具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備方法及制備中間體的制作方法

專利名稱：具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備方法及制備中間體的制作方法
技術領域：
本發明涉及作為具有α4整聯蛋白抑制作用的藥物有用性高的化合物、即具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備方法及其中間體。

背景技術：
近年來，對被認為α4整聯蛋白依賴性的粘接過程與病態相關的炎癥性疾病，例如類風濕性關節炎、炎癥性腸疾病、全身性紅斑狼瘡、多發性硬化癥、斯耶格倫綜合征、哮喘、牛皮癬、過敏、糖尿病、心血管疾病、動脈硬化癥、再狹窄、腫瘤增殖、腫瘤轉移、移植排斥等進行了研究，期待具有α4整聯蛋白抑制作用的化合物在治療藥物或預防藥物中的應用。
本申請人已經發明了具有α4整聯蛋白抑制作用的新型苯丙氨酸衍生物，該衍生物作為被認為α4整聯蛋白依賴性的粘接過程與病態相關的炎癥性疾病的治療劑或預防劑有用性高，并申請了專利(專利文獻1)。該專利申請中，作為這種具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備方法，報告了使苯丙氨酸衍生物負載在固相樹脂上，經過酰胺中間體構建喹唑啉二酮骨架的方法(專利文獻1)。
進一步地，本申請人發現了更適合于工業化的制備方法，并且已經申請了專利(專利文獻2)。該專利申請中，報告了使羧基被酯鍵保護的鄰氨基苯甲酸衍生物與苯丙氨酸衍生物反應，最終得到具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的方法。
進一步地，本申請人發現了新的具有α4整聯蛋白抑制作用的具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物，并且已經申請了專利(專利文獻3)。該專利申請中，作為制備方法，報告了依次構建骨架的直線性的液相合成法。
但是，依然期待開發具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的更適合于工業化的制備方法或迄今為止未知的合成路徑。更具體地說，期待具有合成路徑收斂、從原料至最終化合物的步驟數少、生產時間縮短、以更高收率得到最終化合物、所得到的最終化合物的純度更高等性質的更適合于工業化的制備方法。
專利文獻1WO02/16329 專利文獻2WO2004/74264 專利文獻3WO2005/61466

發明內容
本發明的目的在于，提供適合于工業化制備具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物、并且可以實現高收率的制備方法。
此外，本發明的目的在于，提供迄今為止未知的適合于工業化制備具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的方法。
此外，本發明的目的還在于，提供具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備中間體。
通過本發明，提供式(1)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法(第一制備方法)，該方法包括以下的步驟(a)、(b)和(c)。

[式中， R1表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種， R2表示可以具有取代基的烷基， R3表示被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基中的任意一種， R4表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種。] (a)通過使式(2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與羰基導入試劑以及式(3)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應，得到式(4)所示的羧基不對稱脲衍生物或其化學上可以容許的鹽的步驟，
[式中，R1和R2的定義與上述相同。]
[式中，R3’表示被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基中的任意一種。]
[式中，R1、R2和R3’的定義與上述相同。] (b)將該羧基不對稱脲衍生物(4)在羧基活化劑的存在下轉化成式(5)所示的喹唑啉二酮化合物或其可藥用鹽的步驟，
[式中，R1～R3’的定義與上述相同。] (c)根據需要，用N-烷基化劑對式(5)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R3’被保護時進行脫保護的步驟。
此外，通過本發明，提供式(1-2)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法(第二制備方法)，該方法包括以下的步驟(a)、(b)、(c)和(d)。

[式中， R21表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種， R22表示可以具有取代基的烷基， R23表示二烷基氨基、單烷基氨基、氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種， R24表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種。] (a)使式(2-2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽經過異氰酸酯轉換反應，將羧基轉換為異氰酸基(isocyanyl group)的步驟，
[式中，R21和R22的定義與上述相同。] (b)使所得的式(3-2)所示的化合物或其化學上可以容許的鹽與式(4-2)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應的步驟，
[式中，R21和R22的定義如上所述。]
[式中，R23’表示二烷基氨基、單烷基氨基、可以具有保護基團的氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種，R25表示氫原子或可以具有取代基的烷基。] (c)將所得到的不對稱脲衍生物(5-2)或其化學上可以容許的鹽，
[式中，R21、R22、R23’和R25的定義與上述相同。] 當R25為氫原子時在羧基活化劑的存在下、 當R25為烷基時在堿的存在下， 轉化成式(6-2)所示的喹唑啉二酮化合物或其化學上可以容許的鹽的步驟，
[式中，R21～R23’的定義與上述相同。] (d)根據需要，用N-烷基化劑對式(6-2)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R23’被保護時進行脫保護的步驟。
此外，通過本發明，提供式(1-3)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法(第三制備方法)，該方法包括以下的步驟(a)、(b)和(c)。

[式中， R31表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種， R32表示可以具有取代基的烷基， R33表示二烷基氨基、單烷基氨基、氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種， R34表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種。] (a)使式(2-3)所示的靛紅酸酐衍生物或其化學上可以容許的鹽與式(3-3)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應的步驟，
[式中，R33’表示二烷基氨基、單烷基氨基、可以具有保護基團的氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種。]
[式中，R31和R32的定義與上述相同。] (b)使所得到的酰胺衍生物(4-3)與羰基導入試劑反應，轉化成式(5-3)所示的喹唑啉二酮化合物的步驟，
[式中，R31、R32和R33’的定義與上述相同。]
[式中，R31～R33’的定義與上述相同。] (c)根據需要，用N-烷基化劑對式(5-3)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R33’被保護時進行脫保護的步驟。
此外，通過本發明，提供式(1-4)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法(第四制備方法)，該方法包括以下的步驟(a)、(b)和(c)。

[式中， R41表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種， R42表示可以具有取代基的烷基， R43表示二烷基氨基、單烷基氨基、氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種， R44表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種。] (a)使式(2-4)所示的苯并噁嗪衍生物與式(3-4)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應的步驟，
[式中，R43’表示二烷基氨基、單烷基氨基、可以具有保護基團的氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種，R45表示烷基或可以具有取代基的苯基。]
[式中，R41和R42的定義與上述相同。] (b)在堿的存在下使所得到的酰胺氨基甲酸酯衍生物(4-4)或其化學上可以容許的鹽轉化成式(5-4)所示的喹唑啉二酮化合物的步驟，
[式中，R41、R42、R43’和R45的定義與上述相同。]
[式中，R41～R43’的定義與上述相同。] (c)根據需要，用N-烷基化劑對式(5-4)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R43’被保護時進行脫保護的步驟。

具體實施例方式 本發明中，式(1)、式(1-2)、式(1-3)和式(1-4)中，喹唑啉二酮環基在苯丙氨酸的苯環上的鄰位、間位、對位中優選處于對位。
本發明中，作為R1、R21、R31和R41的可以具有取代基的苯基和可以具有取代基的吡啶基中的取代基，可以舉出鹵原子、烷基、鹵代烷基(包括全氟烷基)、烷氧基、鹵代烷氧基(包括全氟烷氧基)、烷硫基、硝基、烷基磺酰基氨基、四唑基等。其中，作為成分的烷基優選碳原子數為1～6、特別優選碳原子數為1～3。而且，上述取代基的數目為1～5、優選為1～3，它們可以相同或不同。作為R1、R21、R31和R41，優選為被鹵原子和/或烷基取代的苯基，例如優選為2，6-二氯苯基、2，6-二甲基苯基、2-氯-6-甲基苯基、2-氯苯基、2-甲基苯基、2，4，6-三氯苯基、2，4，6-三甲基苯基、2，6-二氯-4-甲基苯基等。
本發明中，R2、R22、R32和R42中的可以具有取代基的烷基中的烷基優選碳原子數為1～6，特別優選為1～3。
作為R2、R22、R32和R42具有取代基時的取代基，可以舉出取代或未取代的低級烷基羰基氧基、取代或未取代的低級烷氧基羰基氧基、取代或未取代的氨基、低級烷氧基、鹵原子、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的氨基甲酰基。
其中，取代基為低級烷基羰基氧基、低級烷氧基羰基氧基、低級烷氧基時的烷基和烷氧基優選碳原子數為1～6，包括鏈狀、環狀、直鏈狀、支鏈狀的基團。
此外，取代基為芳基時，表示碳原子數為6～10的單環～二環芳烴基。可以舉出例如，苯基、萘基等。此外，取代基為雜芳基時，表示含有1～4個選自氧原子、硫原子和氮原子中的雜原子作為環原子的5～8元的單環～三環芳族雜環基。可以舉出例如，吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、異噁唑基、噁唑基、異噻唑基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、四唑基、吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基。其中，作為芳基、雜芳基的取代基，可以舉出鹵原子、烷氧基、烷基、羥基、鹵代烷基、鹵代烷氧基。其中，優選為吡啶基、呋喃基、噻吩基。
作為R2、R22、R32和R42的取代基為低級烷基羰基氧基或低級烷氧基羰基氧基時的取代基，可以舉出低級烷基、低級烯基、低級烷氧基、羥基、氨基、被低級烷基取代的氨基(包括單取代或二取代)。其中，優選為甲基、乙基。
此外，作為R2、R22、R32和R42的取代基為氨基時的取代基，可以舉出低級烷基、低級烷氧基羰基、低級烷基磺酰基。其中，優選為甲基、乙基。此外，其中兩個取代基可以鍵合形成環，形成環時中間可以插入氧、氮、硫原子。例如，1-哌啶基、4-嗎啉基等環狀氨基，2-氧代-1-吡咯烷基等環狀酰氨基，2-氧代咪唑啉-1-基、2-氧代咪唑啉-1-基等環狀脲基也包括在取代的氨基中。
此外，作為R2、R22、R32和R42的取代基為芳基或雜芳基時的取代基，可以舉出鹵原子、烷氧基、烷基、羥基、鹵代烷基、鹵代烷氧基。
此外，作為R2、R22、R32和R42的取代基為氨基甲酰基時的取代基，可以舉出低級烷基、苯基，包括單取代物、二取代物。
作為R2、R22、R32和R42具有取代基時的取代基，優選為低級烷基羰基氧基、氯原子、吡啶基、呋喃基、噻吩基、二低級烷基氨基甲酰基。
本發明中，R3優選為單烷基氨基烷基，R23、R33和R43優選為二烷基氨基、氫原子、鹵原子、單烷基氨基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、被炔基取代的烷基、被氨基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基，R23、R33和R43特別優選為二烷基氨基、單烷基氨基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、被氨基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基。
此外，本發明中，R3’、R23’、R33’和R43’分別是與R3、R23、R33和R43相同的基團或在制備步驟中可以轉化成相同基團的基團。作為R3’、R23’、R33’和R43’中的保護基團，可以舉出作為氨基的保護基團通常使用的保護基團(Protective Groups in Organic Synthesis(第3版)、T.W.Green、P.G.M.Wootz著、JHON WILEY&SONS，INC.、1999年)，優選為甲酰基、烷基羰基、烷氧基羰基等，其中烷基和烷氧基優選碳原子數為1～3。優選為耐堿性條件但在酸性條件下易脫保護的基團，更具體地說優選為甲酰基和叔丁氧基羰基。
二烷基氨基表示被碳原子數為1～6的烷基二取代的氨基(其中，包括環狀的氨基)，優選為被碳原子數為1～3的烷基二取代的氨基或碳原子數為2～6的環狀氨基，可以舉出例如二甲基氨基、二乙基氨基、甲基乙基氨基、吡咯烷基、哌啶基、二丙基氨基、甲基丙基氨基、乙基丙基氨基等。
單烷基氨基表示被碳原子數為1～6的烷基單取代的氨基(其中，包括帶有環狀烷基的烷基氨基)，優選為被碳原子數為1～4的烷基單取代的氨基，可以舉出例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、異丙基氨基、丁基氨基、環丙基甲基氨基等。
被二烷基氨基取代的烷基是被與上述二烷基氨基相同的基團取代的碳原子數為1～6的烷基，優選為被與上述二烷基氨基相同的基團取代的碳原子數為1～3的烷基，可以舉出例如，被二甲基氨基、二乙基氨基、甲基乙基氨基、吡咯烷基、哌啶基、二丙基氨基、甲基丙基氨基、乙基丙基氨基中的任意一種取代的甲基、乙基、丙基中的任意一種等。特別優選為二甲基氨基甲基、二乙基氨基甲基、甲基乙基氨基甲基等。
被單烷基氨基取代的烷基是被與上述單烷基氨基相同的基團取代的碳原子數為1～6的烷基，優選為被與上述單烷基氨基相同的基團取代的碳原子數為1～3的烷基，可以舉出例如，被甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、異丙基氨基、丁基氨基、環丙基甲基氨基中的任意一種取代的甲基、乙基、丙基中的任意一種等。特別優選為甲基氨基甲基、乙基氨基甲基、甲基氨基乙基、乙基氨基乙基等。
被氨基取代的烷基是被氨基取代的碳原子數為1～6的烷基，優選為被氨基取代的碳原子數為1～3的烷基，可以舉出例如，氨基甲基、氨基乙基、氨基丙基等。
被烯基取代的烷基是被碳原子數為2～6的烯基取代的碳原子數為1～6的烷基，優選被碳原子數為2～4的烯基取代的碳原子數為1～3的烷基，可以舉出例如，-CH2CH＝CH2、-CH2CH2CH＝CH2等。
被炔基取代的烷基是被碳原子數為2～6的炔基取代的碳原子數為1～6的烷基，優選為被碳原子數為2～4的炔基取代的碳原子數為1～3的烷基，可以舉出例如-CH2C≡CH、-CH2CH2C≡CH等。
烷氧基羰基表示碳原子數為2～7的烷氧基羰基，優選表示碳原子數為2～4的烷氧基羰基，可以舉出例如，甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基等。
烷硫基表示被碳原子數為1～6的烷基取代的硫基，優選表示被碳原子數為1～3的烷基取代的硫基，可以舉出例如，甲硫基、乙硫基、丙硫基等。
芳硫基表示苯硫基、萘硫基。
更具體地說，R3特別優選為甲基氨基甲基、乙基氨基甲基，R23、R33和R43特別優選為二甲基氨基、二乙基氨基、甲基乙基氨基、吡咯烷基、哌啶基、甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、環丙基甲基氨基、二甲基氨基甲基、二乙基氨基甲基、二甲基氨基乙基、二乙基氨基乙基、甲基氨基甲基、乙基氨基甲基、丙基氨基甲基、甲基氨基乙基、乙基氨基乙基、丙基氨基乙基、HC≡CCH2基、羧基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、甲硫基、乙硫基。
此外，本發明中，R3、R23、R33、R43、R3’、R23’、R33’和R43’優選處于對應于鄰氨基苯甲酸的氨基的氮原子的對位。
