作為trpv1受體拮抗劑的o-取代-二芐基脲衍生物的制作方法

專利名稱：：作為trpv1受體拮抗劑的o-取代-二芐基脲衍生物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及香草素受體拮抗劑，特別涉及拮抗香草素TRPV1受體的O-羥基烷基二爺基脲衍生物。
背景技術：
：最近的試驗證據表明，在炎性狀態過程中，香草素TRPV1受體(瞬時受體電位通道)的表達增加。這表明香草素受體拮抗劑能夠用于治療炎性疼痛狀態，例如慢性神經性疼痛、膀胱過度活動綜合征、跨、炎性痛覺過敏、介入術后疼痛、拔牙、呼吸道與胃腸道疾病。許多香草素受體拮抗劑為已知的；其中一些衍生于辣椒素，并被稱為辣椒素拮抗劑。發明描述本發明涉及式(I)的化合物，其中RR3OR3(1)OCH3R選自卣素、烷基、烷氧基、芳基和雜芳基；R!選自2-羥基乙基、2，3-二羥基丙基、3-羥基丙基、2，2-二羥基乙基、3，3-二羥基丙基、1，3-二氧戊環-乙基、1,3-二噁烷-甲基、1,3-二氧戊環-甲基、1，3-二喁烷-乙基、3-氟-2-羥基丙基、3-g-2-羥基-丙基、3-氯-2-羥基丙基、2-羥基-丙烯-2-基、嗎啉代乙基、哌溱小基乙基、羥基甲基、芐基、4-(羥基甲基)芐基、4-氯芐基、4-氟千基和4-羥基節基；R2是叔丁基或三氟曱基；R3獨立地選自氫、羧基、氰基、烷基或羥基烷基，包括其所有可能的旋光異構體和非對映異構體。為了本申請的目的術語"鹵素"是指選自氟、氯、溴或碘的鹵素原子；術語"烷基"是指直鏈或支鏈(Q-C4)烷基；術語"烷氧基"是指直鏈或支鏈(C廣C4)烷氧基；術語"芳基，，是指苯基，其任選地被一個或多個如上文所定義的卣素、烷基、烷氧基，氰基或氨基取代，其彼此可以相同或不同；術語"雜芳基"是指包含一個或多個氮、氧或硫原子的5或6元雜環，其彼此可以相同或不同，例如吡咯、噻吩、呋喃、咪唑、噻唑、異噻唑、？悉哇、吡咬或嘧咬。第一組優選的式(I)的化合物是下述化合物，其中R是氯或溴；R,是2-羥基乙基；Rz是叔丁基或三氟曱基；R3是氫。第二組優選的式(I)的化合物是下述化合物，其中R是氯或溴；R，是2,3-二羥基丙基；R2是三氟甲基；R3是氫。第三組優選的式(I)的化合物是下述化合物，其中R是甲基、苯基、吡啶或4-(取代的)-苯基；R，是(R)-(-)-2，3-二羥基丙基；R2是三氟曱基；R;j是氫。第四組優選的式(I)的化合物是下述化合物，其中R是氯或溴；R！是(R)-(-)-2，3-二羥基丙基；R2是三氟甲基；R3是氫。特別優選的化合物的實例是l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-溴-5-甲氧基芐基]-3-[4-(三氟甲基)-節基l脲；l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-氯-5-甲氧基芐基-3-4-(三氟甲基)-芐基脲；l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-溴-5-曱氧基芐基-3-[4-(叔丁基)-芐基脲；l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-氯-5-甲氧基芐基I-3-[4-(叔丁基)-芐基脲；l-[4-(2，3-二羥基丙氧基)-2-氯-5-甲氧基芐基-3-[4-(三氟甲基)-芐基脲；l-4-(2，3-二羥基丙氧基)-2-澳-5-甲氧基芐基-3-[4-(三氟曱基)-芐基脲；l-[4-((R)-(-)-2，3-二羥基丙氧基)-2-氯-5-曱氧基芐基]-3-[4-(三氟甲基)-l-[4-((R)-(-)-2,3-二羥基丙氧基)-2-苯基-5-甲氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-千基脲；1-[4-((11)-(-)-2，3-二羥基丙氧基)-2-(吡啶_3-基)_5-甲氧基芐基-3-[4-(三氟甲基)-千基]脲；1-[4-((11)-(-)-2，3-二羥基丙氧基)-2-(4-氯苯基)-5-曱氧基芐基-3-[4-(三氟甲基)-爺基脲；l-[4-((R)-(-)-2，3-二羥基丙氧基)-2_溴-5_曱氧基芐基]-3-[4-(三氟甲基)-千基脲。通式(I)的化合物能以常規方法制備，例如式(II)的化合物(其中R、R,和R3如上文所定義)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>與式(III)的化合物(其中R2和R3如上文所定義)的反應:R3式(I)的化合物、它們的異構體和鹽能夠抑制香草素TRPV1受體，并且能夠用于治療炎性狀態、慢性神經性疼痛、膀胱過度活動綜合征、痔、炎性痛覺過敏、介入術后疼痛、拔牙、呼吸道與胃腸道疾病和腫瘤疼痛的藥物組合物的制備。