專利名稱：：白蛋白結(jié)合分子及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及方便的白蛋白結(jié)合劑，其有效用于提高診斷劑或治療劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性，特別是增加所述試劑的血液循環(huán)時(shí)間和/或組織滲透能力。
背景技術(shù)：
：藥物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性是藥物在人體內(nèi)發(fā)揮藥物作用的主要決定因素。在大部分情形中，藥物需要在生物體內(nèi)停留足夠久，在適當(dāng)?shù)捏w室(bodycompartments)內(nèi)產(chǎn)生足夠高的濃度以足以展示理想的藥理學(xué)功能(例如，藥物與其受體的結(jié)合)。在許多情形中，小藥物的理想的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性是與白蛋白的特定結(jié)合能力的結(jié)果，白蛋白是血液中最豐富的蛋白質(zhì)，濃度約為600^M。制藥公司可以經(jīng)驗(yàn)性地篩選它們的目的藥物的適宜的白蛋白結(jié)合特性。然而，該方法有有限的用途，原因在于在大部分情形中，分子的白蛋白結(jié)合性質(zhì)與負(fù)責(zé)理想的藥理學(xué)作用的分子的部分密切相關(guān)。盡管因此己知許多白蛋白結(jié)合分子，但是大部分已知的白蛋白結(jié)合劑是不"方便的(portable)",在這種意義上，在不丟失白蛋白結(jié)合或其它相關(guān)的藥學(xué)特性的條件下，它們不能容易地與其它生物活性部分偶聯(lián)。溴酚藍(lán)和布洛芬，在生化和制藥科學(xué)中的兩種非常公知的分子，可以作為舉例說明該情形的實(shí)例。溴酚藍(lán)是一種強(qiáng)白蛋白結(jié)合劑，其與白蛋白形成在通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分析時(shí)穩(wěn)定的復(fù)合物。然而，溴酚藍(lán)的相對復(fù)雜的化學(xué)結(jié)構(gòu)缺少適于使該分子與其它制藥學(xué)目的分子(例如，小的有機(jī)藥物或蛋白藥物)容易偶聯(lián)的官能團(tuán)。布洛芬，一種最廣泛應(yīng)用的抗炎藥，以微摩爾范圍的解離常數(shù)與白蛋白結(jié)合。然而，當(dāng)人們嘗試修飾該分子的羧酸基團(tuán)時(shí)(例如，通過形成酰胺鍵)，以便使布洛芬與其它生物制藥目的部分偶聯(lián)，布洛芬便失去其白蛋白-結(jié)合的親和性。不過，已經(jīng)將白蛋白的長久的循環(huán)時(shí)間用于藥物和白蛋白的直接綴合。例如，在遺傳水平上已將許多治療多肽融合到白蛋白上(EPO、干擾素、白介素、治療肽)，并且已經(jīng)在臨床中研究了一些相應(yīng)的融合蛋白[O]。一個(gè)實(shí)例是將化療劑直接偶聯(lián)到人血清白蛋白表面上唯一的半胱氨酸殘基(Cys34)上。Kratz和同事已經(jīng)利用抗癌化療藥多柔比星的伯氨基基團(tuán)或羰基基團(tuán)進(jìn)行該藥物與人白蛋白的Cys34殘基的位點(diǎn)-特異性偶聯(lián)。針對它們水解由此釋放藥理學(xué)活性多柔比星部分的能力選擇用作多柔比星和白蛋白之間的接頭的化學(xué)部分[O]。作為一個(gè)代表性的實(shí)例，DOXO-EMCH的最大耐受劑量是未修飾的多柔比星的2-10倍高，并且在荷瘤小鼠中，DOXO-EMCH可以以2-10倍于多柔比星摩爾當(dāng)量的量注射，與未綴合的多柔比星相比具有更低的毒性和更有效的治療作用。關(guān)于預(yù)先配制的多柔比星-HSA綴合物已經(jīng)報(bào)道了相似的結(jié)果[3]。該蛋白衍生物目前正處于臨床研究中[4]。使用可以在體內(nèi)關(guān)節(jié)炎部位通過基質(zhì)金屬蛋白酶優(yōu)先裂解的肽接頭，同一小組以相似的方式將甲氨蝶呤化學(xué)偶聯(lián)到白蛋白上。相應(yīng)的蛋白-藥物綴合物可以視作藥物前體，并且目前處于藥物開發(fā)中。然而，蛋白-藥物綴合物的一個(gè)嚴(yán)重的常見缺點(diǎn)在于它們在人中可能是免疫原性的[5]。因此，可能不考慮直接綴合作為尋找藥物與白蛋白締合并且由此提高它們的藥物特性的方式的問題的一般解決方案。一般的適用解決方案將由方便的白蛋白結(jié)合分子提供，所述白蛋白結(jié)合分子即為一方面具有針對白蛋白的選擇親和性且另一方面可以連接于任何目的藥物上的分子。白蛋白的一種生理作用是作用為脂肪酸的載體。該特性己經(jīng)用來使藥物與白蛋白締合。例如，商業(yè)上公知的胰島素衍生物特征在于通過與十四烷酸(Levemir)形成酰胺而共價(jià)修飾胰島素部分。這一長脂肪酸鏈賦予胰島素某些有利的性質(zhì)，包括延長的血液清除，這在考慮白蛋白的脂肪酸-結(jié)合特性時(shí)能夠預(yù)測到。然而，該方法的缺點(diǎn)在于，它不易于適用于其它分子。特別地，不適用于溶解性較低的蛋白或小的藥物，原因在于所形成的衍生物的不可接受的低水溶性。近來，Genentech科學(xué)家已經(jīng)報(bào)道二硫化物-限制的白蛋白-結(jié)合肽作為方便的標(biāo)記的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用，其用于改變生物制藥相關(guān)的蛋白(例如，抗體片段)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，賦予它們在血液中長久的血液循環(huán)時(shí)間[6]。最近，一些生物技術(shù)公司(例如，Domantis，Affibody)已經(jīng)以相似的方式通過基因融合開發(fā)了小球蛋白的突變體作為"方便的"白蛋白結(jié)合劑，以賦予目的藥物蛋白的緩慢血液清除特性[7-10]。然而，作為賦予白蛋白對藥物的親和性的賦形劑，肽和蛋白不是理想的。肽和蛋白是可能通過消化或變性而破壞的易變分子，并且因此特別難以口服施用。因此，通常這樣的藥物必須通過注射施用，與口服途徑相比，注射引起不便。同樣地，除了藥物領(lǐng)域之外，對于控制和提高診斷劑如診斷顯像劑和造影劑的血液停留時(shí)間和組織分布也存在需要。熒光素是舉例說明所述需要的一個(gè)很好的實(shí)例。熒光素通常用在眼科學(xué)中用于熒光血管造影成像方法，在美國和歐洲每年有超過一百萬次注射。令人非常吃驚地，熒光素不是經(jīng)核準(zhǔn)的藥物試劑。在大部分情形中，在靜脈內(nèi)注射之前，醫(yī)師必須制備3-5ml熒光素鈉水溶液(10°/。)。熒光素非?？焖俚貜难褐星宄?，并且因此必須以高劑量通過快速推注(bolusinjection)施用。然而，在這樣高的劑量，熒光素在至多20%的患者中引發(fā)惡心和嘔吐，這取決于患者群體。在黑種人、亞洲人、華裔亞洲人或混合種族來源的患者中，這些并發(fā)癥更常見[o]。更嚴(yán)重的反應(yīng)不常見，但是包括蕁麻疹、喉頭水腫、支氣管痙攣、昏厥、過敏性反應(yīng)、心肌梗死和心動(dòng)停止[12]。在注射過程中熒光素染料的外滲可能是血.管造影術(shù)的一個(gè)嚴(yán)重并發(fā)癥。具有8-9.8的溶液pH，熒光素滲透可能是非常疼的。已經(jīng)報(bào)道了在熒光素外滲之后的皮膚蛻皮、局部壞死、皮下肉芽腫和中毒性神經(jīng)炎。盡管在血管造影術(shù)過程中威脅生命的反應(yīng)是罕見的，但是它們可能出現(xiàn)的可能性使得血管造影設(shè)備應(yīng)該適當(dāng)?shù)匮b備并且準(zhǔn)備好處理對該方法的嚴(yán)重反應(yīng)成為必要。減少注射的速率可以減少副反應(yīng)的危險(xiǎn)或嚴(yán)重性。然而，這減弱成像敏感性。因此，例如存在對這樣的熒光素衍生物的需要，所述熒光素衍生物更好且更久地保持在血管空間內(nèi)，并且特別地，較不易于被代謝或外滲。這樣的衍生物將允許施用更低的劑量，因此減少副作用和并發(fā)癥的可能性和嚴(yán)重性，并且此外將導(dǎo)致提高的圖像質(zhì)量。相似的考慮適用于磁共振成像(MRI)造影劑。目前的細(xì)胞外MRI造影劑受到相對短的半衰期的限制，并且也自由地外滲到背景肌肉中，其在穩(wěn)定狀態(tài)成像過程中降低造影-比-噪聲的比例。對于MRI和磁共振血管造影應(yīng)用中的常規(guī)臨床應(yīng)用，理想的是造影劑應(yīng)該選擇性保留在血管空間內(nèi)，并且具有延長的血液半衰期，以在1小時(shí)的成像機(jī)會(huì)中提供足夠的血漿濃度。為了促進(jìn)多個(gè)身體區(qū)域成像和獲得冠狀動(dòng)脈的長久、脈沖-門控的掃描，延長的血液半衰期是必需的[13]。許多小組目的是提高造影劑如Gd-DTPA(Magnevi,)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性，其通過將該部分偶聯(lián)到方便的白蛋白結(jié)合劑上而進(jìn)行。然而，這樣的白蛋白結(jié)合劑的解離常數(shù)限于100pM的量級[14]。因此，例如，為了延長它們的半衰期并且提高它們的弛豫特性，保持對于改善造影劑如Gd-DTPA的需求。因此，在鑒定和開發(fā)可以用作方便的白蛋白結(jié)合部分用于偶聯(lián)到寬范圍的藥學(xué)目的分子(例如，小有機(jī)分子藥物、蛋白藥物、或診斷劑、例如，用于各種形式的醫(yī)學(xué)成像)上的小有機(jī)分子中存在大量的興趣。然而，迄今為止鑒定可以用作方便的白蛋白結(jié)合劑的小有機(jī)分子的嘗試的成功是有限的[15]。特別關(guān)注的領(lǐng)域是與白蛋白結(jié)合的強(qiáng)度、結(jié)合白蛋白的綴合物的體內(nèi)化學(xué)穩(wěn)定性、和方便的程度(特別是，對于任何藥物或藥物種類，不僅是對于某些有利的藥物實(shí)例，應(yīng)該理想地獲得所述綴合物的良好藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性)。為了允許開發(fā)不違反Lipinski，s五原則的藥劑[16]，需要最小化方便的白蛋白結(jié)合劑的大小。方便的白蛋白結(jié)合劑的其它理想的特性包括結(jié)合選擇性(即，區(qū)分白蛋白和其它分子)、易于合成可達(dá)性、容易與目的(生物)藥物分子綴合、良好的水溶性和不存在固有的毒性。迄今為止，提供組合這些有利特性的白蛋白結(jié)合劑尚是不可能的
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明概述本發(fā)明提供一種新種類的白蛋白-結(jié)合化合物及其與藥學(xué)目的分子、特別是治療劑和/或診斷劑的綴合物。以下所述藥學(xué)目的分子可以簡單稱為"藥劑"。按照本發(fā)明，所述化合物和綴合物能夠與白蛋白結(jié)合，即，它們具有針對白蛋白的親和性。因此，以下本發(fā)明的化合物和綴合物可以統(tǒng)稱為白蛋白結(jié)合劑。優(yōu)選地，本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物還選擇性地與白蛋白結(jié)合，S卩，具有優(yōu)于其它結(jié)合配偶體的偏愛性。所述化合物容易制備，并且通過本領(lǐng)域已知的化學(xué)方法可以方便地綴合(即，連接、偶聯(lián)、共價(jià)結(jié)合)到寬范圍的其它分子(特別是所述藥劑)上。當(dāng)與診斷劑或治療劑綴合時(shí)，本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物有利地改變所述藥劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性。特別地，本發(fā)明所述的綴合增加藥劑的血液循環(huán)時(shí)間(備選地稱為血液清除，或血液清除時(shí)間)，即，生理半衰期。因?yàn)槔帽景l(fā)明所述的白蛋白結(jié)合部分，所述藥劑將與白蛋白結(jié)合保留在血流中，故與本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物的綴合允許藥劑較不快速地清除和/或降解。因此，當(dāng)應(yīng)用于，例如，快速代謝或另外清除的藥劑，例如大分子，特別是抗體片段或較小的球狀結(jié)合蛋白，或?qū)τ谄涓行У暮透志玫谋Ａ粼谘髦惺抢硐氲娜魏纹渌巹┗蚍肿永鐭晒馑?、熒光素衍生物、或用于成像目的MRI或X-射線研究的造影劑如用于MRI的Gd-DTPA時(shí)，本發(fā)明的上述方面是有利的。按照本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物賦予它們與之綴合的藥劑更好的組織滲透能力。在本文中，表述"組織滲透能力"可以一方面是指藥劑的組織滲透程度，或另一方面是指藥劑的組織滲透性的特異性或選擇性，或是指組織滲透性的這些方面中的二者。為了本發(fā)明的目的，通過在不同時(shí)間點(diǎn)后對需要的組織內(nèi)的藥物/試劑的定量而測量組織滲透性。優(yōu)選地，這通過在注射之前標(biāo)記分子(例如，放射性、熒光)或通過液相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC/MS/MS)直接定量而實(shí)現(xiàn)。血液半衰期和組織-滲透性是相關(guān)的，如在參考文獻(xiàn)18中關(guān)于不同形式的抗體和抗體片段的情形的描述，其中表明血清半衰期的增加與在腫瘤內(nèi)積聚的增加相關(guān)。因此，當(dāng)應(yīng)用于，例如可以使用白蛋白作為賦形劑而靶向它們的目的作用位點(diǎn)的藥劑時(shí)，本發(fā)明的上述方面將是有利的。因此，抗癌藥可以有效靶向利用白蛋白作為營養(yǎng)的快速生長的腫瘤。14由本發(fā)明所有上述方面產(chǎn)生的益處是將本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物綴合到治療劑或診斷劑上可以允許所述藥劑以較低的劑量施用給患者或受試者。因此，本發(fā)明的這種益處降低了所述藥劑的副作用、不利反應(yīng)或并發(fā)癥的危險(xiǎn)和/或嚴(yán)重性。例如，當(dāng)將診斷顯像劑如熒光團(tuán)或造影劑綴合到本發(fā)明的化合物上時(shí)，所得到的所述藥劑的綴合衍生物，其能夠與白蛋白非共價(jià)結(jié)合，其特征在于，與非衍生化的藥劑相比較，更緩慢的血液清除模式，并且允許例如，從血管獲得更高的信號強(qiáng)度(例如，熒光、磁共振、X-射線、正電子發(fā)射斷層掃描(PET)或單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)化斷層顯象(SPECT)信號)，因此允許施用較低劑量并且還產(chǎn)生更好質(zhì)量的診斷成像(例如，血管造影片、MRI成像、和X-射線成像或PET)。這特別是例如關(guān)于熒光素及其衍生物的情形，以及它們在眼科血管造影中的應(yīng)用。鑒于它們的親和性、溶解性和藥物代謝動(dòng)力學(xué)行為，因此，本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物理想地適用于，例如，與造影劑如Gd-DTPA偶聯(lián)，因此延長半衰期并且提高弛豫特性(優(yōu)選地，與不與本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物偶聯(lián)的造影劑相比，縮短的弛豫時(shí)間)。本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物的一般優(yōu)點(diǎn)在于，由于它們相對小的尺寸和良好的溶解性，它們可以用來賦予小分子藥劑以白蛋白結(jié)合親和性，而基本不影響所述小分子藥劑的溶解性或其它藥理學(xué)相關(guān)特性。本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物的其它優(yōu)點(diǎn)在于，它們普遍是方便的，即，高度通用的。即，所述化合物可以綴合到任何藥劑上，條件是所述要綴合的藥劑包括能夠與白蛋白-結(jié)合化合物鍵合的官能團(tuán)，即，所述官能團(tuán)能夠進(jìn)行反應(yīng)以便所述藥劑變得與所述白蛋白-結(jié)合化合物鍵合，或條件是可以將所述官能團(tuán)引入到所述藥劑中。按照本發(fā)明，本發(fā)明的化合物用于所述綴合的應(yīng)用，形成本發(fā)明的綴合物，其中本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物的殘基可以直接或間接地與目的藥劑的殘基鍵合。本發(fā)明還提供所述綴合物的醫(yī)學(xué)、治療和診斷應(yīng)用。