本發明中，R4、R24、R34和R44優選為氫原子或烷基。其中，烷基優選為碳原子數為1～3的烷基。作為芐基的取代基，可以舉出烷基、烷氧基、鹵原子等，但是優選為未取代的芐基。
R25特別優選為烷基。其中，烷基優選為碳原子數為1～3的烷基。
作為R45，可以舉出烷基、苯基、可以具有取代基的苯基，特別優選為碳原子數為1～3的烷基。其中，作為苯基上的取代基，可以舉出烷基、烷氧基、鹵原子等，但是優選為未取代的苯基。
本發明中，在第一制備方法中，作為具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備中間體，提供式(3-1)所示的化合物。

[式中，R3”表示被二烷基氨基、單烷基氨基取代的烷基，N-烷基-N-甲酰基-氨基烷基，N-烷基-N-烷基羰基-氨基烷基，N-烷基-N-烷氧基羰基-氨基烷基中的任意一種。] 此外，在第一制備方法中，作為具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備中間體，提供選自由下式組成的組中的化合物或其化學上可以容許的鹽。
[化學式1]
此外，本發明中，在第二～第四制備方法中，作為具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物的制備中間體，提供選自包含下式的組中的化合物或其化學上可以容許的鹽。
[化學式2]
[化學式3]
接著，對本發明的第一制備方法進行具體的說明。
本發明的第一制備方法是基于下述發現完成的對于式(3)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽，式中的R3’表示被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基中的任意一種的化合物，若使用未形成酯鍵的羧基(COOH基)的化合物作為反應原料，則與使用羧基的末端形成酯鍵的化合物作為反應原料的情況相比反應收率顯著提高。
第一制備方法中，首先，在(a)步驟中，使式(2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與羰基導入試劑以及式(3)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應。其中，式(2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽，例如可以通過專利文獻2或3中記載的方法得到，式(3)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽也可以通過專利文獻2中記載的將酯化合物水解等來得到。
其中，“羰基導入試劑”指的是喹唑啉二酮環的原子團中，僅羰基來源于本試劑。可以舉出例如，1，1’-羰基二咪唑(合成例公開在Organicsyntheses collective volume V，P.201-204，Wiley，New York，1973)、氯甲酸酯等。都是公知的，并有市售，可以得到。
此外，也可以使用將1，1’-羰基二咪唑的咪唑基取代為其它的雜芳基離去基團而得到的化合物，例如1，1’-羰基二(1，2，4-三唑)(本試劑其中，咪唑基被三唑基取代，有市售，可以得到)。作為取代基，不僅限于咪唑基或三唑基，還可以使用其它的雜芳基離去基團。
進一步地，還可以使用N，N’-二琥珀酰亞氨基碳酸酯(DSC)(本試劑是將N-羥基琥珀酰亞氨基作為離去基團的、有市售的可以得到的羰基導入試劑)。
作為氯甲酸酯，可以舉出氯甲酸苯酯、氯甲酸硝基苯酯、氯甲酸甲氧基苯酯、氯甲酸甲酯、氯甲酸乙酯、氯甲酸異丁酯、氯甲酸辛酯、氯甲酸芐基酯等碳原子數為2～10的試劑，但是并非限于這些。
此外，作為羰基導入試劑，還可以使用光氣、光氣類似物(三光氣等)。
羰基導入試劑特別優選為1，1’-羰基二咪唑。使用1，1’-羰基二咪唑時，特別是在副產物的生成量少、以高收率得到目的不對稱脲衍生物方面優異。
而且，相對于式(2)的化合物1摩爾，優選羰基導入試劑的用量為0.8～1.5摩爾當量的范圍。
上述反應濃度是可以適用于工業化步驟的濃度，例如反應溶劑使用DMF時在0.1～10M下進行，從反應液、結晶液在攪拌時的流動性方面考慮，優選在1.3M附近進行。
作為用式(2)的化合物與羰基導入試劑(例如，1，1’-羰基二咪唑)進行咪唑羰基化的反應溫度，優選在-40℃附近～該反應溶劑的沸點以下的范圍內，在工業上更優選在0℃附近～20℃以下的溫度下進行反應。此外，使用氯甲酸酯進行烷氧基羰基化時，也優選在-40℃附近～該反應溶劑的沸點以下的范圍內，工業上更優選在0℃附近～40℃以下的溫度下進行反應。此時，試劑量優選為1.0～1.1當量。
此外，相對于式(2)的化合物1摩爾，式(3)的化合物的用量可以為0.8～1.2摩爾當量的范圍。
此外，使用氯甲酸酯作為羰基導入試劑時，優選共存有機堿。有機堿優選為三乙基胺、二異丙基乙基胺、吡啶。
作為本反應的溶劑，可以舉出對式(2)所示的化合物(例如，Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-氨基-L-苯丙氨酸甲酯)具有適當溶解性的有機溶劑，可以使用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲氧基乙烷(DME)、二甲基亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)、乙腈、四氫呋喃(THF)或它們的混合溶劑等，特別優選為N，N-二甲基甲酰胺。反應時間優選為1～5小時左右。
其次，咪唑羰基化或烷氧基羰基化的式(2)的化合物與式(3)的被取代的2-氨基苯甲酸的縮合反應的溫度優選為0℃～所使用的溶劑的沸點以下的范圍內。特別是在反應溫度為50℃附近進行時，以2～3小時左右完成脲鍵形成反應，可以以高收率得到式(4)所示的羧基不對稱脲衍生物，所以更優選。
但是，反應溫度和反應時間并非限于此，在兼顧反應時間的基礎上來決定反應時間，從工業方面考慮優選通過HPLC等分析方法管理反應液。
上述反應中，對原料和試劑的投入順序不特別限定，但是使式(2)的化合物先與羰基導入試劑反應進行咪唑羰基化或烷氧基羰基化，然后與式(3)的化合物反應的方法，與先使式(3)的化合物進行咪唑羰基化的方法相比，從收率高、副反應方面考慮優選。但是，本發明的制備方法中，可以先使式(3)的化合物進行咪唑羰基化，或可以使式(2)的化合物、羰基導入試劑和式(3)的化合物同時反應。
接著，在(b)步驟中，將得到的羧基不對稱脲衍生物(4)在適當的反應溶劑中，在羧基活化劑的存在下形成喹唑啉二酮環，轉化成式(5)所示的喹唑啉二酮化合物。
其中，“羧基活化劑”指的是將來源于鄰氨基苯甲酸的羧基活化到可以與分子內脲氮反應形成喹唑啉二酮環的程度以上的試劑。具體地說，作為“羰基導入試劑”的具體例子，可以舉出上述試劑，優選為1，1’-羰基二咪唑。
另外，可以在暫且將式(4)所示的羧基不對稱脲衍生物通過常規的分離技術、例如結晶等從反應液分離后，進行(b)步驟，但是從工業方面考慮，優選連續進行(不分離中間體(4)而進行(b)步驟)。
可以在上述喹唑啉二酮環形成反應后加入醇溶劑，使過量存在的1，1’-羰基二咪唑(CDI)或氯甲酸酯等分解。作為添加的醇溶劑，甲醇或異丙醇等是優異的。此外，產物在分子內具有酯時，加入醇有可能引起酯交換反應，因此優選根據酯的種類選擇對應的醇溶劑。
接著，在(c)步驟中，根據需要用N-烷基化劑對式(5)所示的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代步驟，以及R3’被保護時進行脫保護步驟。
即，通過在堿存在下，使N-烷基化劑發生作用，可以轉化成式(1)中R4為烷基、可以具有取代基的芐基的喹唑啉二酮化合物。
本說明書中，“N-烷基化劑”指的是可以在氮上導入烷基的試劑，可以舉出例如，鹵代烷烴、磺酸烷基酯、可以具有取代基的芐基鹵等。
其中，鹵代烷烴、磺酸烷基酯優選碳原子數為1～10，進一步優選碳原子數為1～6，特別優選碳原子數為1～3。作為鹵代烷烴，可以舉出例如，碘甲烷、碘乙烷等。作為磺酸烷基酯，可以舉出例如，甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、乙磺酸甲酯、乙磺酸乙酯、對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯等。作為芐基鹵，可以舉出芐基氯、芐基溴等，作為其取代基，可以舉出烷基、烷氧基、鹵原子等。更優選為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷或氯甲烷中的任意一種。
例如，在制備式(1)中R4為甲基的化合物時，對甲苯磺酸甲酯從工業化方面考慮是合適的。即，對甲苯磺酸甲酯與揮發性的碘甲烷相比沸點高，室溫下的操作容易。此外，對甲苯磺酸甲酯與甲磺酸甲酯相比，反應液的流動性好，適合于伴隨有液體傳輸操作的工業化步驟。
本反應的溶劑，只要是可以溶解式(5)所示的化合物且在反應中穩定的有機溶劑即可。可以舉出例如，N，N-二甲基甲酰胺、或N，N-二甲基甲酰胺與醇類的混合溶劑系統等，優選為N，N-二甲基甲酰胺。
相對于式(4)或式(5)的化合物，N-烷基化劑的用量為1～2摩爾當量、優選1.0～1.2摩爾當量附近是適當的，但是也可以根據反應的進展增減試劑量。
堿包括無機堿、有機堿。其中，作為無機堿，可以舉出與堿金屬的鹽(例如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫、甲醇鈉、乙醇鈉等)，與堿土金屬的鹽(例如碳酸鈣、碳酸鎂等)。此外，作為有機堿，可以舉出三乙基胺、乙醇胺、嗎啉、哌啶、二環己基胺、1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、N，N-二異丙基-N-乙基胺(DIPEA)等。優選為無機堿，其中優選為碳酸鉀。
相對于式(5)所示的化合物，堿的量優選為1～2摩爾當量，更優選為1.5摩爾當量左右，但是不限于此，可以根據反應的進展進行增減。
此外，R3’被保護時，脫保護可以通過酸性條件或催化還原等通常的方法容易地進行。
保護基團為甲酰基、叔丁氧基羰基、酰基(乙酰基、苯甲酰基)等時，例如可以在酸性條件下進行脫保護。甲酰基和叔丁氧基羰基可以在酸性條件下快速地脫保護，作為保護基團是優選的。作為酸，可以利用鹽酸、氯化氫、硫酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、氫溴酸、溴化氫等。可以根據目標最終化合物的鹽形態選擇適當的酸。例如，目標最終化合物的鹽形態為鹽酸鹽時，更優選使用鹽酸或氯化氫。作為本反應的溶劑，可以使用二甲基甲酰胺、乙酸異丙酯、乙酸甲酯、異丙醇、甲醇，但是從原試劑的酯部分有可能產生酯交換反應的方面考慮，更優選使用對應的醇或乙酸烷基酯溶劑。
此外，在芐氧基、芐基、芐氧基羰基的情況下，例如可以通過催化還原進行脫保護。
所得到的式(1)所示的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽可以通過常規的分離技術方法進行分離。
在第一制備方法中，優選式(1)中R3為甲基氨基甲基、乙基氨基甲基、二甲基氨基甲基、二乙基氨基甲基中的任意一種，且式(3)～式(5)中，R3’為被具有保護基團的甲基氨基取代的甲基、被具有保護基團的乙基氨基取代的甲基、二甲基氨基甲基、二乙基氨基甲基中的任意一種。
此外優選式(1)～式(5)中， R1為2，6-二氯苯基、2-氯-6-甲基苯基、2-氯-6-氟苯基、2，6-二氟苯基、2-氟-6-甲基苯基中的任意一種， R4表示甲基或乙基， 苯丙氨酸的苯環上的取代基的取代位置為對位。
進一步優選使式(2)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基的式(2)的化合物與羰基導入試劑1，1’-羰基二咪唑以及R3’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基的式(3)的化合物反應，得到式(4)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基、R3’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的2-(3-{4-[2(S)-2-(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-異丙氧基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸，使其與羧基活化劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(5)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基、R3’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，用氯化氫進行甲酰基的脫保護，得到式(1)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基、R3為N-甲基氨基甲基、R4為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
而且，上述使用對甲苯磺酸甲酯進行的N-烷基化優選在堿性條件下進行。
接著，對本發明的第二制備方法進行具體的說明。
本發明的第二制備方法是基于下述發現完成的制備式(1-2)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽時，不使用氨基與苯基鍵合的酰基苯丙氨酸衍生物，而使用式(2-2)所示的羧基與苯基鍵合的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽作為原料，經過異氰酸酯轉換反應，將該羧基轉換為異氰酸基，使其與式(4-2)所示的具有烷基酯基的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應，由此不使用羰基導入試劑就簡便地得到不對稱脲衍生物。
第二制備方法中，首先在(a)步驟中，使用式(2-2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽，經過異氰酸酯轉換反應，將羧基轉換為異氰酸基，得到式(3-2)的化合物或其化學上可以容許的鹽，在(b)步驟中，使所得到的式(3-2)的化合物或其化學上可以容許的鹽與式(4-2)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應，得到不對稱脲衍生物(5-2)或其化學上可以容許的鹽，在(c)步驟中，將所得到的不對稱脲衍生物(5-2)或其化學上可以容許的鹽，當R25為氫原子時在羧基活化劑的存在下，當R25為烷基時在堿的存在下，轉化成式(6-2)所示的喹唑啉二酮化合物或其化學上可以容許的鹽，在(d)步驟中，根據需要，用N-烷基化劑對式(6-2)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及在R23’被保護時進行脫保護。
上述用N-烷基化劑進行的N-烷基取代優選在堿性條件下進行。
其中，式(2-2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽可以如下合成使鹵代苯丙氨酸(優選為4-碘-L-苯丙氨酸)在堿性條件下，與例如2，6-二氯苯甲酰氯反應，合成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-鹵代苯丙氨酸，然后通過常規方法進行烷基酯化，通過常規方法將鹵代苯丙氨酸中的鹵原子轉換為羧基，由此可以容易地合成式(2-2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽。然后，使該化合物與異氰酸酯轉換劑、例如疊氮化合物(優選為疊氮化磷酸二苯酯(DPPA))反應，將式(2-2)中的羧基轉換為異氰酸基，可以得到式(3-2)的化合物或其化學上可以容許的鹽。此時，優選相對于式(2-2)所示的酰胺苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽1摩爾，使用1～2摩爾異氰酸酯轉換劑，在1，2-二甲氧基乙烷等有機溶劑中、在三乙胺等胺共存下，于70℃～95℃下，進行1～5小時左右的異氰酸酯轉換反應，將式(2-2)的化合物中的羧基轉換為異氰酸基。此外，還可以采用將式(2-2)的化合物中的羧基轉化成酰氯、然后與疊氮化鈉反應，進行異氰酸酯轉換反應的方法來替代該方法。
另一方面，作為式(4-2)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽，可以使用專利文獻2中記載的酯化合物。
本發明中，接著使式(3-2)的化合物或其化學上可以容許的鹽與式(4-2)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應。其中，相對于式(3-2)的化合物1摩爾，式(4-2)的化合物的用量可以為0.8～1.2摩爾當量的范圍。
反應優選在對式(3-2)的化合物具有適當溶解性的有機溶劑，例如，N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲氧基乙烷(DME)、二甲基亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)、乙腈、四氫呋喃(THF)或它們的混合溶劑中進行。作為有機溶劑特別優選為二甲氧基乙烷。反應優選在三乙基胺、二異丙基乙基胺或吡啶等有機堿，或疊氮化合物(優選為疊氮化磷酸二苯酯(DPPA))的存在下進行。優選反應時間為1～5小時左右，反應溫度為70℃～95℃左右。
本發明中，可以在暫且將式(3-2)的化合物通過常規分離技術、例如結晶等從反應液分離后，進行(b)步驟，但是從工業方面考慮，優選連續進行(不分離中間體(3-2)而進行(b)步驟)。
接著，在(c)步驟中，使所得到的不對稱脲衍生物(5-2)或其化學上可以容許的鹽，當R25為氫原子時在羧基活化劑的存在下，當R25為烷基時在堿的存在下，形成喹唑啉二酮環得到式(6-2)所示的喹唑啉二酮化合物或其化學上可以容許的鹽。其中，作為羧基活化劑和堿，可以使用與第一制備方法的項中所列示的羧基活化劑和堿相同的羧基活化劑和堿。其中，作為羧基活化劑，優選為1，1’-羰基二咪唑、氯甲酸酯、烷基磺酰氯、N，N’-二環己基碳二亞胺(DCC)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺。此外，作為堿，優選為碳酸鉀和甲醇鈉。可以采用在第一制備方法的項中所列示的羧基活化劑和堿的用量、使用條件。