這些制劑可通過常規方法和賦形劑制備，例如在Remington的PharmaceuticalSciencesHandbook,XVII版.Mack出版，紐約，美國.中公開的那些。本發明在下文流程圖1和實施例中被更詳細地說明。流程圖1R4-羥基-3-甲氧基千胺鹽酸鹽'"-m試劑和條件(i)乙酸酐，吡啶；(ii)NBS或NCS，DMF，0oC;(iii)10%HC1水溶液，二悉烷；(iv)當R-Br，Pd(PPh3)4，Na2C03,硼酸，DME，90°C;(v)羥基烷基卣化物，K2C03，DMF，100。C;(vi)HC137%，EtOH，Rfx;(vii)三光氣，4-(取代的)節胺，DIEA，CH2C12，10分鐘。取代基:6a:R=C1，R尸2-羥基乙基；R尸叔丁基，R3=H;6b:R=Br，R尸2-羥基乙基；R2魂丁基，R3=H;6c:R-C1，R尸2，3-二羥基丙基；R2=三氟曱基，R3=H;6d:R=Br，R尸2，3-二羥基丙基；R尸三氟甲基，R3=H;6e:R=C1，R產3-羥基丙基；R^三氟甲基，R3=H;6f:R=C1，R產3-羥基丙基；R產叔丁基，R3=H;6g:R=C1，R產2-羥基乙基；R^三氟甲基，R3=H;6h:R=Br，R產2-羥基乙基；議2=三氟曱基，R3=H;6i:11=苯基，R尸2,3-二羥基丙基；Rf三氟曱基；R3=H;61:R-吡啶-3-基，R尸2，3-二羥基丙基；Rf三氟曱基；R3=H;6m:R-4-(氯)-苯基，R尸2，3-二羥基丙基；R尸三氟甲基；R3=H。實施例各反應通過珪膠薄層色譜(TLC)(預包被F245Merck板)進行常規監測，產物以碘或高錳酸鉀溶液顯色。，HNMR鐠用VarianVXR200波傳儀在CDCb、CF3COOD或DMSO-d6中記錄。峰位置在作為內標的四甲M烷的低場以百萬分之幾(5)表示，J值以Hz表示。IR光i奢"使用KBr壓片技術在PyeUnicamSP300光語儀上記錄。質語用ShimadzuQP5050DI50質i脊儀得到。"輕質石油醚，，的表述是指在40-60°C沸騰的石油餾分。熔點(M.p.)在Buchi-Tottoli測量儀測定，并且為未經校正。色i碧一吏用Merck60-200目珪膠進行。合成的化合物顯示與指定的結構一致的^NMR譜。元素分析為C、H和N理論值±0.4%之內。實施例11.1.4-乙酰氧基-3-甲氧基-N-乙酰基-爺胺的合成將乙酸酐(lml,10.5mmol)加入4-羥基-3-甲氧基-爺胺鹽酸鹽(0.5g，2.63mmol)在吡啶(5ml)中的溶液，并在室溫攪拌該混合物6小時。減壓蒸發除去溶劑，并將殘余物懸浮于水中(100ml)。水層用乙酸乙酯(3x20ml)萃取，將合并的有機相脫水(Na2S04)并減壓蒸發以得到白色固體狀的標題化合物(0.45g，收率75%)。'H畫醒R(CDCl3)52.01(s，3H，CH3)，2.31(s，3H，CH3)，3.81(s，3H，OCH3)，4.38(d，2H，J=6，CH2)，5.90(bs，1H，NH)，6.卯(m，3H，芳族的)。MS:m/z238.1(M+C12H15N04)。1.2.2-溴-4-乙酰氧基-5-甲氧基-N-乙酰基爺胺的合成將N畫溴代琥珀酰亞胺(6.3mmol,1.1g)加入實施例1.1的4-乙酰氧基-3畫甲氧基-N-乙酰基-芐胺(1.5g，4.2mmol)在干燥DMF(8ml)中的溶液，并在0。C攪拌該混合物30分鐘，然后在室溫攪拌16小時。當將水(40ml)加入該反應物中時，觀察到白色沉淀物的形成。將固體濾出并用冷水洗滌兩次(2x20ml)，然后用P20s干燥，得到白色固體狀標題化合物(1.4g，99%收率)。&匪R(DMSO-d6)51.89(s，3H)，2.24(s,3H)，3.76(s，3H，OCH3)，4.27(d，2H，CH2，J=8)，7.09(s，1H，芳族的)，7.25(s，1H，芳族的)，8.35(t，1H，NH)。二維NOESY(DMSO-d6):2.24ppm處的單峰和7.25ppm處的單峰之間偶合了確證溴位于芳族環的2-位。MS:m/z316(M+C12H14BrN04)。實施例22.2-(苯基/吡啶-3-基/4-(氯)苯基)-4-羥基-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺合成的通用方法通過將N2通過混合物5分鐘來將2-溴-4-乙酰氧基-5-甲氧基-N-乙酰基千胺(600mg，1.9mmol)在DME(15mL)中的溶液除氧。然后加入Pd(PPh3)4(0.09moleq)和適宜的硼酸(1.4moleq)在無水乙醇(3mL)中的溶液。攪拌該混合物10分鐘。然后加入2MNa2C03水溶液(9mL)，并在卯。C加熱該反應物12小時。減壓蒸發溶劑，加入水(60mL),7jC相用EtOAc(3x30mL)萃取。重新合并的有機相用Na2S04脫水，蒸發，殘余物經色i普(6:4EtOAc:石油醚)純化，得到固體狀的標題化合物。