii,1當(dāng)量)的草酰氯(4當(dāng)量)溶液1-2小時(shí)。蒸餾出過(guò)量的草酰氯并將混合物蒸發(fā)至干燥。將殘余物溶解于CH2C12中并逐滴加至胺(0.85當(dāng)量)和Et;N(4當(dāng)量)的CH2Cl2溶液。在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物0.5-1小時(shí)(直到TLC指示胺消失)。在減壓下蒸發(fā)溶劑并以快速色譜法純化剩余的油。對(duì)于化合物(xix):'ITNMR(300MHz，CDC13中)57.52(d,J=15.8Hz,IH),7.29(s，IH),6.92(s,IH),6.50(s,2H),6.37(d,J=15.8Hz,IH),6.23(bt,1H),4.46(d,J=5.7Hz,2H),3.81-3.85(s,15H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)467.87;對(duì)C21H25BrN06計(jì)算(MH+)466.32.對(duì)于化合物(xx):&NMR(400MHz,CDC13中)57.51(d,2.0Hz,1H),7.50(d,J=15.6Hz),6.96(d,J=2.0Hz,1H),6.51(s,2H),6.35(d,,/=15.6Hz,1H),6.10(bt,./=5.2Hz,1H),4.47(d,5.2Hz,2H),3.85(s,3H),3.84(s,3H)3.82(s,6H),3,81(s,3H).對(duì)于化合物(xxi):!HNMR(300MHz,CDC13中)S7.52(d,>15.8Hz,1H),7.29(s,1H),6.92(s,1H),6.50(s,2H),6.37(d,,/=15.8Hz,1H),6.23(bt,1H),4.46(d,5.7Hz,2H),3.81-3.85(s,15H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)467.87;對(duì)C21H25BrN06計(jì)算(MH+)466.32.對(duì)于化合物(xxii):HNMR(400MHz,CDCl3+丙酮誦d6中)8.56(bt,J=6.0Hz,lH),7.39(d,^2.0Hz,IH)，57.38(d,/=15.6Hz,1H),7.28((!,/=2.0Hz,1H),7.09(d,J=2.0Hz,1H),7.05(d,J=2.0Hz,1H),6.68(d,J=15.6Hz,1H),4.32(d,6.0Hz,2H),3.85(s,3H),3.80(s,3H),3.74(s,3H),3.67(s,3H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)467.87;對(duì)C^H25BrN06計(jì)算(Mlf)466.32.合成如下標(biāo)號(hào)的化合物的一般程序5其中X二Br和Y=OMe，(xxiii)其中X=^Y=OMe，(油)其中X-CF3和Y=OMe，以及(xxv)其中X=Br和Y=Br:將酰胺(]當(dāng)量)和拉韋松試劑(0.55當(dāng)量)在甲苯中回流3小時(shí)(直到TLC指示酰胺消失)。冷卻反應(yīng)混合物并在減壓下蒸發(fā)。以快速色語(yǔ)法純化殘余物以產(chǎn)生淺黃色固體，產(chǎn)率50-60%。對(duì)于化合物5:'HNMR(300MHz,CDC13中)57.75(d,,/=15.3Hz，1H)7.41(d,J=2.1Hz,IH),7.29(d，,7=2.1Hz,IH),7.16(d，J=5.3Hz,IH)，6.76(s,2H),4.90(m,2H),3.94(s,3H),3.83(s,3H),3.77(s,6H),3.70(s,3H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)483.87;對(duì)C21H25BrN05S計(jì)算(MH+)483.38.對(duì)于化合物(xxiii):NMR(400MHz,CDC13中)57.71(d,J=15.2Hz,IH)，7.6(bt,IH),7.56(d,./=1.8Hz,m),7.01(d,/=1.8Hz,1H),6.78(d，J=15.2Hz,1H),6.55(s,2H)，4.86(d,J=5.0Hz,2H),3.86(s,3H),3.84(s,3H),3.83(s,6H),3.82(s,3H).對(duì)于化合物(xxiv):&NMR(300MHz,CDC"中)S7.75(d,15.3Hz,IH),7.41(d,./=2.1Hz,IH)，7.29(d,./=2.1Hz,1H),7.16(d,./=15.3Hz,1H),6.76(s,2H),4.90(m,2H),3.94(s,3H),3.83(s,3H),3.77(s,6H),3.70(s,3H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)483.87;對(duì)C21H25BrN05S計(jì)算(Mtf)483.38.對(duì)于化合物(xxv):'HNMR(400MHz,CDC13中)S7.74(d,J=15.2Hz,1H),7.52(bt,1H),7.37(d,J=1.9Hz,1H),7.15(d,J=1.9Hz,1H),7.01(d,,/=1.9Hz,1H),6.89(d,J=1.9Hz,1H),6.78(d,J=15.2Hz,1H),4.92(d,,/=5.3,2H),3.91(s,3H),3.90(s,3H),3.88(s,3H),3.87(s,3H).