本發明中，可以在暫且將式(5-2)的化合物通過常規分離技術、例如結晶等從反應液分離后，進行(c)步驟，但是從工業方面考慮，優選連續進行(不分離中間體(5-2)而進行(c)步驟)。
可以在上述喹唑啉二酮環形成反應后加入醇溶劑，使過量存在的羧基活化劑分解。作為添加的醇溶劑，甲醇或異丙醇等是優異的。此外，當產物分子內具有酯時，加入醇有可能引起酯交換反應，因此優選根據酯的種類來選擇對應的醇溶劑。
接著，在(d)步驟中，根據需要，用N-烷基化劑對式(6-2)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R23’被保護時進行脫保護步驟。它們可以與第一制備方法中的(c)步驟同樣地進行。其中，作為N-烷基化劑，優選為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷和氯甲烷。
上述用N-烷基化劑進行的N-烷基取代優選在堿性條件下進行。
第二制備方法中，優選式(1-2)中R23為二甲基氨基或甲基氨基甲基中的任意一種，且式(4-2)～式(6-2)中，R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基氨基甲基、N-乙酰基-N-甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種。
此外，第二制備方法中優選使式(3-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基的式(3-2)的化合物與R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R25為氫原子的式(4-2)的化合物反應，得到式(5-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基、R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R25為氫原子所示的2-(3-{4-[2(S)-2-(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-異丙氧基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸，使其與羧基活化劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(6-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基、R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，在鹽酸酸性條件下進行甲酰基的脫保護，得到式(1-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基、R23為N-甲基氨基甲基、R24為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
上述使用對甲苯磺酸甲酯進行的N-烷基化優選在堿性條件下進行。
此外，第二制備方法中，優選使式(3-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基的式(3-2)的化合物與R23’為二甲基氨基、R25為甲基的式(4-2)的化合物反應，得到式(5-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基、R23’為二甲基氨基、R25為甲基所示的2-(3-{4-[2(S)-2-(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-甲基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(二甲基氨基)苯甲酸甲酯，使其與碳酸鉀反應，轉化成式(6-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基、R23’為二甲基氨基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，得到式(1-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基、R23為二甲基氨基、R24為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯。
上述使用對甲苯磺酸甲酯進行的N-烷基化優選在堿性條件下進行。
接著，對本發明的第三制備方法進行具體的說明。
本發明的第三制備方法是基于下述發現完成的當使用式(2-3)所示的靛紅酸酐衍生物或其化學上可以容許的鹽作為反應原料，與式(3-3)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應，得到酰胺衍生物(4-3)，經過該化合物，制備最終目的化合物式(1-3)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽時，用第一制備方法有可能特征性地生成的副產物的量少。
通常已知靛紅酸酐與胺的縮合反應得到對應的酰胺化合物(Science of Synthesis、16卷、658頁)，本發明中，使用式(2-3)所示的特定的靛紅酸酐衍生物或其化學上可以容許的鹽作為反應原料，使其與式(3-3)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應，合成酰胺衍生物(4-3)。
其中，式(2-3)所示的靛紅酸酐衍生物或其化學上可以容許的鹽可以通過使式(6-3)所示的具有無保護的羧基和氨基的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與羰基導入試劑反應來制備。

[式中，R33’的定義與上述相同。] 其中，通過使式(6-3)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽，在有機溶劑中與N，N’-羰基二咪唑(CDI)或其等價物(以R-CO-R’表示，R和R’表示離去基團，可以是R＝R’。R、R’是咪唑、三唑、琥珀酰亞氨基、鹵原子)反應，可以轉化成式(2-3)所示的靛紅酸酐。此時，更優選使用N，N’-羰基二咪唑(CDI)。
其中，作為羰基導入試劑及其使用條件，可以使用第一制備方法的項中記載的羰基導入試劑及其使用條件，但是優選使用1，1’-羰基二咪唑、1，1’-羰基三唑或氯甲酸酯。
式(6-3)中，作為R33’的取代基中的保護基團，優選為耐堿性條件但在酸性條件下被脫保護的保護基團，更優選為甲酰基和叔丁氧基羰基。此外，作為二烷基氨基，更優選為二甲基氨基。
作為有機溶劑，可以舉出N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲氧基乙烷(DME)、二甲基亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)、乙腈、四氫呋喃(THF)，選擇與N，N’-羰基二咪唑(CDI)反應性低的有機溶劑，其中更優選為DMF。
作為式(2-3)的靛紅酸酐形成時的反應溫度，優選在0～40℃、特別優選在0～20℃下實施反應。
可以將式(2-3)的靛紅酸酐從反應液中分離，此時，可以根據常規分離技術，例如由有機溶劑萃取液通過濃縮干燥進行分離。也可以不分離靛紅酸酐而直接用于縮合反應中，例如，向含有式(2-3)的靛紅酸酐的反應液中加入式(3-3)所示的酰基苯丙氨酸衍生物，對其進行加熱，由此得到式(4-3)所示的酰胺縮合物。
從工業方面考慮，為了削減步驟數，優選不分離靛紅酸酐而連續進行，但是不限于此。
對于式(4-3)所示的酰胺物，也可以根據常規分離技術從反應液中分離，但是也可以使含有式的反應液直接與羰基導入試劑反應，轉化成式(5-3)所示的喹唑啉二酮化合物。從工業方面考慮優選連續進行，但是不限于此。
在式(2-3)的靛紅酸酐與式(3-3)的酰基苯丙氨酸衍生物的縮合反應中，反應溶劑如上所述，可以舉出N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲氧基乙烷(DME)、二甲基亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)、乙腈、四氫呋喃(THF)，選擇與N，N’-羰基二咪唑(CDI)反應性低的有機溶劑，其中更優選為DMF。反應溫度優選為10℃～100℃、特別優選為50℃～80℃。其中，在兼顧目標產物的生成速度(原料的消失速度)或副產物生成等的基礎上來判斷反應溫度，但是不限于此。反應時間通常為1～12小時左右，通過常規HPLC等方法進行反應的進展管理，判斷縮合產物的產率或原料的消耗率來進行決定，但是不限于此。
其中，羰基導入試劑如第一制備方法的說明中記載所述，優選為1，1’-羰基二咪唑(CDI)、氯甲酸甲酯、氯甲酸乙酯、氯甲酸苯酯，特別優選為1，1’-羰基二咪唑(CDI)。
接著，在步驟(c)中，可以根據需要用N-烷基化劑對式(5-3)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R33’被保護時進行脫保護步驟。這些步驟可以與第一制備方法中的(c)步驟同樣地進行。其中，作為N-烷基化劑，優選為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷和氯甲烷。
在本發明的第三制備方法中，優選式(1-3)中R33為甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種，且式(2-3)、式(4-3)、式(5-3)中R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基氨基甲基、N-乙酰基-N-甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種。
此外，優選使式(3-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基的式(3-3)的化合物與R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基的式(2-3)的化合物反應，得到式(4-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基、R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的4-{2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯，使其與羧基導入試劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(5-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基、R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，用氯化氫進行甲酰基的脫保護，得到式(1-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基、R33為N-甲基氨基甲基、R34為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
上述使用對甲苯磺酸甲酯進行的N-烷基化優選在堿性條件下進行。
此外，優選使式(3-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基的式(3-3)的化合物與R33’為二甲基氨基的式(2-3)的化合物反應，得到式(4-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基、R33’為二甲基氨基所示的4-{2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯，使其與羰基導入試劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(5-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基、R33’為二甲基氨基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，得到式(1-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基、R33為二甲基氨基、R34為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯。
上述使用對甲苯磺酸甲酯進行的N-烷基化優選在堿性條件下進行。
接著，對本發明的第四制備方法進行具體的說明。
本發明的第四制備方法是基于下述發現完成的當使用式(2-4)所示的苯并噁嗪衍生物作為反應原料，使其與式(3-4)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應，將所得到的酰胺氨基甲酸酯衍生物(4-4)或其化學上可以容許的鹽在堿的存在下轉化成式(5-4)所示的喹唑啉二酮化合物，經過該化合物，制備最終目的化合物式(1-4)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽時，用第一制備方法有可能特征性地生成的副產物的量少。
作為起始原料的式(2-4)所示的苯并噁嗪衍生物可以根據文獻(Heterocycle、51卷(7)、1999年、1543-1561頁)記載的方法，通過使式(6-4)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與鹵甲酸烷基酯或可以具有取代基的鹵甲酸苯基酯反應來容易地合成。

[式中，R43’的定義與上述相同。] 作為鹵甲酸烷基酯，優選為氯甲酸酯，具體地說，可以使用氯甲酸甲酯、氯甲酸乙酯、氯甲酸苯基酯、氯甲酸異丙酯、氯甲基芐基酯等，更優選為氯甲酸乙酯。此外，優選為不發生酯交換等副反應的氯甲酸酯。作為可以具有取代基的鹵甲酸苯基酯的苯基上的取代基，可以舉出烷基、烷氧基、鹵原子等，優選為未取代的苯基。作為可以具有取代基的鹵甲酸苯基酯，優選為氯甲酸苯基酯。
作為反應溶劑，優選為吡啶、N-甲基嗎啉、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙腈等，更優選為吡啶溶劑。此外，溶劑使用DMF、乙腈時，可以使用加入了有機堿或吡啶等作為堿的混合溶劑。
通過使式(6-4)的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與鹵甲酸烷基酯反應，所得到的式(2-4)的苯并噁嗪衍生物可以直接作為反應液用于下一步驟中，也可以通過常規分離技術進行分離。在化學工業上優選連續與下一步驟連接。
使式(2-4)的苯并噁嗪衍生物與式(3-4)的酰基苯丙氨酸衍生物縮合的縮合反應中，通過向含有式(2-4)的苯并噁嗪衍生物的反應液中加入式(3-4)的酰基苯丙氨酸衍生物，得到對應的式(4-4)的酰胺氨基甲酸酯衍生物。
作為反應溶劑，可以利用DMF、乙腈、吡啶等。反應溫度優選為0～80℃、更優選為10℃～30℃左右，但是不限于此。用HPLC等確認反應的進展后，可以通過常規分離技術，例如添加不良溶劑來分離作為產物的式(4-4)的酰胺氨基甲酸酯衍生物。
式(4-4)的酰胺氨基甲酸酯衍生物在堿性條件下形成喹唑啉二酮環，可以轉化成式(5-4)的喹唑啉二酮化合物。作為反應溶劑，可以利用DMF、N-甲基吡咯烷酮、乙腈、DMF/醇的混合溶劑等。作為堿，可以舉出三乙基胺或二丙基乙基胺等有機堿或堿金屬類的碳酸鹽，例如，碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈉等。其中，作為堿，優選為碳酸鉀或甲醇鈉。
反應溫度為10℃～80℃、更優選為20℃～40℃左右，在兼顧目標產物的生成速度(原料的消失速度)、副產物生成等的基礎上來判斷反應溫度，但是不限于此。
進一步地，在步驟(c)中，根據需要可以用N-烷基化劑對得到的式(5-4)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R43’被保護時進行脫保護步驟。這些步驟可以與第一制備方法中的(c)步驟同樣地進行。其中，作為N-烷基化劑，優選為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷和氯甲烷。
在本發明的第四制備方法中，優選式(1-4)中R43為甲基氨基甲基、二甲基氨基中的任意一種，且式(2-4)、式(4-4)、式(5-4)中R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基氨基甲基、N-乙酰基-N-甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種。而且，用N-烷基化劑進行的N-烷基取代優選在堿性條件下進行。
此外，優選使式(3-4)的R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基的式(3-4)的化合物與R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R45為乙基的式(2-4)的化合物反應，得到式(4-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基、R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R45為乙基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，使其與碳酸鉀反應，轉化成式(5-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基、R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，用氯化氫進行甲酰基的脫保護，得到R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基、R43為N-甲基氨基甲基、R44為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
上述使用對甲苯磺酸甲酯進行的N-烷基化優選在堿性條件下進行。