2.1.2-苯基-4-羥基-5-曱氧基-N-乙酰基千胺固體，收率95%。!H醒R(CDC13)51.89(s，3H)，3.92(s，3H)，4.33(d，2H，J=4.4)，5.41(bs，1H)，5.75(s，1H)，6.84(s，1H)，6.94(s,1H)，7.41-7.29(m，5H)。MS:m/z271(M+C16H17N03)。2.2.2-(吡咬-3-基)-4-羥基-5-曱氧基-N-乙酰基節胺淡黃色固體，收率68%。，H匪R(DMSO-d6)51.79(s，3H)，3.79(s，3H)，4.04(d，2H，J=4)，6.65(s，1H)，6.98(s，1H)，7.42(m,1H)，7.71(m，1H)，8.41(bt，1H)，8.54(m，1H)，9,19(s，1H)。MS:m/z272(M+C15H16N203)。2.2.2-(4-氯)苯基-4-羥基-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺淡黃色固體，收率78%。HNMR(DMSOd6)51.81(s，3H)，3.79(s，3H)，4.08(d，2H，J=4)，6.01(t，1H)，6.79(s，1H)，6.98(s，1H)，7.44(dd，4H)，8.15(s，1H)。MS:m/z305(M+C16H16ClNO3)。實施例33.1.2-溴-4-羥基-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺的合成將10%鹽酸水溶液(2.5ml)加入2-溴-4-乙酰氧基-5-甲氧基-N-乙酰基-千胺2(0.45g，1.66mmol)在二5悉烷(15ml)中的溶液，并將該混合物回流2小時，然后冷卻，真空濃縮溶劑，殘余物用10%NaOH水溶液堿化。得到的固體通過過濾收集，用冷水洗滌并干燥，得到定量收率的白色固體狀標題化合物。'H醒R(DMSO-d6)52.18(s,3H，CH3)，3.87(s，3H，OCH3)，4.00(d，2H，CH2)，6.91(s，1H，芳族的)，7.32(s，1H，芳族的)，8.46(t，3H，NH2)，9.80(bs，1H，OH)。M.p.:>300oC。3.2.2-溴-4-(2-羥基乙氧基)-5-甲氧基-N-乙酰基節胺的合成向化合物3(0.4g，1.46mmol)在干燥DMF(15ml)中的溶液中加入干燥K2C03(2moleq)和2-殃乙醇(2moleq)。將該混合物回流6小時，然后減壓蒸發除去溶劑。加入7jc后，水層用EtOAc(3x25ml)萃取，有機相用82804脫水并減壓蒸發，得到淡黃色固體狀標題化合物(0.38^81%收率)。NMR(CDC13)52.00(s，3H)，3,84(s，3H)，3.92(t，2H，J=2)，4.09(t，2H，J=2.1)，4.44(d，2H，J=4)，5.21(t，1H)，5"0(bs，1H)，6.96(s，1H)，7.07(s，m)。3.3.2-溴-4-(2-羥基乙氧基)-5-甲氧基-千胺鹽酸鹽的合成將37%鹽酸(0.2ml)加入2-溴-4-(2-羥基乙氧基)-5-甲氧基-N-乙酰基千胺4(0.1g，0.31mmol)在無水乙醇(5ml)中的溶液，并將該混合物回流12小時。冷卻后，減壓蒸發除去溶劑，殘余物用甲醇/乙醚混合液重結晶，得到定量收率的淡黃色固體狀標題化合物。、醒R(DMSO-d6)53.95(s，3H)，4.14(t，2H，J=2)，4.19(m，2H，)，5.01(m，2H，)，5.44(t，1H),7.02(s，1H)，7.27(s，1H)，7.38(m，3H)。實施例42-(苯基/吡啶-3-基/4-(氯)苯基)-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基-N-乙酰基千胺合成的通用方法向2-(苯基/吡啶-3-基/4-(氯)苯基)-4-羥基-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺(l.lmmol)在干燥DMF(10ml)中的溶液中加入干燥K2C03(2mol叫)和3-氯-1，2-二羥基丙烷(2moleq)。將該混合物回流12小時，然后減壓蒸發除去溶劑。加入水后，水層用EtOAc(3x25ml)萃取，有樹目用3%NaOH(20mL)洗滌，用Na2S04干燥并減壓蒸發除去溶劑，在用Et20重結晶后得到固體狀標題化合物。4.1.2-苯基-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基->[-乙酰基節胺淡黃色固體，收率72%H醒R(DMSO-d6)51.83(s，1H),3.44(t，2H)，3.79(s，1H)，3.95(m，7H)，4.10(d，2H，J=4.2)，4,62(t，1H)，4.92(d，1H)，6.79(s，1H)，6.98(s，1H)，7.36(m，5H)，8.16(t，1H)。