合成化合物9-10、14和18的一般程序?qū)⑷寤?對(duì)各羥基基團(tuán)1.5當(dāng)量過(guò)量)加入受保護(hù)產(chǎn)物在無(wú)水CH2Cb(大約20mL/mmol化合物5和(xxiii-xxv))中的冷溶液。使反應(yīng)混合物升溫至室溫并撹拌2-4小時(shí)(直到HPLC指示形成了期望的脫保護(hù)產(chǎn)物)。冷卻溶液隨后用稀鹽酸處理。用乙酸乙酯萃取溶液三次，合并的有機(jī)層經(jīng)Na2S04千燥并在減壓下蒸發(fā)。從水/乙醇重結(jié)晶粗產(chǎn)物以獲得期望產(chǎn)物，產(chǎn)率60-70%。對(duì)于化合物9:'HNMR(400MHz,丙酮^6中)59.16(bs,1H),7.69(d，./=15.4Hz,1H),7.31(d，'/=1.9Hz,1H)，7.09(d,J二1.9Hz,1H),7.06(d,,/=15.4Hz,1H),6.44(s,2H),4.76(d,J=5.7Hz,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)411.93;對(duì)Cl6H15BiN05S計(jì)算(MH^411.97.對(duì)于化合物10:'HNMR(400MHz,丙酮-A中)59.2(bs,IH),7.67(d,,/=5.2Hz,1H),7.51(d,,/=2.0Hz,IH)，7.12(d,,/=2.0Hz,1H),7.02(d,,/=15.2Hz,IH)，6.44(s,2FI)，4.76(d,,/=5.2Hz,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)460.13;對(duì)C16H151N05S計(jì)算(MH+)460.26.對(duì)于化合物14:'HNMR(400MHz,丙酮匿(16中)S9.16(bd,1H)，7.69(d4815.4Hz,1H),7.31(d,J=1.9Hz,1H),7.09(d,J=1.9Hz,1H),7.06(d,t/=15.4Hz,1H),6.44(s,2H),4.76(d,J=5.7Hz,2H).MS(EST):測(cè)量值(m/z)411.93;對(duì)C16H15BrN05S計(jì)算(MlT)411.97.對(duì)于化合物18:'HNMR(300MHz,丙酮46中)S9.23(bt,1H),7.68(d15.2Hz,1H),7.31(d,,/=2.0Hz,IH)，7.09(d,J=2.0Hz,1H),7.09(d,2.0Hz,1H),6.99(d,./=15.2Hz,1H),6.91(d,,/=2.0Hz,1H),4.85(d,,/=5.6Hz,2H).MS(ESI):測(cè)量值(m/z)476.27;對(duì)C16H14Br2N04S計(jì)算(MH+)476.15.合成用于合成本發(fā)明新型酪氨酸磷酸化抑制劑的中間產(chǎn)物的一般程序顯示于圖3并在下文描述合成如下的在此標(biāo)號(hào)為(xxvi)的化合物的一般程序?qū)?-溴代藜蘆@荃(5.00g,20.5mmol,1當(dāng)量)溶解于最少量的熱乙醇，并加入鹽酸輕胺(1.71g，24.6誦ol,1.2當(dāng)量)的水(30mL)溶液。隨后加入10%氫氧化鈉(.09g,27.3mmol,1.33當(dāng)量)水溶液，在室溫?cái)嚢杌旌衔?直到TLC指示醛消失)。蒸發(fā)乙醇后，沉淀、過(guò)濾收集產(chǎn)物，以水洗滌并在減壓下干燥以便以定量產(chǎn)率產(chǎn)生純的白色固體。'HNMR(300MHz,CDC1;中):58.01(s,1H),7.71(s,1H),7.27(d,J=1.8Hz,H),7.15(d,J"=1.8Hz,1H),3.89(s,3H),3.88(s,3H).合成如下的在此標(biāo)號(hào)為(xxvii)的化合物的一般程序向(xxvi)(5.00g，19.2mmol,1當(dāng)量)的20mL乙酸溶液加入鋅(3.77gr,4957.6mmol,3當(dāng)量)?；亓魅芤褐钡絋LC顯示肟消失。過(guò)濾鋅鹽并用乙酸乙酯洗滌。蒸發(fā)濾液并加入氫氧化鈉水溶液。用乙酸乙酯萃取水層三次。以鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)Na2S04干燥并在減壓下蒸發(fā)以產(chǎn)生微黃色油，產(chǎn)率55%。丄HNMR(300MHz,CDC13中)57.09(d,J=2.1Hz,1H),6.85(d,/=2.1Hz,IH),3.90(s,3H),3.86(s,3H),3.82(s,2H).實(shí)施例2:生物活性試劑和抗體用于化學(xué)合成的所有化學(xué)品，即牛血清白蛋白、聚(Glu,Tyr)4:1(pGT)、2,2'-疊氮基-雙-3-乙基苯并噻唑啉(ethylbenzMiiazoline)-6-磺酸、IGF1、亞甲藍(lán)、溴化3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2H-四唑(MTT)、HRP-軛合的抗-磷酸酪氨酸PT-66和二磷酸化促分裂原活化蛋白激酶抗體(pERK)購(gòu)自Sigma?？?