發(fā)明詳述本發(fā)明所述的化合物本發(fā)明提供由式1表示的方便的白蛋白-結(jié)合化合物種類:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中E是至多6個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈、或環(huán)狀烴基基團(tuán)，其任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，任選地被選自F,CI,Br,I,支鏈、非支鏈或環(huán)狀C,-C10烴基基團(tuán)，OR9,OCOR9,COOR9,CHO，COR9，CH2OR9，NR9R10,CH2NR9R1(),SR9,=0,=S和=麗的至多6個(gè)基團(tuán)取代；X是O或S;A是NH,O，S或CR9R1();d是至多io個(gè)原子的官能團(tuán)，其帶負(fù)電荷，或可以被去質(zhì)子化以產(chǎn)生負(fù)電荷；W和RS獨(dú)立地選自H,F，Cl，Br,1,支鏈、非支鏈或環(huán)狀C,一C1()烴基,OR9,OCOR9，COOR9，CH2OR9，CHO，COR9，NR9r"和SR9;或者R1和112連接形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，其包括支鏈、非支鏈或環(huán)狀C,-do烴基(其中所述烴基任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，并且任選地被獨(dú)立地選自F，CI,Br,I,OR9,OCOR9,COOR9，CHO,COR9,CH2OR9，NR9R10，CH2NR9R10,SR9,=0,=S和=NH的至多3個(gè)基團(tuán)取代)；B包含至多30個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈或環(huán)狀烴基，任選地被至多10個(gè)雜原子或至多20個(gè)氨基酸殘基的肽鏈中斷，其中B任選地被選自F，CI,Br,I,=0,OR9,OCOR9,COOR9,CN，NR9,NR9R1C),=S，和SR9的1-5個(gè)基團(tuán)取代，條件是B在基團(tuán)D和基團(tuán)A之間的鏈中包含至少3個(gè)原子；Y是能夠與治療劑或診斷劑分子結(jié)合的官能團(tuán)；并且119和111()獨(dú)立地選自下組H和支鏈、非支鏈和環(huán)狀do烴基，或其鹽。本發(fā)明還提供由式2表示的白蛋白-結(jié)合綴合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>(式2)其中E是至多6個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈或環(huán)狀烴基，任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，任選地被選自F，CI,Br,I,支鏈、非支鏈或環(huán)狀d-C,o烴基基團(tuán)，OR9,OCOR9,COOR9,CHO,COR9，CH2OR9,NR9R10,CHzNR9!^0,SR9,=0,=S和=麗的至多6個(gè)基團(tuán)取代；X是O或S;A是NH,O,S或CR9R^;D是至多10個(gè)原子的官能團(tuán)，其帶負(fù)電荷，或可以被去質(zhì)子化以產(chǎn)生負(fù)電荷；R1和R2獨(dú)立地選自H,F,Cl,Br,I，支鏈、非支鏈或環(huán)狀C,-C1()烴基,OR9,OCOR9,COOR9,CH2OR9,CHO，COR9，服9111()和SR9;或者R1和R2連接形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，其包含支鏈、非支鏈或環(huán)狀Q-C1Q烴基(其中所述烴基任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，并且任選地被獨(dú)立地選自F,CI,Br,I，OR9,OCOR9,COOR9,CHO，COR9,CH2OR9,NR9R10,CH2NR9R10,SR9,=0，=S和=NH的至多3個(gè)基團(tuán)取代)；B包含至多30個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈或環(huán)狀烴基，任選地被至多10個(gè)雜原子或至多20個(gè)氨基酸殘基的肽鏈中斷，其中B任選地被選自F,CI,Br，I，=0,OR9,OCOR9,COOR9,CN,NR9,NR9R1Q,=S，和SR9的1-5個(gè)基團(tuán)取代，條件是B在基團(tuán)D和基團(tuán)A之間的鏈中包含至少3個(gè)原子；Y'是能夠與治療劑或診斷劑分子結(jié)合的官能團(tuán)的殘基；Z包含治療劑或診斷劑分子的殘基以及任選地接頭；并且W和RW獨(dú)立地選自下組H和支鏈、非支鏈和環(huán)狀d-Cu)烴基，或其藥用鹽。按照優(yōu)選實(shí)施方案，部分E包含由式3表示的部分(式3)其中R3-R8獨(dú)立地選自H,F,Cl,Br,1,支鏈、非支鏈或環(huán)狀d—C1()烴基,OR9,OCOR9,COOR9,CHO,COR9,CH2OR9,NR9R10,CH2NR9R1(^。SR9;或者取代基對W和R"—起，115和RS—起，或W和RS—起任選地獨(dú)立選自下組=0，=SfH=NH。在本發(fā)明的其它優(yōu)選實(shí)施方案中，部分E包括由式4表示的部分其中RS和RM蟲立地選自H,F,Cl,Br,1,支鏈、非支鏈或環(huán)狀Q-C1()烴基，OR9,OCOR9,COOR9,CHO,COR9，CH2OR9，NR9R10,CH2NR9R1(^nSR9;或者取代基對RS和R"—起任選地獨(dú)立選自下組=0,=8和=,。本發(fā)明的化合物和綴合物能夠結(jié)合白蛋白，即，它們具有針對白蛋白的親和性。它們的化合物親和性優(yōu)選是這樣的，以使它們的解離常數(shù)為100pM以下，更優(yōu)選地為卯，80,70,60，50,40，30,20，10,9,8,7,6,5，4,3,2，或1pM以下，更優(yōu)選地為90,80,70，60，50,40，30,20，10，9，8，7,6，5,4,3,2,或1nM以下。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物和綴合物選擇性與白蛋白結(jié)合。如果白蛋白結(jié)合劑以比對備選結(jié)合配偶體更高的親和力結(jié)合白蛋白，則認(rèn)為所述白蛋白結(jié)合劑關(guān)于備選的結(jié)合配偶體具有針對白蛋白的選擇親和性，其中關(guān)于所述白蛋白結(jié)合劑與所述備選結(jié)合配偶體結(jié)合的解離常數(shù)是關(guān)于所述白蛋白結(jié)合劑與白蛋白結(jié)合的解離常數(shù)的至少1.5-倍，優(yōu)選地至少2-，3-，5-，10-，15-,20國，25-,30-,35-,40隱，45-,50-,60畫，70-,80-，90誦，100-200-，300-，400-,500-，750-，或1000-倍。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，部分B以及基團(tuán)D包含氨基酸殘基。氨基酸是包含酸和氨基官能團(tuán)的任何有機(jī)分子。所述基團(tuán)的一個(gè)或二者可以任選地進(jìn)行衍生化。氨基和酸性團(tuán)可以相對于彼此處在任何位置，但是(式4)氨基酸典型地包括2-氨基羧酸、3-氨基酸羧酸、4-氨基羧酸等，即，在優(yōu)選實(shí)施方案中，依據(jù)IUPAC命名習(xí)慣[O，O]，氨基基團(tuán)處在編號為2，3,4,5,6，7,8，9,10,11,12,13,14,15,16,17,18，19，20等的原子上。遵循本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的備選的命名習(xí)慣，所述氨基酸可以是(x-，P-，y-,5-,e-(等)直到co-氨基酸。在優(yōu)選實(shí)施方案中，氨基酸可以是氨基羧酸[例如，O,O]。然而，在其它實(shí)施方案中，氨基酸上的酸性團(tuán)選自下組-OP03H,-P03H,-OS03H和-S03H。在優(yōu)選實(shí)施方案中，所述氨基酸是天然存在的氨基酸，或其衍生物。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述氨基酸是alpha(a-)氨基酸，其中所述氨基酸可以是D-或L-氨基酸。優(yōu)選地，所述氨基酸是選自下組的氨基酸的D-或L-對映異構(gòu)體精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、組氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸和/或纈氨酸。最優(yōu)選地，所述氨基酸是D-賴氨酸或L-賴氨酸。在使用D-對映異構(gòu)體的實(shí)施方案中，D-對映異構(gòu)體的使用可以提供進(jìn)一步降低新陳代謝速率并且由此減少從血流中的清除的有益作用。在優(yōu)選實(shí)施方案中，當(dāng)B或B-D包含氨基酸殘基時(shí)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的，Y可以方便地是所述氨基酸的氨基基團(tuán)，最優(yōu)選地是(x-氨基酸的alpha(a-)氨基基團(tuán)。按照本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，B可在生理?xiàng)l件下裂解，優(yōu)選地在來源于本發(fā)明的綴合物中的治療劑或診斷劑的部分的理想作用部位處發(fā)現(xiàn)的體內(nèi)條件下裂解。因此，按照一些實(shí)施方案，在所述部位發(fā)現(xiàn)的條件是病理生理學(xué)條件，盡管按照其它實(shí)施方案，所述條件是在特定的組織或細(xì)胞類型中發(fā)現(xiàn)的正常條件。病理生理學(xué)條件優(yōu)選是在癌組織中、在腫瘤部位、在炎癥、凝固或病理斑形成(例如，動(dòng)脈粥樣硬化形成或淀粉樣斑形成)的部位等處發(fā)現(xiàn)的條件。所述部分B優(yōu)選地可通過水解裂解，更優(yōu)選地通過酶的作用裂解，即，酶促裂解。按照優(yōu)選實(shí)施方案，所述裂解是通過酰胺分解或蛋白水解，艮口，通過肽酶或蛋白酶作用。按照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，部分B因此可以通過酶裂解，即，B包含可以作為酶的底物的裂解位點(diǎn)。優(yōu)選地，所述酶是水解酶，更優(yōu)選地是酰胺分解酶、肽分解酶或蛋白水解酶(蛋白酶)。合適的酶裂解位點(diǎn)，特別是蛋白水解位點(diǎn)，是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的[21]，并且包括用于由酶裂解的位點(diǎn)，所述酶如金屬蛋白酶(基質(zhì)金屬蛋白酶、或冠毛素(pappalysins)或蛇毒蛋白酶)、絲氨酸蛋白酶(例如，凝血酶、彈性蛋白酶、凝血因子、纖維蛋白溶酶、組織纖溶酶原激活物、尿激酶或纖溶酶原激活物)、或半胱氨酸蛋白酶(諸如組織蛋白酶)、羧酸蛋白酶、蘇氨酸蛋白酶或谷氨酸蛋白酶。優(yōu)選地，所述裂解位點(diǎn)與選自下組的酶有關(guān)葡糖醛酸糖苷酶、尿激酶型纖溶酶原激活物、基質(zhì)金屬蛋白酶、前列腺特異性抗原、人腺激肽釋放酶2、纖維蛋白溶酶，組織蛋白酶B和PSMA。按照本發(fā)明的某些實(shí)施方案，部分B包含肽。所述肽優(yōu)選地包含2個(gè)或更多個(gè)氨基酸殘基，優(yōu)選為3,4,5,6,7,8,9，10,11,12，13，14,15，16，17,18,19,20個(gè)氨基酸殘基。最優(yōu)選地，所述肽包含上述裂解位點(diǎn)[21]，艮卩，優(yōu)選地蛋白酶裂解位點(diǎn)，并且其優(yōu)選在特定的病理生理?xiàng)l件下裂解。按照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，當(dāng)本發(fā)明化合物或綴合物的部分B不包含可裂解的接頭時(shí)，本發(fā)明所述的化合物的一般種類可以進(jìn)一步通過可裂解的接頭、優(yōu)選是可在體內(nèi)水解的接頭擴(kuò)大。因此，在優(yōu)選實(shí)施方案中，可以利用可以通過蛋白酶裂解的一個(gè)或多個(gè)氨基酸接頭或肽、可以在37。C水解的席夫堿[20]、可裂解的酯類或表現(xiàn)出在充分的體外穩(wěn)定性與充分的體內(nèi)快速且優(yōu)選選擇性裂解性之間的適宜的折中(compromise)的其它化學(xué)部分，使治療劑或診斷劑與本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物偶聯(lián)。如上文參考式2提及的，因此接頭可以任選地包含在部分Z內(nèi)，所述接頭優(yōu)選是可裂解的，更優(yōu)選是可在體內(nèi)水解的，最優(yōu)選是在限定的條件下在體內(nèi)選擇性裂解。其適用于本文中其中定義了Z的其它式?；鶊F(tuán)D優(yōu)選地是酸性團(tuán)或其共軛堿，并且更優(yōu)選地選自下組OP03H，P03H,OS03H,S03f^nCOOH,優(yōu)選為COOH，或其共軛堿(磷酸鹽，膦酸鹽，硫酸鹽，磺酸鹽和羧酸鹽)，其中在前述式中的氫原子H用負(fù)電荷取代。在存在適當(dāng)?shù)馁|(zhì)子受體(堿)的條件下，酸性團(tuán)去質(zhì)子化產(chǎn)生它們的共軛堿。技術(shù)人員明白并且能夠預(yù)測發(fā)生所述去質(zhì)子化的環(huán)境。在本發(fā)明的化合物和綴合物中的烴基或烴基殘基是烴基團(tuán)的殘基，即，烴鏈基團(tuán)，其優(yōu)選地獨(dú)立選自下組烷基、烯基、炔基、芳基和芳烷基。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"烷基"包括具有1-30個(gè)碳原子的直鏈、支鏈和環(huán)狀鏈基團(tuán)，優(yōu)選具有1-20，1-15，1-10,1-8，1-6,1-4,1-3或1-2個(gè)碳原子的直鏈、支鏈和環(huán)狀鏈基團(tuán)。烷基殘基的具體實(shí)例為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、戊基、己基、辛基、癸基、十一垸基、十二垸基、十三垸基、十四垸基、十五垸基、十六烷基、十七垸基、十八垸基、十九烷基、二十烷基(icosyl)、二H—"烷基(henicosyl)、二十二烷基、二十三烷基、二十四烷基、二十五垸基、二十六垸基、二十七垸基(heptacosyl)、二十八烷基、二十九烷基或三十烷基(triacosyl)，包括其各種支鏈和/或環(huán)狀異構(gòu)體，例如，叔-丁基或異戊基等。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"環(huán)狀"包括術(shù)語"多環(huán)"，其是指具有多于一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)。特別地，術(shù)語"環(huán)狀"還指螺環(huán)結(jié)構(gòu)，其中兩個(gè)或更多個(gè)環(huán)具有一個(gè)共用原子，和稠合多環(huán)結(jié)構(gòu)，其中兩個(gè)或更多個(gè)環(huán)具有至少兩個(gè)共用原子。所述稠合多環(huán)結(jié)構(gòu)的優(yōu)選實(shí)施方案是金剛烷或其殘基(金剛'烷基基團(tuán))。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"烯基"包括具有2-30個(gè)碳原子的直鏈的、支鏈和環(huán)狀的鏈基團(tuán)，優(yōu)選地具有2-20，2-15,2-10，2-8,2-6，2-4,或2-3個(gè)碳原子的直鏈的、支鏈和環(huán)狀的鏈基團(tuán)，其包含至少一個(gè)碳-碳雙鍵。"烯基"基團(tuán)的具體實(shí)例是關(guān)于垸基基團(tuán)提供的那些的各種烯不飽和等價(jià)物，其根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的習(xí)慣[17,19]命名，取決于一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵的數(shù)目和位置，例如，丁二亞基-，l-丙-3-亞基。"烯基"基團(tuán)優(yōu)選地包含至少1個(gè)、更優(yōu)選地至少2，3,4,6,7,8,9,10,11，12,13,14,15,或16個(gè)雙鍵，其中雙鍵優(yōu)選地位于烴基鏈的位置1，2，3,4,5,6,7,8，9,10,12，13,14,15，16，17,18,19，20，21，22,23,24，25,26，27，28或29。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"炔基"包括具有2-30個(gè)碳原子的直鏈的、支鏈和環(huán)狀的鏈基團(tuán)，優(yōu)選地具有2-20,2-15,2-10，2-8，2-6,2-4，或2-3個(gè)碳原子的直鏈的、支鏈和環(huán)狀的鏈基團(tuán)，包含至少一個(gè)碳-碳三鍵。"炔基"基團(tuán)的具體實(shí)例是關(guān)于垸基和烯基基團(tuán)給出的那些的各種炔不飽和等價(jià)物，其根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的習(xí)慣[17，19]命名，取決于一個(gè)或多個(gè)碳-碳三鍵的數(shù)目和位置。"炔基"基團(tuán)優(yōu)選地包含至少1個(gè)、更優(yōu)選地至少2，3,4,6,7,8，9，10,11,12,13,14,15,或16個(gè)三鍵，其中雙三鍵優(yōu)選地位于烴基鏈的位置1,2,3，4,5，6,7,8,9，10，12，13,14，15,16,17,18,19，20,21,22:23，24,25,26,27，28或29處。此外，術(shù)語"炔基"包括還包含至少一個(gè)碳-碳雙鍵的"炔基"基團(tuán)，即，落入本文所用的"炔基"和"烯基"基團(tuán)的定義中的"炔基"基團(tuán)。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"芳基"是指具有2-30個(gè)、優(yōu)選2-20個(gè)、2-10個(gè)、更優(yōu)選2-6個(gè)碳原子的單環(huán)或多環(huán)或稠合多環(huán)芳香環(huán)系統(tǒng)。