4.2.2-(吡咬-3-基)-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基-N-乙酰基千胺淡黃色固體，收率60%。&NMR(DMSO-d6)51.80(s，3H),3.44(t，2H)，3.80(s，3H)，3.96(m，3H)，4.08(d，2H)，4.62(t，1H)，4.93(d,1H)，6.84(s，1H)，7.02(s，1H)，7.44(m，1H)，7.77(m，1H)，8.20(bt，1H)，8.56(m，2H)。4.3.2-(4-氯)-苯基-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺淡黃色固體，收率65%。'H醒R(DMSO畫d6)51.81(s，3H)，3.42(d，3H)，3.79(s，3H),3"0(m，4H)，4.08(d,2H)，6.79(s，1H)，6.98(s，1H)，7.45(dd，4H)，8.20(bt，1H)。實施例55丄2-溴-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺的合成向2-溴-4-羥基-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺3(0.3g，1.1mmol)在干燥DMF(10ml)中的溶液加入干燥K2C03(2moleq)和3-氯-1，2-二羥基丙烷(2mol叫)。將該混合物回流6小時，然后減壓蒸發除去溶劑。加入水后，水層用EtOAc(3x25ml)萃取，有才M目用Na2S04脫水并減壓蒸發，得到淡黃色固體狀標題化合物(0,35g，84%收率)。、匪R(DMSO-d6)51.88(s，3H)，3.44(t，2H)，3.74(s，3H)，3.88-3.96(m，3H)，4.22(d，2H,J=6)，4.66(t，1H)，4.96(d，1H，J=6)，6.93(s，1H)，7.14(s，1H)，8.25(仁1H)。5.2.2-溴-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-甲|^-芐胺鹽酸鹽的合成將37%鹽酸(0.3ml)加入2-溴-4-(2,3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基-N-乙酰基節胺4(0,3g，0.86mmol)在無7jc乙醇(12ml)中的溶液，并將該混合物回流12小時。冷卻后，減壓蒸發除去溶劑，殘余物用甲醇/乙醚混合液重結晶，得到定量收率的淺橙色固體狀標題化合物。匪R(DMSO-d6)53.42(t，2H),3.74(s,3H)，3.74-3.95(m，4H)，4.21(d，2H，J=6)，4.98(m，4H)，7.13(s，1H)，7.38(s，1H)。實施例62-(苯基/吡啶-3-基/4-(氯)苯基)-4-(2,3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基-千胺鹽酸鹽合成的通用方法將37%鹽酸(5ml)加入2-(苯基/吡啶-3-基/4-(氯)苯基)-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-曱氧基-N-乙酰基芐胺(8mmol)在無水乙醇(25ml)中的溶液，并將該混合物回流12小時。冷卻后，減壓蒸發除去溶劑，殘余物用甲醇/乙醚混合液重結晶，得到定量收率的標題化合物固體。6.1.2-氯-4-乙酰氧基-5-甲氧基-N-乙酰基節胺的合成將N-氯代琥珀酰亞胺(3.15mmol，0.42g)加入實施例1.1的4-乙酰氧基畫3-甲氧基陽N國乙酰基-芐胺(0.5g,2.1mmol)在干燥DMF(6ml)中的溶液，并在0。C攪拌該混合物30分鐘，然后在室溫攪拌l6小時。當將水加入反應物(40ml)中時，觀察到白色沉淀的形成。將固體濾出并用冷水洗滌兩次(2x20ml),然后用P20s干燥，得到白色固體狀標題化合物(0.45g，83%收率)。，H匪R(DMSO-d6)51.85(s，3H)，2.21(s，3H)，3.74(s，3H，OCH3)，4.21(d，2H，CH2，J=8)，7.01(s，1H，芳族的)，7.22(s，1H，芳族的)，8.32(t，1H，NH)。二維NOESY(DMSO-d6):2.21ppm處的單峰和7.22ppm處的單峰之間偶合確證了氯位于芳族環的2-位。MS:m/z272.1(M+C12H14C,4)。6.2.2-氯-4-羥基-5-甲氧基-N-乙酰基芐胺的合成將10%鹽酸水溶液(2.5ml)加入2-氯-4-乙酰氧基-S-甲氧基-N-乙酰基-千胺2(0.45g，1.66mmol)在二^i烷(15ml)中的溶液，并將該混合物回流2小時。冷卻后，在真空下蒸發使溶劑減少，殘余物用10。/。NaOH水溶液堿化。通過過濾收集得到的固體，用冷水洗滌并干燥，得到定量收率的白色固體狀標題化合物。