磷酸-IRSl抗體從OncogeneResearchProducts,Germany獲得；抗-IRSl從UpstateBiotechnology,Tnc獲得。抗-Aktl/2(PKB)、抗-ERK2和抗-IGFlR(3抗體從SantaCmzBiotechnology獲得?？巩嬃姿?T308)Akt、抗陽(yáng)磷酸(Ser636/Ser639)IRSl和抗-PARP抗體從CellSignalingTechnology獲得。Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)和胎牛血清(FCS)從BiologicalIndustries,Bet-Haemek,Israel獲得。DMSO從BDH獲得。1GFlR-催化的底物磷酸化的抑制通過(guò)向各孔加入125^的PBS中的0.1mg/mlpGT而將普通的蛋白-酪氨酸激酶底物聚(Glu,Tyr)4:1(pGT)包被在96-孔Maxisorp板(Nunc)上。密封板并在37。C孵育16小時(shí)，以TBST(10mMTris-HCl,pH7.5、50mMNaCl和0.1%TritonX-100)洗滌一次，以DDW洗滌一次，干燥2-3小時(shí)，并保存在4°C。在30°C在20ATP、10mMMgCl2、5mMMnAc2和20mMTris-HCl,pH7.4(含有或不含有抑制劑)中孵育受體(l0ng/孑L)20min。隨后以含有0.2%Tween20的TBS(TBST)洗滌板并用溶于TBST中的0.5%BSA封閉板。將軛合于辣根過(guò)氧化物酶(PT-66,1:50000)的小鼠單克隆抗-磷酸酪氨酸抗體加至板。在室溫孵育45min后，以TBST反復(fù)洗滌板。在50含有0.004%&02的檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖液，pH4.0中以顯色試劑2,2'-疊氮基-雙-3-乙基苯并p塞唑啉(ethylbenz池iazoline)-6-磺酸進(jìn)行檢測(cè)10min并在405nm監(jiān)控，都在室溫進(jìn)行。使用REGRESSION程序計(jì)算抑制劑的IC50值。關(guān)于1GF-1R(從過(guò)表達(dá)IGF1R的細(xì)胞部分地純化)的量、反應(yīng)時(shí)間和ATP濃度優(yōu)化測(cè)定。在IGF1R蛋白濃度最高達(dá)到35ng/孔的范圍內(nèi)信號(hào)為線性，持續(xù)30min。在完整細(xì)胞中IGF1誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和其它信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑(例如EGF、PDGF和胰島素-誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo))的抑制在乳腺癌MCF7細(xì)胞中測(cè)定IGF1R的p-亞基的酪氨酸自磷酸化以及IGF1R誘導(dǎo)的下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在前列腺癌PC3細(xì)胞中測(cè)定EGFR的酪氨酸自磷酸化和EGFR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在過(guò)表達(dá)PDGFR的成纖維細(xì)胞中測(cè)定PDGFR的酪氨酸自磷酸化和其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在過(guò)表達(dá)IR的成纖維細(xì)胞中測(cè)定IR的酪氨酸自磷酸化和其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。將細(xì)胞接種在6-孔板中(MCF7-250,000細(xì)胞/孔、PC3-150,000細(xì)胞/孔、成纖維細(xì)胞-140，000細(xì)胞/孔)，24小時(shí)后培養(yǎng)基以無(wú)血清培養(yǎng)基(補(bǔ)充100單位/ml青霉素和100昭/ml鏈霉素的DMEM)代替。20小時(shí)的血清-饑餓后，將培養(yǎng)基以含有0.1%DMSO中各種濃度抑制劑的培養(yǎng)基代替，持續(xù)另外4小時(shí)。隨后用50ng/ml1GF-1(MCF7細(xì)胞)、20ng/mlEGF(PC3細(xì)胞)、50ng/mlPDGF(過(guò)表達(dá)PDGFR的成纖維細(xì)胞)或100nM胰島素(過(guò)表達(dá)1R的成纖維細(xì)胞)刺激細(xì)胞5nun,用PBS洗滌兩次、并用沸騰的樣品緩沖液(10%甘油、50mMTris-HCl、pH6.8、3%SDS和5%(3-巰基乙醇)溶解。以8%SDS-PAGE分離每條泳道等量的蛋白并轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜(SartomisAG)。將磷酸化蛋白以抗-磷酸-IGF1R(磷酸-IGF1R(phosphor-IGF1R))、抗-磷酸酪氨酸-IRSl(磷酸-IRSl)、抗-磷酸(T308)Akt(磷酸-PKB)、抗-磷酸-Erk(磷酸-ERK)、抗-磷酸酪氨酸4G10&PY20(pY-EGFR或pY-PDGFR)、抗-磷酸-Ser636/639-lRSl(pS6'W639-lRSI^"^Ji^ll-STAT3(磷酸-STAT3)抗體進(jìn)行免疫印跡。