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"芳烷基"是指包含如本文所定義的至少一個(gè)烷基基團(tuán)和至少一個(gè)芳基基團(tuán)的基團(tuán)。在如本文定義的芳烷基基團(tuán)中，所述芳烷基通過烷基基團(tuán)與本發(fā)明的化合物或綴合物的另一個(gè)部分鍵合，例如苯甲基基團(tuán)。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"雜原子"包括N,O，S，P,優(yōu)選為N和O。在其中R'和W連接以一起形成環(huán)結(jié)構(gòu)的實(shí)施方案中，所述環(huán)結(jié)構(gòu)優(yōu)選是3-10個(gè)、更優(yōu)選地，3-9,3-8,3-7,3-6，3-5,3-4或4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基鏈，其在式1或式2的苯環(huán)的兩個(gè)位置處鍵合，即與所述苯環(huán)形成兩個(gè)鍵，以便形成與所述苯環(huán)稠合的環(huán)結(jié)構(gòu)。優(yōu)選地，所述兩個(gè)鍵優(yōu)選位于所述苯環(huán)的間位(3-)和對位(4-)，位于鄰位(2-)和間位或位于鄰位和對位。所述環(huán)結(jié)構(gòu)任選地由至多2個(gè)、優(yōu)選地1個(gè)或0個(gè)雜原子打斷。所述環(huán)結(jié)構(gòu)任選地被選自下列各項(xiàng)的至多3個(gè)、優(yōu)選地至多5,4,3,2，1或0個(gè)基團(tuán)取代F,Cl,Br，I,OR9,OCOR9,COOR9，CHO，COR9，CH2OR9,NR9R10,CH2NR9R10,SR9,=0,=S和NH。在本發(fā)明的特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述環(huán)結(jié)構(gòu)是這樣的C4鏈片段(1，4-雙自由基)，其通過其1-和4-原子與式1或式2的所述苯環(huán)連接，從而形成與所述苯環(huán)稠合的六元環(huán)，優(yōu)選地在所述苯環(huán)的間位和對位，艮P，優(yōu)選地形成間位-和對位-稠合的六元環(huán)，如在化合物539的苯環(huán)中(圖1)，其是一種有效用于合成本發(fā)明的化合物和綴合物的化合物。按照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，W和W獨(dú)立地選自下組I,Br,CH3，和H。更優(yōu)選地，R'位于對位，并且選自下組1，Br禾BCH3，并且f是H。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，R3-RS是H。獨(dú)立地，在優(yōu)選實(shí)施方案中，其W和R^也可以是H。22在本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物或在與其連接的藥劑上的任一個(gè)官能團(tuán)、或多個(gè)官能團(tuán)可以用來締合所述化合物和藥劑，條件是在所述化合物和所述藥劑上的官能團(tuán)能夠進(jìn)行反應(yīng)，以便所述化合物與所述化合物連接。優(yōu)選地，所述連接，g卩，綴合，通過共價(jià)鍵合，然而也考慮非共價(jià)鍵合(即，氫鍵、離子鍵、范德華鍵)。在本說明書中，藥劑與化合物的鍵合、連接偶聯(lián)或綴合意指所述藥劑與化合物或它們的殘基直接或通過其他分子部分間接連接。按照優(yōu)選的實(shí)施方案，Y選自下組-NH2,-SH，-OH,-CHO，-NCS，-NCO和H。優(yōu)選地，Y是-NH2。當(dāng)Y是-NH2時(shí)，本發(fā)明的化合物還包括其質(zhì)子化的形式(共軛酸)(NH3+)。在本發(fā)明化合物的優(yōu)選實(shí)施方案中，B(Y)-D包含由式5表示的部分在本發(fā)明化合物的其他優(yōu)選實(shí)施方案中，B(Y)-D包含由式6表示的部分按照其他優(yōu)選實(shí)施方案本發(fā)明的化合物由式7表(式7)按照其他優(yōu)選實(shí)施方案本發(fā)明的化合物由式8表示:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>(式8)按照優(yōu)選實(shí)施方案，B包含選自下組的殘基3-[2-(aminyl乙基)二硫代]丙酰，N-[a-馬來酰亞胺-3，-基-乙?；鵑,N，-1,4-雙-馬來酰亞胺-3，,3，，-二基-丁烷，N，N，-l,6-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-己垸,N,N，-l,2-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-乙垸，>1,:^，-1,4-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-2,3-二羥基丁烷,N-[P-馬來酰亞胺-3，-基-丙酰,N-[(3-馬來酰亞胺-3，-基-脲氨基(semicarbazyl),N,N，-l,8-雙-馬來酰亞胺-3，,3，-二基-三甘醇,N，N，-l，ll-雙-馬來酰亞胺-3，,3，-二基-四甘醇，環(huán)庚基，二甲基己二酰亞胺基，二甲基庚二酰亞胺基(pimelimidyl),二甲基環(huán)庚二亞胺基(suberimidyl),1,4-二-[3'-(2'-含硫基)-丙酰胺基]丁烷，戊二?；?，二硫代二丙?；?，酒石酸基(tartaryl),二甲基3，3'-二硫代二丙酰亞胺基，3,4-二硫代-N,N，-l，6-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-己烷，乙二醇雙-琥珀酰，N-7-馬來酰亞胺-3，-基-己?；鵑-7-馬來酰亞胺-3，-基-己?；灏被鵑-[Y-馬來酰亞胺-3，-基-丁酰基,1,6-己垸-二-乙烯砜，N-[ic-馬來酰亞胺-3，-基-十一酰，！^[^馬來酰亞胺-3，-基-十一酰脲氨基，4-[N-馬來酰亞胺-3，基-甲基]環(huán)己烷-l-羧基-[6-酰胺基己酰基],6-[3-巰基-]丙酰胺基己酰，/豕[馬來酰亞胺-3-基]-苯甲酰，4-(4-N-馬來酰亞胺-3'-基苯基)丁酰脲氨基，己二酰，3-巰基-丙酰脲氨基，N-[對-馬來酰亞胺-3-基苯基]脲基，2-巰基乙?；?，3-巰基丙酰，3-[溴乙酰氨基]丙酰，2-碘乙?；?，4-[碘乙酰基]氨基苯甲酰，4-[N-馬來酰亞胺-3，-基甲基]環(huán)己垸-l-羧基，4-[,馬來酰亞胺-3，-萄丁酰，6-[13-馬來酰亞胺-3-基-丙酰氨萄己?；?，和對-[2-巰基乙基]苯甲酰，和4-硫代丁二酰亞胺酰胺基。按照本發(fā)明的綴合物的優(yōu)選實(shí)施方案，Y'選自下組-NH-，-S-,-O-，-CO-,-NHCS-，-NHCO"和鍵。優(yōu)選地，所述鍵是共價(jià)鍵。最優(yōu)選地，Y'是-NH-。按照本發(fā)明的綴合物的優(yōu)選實(shí)施方案，B(Y'-Z)-D包含由式9表示的部分0AHO0(式9)按照本發(fā)明的綴合物的其他優(yōu)選實(shí)施方案，B(Y'-Z)-D包含由式10表示的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>按照本發(fā)明的特別優(yōu)選的實(shí)施方案，本發(fā)明的綴合物包含由式11表:的部分(式11)按照本發(fā)明的其他優(yōu)選的實(shí)施方案，本發(fā)明的綴合物包含由式12表示的部分(式12)O入HOO在其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物或綴合物，基團(tuán)RR125選自由下列各項(xiàng)組成的組:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>(式21)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>(式22)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>(式23)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>(式24)按照本發(fā)明，要綴合到本發(fā)明的化合物上的治療劑或診斷劑可以是任意類型的藥劑。術(shù)語"診斷劑"包括顯像劑。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物可以綴合到有機(jī)化合物、金屬有機(jī)化合物、包括放射性核素的化合物、核苷酸、核酸、聚合物、肽、核肽(皿cleopeptide)、蛋白、脂質(zhì)、類固醇、或其任一個(gè)的衍生物或它們的組合。優(yōu)選地，所述藥劑選自下組小分子、肽、抗體、治療性蛋白、反義寡核苷酸、和包含放射性核素的無機(jī)或有機(jī)分子或復(fù)合物。按照本發(fā)明，由于它們相對小的尺寸和良好的溶解性，所述白蛋白結(jié)合劑可以用于與小分子藥劑綴合，而基本上不影響，優(yōu)選基本上不減少所述小分子藥劑的溶解性或其他藥理學(xué)相關(guān)特征。優(yōu)選地，與本發(fā)明所述的化合物綴合的藥劑的溶解性為在不綴合時(shí)所述藥劑的至少1%，更優(yōu)選地至少5%,10%,20%,30%,40%，50%,60%，70%,80%,90%,95%,98o/o，99%或100%。在本文中，術(shù)語"小分子"是指具有小于約1500Da、特別是小于1200,1000,900，800,700,600,500,400,350，300，250或200Da的分子量的分子，優(yōu)選是有機(jī)分子。在本發(fā)明中，術(shù)語"蛋白"、"肽"或"多肽"可互換使用，并且是指任意長度的氨基酸聚合物。所述聚合物可以是直鏈的或支鏈的，它可以包含修飾的氨基酸，并且它可以被非氨基酸中斷。該術(shù)語還包括己經(jīng)天然或通過干涉修飾的氨基酸聚合物；例如，二硫鍵形成、糖基化、脂化、乙酰化、磷酸化、或任何其他操作或修飾，諸如與標(biāo)記成分綴合。所述定義還包括，例如，包含一個(gè)或多個(gè)氨基酸類似物(包含，例如，非天然氨基酸等)的多肽，以及本領(lǐng)域已知的其他修飾。多肽可以作為單鏈或締合鏈存在，并且本發(fā)明的許多多肽(mayof)可以是天然或非天然糖基化的(即，所述多肽具有與在相對應(yīng)的天然存在的多肽中發(fā)現(xiàn)的糖基化模式不同的糖基化模式)。按照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，本發(fā)明的化合物與之綴合的、或其殘基包括在本發(fā)明所述的綴合物中的治療劑分子是用于治療下列各項(xiàng)的藥物癌癥，腫瘤，心血管疾病，肥胖癥，病毒、細(xì)菌、真菌或其他感染，炎癥，神經(jīng)病癥，變性神經(jīng)病癥，精神病或病癥，抑郁癥，激素病癥，葡萄糖代謝病癥或糖尿病，或是用于避孕的藥物。在本發(fā)明中，術(shù)語"治療(thempy)"、"治療(treatment)"、"要治療(totreat)"和"治療性的(therapeutic)",分別包括"預(yù)防"、"防止"、"要防止"和"預(yù)防性的"方面。按照一些實(shí)施方案，所述治療劑是用于治療下列各項(xiàng)的藥物結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、頭頸癌、胰腺癌、胃癌或卵巢癌、或淋巴瘤、白血病、星形細(xì)胞瘤、高級星形細(xì)胞瘤、或肝細(xì)胞癌。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述藥劑是用于治療快速生長的腫瘤(優(yōu)選地，具有小于120,100，80,或60天的倍增時(shí)間的腫瘤)的藥物。在本文中，術(shù)語"腫瘤倍增時(shí)間"是指腫瘤體積加倍的時(shí)間(腫瘤體積倍增時(shí)間，參見參考文獻(xiàn)22)，如例如，在參考文獻(xiàn)23中測量。在本發(fā)明的特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述治療劑分子是用于治療特征為快速的白蛋白攝取的腫瘤的藥物。當(dāng)本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物與某種藥劑直接或通過其他連接部分(接頭)綴合時(shí)，并且本發(fā)明所定義的部分B或所述接頭在特定條件下、優(yōu)選在病理生理?xiàng)l件下可裂解時(shí)，所述裂解反應(yīng)的產(chǎn)物不再保留對白蛋白的親和性，或其對白蛋白的親和性減小。按照本發(fā)明的具體實(shí)施方案。因此本發(fā)明所述的綴合物包含在所述接頭裂解后能夠穿過和/或組織或細(xì)胞的藥劑或藥物。按照本發(fā)明的這一方面，所述綴合物因此可以是藥物前體。按照本發(fā)明的其他優(yōu)選實(shí)施方案，診斷劑分子是用于診斷影像學(xué)技術(shù)、熒光、血管造影術(shù)、熒光血管造影術(shù)、超聲波檢查法、基于磁共振的診斷方法、磁共振成像、X-射線成像、核醫(yī)學(xué)、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)化斷層顯象(SPECT)或正電子發(fā)射斷層掃描(PET)的藥齊lJ。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述藥劑是用于眼科血管造影術(shù)的熒光團(tuán)或用于x-射線或磁共振成像的造影劑。最優(yōu)選地，所述藥劑包括熒光素或釓(m)-二乙基三胺五乙酸(Gd-DTPA)、或其殘基。DTPA的^Lu-復(fù)合物同樣是優(yōu)選的。在優(yōu)選實(shí)施方案中，所述治療劑或診斷劑通過硫脲部分與部分B連接(如用在化合物"428-D-Lys-FITC"中的熒光素試劑所示例；參見下文，在"化合物的合成"(2)和實(shí)施例6中)或通過酰胺部分與部分B連接(如用在化合物"428-D-Lys-FAM"中的熒光素試劑所示例；參見下文，在"化合物的合成"(1)和實(shí)施例7中)。本發(fā)明的綴合物的實(shí)例(428-Lys-FITC,428-Lys-FAM,和428-Lys-卩-Ala-DTPA-Gd)的結(jié)構(gòu)顯示在圖7中。制備本發(fā)明的化合物和綴合物本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物和綴合物可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法合成并且偶聯(lián)到攜帶適當(dāng)?shù)墓倌軋F(tuán)的藥物上，例如合成有機(jī)化學(xué)的方法[24，特別是25]。按照優(yōu)選實(shí)施方案，本發(fā)明的化合物由圖1所示的優(yōu)選的化合物所示例的羧酸前體起始合成。羧酸前體可以商購(例如，購自西格瑪-奧得里奇(SIGMA-ALDRICH),http:〃www.sigmaaldrich.讓,以下稱為西格瑪(SIGMA),西格瑪-奧得里奇稀有化學(xué)品庫(TheSigma-AldrichLibraryofRareChemicals),以下稱為SALOR,http:〃cds.dlac.uk/cds/datasets/orgchem/isis/salor.html或Maybridge,http:〃www.mavbridge.畫)，或者可以通過本領(lǐng)域已知的方法合成[24]。圖1所示的優(yōu)選的羧酸前體可從下述來源獲得29<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>在其中X為O且A為NH的實(shí)施方案中，部分B優(yōu)選地與羧酸前體成分的羧酸綴合，如在實(shí)施例1中關(guān)于化合物428所述，由羧酸前體成分和賴氨酸、或7-氨基庚酸和賴氨酸作為提供部分B的成分。在其中X為O且A為O的實(shí)施方案中，所述羧酸前體成分的羧酸基團(tuán)優(yōu)選地與等摩爾量的偶氮二羧酸二乙酯(DEAD),三苯膦(triphenylphosphane)(PPh3)和包括部分B和羥基(-OH)基團(tuán)的成分反應(yīng)。在其中X為O且A為S的實(shí)施方案中，實(shí)施同樣的步驟，不同的是包含部分B的成分包含硫羥(巰基，-SH)替代羥基基團(tuán)。在其中X為O且A為CH的實(shí)施方案中，所述羧酸前體成分的羧酸基團(tuán)優(yōu)選地首先通過與SOCl2和痕量的DMF反應(yīng)轉(zhuǎn)化成?；?；備選地在CCU中與PPh3反應(yīng)。這之后是加入ZnBr-衍生物。在其中X為S的實(shí)施方案中，在上述關(guān)于其中X為O的實(shí)施方案的綴合反應(yīng)之后，使用Lawesson試劑將C=0基團(tuán)轉(zhuǎn)化為C=S。通常，提供部分B的分子的官能團(tuán)(例如，NH2，COOH,OH,SH等)，除了要與羧酸前體成分偶聯(lián)的基團(tuán)之外，優(yōu)選地被保護(hù)(例如，使用Fmoc基團(tuán)保護(hù)NH2、或作為叔-丁基酯保護(hù)COOH)。去保護(hù)優(yōu)選地如實(shí)施例l中所述在純化之前實(shí)現(xiàn)，或通過本領(lǐng)域已知的其他方法實(shí)現(xiàn)。按照某些優(yōu)選實(shí)施方案，對于白蛋白-結(jié)合化合物與藥劑的偶聯(lián)，并且特別是對于當(dāng)B包含肽時(shí)合成部分B，熟練的技術(shù)人員可以利用公知的肽化學(xué)技術(shù)[24-29]。在其中Y為NH2的優(yōu)選實(shí)施方案中，該伯氨基基團(tuán)可以用寬范圍的試劑修飾用于與目的分子綴合(偶聯(lián))。