此外，優選使式(3-4)的R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基的式(3-4)的化合物與R43’為二甲基氨基、R45為乙基的式(2-4)的化合物反應，得到式(4-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基、R43’為二甲基氨基、R45為乙基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-4-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸甲酯，使其與碳酸鉀反應，轉化成式(4-5)中R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基、R43’為二甲基氨基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，得到式(1-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基、R43為二甲基氨基甲基、R44為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯。
上述使用對甲苯磺酸甲酯進行的N-烷基化優選在堿性條件下進行。
接著，通過實施例對本發明進行具體的說明。
實施例 首先，對實施例中采用的分析方法和使用的原料進行說明。
1.分析條件等 (1)1H和13C NMR以測定溶劑峰為基準，使用Bruker公司生產的AVANCE 400MHz核磁共振裝置或Varian公司生產的GEMINI 300MHz核磁共振裝置。
(2)HPLC分析使用島津制作所生產的LC系列，用色譜分析軟件進行數據處理。HPLC條件如下所述 洗脫液A液-0.1％三氟乙酸水溶液，B液-含0.1％三氟乙酸的乙腈 梯度條件(A液/B液)＝初期(90/10)-25分鐘后(10/90)-30分鐘后(10/90) 流速1.0mL/min 使用色譜柱反相ODS硅膠柱(GL Science公司生產的ODS-2)，色譜柱尺寸內徑φ4.6mm×長150mm 柱溫40℃，樣品注入量10μl (3)離子色譜使用Dionex公司的DIONEX(DX-120)，數據分析使用色譜分析軟件。洗脫液使用1M Na2CO3/1M NaHCO3＝9/1。
(4)熔點的測定使用差示掃描量熱分析(DSC、Seiko-Epolead公司生產的DSC6200)裝置。容器使用SUS密封容器或鋁鍋簡易密閉容器。
(5)質譜(MS)使用Seiko-Epolead公司生產的Thermo QuestTSQ700。
(6)高分辨質譜分析(HRMS)使用日本電子生產的MS700V。
2.合成原料等 本實施例中使用的溶劑和原料只要不特別記載，購入市售品直接使用。4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯根據專利文獻2記載的方法合成。
(實施例1)2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸的合成
步驟1 5-(N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸的合成 (方法1)使用DBH/AIBN進行的5-(N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸的合成和通過添加2-丙醇并結晶進行的分離 將5-甲基-2-硝基苯甲酸50g和1，3-二溴-5，5-二甲基乙內酰脲(DBH)36.66g加入到氯苯100ml中并使其懸浮。在氬氣環境下將懸浮液加熱至40℃，加入偶氮二(2-甲基丙腈)(AIBN)1.263g并加熱至80℃。1小時后，將反應液冷卻至40℃后，再次加入1，3-二溴-5，5-二甲基乙內酰脲18.33g和偶氮二(2-甲基丙腈)1.263g，再加熱至80℃。2小時后，將反應液冷卻至10℃，攪拌一夜，過濾分離析出的不溶性固體，用氯苯40ml洗滌。合并濾液和洗滌液，在注意放熱的同時用80分鐘滴加到預先冷卻至10℃的40％甲胺/甲醇溶液260ml中。然后，使反應液升溫至25℃，并進行攪拌。通過HPLC確認反應進展后，通過減壓蒸餾(水浴溫度50℃)將反應液濃縮至一半量，加入2-丙醇150ml和晶種。在50℃下繼續攪拌，析出目標產物后加入2-丙醇100ml。再次進行減壓蒸餾，濃縮漿料，在50℃下攪拌1小時后，冷卻至9℃，進行4小時熟化。從漿料中濾出晶體，用100ml的2-丙醇洗滌濕晶體。在60℃下減壓干燥濕晶體，以白色結晶性固體形式得到標題化合物42.18g(收率52％)。
1H-NMR(400MHz，D2O)δ7.98(1H，d，J＝8.4Hz)，7.50(1H，dd，J＝8.4，1.9Hz)，7.44(d，1H，J＝1.7Hz)，4.20(s，2H)，2.66(s，3H)、13C-NMR(100MHz，D2O)δ173.89，145.56，137.84，136.83，130.64，129.07，125.37，51.56，32.92、熔點(DSC)未觀察到熔點，化合物分解(分解開始溫度為239.6℃)、MS(ESI+)m/z 210.8(MH+)，421.1(2MH+)、HRMS(FAB)理論值C9H11N2O4 m/z 211.0719(MH+)，實測值m/z 211.0723(MH+) (方法2)通過使用NBS/BPO的溴化進行的5-(N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸的合成和添加氯化氫/乙酸乙酯進行的結晶 使5-甲基-2-硝基苯甲酸6.12g懸浮在苯25ml中，加入N-溴琥珀酰亞胺(NBS)6.72g和25％含水過氧化苯甲酰(BPO)280mg。將反應體系中的空氣用氬氣置換后，加熱至80℃并攪拌3小時。然后，將反應液冷卻至10℃，將反應液滴加到40％甲胺甲醇溶液32ml中，在室溫下攪拌一夜。將反應液減壓蒸餾至大約一半量，加入氯化氫/乙酸乙酯(3M)23.5ml。過濾分離析出的固體，用乙酸乙酯50ml洗滌。經過減壓干燥以結晶性固體形式得到標題化合物(與甲胺鹽酸鹽的混合物)8.08g。物性值與上述相同化合物的合成實施例記載的數值大體一致。
步驟2 5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸的合成 向100ml的茄形燒瓶中加入甲酸4.0ml和乙酸酐2.7ml，在室溫下進行攪拌。然后分兩次加入甲酸鈉0.65g和5-(N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸5.58g(含量71.7wt％)，在室溫下攪拌1小時。通過HPLC確認反應進展后，加入水32ml析出晶體形成漿料，冷卻至9℃，整夜攪拌。將析出的固體濾出并用水洗滌后，經過減壓干燥，以白色結晶性固體形式得到標題化合物3.95g(收率87％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.32和8.19(兩個s，1H)8.02和7.99(兩個d，1H，J＝8.3Hz)，7.74和7.67(兩個d，1H，J＝1.8Hz)，7.65和7.59(兩個dd，1H，J＝8.3，1.9Hz)，4.62和4.58(兩個s，2H)，2.90和2.66(兩個s，3H)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ166.11，166.05，163.39，163.32，147.63，147.33，143.18，143.01，131.37，131.23，128.99，128.85，128.08，128.06，124.50，124.41，51.31，46.26，34.18，29.18、熔點(DSC)174.8℃、MS(ESI+)m/z 239(MH+)，477.1(2MH+)、HRMS(FAB)理論值C10H11N2O5 m/z 239.0688(MH+)，實測值m/z 239.0667(MH+) 步驟3 2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸的合成 在室溫下向100ml的雙頸茄形燒瓶中加入5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸6.98g(含量85.9％)和甲醇48ml并使其懸浮，然后加入6M氫氧化鈉水溶液3.5ml并使其溶解(pH 5.6)。在氬氣環境下加入5％鈀碳(濕產品)1.028g(相對于原料為0.9摩爾％)后，用氫氣置換氣相并加熱至40℃。5小時后通過HPLC確認反應進展(原料消失)后，過濾分離催化劑，用甲醇18ml洗滌過濾器上的催化劑。合并濾液和洗滌液，在40℃下減壓蒸餾至濃度為2L/kg，加入水48ml。在室溫下向其中加入2M鹽酸水溶液11.0ml析出晶體(pH為2～3)。將得到的漿料冷卻至9℃，攪拌一夜后濾出晶體，用水24ml洗滌。在60℃下進行減壓干燥，以白色結晶性固體形式得到標題化合物4.84g(收率92％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.49(bs，2H)，8.25和8.08(兩個s，1H)，7.60和7.59(兩個d，1H，J＝2.1Hz)，7.14和7.10(兩個dd，1H，J＝8.5，2.3Hz)，6.76和6.72(兩個d，1H，J＝8.4Hz)，4.27(s，2H)，2.77和2.58(兩個s，3H)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ169.55，169.52，162.67，162.62，151.24，151.00，134.03，133.65，131.01，130.76，122.60，122.54，117.01，116.88，109.49，109.48，51.75，46.14，33.48，28.60、熔點(DSC)174.2℃、MS(ESI+)m/z 231.3(MH+)，417.2(2MH+)、HRMS(FAB)理論值C10H13N2O3 m/z 209.0926(MH+)，實測值m/z 209.0950(MH+) (實施例2)2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸的合成 (方法1)在堿性條件下，由5-二甲基氨基-2-硝基苯甲酸通過催化還原進行合成
往5-二甲基氨基-2-硝基苯甲酸1.0g中加入甲醇16ml和6M氫氧化鈉水溶液0.79ml，加熱至40℃使其形成均相。然后在氬氣環境下加入5％鈀碳(濕產品)0.21g，導入氫氣進行反應。5小時后通過HPLC確認反應進展后，減壓過濾催化劑，用甲醇10ml進行洗滌。對于該過濾洗滌液，加入6M鹽酸水溶液0.79ml進行中和后(pH為5.5)，減壓蒸餾除去溶劑析出固體。向得到的懸浮液中加入水10ml，在10℃下攪拌1小時。通過減壓過濾分離晶體，用水10ml進行洗滌后，在60℃下減壓干燥12小時，以固體形式得到標題化合物0.56g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.21(bs，3H)，7.10(d，1H，J＝2.8Hz)，6.97(dd，1H，J＝9.1，2.8Hz)，6.70(d，1H，J＝9.1Hz)，2.72(s 6H)13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ168.89，144.55，141.61，123.29，117.90，114.78，110.11，41.95、MS(ESI+)m/z 181.3(MH+)，(ESI-)m/z 179.2(M-H-) (方法2)由2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸甲酯·二鹽酸鹽通過在堿性條件下的水解進行合成
向2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸甲酯·二鹽酸鹽5.0g中加入水15ml和6M氫氧化鈉水溶液15.6ml，在40℃下加熱2小時。通過HPLC確認反應進展后，冷卻至室溫，滴加6M鹽酸水溶液進行中和結晶(pH為4.9)，在10℃下攪拌2小時。通過減壓過濾分離固體，用水30ml進行洗滌，在60℃下減壓干燥14小時，以灰色固體形式得到標題化合物3.14g。物性值與上述相同化合物的合成實施例記載的數值一致。
(實施例3)2-氨基-5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸的合成
步驟1 5-甲基氨基甲基-2-硝基苯甲酸·鹽酸鹽的合成 向苯260ml中加入5-甲基-2-硝基苯甲酸29.52g和N-溴琥珀酰亞胺31.10g以及過氧化苯甲酰1.00g，在70℃下加熱攪拌一夜。通過HPLC確認反應進展后，將反應液冷卻至室溫附近，用蒸發器進行濃縮。向濃縮殘渣中加入水300ml和乙酸乙酯300ml，將產物萃取到有機層中。將有機層用水200ml洗滌3次，加入少量硫酸鎂進行脫水后，用蒸發器進行濃縮。將得到的油狀產物溶解在200ml的乙腈溶液中，將其在冰浴冷卻下滴加到2M甲胺THF溶液400ml中。滴加后，用蒸發器進行濃縮，向殘渣中加入乙酸乙酯300ml，然后加入4M氯化氫乙酸乙酯溶液250ml。過濾分離所得到的晶體，減壓干燥后得到33.57g標題化合物與甲胺鹽酸鹽的混合物(比率1∶3)。將該混合物加入到2-丙醇500ml中，在70℃下加熱攪拌，從室溫緩慢冷卻至10℃，收集析出物。
步驟2 5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸的合成 將上述步驟1中得到的5-甲基氨基甲基-2-硝基苯甲酸·鹽酸鹽2.46g和二叔丁基二碳酸酯2.40g加入到乙腈25ml中，然后加入三乙胺3.5ml，在室溫下攪拌3小時。確認反應的進展后，用蒸發器濃縮，向殘渣中加入乙酸乙酯100ml進行稀釋，然后加入水100ml和2M氫氧化鈉溶液10ml。將目標產物萃取到水層中，加入乙酸乙酯和2M鹽酸使液性為弱酸性，萃取到有機層中。將有機層用飽和食鹽水洗滌后，用硫酸鈉脫水，用蒸發器進行濃縮至干固后，經過減壓干燥，以淡黃色固體形式得到標題化合物2.214g(收率71％)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.76(bs，1H)，7.89(d，1H，J＝8.4Hz)，7.68(s，1H)，7.51(d，1H，J＝7.5Hz)，4.55(s，2H)，2.90(bs，3H)，1.48(s，9H) 步驟3 2-氨基-5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸的合成 將上述步驟2中得到的5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸8.3g和10％Pd/C(濕產品)500mg加入到甲醇80ml中，接著導入氫氣，在室溫下攪拌。1小時30分鐘后進一步加入10％Pd/C 500mg，在氫氣環境下攪拌7小時。通過硅藻土過濾過濾分離催化劑，用甲醇洗滌硅藻土。通過將液濃縮至干固，得到標題化合物。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.62(bs，1H)，7.11(d，1H，J＝6.6Hz)，6.80(d，1H，J＝8.1Hz)，4.18(s，2H)，2.69(s，3H)，1.41(s，9H)、MS(ES+)m/z 281.0(MH+) (實施例4)4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
步驟1 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-硝基-L-苯丙氨酸的合成 向水28ml和丙酮13ml中加入對硝基-L-苯丙氨酸10.04g并使其懸浮，用冰浴冷卻。向該懸浮液中交替滴加6M氫氧化鈉18.4ml和2，6-二氯苯甲酰氯10.05g，注意維持溫度為15℃以下、pH為13以上。滴加后進一步在冰浴冷卻下攪拌2小時，通過HPLC確認反應的進展后，在注意放熱的同時滴加2M鹽酸36ml。將含有析出的固體的懸浮液在10℃下攪拌一夜，通過過濾分離析出物，在60℃下進行減壓干燥，以白色結晶性固體形式得到標題化合物17.32g(收率95％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.13(d，1H，J＝8.3Hz)，8.16(m，2H)，7.59(d，2H，J＝8.4Hz)，7.42(m，3H)，4.79(m，1H)，3.30(m，1H)，3.06(m，1H)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ172.08，163.56，146.50，146.00，136.18，131.33，131.19，130.88，128.19，123.37，93.39，52.98，36.55、熔點(DSC)220.6℃、MS(ESI+，m/z)383.0(MH+)，385.1(MH+) 步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-硝基-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成 (方法1)用甲磺酸進行的酯化反應和分離/干燥 使通過上述方法合成的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-硝基-L-苯丙氨酸35.90g懸浮在2-丙醇359ml中，向其中加入甲磺酸6.0ml。在60℃下攪拌19小時后，冷卻至室溫，過濾分離晶體。將得到的濕晶體在60℃下減壓干燥，以白色結晶性固體形式得到標題化合物38.29g(收率96％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.21(d，1H，J＝8.1Hz)，8.16(d，2H，J＝8.7Hz)，7.60(d，2H，J＝8.7Hz)，7.46-7.38(m，3H)，4.95(m，1H)，4.82(m，1H)，3.27(m，1H)，3.08(m，1H)，1.22(d，3H，J＝6.2Hz)，1.18(d，3H，J＝6.2Hz)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ170.05，163.50，146.54，145.63，136.03，131.31，131.28，130.91，128.22，123.38，68.67，53.13，36.38，21.71，21.65、熔點(DSC)188.2℃、MS(ESI+，m/z)425.1(MH+)，427.0(MH+) (方法2)用甲磺酸進行的酯化反應和通過省略濕晶體的干燥進行的后續步驟連續化 將Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-硝基-L-苯丙氨酸14.92g在室溫下加入到2-丙醇150ml中并使其懸浮。向其中加入甲磺酸2.5ml，加熱至65℃并攪拌16小時。通過HPLC確認反應進展后，將反應液冷卻至室溫，通過過濾分離析出的固體。用2-丙醇75ml洗滌晶體，以白色的濕晶體形式得到標題化合物。對該濕晶體不進行干燥而將其用于后續步驟(硝基還原反應)。