使用ECL系統(tǒng)，以辣根過(guò)氧化物酶-軛合的第二抗體進(jìn)行檢測(cè)。隨后將印跡的抗體剝落，以TBST和5%低脂乳封閉并用檢測(cè)磷酸化和非-磷酸化相應(yīng)蛋白(例如IGF1R(3、IRS1、PKB、ERK、IR(3、PDGFR和Stat3)此外，在FCS存在或不存在時(shí)，無(wú)刺激的情況下，從接觸不同濃度抑制劑24小時(shí)的細(xì)胞制備溶解產(chǎn)物。溶解產(chǎn)物的制備和蛋白質(zhì)印跡與上述相同。通過(guò)用兔抗-PARP抗體進(jìn)行免疫印跡來(lái)檢測(cè)凋亡。增殖測(cè)定以1000-5000細(xì)胞/孔的密度將90含有10%FCS、100單位/ml青霉素和100pg/ml鏈霉素的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的各種癌細(xì)胞系(列于表l)鋪板于96-孔板。一天后加入溶于10^的含有1%DMSO的DDW中的抑制劑以獲得終濃度0、0.1、0.3、1、3和10pM。所有樣品中DMSO的終濃度(0.1%DMSO)保持恒定。一天后和兩天后更新含有抑制劑的培養(yǎng)基。在37。C將細(xì)胞接觸抑制劑72小時(shí)后，將細(xì)胞在培養(yǎng)基中于0.5。/。戊二醛(gluteraldehyde)中固定10min，以DDW洗滌三次，以0.1M硼酸鈉H沖液pH8.5洗滌一次，并以溶解于O.lM硼酸鹽緩沖溶液的1%亞甲藍(lán)染色60min。洗去過(guò)量的染料，將細(xì)胞結(jié)合的染料以200pl/孔的0.1MHC1洗脫。在EL1SA板讀數(shù)器中以620nm讀取光密度值。使用4某介物對(duì)照作為100%增殖，以MicrosoftExcel分析數(shù)據(jù)。以三份進(jìn)行測(cè)定。表l中的值表示從獲得的劑量依賴性生長(zhǎng)曲線衍生的IC5()值?？寺⌒纬?Clonogenic)測(cè)定將各種癌細(xì)胞(列于表l)以非常低濃度(96-孔板中19細(xì)胞/孔或24-孔板中63細(xì)胞/孔)接種于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。—天后以生長(zhǎng)培養(yǎng)基代替培養(yǎng)基，所述生長(zhǎng)培養(yǎng)基含有在終濃度為0.1%的DMSO中的不同濃度抑制劑。每周更新三次含有抑制劑的培養(yǎng)基。大約兩周后，通過(guò)加入戊二醛(Gluteraldehide)(0.5%終濃度)將細(xì)胞固定10rmn,以DDW洗滌三次，以硼酸鹽緩沖液0.1M洗滌一次，并以硼酸鹽緩沖液0.1M中的1%亞曱藍(lán)染色1小時(shí)。用水洗去多余染料，千燥后計(jì)數(shù)集落?？蛇x地，以O(shè).INHC1萃取染料1小時(shí)并以EL1SA讀數(shù)器測(cè)量620nm處的吸光度。以三份進(jìn)行測(cè)定。表1中的值表示從獲得的劑量依賴性生長(zhǎng)曲線衍生的IC5(>值。對(duì)異種移植才莫型中前列腺、卵巢、黑素瘤和胰腺腫瘤生長(zhǎng)的體內(nèi)作用將人類激素難治性前列腺癌PC3纟曰胞(ATCC,每只小鼠1.5xl(f細(xì)胞)皮下注射到Nude:Hsd小鼠(購(gòu)自Harlan)的右腿。十天后，當(dāng)已發(fā)展明顯腫瘤時(shí)，將小鼠分為具有類似平均腫瘤尺寸的3組。未處理組(UT)不接受任何處理。對(duì)以化合物7處理組的小鼠每天注射溶解于以下所述媒介物中的化合物7，對(duì)媒介物處理組(veh)每天僅注射媒介物。媒介物包括DDW中的4.4%DMSO、1.2%乙醇和50%PEG400;每組包括3只小鼠。IP施用劑量為50mg/Kg(4ml/Kg),每天一次持續(xù)一個(gè)月。每天測(cè)量腫瘤的長(zhǎng)度(l)和寬度(w),如下計(jì)算腫瘤體積v=lw2/2。圖表示了腫瘤平均體積對(duì)以天數(shù)表示的時(shí)間。其它描述的體內(nèi)研究遵循該程序并有以下修改將人類卵巢癌A2780細(xì)胞(來(lái)自ECACC,每只小鼠2xl06細(xì)胞)皮下注射到雌性Nude:Hsd小鼠(購(gòu)自Harlan)的右腿。以溶解于含有4.4%DMSO、0.12%EtOH、50%PEG-400的DDW中的20mg/kg(Exp.2&3)或50mg/kg(Exp.4)劑量以4ml/kg的體積每天IP注射抑制劑。Veh組以4ml/kg的體積接受DDW中的4.4%DMSO、0.12%Et〇H、50%PEG-400。將小鼠BI6黑素瘤細(xì)胞(每只小鼠1.5x106細(xì)胞)皮下注射到雄性Nude:Hsd小鼠(購(gòu)自Harlan)的右腿。以溶解于含有4.4%DMSO、1.2%EtOH、33%PEG-400的DDW中的20mg/kg劑量以4ml/kg的體積每天IP注射抑制劑。將Dr.RuthHalaban(YaleUmversity)提供的人類YUMAC轉(zhuǎn)移的黑素瘤細(xì)胞(每只小鼠2xl(/'細(xì)胞)皮下注射到雄性Nude:Hsd小鼠(購(gòu)自Harlan)的右腿。以溶解于含有8%EtOH、2%Tween-80、20%PEG-400和20%solutol的DDW中的20mg/kg劑量以4ml/kg的體積每天IP注射抑制劑。