在優(yōu)選的實(shí)施例中，所述白蛋白-結(jié)合部分的所述NH2基團(tuán)可以通過下列進(jìn)行修飾1)通過在用l-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺(EDC)/NHS(或sulfo-NHS)，HOBt(l-羥基苯并三唑)，HBTU(O-(苯并三唑-l-基)-7V，A^7V',iV'-四甲基脲鎗(uronium)六氟磷酸酯)，HATU(0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-7V,iV，，-四甲基脲鑰六氟磷酸酯)，TSTU(AWgV',-四甲基—o(;v-琥珀酰亞胺基)脲鐵四氟硼酸酯)及其他活化后，與如琥珀酰亞胺(NHS)酯，sulfo-NHS酯，?；龋；人嵝纬甚０锋I；2)通過與異氰酸酯/異硫氰酸酯反應(yīng)時(shí)形成脲/硫脲，和3)通過與醛形成席夫堿。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，其中使用雙官能接頭增加用于連接藥物與本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合部分的化學(xué)偶聯(lián)基團(tuán)的范圍，特別優(yōu)選引入下列各項(xiàng)1)通過與NHS-酯(例如，4-馬來酰亞胺基丁酸N-羥基琥珀酰亞胺酯,GMBS)綴合引入馬來酰亞胺，或2)通過Tmut，s試劑或保護(hù)的硫醇引入硫羥基團(tuán)。備選地，優(yōu)選使用硫羥基團(tuán)的化學(xué)修飾(例如，使用馬來酰亞胺基或碘乙酰胺)使本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物與小的有機(jī)分子藥物或蛋白質(zhì)藥物偶聯(lián)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述硫羥基團(tuán)位于要偶聯(lián)到本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物上的藥劑上。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是SH，并且硫羥基團(tuán)可以直接位于本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物上。在另一個(gè)實(shí)施方案中，SH基團(tuán)可以通過上述雙官能接頭的方式引入或加入到所述白蛋白-結(jié)合化合物中。在實(shí)施例中提供用于制備本發(fā)明的代表性化合物的具體方法。31本發(fā)明所述的白蛋白-結(jié)合部分還可以通過非共價(jià)方式，例如，通過利用核苷酸、或修飾的核苷酸、部分的堿基配對，與藥物連接。藥物組合物本發(fā)明提供本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物或其藥用鹽，其用作藥物。本發(fā)明還提供包括本發(fā)明所述的白蛋白-結(jié)合綴合物或其藥用鹽、或本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物與治療劑或診斷劑結(jié)合的殘對residue)或其藥用鹽、和藥用載體的藥物組合物。還提供本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物、或本發(fā)明的白蛋白-結(jié)，化合物用于制備藥物，優(yōu)選地用于治療癌癥，心血管疾病，肥胖癥，病毒、細(xì)菌、真菌或其他感染，炎癥，神經(jīng)病癥，變性神經(jīng)病癥，精神病或病癥，抑郁癥，激素病癥，或用于避孕。藥物組合物的制備是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物的藥用鹽可以通過常規(guī)方法制備，諸如通過使白蛋白-結(jié)合綴合物的游離堿和/或酸分別與至少化學(xué)計(jì)量的理想的形成鹽的酸或堿反應(yīng)而制備。本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物的藥用鹽包括具有無機(jī)陽離子的鹽，和與有機(jī)堿形成的鹽，所述無機(jī)陽離子諸如鈉、鉀、鈣、鎂、鋅、和銨。適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)堿包括N-甲基-D-葡糖胺，精氨酸，芐星青霉素(benzathine),二乙醇胺，乙醇胺，普魯卡因和氨丁三醇。本發(fā)明所述的藥用鹽還包括源自有機(jī)酸或無機(jī)酸的鹽。適當(dāng)?shù)年庪x子包括乙酸鹽、己二酸鹽、苯磺酸鹽，溴化物，樟腦磺酸鹽(camsylate),氯化物，檸檬酸鹽，乙二磺酸鹽(edisylate)，依托酸鹽，延胡索酸鹽，葡庚糖酸鹽，葡糖酸鹽，葡糖醛酸鹽，馬尿酸鹽,海克酸鹽，氫溴酸鹽，鹽酸鹽，碘化物，伊西酸鹽，乳酸鹽，乳糖酸鹽，馬來酸鹽，甲磺酸鹽，溴甲烷，甲基硫酸鹽，萘磺酸鹽，硝酸鹽，油酸鹽，撲姆酸鹽，磷酸鹽，聚半乳糖醛酸鹽，硬脂酸鹽，琥珀酸鹽，硫酸鹽，磺基水楊酸鹽，單寧酸鹽，酒石酸鹽，對苯二酸鹽，甲苯磺酸鹽和三乙基碘(triethiodide)。本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物的藥物劑型可以以即時(shí)釋放、控釋、緩釋、或靶向藥物-遞送系統(tǒng)提供，盡管由于存在本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合部分，即，包含在本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物內(nèi)的本發(fā)明所述的白蛋白-結(jié)合化合物的殘基，包含在本發(fā)明的藥物組合物中的藥物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性也受到影響。常用劑型包括，例如，ovules,植入物，貼片，脂質(zhì)體，片劑，糖衣丸,錠劑，軟或硬殼膠囊，無定形的或結(jié)晶粉末，泡騰粉劑或片劑，氣霧劑，凍干制劑，溶液和混懸液，(微-)乳液，油膏，凝膠，霜?jiǎng)?，糊劑，泡沫劑，栓劑。取決于所用的施用途徑，涂覆或施用藥劑可能需要專門的裝置，諸如，例如，注射器和針頭、吸入器、泵、注射筆、涂藥器、專用瓶、或其他用于施用的裝置，其還可以植入體內(nèi)。藥物劑型通常由藥物、賦形劑、和容器/密閉系統(tǒng)組成。一種或多種賦形劑，也稱為無活性成分，可以加入到本發(fā)明的白蛋白結(jié)合劑中，以改進(jìn)或促進(jìn)藥物的制備、穩(wěn)定性、施用和安全性，并且可以提供實(shí)現(xiàn)理想的藥物釋放模式的方式。因此，添加到所述組合物中的賦形劑類型可以取決于各種因素，諸如例如，藥劑和/或白蛋白-結(jié)合部分的物理和化學(xué)特性，施用途徑，和制備方法。藥用賦形劑在本領(lǐng)域內(nèi)是可獲得的，并且包括在各種藥典中列出的那些(參見，例如，[30，31])。本發(fā)明的白蛋白結(jié)合劑的藥物劑型可以通過本領(lǐng)域公知的任何方法制備，諸如例如，通過常規(guī)混合、篩分、溶解、熔融、?；?、糖衣丸-制備、片劑化、混懸、擠壓、噴霧-干燥、研細(xì)、乳化、(納米/微-)包封、包埋、或凍干處理。如上所示，本發(fā)明的組合物可以包括一種或多種生理學(xué)可用的無活性成分，其促進(jìn)將活性分子加工成藥用制劑。正確的配制依賴于需要的施用途徑。對于靜脈內(nèi)注射，例如，組合物可以配制在水溶液中，如果需要的話，使用生理相容的緩沖劑，包括，例如，磷酸鹽、組氨酸、或擰檬酸鹽，用于調(diào)節(jié)制劑pH，和使用張度劑，諸如例如，氯化鈉或葡萄糖。對于透黏膜或鼻施用，半固體、液體制劑、或貼劑可能是優(yōu)選的，可能包含滲透增強(qiáng)劑。這樣的滲透劑通常在本領(lǐng)域中是已知的。對于口服施用，所述白蛋白-結(jié)合綴合物可以配制在液體或固體劑型中，并且配制成即時(shí)或控釋/緩釋制劑。適用于受試者口服的劑型包括片劑、丸劑、糖衣丸、硬和軟殼膠囊、液體、凝膠、糖漿、結(jié)晶漿液、混懸液、和乳液。本發(fā)明所述的藥物組合物還可以配制成直腸或陰道劑型，諸如栓劑或滯留灌腸劑，例如包含熟練的技術(shù)人員已知的常規(guī)栓劑基質(zhì)，諸如可可脂、甘油酯、甘油化的明膠、去極化明膠、聚乙二醇、聚山梨酸酯、或其他。對于口服施用，本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物將通常以固體劑型提供，例如以片劑或膠囊的形式，或作為水溶液或混懸液提供。固體口服劑型可以使用賦形劑獲得，所述賦形劑可以包括惰性稀釋劑、填充劑、崩解劑、粘合劑(干的和濕的)、分解延緩劑、潤滑劑、助流劑、抗粘附劑、陽離子交換樹脂、濕潤劑、抗氧化劑、防腐劑、著色劑、增甜劑和調(diào)味劑。這些賦形劑可以是合成的或天然來源的。所述賦形劑的實(shí)例包括纖維素衍生物、檸檬酸、磷酸二鈣、明膠、碳酸鎂、十二烷基硫酸鎂/鈉、甘露醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯垸酮、硅酸鹽、二氧化硅、苯甲酸鈉、山梨醇、淀粉、硬脂酸或其鹽、糖(即，葡萄糖、蔗糖、乳糖等)、滑石、西黃蓍膠漿、植物油(氫化)、和蠟。乙醇和水可以作為?；o助物。在某些情形中，用例如口味掩飾膜(taste-maskingfilm)、抗胃酸膜、或釋放延遲膜包被片劑是理想的。天然和合成的聚合物，與著色劑、糖、和有機(jī)溶劑或水結(jié)合，通常用于包被片劑，形成糖衣丸。當(dāng)與片劑相比優(yōu)選膠囊時(shí)，藥物粉末、或其混懸液、溶液可以以相容的硬或軟殼膠囊遞送。適當(dāng)?shù)亩栊韵♂寗┌ㄌ妓徕c和碳酸鈣、磷酸鈉和磷酸鈣以及乳糖。玉米淀粉和褐藻酸是合適的崩解劑。粘合劑可以包括淀粉和明膠。潤滑劑，如果存在的話，通常是硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。如果需要，片劑可以用物質(zhì)如甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯包被，以延遲在胃腸道中的吸收?？诜?yīng)用的膠嚢包括硬明膠膠囊和軟明膠膠囊，在所述硬明膠膠囊中，活性成分與固體稀釋劑混合，在所述軟明膠膠囊中，活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。對于通過皮膚或黏膜的局部施用，所述白蛋白結(jié)合劑可以配制在皮膚貼片中，作為半固體或液體制劑，例如，凝膠、(微)乳液、油膏、溶液、(納米/微)混懸液、或泡沫劑。白蛋白結(jié)合劑滲透進(jìn)入皮膚或黏膜以及下面的組織可以進(jìn)行調(diào)節(jié)，例如，使用滲透增強(qiáng)劑；親脂、親水、和兩親性賦形劑的適當(dāng)?shù)倪x擇和組合，其包括水、有機(jī)溶劑、蠟、油、合成的和天然的聚合物、表面活性劑、乳化劑；通過pH調(diào)節(jié)；和使用絡(luò)合劑。其他技術(shù)，諸如離子導(dǎo)入，可以用來調(diào)節(jié)本發(fā)明的白蛋白結(jié)合劑的皮膚滲透。透皮或局部施用將是優(yōu)選的，例如，在需要具有最小系統(tǒng)暴露的局部遞送的情形中。對于通過吸入施用，或施用到鼻，按照本發(fā)明使用的白蛋白結(jié)合劑便利地以下列形式遞送溶液，混懸液，乳液，或來自加壓包裝或噴霧器的半固體氣霧劑，通常與推進(jìn)劑如來源于甲烷和乙烷的鹵化碳、二氧化碳、或任何其他適用氣體一起使用。對于局部的氣霧劑，烴如丁垸、異丁垸、和戊烷是有效的。在加壓的氣霧劑的情形中，適當(dāng)?shù)膯挝粍┝靠梢酝ㄟ^提供遞送定量的閥門確定。例如，可以配制明膠膠囊和藥筒以用在吸入器或吹藥器中。這些典型地包含白蛋白結(jié)合劑和適當(dāng)?shù)姆勰┗|(zhì)如乳糖或淀粉的粉末混合物。配制用于通過注射進(jìn)行腸胃外施用的組合物通常是無菌的，并且可以以單位劑型存在，例如，存在于安瓿、注射器、注射筆、或多劑量容器中，后者通常包含防腐劑。組合物可以采取這樣的形式，如在油性或水性賦形劑(vehicle)中的混懸液、溶液、或乳液，并且可以包含配方試劑，如緩沖劑、張度劑、粘度增強(qiáng)劑、表面活性劑、混懸劑和分散劑、抗氧化劑、生物相容性聚合物、螯合劑、和防腐劑。取決于注射位點(diǎn)，所述賦形劑可以包含水、合成的或植物油、和/或有機(jī)共溶劑。在某些情形中，諸如使用凍干的產(chǎn)物或濃縮物的情形中，所述腸胃外制劑將在施用之前重構(gòu)或稀釋。長效制劑，提供本發(fā)明藥劑的控釋或緩釋，可以包含可注射的納米/微米粒子或納米/微米或未微粉化的晶體的混懸液。不依賴由本發(fā)明所述的白蛋白-結(jié)合部分實(shí)現(xiàn)的血液循環(huán)時(shí)間的增加，除了本領(lǐng)域己知的其他物質(zhì)之外，聚合物如聚(乳酸)、聚(乙醇酸)、或它們的共聚物可以作為控釋/緩釋基質(zhì)。其他長效制劑遞送系統(tǒng)可以以需要切口的植入物和泵的形式存在。適用于靜脈內(nèi)注射本發(fā)明的分子的載體是本領(lǐng)域公知的，并且例如，包括包含堿諸如例如氫氧化鈉的基于水的溶液，以形成離子化試劑，蔗糖或氯化鈉作為張度劑。所述基于水的溶液可以包括包含磷酸鹽或組氨酸的緩沖液?？梢约尤牍踩軇?，諸如例如，聚乙二醇。這些基于水的系統(tǒng)有效溶解本發(fā)明的藥劑，并且在系統(tǒng)施用時(shí)產(chǎn)生低的毒性。在不破壞溶解性和35毒性特征的條件下，溶液系統(tǒng)成分的比例可以顯著變化。此外，成分的身份可以變化。例如，可以使用低毒性表面活性劑，諸如聚山梨酯或泊洛沙姆，也可以使用聚乙二醇或其他共溶劑，可以加入生物相容性聚合物諸如聚乙烯吡咯烷酮，并且其他糖和多元醇可以替代葡萄糖。方便的白蛋白結(jié)合劑的應(yīng)用/治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物用于結(jié)合針對白蛋白的治療劑或診斷劑分子的應(yīng)用，即，用于賦予所述藥劑針對白蛋白的親和性，或用于增加所述藥劑針對白蛋白的親和性。優(yōu)選地，所述藥劑的親和性增高至少1.5倍，更優(yōu)選地增高至少2,3,4，5,6,7,8,9,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,150，200,250,300,400，500，600,700,800，900,1000，1500,2000,2500，3000,3500,4000,5000,7000,104，105,106,108或109倍。本發(fā)明由此提供所述化合物用于減小所述藥劑在受試者體內(nèi)代謝或降解的速率，并且由此用于增加治療劑或診斷劑分子的血液循環(huán)時(shí)間(也稱為血液清除時(shí)間，"血液清除"，或關(guān)于生理半衰期表示)的應(yīng)用。此外，本發(fā)明因此提供所述化合物用于增加所述藥劑在血管空間內(nèi)的停留時(shí)間的應(yīng)用。優(yōu)選地，所述血液循環(huán)時(shí)間或所述藥劑在血管空間內(nèi)的停留時(shí)間增加至少1.5倍，更優(yōu)選地增加至少2,3，4,5，6,7，8,9,10,20,30,40,50,60:70,80，90,100,150,200,250,300，400,500,600,700，800，900,1000,1500,2000,2500,3000，3500,4000,5000,7000,104,105,106,或107倍。此外，本發(fā)明提供所述化合物提高治療劑或診斷劑分子的組織滲透能力的應(yīng)用。組織滲透能力的提高意味著使用本發(fā)明的綴合物導(dǎo)致在特定組織中或在特定作用部位處所述綴合物和/或其中包含的或在接頭部分分裂后從其釋放的治療劑或診斷劑的更多的積累，該積累高于單獨(dú)的所述治療劑或診斷劑，即，在不與本發(fā)明所述的白蛋白-結(jié)合化合物綴合的條件下，所獲得的積累。優(yōu)選地，所述組織滲透性增加至少1.5倍，更優(yōu)選地增加至少2,3,4,5,6,7,8,9,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,150,200,250,300,400,500,600，700，800，900，1000,1500,2000,2500，3000,3500，4000，5000，7000,104,105,106,或107倍。此外，本發(fā)明提供治療疾病或病癥的方法，所述方法包括給需要所述治療的患者施用有效劑量的本發(fā)明所述的白蛋白-結(jié)合綴合物，或與治療劑或診斷劑鍵合的本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物。在優(yōu)選實(shí)施方案中，所述疾病或病癥是癌癥，心血管疾病，肥胖癥，病毒、細(xì)菌、真菌或其他感染，炎癥，神經(jīng)病癥，變性神經(jīng)病癥，精神病或病癥，抑郁癥，或激素病癥。按照本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，所述方法包括利用與本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物綴合而使所述藥劑耙向組織或作用部位。所述部位優(yōu)選包括癌細(xì)胞，腫瘤，炎癥、凝固或病理斑形成(例如動(dòng)脈粥樣硬化或淀粉樣斑形成)部位，或具有可以利用所述藥劑治療、顯現(xiàn)、或診斷的生理或病理特征的任何其他部位。按照優(yōu)選實(shí)施方案，所述組織特征在于高的白蛋白攝取速率。優(yōu)選地，所述組織是腫瘤，更優(yōu)選地是結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、頭頸癌、胰腺癌、胃癌或卵巢癌、或淋巴瘤、白血病、星形細(xì)胞瘤、高級星形細(xì)胞瘤、或肝細(xì)胞癌。