HNMR(DMSO-d6)52.15(s，3H，CH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.99(d，2H，CH2)，6.86(s，1H，芳族的)，7.30(s，1H，芳族的)，8.41(t，3H，NH2)，9.77(bs，1H，OH)。M.p.:>300oC。6.3.2-氯-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-曱氧基-1^-乙酰基千胺的合成將干燥K2C03(2moleq)和2-硤乙醇(2moleq)加入2-氯-4-羥基-5-甲氧基-N-乙醜基千胺3(0.4g，1.46mmo1)在干燥DMF(15ml)中的溶液。將該混合物回流6小時，然后減壓蒸發除去溶劑。加入7K后，水層用EtOAc(3x25ml)萃取，有才M目用Na2S04脫水并減壓蒸發，得到淡黃色固體狀標題化合物((U8g，81%收率)。^NMR(CDC13)52.00(s，3H)，3.84(s，3H)，3.92(t,2H，J=2)，4.09(t，2H，J=2.1)，4.44(d，2H，J=4)，5.21(t，1H)，5.90(bs，1H),6.96(s，1H)，7.07(s，1H)。6.4.2-氯-4-(2，3-二羥基丙氧基)-5-甲氧基-芐胺鹽酸鹽的合成將37%鹽酸(0.2ml)加入2-溴-4-(2-羥基乙氧基)-5-曱氧基-N-乙酰基芐胺4(0.1g，0.31mmol)在無水乙醇(5ml)中的溶液，并將混合物回流12小時。冷卻后，減壓蒸發除去溶劑，殘余物用甲醇/乙醚混合物重結晶，得到定量收率的淡黃色固體狀標題化合物。實施例7合成化合物6a-6m的通用步驟將三光氣(0.37mol叫)溶于CH2C12(3ml)中。將4-叔丁基/三氟甲基芐胺(0.33mmol)和DIEA(2.2moleq)在CH2C12(2ml)中的混合物使用注射泵歷經30分鐘緩慢加入攪拌著的三光氣溶液中。5分鐘后，一次性加入適宜的胺鹽酸鹽5(0.33mmol)的溶液。在室溫攪拌反應該混合物2-4小時，減壓蒸發，用EtOAc(20ml)稀釋，用10%KHS04水溶液、5。/。NaHC03水溶液和鹽水洗滌，用Na2S04干燥并蒸干。殘余物經快速色鐠(100。/。EtOAc)純化，得到固體狀標題化合物。7.1.l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-溴-5-甲氧基芐基-3-[4-(叔丁基)-千基]脲6b，HNMR(DMSO-d6)51.26(s，9H)，3.37(s，3H)，3.70(m，4H)，3.98(t,2H，J=2)，4.61(bs，4H),4.87(t，1H，J=2.1)，6.98(bs，1H)，7.21(s，1H)，7.23(d，2H,J=7.8)，7,34(d，2H，J=8)，7.80(bs，1H)，8.00(bs，1H)。Mp:138。C。MS:m/z481.4(M+C22H29BrN203S)。7.2.l-4-(2，3-二羥基丙氧基)-2-氯-5-甲絲芐基-3-4-(三氟甲基)-芐基脲6c白色固體，收率80%。&醒R(DMSO-d6)53.44(t，2H，J=6)，3.68(s，1H)，3.74-4.00(m，5H)，4.22(d，2H，J=6)，4.32(d，2H，J=6)，4.67(t，1H),4.94(d，1H)，6.45(bt，1H)，6.65(bt，1H)，6.90(s，1H)，7.00(s，1H)，7.48(d，2H，J-7.8),7.69(d，2H,J=8)。MS:m/z462(M+C20H22ClF3N2O5)。Mp:154-5。C。(R)-(-)6c:[a]D20=-8.33(95%EtOH)。7.3.l-4-(2，3-二羥基丙氧基)-2-溴-5-甲氧基芐基]-3-[4-(三氟甲基)-芐基脲6d白色固體，收率84%。^NMR(DMSO-d6)53.41(t，2H，J=6)，3.74(s，1H)，4.00-3.85(m，5H)，4.19(d，2H，J=6)，4.32(d，2H，J=6)，4.62(t，1H),4.95(d，1H)，6.49(bt，1H)，6.68(bt，1H),6.90(s，1H)，7.13(s，1H)，7.45(d，2H，J=7.8)，7.65(d，2H，J=8)。MS:m/z507(M+C20H22BrF3N2O5)。Mp:1640C。(R)-(-)6d:=畫8.5(95%EtOH)。7.4.1書-(2-羥基乙氧基)-2-溴-5-甲氧基千基-3-[4-(三氟甲基)-千基脲6h白色固體，收率73%。'HNMR(DMSO-d6)53.67(s，3H)，3.47(m，2H)，3.94(t，2H，J=4)，4.16(d，2H，J=6)，4，32(d,2H,J=6)，4，85(t，1H，J=2)，6.52(bt，1H)，6.68(bt，1H)，6"0(s，1H)，7.14(s，1H)，7.49(d，2H，J=8)，7.65(d，2H，J=8)。