將人類胰腺癌Panel細(xì)胞(每只小鼠2xl06細(xì)胞)皮下注射到雄性Nude:Hsd小鼠(購(gòu)自Harlan)的右腿。每天以在含有0.06%DMSO和2.16%的PEG400的鹽水中的125嗎/小鼠的劑量將化合物7腫瘤內(nèi)(FT)注射。角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)的體外抑制將生長(zhǎng)因子富集的培養(yǎng)基中的原代角質(zhì)形成細(xì)胞接種到96-孔板中。48小時(shí)后更新培養(yǎng)基，以指示濃度(O是0.1%DMSO,其在所有孔中保持恒定)加入化合物7。每24小時(shí)更新培養(yǎng)基和化合物7,且4姿種細(xì)胞5天后以0.5。/o戊二醛(gluteraldehide)固定10min,以亞甲藍(lán)染色。洗去多余染料，并以0.1NHC1萃取結(jié)合的染料。在ELISA讀數(shù)器讀取620nm波長(zhǎng)的吸光度。結(jié)果本發(fā)明化合物的生化表征無(wú)細(xì)胞測(cè)定中IGF1R活性的抑制如表1和表2中所示的，化合物6-18以劑量依賴性方式抑制部分純化的IGF1R的激酶活性，顯示IC50值為30-200nM。如通過(guò)比較化合物19和7證實(shí)的，消除羥基基團(tuán)增加IC50值(表1)。動(dòng)力學(xué)研究顯示，化合物7以及化合物6和8不與ATP竟?fàn)?，因?yàn)锳TP濃度升高不誘導(dǎo)在TGF1R的無(wú)細(xì)胞激.特測(cè)定中確定的IC50值增加(表2)。表1:無(wú)細(xì)胞激酶測(cè)定中IGF1R活性的IC50值化合物編號(hào)IC50(nM)6987116876978103311不可測(cè)121691368151151619317491819619700表2:在1GFR的無(wú)細(xì)胞激酶測(cè)定中測(cè)試抑制劑與ATP竟?fàn)幍膭?dòng)力學(xué)研究54<table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table>細(xì)胞中IGF1R的抑制乳腺癌MCF7細(xì)胞接觸化合物7產(chǎn)生IGFl-誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的顯著抑制。圖4A顯示盡管對(duì)照分子20(見以下結(jié)構(gòu))對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)無(wú)作用，但是化合物7顯著地抑制IGF1R的自磷酸化、IGFl-誘導(dǎo)的IRS1(IGF1R的直接底物)的酪氨酸^粦酸化和IGFl-誘導(dǎo)的IGF1R下游兩種主要抗-凋亡和增殖途徑(Akt/PKB和MAPK/ERK途徑)的活化。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage55</formula>化合物20圖4B例示化合物7在MCF7細(xì)胞中的劑量依賴性活性，顯示在IGF1R下游的關(guān)鍵抗-凋亡途徑Akt/PKB途徑的抑制中IC50值為1-2pM。在甚至更低濃度檢測(cè)到MAPK/ERK途徑活化的抑制。出人意料地發(fā)現(xiàn)化合物7誘導(dǎo)乳腺癌MCF7細(xì)胞中1GFlR-直接底物IRS1在細(xì)胞水平的減少(圖5)。顯示該作用是持久的(圖5B)。甚至將細(xì)胞接觸化合物7后24小時(shí)檢測(cè)到IRS1水平減少，伴有其下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑-抗凋亡PKB/Akt途徑的抑制且隨后PARP裂解，已知PARP的裂解是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志。不希望受任何特定機(jī)理或理論所束縛，預(yù)期化合物7誘導(dǎo)的IRS1水平減少是誘導(dǎo)次級(jí)負(fù)調(diào)節(jié)的結(jié)果，在次級(jí)負(fù)調(diào)節(jié)中IRSI經(jīng)歷對(duì)絲氨酸殘基磷酸化的抑制和隨后的降解。認(rèn)為該作用在源于PTK信號(hào)傳導(dǎo)的抑制機(jī)理的抗癌癥活性中有高度重要性。進(jìn)一步預(yù)期，化合物7以及本發(fā)明由三羥基千基硫代酰胺和第二兒茶酚環(huán)中卣素或卣曱基部分組成的其它化合物誘導(dǎo)IRS1的Ser-磷酸化和/或IRS1水平減少。這些結(jié)構(gòu)顯示與對(duì)細(xì)胞中IRS1水平或Ser-磷酸化顯示無(wú)作用的相關(guān)分子(如化合物6)相比，更高的體夕卜(癌細(xì)胞增殖的抑制)和體內(nèi)(腫瘤生長(zhǎng)的抑制)活性。以化合物7處理細(xì)胞誘導(dǎo)的IRS1Ser-磷酸化的增加通過(guò)使用抗Ser殘基636&639上磷酸化的IRS1的特異性抗體的免疫印跡(圖5B)和圖5A中IRS1條帶的移動(dòng)而證實(shí)。已知IRS1的Ser-磷酸化誘導(dǎo)IRSl從IGF1R解偶，從而抑制IGF1R信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。