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述組織是快速生長的腫瘤(優(yōu)選地，具有小于120,100,80,或60天的倍增時(shí)間的腫瘤)。按照其他優(yōu)選實(shí)施方案，所述方法包括通過白蛋白-結(jié)合部分，即，本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物或其殘基，使治療劑或診斷劑和白蛋白結(jié)合的步驟，由此使用血清白蛋白作為載體，將所述藥劑遞送至患者中所述藥劑的理想作用部位，或特定組織。在優(yōu)選實(shí)施方案中，在所述作用部位或在所述組織中，所述藥劑從白蛋白釋放。此外，優(yōu)選地，藥劑的釋放通過化學(xué)處理，優(yōu)選地通過連接所述藥劑和本發(fā)明所述的白蛋白-結(jié)合部分的可裂解的接頭的裂解實(shí)現(xiàn)，其中所述裂解優(yōu)選地是蛋白水解裂解。按照一個(gè)實(shí)施方案，所述藥劑在所述化學(xué)處理之前被腫瘤細(xì)胞攝取。在本發(fā)明方法的一些實(shí)施方案中，要與本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物綴合的藥劑阻滯細(xì)胞外靶標(biāo)(例如，受體、細(xì)胞因子、生長因子、和血液酶)。按照本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明提供所述化合物或綴合物用于醫(yī)學(xué)成像目的的應(yīng)用。表述"醫(yī)學(xué)成像"包括"診斷成像"或"成像診斷學(xué)"。本發(fā)明所述的這樣的應(yīng)用優(yōu)選地包括通過與本發(fā)明的化合物綴合而修飾治療劑或診斷劑，以形成本發(fā)明的綴合物。優(yōu)選地，要與本發(fā)明的化合物綴合的藥劑是診斷劑。本發(fā)明所述的化合物和綴合物用于醫(yī)學(xué)成像目的的應(yīng)用還優(yōu)選地包括給患者施用有效劑量的本發(fā)明的綴合物。如在本說明書其他部分描述的，所述醫(yī)學(xué)成像優(yōu)選地是基于熒光的方法、血管造影術(shù)、熒光血管造影術(shù)、超聲檢査法、基于磁共振的診斷方法、磁共振成像、X-射線成像、醫(yī)學(xué)、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)化斷層顯象(SPECT)或正電子發(fā)射斷層掃描(PET)。施用模式本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合綴合物可以直接或在包含賦形劑(見上文)的藥物組合物中遞送，這是本領(lǐng)域中公知的。所述治療方法包括給受試者施用治療有效量的本發(fā)明的白蛋白-結(jié)合化合物。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"治療有效量"是指治療、改善、或預(yù)防目的疾病病癥、或表現(xiàn)出可檢測的治療或預(yù)防作用所需要的本發(fā)明所述的綴合物的量。一般地，治療有效劑量最初可以在細(xì)胞培養(yǎng)測定或在動(dòng)物模型中，例如，在非人靈長類動(dòng)物、小鼠、兔、狗、或豬中估算。動(dòng)物模型還可以用來確定合適的濃度范圍和施用途徑。然后可以利用這些信息來確定在人中施用的有效劑量和途徑。用于人受試者的精確的有效量應(yīng)該取決于疾病狀況的嚴(yán)重性、受試者的一般健康、年齡、體重、和受試者的性別、日常飲食、施用的時(shí)間和頻率、藥物組合、反應(yīng)敏感性、和對治療的耐受/響應(yīng)。該量可以通過常規(guī)實(shí)驗(yàn)確定，并且在臨床醫(yī)師的判斷之內(nèi)。通常，藥劑的有效量，即，劑量，為0.005mg/kg-50mg/kg,優(yōu)選地為0.125mg/kg-20mg/kg。本發(fā)明的優(yōu)選藥劑的有效治療方案包括每天施用一次、兩次或三次，和/或每周一次、兩次、三次、四次、五次或六次。因此，這些方案特別優(yōu)選地用于本發(fā)明。本發(fā)明藥劑在藥物組合物(見上文)中的有效且便利的施用途徑和適當(dāng)?shù)呐渲七€可以容易地通過常規(guī)實(shí)驗(yàn)確定。在本領(lǐng)域中許多制劑和藥物遞送系統(tǒng)是可用的(參見，例如，[32,33])。適當(dāng)?shù)氖┯猛緩娇梢园?，例如；口服、?鼻內(nèi))、肺或其他黏膜、局部、透皮、陰道、直腸、腸、眼、耳、腸胃外施用。主要的腸胃外施用途徑包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、和皮下施用。次要施用途徑包括腹膜內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、心臟內(nèi)、池內(nèi)(intracisteral)、皮內(nèi)、病灶內(nèi)、眼內(nèi)、胸膜內(nèi)、鞘內(nèi)、子宮內(nèi)、和心室內(nèi)施用。待治療的適應(yīng)癥、以及藥物的物理、化學(xué)和生物學(xué)特征，指示要用的制劑類型和施用途徑，以及優(yōu)選局部還是系統(tǒng)遞送。對于有效用于本發(fā)明治療的方法的組合物，治療有效劑量可以最初使用本領(lǐng)域公知的各種技術(shù)估算。動(dòng)物研究中所用的初始劑量可以基于在細(xì)胞培養(yǎng)測定中確定的有效濃度。適用于人受試者的劑量范圍可以，例如，使用從動(dòng)物研究和細(xì)胞培養(yǎng)測定獲得的數(shù)據(jù)來確定。按照本發(fā)明，綴合物、或包含所述綴合物的藥物或藥物組合物的治療有效劑量或量，是指所述綴合物、藥物或藥物組合物在受試者中導(dǎo)致癥狀改善或生存延長的量或劑量。所述綴合物、藥物或藥物組合物的毒性和治療功效可以通過標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)方法在細(xì)胞培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物中測定，例如，通過測定LD50(對50%群體致死的劑量)和ED50(對50%群體治療有效的劑量)。毒性與治療效果的劑量比率是治療指數(shù)，其可以表示為LD50/ED50比率。優(yōu)選表現(xiàn)出高的治療指數(shù)的綴合物、藥物或藥物組合物。有效量或治療有效量是所述綴合物、藥物或藥物組合物引發(fā)組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)響應(yīng)的量，所述生物學(xué)或醫(yī)學(xué)響應(yīng)是研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生、或其他臨床醫(yī)師所尋找的，例如，控制腫瘤生長、控制感染、調(diào)節(jié)葡萄糖代謝、降低升高的或增加的血液葡萄糖水平、治療或預(yù)防與改變的葡萄糖代謝相關(guān)的病癥如糖尿病、等等。劑量優(yōu)選地落入循環(huán)濃度范圍內(nèi)，其包括具有很少或沒有毒性的ED50。劑量可以在該范圍內(nèi)變化，這取決于所用的劑型和/或所用的施用途徑。準(zhǔn)確的配制、施用途徑、劑量、和給藥時(shí)間間隔應(yīng)該按照本領(lǐng)域已知的方法考慮受試者病癥的特殊性而選擇?？梢詥为?dú)調(diào)節(jié)劑量的量和時(shí)間間隔以提供足以有效實(shí)現(xiàn)理想的作用的活性部分血漿水平，即，最小有效濃度(MEC)。MEC將關(guān)于每種藥劑而不同，但是可以從，例如，體外數(shù)據(jù)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)估算。獲得MEC所需要的劑量將取決于個(gè)體特征和施用途徑。在局部施用或選擇性攝取的情形中，藥物的有效局部濃度可能與血漿濃度不相關(guān)。施用的藥劑或組合物的量可以依賴于各種因素，包括被治療的受試者的性別、年齡、和體重、痛苦的嚴(yán)重性、施用方式、和開處方醫(yī)師的判斷。39所述組合物，如果需要，可以存在于包裝或分配器裝置中，其包含含有活性成分的一個(gè)或多個(gè)單位劑型。例如，所述包裝或裝置可以包括金屬或塑料箔，諸如泡眼包裝，或玻璃和橡膠塞，如在小瓶中。所述包裝或分配器裝置可以附有施用說明書。還可以制備包括配制在相容的藥物載體中的本發(fā)明的藥劑的組合物，置于適當(dāng)?shù)娜萜髦?，并且?biāo)記用于適應(yīng)病癥的治療。附圖簡述圖1顯示結(jié)構(gòu)單元試劑326，428,533,535,536,539,622,624,625，630，631和632，從其起始可以合成本發(fā)明的化合物。圖2顯示優(yōu)選的本發(fā)明的化合物的實(shí)例延伸的白蛋白結(jié)合分子428-e-Lys-a-NH2(上圖)和428-氨基庚酸-a-Lys-s-NH2(下圖)的結(jié)構(gòu)。圖3顯示428-s-Lys-a-NHAc(A)，428-s-Lys-a-NH-FITC(B)和428-氨基庚酸-a-Lys-e-NHAc(C)的等溫滴定熱量測定(ITC)測量。圖4顯示比較熒光素(A)和428-s-Lys-a-NH-FITC(B)獲得的電遷移位移，每種單獨(dú)的(-)或用人血清白蛋白(HSA)和人血清(Semm)預(yù)溫育。圖5顯示428-e-Lys-a-NH-FITC對比熒光素的藥物代謝動(dòng)力學(xué)模式。圖6顯示關(guān)于與人血清白蛋白結(jié)合的微陣列測定的讀取。圖7版A,B,C顯示428-Lys誦FITC,428-Lys-FAM，禾B428-Lys-|3-Ala-DTPA-Gd的結(jié)構(gòu)，其分別為本發(fā)明的綴合物的實(shí)例。圖8顯示白蛋白結(jié)合的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系研究(ITC)。圖9顯示通過ITC對本發(fā)明所述的熒光素酰胺綴合物(428-D-Lys-FAM)的Kd值的測量。圖10顯示通過ITC對本發(fā)明所述的Gd-DTPA-綴合物(428-D-Lys-(3Ala-DTPA-Gd)的Kd值的測量。圖11顯示通過熒光偏振法對Kd值的測量。圖12總結(jié)表征428-D-Lys-FAM與HSA的結(jié)合的競爭性實(shí)驗(yàn)。圖13顯示比較熒光素、苯乙胺-FAM,428-D-Lys-FAM和622-D-Lys-FITC獲得的電遷移位移，每種單獨(dú)的(-)或用人血清白蛋白(HSA)和人血清(Serum)預(yù)溫育。圖14顯示熒光素、苯乙胺-FAM，428-D-Lys-FAM,禾Q622-D-Lys-FAM在小鼠中的藥物代謝動(dòng)力學(xué)模式。圖15顯示DTPA-177Lu和428-D-Lys-|3Ala-DTPA-177Lu在小鼠中的藥物代謝動(dòng)力學(xué)模式。圖16顯示通過定量選擇測定法(層析法白蛋白結(jié)合測定法)對白蛋白結(jié)合特征的表征。圖17顯示本發(fā)明所述的化合物(428-D-Lys-FAM)在血管造影分析中的提高的成像性能。圖18顯示本發(fā)明所述的化合物(428-D-Lys-(3Ala-DTPA-'"Lu)在MRI分析中的提高的成像性能。實(shí)施例實(shí)施例1制備本發(fā)明的化合物("428-氨基庚酸-a-Lys-e-NH2"和"428-s-Lys-aNH2")圖1顯示可能的結(jié)構(gòu)單元試劑，從其起始可以合成本發(fā)明的化合物。在加入10當(dāng)量的7-氨基庚酸和三乙胺之前，將化合物428的羧酸(可從西格瑪(SIGMA)獲得，目錄號I5634)用在DMSO中的1當(dāng)量的EDC和1.2當(dāng)量的NHS在30。C活化4小時(shí)。反應(yīng)在30。C攪拌過夜，以生成428-氨基庚酸。產(chǎn)物通過HPLC(參見實(shí)施例21，常規(guī)方法)純化并且通過質(zhì)譜法分析。通常，在下述實(shí)施例中合成的所有分子通過質(zhì)譜法表征。在一次制備中，428-氨基庚酸將10pmol的428與在50|il的DMSO中的8pmo1N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亞胺(EDC)和10pmolN-羥基琥珀酰亞胺(NHS)在30。C攪拌3小時(shí)，然后加入在1001MNaHC03,pH9中的20pmol7-氨基庚酸(Bachem)。允許反應(yīng)在30°C攪拌過夜。在用過量的Trizma堿猝滅殘余的試劑后，反應(yīng)通過HPLC純化，并且通過質(zhì)譜法表征。按照本發(fā)明，為了獲得"化學(xué)處理"用于與多種藥劑的綴合反應(yīng)同時(shí)保留對白蛋白結(jié)合所需要的羧酸官能性的存在，通過將Fmoc-D-Lys-OH經(jīng)s-氨基基團(tuán)與428的羧酸官能團(tuán)綴合，或通過將D-Lys(Fmoc)-OH經(jīng)a-氨基基團(tuán)與428-氨基庚酸的游離羧基官能團(tuán)綴合而引入伯氨基基團(tuán)(見圖2)。合成和純化按上述進(jìn)行，包括在純化之前加入大量過量的三乙胺進(jìn)行的綴合4小時(shí)后的去保護(hù)步驟。實(shí)施例2制備本發(fā)明的化合物("533-氨基庚酸-a-Lys-e-NH，和"533sLys-aNH2")將化合物533(可從SALOR獲得，目錄號S532649)的羧酸用在DMSO中的1當(dāng)量的EDC和1.2當(dāng)量的NHS在30°C活化4小時(shí)，之后加入10當(dāng)量的7-氨基庚酸和三乙胺。反應(yīng)在30°C攪拌過夜，以生成533-氨基庚酸。產(chǎn)物通過HPLC純化并且通過質(zhì)譜法分析。通過將Fmoc-D-Lys-OH經(jīng)s-氨基基團(tuán)與533的羧酸官能團(tuán)綴合，或通過將D-Lys(Fmoc)-OH經(jīng)a-氨基基團(tuán)與533-氨基庚酸的游離羧基官能團(tuán)綴合而引入伯氨基基團(tuán)。合成和純化按上述進(jìn)行，包括在純化之前通過加入大量過量的三乙胺綴合4小時(shí)后的去保護(hù)步驟。實(shí)施例3制備本發(fā)明的化合物("539-氨基庚酸-a-Lys-e-NH2"和"539-s-Lys-a-NH2")將化合物539(可從SALOR獲得，目錄號R244996)的羧酸用在DMSO中的1當(dāng)量的EDC和1.2當(dāng)量的NHS在30°C活化4小時(shí)，之后加入10當(dāng)量的7-氨基庚酸和三乙胺。反應(yīng)在30°C攪拌過夜，以生成539-氨基庚酸。產(chǎn)物通過HPLC純化并且通過質(zhì)譜法分析。通過將Fmoc-D-Lys-OH經(jīng)s-氨基基團(tuán)與539的羧酸官能團(tuán)綴合，或通過將D-Lys(Fmoc)-OH經(jīng)oc-氨基基團(tuán)與539-氨基庚酸的游離羧基官能團(tuán)綴合而引入伯氨基基團(tuán)。合成和純化按上述進(jìn)行，包括在純化之前通加入大量過量的三乙胺綴合4小時(shí)后的去保護(hù)步驟。實(shí)施例4制備化合物X-D-Lys(X=326，428，533，535，536，539，622和624)在一組實(shí)驗(yàn)中，還按下述合成關(guān)于各種化合物"X"(X=326,428,533,535，536,539,622和624)的通式為X-D-Lys的分子按在上述實(shí)施例中上文所述進(jìn)行部分X的羧酸活化。加入在100piDMSO中的20pmolFmoc-D-Lys(Bachem)和43pmol三乙胺(TEA)之后，反應(yīng)在30。C攪拌過夜。通過加入10pl5MKOH并在30°C攪拌2小時(shí)而去除在a-氨基位置處的Fmoc-保護(hù)基團(tuán)。在通過在0.1。/。三氟乙酸梯度上的HPLC純化后，將含有X-D-Lys的干燥的級分重懸在DMSO中。加入5MHC1直到溶液變澄清。實(shí)施例5對本發(fā)明的化合物的"化學(xué)處理"修飾乙酸或丁酸分別與428-e-Lys-ot-NH2和428-氨基庚酸-a-Lys-s-NH2的氨基基團(tuán)的綴合通過下列步驟實(shí)現(xiàn):用等摩爾的EDC/NHS在30°C活化羧酸3小時(shí)，并且隨后向428-s-Lys-a-NH2和428-氨基庚酸-a-Lys-s-NH2中分別加入100x摩爾過量的活化的酸，并且在30。C攪拌12小時(shí)。備選地，分別向428-e-Lys-a-NH2和428-氨基庚酸-a-Lys-s-NH2中加入100x摩爾過量的乙酸酐，并且在30。C攪拌12小時(shí)。在一組制備中，由X-D-Lys(按實(shí)施例4所述制備，并且重懸在DMSO中)合成通式為X-D-Lys-Ac(X=326，428，533,535,536，539,和624)的分子。在這些情形中，在通過HPLC/UV確定濃度后，使X-D-Lys與10x摩爾過量的Ac20在30°C反應(yīng)4小時(shí)。產(chǎn)物通過HPLC純化。實(shí)施例6制備本發(fā)明的綴合物與熒光團(tuán)(FITC/硫脲衍生物)偶聯(lián)428-s-Lys-a-NH2的a-氨基基團(tuán)與熒光素-異硫氰酸酯(FITC)綴合，作為熒光團(tuán)、診斷劑、以及一般的藥物樣分子的實(shí)例。偶聯(lián)通過將2.5)Limol428-s-Lys-a-NH2和10pmolFITC在650mMNaH2P04,30%DMSO,pH7.2中在30°C攪拌12小時(shí)而實(shí)現(xiàn)。產(chǎn)物(428-D-Lys-FITC)通過HPLC純化并且通過質(zhì)譜法表征。