步驟3 4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成 將Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-硝基-L-苯丙氨酸異丙基酯的濕晶體31.3g(含量約50wt％)在氮氣環境、室溫下加入到四氫呋喃80ml中，并進行攪拌。向其中加入2-丙醇80ml和3％Pt-S/C(濕產品、使鉑負載在碳上、并用硫使其中毒)0.86g，接著向反應體系內導入氫氣，在常壓下攪拌。在此狀態下在室溫下攪拌一夜，通過HPLC確認反應進展后，使用硅藻土從反應液過濾分離催化劑。通過減壓蒸餾將濾液從178g濃縮至91g，向其中加入2-丙醇40ml進行濃度調整。在室溫下向該濃度調整液中滴加水150ml，由此析出結晶性固體，將得到的懸浮液在10℃以下保持一夜。過濾分離晶體，用水100ml進行洗滌，將得到的濕晶體在60℃下減壓干燥，由此以白色結晶性固體形式得到標題化合物13.16g(經過2步驟的收率為86％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.10(d，1H，J＝7.7Hz)，7.47-7.38(m，3H)，6.90(d，2H，J＝8.2Hz)，6.46(d，2H，J＝8.3Hz)，4.95-4.80(m，3H)，4.52(m，1H)，2.88(m，1H)，2.78(m，1H)，1.19(d，3H，J＝6.2Hz)，1.12(d，3H，J＝6.2Hz)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ170.63，163.54，147.33，136.33，131.47，131.12，129.77，128.15，123.76，113.90，68.09，54.57，36.39，21.75，21.61、熔點(DSC)115.3℃、MS(ESI+，m/z)395.0(MH+)，397.1(MH+) (實施例5)經由保護基團使用甲酰基的中間體合成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯·鹽酸鹽的合成
步驟1 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
在氮氣流下向N，N-二甲基甲酰胺7.6L中加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)1.74kg，并冷卻至5℃。在注意放熱的同時向該溶液中分3次投入4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯4.00kg。接著，在5℃～10℃下攪拌1小時30分鐘后，加入2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸2.11kg，在60℃下加熱攪拌1小時。通過HPLC確認脲鍵形成反應的進行后，將反應液冷卻至15℃，在注意發泡的同時向其中分3次投入1，1’-羰基二咪唑(CDI)1.99kg，在60℃下攪拌。通過HPLC確認喹唑啉二酮環形成反應的進行后，在50℃下滴加2-丙醇32L，加入2g晶種。將含有產物的懸浮液冷卻至25℃，進一步追加滴加2-丙醇40.01L。
在10℃～15℃下熟化一夜后，通過離心分離機過濾分離生成的結晶性固體，用2-丙醇8L洗滌濾餅。在70℃下進行減壓干燥，以白色結晶性固體形式得到標題化合物5.45kg(收率88％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.53(bs，1H)，9.24(d，1H，J＝7.9Hz)，8.33和8.15(兩個s，1H)，7.86和7.81(兩個d，1H，J＝1.8Hz)，7.61和7.56(兩個dd，1H，J＝8.3，1.9Hz)，7.48-7.36(m，5H)，7.26-7.18(m，3H)，4.95(七重峰，1H，J＝6.2Hz)，4.76(ddd，1H，J＝9.8，8.2，5.4Hz)，4.50和4.48(兩個s，2H)，3.18(dd，1H，J＝5.2，14.0Hz)，3.01(dd，1H，J＝14.0，9.9Hz)，2.83和2.62(兩個s，3H)，1.23(d，3H，J＝6.2Hz)，1.19(d，3H，J＝6.2Hz)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ170.51，163.67，162.99，162.92，162.21，150.29，139.52，139.25，137.12，136.25，135.14，134.95，134.27，131.61，131.32，131.23，131.14，129.75，128.93，128.13，126.98，126.96，115.92，115.82，114.53，114.48，68.51，53.77，51.52，46.12，36.44，33.71，28.80，21.76，21.68、熔點(DSC)185.8℃、MS(ESI+)m/z 611(MH+)和633.1(M+Na)，(ESI-)m/z 609.1(M-H-)、MS(FAB)m/z 611.0(MH+)、HRMS(FAB)理論值C30H29Cl2N4O6 m/z 611.1464(MH+)，實測值m/z 611.1461(MH+) 在該步驟中未分離的不對稱脲衍生物可以通過其它實施例所示的方法進行分離。
步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
向N，N-二甲基甲酰胺(DMF)21.26L中加入Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯5.445kg，在23℃下攪拌，在氮氣流下使其溶解。然后，加入碳酸鉀2.46kg和對甲苯磺酸甲酯2.491kg，在55℃～65℃加熱攪拌。通過HPLC確認N-甲基化反應的進展后，加入乙酸2.14kg，接著在50℃下加熱攪拌1小時。向反應液中滴加水10.9L，加入晶種6g，在50℃下攪拌2小時。向得到的漿料中進一步加入水10.9L，冷卻至25℃并攪拌一夜。通過離心分離機過濾分離析出物，用水21.8kg洗滌濾餅。將得到的濕晶體在60℃下減壓干燥，以白色結晶性固體形式得到標題化合物5.235kg(收率94％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.25(d，1H，J＝8.0Hz)，8.36和8.16(兩個s，1H)，7.97和7.92(兩個d，1H，J＝2.2Hz)，7.73和7.67(兩個dd，1H，J＝8.6，2.2Hz)，7.53和7.50(兩個d，1H，J＝8.7Hz)，7.47-7.37(m，5H)，7.20(dd，2H，J＝8.4，2.4Hz)，4.95(七重峰，1H，J＝6.2Hz)，4.77(ddd，1H，J＝9.9，8.1，5.2Hz)，4.55和4.53(兩個s，2H)，3.53和3.52(兩個s，3H)，3.19(dd，1H，J＝14.1，5.2Hz)，3.02(dd，1H，J＝14.2，10.0Hz)，2.84和2.63(兩個s，3H)，1.23(d，3H，J＝6.2Hz)，1.19(d，3H，J＝6.2Hz)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)170.54，163.71，163.02，162.94，161.38，150.57，140.47，140.20，137.20，136.27，135.30，135.13，134.82，131.64，131.61，131.54，131.12，129.84，128.75，128.10，127.34，127.30，115.65，115.59，115.40，115.28，68.54，53.75，51.31，45.97，36.47，33.77，30.93，30.90，28.84，21.75，21.68、熔點(DSC)118.1℃、MS(ESI)m/z 625.1(MH+)、MS(FAB)m/z 625.1(MH+)、HRMS(FAB)理論值C31H31Cl2N4O6 m/z 625.1635(MH+)，實測值m/z 625.1621(MH+) 步驟3 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯·鹽酸鹽的合成
向2-丙醇61.67L中加入Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯5.226kg，并使其懸浮，將其冷卻至10℃，在氮氣流下攪拌。在注意放熱的同時向該懸浮液中用1小時滴加乙酰氯10.00kg，接著加入乙酸異丙酯37.67L，在70℃下加熱攪拌24小時。通過HPLC確認反應的進展后，將漿料冷卻至25℃，攪拌19小時。通過離心分離機過濾分離析出物，用2-丙醇20.90L洗滌濾餅。在75℃下減壓干燥濕晶體，以白色結晶性固體形式得到標題化合物5.159kg(收率95％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.45(bs，2H)，9.26(d，1H，J＝8.0Hz)，8.23(d，1H，J＝2.1Hz)，8.02(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，7.58(d，1H，J＝8.8Hz)，7.38-7.47(m，5H)，7.21(d，2H，J＝8.3Hz)，4.95(m，1H)，4.77(m，1H)，4.21(bs，2H)，3.55(s，3H)，3.19(dd，1H，J＝5.2，14.1Hz)，3.02(dd，1H，J＝10.0，14.0Hz)，2.52(s，3H)，1.23(d，3H，J＝6.2Hz)，1.19(d，3H，J＝6.2Hz)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ170.54，163.71，161.26，150.59，141.17，137.45，137.25，136.22，134.75，131.60，131.19，130.09，129.88，128.73，128.13，126.68，115.47，115.27，68.55，53.76，50.18，36.44，31.94，31.05，21.77，21.70、熔點(DSC)254-258℃、MS(ESI)m/z 597.2(MH+)、MS(FAB)m/z 597.1(MH-)、HRMS(FAB)理論值C30H31Cl2N4O5 m/z 597.1672(MH+)，實測值m/z 597.1691(MH+) (比較例1)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成(使用取代鄰氨基苯甲酸酯的反應)
在氮氣流下向N，N-二甲基甲酰胺3.6ml中加入N，N’-羰基二咪唑(CDI)0.79g形成漿料，冷卻至5℃。在注意放熱的同時向該溶液中分2次投入Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-氨基-L-苯丙氨酸異丙酯1.8g。接著，在10℃下攪拌1小時后，加入2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸甲酯1.01g，在60℃下攪拌6小時。通過HPLC確認原料的消失后，將反應液冷卻至50℃，加入2-丙醇14.4ml，添加晶種析出目標產物。往該漿料中滴加2-丙醇18ml，冷卻至10℃，攪拌一夜。
通過減壓過濾分離固體，用2-丙醇3.6ml進行洗滌后，在60℃下進行減壓干燥，以白色結晶性固體形式得到標題化合物1.52g(收率55％)。得到的化合物的物性值與實施例5的步驟1所示的物性值一致。
(實施例6)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成 步驟1 2-(3-{4-[2(S)-2-(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-異丙氧基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸的合成
使1，1’-羰基二咪唑(CDI)0.86g懸浮在N，N-二甲基甲酰胺3.8ml中，并冷卻至10℃。向該漿料中投入4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯1.90g，在10℃下攪拌1小時后，加入2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸1.0g，在60℃下攪拌2小時。然后，在室溫下加入水7.6ml、6M鹽酸水溶液1.0ml、6M氫氧化鈉水溶液1.0ml。將該溶液緩慢地滴加到裝有水3.8ml和6M鹽酸水溶液1.1ml的另一茄形燒瓶中，析出固體，通過抽濾進行分離。用水10ml進行洗滌后，在70℃下減壓干燥2小時，以白色結晶性固體形式得到標題化合物3.02g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.41和10.37(兩個s，1H)，9.76和9.74(兩個s，1H)，9.17(d，1H，J＝7.9Hz)，8.46-8.31(m，1H)，8.31和8.14(兩個s，1H)，7.84和7.82(兩個d，1H，J＝2.1Hz)，7.48-7.37(m，6H)，7.19(d，2H，8.6Hz)，4.92(七重峰，1H，J＝6.2Hz)，4.69-4.61(m，1H)，4.43和4.41(兩個s，2H)，3.04(dd，1H，J＝5.7和14.2Hz)，2.90(dd，1H，J＝9.2，14.0Hz)，2.83和2.63(兩個s，3H)，1.21(d，3H，J＝6.2Hz)，1.15(d，3H，J＝6.2Hz)MS(ESI-)m/z 629.2(M-H-) 步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4-[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
向2-(3-{4-[2(S)-2(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-異丙氧基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸500mg中加入N，N-二甲基甲酰胺0.63ml使其形成均相，加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)287mg，并加熱至60℃，進行3小時攪拌。將反應液冷卻至50℃后，添加2-丙醇3.15ml，接著加入晶種析出固體。進一步滴加2-丙醇2.52ml，冷卻至10℃，攪拌一夜。通過減壓過濾分離析出的固體后，用2-丙醇2ml洗滌濾餅，在70℃下進行減壓干燥，得到目標產物的白色固體375mg。所得到的化合物的物性數據與實施例5的步驟1一致。
(實施例7)2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸甲酯的合成
步驟15-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯的合成 使5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸3.40g溶解在N，N-二甲基甲酰胺6.8ml中后，加入碳酸鉀3.94g和碘甲烷1.77ml，在20℃～30℃下進行4小時攪拌。通過HPLC確認原料消失后，向反應液中加入水20.5ml和乙酸乙酯34ml。將有機層分離并濃縮，得到目標產物的粗產物(油狀)4.47g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.31和8.19(兩個s，1H)，8.11和8.08(兩個d，1H，J＝8.2Hz)，7.78-7.61(m，2H)，4.63和4.58(兩個s，2H)，3.86和3.85(兩個s，3H)，2.89和2.65(兩個s，3H) 步驟2 2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸甲酯的合成 將步驟1中合成的5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯的粗產物4.47g溶解在甲醇34ml中，在氬氣環境下加入5％Pd/C(濕產品)后，將氫氣導入到反應容器內。在反應溫度40℃下攪拌8小時后，將氫氣替換為氬氣，加入甲醇14ml，升溫至55℃。通過減壓過濾分離Pd/C催化劑，用甲醇25ml進行洗滌后，將得到的過濾洗滌液保持在40℃。滴加水31ml析出固體后，將漿料在10℃下攪拌一夜。通過減壓過濾分離固體，用水7ml進行洗滌后，在70℃下減壓干燥5小時，以白色固體形式得到標題化合物2.53g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.26和8.10(兩個s，1H)，7.62和7.60(兩個d，1H，J＝2.2Hz)，7.17和7.14(兩個dd，1H，J＝2.2，8.6Hz)，6.80和6.77(兩個d，1H，J＝8.6Hz)，6.71和6.67(兩個bs，2H)，4.28(s，2H)，3.80和3.79(兩個s，3H)，2.78和2.59(兩個s，3H)MS(ESI+)m/z 223.3(MH+)，245.2(M+Na) (實施例8)2-氨基-5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸甲酯的合成
步驟1 5-甲基-2-硝基苯甲酸甲酯的合成 將5-甲基-2-硝基苯甲酸20.0g溶解在N，N-二甲基甲酰胺200ml中，依次添加碳酸鉀22.9g、碘甲烷8.2ml，在室溫下攪拌4小時。向反應液中添加水400ml、1M鹽酸200ml，用乙酸乙酯900ml進行萃取，將萃取液用飽和碳酸氫鈉200ml、飽和食鹽水200ml洗滌，減壓下蒸餾除去溶劑，以粗產物形式得到標題化合物20.6g。