進(jìn)一步顯示該亞家族中其它相關(guān)抑制劑(例如化合物8、9、10、11和13)也在乳腺癌MCF7細(xì)胞(圖6)以及轉(zhuǎn)移的黑素瘤YUMAC細(xì)胞(圖8)中觸發(fā)IRSl-ser磷酸化。在卵巢癌A2780細(xì)胞中，化合物7以及化合物8和9誘導(dǎo)Ser-磷酸化(SDS-PAGE中IRS1條帶上移)和細(xì)胞IRS1水平減少(圖7)。對(duì)IRS1的這種長(zhǎng)期作用伴有癌細(xì)胞的凋亡，如卯巢癌細(xì)胞在接觸新型抑制劑21小時(shí)后(圖7)和黑素瘤細(xì)胞在接觸新型抑制劑24小時(shí)后(圖8;3pM)所證實(shí)的?；衔?除了對(duì)〗GF1R途徑的抑制作用，化合物7還抑制完整細(xì)胞中其它酪氨酸激酶諸如EGFR、PDGFR和IR(圖9)。這些激酶在有絲分裂發(fā)生中具有關(guān)鍵作用。以化合物7孵育后，將表達(dá)這些激酶受體的細(xì)胞(例如表達(dá)EGFR的前列腺癌PC3細(xì)胞、過(guò)表達(dá)PDGFR的成纖維細(xì)胞和過(guò)表達(dá)IR的成纖維細(xì)胞)分別以EGF、PDGF或胰島素刺激(圖9A、9B和9C),并將溶解產(chǎn)物與抗-磷酸酪氨酸抗體進(jìn)行免疫印跡以檢測(cè)受體的自磷酸化。還測(cè)量了這些受體的下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Ser/Thr-激酶諸如MEK或PDK不被化合物7抑制，如同通過(guò)在化合物7對(duì)上游調(diào)節(jié)子無(wú)抑制作用的細(xì)胞中它們底物(分別是ERK和PKB(Thr308))的磷酸化水平所檢測(cè)的那樣。生長(zhǎng)抑制在細(xì)胞增殖測(cè)定中測(cè)試化合物6、7、8和9的抑制潛能。在該測(cè)定中，接種一天后將細(xì)胞接觸增加濃度的分子(以所有孔中0.1%DMSO)。每天更新培養(yǎng)基和抑制劑，處理三天后，固定細(xì)胞并以亞甲藍(lán)染色。從光密度對(duì)化合物濃度的曲線確定IC50值。以三份進(jìn)行測(cè)定。56測(cè)試來(lái)自不同適應(yīng)癥的一組癌細(xì)胞系對(duì)分子的敏感性(表3)?；衔?、8和9顯示抗癌癥活性而化合物6具有較低活性。該活性與這些分子"i秀導(dǎo)細(xì)胞中Ser-磷酸化&11^1水平減少的能力相關(guān)聯(lián)。與化合物6不同(圖19A&B),化合物7、8和9誘導(dǎo)IRSl-ser-磷酸化增力口(圖5-8)和IRS1水平減少(圖5和7)。24小時(shí)的處理觸發(fā)這些細(xì)胞凋亡，如通過(guò)PARP的裂解所檢測(cè)到的(圖5C、7A和8)。表3:化合物6、7、8和9在不同癌細(xì)胞系的細(xì)胞增殖和克隆形成測(cè)定中的抑制活性(以pM表示的IC5Q值)。以三份進(jìn)行測(cè)定。57<table>tableseeoriginaldocumentpage58</column></row><table>表4:一系列新型分子對(duì)人類轉(zhuǎn)移的黑素瘤細(xì)胞的抑制。將細(xì)胞與分子孵育72小時(shí)后，結(jié)果以IC5Q值表示。<table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table>體內(nèi)研究測(cè)試化合物7在動(dòng)物模型中對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用。在小鼠側(cè)腹向棵小鼠皮下注射癌細(xì)胞，且當(dāng)腫瘤可測(cè)量時(shí)，開始施用本發(fā)明的各種化合物。圖中呈現(xiàn)的腫瘤尺寸是第一次施用后測(cè)量的肺瘤尺寸。首先檢查人類激素難治性前列腺癌(HRPC)PC3模型。圖10顯示，與對(duì)照(媒介物處理的和未處理的)相比，每天一次以50mg/kg的劑量系統(tǒng)施用(IP)化合物7導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)的82%抑制。而且，施用一個(gè)月后，未^r測(cè)到對(duì)棵小鼠體重的顯著作用(圖11)。此外，使用腫瘤內(nèi)施用測(cè)試時(shí)，發(fā)現(xiàn)化合物7對(duì)HRPC和胰腺癌PANC1模型都有效(圖16)。由于報(bào)道IGF1R參與許多類型的癌癥，在體外篩選一組癌細(xì)胞系以及若干種其它類似細(xì)胞系對(duì)化合物7的敏感性(表3)?；谠摵Y選，檢查化合物7&8在卵巢癌A2780模型中的效力。圖12顯示，每天一次IP施用20mg/kg的化合物7或8導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)的87%抑制?；衔?、7、8和9(每天一次IP施用，20mg/kg)的比較性研究顯示，化合物7、8和9抑制卵巢腫瘤生長(zhǎng)約90%，甚至誘導(dǎo)小腫瘤消退，而施用化合物6(同樣條件下)僅導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)的33%抑制(圖13)。