實(shí)施例7制備本發(fā)明的綴合物與熒光團(tuán)(FAM/酰胺衍生物)偶聯(lián)按下述制備428-D-Lys,622-D-Lys,以及用于比較的苯乙胺與熒光素的酰胺綴合物(428-D-Lys-FAM,622-D-Lys-FAM和苯乙胺-FAM):將19pmol苯乙胺，按照上述制備的428-D-Lys，或622-D-Lys和14pmol5-羧基熒光素NHS酯溶解在120^DMSO中。加入72jnmolTEA。反應(yīng)在避光條件下在30°C攪拌24小時(shí)。反應(yīng)通過利用醋酸三乙銨(TEAA)梯度的HPLC進(jìn)行純化。實(shí)施例8制備本發(fā)明的綴合物與診斷造影劑(DTPA)偶聯(lián)在增加血液半衰期和更短的弛豫時(shí)間方面，造影劑在MRI成像方法中的性能受益于與血清白蛋白的非共價(jià)結(jié)合。造影劑DTPA通過下述方法與本發(fā)明的化合物綴合，以生成本發(fā)明的綴合物。通過用在THF中的等摩爾量的偶氮二羧酸二乙酯，PPh3和二苯基磷酰氮化物攪拌12小時(shí)首先將羥基-基團(tuán)轉(zhuǎn)化成疊氮化物，然后通過用在甲醇中的Pd/C/H2攪拌12小時(shí)而將所述氨基基團(tuán)還原，從而將2-(R)-羥甲基-DTPA-五-叔-丁酯轉(zhuǎn)化為2-(R)-氨基甲基-DTPA-五-叔-丁酯。為了與2-(R)-氨基甲基-DTPA-五-叔-丁基綴合，將428-s-Lys-ot-NH2的伯氨基基團(tuán)通過與由EDC/NHS活化的二硫代乙醇酸反應(yīng)并且隨后用TCEP還原而轉(zhuǎn)化為硫羥基團(tuán)。將2-(R)-氨基甲基-DTPA-五-叔-丁基N-(c-馬來酰亞胺基丁酰氧基)琥珀酰亞胺酯(GMBS)和428-s-Lys-a-NH2的硫羥衍生物(比例為1:2:10)在30。C攪拌12小時(shí)。用TFA去除羧酸的叔-丁基保護(hù)基團(tuán)。隨后，可以將得到的428-s-Lys-a-GMBS-DTPA綴合物用Gd負(fù)載，并且用于MRI研究。在一個(gè)實(shí)例中，將428-D-Lys-卩-Ala-DTPA-Gd按下述合成按上述，用EDC/NHS使Fmoc-(3-Ala與428-D-Lys綴合，并且用5MKOH去保護(hù)。將19pmol428-D-Lys-(3隱Ala禾Q14(imolp匿SCN-Bn隱DTPA(Macrocyclics)溶解在120plDMSO中。加入72jamolTEA。反應(yīng)在30。C攪拌24小時(shí)。反應(yīng)通過利用100mMTEAA梯度的HPLC純化。通過向1pmol428-D-Lys-卩-Ala-DTPA中加入10|imolGdCl3并且用NaOH調(diào)節(jié)為pH10，然而在25°C溫育過夜，而進(jìn)行428-D-Lys-(3-Ala-DTPA和Gd3+之間的復(fù)44合物形成。通過在TEAA梯度上的HPLC進(jìn)行過量Gd"的去除。通常，終產(chǎn)物通過質(zhì)譜法表征。實(shí)施例9制備本發(fā)明的綴合物與抗癌藥物(多柔比星)偶聯(lián)利用琥珀酸作為雙官能接頭將多柔比星通過伯氨基基團(tuán)與428-s-Lys-ot-NH2綴合。首先，多柔比星與100x摩爾過量的琥珀酸酐在30。C攪拌12小時(shí)，并且隨后通過HPLC純化。由此氨基基團(tuán)與琥珀酸酐反應(yīng)，形成酰胺鍵并且釋放羧酸。在加入10x過量的428-s-Lys-oc-NH2之前，用等摩爾量的EDC/NHS在30。C活化該羧酸4小時(shí)。純化通過HPLC進(jìn)行并且通過質(zhì)譜法表征。對于通過羰基基團(tuán)綴合，將多柔比星與摩爾過量的(6-馬來酰亞胺基己?；?酰肼在30。C攪拌12小時(shí)。通過與EDC/NHS活化的二硫代乙醇酸反應(yīng)并且隨后用TCEP還原，將428-e-Lys-a-NH2的伯氨基基團(tuán)轉(zhuǎn)化為硫醇。通過與10倍過量的硫醇衍生物在30。C攪拌12小時(shí)，將多柔比星-腙-己?；?馬來酰亞胺與428-s-Lys-a-NH2的硫醇衍生物偶聯(lián)。實(shí)施例IO制備本發(fā)明的綴合物與癌癥藥物(epithilone)偶聯(lián)Epothilones是癌癥治療領(lǐng)域的有效藥物。然而，施用epothilones的主要限制在于它們的神經(jīng)毒性。由于與血清白蛋白的結(jié)合顯著減少藥物滲透血腦屏障的能力，epothilones與白蛋白-結(jié)合分子的綴合是減少副作用、允許更高的劑量并且因此增加它們的治療功效的有效方法。428-s-Lys-a-NH2與epothilones的綴合按照與實(shí)施例9中關(guān)于多柔比星的記述相同的流程進(jìn)行。首先，如實(shí)施例9中關(guān)于多柔比星所述，將428-s-Lys-a-NH2轉(zhuǎn)化為硫醇衍生物。將epothilone,(6-馬來酰亞胺基己?；?酰肼和428-s-Lys-a-NH2的硫醇衍生物按1:2:10的摩爾比例攪拌12小時(shí)。為了防止與epothilone的環(huán)氧化物基團(tuán)的副反應(yīng)，可以采用保護(hù)策略。實(shí)施例11通過等溫滴定熱量測定(ITC)表征本發(fā)明的化合物和綴合物通過等溫滴定熱量測定(ITC)進(jìn)行結(jié)合親和力的溶液中測量(insolutionmeasurement)0按照參考文獻(xiàn)34的方法進(jìn)行通過ITC的結(jié)合實(shí)驗(yàn)。將1X2^d，然后是29x20pi的428-衍生物注射到1.8ml的人血清白蛋白中。所有ITC測量均在50-100pM蛋白和0.5-1mM綴合物的濃度下在PBS,2%DMSO中在37°C進(jìn)行。實(shí)施例1的428-氨基庚酸的ITC測量揭示針對親和性相當(dāng)?shù)膬蓚€(gè)結(jié)合位點(diǎn)的解離常數(shù)Kd-3^iM。用乙酸和丁酸修飾428-氨基庚酸-a-Lys-s-NH2和428-s-Lys-a-NH2中的伯氨基基團(tuán)沒有顯著改變針對HSA的結(jié)合親和性(對于428-e-Lys-a-NHAc，Kd:3.2pM，對于428-s-Lys-a-NHBu，Kd=5.5pM，對于428-氨基庚酸-ot-Lys-s-NHAc，Kd=8^M，對于428-氨基庚酸-a-Lys-s-NHBu針對人血清白蛋白上的單一結(jié)合位點(diǎn)，K^8pM)(見圖3)。這證實(shí)通用"化學(xué)處理"的理想特征，其可以用于將寬范圍的藥劑綴合到本發(fā)明的化合物上。428-s-Lys-a-NHAc還結(jié)合其他物種的血清白蛋白。以相似的親和性識別鼠血清白蛋白(在兩次獨(dú)立的測量中，Kd=3.7pM和3.6(iM)，而針對大鼠血清白蛋白的親和性低6x(IQ=28闊。在圖8所示的一系列測量中通過ITC進(jìn)一步表征白蛋白結(jié)合的結(jié)構(gòu)-活性-關(guān)系。該附圖顯示通過ITC測量的分子X-D-Lys-Ac(X=533,535,536:539和624)的一般結(jié)構(gòu)。表征了428-D-Lys-Ac(l)以及其他鑒定的結(jié)合分子(其中2，3,4,5和6分別對應(yīng)于結(jié)構(gòu)533,535,536，539和624)與HSA的2=口no另外，圖8顯示428-D-Lys針對MSA(7)的親和性測量，其與使用HAS(l)的相應(yīng)測量相當(dāng)。其他測試的與乙?；腄-賴氨酸綴合的結(jié)合劑(X=533,535，536,539和624)具有微摩爾范圍內(nèi)的親和性。對它們的解離常數(shù)排序發(fā)現(xiàn)與層析法白蛋白結(jié)合測定中的相對保留相對應(yīng)(見下文，實(shí)施例17)。428-s-Lys-a-NH2的a-氨基基團(tuán)與FITC的綴合沒有導(dǎo)致白蛋白-結(jié)合親和性的任何顯著損失。在與FITC綴合后，當(dāng)通過ITC確定時(shí)，針對人血清白蛋白的結(jié)合親和性保持相似(1^=6.5^M,見圖3)。此外，表征了熒光素和一些熒光素衍生物(428-D-Lys-FAM,622-D-Lys-FAM，和苯乙胺-FAM)。通過ITC在37°C測量的428-D-Lys-FAM針對HSA的解離常數(shù)為330nM(圖9)。此外，通過ITC確定428-D-Lys-(3Ala-DTPA-Gd針對HSA的親和性(Kd=3.3^M,圖IO)。如上文所解釋的，DTPA(二乙烯三胺-五乙酸)是核醫(yī)學(xué)方法中常用的螯合劑，并且Gd-DTPA是MRI中最廣泛使用的造影劑。一般地，使用VP-ITC儀器(Microcal)進(jìn)行等溫滴定熱量測定測量。將不含脂肪酸的HSA(西格瑪，A1887)或不含脂肪酸的MSA(A1056)溶解在PBS,2。/。DMSO中，并且針對同樣的緩沖液透析。用于實(shí)驗(yàn)的蛋白濃度在30pM-lmM之間變化。實(shí)驗(yàn)通常通過用結(jié)合分子滴定血清白蛋白進(jìn)行。在37°C，HSA或MSA用比蛋白溶液約10倍更高的濃度的在PBS,2%DMSO中的結(jié)合分子溶液進(jìn)行滴定。典型地，滴定進(jìn)行到直到達(dá)到配體與蛋白上的結(jié)合位點(diǎn)為2:1的比率。將配體溶解在透析緩沖液中。結(jié)合分子的精確的濃度通過HPLC/UV確定。處理得到的滴定曲線，并且用Origin7軟件(Microcal)擬合，以獲得Kd和AH值。實(shí)施例12通過熒光偏振法表征本發(fā)明的化合物和綴合物將100nM428-D-Lys-FAM,622-D-Lys-FAM禾口，用于比較的熒光素和苯乙胺-FAM與增加量的HSA在PBS中在25°C溫育1小時(shí)。通過在485nm激發(fā)和在535nm測量而確定熒光偏振。這樣測量的解離常數(shù)對于熒光素為76pM，對于428-D-Lys-FAM為108nM，對于622-D-Lys-FAM為6.6jaM和對于苯乙胺-FAM為17(見圖11)。實(shí)施例13在競爭性實(shí)驗(yàn)中通過熒光偏振法表征本發(fā)明的化合物和綴合物將500nM428-D-Lys-FAM和HSA與在PBS中的1(iM,10(iM和100的各種HSA-結(jié)合競爭劑在25°C溫育1小時(shí)。通過在485nm激發(fā)和在535nm測量而確定熒光偏振。這些競爭實(shí)驗(yàn)表明428-D-Lys-FAM在位點(diǎn)II結(jié)合HSA。圖12總結(jié)通過關(guān)于428-D-Lys-FAM結(jié)合競爭的熒光偏振獲得的結(jié)果。將500nM428-D-Lys-FAM和HSA用增加量的競爭劑(左版)溫育。提供關(guān)于未結(jié)合的(無HSA)和結(jié)合的(無抑制劑)428-D-Lys-FAM的對照值(右版)。實(shí)施例14通過電遷移位移測定法表征本發(fā)明的化合物和綴合物按照參考文獻(xiàn)35的一般方法進(jìn)行電遷移位移測定。將在PBS緩沖液中的10ul10|iM熒光素或10pM428-s-Lys-oc-NH-FITC[36]分別與100pM人血清白蛋白或人血清(1/5稀釋)預(yù)先溫育。測定的溫育時(shí)間為30分鐘。使用20%-丙烯酰胺凝膠制備液，TBE(Tris/硼酸/EDTA)緩沖液[36]，和在5%蔗糖中的10ul樣品上樣體積，進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳[35,36]。運(yùn)行條件為180V/40分鐘。電遷移位移測定表明428-s-Lys-ot-NH-FITC的結(jié)合及其對HSA的特異性(圖4)。在其他系列的電遷移位移實(shí)驗(yàn)中(見圖13)，將濃度為5^M的熒光素、苯乙胺-FAM、428-D畫Lys-FAM，禾B622-D-Lys-FAM與PBS、在PBS中的HSA(50nM)和人血清(10x在PBS中稀釋)溫育。1小時(shí)后，將樣品上樣到20%聚丙烯酰胺凝膠上，并且在Tris/硼酸/EDTApH8.2中在180V運(yùn)行40分鐘。實(shí)施例15評價(jià)本發(fā)明的綴合物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性本發(fā)明的綴合物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征通過將所述綴合物和相對應(yīng)的未綴合的藥劑(即，未通過本發(fā)明的化合物修飾的藥劑)注射到小鼠中并且隨后取樣所述綴合物和藥劑的濃度而進(jìn)行評估。綴合物和藥劑濃度通過液相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC-MS/MS)按照本領(lǐng)域已知的技術(shù)[37]確定。將100^170iliM的熒光素和428-s-Lys-a-NH-FITC溶液注射到2對免疫活性129SV小鼠中。單獨(dú)的化合物在24小時(shí)期間的時(shí)間點(diǎn)取樣的小鼠血清中的濃度通過LC/MS/MS確定，這表明兩種化合物顯著不同的藥物代謝動(dòng)力學(xué)模式。盡管熒光素很快從血清中清除(t,/產(chǎn)12.5分鐘)，而428-s-Lys-a-NH-FITC保留在血清中顯著更長的時(shí)間期間，顯示出兩階段性清除，tl/2,a=22.5分鐘和t1/2，p=340分鐘(圖5)。在進(jìn)一步的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，測量并比較熒光素、苯乙胺-FAM、428-D-Lys-FAM、和622-D-Lys-FAM的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。關(guān)于所述4種化合物的清除模式顯然不同(圖14)。盡管熒光素以單階段模式快速清除，并且在注射后30分鐘就不再檢測到，而所述衍生物表現(xiàn)出與它們針對HSA的親和性相關(guān)的兩階段清除模式(熒光素tl/2=4.6分鐘;428-D-Lys-FAM:tl/2,a=27分鐘，a-階段=90%,tl/2,(3=495分鐘;622-D-Lys-FAM:tl/2,a=5.3分鐘，a-階段=98%,tl/2,(3=100分鐘；苯乙胺-FAM:tl/2,a=5分鐘，a-階段=99.5%,tl/2,(3=53分鐘)。在VeterinaramtdesKantonsZiirich(授予DarioNeri)的方案i午可198/2005下進(jìn)行藥物代謝動(dòng)力學(xué)分析。向129SvPas小鼠尾靜脈注射溶解在100pi的100mMTris/HCl,105mMNaCl,pH8.2中的20nmol的熒光素、苯乙胺-FAM，428-D-Lys-FAM,或622-D-Lys-FAM(每種2只小鼠)。在注射后1,5,15,30,60,120,240,360,480和1440分鐘，用EDTA包被的毛細(xì)管(Sarstedt)從隱靜脈采集20-30^血液樣品，并且離心。將5-10血漿與40^10.1%三氟乙酸和200^1乙醇混合，并且在冰上溫育l小時(shí)。1小時(shí)后，離心樣品以去除沉淀的蛋白質(zhì)。上清在真空下干燥，并且隨后重新溶解在50^DMSO/H20中。將40|al注射到LC/MS/MS系統(tǒng)(MicromassQuattromicroAPI)并且在WatersXTerraMSCI8柱(3.5jiM,1x50mm)上運(yùn)行在0.1%HCOOH中從5%到95%的乙腈的線性梯度10分鐘，同時(shí)觀察到對于熒光素，子離子m/z287.1和202.1，母體離子333.1，對于苯乙胺-FAM，子離子m/z287.3和332.3，親代離子480.2，對于428-D-Lys-FAM，子離子m/z287.3,377.2和505.2，母體離子777.1，對于622-D-Lys-FAM，子離子m/z287.3和505.4，母體離子651.3。比較用先前利用相同的樣品制備獲得的熒光素和428-D-Lys-FAM在血漿中的稀釋系列的曲線下面積允許分子定量。還利用靜脈內(nèi)注射到小鼠中的DTPA和428-D-Lys-卩Ala-DTPA的177Lu復(fù)合物研究藥物代謝動(dòng)力學(xué)模式。與使用熒光素衍生物遇到的情形相似，DTPA-177Lu以單階段模式快速清除，并且在注射后60分鐘不再檢測到，而428-D-Lys-|3Ala-DTPA-177LU表現(xiàn)出顯著更緩慢的兩階段清除模式(圖15;428-DLys-(3Ala-DTPA-177Lu:tl/2,a=22分鐘，a-階段=90%,tl/2，p=408分鐘)。DTPA復(fù)合物的形成通過將2.25nmolDTPA或428-DLys-DTPA與70pCi的177Lu(PerkinElmer)在25°C在250piPBS中溫育過夜而進(jìn)行。完全的復(fù)合物形成通過HPLC使用放射活性檢測器(GABIStar,Raytest)利用TEAA緩沖液驗(yàn)證。對129SvPas小鼠(每種2只小鼠)尾靜脈注射在100piPBS中的30pCiDTPA-"7Lu，或428-D-Lys-(3-Ala-DTPA-I77Lu。在注射后1,5,15,30，60,120,240,480,1440分鐘按上述進(jìn)行血液取樣和177Lu定量。為了測量MSA的藥物代謝動(dòng)力學(xué)，將75nmolMSA用DTPA標(biāo)記，標(biāo)記通過與2.1nmol在PBS中的p-SCN-Bn-DTPA在4°C反應(yīng)4小時(shí)然后在PD-10柱(GE衛(wèi)生保健(GEHealthcare))上純化而進(jìn)行。將50nmolMSA-DTPA用50jiCi177Lu(PerkinElmer)標(biāo)記并且在PBS平衡的PD-10柱上純化。將3|xCiMSA-DTPA-177Lu注射到129SvPas小鼠的尾靜脈(2只小鼠)中。在注射后1,15,30,60，120,240,480,1440分鐘按上述進(jìn)行血液取樣。通過在PackardCobraY-計(jì)數(shù)儀上計(jì)數(shù)而定量在注射液和血漿中的'"Lu的量。