MS(ESI+)m/z 196(MH+) 步驟2 5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯的合成 向步驟1中合成的5-甲基-2-硝基苯甲酸甲酯的粗產物1.0g中加入N-溴琥珀酰亞胺1.4g、過氧化苯甲酰0.5g、苯30ml，在回流下攪拌4小時后，在減壓下蒸餾除去溶劑。將得到的殘渣溶解在乙腈30ml中，添加到2M甲胺THF溶液36ml中，進一步在室溫下攪拌10分鐘。在減壓下蒸餾除去溶劑后，加入乙酸乙酯，用1M鹽酸洗滌4次。乙酸乙酯層用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，減壓下蒸餾除去溶劑。將其中得到的粗產物溶解在乙腈30ml中，加入二叔丁基二碳酸酯1.1g、三乙胺1.1ml，在室溫下攪拌整夜。減壓下蒸餾除去溶劑，加入乙酸乙酯，過濾除去不溶物，在減壓下濃縮濾液。將所得到的粗產物用硅膠柱色譜進行純化(己烷∶乙酸乙酯＝90∶10→80∶20)，得到標題化合物0.71g。MS(ESI+)m/z 325(MH+) 步驟3 2-氨基-5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸甲酯的合成 將步驟2中合成的5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯2.5g溶解在甲醇50ml中，添加10％Pd-C 230mg，在氫氣環境下，在室溫下攪拌3小時。用硅藻土過濾反應液，用甲醇洗滌后，在減壓下蒸餾除去溶劑，得到標題化合物2.26g。
MS(ESI+)m/z 295(MH+) (實施例9)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-異氰酸酯基-L-苯丙氨酸甲酯的合成 步驟1 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-碘-L-苯丙氨酸的合成
往4-碘-L-苯丙氨酸7.50g中加入水21ml、丙酮9.80ml、6M氫氧化鈉水溶液5.20ml，在10℃下攪拌使其形成均相。往該溶液中交替加入2，6-二氯苯甲酰氯4.05ml和6M氫氧化鈉水溶液4.50ml，注意維持pH為13以下、并且溫度不為15℃以上。確認反應結束后，加入6M鹽酸水溶液6.50ml析出目標產物。通過減壓過濾分離析出的固體，用水15ml進行洗滌，在70℃下減壓干燥4小時，得到目標產物的固體12.42g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.06(d，1H，J＝8.3Hz)，δ7.63(d，2H，J＝8.2Hz)，δ7.48-7.35(m，3H)，δ7.11(d，2H，J＝8.2Hz)，δ4.68(ddd，1H，J＝10.0，8.4，4.8Hz)，δ3.11(dd，1H，J＝14.0，4.8Hz)，δ2.87(dd，1H，J＝14.0，10.0Hz)MS(ESI+)m/z 463.9(MH+)，和485.9(M+Na)(ESI-)m/z 461.8(M-H-) 步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-碘-L-苯丙氨酸甲酯的合成
往Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-碘-L-苯丙氨酸8.0g中加入甲醇40ml、濃硫酸0.98ml，加熱至40℃，進行4小時反應。確認反應結束后，冷卻至10℃，滴加水20ml的同時析出固體。通過減壓過濾分離析出的固體，用水40ml進行洗滌后，在70℃下進行減壓干燥，得到目標產物的固體7.40g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.18(d，1H，J＝8.1Hz)，7.64(d，2H，J＝8.1Hz)，7.48-7.35(m，3H)，7.11(d，2H，J＝8.2Hz)，4.75(ddd，1H，J＝10.0，8.1，4.9Hz)，3.67(s，3H)，3.11(dd，1H，J＝14.1，5.1Hz)，2.90(dd，1H，J＝14.0，10.2Hz)MS(ESI+)m/z 478.0(MH+)，(ESI-)m/z 475.9(M-H-) 步驟3 4-羧基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯的合成
使用帶螺蓋的試管，混合DMF 0.5ml、甲酸鈉122mg、二異丙基乙基胺206μl、乙酸酐113μl，在室溫下攪拌10分鐘后，加入Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-碘-L-苯丙氨酸甲酯288mg、10％Pd/C 32mg、氯化鋰76mg和DMF 0.4ml，升溫至80℃并進行攪拌后，進一步追加甲酸鈉41mg和乙酸酐57μl并進行攪拌。確認反應結束后，過濾Pd/C，用6M鹽酸0.6ml、水0.3ml、DMF 1.3ml進行洗滌。在室溫下向反應液中滴加水3.5ml，進一步加入晶種析出固體，將懸浮液冷卻至10℃。通過減壓過濾分離析出物，用水3ml進行洗滌后，在60℃下進行減壓干燥，得到粗純化物的固體217mg。接著，在乙腈中進行重結晶，得到純化后的目標產物71mg。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.22(d，1H，J＝8.1Hz)，7.86(d，2H，J＝8.4Hz)，7.48-7.35(m，5H)，4.81(ddd，1H，J＝10.2，8.3，5.1Hz)，3.67(s，3H)，3.23(dd，1H，J＝14.0，4.9Hz)，3.02(dd，1H，J＝14.0，10.2Hz)、MS(ESI+)m/z 396.1(MH+)，418.1(M+Na)、MS(ESI-)m/z 394.1(M-H-) 步驟4 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-異氰酸酯基-L-苯丙氨酸甲酯的合成
往4-羧基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯100mg中加入1，2-二甲氧基乙烷(脫水)2ml、三乙胺54μl、疊氮化磷酸二苯酯(DPPA)55μl，在室溫下攪拌1小時。接著，升溫至80℃～90℃并攪拌3小時后，通過減壓蒸餾除去溶劑。將所得到的油狀粗產物通過使用硅膠的快速柱(flash column)(二乙基醚/正己烷＝1/1→僅用二乙基醚)純化，減壓蒸餾除去溶劑，得到目標產物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35-7.23(m，3H)，7.20-7.15(m，2H)，7.04-6.98(m，2H)，6.31(bd，1H，J＝7.3Hz)，5.16(dt，1H，J＝8.0，5.8Hz)，3.76(s，3H)，3.27(dd，1H，J＝14.2，5.7Hz)，3.23(dd，1H，J＝14.2，5.7Hz)、MS(ESI+)m/z 393.0，415.0(M+Na)、MS(ESI-)m/z 391.1(M-H-)、IR(KBr)cm-1 2268.1(s)，1743.5(m)，1654.8(m)，1581.5(m)，1539.1(m)，1519.8(m) (實施例10)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯的合成
往4-羧基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯100mg中加入二甲氧基乙烷(DME)1ml、三乙胺53μl和疊氮化磷酸二苯酯(DPPA)55μl，加熱至40℃，攪拌1小時以上。向該反應液中加入2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸甲酯二鹽酸鹽63.7mg、三乙胺71μl、DME 0.5ml形成漿料，加熱至80℃～90℃，攪拌3小時以上。濃縮反應液后，加入水5ml，用乙酸乙酯5ml×2次進行萃取操作。將得到的有機層濃縮至干固，加入N，N-二甲基甲酰胺0.4ml使其形成均相，加入甲醇2ml析出目標產物，在10℃下攪拌一夜。通過減壓過濾分離析出固體后，用甲醇5ml進行洗滌，在70℃下減壓干燥6小時，得到目的化合物的淡黃色固體75mg。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.22(s，1H)，9.28(d，1H，J＝8.1Hz)，7.48-7.35(m，5H)，7.27(dd，1H，J＝9.0，2.8Hz)，7.21-7.09(m，4H)，4.80(ddd，1H，J＝10.0，8.1，4.9Hz)，3.69(s，3H)，3.22(dd，1H，J＝4.6，14.2Hz)，3.02(dd，1H，J＝10.2，13.8Hz)，2.91(6H，s)、13C-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ171.70，163.99，162.75，150.18，146.83，137.15，136.34，134.80，131.78，131.36，131.15，129.84，129.18，128.32，122.05，116.48，115.03，108.50，53.70，52.29，40.93，36.36、MS(ESI+)m/z 555.1(MH+)和577.2(M+Na)，(ESI-)m/z 553.2(M-H-) 而且，上述得到的化合物可以通過專利文獻2(WO2004/74264)記載的方法進行N-甲基化反應，轉化成具有下述結構式的化合物。

(實施例11)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
往4-羧基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯3.0g中加入乙腈80ml、三乙胺4.93ml、疊氮化磷酸二苯酯(DPPA)1.52ml，加熱至60℃，攪拌1小時。向該反應液中加入2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸1.47g，加熱至90℃，攪拌12小時以上。接著加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)2.29g，攪拌1.5小時以上。反應結束后將反應液濃縮，然后加入乙酸乙酯500ml、1M鹽酸500ml，進行萃取分離。得到的有機層依次用水500ml與飽和碳酸氫鈉水100ml的混合液、飽和碳酸氫鈉300ml、飽和氯化鈉水溶液300ml進行洗滌后，用無水硫酸鈉干燥。然后濃縮至干固，用二乙基醚洗滌漿料后，通過減壓過濾分離固體，用二乙基醚進行洗滌。接著進行減壓干燥，得到目標產物的白色固體3.25g。所得到的化合物的物性值與上述相同化合物的合成實施例所示的物性值一致。
(實施例12)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
往Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-羧基-L-苯丙氨酸異丙基酯250mg中加入乙腈20ml、三乙胺411μl、疊氮化磷酸二苯酯(DPPA)127μl，加熱至60℃，攪拌1小時。向該反應液中加入2-氨基-5-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸165mg，加熱至90℃，攪拌2小時。接著，加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)96mg，攪拌一夜。反應結束后由反應液通過反相柱色譜進行分離純化操作，得到目標產物的固體229mg。
MS(ESI)m/z 683(MH+) (實施例13)5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)靛紅酸酐的合成
使1，1’-羰基二咪唑(CDI)3.82g懸浮在N，N-二甲基甲酰胺15.2ml中，并冷卻至5℃。往該漿料中分2次加入2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸4.0g，攪拌1小時。通過HPLC確認原料消失后，滴加1M鹽酸水溶液40.3ml的同時加入晶種析出固體，并通過減壓過濾分離所析出的固體。用水120ml進行洗滌后，在70℃下進行13小時減壓干燥，以白色固體形式得到標題化合物3.20g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.82(bs，1H)，8.32和8.15(兩個s，1H)，7.84和7.78(兩個d，1H，J＝1.7Hz)，7.65和7.60(兩個dd，1H，J＝2.0，8.4Hz)，7.17和7.15(兩個d，1H，J＝8.4Hz)，4.49和4.47(兩個s，2H)，2.84和2.62(兩個s，3H)、MS(ESI+)m/z 235(MH+)，(ESI-)m/z 233.1(M-H-) (實施例14)5-二甲基氨基靛紅酸酐的合成
使1，1’-羰基二咪唑(CDI)144mg懸浮在N，N-二甲基甲酰胺0.76ml中，冷卻至5℃。向該漿料中加入2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸·鹽酸鹽200mg，攪拌1小時以上后，追加N，N-二甲基甲酰胺0.76ml、1，1’-羰基二咪唑(CDI)66mg，進一步攪拌1小時。通過減壓過濾分離析出的固體，用甲醇2ml進行洗滌后，在60℃下減壓干燥，得到目標產物的黃色固體91mg。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.42(bs，1H)，δ7.28(dd，1H，J＝9.1，3.0Hz)，7.05(d，1H，J＝8.7Hz)，7.04(d，1H，J＝3.2Hz)，2.91(s，6H)、MS(ESI+)m/z 207.2(M+H+)和248.2(M+MeCN)和270.2(M+MeCN+Na)，(ESI-)m/z 205.1(M-H-) (實施例15)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成(方法1，不分離酰胺中間體的連續方法)
使1，1’-羰基二咪唑(CDI)1.64g懸浮在N，N-二甲基甲酰胺7.6ml中，并冷卻至10℃。往該懸浮液中加入2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸2.0g，在10℃下進行攪拌。通過HPLC確認靛紅酸酐的生成后，添加4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯3.80g，在60℃下進行酰胺化。通過HPLC確認反應結束后，冷卻至25℃，加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)1.96g并再次加熱至60℃。2小時后，通過HPLC確認反應結束后，冷卻至50℃～40℃，添加晶種的同時滴加2-丙醇30.4ml析出目標產物。進一步滴加2-丙醇38.0ml，在9℃下攪拌一夜后，通過減壓過濾分離析出的固體，用2-丙醇11.4ml洗滌。
然后在60℃下進行3小時減壓干燥，得到標題化合物的白色結晶性固體3.51g。這里得到的化合物的物性值與上述相同化合物的合成實施例中記載的物性值一致。
而且，該步驟中未分離的酰胺中間體也可以通過另外示出的實施例的方法進行分離。
(實施例16)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯的合成(方法1，不分離酰胺中間體的連續方法)
使1，1’-羰基二咪唑(CDI)1.89g懸浮在N，N-二甲基甲酰胺32ml中，并冷卻至10℃。往該漿料中加入2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸1.96g，在10℃～25℃下攪拌2小時。接著添加Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-氨基-L-苯丙氨酸甲酯4.00g，在60℃下攪拌2小時。往該溶液中加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)2.16g，在60℃下攪拌一夜后，在60℃～10℃下添加晶種的同時滴加甲醇160ml析出固體。在10℃下攪拌一夜后，通過減壓過濾分離固體，用甲醇16ml洗滌，在70℃下減壓干燥5小時，得到目的化合物的淡黃色固體1.84g。所得到的化合物的物性值與上述相同化合物的合成實施例所示的物性值一致。
(實施例17)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成(方法2，分離酰胺中間體的方法) 步驟1 4-{2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
使1，1’-羰基二咪唑(CDI)1.67g懸浮在N，N-二甲基甲酰胺7.6ml中，并冷卻至5℃。往該漿料中加入2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸2.0g，在5℃下進行靛紅酸酐化反應。通過HPLC確認反應結束后，加入4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯3.80g，在60℃下進行一夜酰胺化。通過HPLC確認反應結束后，冷卻至25℃～50℃，添加水3ml。將該溶液緩慢滴加到預先加有水29ml的另一茄形燒瓶中，析出固體后，通過減壓過濾分離析出的固體。用水20ml洗滌后，進行減壓干燥，得到目標產物的粗產物5.50g。往該粗產物中加入乙腈5.5ml使其形成均相，添加2-丙醇137.5ml和晶種析出固體，在20℃下攪拌2小時。通過減壓過濾分離析出的固體，用2-丙醇20ml進行洗滌后，進行減壓干燥，得到目標產物的白色結晶性固體2.60g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.97和9.95(兩個s，1H)，9.19(d，1H，J＝8.0Hz)，8.27和8.10(兩個s，1H)，7.65-7.35(m，6H)，7.29-7.22(m，2H)，7.14-7.03(m，1H)，6.79-6.71(m，1H)，6.35和6.27(兩個bs，2H)，4.92(七重峰，1H，J＝6.2Hz)，4.72-4.63(m，1H)，4.32和4.29(兩個s，2H)，3.07(dd，1H，J＝14.0，5.7Hz)，2.94(dd，1H，J＝14.0，9.2Hz)，2.81和2.64(兩個s，3H)，1.21(d，3H，J＝6.4Hz)，1.16(d，3H，J＝6.4Hz)MS(ESI+)m/z 585.0(MH+)(ESI-)m/z 583.2(M-H-) 步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