MS:m/z477(M+C19H20BrF3N2O4)。Mp:162。C。7.5.l-[4-(2，3-二羥基丙氧基)-2-苯基-5-甲氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-芐基j脲6i白色固體，收率35%。，HNMR(DMSO-d6)53.41(t，2H)，3.78(s，3H)，4.06(m，3H)，4.23(d,2H)，4.26(d，2H)，4.61(t，1H)，4.95(d，1H)，6.40(t，1H)，6.51(t，1H)，6.80(s，1H)，6.99(s，1H),7.36(m，7H)，7.68(d，2H)。MS:m/z504(M+C26H27F3N2O5)。Mp:168。C。7.6.l-[4-(2,3-二羥基丙氧基)-2-(吡啶-3-基)-5-曱氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-芐基1脲61淡黃色固體，收率30%。，HNMR(DMSO-d6)53.44(t，2H)，3.75(s，3H)，3.91(m，4H)，4.05(d，2H，J=4.3)，4.29(d，2H，J04.2)，4.61(t，1H)，4.92(d，1H),6.51(m，2H)，6.84(s，1H)，7.03(s，1H)，4.45(m，3H)，7.68(d，2H)，7.77(m,1H),8.56(m，1H)。MS:m/z505(M+C25H26F3N305)。Mp:201oC。7.7.l-[4-(2，3-二羥基丙氧基)-2-(4-氯)苯基-5-甲氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-芐基l脲6m白色固體，收率45%。力畫R(DMSO-d6)53.44(t，2H)，3.74(s，3H)，3.93(m，4H)，4.07(d，2H)，4.30(d，2H)，4.62(t，1H)，4.92(d，1H)，6.41(m，2H)，6.78(s，1H)，6.98(s，1H)，7.43(m，6H)，7.69(d，2H)。MS:m/z538(M+C26H26C1F3N205)。Mp:174。C。生物學試驗動物體內實驗由PharmEstesrl(費拉拉，意大利)和費拉拉大學根據費拉拉大學動物管理和使用委員會批準的規程進行。放射性配體結合試驗使用體重在250至350g之間的雄性Sprague-Dawley大鼠。對于結合試驗而言，使大鼠在麻醉下斷頭，取出脊髓并使用Polytron組織勻漿儀在包含5mMKCl、5.8mMNaCl、0.75mMCaCl2、2mMMgCl2、320mM蔗糖、10mMHepes、pH8.6(Szallasi和Blunberg,1992;1993)的冰冷的緩沖液中破碎。在竟爭實驗中，在37。C將膜與卩HRTX(O.4nM)和在0.1nM至3nM范圍內濃度增加的檢測化合物孵育60分鐘。在存在1nMRTX的情況下評價非特異性結合。飽和和竟爭研究利用Ligand程序(Bradford，1976;Munson和Rodbard,1980)分析。培養的大鼠三叉神經節中的Ca^熒光檢測使用包含Fura-2-AM-ester和確定濃度的游離Ca"的緩沖液確定標準曲線。然后此曲線用于將從F34q/F38()比率得到的數據轉換成[Ca2、(nM)(Kudo，Y)。研究了用化合物6a-6m預處理對由30nM辣椒素誘導的[Ca2+i的增加的影響。辣才扠素誘導的大鼠繼發性異常性疼痛將辣椒素(5nmol/50ftl/爪)注射入用乙醚麻醉的大鼠右爪無毛皮膚的趾面(ChapIan等，l"4)。在注射辣椒素2小時前，口服施用化合物6c和6d。辣椒素刺激后卯分鐘評價觸覺異常性疼痛。試劑在無水乙醇中配制儲存濃度的辣椒素(IOmM)。在50%DMSO和50%Tween80中配制化合物6a-6m。將Fura-2-AM-ester和離子霉素溶于100%DMSO中。將所有其他藥物溶于蒸餾水中。然后，用Krebs緩沖液配制適宜的稀釋液。結果放射性配體結合試驗如表1中所才艮導的Kj值所示，化合物6a-6m在低濃度將卩HRTX從其在大鼠脊髓膜中的結合位點上置換出來。Ca2+焚光檢測辣椒素(30nM)增加了絕大多數(95%)大鼠三叉神經元細胞中的Ca2、，因此，其被確定是TRPVl-表達神經元。抑制辣椒素誘發的[Ca2+h活化的ICso值匯總于表1中。表1:本發明一些代表性化合物的Kj和ICso值。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>為鑒別與外消旋化合物活性的不同還合成了化合物6c和6d的(R)-(-)和(S)-(+)-異構體。如表2中所示，活性最強的異構體是(R)-(-)型，而作為(S)-(+)型活性至少低300倍。