實(shí)施例16基于微陣列檢測白蛋白-結(jié)合下述實(shí)施例提供基于微陣列的測定法，以用于檢測化合物(例如，治療劑或診斷劑與白蛋白-結(jié)合結(jié)構(gòu)域、或任何其他分子的綴合物)是否結(jié)合白蛋白。在該測定中，其可以便利地平行應(yīng)用于大量的化合物，所述化合物是單獨(dú)且共價(jià)偶聯(lián)到相似而不同的寡核苷酸上，所述寡核苷酸在5'末端攜帶氨基己基部分[如在38中所述]。所有這些寡核苷酸在5，端具有相同的序列，這允許它們與互補(bǔ)寡核苷酸退火，但是在6個(gè)堿基的部分中不同。該獨(dú)特的、不同的部分作用為與不同寡核苷酸偶聯(lián)的每種有機(jī)化合物的獨(dú)特的"鑒定密碼"。要針對白蛋白結(jié)合進(jìn)行檢測的寡核苷酸-化合物綴合物的混合物(以下為"文庫")與未修飾的24mer寡核苷酸雜交，所述未修飾的寡核苷酸與所述寡核苷酸5，末端的恒定區(qū)互補(bǔ)。通過將所述寡核苷酸在94°C變性3分鐘，然后在10mMTris/Cl,1mMMgCl2,pH8中以終濃度為87nM的文庫和120nM的未修飾的配對寡核苷酸在50°C10分鐘形成異源雙鏈體，實(shí)現(xiàn)寡核苷酸的二聚體化。在100)Lil的總體積中，將10nl的該裝配的文庫與50^tl用人血清白蛋白或作為陰性對照的Tris修飾的CNBr-瓊脂糖溫育，其預(yù)先用100|iig/mlhering精子DNA預(yù)溫育。在用400ml100mMNaH2P04，1mMMgCl2,0.1%吐溫20,pH8.5在SpinX柱中的三次洗滌步驟之后，將樹脂重懸在100^H20中。通過使用5pi重懸的樹脂進(jìn)行25個(gè)循環(huán)的指數(shù)PCR而擴(kuò)增保留的寡核苷酸-化合物綴合物的密碼(code)。在用PCR純化試劑盒(Qiagen)去除未標(biāo)記的引物之后，使用Cy3-標(biāo)記的引物將所述密碼線性擴(kuò)增25x。將產(chǎn)物沉淀在乙醇中，并且重新溶解在120pL雜交緩沖液(4xSSC,50mMHEPES，0.2%SDS,pH7)中，并且在TecanHS400雜交儀中用微陣列載玻片(以五個(gè)一組展示具有與單個(gè)文庫寡核苷酸的6堿基密碼特異性互補(bǔ)序列的19mers)在44°C溫育4小時(shí)，然后使用2xSSC/0.2%(w/v)SDS,0.2xSSC/0.2%(w/v)SDS,和0.2xSSC進(jìn)行連續(xù)的洗滌步驟。在雜交后，使用Genepix專業(yè)4200A掃描儀(人ex532nm,100%激光功率，光電倍增管300)分析微陣列。使用Genespotter(v2.4.3)定量并評估點(diǎn)強(qiáng)度。在減去背景后，平均值用作點(diǎn)信號強(qiáng)度(5個(gè)點(diǎn)的平均值)。比較用人血清白蛋白溫育后的信號強(qiáng)度與用Tris猝滅的樹脂溫育后的信號強(qiáng)度，以及在溫育之前的文庫的信號強(qiáng)度，揭示要被檢測的化合物的白蛋白-結(jié)合性質(zhì)(圖6)。實(shí)施例17通過定量選擇測定表征白蛋白結(jié)合特性(色譜法白蛋白結(jié)合測定)本發(fā)明化合物和綴合物的結(jié)合特性，特別是白蛋白-結(jié)合選擇性，還可以通過下述定量選擇測定法進(jìn)行分析。使用？SP-ATP和T4多核苷酸激酶，將與寡核苷酸如實(shí)施例16的文庫中的那些的恒定("相同")序列互補(bǔ)的24mer寡核苷酸在5，端進(jìn)行放射性標(biāo)記。在單獨(dú)的管中，所述放射標(biāo)記的寡核苷酸與所述寡核苷酸-化合物綴合物或作為陰性對照的未綴合的寡核苷酸之一雜交。實(shí)驗(yàn)以100nM的雙鏈體濃度進(jìn)行。將這些寡核苷酸雙鏈體對的等分試樣與綴合到CNBr-瓊脂糖漿上的人血清白蛋白溫育l小時(shí)，并且按上述在選擇步驟中洗滌。使用BeckmanLS6500閃爍計(jì)數(shù)儀，對溫育和洗滌步驟的流過液以及樹脂進(jìn)行"P放射性計(jì)數(shù)。放射性的計(jì)數(shù)表明所述寡核苷酸-化合物綴合物在樹脂上的保持(即，結(jié)合)的相對程度，如果存在的話。在一系列實(shí)驗(yàn)中，使用y"P-ATP(GE衛(wèi)生保健(GEHealthcare))和T4多核苷酸激酶(USB)，按上述標(biāo)記24mer寡核苷酸。在單獨(dú)的管中，將所述放射標(biāo)記的寡核苷酸與所選擇的寡核苷酸-化合物綴合物或作為陰性對照的未綴合的寡核苷酸之一雜交，每種寡核苷酸濃度為100nM。將這些寡核苷酸雙鏈體對的等分試樣與在100^dPBS中的HSA樹脂溫育。在溫育l小時(shí)后，使用400plPBS進(jìn)行3輪洗滌，并且使用BeckmanLS6500閃爍計(jì)數(shù)儀，對剩余的珠以及輸入物、流出液、和所有洗滌級分的等分試樣進(jìn)行3卞放射性計(jì)數(shù)。圖16顯示在整個(gè)數(shù)次洗滌步驟中對白蛋白-結(jié)合部分選擇定量的放射性的量。該方法有效用于結(jié)合劑的初始分類。在圖16中檢測的結(jié)合劑中，發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)的結(jié)合劑，以及它們的相對結(jié)合強(qiáng)度(排序)可以描述為428>539>624>535>533>536>326>其它結(jié)合分子。實(shí)施例18從血清去除白蛋白的測定目的化合物對白蛋白的結(jié)合以及所述針對白蛋白與血清中的其它蛋白的結(jié)合特異性可以通過將目的化合物以及膽紅素(具有納摩爾親和性的天然HSA配體)偶聯(lián)到氨基-標(biāo)記的瓊脂糖上而進(jìn)行測定。人血清白蛋白和人血清樣品(或相對應(yīng)的動(dòng)物白蛋白和血清樣品，例如，小鼠、大鼠等等)與化合物-樹脂綴合物溫育，或流過用所述樹脂填充的層析柱。將1ml樹脂(用比樹脂上的NH2-基團(tuán)100-100x倍摩爾過量的結(jié)合分子修飾)與1mlHSA(2mg/ml)在PBS中溫育30分鐘。將所述樹脂負(fù)載到柱上，并且用3mlPBS洗滌。洗脫使用lml8M尿素或100mM三乙胺進(jìn)行。結(jié)果在蛋白質(zhì)凝膠上顯現(xiàn)，即，血清輸入物、來自樹脂的流出液或洗液以及來自樹脂的洗脫液施加到聚丙烯酰胺凝膠的泳道中，所述凝膠使用本領(lǐng)域已知的方法[36]進(jìn)行電泳。對在凝膠上顯現(xiàn)蛋白質(zhì)條帶(例如，染色和顯影)后得到的所述泳道的評價(jià)和比較[36]揭示與膽紅素陽性對照相比，各種化合物-樹脂綴合物從血清樣品中去除血清白蛋白的程度。特別地，揭示所述化合物-樹脂綴合物相對血清內(nèi)包含的其它蛋白選擇性去除(并且因此結(jié)合)白蛋白的程度。52實(shí)施例19本發(fā)明所述的化合物的提高的成像性能(血管造影分析)為了獲得關(guān)于428-D-Lys-FAM的成像性質(zhì)的功能性信息，進(jìn)行視網(wǎng)膜的熒光素血管造影分析。將熒光素和428-D-Lys-FAM靜脈內(nèi)注射到小鼠中，并且在不同時(shí)間點(diǎn)拍攝眼底照片。熒光素血管造影照片證實(shí)藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究的結(jié)果。對于熒光素，即使在較早的時(shí)間點(diǎn)，血管染色也是弱的，并且在20分鐘后就檢測不到。相反，428-D-Lys-FAM對血管的染色持續(xù)更久并且允許顯現(xiàn)更小的血管(0)。使用Heidelberg視網(wǎng)膜血管造影(HRAI,HeidelbergEngineering,德國)，一種共聚焦掃描-激光檢眼鏡，按照先前所述的步驟[參見參考文獻(xiàn)O]，進(jìn)行掃描-激光檢眼鏡檢査成像。簡言之，將野生型C57BL/6小鼠用氯胺酮(66.7mg/kg)和賽拉嗪(11.7mg.Zkg)麻醉，并且用托吡卡胺滴眼劑(MydriaticumStulln,PharmaStulln,德國)對它們的瞳孔進(jìn)行散瞳。HRA特有在短波長范圍內(nèi)的兩種氬波長(488nm和514nm)和在長波長范圍內(nèi)的兩種紅外二極管激光器(795nm和830nm)。488nm的激光波長用于熒光素血管造影，屏障濾器為500nm。4只小鼠每只靜脈內(nèi)注射到尾部而接受50nmol溶解在100^的100mMTris/HCl,105mMNaCl，pH8.2中的熒光素或428-DLys-FAM。使用相同的裝置設(shè)置，在注射后時(shí)間點(diǎn)1,5，20和60分鐘，獲得圖像。特別地，在本研究中的亮度值固定不變，以便可以在沒有感光過度的條件下記錄最亮的圖像(428-D-Lys-FAM，在注射后1分鐘)。所有的檢查均得到當(dāng)?shù)貦?quán)威機(jī)構(gòu)的核準(zhǔn)(Anzeigev.2006年12月13日，RPTuebingen)并且按照動(dòng)物在眼科和視覺研究中的應(yīng)用的ARVO聲明進(jìn)行。實(shí)施例20本發(fā)明所述的化合物的提高的成像性能(MRI分析)為了驗(yàn)證428-D-Lys作為白蛋白結(jié)合部分的方便性(portability)，將第二造影劑，二乙烯三胺-五乙酸(DTPA)綴合到428-D-Lys上(428-D-Lys-卩Ala-DTPA-Gd)，并且進(jìn)行評估。DTPA是核醫(yī)學(xué)方法中的常用螯合劑，并且Gd-DTPA是MRI中最廣泛使用的造影劑。在靜脈內(nèi)注射所述造影劑后，通過MRI成像方法，與428-D-Lys-(3Ala-DTPA-Gd的較慢外滲相比，DTPA-Gd快速外滲。腦部主要血管的MRI分析(圖18)揭示在注射了428-D-Lys-(3Ala-DTPAGd的小鼠中信號輕度的更緩慢的減少，這與其更緩慢的清除模式(參考圖15)相一致。所有的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均嚴(yán)格遵守瑞士動(dòng)物保護(hù)法進(jìn)行。使用用于信號傳送和接收的環(huán)形低溫表面線圈，在200MHz操縱的BrukerPharmaScan47/16MR系統(tǒng)(BrukerBioSpinGmbH)上進(jìn)行MR測量。將小鼠使用在空氣02(4:1)中的1.4-1.5%異氟烷麻醉。進(jìn)行檢測掃描，以評估動(dòng)物的解剖。在兩只C57/B16小鼠中研究兩種造影劑DTPA-Gd和428-D-Lys-卩-Ala-DTPA-Gd對縱向血液馳豫時(shí)間(T1)的縮短作用。為了這一目的，使用下述順序參數(shù)獲得橫向活動(dòng)(cine)2D圖像視野(FOV):19xl9x0.5mm3,矩陣尺寸128x128,傾倒角15°,TE/TR:3,0/14ms,平均值6,重復(fù)50,時(shí)間分辨率(temporalresolution):10.75s,總掃描時(shí)間8分57秒。通過刺激在圖像平面上方(cranialto)的4mm厚的薄片(傾倒角15。)充滿流入的血液。在20次重復(fù)的基線之后向尾靜脈中注射造影劑。首先，施用劑量1.2nmolDTPA-Gd，并且其次，在等待30分鐘之后，施用劑量1.2pmol428-D-Lys-卩-Ala-DTPA-Gd。在大容器中分析MR信號的時(shí)程并且與基線值標(biāo)準(zhǔn)化以用于比較。實(shí)施例21HPLC純化方法HPLC純化所有的反應(yīng)產(chǎn)物通過HPLC在WatersXTerraPrepRP18柱(5^M,10x150mm)上利用從0.1%三氟乙酸到乙腈或從100mMTEAApH7到在80%乙腈中的100mMTEAA,pH7的15分鐘線性梯度進(jìn)行純化。除非特別指明一種梯度，否則二者均可以用于純化。在收集需要的級分之后，在真空下去除溶劑和緩沖液。參考文獻(xiàn)1.http:〃biopharmaceuticals.novozymes.com/files/documents/presds一albfUs2005nov.pdf2.Haag等，AngewChemIntEdEngl.，2006，化1198-215.3.Kratz等.，藥物耙點(diǎn)雜志(JDrugTarget)2000,Sf3」，305-18.4.Drevs等.，JCO,2004,",2125.5.JanewayCA等.免疫生物學(xué)(Immunobiology),第六版2004,Garland，紐約，ISBN:0815341016,第13-21章.6.D醒is等"生物化學(xué)雜志(JBiolChem.)，2002,277,35035-437.WO20051186428.WO20060512889.EP1517921B10.Nielson等.，癌癥研究(CancerRes.),2001,^,711-6.11.McLauchlanR,WatermanH,WatermanC,HillierV,DoddC.熒光素血管造影術(shù)誘導(dǎo)的惡心和嘔吐中的人種差別(Ethnicvariationinfluoresceinangiographyinducednauseaandvomiting).Eye.2001年4月；15(Pt2):159-62.12.用于眼科學(xué)的PDR(PDRforOphthalmology).Montvale，MedicalEconomyCompany(醫(yī)學(xué)經(jīng)濟(jì)公司)，(200)25-2613.McMurry等.(2002)醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志(J.Med.Chem.),45:3465-347414.Parac-Vogt等.(2005)歐洲化學(xué)雜志(Chem.Eur.J.),11:3077-308615.Koehler等，生物有機(jī)醫(yī)學(xué)化學(xué)通信(BioorgMedChemLett),2002,2883-6.16丄ipinski等.，高級藥物開發(fā)綜述(Adv.DrugDel.Rev.),1997,23,3-25.17.有機(jī)化學(xué)命名法(NomenclatureofOrganicChemistry)，部分A,B，C,D,E，F(xiàn),和H,PergamonPress,牛津，1979.版權(quán)1979IUPAC.18.Borsi等，2002年11月1日；102(l):75-8519.有機(jī)化合物的IUPAC命名法指導(dǎo)(AGuidetoIUPACNomenclatureofOrganicCompunds)(Recommendations1993),1993,BlackwellScientificpublications,版權(quán)1993IUPAC.20.P.Alessi."在癌癥和疾病中的L19抗體綴合物"("L19antibodyconjugatesincanceranddisease");PhD論文,ETHZiirich;Nr.15764.21.BarrettAJ,RawlingsND,WoessnerJF(編輯).蛋白水解酶手冊(Handbookofproteolyticenzymes).第2版2004,ElsevierAcademicPress,Amsterdam;Boston,MA.22.抗癌藥物(TheAnticancerDrugs),牛津大學(xué)出版社(OxfordUniversityPress)，第2版，第3章，ISBN0-19-506739-823,OzonoS等.通過CT測量的腎細(xì)胞癌的腫瘤倍增時(shí)間(TumordoublingtimeofrenalcellcarcinomameasuredbyCT).曰本臨床月中瘤學(xué)雜志(JpnJClinOncol.)2004年2月;34(2):82-5.24.March's高級有機(jī)化學(xué)反應(yīng)、機(jī)制、和結(jié)構(gòu)(March'sAdvancedOrganicChemistry:Reactions,Mechanisms,andStructure).Wiley-Interscience;第5版(2001年1月15曰)ISBN:0471585890及其中的參考文獻(xiàn)25.生物綴合物技術(shù)(BioconjugateTechniques)，學(xué)院出版社(AcademicPress),ISBN:0-12-342336-8.2611oyd-WilliamsP，AlbericioF,GiraltE.合成肽和蛋白的化學(xué)方法(ChemicalApproachestotheSynthesisofPeptidesandProteins).CRCPress.1997.ISBN0849391423.27.BenoitonNL.肽合成化學(xué)(ChemistryofPeptideSynthesis).CRCPress.2005.ISBN1574444549.28.ChanW,WhiteP.Fmoc固相肽合成(FmocSolidPhasePeptideSynthesis).牛津大學(xué)出版社(OxfordUniversityPress).2000.ISBN:0199637245.29.KullmannW.酶促月太合成(EnzymaticPeptideSynthesis).CRCPress.1987.ISBN0849368413.30.FDA(美國食品及藥物管理局(USFoodandDrugAdministration))網(wǎng)頁.無活性成分指導(dǎo)(InactiveIngredientGuide).1996.http:〃www.fda.gov/cder/drug/iig/default.htm31.AshM和AshI.藥物添加劑手冊(HandbookofPharmaceuticalAdditives).突角蟲信息資源(SynapseInformationResources).第2版.2002.ISBN189059534932.GennaroAR(編).雷明頓藥學(xué)科學(xué)和實(shí)踐(Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy).LippincottWilliams&Wilkins.