向4-{2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯1.0g中加入N，N-二甲基甲酰胺1.34ml使其形成均相，加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)0.34g并加熱至60℃，攪拌1小時以上。
冷卻至50℃后，添加2-丙醇6.7ml，加入晶種析出固體。進一步滴加2-丙醇5.36ml，冷卻至10℃，攪拌一夜。通過減壓過濾分離析出的固體后，用2-丙醇2ml進行洗滌，經過70℃下的減壓干燥，以白色固體形式得到標題化合物0.85g。所得到的化合物的物性值與上述相同化合物的合成實施例所示的物性值一致。
(實施例18)4-{2-氨基-6-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯的合成(方法2，分離酰胺中間體的方法) 步驟1 4-{2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯的合成
通過使2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸與1，1’-羰基二咪唑(CDI)反應生成靛紅酸酐，使該靛紅酸酐與4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯反應來合成。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.96(s，1H)，9.22(d，1H，J＝7.9Hz)，7.61(d，2H，J＝8.5Hz)，7.48-7.38(m，3H)，7.23(d，2H，J＝8.5Hz)，6.95(d，1H，J＝2.7Hz)，6.88-6.84(m，1H)，6.69(d，1H，J＝8.8Hz)，5.62(bs，2H)，4.74-4.68(m，1H)，3.66(s，3H)，3.12-3.06(m，1H)，2.98-2.91(m，1H)，2.79(s，6H)、13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ36.46，42.13，52.20，54.11，113.86，117.09，118.04，120.32，120.78，128.37，129.55，131.39，131.65，132.21，136.36，138.17，141.80，142.25，163.90，168.33，171.65、MS(ESI)m/z 529(M+H+) 步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯的合成
使步驟1中合成的4-{2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯47.1g懸浮在乙腈480ml中，向其中加入1，1’-羰基二咪唑(CDI)15.9g，在55℃～60℃下加熱攪拌2.5小時。反應結束后，冷卻至5℃，濾出晶體，得到35.6g的一次結晶。將過濾洗滌液濃縮至一半量，加入水200ml析出晶體，對該晶體進行過濾、干燥，由此得到6.35g的二次結晶。所得到的化合物的物性值與上述合成實施例記載的物性值一致。
(實施例19)2-乙氧基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)-3，1-苯并噁嗪-4-酮的合成
向2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸6.0g中加入吡啶30ml，在冰浴冷卻下滴加氯甲酸乙酯11.1ml。一夜后，滴加水20ml析出固體后，通過減壓過濾分離固體，用水20ml進行洗滌。進行減壓干燥，得到目的化合物的白色固體3.97g。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.33和8.19(兩個s，1H)，7.98和7.96(兩個bs，1H)，7.65和7.57(兩個dd，1H，J＝2.2，8.4Hz)，7.44和7.40(兩個d，1H，J＝8.2Hz)，4.59和4.47(兩個s，2H)，4.56-4.49(m，2H)，2.90和2.79(兩個s，3H)，1.50-1.43(m，3H)MS(ESI+)m/z 263(MH+)和285.1(M+Na) (實施例20)6-二甲基氨基-2-乙氧基-3，1-苯并噁嗪-4-酮的合成
往2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸2.0g中加入乙腈10ml、吡啶4.49ml，使溫度為20℃。向該溶液中緩慢加入氯甲酸乙酯3.19ml，攪拌1小時以上。確認反應結束后，滴加水20ml的同時析出固體，冷卻至10℃。通過減壓過濾分離析出的固體后，用水20ml進行洗滌，在70℃下進行減壓干燥，得到目標產物的黃色固體2.35g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.31(m，2H)，7.12-7.07(m，1H)，4.40(q，2H，J＝7.1Hz)，2.96(s，6H)，1.35(t，3H，J＝7.2Hz)、MS(ESI+)m/z 235.1(M+H+)，276.2(M+MeCN)和298.2(M+MeCN+Na) (實施例21)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成 步驟1 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
向2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸2.0g中加入乙腈10ml和吡啶3.9ml，形成漿料，冷卻至10℃。用5分鐘向該漿料中滴加氯甲酸乙酯2.76ml，然后攪拌1小時。通過HPLC確認原料的消失后，向反應液中加入2-丙醇1.46ml，在25℃下分解未反應的氯甲酸乙酯。向該反應液中加入4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯3.80g，攪拌一夜。接著滴加2-丙醇30ml，在10℃下攪拌3小時。通過減壓過濾分離析出的固體，用2-丙醇10ml進行洗滌后，在60℃下減壓干燥18小時，得到目的化合物的白色結晶性固體4.35g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.42(s，1H)，10.11和10.02(兩個s，1H)，9.20(d，1H，J＝7.9Hz)，8.31和8.15(兩個s，1H)，8.06和8.02(兩個d，1H，J＝8.4Hz)，7.72和7.66(兩個d，1H，J＝1.7Hz)，7.63-7.58(m，2H)，7.49-7.35(m，4H)，7.32-7.26(m，2H)，4.93(七重峰，1H，J＝6.4Hz)，4.73-4.65(m，1H)，4.47和4.46(兩個s，2H)，4.11和4.11(兩個q，2H，J＝7.2Hz)，3.10(dd，1H，J＝14.1，5.9Hz)，2.96(dd，1H，J＝9.2，14.0Hz)，2.86和2.67(兩個s，3H)，1.22和1.21(兩個t，3H，J＝7.2Hz)，1.22(3H，d，J＝6.0Hz)，1.17(3H，d，J＝6.4Hz)、MS(ESI+)m/z 657.1(MH+)，(ESI-)m/z 655.2 步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯的合成
向上述步驟1中合成的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸異丙基酯17.1g中分別加入N，N-二甲基甲酰胺68ml、2-丙醇6.8ml、碳酸鉀7.55g后，加入對甲苯磺酸甲酯5.89ml，在室溫下攪拌一夜。通過HPLC確認反應結束后，加入乙酸6.25ml進行驟冷(quench)，滴加水84ml析出固體。通過減壓過濾分離析出的固體，用水82ml洗滌析出的固體后，進行減壓干燥，得到目標化合物的白色結晶性固體15.80g。所得到的化合物的物性值與上述相同化合物的合成實施中記載的物性值大體一致。
而且，本化合物可以通過實施例5的步驟3所示的方法進行脫甲酰基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯·鹽酸鹽。
(實施例22)Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯的合成 步驟1 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-5-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸甲酯的合成
向2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酸1.96g中加入乙腈12ml和吡啶5.29ml，形成懸浮液，冷卻至4℃。用5分鐘向該懸浮液中滴加氯甲酸乙酯4.17ml，在25℃下攪拌1小時。通過HPLC確認原料消失后，加入乙醇0.7ml分解剩余的氯甲酸乙酯，進一步攪拌1小時。向該反應液中加入4-氨基-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯4.0g、N，N-二甲基甲酰胺12m，攪拌一夜。接著滴加甲醇48ml，在10℃下攪拌一夜，通過減壓過濾分離析出的固體，用甲醇8ml進行洗滌后，在70℃下減壓干燥5小時，以淡黃色固體形式得到標題化合物5.50g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.29(s，1H)，9.42(bs，1H)，9.24(d，1H，J＝7.9Hz)，7.73(bs，1H)，7.62(d，2H，J＝8.4Hz)，7.48-7.44(m，2H)，7.41(dd，1H，J＝9.5，6.2Hz)，7.27(d，2H，J＝8.4Hz)，7.01(d，1H，J＝2.7Hz)，6.93(dd，1H，J＝9.1，2.9Hz)，4.71(ddd，1H，J＝9.2，8.1，5.7Hz)，4.05(q，2H，J＝7.0Hz)，3.66(s，3H)，3.10(dd，1H，J＝14.0，5.6Hz)，2.96(dd，1H，J＝14.0，9.2Hz)，2.93(s，6H)，1.18(t，3H，J＝7.2Hz)、MS(ESI+)m/z 601.2(MH+)和623.2(M+Na)，(ESI-)m/z 599.1(M-H-) 步驟2 Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基-1-甲基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯的合成
往上述步驟1中得到的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-5-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸甲酯2.0g中分別加入N，N-二甲基甲酰胺16ml、甲醇0.8ml、碳酸鉀0.91g，在25℃下攪拌一夜。向該反應液中加入對甲苯磺酸甲酯0.75ml，在25℃～40℃下進行烷基化反應。通過HPLC確認原料的消失后，加入乙酸0.75ml進行驟冷，滴加水16ml析出固體。進一步加入N，N-二甲基甲酰胺/水＝1/1的混合液8ml，在25℃下進行攪拌后，通過減壓過濾分離析出的固體，用水8ml進行洗滌。然后，在70℃下進行4小時減壓干燥，得到目的化合物的淡黃色固體1.77g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.28(d，1H，J＝8.1Hz)，7.48-7.36(m，6H)，7.31(dd，1H，J＝3.0，9.0Hz)，7.24(d，1H，J＝3.0Hz)，7.20-7.15(m，2H)，4.81(ddd，1H，J＝10.2，8.1，4.8Hz)，3.69(s，3H)，3.49(s，3H)，3.22(dd，1H，J＝14.1，4.8Hz)，3.02(dd，1H，J＝14.2，10.5Hz)，2.94(s，6H)、MS(ESI+)m/z 569.2(MH+)和591.1(M+Na)，(ESI-)m/z 567.2(M-H-)
權利要求
1.式(1)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法，該方法包括以下的步驟(a)、(b)和(c)，
[式中，
R1表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種，
R2表示可以具有取代基的烷基，
R3表示被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基中的任意一種，
R4表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種，]
(a)通過使式(2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與羰基導入試劑以及式(3)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應，得到式(4)所示的羧基不對稱脲衍生物或其化學上可以容許的鹽的步驟，
[式中，R1和R2的定義與上述相同]，
[式中，R3’表示被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基中的任意一種]，
[式中，R1、R2和R3’的定義與上述相同]；
(b)在羧基活化劑的存在下將該羧基不對稱脲衍生物(4)轉化成式(5)所示的喹唑啉二酮化合物或其可藥用鹽的步驟，
[式中，R1～R3’的定義與上述相同]；
(c)根據需要，用N-烷基化劑對式(5)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R3’被保護時進行脫保護的步驟。
2.如權利要求1所述的制備方法，其中，式(1)中，R3為甲基氨基甲基、乙基氨基甲基、二甲基氨基甲基、二乙基氨基甲基中的任意一種，且式(3)～式(5)中，R3’為被具有保護基團的甲基氨基取代的甲基、被具有保護基團的乙基氨基取代的甲基、二甲基氨基甲基、二乙基氨基甲基中的任意一種。
3.如權利要求1或2所述的制備方法，其中，式(1)～式(5)中，
R1為2，6-二氯苯基、2-氯-6-甲基苯基、2-氯-6-氟苯基、2，6-二氟苯基、2-氟-6-甲基苯基中的任意一種，
R4表示甲基、乙基中的任意一種，
苯丙氨酸的苯環上的取代基的取代位置為對位。
4.如權利要求1～3中任意一項所述的制備方法，其中，羰基導入試劑為1，1’-羰基二咪唑、1，1’-羰基二(三唑)或氯甲酸酯中的任意一種。
5.如權利要求1～4中任意一項所述的制備方法，其中，羧基活化劑為1，1’-羰基二咪唑、氯甲酸酯、烷基磺酰氯、N，N’-二環己基碳二亞胺(DCC)或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺中的任意一種。
6.如權利要求1～5中任意一項所述的制備方法，其中，N-烷基化劑為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷或氯甲烷中的任意一種。
7.如權利要求1～6中任意一項所述的制備方法，其中，包括在使式(2)所示的化合物先與羰基導入試劑反應后，接著與式(3)所示的化合物反應。
8.如權利要求1～7中任意一項所述的制備方法，其中，包括不分離式(4)所示的化合物而進行后續步驟。
9.如權利要求1所述的制備方法，其中，使式(2)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基的式(2)的化合物與羰基導入試劑1，1’-羰基二咪唑和R3’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基的式(3)的化合物反應，得到式(4)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基、R3’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的2-(3-{4-[2(S)-2-(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-異丙氧基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸，使其與羧基活化劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(5)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基、R3’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，用氯化氫進行甲酰基的脫保護，得到式(1)中R1為2，6-二氯苯基、R2為異丙基、R3為N-甲基氨基甲基、R4為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
10.式(3-1)所示的化合物或其化學上可以容許的鹽，
[式中，R3”表示N-烷基-N-甲酰基-氨基烷基、N-烷基-N-烷基羰基-氨基烷基、N-烷基-N-烷氧基羰基-氨基烷基中的任意一種。]
11.選自由下式組成的組中的化合物或其化學上可以容許的鹽，
[化學式1]
12.式(1-2)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法，該方法包括以下的步驟(a)、(b)、(c)和(d)，
[式中，
R21表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種，
R22表示可以具有取代基的烷基，
R23表示二烷基氨基、單烷基氨基、氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種，
R24表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種]，
(a)使式(2-2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽經過異氰酸酯轉換反應，將羧基轉換為異氰酸基的步驟，