根據以合成的兩種單獨的異構體得到的結果，化合物6i-6m直接以活性(R)-(-)型合成。表2.化合物6c和6d與它們的活性異構體之間的比較。<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>結果用平均值和95。/。置信P艮表示。辣椒素誘導的大鼠繼發性異常性疼痛在更進一步的研究中，檢測了化合物6c和6d抗辣椒素誘導的大鼠繼發性異常性疼痛。辣椒素刺激后90分鐘，化合物6c和6d(都在30nmol/kg，口月l)顯著防止了辣椒素的促異常性疼痛效應(分別抑制53.1%和47.9%)。ADME研究為選擇適合的藥物候選物，對所選的化合物6c、6d連同它們的活性異構體進行了體外ADME研究，從而根據取代基評價這些化合物的特性。通過電腦模擬計算了在pH=7.0的LogD值，而體外檢測分析了-在冷凍保存的人肝細胞中的代謝穩定性；-對HepG2細胞的細胞毒性；-在大鼠中的盒式藥動學。本發明化合物的數據與從最近公開的作為TRPV1拮抗劑的兩個結構不同的化合物即JYL1421(Jakab等，2005)和SB-705498(Rami等，2006)得到的數據和從兩個廣泛應用的藥物(其中一個具有短半衰期(納洛酮)和一個具有長半衰期(甲笨璜丁脲))得到的數據進行比較。最相關的ADME數據可以進行快速比較具體取代基的影響，尤其是對于代謝穩定性。肝細胞制備將細胞快速小心地解凍，并用用水冷的Krebs-Henseleit緩沖液(KHB)稀釋。離心(50g，5min)后棄上清，根據凍存管中的標稱濃度，將細胞重新懸浮于一定體積的冰冷的KHB至比2x(就孵育終濃度而言)活性細胞/ml更大的密度。有活性的細胞用血細胞計數器通過臺盼藍排除計數，并將活性肝細胞濃度用KHB精確調整至2x濃度。HepG2細胞制備將細胞孵育3天，胰蛋白酶處理并重新懸浮于20ml培養液中。然后將細胞計數并稀釋以得到適合于在96孔細胞培養板中(200pl/孑L)接種40.000個細胞/孔的終濃度。細胞接種在列1至11(列12容納沒有細胞的培養液)中，然后在37°C與5%C02條件下放置16-24小時。化合物配制將檢測和參比化合物配制成2x孵育濃度(IO和1|LiM),在0.99ml的KHB中稀釋10pl儲存溶液至10pM濃度，在0.995^1的KHB中稀釋5pi的儲存溶液至5pM濃度。然后將300的10|LiM和1|LiM溶液分別分配至2和1孵育檢測管中(SterilinT.C.管17x100mm)。在插管清醒大鼠中的初步盒式藥動學研究將化合物一起給予大鼠。當不使用時將化合物儲存于-20。C。根據標準規程(Raynaud，FI等，2004;Manitpisitkul,P.等，2004;SinghS.等，2006)進行制劑、給藥途徑、血漿樣品的鑒定和藥動學分析。結果就在WO2005/123666Al中公開的化合物Ia、Ib、Ic而言，這個新系列的O-羥基烷基脲衍生物與參比化合物JYL1421和SB-705498相比在代謝穩定性和細胞毒性方面顯示出明顯意外的改善以及良好的半衰期，它們的清除相對緩慢。并且表現為微摩爾濃度的IC5q的細胞毒性值是可接受的。表3報告了本發明兩個化合物相對于WO2005/123666中乂^開的化合物的ADME概況。此外，化合物&和6d的(R)-(-)-異構體顯示出在半衰期方面的進一步改善，同時維持良好的代謝穩定性和低細胞毒性值(表3)。表3.化合物6c、6d和它們的活性異構體相對于所選擇的參比化合物的<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>參考文獻1.PharmEsteS.r丄WO2005/123666Al.2.BradfordMM.AnalBiochem.1976，72，248-254.3.MunsonPJ.等，AnalBiochem1980，107，220-239.4.Rigoni，M.等，Br.J.Pharmacol,2003，138，977-985.5.Kudo，Y.等，Jap.J.Pharmacol.1986，41，345-351.6.ChaplanN.等，JNeurosciMethods.1994，53，55-63.7.JakabB.等，Eur.J.Pharmacol.2005，517，35-44.8.RamiHK.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.2006，16，3287-3291.9.RaynaudFI.等，Mol.CancerTher,2004，3，353-362.10.Manitpisitkul,P.等，DrugDiscov.Today,2004，9，652-658.11.SinghS.Curr.DrugMetab.2006，7，165-182.權利要求1.