第21版.2005年7月3日.ISBN0781763789.33.HardmanJG,LimbirdLE,AlfredG.GilmanAG.Goodman&Gilman's治療的藥理學(xué)基礎(chǔ)(ThePharmacologicalBasisofTherapeutics).McGraw-Hill;第10版.2001年8月13日.ISBN0071354697.34.Pierce等,方法(Methods).1999年10月；19(2):213-2135.Fried等1981.核酸研究(Nucl.AcidsRes.)9:6505-652536.現(xiàn)代分子生物學(xué)方法(CurrentProtocolsinMolecularBiology)ed.:FrederickM.Ausubd等.紐約，JohnWiley&SonsInc(2004年2月3日).ISBN:047150338X37.Mano等，分析生物化學(xué)(AnalBiochem,)1997年1月15日;244(2):291-30038.DumelinCE等.，生物綴合物化學(xué)(BioconjugateChem.),2006,〃,366-370.39.SeeligerMW,BeckSC，Pereyra-MunozN,DangelS，TsaiJY,LuhmannUF，vandePavertSA,WijnholdsJ，SamardzijaM,WenzelA，ZrennerE,NarfstromK,FahlE,TanimotoN，AcarN,TonagelF.在動(dòng)物模型中使用掃描激光檢眼鏡檢查法進(jìn)行的視網(wǎng)膜體內(nèi)共聚焦成像(Invivoconfocalimagingoftheretinainanimalmodelsusingscanninglaserophthalmoscopy).視覺研究(VisionRes.)2005年12月;45(28):3512畫9.權(quán)利要求1.由式1表示的化合物id="icf0001"file="A2007800492300002C1.tif"wi="60"he="16"top="46"left="57"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>(式1)其中E是至多6個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈、或環(huán)狀烴基基團(tuán)，所述E任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，任選地被選自F，Cl，Br，I，支鏈，非支鏈或環(huán)狀C1-C10烴基基團(tuán)，OR9，OCOR9，COOR9，CHO，COR9，CH2OR9，NR9R10，CH2NR9R10，SR9，＝O，＝S和＝NH的至多6個(gè)基團(tuán)取代；X是O或S；A是NH，O，S或CR9R10；D是至多10個(gè)原子的官能團(tuán)，其帶負(fù)電荷，或可以被去質(zhì)子化以產(chǎn)生負(fù)電荷；R1和R2獨(dú)立地選自H，F(xiàn)，Cl，Br，I，支鏈、非支鏈或環(huán)狀C1-C10烴基，OR9，OCOR9，COOR9，CH2OR9，CHO，COR9，NR9R10和SR9；或者R1和R2連接形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，所述環(huán)狀結(jié)構(gòu)包含支鏈、非支鏈或環(huán)狀C1-C10烴基(其中所述烴基任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，并且任選地被獨(dú)立地選自F，Cl，Br，I，OR9，OCOR9，COOR9，CHO，COR9，CH2OR9，NR9R10，CH2NR9R10，SR9，＝O，＝S和＝NH的至多3個(gè)基團(tuán)取代)；B包含至多30個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈或環(huán)狀烴基，任選地被至多10個(gè)雜原子或至多20個(gè)氨基酸殘基的肽鏈中斷，其中B任選地被選自F，Cl，Br，I，＝O，OR9，OCOR9，COOR9，CN，NR9，NR9R10，＝S，和SR9的1-5個(gè)基團(tuán)取代，條件是B在基團(tuán)D和基團(tuán)A之間的鏈中包含至少3個(gè)原子；Y是能夠與治療劑或診斷劑分子結(jié)合的官能團(tuán)；并且R9和R10獨(dú)立地選自下組H和支鏈、非支鏈和環(huán)狀C1-C10烴基，或其鹽。2.由式2表示的綴合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中E是至多6個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈或環(huán)狀烴基，所述E任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，任選地被選自F,CI,Br，I,支鏈、非支鏈或環(huán)狀d-C1()烴基基團(tuán)，OR9,OCOR9,COOR9，CHO,COR9，CH2OR9,NR9R10，CH2NR9R10,SR9，=0,=S和-NH的至多6個(gè)基團(tuán)取代；X是O或S;A是NH，O,S或CR9R1Q;D是至多IO個(gè)原子的官能團(tuán)，其帶負(fù)電荷，或可以被去質(zhì)子化以產(chǎn)生負(fù)電荷；R'和f獨(dú)立地選自H，F(xiàn)，Cl，Br，1，支鏈、非支鏈或環(huán)狀-CIQ烴基OR9，OCOR9,COOR9,CH2OR9，CHO,COR9,NR9R1(^PSR9;或者R1和112連接形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，所述環(huán)狀結(jié)構(gòu)包含支鏈、非支鏈或環(huán)狀c,-C1Q烴基(其中所述烴基任選地被至多2個(gè)雜原子中斷，并且任選地被獨(dú)立地選自F,CI,Br，I，OR9,OCOR9,COOR9,CHO,COR9,CH2OR9,NR9R10,CH2NR9R10,SR9,=0,=S和-NH的至多3個(gè)基團(tuán)取代)；B包含至多30個(gè)碳原子的支鏈、非支鏈或環(huán)狀烴基，任選地被至多10個(gè)雜原子或至多20個(gè)氨基酸殘基的肽鏈中斷，其中B任選地被選自F,Cl，Br,I,=0,OR9,OCOR9,COOR9,CN,NR9,NR9R1(),=S，禾BSR9的1-5個(gè)基團(tuán)取代，條件是B在基團(tuán)D和基團(tuán)A之間的鏈中包含至少3個(gè)原子；Y'是能夠與治療劑或診斷劑分子結(jié)合的官能團(tuán)的殘基；Z包含治療劑或診斷劑分子的殘基以及任選地接頭；并且119和111()獨(dú)立地選自下組H和支鏈、非支鏈和環(huán)狀d-Cu)烴基，或其藥用鹽。3.權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求2的綴合物，其中E包含由式3表示的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R3—R8獨(dú)立地選自H,F,Cl,Br,I,支鏈、非支鏈或環(huán)狀d—C,。烴基，OR9,OCOR9,COOR9,CHO,COR9，CH2OR9,NR9R10,CH2NR9R'，SR9;或者取代基對W和R"—起，Rs和W—起，或R"和RS—起任選地獨(dú)立選自下組=0,=8禾口=順。4.權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求2的綴合物，其中E包含由式4表示的部分.-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R3和R4獨(dú)立地選自H,F,Cl，Br,1，支鏈、非支鏈或環(huán)狀d—C1Q烴基，OR9,OCOR9,COOR9，CHO,COR9,CH2OR9,NR9R10，CH2NR9R1(^f]SR9;或者取代基對W和R"—起任選地獨(dú)立選自下組=0，=8和=麗。5.權(quán)利要求1、3或4的化合物或權(quán)利要求2-4的綴合物，其中B包含氨基酸殘基。6.權(quán)利要求1,或3-5的化合物或權(quán)利要求2-5的綴合物，其中B可通過酶裂解。7.權(quán)利要求1,或3-6的化合物或權(quán)利要求2-6的綴合物，其中D選自下組OP03H，P03H，OS03H,S03H禾nCOOH，或它們的共軛堿。8.權(quán)利要求1，或3-7的化合物或權(quán)利要求2-7的綴合物，其中所述烴基獨(dú)立地選自下組烷基、鏈烯基、炔基、芳基和芳烷基。9.權(quán)利要求l,或3-8的化合物或權(quán)利要求2-8的綴合物，其中R'和R2獨(dú)立地選自下組1，CH3,Br禾口H。10.權(quán)利要求1，或3-9的化合物或權(quán)利要求2-9的綴合物，其中R1位于對位，并且選自下組1,Br禾nCH3，且R2是H。11.權(quán)利要求1,或3-10的化合物或權(quán)利要求2-10的綴合物，其中R:-R8是H。12.權(quán)利要求1，或3-11的化合物或權(quán)利要求2-11的綴合物，其中Rs和RW是H。13.權(quán)利要求l,或3-12的化合物，其中Y選自下組:-NH2，-SH，-OH-CHO,-NCS,-NCO和H。14.權(quán)利要求l,或3-13的化合物，其中B-D包含由式5表示的部分:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(式5)15.權(quán)利要求l，或3-14的化合物，其中B-D包含由式6表示的部分:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(式6)16.權(quán)利要求l、10或13的化合物，其由式7表示:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(式7)17.權(quán)利要求l、10或13的化合物，其由式8表示:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(式8)18.權(quán)利要求1或3-17的化合物，其中Y是-NH2。19.權(quán)利要求2-12的綴合物，其中Y'選自下組:-NH-,-S-,-O-,-CO-:-NHCS—,-NHCO-和鍵。20.權(quán)利要求2-12或19的綴合物，其中B包含選自下組的殘基3-[2-(aminyl乙基)二硫代]丙酰，N-[oc-馬來酰亞胺-3，-基-乙酰基，N，N，-1,4-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-丁垸，N，N，-l,6-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-己烷,N，N，-l,2-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-乙烷，>^^-1,4-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-2,3-二羥基丁烷,N-[P-馬來酰亞胺-3，-基-丙酰,N-[(3-馬來酰亞胺-3，-基-脲氨基(semicarbazyl),N,N，-l,8-雙-馬來酰亞胺-3，,3，-二基-三甘醇,N，N，-l,ll-雙-馬來酰亞胺-3，,3，-二基-四甘醇，環(huán)庚基，二甲基己二酰亞胺基，二甲基庚二酰亞胺基(pimelimidyl),二甲基環(huán)庚二亞胺基(suberimidyl),1，4-二-[3'-(2'-含硫基)-丙酰胺基]丁烷，戊二酰基，二硫代二丙酰基，酒石酸基(tartaryl),二甲基3,3'-二硫代二丙酰亞胺基，3,4-二硫代-1^,:^，-1,6-雙-馬來酰亞胺-3，,3"-二基-己烷，乙二醇雙-琥珀酰，N-7-馬來酰亞胺-3，-基-己?；?，N-7-馬來酰亞胺-3，-基-己?；灏被?，N-[Y-馬來酰亞胺-3，-基-丁?；?1,6-己烷-二-乙烯砜，N-[K-馬來酰亞胺-3，-基-H"^—酰，N-[K-馬來酰亞胺-3，-基沖一酰脲氨基，4-[N-馬來酰亞胺-3，基-甲萄環(huán)己垸-l-羧基-[6-酰胺基己酰基]，6-[3-巰基-]丙酰胺基己酰，/承[馬來酰亞胺-3-基]-苯甲酰，4-(4-N-馬來酰亞胺-3，-基苯基)丁酰脲氨基，己二酰，3-巰基-丙酰脲氨基，N-[對-馬來酰亞胺-3-基苯基]脲基，2-巰基乙?；?，3-巰基丙酰，3-[溴乙酰氨基]丙酰，2-碘乙?；?-[碘乙酰基]氨基苯甲酰，4-[N-馬來酰亞胺-3，-基甲基]環(huán)己烷-l-羧基，4-[對-馬來酰亞胺-3，-基]丁酰，6-[J3-馬來酰亞胺-3-基-丙酰氨基]己酰基，和對-[2-巰基乙基]苯甲酰，和4-硫代丁二酰亞胺酰胺基。21.權(quán)利要求2-12,19或20的綴合物，其中B-D包含由式9表示的部分(式9)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>22.權(quán)利要求2-12,或19-21的綴合物，其中B-D包含由式10表示的部分23.<image>imageseeoriginaldocumentpage7</image>24.權(quán)利要求2、10、或19的綴合物，其包含由式12表示的部分:(式12)25.權(quán)利要求2-12或19-24的綴合物，其中Y'是-NH-。26.權(quán)利要求2-12或19-25的綴合物，其中所述治療劑或診斷劑是有機(jī)化合物、金屬有機(jī)化合物、包含放射性核素的化合物、核苷酸、核酸、聚合物、肽、核肽(nucle叩eptide)、蛋白、抗體、脂質(zhì)、類固醇、或它們?nèi)我豁?xiàng)的衍生物或它們的組合。27.權(quán)利要求2-12或19-26的綴合物，其中所述治療劑分子是用于治療下列各項(xiàng)的藥物癌癥，心血管疾病，肥胖癥，病毒、細(xì)菌、真菌或其他感染，炎癥，神經(jīng)病癥，變性神經(jīng)病癥，精神病或病癥，抑郁癥，激素病癥，葡萄糖代謝病癥或糖尿病，或是用于避孕的藥物。28.權(quán)利要求2-12或19-27的綴合物，其中所述治療劑分子是用于治療特征在于快速攝取白蛋白的腫瘤的藥物。29.權(quán)利要求2-12或19-28的綴合物，其中所述治療劑分子是用于治療具有小于60天的倍增時(shí)間的腫瘤的藥物。30.權(quán)利要求2-12或19-29的綴合物，其中所述治療劑分子是用于治療下列各項(xiàng)的藥物結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、頭頸癌、胰腺癌、胃癌、或卵巢癌、或淋巴瘤、白血病、星形細(xì)胞瘤、或肝細(xì)胞癌。31.權(quán)利要求2-12或19-26的綴合物，其中所述診斷劑分子是用于診斷影像學(xué)技術(shù)、基于熒光的技術(shù)、血管造影術(shù)、熒光血管造影術(shù)、超聲波檢查法、基于磁共振的診斷方法、磁共振成像、X-射線成像、核醫(yī)學(xué)、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)化斷層顯象(SPECT)或正電子發(fā)射斷層掃描(PET)的試齊lJ。32.權(quán)利要求2-12或19-26或31的綴合物，其中所述診斷劑分子是用于眼科血管造影術(shù)的熒光團(tuán)或用于X-射線或磁共振成像的造影劑。33.權(quán)利要求2-12或19-26、31或32的綴合物，其中所述診斷劑分子包括熒光素或釓(III)-二乙基三胺五乙酸(Gd-DTPA)、或其殘基。34.—種藥物組合物，其包含權(quán)利要求2-12或19-33任一項(xiàng)所述的綴合物。35.權(quán)利要求2-12或19-33的綴合物，其用作藥物。36.權(quán)利要求2-12或19-33的綴合物用于制備藥物的應(yīng)用，所述藥物用于治療癌癥，心血管疾病，肥胖癥，病毒、細(xì)菌、真菌或其他感染，炎癥，神經(jīng)病癥，變性神經(jīng)病癥，精神病或病癥，抑郁癥，激素病癥，或用于避孕。37.權(quán)利要求1或3-18的化合物的應(yīng)用，其用于使治療劑或診斷劑分子與白蛋白結(jié)合。38.權(quán)利要求1或3-18的化合物的應(yīng)用，其用于增加治療劑或診斷劑分子的血液循環(huán)時(shí)間。39.權(quán)利要求1或3-18的化合物的應(yīng)用，其用于增加治療劑或診斷劑分子在血管空間內(nèi)的停留時(shí)間。40.權(quán)利要求1或3-18的化合物的應(yīng)用，其用于提高治療劑或診斷劑分子的組織滲透能力。41.治療疾病或病癥的方法，其包括給需要所述治療的患者施用有效劑量的權(quán)利要求2-12或19-26的綴合物。42.權(quán)利要求41的方法，其中所述疾病或病癥包括癌癥，心血管疾病，肥胖癥，病毒、細(xì)菌、真菌或其他感染，炎癥，神經(jīng)病癥，變性神經(jīng)病癥，精神病或病癥，抑郁癥和激素病癥。43.權(quán)利要求1或3-18的化合物或權(quán)利要求2-33或35的綴合物用于醫(yī)學(xué)成像目的的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及方便的白蛋白結(jié)合劑，其有效用于提高診斷劑或治療劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性，特別是增加所述試劑的血液循環(huán)時(shí)間和/或組織滲透能力。本發(fā)明的分子包括式(1)表示的化合物。文檔編號C07C237/22GK101668731SQ200780049230公開日2010年3月10日申請日期2007年11月2日優(yōu)先權(quán)日2006年11月3日發(fā)明者克里斯托弗·迪梅林,達(dá)里奧·內(nèi)里申請人:菲羅化學(xué)股份公司