[式中，R21和R22的定義與上述相同]；
(b)使所得到的式(3-2)所示的化合物或其化學上可以容許的鹽與式(4-2)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應的步驟，
[式中，R21和R22的定義如上所述]，
[式中，R23’表示二烷基氨基、單烷基氨基、可以具有保護基團的氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種，R25表示氫原子或可以具有取代基的烷基]；
(c)將所得到的不對稱脲衍生物(5-2)或其化學上可以容許的鹽，
[式中，R21、R22、R23’和R25的定義與上述相同]
當R25為氫原子時在羧基活化劑的存在下、
當R25為烷基時在堿的存在下，
轉化成式(6-2)所示的喹唑啉二酮化合物或其化學上可以容許的鹽的步驟，
[式中，R21～R23’的定義與上述相同]；
(d)根據需要，用N-烷基化劑對式(6-2)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R23’被保護時進行脫保護的步驟。
13.如權利要求12所述的制備方法，其中，式(1-2)中R23為二甲基氨基或甲基氨基甲基中的任意一種，且式(4-2)～式(6-2)中，R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基氨基甲基、N-乙酰基-N-甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種。
14.如權利要求12或13所述的制備方法，其中，異氰酸酯轉換反應是使疊氮化磷酸二苯酯反應的方法或將羧基轉化成酰氯后與疊氮化鈉反應的方法。
15.如權利要求12～14中任意一項所述的制備方法，其中，式(4-2)、式(5-2)中，R25表示氫原子，
羧基活化劑為1，1’-羰基二咪唑、氯甲酸酯、烷基磺酰氯、N，N’-二環己基碳二亞胺(DCC)或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺中的任意一種。
16.如權利要求12～14中任意一項所述的制備方法，其中，式(4-2)、式(5-2)中，R25表示烷基，
堿為碳酸鉀或甲醇鈉。
17.如權利要求12～16中任意一項所述的制備方法，其中，N-烷基化劑為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷或氯甲烷中的任意一種。
18.如權利要求12～17中任意一項所述的制備方法，其中，包括不分離式(3-2)和/或式(5-2)所示的化合物而連續進行反應。
19.如權利要求12所述的制備方法，其中，使式(3-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基的式(3-2)的化合物與R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R25為氫原子的式(4-2)的化合物反應，得到式(5-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基、R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R25為氫原子所示的2-(3-{4-[2(S)-2-(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-異丙氧基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酸，使其與羧基活化劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(6-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基、R23’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，在鹽酸酸性條件下進行甲酰基的脫保護，得到式(1-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為異丙基、R23為N-甲基氨基甲基、R24為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
20.如權利要求12所述的制備方法，其中，使式(3-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基的式(3-2)的化合物與R23’為二甲基氨基、R25為甲基的式(4-2)的化合物反應，得到式(5-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基、R23’為二甲基氨基、R25為甲基所示的2-(3-{4-[2(S)-2-(2，6-二氯苯甲酰基氨基)-2-甲基羰基乙基]苯基}脲基)-5-(二甲基氨基)苯甲酸甲酯，使其與碳酸鉀反應，轉化成式(6-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基、R23’為二甲基氨基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，得到式(1-2)中R21為2，6-二氯苯基、R22為甲基、R23為二甲基氨基、R24為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯。
21.式(1-3)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法，該方法包括以下的步驟(a)、(b)和(c)，
[式中，
R31表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種，
R32表示可以具有取代基的烷基，
R33表示二烷基氨基、單烷基氨基、氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種，
R34表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種]，
(a)使式(2-3)所示的靛紅酸酐衍生物或其化學上可以容許的鹽與式(3-3)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應的步驟，
[式中，R33’表示二烷基氨基、單烷基氨基、可以具有保護基團的氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種]，
[式中，R31和R32的定義與上述相同，]
(b)使所得到的酰胺衍生物(4-3)與羰基導入試劑反應，轉化成式(5-3)所示的喹唑啉二酮化合物的步驟，
[式中，R31、R32和R33’的定義與上述相同，]
[式中，R31～R33’的定義與上述相同，]
(c)根據需要，用N-烷基化劑對式(5-3)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R33’被保護時進行脫保護的步驟。
22.如權利要求21所述的制備方法，其中，使用通過包括使式(6-3)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與羰基導入試劑反應的方法得到的式(2-3)所示的靛紅酸酐衍生物或其化學上可以容許的鹽，
[式中，R33’的定義與上述相同]。
23.如權利要求21所述的制備方法，其中，式(1-3)中R33為甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種，且式(2-3)、式(4-3)、式(5-3)中R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基氨基甲基、N-乙酰基-N-甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種。
24.如權利要求21～23中任意一項所述的制備方法，其中，羰基導入試劑為1，1’-羰基二咪唑、1，1’-羰基三唑或氯甲酸酯中的任意一種。
25.如權利要求21～24中任意一項所述的制備方法，其中，N-烷基化劑為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷或氯甲烷中的任意一種。
26.如權利要求21～25中任意一項所述的制備方法，其中，包括不分離式(4-3)所示的化合物而連續進行反應。
27.如權利要求21所述的制備方法，其中，使式(3-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基的式(3-3)的化合物與R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基的式(2-3)的化合物反應，得到式(4-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基、R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的4-{2-氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸異丙基酯，使其與羧基導入試劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(5-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基、R33’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，用氯化氫進行甲酰基的脫保護，得到式(1-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為異丙基、R33為N-甲基氨基甲基、R34為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
28.如權利要求21所述的制備方法，其中，使式(3-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基的式(3-3)的化合物與R33’為二甲基氨基的式(2-3)的化合物反應，得到式(4-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基、R33’為二甲基氨基所示的4-{2-氨基-5-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-L-苯丙氨酸甲酯，使其與羰基導入試劑1，1’-羰基二咪唑反應，轉化成式(5-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基、R33’為二甲基氨基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，得到式(1-3)中R31為2，6-二氯苯基、R32為甲基、R33為二甲基氨基、R34為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯。
29.式(1-4)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法，該方法包括以下的步驟(a)、(b)和(c)，
[式中，
R41表示可以具有取代基的苯基、可以具有取代基的吡啶基中的任意一種，
R42表示可以具有取代基的烷基，
R43表示二烷基氨基、單烷基氨基、氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被單烷基氨基取代的烷基、或被氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種，
R44表示氫原子、烷基、可以具有取代基的芐基中的任意一種，]
(a)使式(2-4)所示的苯并噁嗪衍生物與式(3-4)所示的酰基苯丙氨酸衍生物或其化學上可以容許的鹽反應的步驟，
[式中，R43’表示二烷基氨基、單烷基氨基、可以具有保護基團的氨基、氫原子、鹵原子、烷基、全氟烷基、烷氧基、硝基、被二烷基氨基取代的烷基、被可以具有保護基團的單烷基氨基取代的烷基、或被可以具有保護基團的氨基取代的烷基、被烯基取代的烷基、被炔基取代的烷基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基、芳硫基中的任意一種，R45表示烷基或可以具有取代基的苯基，]
[式中，R41和R42的定義與上述相同，]
(b)將所得到的酰胺氨基甲酸酯衍生物(4-4)或其化學上可以容許的鹽在堿的存在下轉化成式(5-4)所示的喹唑啉二酮化合物的步驟，
[式中，R41、R42、R43’和R45的定義與上述相同，]
[式中，R41～R43’的定義與上述相同，]
(c)根據需要，用N-烷基化劑對式(5-4)中的喹唑啉二酮化合物中與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R43’被保護時進行脫保護的步驟。
30.如權利要求29所述的制備方法，其中，使用通過包括使式(6-4)所示的鄰氨基苯甲酸衍生物或其化學上可以容許的鹽與鹵甲酸烷基酯或可以具有取代基的鹵甲酸苯基酯反應的方法得到的式(2-4)所示的苯并噁嗪衍生物，
[式中，R43’的定義與上述相同]。
31.如權利要求29或30所述的制備方法，其中，式(1-4)中R43為甲基氨基甲基、二甲基氨基中的任意一種，且式(2-4)、式(4-4)、式(5-4)中R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、N-(叔丁氧基羰基)-N-甲基氨基甲基、N-乙酰基-N-甲基氨基甲基或二甲基氨基中的任意一種。
32.如權利要求29～31中任意一項所述的制備方法，其中，堿為碳酸鉀或甲醇鈉。
33.如權利要求29～32中任意一項所述的制備方法，其中，N-烷基化劑為對甲苯磺酸甲酯、甲磺酸甲酯、碘甲烷、溴甲烷或氯甲烷中的任意一種。
34.如權利要求29～33中任意一項所述的制備方法，其中，包括不分離式(4-4)和/或式(5-4)所示的化合物而連續進行反應。
35.如權利要求29所述的制備方法，其中，使式(3-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基的式(3-4)的化合物與R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R45為乙基的式(2-4)的化合物反應，得到式(4-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基、R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基、R45為乙基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-5-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，使其與碳酸鉀反應，轉化成式(5-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基、R43’為N-甲酰基-N-甲基氨基甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，轉化成Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲酰基-N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯，用氯化氫進行甲酰基的脫保護，得到R41為2，6-二氯苯基、R42為異丙基、R43為N-甲基氨基甲基、R44為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-(N-甲基氨基甲基)喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸異丙基酯或其鹽酸鹽。
36.如權利要求29所述的制備方法，其中，使式(3-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基的式(3-4)的化合物與R43’為二甲基氨基、R45為乙基的式(2-4)的化合物反應，得到式(4-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基、R43’為二甲基氨基、R45為乙基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{2-乙氧基羰基氨基-5-二甲基氨基苯甲酰基氨基}-L-苯丙氨酸甲酯，使其與碳酸鉀反應，轉化成式(5-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基、R43’為二甲基氨基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯，然后使用對甲苯磺酸甲酯進行N-烷基化，得到式(1-4)中R41為2，6-二氯苯基、R42為甲基、R43為二甲基氨基甲基、R44為甲基所示的Nα-(2，6-二氯苯甲酰基)-4-{1-甲基-6-二甲基氨基喹唑啉-2，4[1H，3H]-二酮-3-基}-L-苯丙氨酸甲酯。
37.選自由下式組成的組中的化合物或其化學上可以容許的鹽，
[化學式2]
38.選自由下式組成的組中的化合物或其化學上可以容許的鹽，
[化學式3]
全文摘要
本發明提供包括以下的步驟(a)、(b)和(c)的式(1)所示的具有喹唑啉二酮環的苯丙氨酸衍生物或其可藥用鹽的制備方法。(a)通過使式(2)所示的酰基苯丙氨酸衍生物與羰基導入試劑和特定的鄰氨基苯甲酸衍生物反應，得到對應的羧基不對稱脲衍生物的步驟，(b)將該羧基不對稱脲衍生物在羧基活化劑的存在下轉化成對應的喹唑啉二酮化合物的步驟，(c)根據需要，用N-烷基化劑對該喹唑啉二酮化合物的與喹唑啉二酮環中的氮原子鍵合的氫原子進行N-烷基取代的步驟，以及R3′(對應于R3的基團)被保護時進行脫保護的步驟。根據該方法，可以以適合于工業化的高收率制備具有喹唑啉二酮骨架的苯丙氨酸衍生物。
文檔編號C07C237/40GK101589028SQ20078005029
公開日2009年11月25日 申請日期2007年11月22日 優先權日2006年11月22日
發明者片岡范康, 岡戶康太朗, 山田龍大, 藤田康一, 鈴木保, 奧住龍哉, 杉木正之, 多多良明訓 申請人:味之素株式會社