還對(duì)黑素瘤B16體內(nèi)模型測(cè)試化合物6和7的效力。兩種分子都具有顯著抑制作用，而化合物7更為有效(圖17)。本發(fā)明化合物對(duì)黑素瘤腫瘤的效力還通過(guò)化合物8對(duì)棵小鼠中人類轉(zhuǎn)移的(metasatic)黑素瘤YUMAC腫瘤的抑制而證實(shí)(圖18)。隨后，檢查化合物8對(duì)抑制卵巢癌A2780腫瘤生長(zhǎng)的效力。當(dāng)腫瘤尺寸大于50mn^或可選地當(dāng)肺瘤尺寸大于470mn^時(shí)開始施用。圖14&15顯示，每天一次IP施用50mg/kg的化合物8導(dǎo)致顯著和引人注目的腫瘤生長(zhǎng)抑制。因此證實(shí)本發(fā)明的化合物為體外和體內(nèi)對(duì)不同癌癥的有效抗癌劑。對(duì)銀屑病的體外研究證實(shí)生長(zhǎng)于富集的培養(yǎng)基的原代角質(zhì)形成細(xì)胞可用作銀屑病的體外模型?；衔?抑制原代角質(zhì)形成細(xì)胞的體外生長(zhǎng)(IC5(^2.3pM)，因此是抗銀屑病藥物的候選物(圖21)?；衔?的生化表征細(xì)胞中IGF1R和EGFR的酪氨酸激酶活性的抑制乳腺癌MCF7細(xì)胞與化合物6接觸產(chǎn)生IGFl-誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的顯著抑制。圖19A顯示，化合物6抑制IGF1R的自磷酸化、IGFl-誘導(dǎo)的IRS1(IGF1R的直接底物)的酪氨酸磷酸化和IGFl-誘導(dǎo)的Akt/PKB活化。與化合物7不同，化合物6對(duì)IGF1R或IRS1水平無(wú)影響(圖19B)。化合物6還抑制EGFR和EGF-誘導(dǎo)的STAT3(EGFR的直接底物)的酪氨酸磷酸化和EGF-誘導(dǎo)的PKB途徑活化(圖20A&20B)。生長(zhǎng)抑制不同癌細(xì)胞接觸化合物6導(dǎo)致軟瓊脂和板上集落形成的顯著抑制(表3，克隆形成測(cè)定)。盡管已闡釋和描述了本發(fā)明的某些實(shí)施方式，應(yīng)清楚的是，本發(fā)明不限于本文描述的實(shí)施方式。許多修改、改變、變化、代替和等價(jià)物對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是明顯的而不偏離本發(fā)明的主旨和范圍，本發(fā)明的主旨和范圍由隨后的權(quán)利要求書描迷。權(quán)利要求1.一種由下式1結(jié)構(gòu)表示的化合物其中R1、R2、R5和R6獨(dú)立地選自H、C1-C4烷基、?；退鈺r(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；R3和R7獨(dú)立地選自H、鹵素、鹵烷基和OR8，其中R8是H、C1-C4烷基、?；蛩鈺r(shí)產(chǎn)生羥基的官能團(tuán)；R4是H或CN，包括其鹽、水合物、溶劑合物、多晶型物、光學(xué)異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、對(duì)映體、非對(duì)映體和混合物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物基、OH或OCH3。6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物是鹵素且W是OH。7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物113和尺7各為鹵素。8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物為卣甲基且R"為OH。,其中R"是cn。，其中R1、R2、R5和R6各為氫。,其中R1、R2、R5和R6各為CH;。,其中113和117各為氫、卣素、鹵甲，其中R1、R2、R5和R6各為H,R3,其中R1、R2、R5和R6各為H,且,其中R1、R2、R5和R6各為H，R39.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中R1、R2、RS和I^各為H，R3為卣素且R〗為H。10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中R1、R2、尺5和W各為H，R3為OH且R7為卣素。11.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中R1、R2、RS和Re各為CH3，R3為卣素且R7為OCH3。12.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中R1、R2、RS和RS各為CH3，且113和117各為卣素。13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R"是氫。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、RS和F^各為氫。15.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、115和116各為CH3。16.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中113和117各為氫、鹵素、卣曱基、OH或OCH3。