式(I)的化合物其中R選自鹵素、烷基、烷氧基、芳基和雜芳基；R1選自2-羥基乙基、2，3-二羥基丙基、3-羥基丙基、2，2-二羥基乙基、3，3-二羥基丙基、1，3-二氧戊環-乙基、1，3-二噁烷-甲基、1，3-二氧戊環-甲基、1，3-二噁烷-乙基、3-氟-2-羥基丙基、3-羧基-2-羥基-丙基、3-氯-2-羥基丙基、2-羥基丙基、2-羥基-丙烯-2-基、嗎啉代乙基、哌嗪-1-基乙基、羥基甲基、芐基、4-(羥基甲基)芐基、4-氯芐基、4-氟芐基和4-羥基芐基；R2是叔丁基或三氟甲基；R3獨立地選自氫、羧基、氰基、烷基或羥基烷基，包括其所有可能的旋光異構體和非對映異構體，其中“鹵素”是選自氟、氯、溴和碘的鹵素原子；“烷基”是直鏈或支鏈(C1-C4)烷基；“烷氧基”是直鏈或支鏈(C1-C4)烷氧基；“芳基”是苯基，其任選地被一個或多個如上文所定義的鹵素、烷基、烷氧基，氰基或氨基取代，其彼此可以相同或不同；并且“雜芳基”是包含一個或多個氮、氧或硫原子的5-或6-元雜環，其彼此可以相同或不同。2.根據權利要求1所述的化合物，其中R是氯或溴；R,是2-羥基乙基；R2是叔丁基或三氟甲基；R3是氫。3.根據權利要求1所述的化合物，其中R是氯或溴；R,是2，3-二羥基丙基；R2是三氟甲基；R3是氫。4.權利要求l所述的化合物，其中R是甲基、苯基、吡啶或4-(取代的)-苯基；R,是(R)樸2，3-二羥基丙基；R2是三氟曱基；R3是氫。5.權利要求l所述的化合物，其中R是氯或溴；Rj是(R)-(-)-2，3-二羥基丙基；R2是三氟甲基；R3是氫。6.化合物，選自l-4-(2-羥基乙氧基)-2-溴-5-甲氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-芐基i脲；l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-氯-5-甲氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-芐基l脲；l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-溴-5-曱氧基芐基-3-4-(叔丁基)-芐基脲；l-[4-(2-羥基乙氧基)-2-氯-5-甲氧基芐基j-3-[4-(叔丁基)-芐基I脲；1-[4-(2，3-二羥基丙氧基)-2-氯-5-甲氧基芐基-3-[4-(三氟甲基)-千基脲；1-[4_(2，3-二羥基丙氧基)-2-溴-5-甲氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-千基I脲；l-[4-((R)-(-)-2，3-二羥基丙氧基)-2-氯-5-甲氧基芐基-3-[4-(三氟甲基)-節基l脲；l-4-((R)-(-)-2，3-二羥基丙氧基)-2-苯基-5-曱氧基節基-3-[4-(三氟曱基)-芐基脲；l-[4-((R)-(-)-2，3畫二羥基丙氧基)-2-(吡啶-3-基)畫5-甲氧基節基-3-[4-(三氟甲基)-芐基脲；l-[4-((R)-(畫)-2，3-二羥基丙氧基)國2-(4-氯苯基)-5畫甲氧基卡基卜3-4-(三氟甲基)-芐基脲；l-[4-((R)-(-)-2，3-二羥基丙氧基)-2-溴-5-曱氧基芐基卜3-[4-(三氟甲基)-芐基脲。7.用作藥物的如權利要求1至6中的任意一項所述的式(I)的化合物。8.如權利要求1至6中任意一項所述的式(I)的化合物作為香草素TRPV1受體拮抗劑的應用。9.如^=又利要求1至6中任意一項所述的式(I)的化合物用于制備用來治療炎性狀態的藥物組合物的應用。10.根據權利要求9所述的應用，其中所述炎性狀態選自慢性神經性疼痛、膀胱過度活動綜合征、腫瘤疼痛、痔、炎性痛覺過敏、介入術后疼痛、拔牙、呼吸道與胃腸道疾病。11.包含與適合的賦形劑和/或載體混合的權利要求1至6中任意一項所述的式(I)的化合物的藥物組合物。全文摘要本發明涉及式(I)的組合物，其中R選自鹵素、烷基、烷氧基、芳基和雜芳基；R₁選自2-羥基乙基、2，3-二羥基丙基、3-羥基丙基、2，2-二羥基乙基、3，3-二羥基丙基、1，3-二氧戊環-乙基、1，3-二噁烷-甲基、1，3-二氧戊環-甲基、1，3-二噁烷-乙基、3-氟-2-羥基丙基、3-羧基-2-羥基-丙基、3-氯-2-羥基丙基、2-羥基丙基、2-羥基-丙烯-2-基、嗎啉代乙基、哌嗪-1-基乙基、羥基甲基、芐基、4-(羥基甲基)芐基、4-氯芐基、4-氟芐基和4-羥基芐基；R₂是叔丁基或三氟甲基；R₃獨立地選自氫、羧基、氰基、烷基或羥基烷基，式(I)的組合物可用于制備用來治療炎性狀態，例如慢性神經性痛、膀胱過度活動綜合征、腫瘤疼痛、痔、炎性痛覺過敏、介入術后疼痛、拔牙、呼吸道與胃腸道疾病的藥物組合物。文檔編號C07C275/24GK101563317SQ200780046925公開日2009年10月21日申請日期2007年12月6日優先權日2006年12月21日發明者F·弗魯塔羅羅,M·G·帕瓦尼,M·特雷維薩尼,P·A·博雷亞,P·G·巴拉爾迪,P·杰佩蒂申請人:法梅斯特有限公司