17.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、RS和R"各為H,R3是面素且R7是QH。18.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、R^和Rf'各為H，且R"和R"各為卣素。19.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、RS和RG各為H，R"為卣甲基且R"為OH。20.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、115和116各為H，R3為卣素且I^為H。21.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、RS和I^各為H，R3為OH且R7為卣素。22.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、W和R6各為CH;,R3為卣素且R7為OCH3。23.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中R1、R2、115和W各為CH3，且R和]^各為卣素。24.—種化合物，其選自由以下組成的組:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>25.—種藥物組合物，其包含治療上有效量的根據(jù)權(quán)利要求1或24所述的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。26.—種抑制蛋白酪氨酸激酶(PTK)的方法，其包括使所述PTK與有效抑制量的根據(jù)權(quán)利要求1或24所述的化合物接觸的步驟。27.—種治療或預(yù)防受治療者的蛋白酪氨酸激酶(PTK)相關(guān)疾患的方法，其包括向所述受治療者施用治療上有效量的根據(jù)權(quán)利要求1或24所述的化合物的步驟。28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述PTK相關(guān)疾患是細(xì)胞增殖疾患、纖維變性疾患或代謝疾患。29.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述PTK相關(guān)疾患是癌癥。30.根據(jù)權(quán)利要求26-29中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述蛋白激酶是受體蛋白酪氨酸激酶(RTK)。31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的方法，其中所述受體蛋白激酶選自由以下組成的組血小板源性生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(HGFR)、胰島素受體、胰島素樣生長(zhǎng)因子-l受體(IGF-1R)、表皮生長(zhǎng)因子受體(EDFR)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體(NGFR)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)和巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSFR)。32.根據(jù)權(quán)利要求26-31中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述化合物選自由以下組成的組<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>33.根據(jù)權(quán)利要求26-32中任一項(xiàng)所述的方法，其進(jìn)一步包括施用包含所述化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。34.根據(jù)權(quán)利要求1或24所述的化合物在制備用于治療或預(yù)防蛋白酪氨酸激酶(PTK)相關(guān)疾患的藥物中的應(yīng)用。35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的應(yīng)用，其中所述化合物選自由化合物6、7、8、9、10和13ia成的組。全文摘要本發(fā)明提供用作底物競(jìng)爭(zhēng)性蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制劑和受體酪氨酸激酶(RTK)抑制劑的新型酪氨酸磷酸化抑制劑衍生物，其制備方法，包含所述化合物的藥物組合物，和使用這些化合物和組合物的方法，尤其是用作預(yù)防和治療PTK和RTK相關(guān)疾患諸如代謝疾患、纖維變性疾患和細(xì)胞增殖疾患尤其是銀屑病和癌癥的化療劑。文檔編號(hào)C07C327/44GK101652345SQ200780050587公開日2010年2月17日申請(qǐng)日期2007年12月4日優(yōu)先權(quán)日2006年12月4日發(fā)明者亞歷山大·利維斯茲奇,利拉奇·斯泰納,哈達(dá)斯·路維尼,艾里斯·本-大衛(wèi),莉薇特麗·薩森,阿維·魏斯伯格申請(qǐng)人:諾沃泰爾醫(yī)療有限公司